Abstrak

Alergenisitas rekayasa genetik (GM) kedelai dievaluasi dalam tikus jantan Sprague Dawley.
Untuk mengkonfirmasi kedelai GM yang digunakan dalam penelitian ini, reaksi berantai
polimerase (PCR) dilakukan dengan menggunakan DNA kromosom dari kedelai. Hasil PCR
tersedia diskriminasi jelas rekayasa genetik (GM) kedelai. Untuk mengevaluasi alergenisitas GM
kedelai dan non-GM kontrol satu, homogenat kedelai peka subcuta- simultan 3 kali seminggu
selama 3 minggu. Dosis kedelai adalah 0, 2 dan 20 mg / kg di dasar protein. Seminggu setelah
sensitisasi terakhir, antisera ditemukan dari hewan ual individ-. Ketika sera yang disuntikkan
intradermal pada terpotong belakang tikus tized unsensi- dengan berbagai pengenceran, diikuti
oleh tantangan dengan 20 mg / kg kedelai genate homo yang mengandung 1% Evans biru, ada
tanda-tanda reaksi kulit anafilaksis pasif terdeteksi. Selain itu, ketika sera yang diperlakukan
dalam kultur sel mast peritoneum, peningkatan pelepasan histamin oleh anti (GM kedelai) sera
tidak diamati bila dibandingkan dengan yang oleh anti (non-GM kedelai) sera. Hasil ini
menunjukkan bahwa kedelai GM mungkin tidak bertindak sebagai alergen yang kuat dalam tikus
jantan Sprague Dawley.
hewan percobaan
Spesifik bebas patogen tikus jantan Sprague Dawley (berusia 4 5 minggu) yang dibeli dari
Daehan Hewan Laboratorium Research Center Co Ltd (Eumsung, Korea). Empat hewan
bertempat di kandang dan diberi makan dengan air keran dan hewan pengerat pelet bahan pakan
(Samyang Co, Ulsan, Korea). D F \ IMdl FOOITI disimpan pada 2 3? 3 "C dengan kelembaban
50? 10% dan diterangi berulang kali di 150-300 Lux dengan 1 2 selang h. Semua hewan yang
disesuaikan untuk setidaknya
1 minggu sebelum percobaan.
Sensitisasi dari Sprague Oawley tikus dengan kedelai
homogenat
Sprague Dawley tikus dibagi menjadi 5 kelompok dan setiap kelompok peka
subkutan 3 kali seminggu selama 3 minggu dengan larutan garam sebagai kontrol,
2 atau 20 mg / kg dari GM homogenat kedelai, dan 2 atau 20 mg / kg non-GM
kedelai homogenat. Satu minggu setelah 9 kali dari sensitisasi, hewan Potong
terbuka perut setelah pembiusan dengan eter, dan darah diambil dari vena cava
inferior dan dibiarkan pada suhu kamar selama 30 menit untuk aglutinasi. sera yang
diperoleh dengan sentrifugasi darah agglutinated pada 4 "C dan 2.500 x g selama 1
0 menit, dan disimpan pada -80" C sampai digunakan.
pelepasan histamin di sel mast
Dalam cavi / peritoneal dari tikus belum tersensitisasi setelah
anesthetizing dengan eter, 20 ml Tyrode penyangga B (1 37
mM NaCl, 5,6 mM glukosa, 12 mM NaHCO "2. 7 mM KCI, dan 0,3 mM NaH, PO4)
disuntik, dan orang-orang abdo- itu lancar dipijat selama 90 detik. Setelah
memotong terbuka perut, cairan peritoneal diambil ke dalam tabung centrifuge
disterilkan, dan sel-sel dipisahkan oleh centrifigation pada 1 50> <g selama 10

menit. Sel-sel mast dipisahkan menggunakan metrizamide dengan prosedur JippoKanemoto et / a. (1993). Sel-sel mast akhirnya diperoleh resuspended dalam 1 ml c
<-MEM mengandung 15 mM HEPES dan 10% serum janin sapi. Kemurnian sel mast
terdeteksi oleh pewarnaan Giemsa, dan viabilitas sel diuji dengan metode
pewarnaan biru tryphan. Tingkat pelepasan histamin di sel mast diukur setelah
mengobati dengan s% peka sera dengan 1) ag / ml antigen atau 0,5 pg / ml A231
87 sebagai kontrol, dan budidaya di CO inkubator pada 37 "C selama 30 menit. Dari
supernatan yang diperoleh dengan sentrifugasi kaldu terstruktur kultur, jumlah
histamin diuji dengan metode Shore et / a. (1959).