Volume 4 No.
2 Warta Tumbuhan Obat Indonesia
2. Ekstrak batang brotowali tidak menunjukkan daya anti jamur
terhadap Candida albicans.
3. Ekstrak batang brotowali 0,7 g/mL belum menunjukkan efek
terhadap Trichophyton ajelloi dan mulai menunjukkan efek
fungistatik pada konsentrasi 0,9 f'-T
SARA
Perlu ditel~tlmengenai kandungan zat bermastat tanaman
brotowali yang mempunyai daya antimikrobaselain berberin yang
telah diketahui
DAFTAR PUSTAKA
1. Departemen Kesehatan RI. Materia Medika lndonesia 11, 1977;
91-95.
PENGARUH BROTOWALI [TINOSPORA CRISPA (L.) MIERS] TERHADAP
METABOLISME GLUKOSA PADA KELINCI
PENDAHULUAN
B ROTOWALI [7incxporacrispa (L.) Miers] mempunyai berbagai
nama daerah antara lain patanvali, akar sertin, panamar
gantung (Kalimantan Tengah), macabuhai (Filipina) dan
Lianequinine (Perancis), dengan rasa yang sangat pahit. Brotowali
hampir selalu ditemukan pada pedagang obat tradisional dan
disebutkan mempunyai khasiat untukmengobati beberapapenyakit
antara lain kudis, infeksi cacing kremi, radang usus buntu, penyakit
rajasinga, cacar air, penyakit kuning, kholera, trakhomadan diabe-
tes (I). Bahkan di India, brotowali digunakan sebagai tonikum, diure-
tikum dan afrodisiak (2,3). Kulit batangnyamengandung alkaloid
berberindankolumbin, pati,glikosida, palmitin dan mt pahit pikroretin
serta harsa (4). Penggunaan brotowali sebagai obat tradisional
terhadap diabetes dilakukan sejak awal abad ke-20 ini, dimana
batangnya diolah men.jadi bentuk tepung yang dijual dalam
bungkusan "cachet" (ouwels), dengan nama Ouwel Antidiabetik,
untuk pemberian secara oral.
Penelitian tentang kemungkinan digunakannya brotowali sebagai
obat alternatif untuk mengendalikan diabetes mellitus tipe I1 (Non-
Insulin Dependent Diabetes Mellitus), telah dilakukan di Malaysia
oleh Noor et al. (5), yang melaporkan bahwa efek hipoglikemik
dari brotowali terjadi karena adanya kenaikan kadar insulin plasma
akibat pemberian brotowali pada hewan percobaan. Penelitian ini
dilanjutkan di Inggris oleh Bambang Kiranadi (6), yangmempelajari
elektrofisiologi membran sel-sel B, dan melaporkan bahwa efek
insulinotropik dari brotowali adalah terjadi karena brotowali
mengadakan blokade pada saluran C a t t di membran sel B Langer-
hans, sehingga C a w menumpuk dalam ruang intraseluler, sehingga
instdin disekre!ji.
Makalah itT i melaporkan hasil penelitian tentang sejauh mana
" .. .
mantaat orotowali dalam mempengaruhi metabolisme oksidatif
glukosa in vivo. Percobaan ini meng,gunakan kc:linci yang dibuat
diabetes mellitus (DM) oleh induks i dengan allloxan monohidrat
,. :I,
(AM). dan nendekatan dengan teklllh rLlu,,utan radioisotop
o
.
glu sebagai suntikan tunggal intraka~rdialyang diikuti
1 Dengan mengetahui nilai (jD maka Ililai P dapat dihitung
- sebagai berikut:
*Bagian Farmakologi,FK-UKf, Jakarta
,
:--",
1"
r . . _ <
17
2. Hargono Djoko. Tumbuhan obat yang potensial dikembangkan
dalam fitofarmaka. Simposium Penelitian Tumbuhan
Obat V den Expo Jamu 1986;2.
3. Heyne K. Tumbuhan Berguna lndonesia 1. Badan Penelitian dan
Pengembangan Kehutanan. Departemen Kehutanan,
1987;775-756.
4. Backer CA. Bakhuizen van den Brink Jr, RC Flora of Java Vol. II, NVP
Noordhoff Groningen, The Nedherlands, 1965;157-158.
5. Mardisiswojo, Sudarman dan Rajakmangunsudarso, Harsono. Cabe
Puyang Warisan Nenek Moyang. PT Karya Wreda, Jakarta,
1971:15.
6. Bailey W, Robert & Scott. Elvyn G. Diagnostic Microbiology, a
Textbook for Isolation and Identification of Pathogenic Micro-
organism. 4th Ed. St. Louis, The CV Mosby, 1974; 400-401.
7. Departemen Kesehatan RI. Farmakope lndonesia Edisi Ill.
1979;32-33.
dengan melakukan pemantauan terhadap I4C dalam udara
ekspirasi serta dalam plasma. Teknik perunutan radioisotop
memberikan hasil yang bersifat lebih kuantitatifdan akurat dalam
menggambarkan hail katabolisme oksidatif1 I
seluruh glukosa yang ada dalam tubuh.
BAHANDAN CAR'
Penelitian ini dilakukan di laboratori um Jurusan FisiologiI
Farmakologi FKH-IPB Bogor pada tahun 1992. Baha.n u.i i utamaL
. .. .. .
adalah ekstrak batang brotowali, dan sebagai pembandlng dlgunaKan
euglucon (glibenklamid) tablet, serta AM sebagai penginduksi
terjadinya DM, dan gluk~sa-U-'~C sebagai perunut metabolisme
oksidatifglukosa. Dilakukan percobaan pendahuluan untukmencari
dosis optimal brotowali maupun AM, menggunakan tikus putilijantan
usia 2 (dua) bulan dari Lembaga Makanan Rakyat FK-Ul,
Jakarta.
Pengukuran parameter metabolisme glukosa dalam percobaan
utama dilakukan dengan menggunakan kelinci putih jantan usia3-
5 bulan, strain California dari Balai Pembibitan Ternakdan Hijauan
Makanan Ternak. Direktorat Jenderal Peternakan Departemen
Pertanian, Cisarua, Bogor.
Parameter metabolisme yang diukur adalah.
I. Kadar glukosa darah (GD), yaitu banyaknya glukosa dalam
100 mL plasma. Nilai normal GD tikus berkisar 50-135 mg%
dan kelinci berkisar 50-150 mg%(7).
2. 'Pool glukosa (P), seluruh massa glukosa tubuh yang ter-
distribusi dalam cairan ekstraseluler (plasma dan cairan
interstitial).
3. Secara teoritis nilai P dapat dihitung berdasarkan anggapan
bahwaglukosadalamtubuh terdapat menyebar secara homogen
dalam seluruh cairan ekstraseluler, dan dalam keadaan normal
mengambil ruang sebesar 20-25% dari bobot massa tubuh.
_
 IS Warta Tumbuhan Obat Indonesia
P = GD x 20% bb (kg)
P =pool glukosa (mg/kg bb)
GD = kadar glukosa darah (mg%)
20%= volume cairan ekstraseluler
bb =bobot badan (kg)
Dengan metode perunutan radioisotop, nilai P dapat dihitung
sebagai berikut (8).
D
p=-
Co
P = pool glukosa (mg/ekor)
D = dosis gl~kosa-U-'~C
Co = aktivitasjenis glukosa
3. Derajat oksidasi glukosa (DOG), yaitu banyaknya CO, yang
ditemukan dalam udara ekspirasi, yang merupakan hasil
katabolisme oksidatif dari glukosa, yang digambarkan dengan
reaksi kimia berikut: glukosa+ 6 0,-> 6 CO, + 6 H,O
Respirasi adalah proses penguraian glukosa dengan mengguna-
kan O,, menghasilkan CO, dan H,O dan energi yang melibatkan
jalan metabolisme glikolisis daur Krebs dan fosforilasi oksidatif.
Dalam keadaan normal sekitar 50% glukosa yang diperoleh dari
makanan akan mengalami metabolisme menjadi CO, dan H,O,
30-40% berubah menjadi lemak serta 5% menjadi glikogen,
selebihnyadimetabolisir oleh otot dan jaringan lain (9).
Persiapan percobaan
Pembuatan ekstrak batang brotowali, yaitu stek batang dipo-
tong-potongkecil kemudian dihaluskan dengan blender, selanjutnya
direbus di atas tangas air dalam panci yangdirendam dalam parafin
cair sampai semua bahan hancur (lo-12jam). Kemudian disaring
dengan kain flanel dan serat kasar dibuang, filtrat diuapkan di atas
tangas air sampai kental. Setelah dingin dimasukkan ke dalam
eksikator yang diisi dengan gel silika sampai kering (sekurang-
kurangnya selama 10 hari). Ketika akan diberikan pada hewan
percobaan ekstrak ini dilarutkan dengan akuades sampai mencapai
konsentrasi 10%. Adaptasi hewan percobaan terhadap lingkungan
maupun makanan dilakukan selarna lebih kurang 1 (satu) minggu.
Percobaan pendahuluan
Hewan percobaan yang dikelompokkan menurut rancangan
acak lengkap dengan 5 ulangan, diberi ekstrak batang brotowali
secara oral dalam berbagai dosis pada tikus normal. Dilanjutkan
dengan menginduksi terjadinyaDM dengan suntikan intravena(iv)
larutan AM 10% dalam akuades, pada berbagai dosis. Diteruskan
dengan memberikan brotowali dalam berbagai dosis pada tikus DM-
alloxan, untuk menentukan dosis optimal dalam mengendalikan GD,
serta pemberian obat pembanding dalam berbagai dosis terapeutik
padakelinci DM-alloxan.
Percobaan utama
Pengukuran parameter metabolisme glukosa dengan
menggunakan kelincijantan putih, dalam dosis dan carapemberian
mengikuti hasil yang telah diperoleh padapercobaan pendahuluan
(tikus), baikuntuk tujuan induksi DB maupun pemberian bahan uji.
Kelinci tersebut dikelompokkan menurut perlakuan, dan masing-
masing perlakuan mendapat 3 (tiga) ulangan sebagai berikut:
Perlakuan A: Kelinci DM-alloxan, tanpa brotowali
Perlakuan B: Kelinci DM-alloxan, dan mendapat brotowali
1998
Perlakuan E: Kelinci DM-alloxan, dan mendapat Euglucon
Perlakuan K: Kelinci non-DM (sehat).
Menginduksi DM pada kelinci tersebut dilakukan dengan
menyuntikan secara iv AM lo%, 75 mg/kg bblkali, 2 hari 1 kali,
sampai terjadi hiperglikemia (GD antara250-350 mg%) yang stabil
selama minimal 3 hari berturut-turut. Untuk perlakuan B dan E,
setelah tejadi hiperglikemia yangstabil, untuk kelompok B diberikan
ekstrak batang brotowali secara oral dosis 1 g/kg bb/h dan pada
kelompokE diberikan Euglucon 0,15 mgkg bbh, masing-masing
selama 7 (tujuh) hari berturut-turut. Pelaksanaan pengukuran pa-
rameter metabolisme glukosa padaperlakuan B dan E dilakukan
2-4jam setelah pemberian terakhir bahan u.ji atau obat pembanding,
yaitu dengan suntikan intrakardial, dosis tunggal isotop glukosa-U-
I4C, sebanyak 10 uCi per ekor kelinci. Perubahan aktivitas jenis
I4C-glukosadan I4C-CO, diikuti selama 2 jam setelah suntikan
isotop, masing-masingmelaluipengambilan sarnpel plasmadengan
selang waktu 20 menit dan penarnpungan udara ekspirasi total,
dengan selang waktu 15 menit.
Teknik pengukuran parameter
Penentuan GD dilakukan menggunakan alat khusus yang
disebut Reflolux-S (PT. BoehringerMannheim Indonesia);setelah
dua (2) menit hasil akan tertera pada monitor.
Aktivitas jenis (specific activity) 14C-glukosasetiap sampel
plasma, ditentukan melalui pembentukan ester glukosapentaasetat
(GPA, kristal putih), yang kemudian dicacah dengan AlokaLiquid
Scintillation Counter tipe 753, dengan sebelumnya menambahkan
4 mL cairan sintilasi yang terdiri dari PPO 5 g, POPOP 0,5 g,
Toluen 1 L (8).
Aktivitasjenis '4CC-0, masing-masing sampel udaraekspirasi
ditentukan melalui pembentukan endapan BaCO, dan dicacah
dengan alat yang sama, dengan terlebih dahulu menambahkan 5
mL cairan sintilasi, yaitu PPO 4 g, POPOP 0,4 g, Cab-o-sil34 g,
Xylene 1 L (10).
Nilai parameter metabolisme glukosa yang diperoleh sebagai
hail akhir, dianalisisdengan Analisis Ragam dan dilanjutkan dengan
uji lanjutmenggunakan ujijarakDuncan(11,12,13,14).
HASIL DAN PEMBAHASAN
Percobaan pendrhuluan
1. Pemberian brotowali dalam berbagai dosis pada tikus sehat
selama7 (tujuh) hari berturut-turut ternyata tidak menunjukkan
perubahan GD.
2. Perubahan GD tikus yang diberi berbagai dosis AM mem-
perlihatkan hasil, yaitu dosis yang AM untuk tujuan induksi
DM adalah 75 mg/kg bb/2 h, sebab pada dosis tersebut
hiperglikemi a mulai terlihat pad;1 hari ke t ujuh, bers ifat
irreversible tc:tapi non-p rogresi f.
3. Pemberian brc3towali padlatikus DMl-alloxan de:ngan berba ~gai
.-
dosis ternyata dapat menurunkan GD, tetapi nilai relatifnya
hampir tidak ada perbedaan antara masing-masing dosis.
Berdasarkan ha1 tersebut maka dosis brotowali yang akan
digunakan dalarn percobaan utarnaadalah 1g/kg bblh, diberikan
selama 7 hari berturut-turut.
4. Pemberian Euglucon dalam berbagai dosis terapeutik padatikus
DM-alloxan: berbagai dosis terapeutik menggambarkan
penurunan GD, tetapi tidak adaperbedaan yang bermaknadi
antaramasing-masing dosis, sehinggadalam percobaan utama,
digunakan dosis 0,15 mgikg bblh.
 Volume 4 No. 2 Warta Tumbuhan Obat Indonesia 19

Percobaan utama hasil penelitian yang ada, yang menyatakan bahwa hiperglikemia
Percobaan utama menggunakan kelinci DM-alloxan memper- pada anjing yang diberikan alloxan secara iv adalah 65 mg/kg bb,
oleh data hasil sebagai berikut (Tabel 1 dan Tabel 2). dimana hiperglikemia mulai terjadi antara minggu pertama sampai
1. Pool glukosa (P) minggu ketiga
Nilai rata-rataP perlakuan A lebih tinggi dari perlakuan lainnya Karena pemberian brotowali dalam berbagai dosis pada
Uji statistik terhadap nilai P menunjukkan perbedaan pengaruh percobaan pendahuluan tidak memperlihatkan perbedaan yang
perlakuan yang sangat bermakna (p<0,01) antara nilai P bermakna antara tiap-tiap dosis, maka dosis yang dipilih untuk
perlakuan A dengan perlakuan lainnya, tetapi nilai P antara percobaan utama adalah 1 glkg bblh yang dilarutkan dengan
perlakuan B, E dan K berbedasecara tak bermakna(p>0,05). akuades dengan konsentrasi 10%. Demikian pula pemberian
2. Derajat oksidasi glukosa (DOG) Euglucon dalam berbagai dosis terapeutik tidak memperlihatkan
pengaruh yang berbeda, maka dosis yang ditetapkan untuk
Nilai rata-rata DOG perlakuan A paling kecil dari ketiga
percobaan utama adalah O,15 mg/kg bbh.
perlakuan lainnya Uji statistik lanjut nilai DOG, menunjukkan
pengaruh perlakuan yang berbeda sangat bermakna (p<O,Ol) Menurut Turner (IS), hewan yang menderita DM eksperimental
antara perlakuan K dengan ketiga perlakuan lainnya Demikian oleh alloxan, akan menderita defisiensi insulin yang relatif dalam
pula nilai DOG perlakuan A dengan perlakuan B dan E plasmanya, sebab pada dosis tertentu alloxan merusak secara
mempunyai perbedaan yang sangat bermakna (p<O,Ol). selektif sel-sel B pulau Langerhans pankreas. Pemberian bahan
yang berkhasiat meningkatkan sekresi oleh sel-sel B pada
Tabel 1. Nilai parameter metabolisme glukosa kelinci pada berbagai
individu yang menderita DM-alloxan akan terjadi sekresi
perlakuan insulin oleh sel-sel B yang sehat, sehingga terjadi perbaikan
metabolisme.
Perlakuan bb (g) P DOG GD Adanya penurunan pool glukosa pada kelinci DM-alloxan
(mglkg bb) (%) (mg %)
(sampai mencapai nilai P pada kelompok K) yang mendapat
A-I brotowali, seperti ha1 yang terjadi pada kelinci yang mendapat
A-2 Euglucon, didukung adanya kenaikan produksi CO, dalam udara
A-3 ekspirasi (peningkatan katabolisme oksidatif) pada kelinci yang
B-I mendapat brotowali dan Euglucon, walaupun tidakdapat menyamai
8-2 nilai DOG pada kelinci, memberikan petunjuk bahwa brotowali dapat
8-3 memperbaiki metabolisme glukosa pada kelinci yang menderita
E-I DM-alloxan, walaupun tidak dapat menyamai nilai DOG pada
E-2 kelinci sehat (K).
E-3

K-I KESIMPULAN
K-2 1. Pemberian brotowali pada kelinci DM-alloxan menyebabkan:
a. Penurunan seluruh glukosa yang ada dalam tubuh
Keterangan:
bb = bobot badan (g) (penurunan pool glukosa= P), dimana nilai P ~ a dperlakuan
a
P = pool glukosa (mglkg bb) A B; p<0,01.
DOG = derajat oksidasi glukosa (%)
b. Pe tabolisme oksidatif, dimana nilai DOG pada
GD kadar glukosa darah (mg%)
PC <B<E<K;p<O,Ol.
Tabel 2. Nilai rata-rata parameter dan hasil uji statistik 2. Alloxan monohidrat sebagai penginduksi DM dapat
menimbulkan efek negatif berupa:
Parameter Perlakuan Uii a. Kerusakan pembuluh vena pada tempat penyuntikan, berupa
indurasi dan penyempitan lumen, abses serta nekrosis
(tromboflebitis).
P 500,217 234,710 278,465 312,947 S b. Abses dan nekrosis padajaringan di tempat penyuntikan
(mglkg bb) +79,709 +33,701 +43,995 +19,357 maupun jaringan sekitarnya
DOG 11,347 14,337 10,092 23,130 S
(%) +3,323 +0,406 + I ,542 +0,010 SARAN
Dari hasil penelitian ini ada beberapa ha1 yang dirasakan perlu
Keterangan:
S = significant untuk diteliti lebih lanjut, antara lain seberapa jauh brotowali
berpengaruh pada individu yangmenderita DM-idiopathik ataupun
AM ternyata sangat iritatif, dimana tejadi abses dan nekrosis DM-nonalloxan, serta melengkapi pemeriksaan patologi klinik
pada jaringan tempat penyuntikan dan sekitarnya, serta terlihat terhadap insulin, glukagon plasmadan kadar glukosa, badan keton
tanda-tanda tromboflebitis padavena yang bersangkutan. Dari data serta CO, dalam urine, selarna pengukuran parameter glukosa.
dalam percobaan pendahuluan diketahui bahwadosis optimal AM Dari aspek patologi anatomi dan histokimia, melakukan diagnosa
untukmaksud induksi hiperglikemiaadalah 75 mgkg bbl2 h, dimana banding antara kelainan vaskuler akibat efek iritatif A.M dengan
hiperglikemia mulai terjadi pada hari ke tujuh. Data ini mendekati kelainan vaskuler akibat hiperglikemia itu sendiri.