DALF BLOOD GROUPING TEST
Anti-A, Anti-B, and Anti-AB
Pendahuluan
DALF Blood Grouping Anti-A, Anti-B dan Anti-AB adalah
reagen untuk mengidentifikasi golongan darah ABO dengan cara
slide atau tabung reaksi. Antigen sel darah manusia dapat dibagi
dalam 4 golongan : A, B, AB, dan O.
Prinsip Tes
DALF Blood Grouping Anti-A, Anti-B dan Anti-AB digunakan
berdasarkan pada prinsip aglutinasi. Sel darah merah sebagai
antigen akan teraglutinasi jika berikatan dengan antibodi.
DALF Blood Grouping adalah larutan reagen siap pakai terbuat
dari supernatant kultur sel hybridoma tikus. Antibodi
immunoglobulin ini adalah campuran dari antibodi monoclonal
yang mempunyai kemampuan untuk mengenali secara spesifik
epitope dari sel darah merah sebagai antigen.
Perhatian
1. Tes hanya untuk in vitro diagnostik saja.
2. Perlakukan semua spesimen dengan hati-hati.
3. Reagen ini mengandung sodium azide sebagai
pengawet. Hindari kontak langsung dengan kulit dan
mukosa.
Pengumpulan dan Persiapan Spesimen.
1. Sampel sel darah manusia dengan atau tanpa anti- Keterbatasan Hasil Prosedur Tes
koagulan.
2. Tes harus dikerjakan secepatnya setelah pengambilan
sampel.
3. Sampel dengan EDTA atau Heparin dapat disimpan
pada suhu 2 8 0C selama 2 hari saja.
Bahan tambahan yang diperlukan :
Kertas slide, Tabung reaksi, Pipet ukur, Larutan Isotonik Saline, 3. Negatif palsu atau reaksi yang lemah bisa disebabkan
Sentrifuge, Timer dan Stik Pengaduk.
Prosedur Tes
Siapkan reagen dan sampel yang akan digunakan untuk
mencapai suhu ruang sebelum pengetesan.
A. Metode Tes Slide
1. Teteskan satu tetes reagen Anti-A,Anti-B atau Anti-AB
pada kertas/kartu slide yang belum pernah terpakai.
2. Lalu tambahkan satu tetes kecil sel darah merah atau
whole blood pada tiap-tiap reagen pada kartu.
3. Aduk campuran tersebut secara merata dengan
menggunakan stik atau tusuk gigi dengan gerakan
melingkar.
4. perlahan-lahan putar atau goyangkan secara melingkar
slide atau kartu dan perhatikan aglutinasi yang terjadi
secara makroskopik dalam waktu 20detik hingga 2
menit.
PT. JAFAREL MEDIATICS
Jl. Kendal No. 6, Menteng, Jakarta Pusat 10310
Phone : 21 314 9027 / 28 Fax : 21 390 6956
B. Metode Tes Tabung Reaksi
1. Siapkan suspensi sel darah merah 2-5% dalam larutan
saline.
2. Untuk setiap tabung reaksi,tambahkan satu tetes (50 ul)
dari setiap reagen blood grouping yang akan dites.
3. Tambahkan satu tetes (50ul) dari suspensi sel darah merah
pada setiap tabung dengan menggunakan pipet transfer.
Homogen dengan baik.
4. Untuk rapid tes, sentrifuge tabung reaksi selama
10-20 detik dengan kecepatan 1500 2500 rpm atau
inkubasi pada suhu ruang selama 30 menit.
5. Perlahan perhatikan bentuk titik pada sel darah pada
tabung dan lihat aglutinasi yang terjadi secara
makroskopik.
Hasil Reaksi
Blood
Anti-A Anti-B Anti-AB
Grouping
O - - -
A + - +
B - + +
AB + + +
1. Negatif palsu atau reaksi yang lemah bisa disebabkan oleh
darah yang lemah dari sub group A atau B atau dengan sel
darah merah uterus ( Cord Red Cell ) dari bayi yang baru
lahir.
2. Sel darah merah dari bayi yang baru lahir belum memiliki
antigen A dan B yang seutuhnya dan bisa membuat hasil
tes golongan darah ABO menjadi lemah.
karena penyimpanan sel darah merah yang terlalu lama
atau ketidak sesuaian metode penyimpanan.
4. Variable tes seperti teknik yang tidak benar, sentrifugasi
atau inkubasi yang tidak tepat, peralatan gelas yang tidak
bersih dan atau kontaminasi dari bakteri atau bahan kimia,
dapat menyebabkan hasil tes menjadi keliru.
5. Sel darah manusia yang terkena penyakit tertentu dapat
memberikan hasil positif palsu atau negatif palsu dengan
Anti-A atau Anti-B
 DALF BLOOD GROUPING TEST
Anti-D (Anti-Rh) IgG / IgM
Pendahuluan
DALF Blood Grouping Anti-D (Anti-Rh) merupakan reagen
untuk menentukan Rhesus dari golongan darah secara
aglutinasi.
Prinsip Tes
Prosedur yang digunakan dalam reagen ini berdasarkan pada
prinsip aglutinasi. Sel darah manusia normal memiliki antigen
yang akan langsung menggumpal dengan adanya ikatan
terhadap antibodi spesifik. Reagen DALF Blood Grouping
Anti-D khusus untuk melihat antigen D secara aglutinasi pada
sel darah manusia. Terbentuknya aglutinasi dari sel darah
manusia dengan reagen anti-D menandakan adanya antigen D
pada sel darah merah.
Tidak terjadinya aglutinasi menandakan tidak adanya
antigen D pada sel darah merah.
Deskripsi Produk
DALF Blood Grouping Anti-D dipersiapkan dari monoklonal
Anti-D manusia. Serum manusia mengandung anti-D didapat
dari pendonor yang sudah diimunisasi.
DALF Blood Grouping Anti-D digunakan untuk tes pada slide
atau pada tabung reaksi.
Tindakan Pencegahan
1. Tes hanya untuk in vitro diagnostik saja.
2. Perlakukan semua spesimen dengan hati-hati.
Perhatian : mengandung sodium azide. Sodium azide bisa
bereaksi dengan timah dan tembaga dapat menghasilkan
ledakan yang besar. Untuk menghindari ledakan, campur
buangan reagen dengan air sebanyak-banyaknya.
Pengumpulan dan Perlakuan Spesimen
1. Tes dilakukan pada sel darah manusia. Spesimen darah
bisa dikumpulkan dengan atau tanpa anti-koagulan.
2. Tes harus dikerjakan secepatnya setelah pengumpulan
spesimen. Darah yang didapat dari tusukan jari bisa
langsung diperiksa dengan metode tes slide secepatnya
dicampur dengan reagen untuk menghindari
penggumpalan.
3. Jika tes ditunda, spesimen harus disimpan pada suhu
2-8 0C. Darah dengan antikoagulan seperti Heparin atau
Oksalat harus diperiksa dalam 2 hari. Darah dengan
EDTA atau sodium sitrat harus diperiksa dalm 14 hari.
4. Kontaminasi bakteri dapat memberikan hasil positif palsu.
PT. JAFAREL MEDIATICS
Jl. Kendal No. 6, Menteng, Jakarta Pusat 10310
Phone : 21 314 9027 / 28 Fax : 21 390 6956
Prosedur Tes
A. Tes Slide
1. Siapkan suspensi sel darah merah 35-45 % dalam
larutan salin atau serum/ plasma autologous.
2. Teteskan satu tetes (50 ul) reagen DALF Blood
Grouping Anti-D dan satu tetes larutan 35-45 %
sel darah merah pada slide tes.
3. Dengan menggunakan pipet transfer atau stik
aplikator, campur reagen dan suspensi darah secara
merata.
4. Perlahan gerakan berputar slide tes depan belakang
selama 2 menit hingga terlihat aglutinasi.
B. Tes Tabung Reaksi
1. Siapkan suspensi sel darah merah 3-5% dalam larutan
salin atau serum/plasma autologous.
2. Tambahkan satu tetes (50 ul) dari reagen DALF Blood
Grouping Anti-D kedalam setiap tabung reaksi.
3. Tambahkan satu tetes (50 ul) dari suspensi sel pada
setiap tabung dengan menggunakan pipet transfer.
4. Kocok dan inkubasi dalam suhu ruang selama satu
menit atau lebih.
5. Sentrifuge tabung reaksi selama 30 detik pada
kecepatan 3200-3400 rpm (900-10.000 rcf).
6. Perlahan campur sel pada tabung dan perhatikan
aglutinasi yang terjadi dengan mikroskop.
Pembatasan Prosedur Tes
1. Beberapa sel darah bisa memberikan antigen Rh yang
bervariasi.
2. Negatif yang keliru atau reaksi yang lemah bisa
disebabkan karena penyimpanan sel darah merah
yang lama atau ketidak sesuaian penyimpanan.
3. Penundaan dalam membaca hasil tes dan teknik yang
tidak benar, sentrifuge atau inkubasi yang tidak tepat,
peralatan gelas yang tidak bersih dan atau
kontaminasi dari bakteri atau bahan kimia, dapat
menyebabkan hasil tes menjadi keliru.
4. Sel darah merah dilapisi dengan alloantibodi yang
hamper sama dengan reagen (contohnya sel yang
DAT positif) bisa memberikan reaksi yang lemah.