USULAN
PENELITIAN DOSEN PEMULA
TIM PENGUSUL:
Mardiana Prasetyani Putri, M.Si/ NIDN.0717038702 (Ketua)
Lailatul Badriyah, S.Si., M.Sc/ NIDN. 0706108901 (Anggota)
i
HALAMAN PENGESAHAN
PENELITIAN DOSEN PEMULA
MM. Riyaniarti E., A.Md., M.Pd., M.Si Mardiana Prasetyani P., M.Si
NIK 1995.0045 NIK 2013.0535
Menyetujui
Ketua LP2M
ii
iii
DAFTAR ISI
BAB 1. PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang.......................................................................... 1
1.2 Rumusan Masalah .................................................................... 3
1.3 Tujuan ....................................................................................... 3
1.4 Manfaat .................................................................................... 3
1.5 Luaran ...................................................................................... 4
1.6 Rencana Target Capaian ........................................................... 4
iv
DAFTAR PUSTAKA .................................................................................. 16
v
Ringkasan
Tongkol jagung yang melimpah merupakan hasil samping dari limbah pertanian.
Pemanfaatan limbah tongkol jagung selama ini banyak digunakan sebagai bahan
bakar oleh ibu rumah tangga, sebagai tambahan makanan ternak, dan sebagai
karbon aktif. Pektinase adalah sekelompok enzim yang dapat memecah pektit
polisakarida pada jaringan tumbuhan menjadi molekul kecil. Enzim pektinase
dihasilkan dari hasil isolasi pektin dalam suatu jaringan tumbuhan dengan bantuan
mikroorganisme. Salah satu mikroorganisme yang banyak digunakan dalam
isolasi pektinase adalah Aspergillus niger. Penggunaan pektinase banyak
digunakan dalam industri tekstile dan minuman. Pektin yang terdapat dalam
tongkol jagung dimanfaatkan sebagai sumber karbon dalam pertumbuhan
mikroorganisme A. niger. Uji aktivitas pektinase dilakukan dengan metode DNS.
Hasil aktivitas dipilih pada kondisi optimum dengan hasil yang terbanyak dengan
membandingkan tanpa tambahan induser kemudian dianalisis mekanisme
enzimatik pektinase dengan tambahan induser untuk mengetahui kecepatan reaksi
kerja enzim pektinase dalam penjernihan jus buah mangga podang yang
merupakan ciri khas dari kota Kediri. Berdasarkan hal tersebut, pektinase yang
dihasilkan dapat diaplikasikan pada jus buah mangga podang.
Kunci: limbah tongkol jagung, induser, pektin, A.niger, jus buah mangga podang
vi
BAB I
PENDAHULUAN
1
pada kondisi asam yang digunakan dalam industri jus dan wine sedangkan
pektinase yang dapat bekerja pada kondisi basa disebut pektinase alkalin yang
digunakan dalam industri tekstil, farmasi, deterjen dan industri kertas. Kapang
Aspergillus niger dapat tumbuh dalam media padat yang banyak mengandung
nutrien polisakarida yang berfungsi sebagai sumber karbon (Bayoumi et al. 2008).
Aktivitas enzim akan maksimal jika ditambahkan media sebagai sumber
pertumbuhan Aspergillus niger. Media yang berperan tersebut biasanya bersumber
dari karbon. Beberapa sumber karbon biasanya dari buah, sayuran dan biji-bijian,
diantaranya mangga, jeruk, tomat, gula bit, apel dan wortel yang kemudian
disebut sebagai induser. Telah banyak dilakukan pemanfaatan buah sebagai
induser dalam isolasi pektinase. Shubakov dan Elkina (2002) menambahkan
induser pektin dari buah jeruk, apel dan gula bit dengan Aspergillus niger.
Nighojkar et al (2006) memproduksi pektinase dengan induser kulit jeruk dengan
Aspergillus niger. Patil dan Danayand (2006) menggunakan kulit ari kacang-
kacangan dan bunga matahari sebagai sumber karbon dalam sintesis pektinase
oleh Aspergillus niger. Rangarajan et al. (2010) memproduksi pektinase
menggunakan Aspergillus niger dengan kulit jeruk sebagai sumber karbonnya dan
berbagai senyawa organik dan anorganik sebagai sumber nitrogennya. Ahmed et
al (2015) menambahkan induser limbah kulit jeruk sebagai sumber karbon oleh
Aspergillus niger. Grassino et al. (2016) menggunakan limbah buah tomat sebagai
induser produksi pektinase. Berdasarkan beberapa penelitian tersebut,
penambahan induser dapat meningkatkan aktivitas enzim pektinase.
Salah satu parameter yang penting dalam produksi pektinase adalah
kondisi optimum yang meliputi pH, temperatur dan waktu inkubasi karena
berhubungan dengan lingkungan hidup mikroorganisme. Perubahan pH
disesuaikan dengan suhu normal mikroorganisme tersebut hidup. Kenaikan
temperatur yang tidak wajar bagi mikroorganisme menyebabkan struktur enzim
berubah atau disebut denaturasi enzim. Setelah diketahui kondisi optimum tiga
parameter tersebut, maka diharapkan dapat memproduksi pektinase terbanyak.
Pengukuran aktivitas enzim pektinase ditentukan kinetika enzimatisnya yang
meliputi Vm dan KM, dengan memperhitungan konsentrasi substrat dan waktu
2
reaksi enzimatisnya. Berdasarkan latar belakang tersebut, penelitian ini akan
mempelajari pengaruh pH, temperatur, kondisi optimum dan laju reaksi
enzimatisnya sehingga dapat diketahui aktivitas suatu enzim pektinase dengan
induser tongkol jagung oleh Aspergillus niger.
3
1.5 Luaran
Luaran yang diharapkan dari hasil penelitian ini adalah jurnal yang akan
dipublikasikan pada jurnal lokal (tentatif) yang mempunyai ISSN atau jurnal
nasional terakreditasi.
4
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1. Pektinase
5
2.2. Sumber Karbon
6
Limbah biomas tersebut mengandung gula sederhana dan kompleks
yang metabolisme oleh mikroorganisme melalui sekresi (Saheed et al. 2013).
(2.1)
dengan,
vo = laju awal reaksi (g/mL.menit)
Vm = laju reaksi maksimum (g/mL.menit)
KM=konstanta Michaelis Menten (g/mL)
[S]= konsentrasi substrat (g/mL)
7
Vm
Vo
[S]
Gambar 2.1 Grafik hubungan antara konsentrasi substrat terhadap kecepatan
reaksi enzimatik
(2.2)
8
1/Vo
KM/Vm
1/Vm
1/KM
9
BAB III
METODE PENELITIAN
b. Pembuatan media
- Media padat
- Media cair
10
c. Penanambiakan murni Aspergillus Niger
e. Pembuatan inokulum
f. Produksi enzim
- pH optimum
- Temperatur optimum
j. Pemurnian pektinase
- Dialisis enzim
l. Pengukuran Vm dan KM
m. Analisis data
Parameter yang diamati pada penelitian ini yaitu analisa kadar gula
pereduksi, penentuan kondisi optimum yang meliputi (pH, temperatur, waktu
inkubasi), pengukuran aktivitas enzim pektinase dan parameter kinetika enzimatis
yang meliputi Vm dan KM.
11
3.6 Analisis Data
Data yang diperoleh dari penentuan aktivitas optimum dan kinetika enzim
pektinase dianalis dengan menggunakan metode analisa Rancangan Acak
Lengkap (RAL). Apabila terdapat perbedaan diantara akan diuji lebih lanjut
dengan uji beda nyata kecil (BNT). Semua data percobaan akan diuji dengan
tingkat kepercayaan 95% atau BNT 5%.
12
BAB IV
BIAYA DAN JADWAL PENELITIAN
13
13
laboratorium, kendaraan, kebun percobaan,
peraltan penunjang penelitian lainnya
(maksimum 40%)
Jumlah (100%) Rp. 20.000.000
14
4.2 Jadwal Pelaksanaan penelitian
Tabel 2. Jadwal Kegiatan Program
No Jenis Kegiatan Bulan ke-
1 2 3 4 5 6 7 8
1 Persiapan, penyusunan proposal
2 Pengadaan bahan penelitian dan pengurusan ijin
laboratorium
3 Pelaksanaan Penelitian
4 Pengumpulan data
5 Analisis data
6 Penyusunan laporan
7 Publikasi jurnal nasional
15
DAFTAR PUSTAKA
Bayoumi R. A., Hesham M. Y., Mahmoud A., Swelim E., dan Abdel-All Z.,
2008, Production of Bacterial Pectinase from Agro-Industrial Waste under Solid
State Fermentation Conditions, Journal of Applied Sciences Research, 4(12):
1708-1721, INSInet Publication.
Grassino, A.N., Halambek, J., Djakovic, S., Brncic, S.R., Dent, M., Grabaric, Z.,
2016, Utilization of tomato peel waste from canning factory as a potential source
for pectin production and application as tin corrossion inhibitor, Food
Hidrocolloids, 52, 265-274.
Kashyap, D. R., Vohra, P. K., Chopra, S., dan Tewari, S., 2001, Applications of
pectinases in the commercial sector: a review, Bioresource Technology, 77: 215-
227.
Lorenz, K. J., dan Kulp, K., 1991, Handbook of Cereal Science and Technology,
Marcel Dekker: New York.
Nighojkar, S., Phanse, Y., Sinha, D., Nighojkar, A., Kumar, S., 2006, Production
of polygaracturonase by immobilized cells of Aspergillus niger using orange peel
as inducer. Process Biochemistry 41, 1136-1140.
Patil, S.R., dan Dayanand, A., 2006, Production of pectinases from deseeded
sunflower head by Aspergillus niger in submerged and solid-state conditions,
Bioresource Technology, 97, 2054- 2058.
Priest, M., 1984, Position Paper Microbial Cellulose: A New Research for Wood,
Paper, Textiles, Food and Specially Product, University of Texas, Austin
16
Pedrolli, D. B., Monteiro, A. C., Gomes, E., dan Carmona, E. C., Pectin and
Pectinases: Production, Characterization and Industrial Application of Microbial
Pectinolytic Enzymes, the Open Biotec. J., 3: 9-18.
Raper KB, Fennell DI. The genus Aspergillus. 1965. Baltimore: Williams &
Wilkins
Someya, S., Yoshiki, Y., Okubo, K., 2002. Antioxidant compounds from bananas
(Musa Cavendish). Food Chem. 79, 351–354.
Taragano, V., Sanchez, V.E., Pilosof, A.M.R., 1997. Combined effect of water
activity depression and glucose addition on pectinases and protease production by
Aspergillus niger. Biotechnol. Lett. 19 (3), 233–236.
17
Lampiran 1. Justifikasi Anggaran
1. Honoranorium
Honor Honor/Jam Waktu Minggu Honor (Rp)
(Jam/Min
ggu)
Ketua 7.500 12 32 2.880.000
Anggota 1 6.500 12 32 2.496.000
SUB TOTAL (Rp) 5.376.000
2. Bahan Habis Pakai
Material Justifikasi Pemakaian Kuantitas Harga satuan Harga Peralatan
(Rp) Penunjang (Rp)
Akuades Untuk pembuatan reagen 10 L 3.200 32.000
Akuabides Untuk sterilisasi 5L 40.000 200.000
Kultur murni
Aspergillus Niger Produksi enzim 2 95.000 190.000
KH2PO4 Sebagai mediacair 15 gram 6.000 90.000
(NH4)2CO3 5.50
Sebagai media cair 15 gram 0 82.500
MgSO4.7H2O Sebagai media cair 15 gram 5.200 78.000
FeCl3 Sebagai media cair 15 gram 7.000 105.000
NaOH Sebagai media 15 gram 5.500 82.500
Asam 3,5
Reagen analisis 5 gram 50.000 250.000
Dinitrosalisilat
NaKC4O6H4 Sebagai pembuatan DNS 15 gram 4.700 70.500
C6H5OH Sebagai pembuatan DNS 15 gram 7.700 115.500
C6H12O6 Sebagai media 15 gram 4.200 63.000
CH3COOH Sebagai pembuatan buffer 150 mL 4.500 675.000
CH3COONa Sebagai pembuatan buffer 20 gram 3.600 72.000
(NH4)2SO4 Pemurnian enzim 25 gram 6.000 150.000
Citrus pectin Sebagai substrat 10 gram 7.000 70.000
PDA Sebagai media padat 5 gram 6.500 32.500
Kertas coklat Sterilisasi 5 6.000 30.000
Aluminium foil Sterilisasi 2 35.000 70.000
Plastik Wrap Penutup sterilisasi 1 27.000 27.000
Membran selofan Dialisis enzim 1,5 meter 4.000/cm 600.000
Handskun Sebagai pelindung tangan 1 pack 40.000 40.000
Masker Sebagai pelindung hidung 1 pack 27.000 27.000
Plastic klip Sebagai wadah sampel 1 pack 15.000 15.000
Label nama Untuk labelling 1 pack 7.000 7.000
Kertas saring 1 350.000 350.000
whatman no. 42 Untuk menyaring
Untuk mengikat tabung 1 pack 12.500 12.500
Karet gelang media
ATK dan tinta Untuk pencetakan 1 250.000 250.000
komputer
Penjilidan Jilid proposal dan laporan 5 20.000 100.000
Biaya publikasi jurnal 1 500.000 500.000
nasional
Publikasi
Biaya publikasi jurnal 1 1.600.000 1.600.000
internasional
Penggandaan Penggandaan proposal dan 10 25.000 250.000
laporan
18
Pulsa Pulsa telephon 2 200.000 400.000
Internet Pencarian referensi 1 150.000 150.000
SUB TOTAL (Rp) 6.787.000
3. Perjalanan
Kegiatan Justifikasi Pemakaian Kuantitas Harga Satuan Biaya (Rp)
(Rp)
Perjalanan ke Akomodasi dan pembelian @6 200.000 2.400.000
Malang sampel, mengurus
perijinan laboratorium,
serta pelaksanaan
penelitian 2 orang
Perjalanan lokal Transportasi mencari 3 75.000 225.000
bahan
Seminar Akomodasi dan 2 1.500.000 3.000.000
transportasi seminar.
SUB TOTAL (Rp) 5.625.000
4. Sewa
Kegiatan Justifikasi Pemakaian Kuantitas Harga Satuan Biaya (Rp)
(Rp)
Penyewaan Laboratorium biokimia 2 350.000 700.000
laboratorium di dan instrumen
Malang
Penyewaan alat Pemakaian alat gelas 1 350.000 350.000
Penyewaan UV- Pemakaian UV-VIS untuk 75 7.500 562.500
VIS mengukur aktivitas enzim
Penyewaan Sterilisasi alat dan media 3 50.000 150.000
autoklaf
Penyewaan Pemurnian enzim 6 75.000 450.000
sentrifuge dingin
SUB TOTAL (Rp) 2.212.000
19
20
Lampiran 2. Susunan Organisasi Tim Peneliti dan Pembagian Tugas
Alokasi
No Nama / NIDN Instansi Asal Bidang Ilmu Uraian Tugas
Waktu(jam/minggu)
1 Mardiana Prasetyani Putri, Institut Ilmu Biokimia 12 jam/minggu a. Mengkoordinasi proses
M.Si Kesehatan Bhakti pengambilan data, pengumpulan
0717038702 Wiyata data, analisis data, penyusunan
interpretasi data, dan penyusunan
laporan penelitian.
b. Mengkoordinasi persiapan
instrument penelitian,
perlengkapan penelitian, dan
instrument penunjang.
c. Mengkoordinasi penyusunan
laporan akhir penelitian, publikasi
hasil penelitian dalam seminar
nasional/ prosiding.
d. Bertanggung jawab terhadap hasil
pelaporan penelitian mulai dari
laporan harian, laporan kemajuan,
laporan akhir dan penggunaan
anggaran penelitian
2 Lailatul Badriyah, S.Si., M.Sc Institut Ilmu Kimia Fisik 12 jam/minggu a. Membantu ketua dalam proses
0706108901 Kesehatan Bhakti pengambilan data, pengumpulan
Wiyata data, analisis data, penyusunan
interpretasi data, dan penyusunan
laporan penelitian.
b. Membantu ketua dalam persiapan
instrument penelitian,
perlengkapan penelitian, dan
instrument penunjang.
c. Membantu ketua dalam
penyusunan laporan akhir
penelitian, publikasi hasil
21
penelitian dalam seminar
nasional/ prosiding.
d. Turut bertanggung jawab
terhadap hasil pelaporan
penelitian mulai dari laporan
harian, laporan kemajuan, laporan
akhir dan penggunaan anggaran
penelitian
22
Lampiran 3. Biodata Ketua dan Anggota Tim Pengusul yang Telah Ditandatangani
A. Ketua
1. Riwayat Hidup
No. Tentang Keterangan
1 Nama Lengkap Mardiana Prasetyani Putri, M.Si
2 Jenis Kelamin Perempuan
3 Jabatan Fungsional -
4 NIK 2013.0535
5 NIDN 0717038702
6 Tempat Tanggal Lahir Kediri, 17 Maret 1987
7 E-mail Neyna_ub@yahoo.co.id
8 No. Telp/HP 085649009887/082335185949
9 Alamat Kantor Jl. Wahid Hasyim No 65 Kediri
10 No Telp Kantor (0354) 773299 ext. 202
11 Lulusan yang Dihasilkan S1 = 0 orang, S2 = 0 orang, S3 = 0 orang
1. Biokimia umum
2. Biokimia lanjut
12 Mata Kuliah yang Diampu 3. Kimia Amami (Analisis Air, Makanan dan
Minuman)
2. RiwayatPendidikan
S1 S2
Nama PT Universitas Brawijaya Universitas Brawijaya
Bidang Ilmu Biokimia Biokimia
Tahun Masuk-lulus 2005-2009 2009-2013
Isolasi dan Karakterisasi Isolasi dan Karakterisasi Enzim
enzim xilanase dari Bacillus
Judul skripsi/tesis Pektinase dari Bacillus subtillis untuk
sp Menggunakan Induser
Klobot Jagung Industri Bleaching Kertas
1. Drs. Sutrisno, M.Si
2. Dra. Anna Roosdiana, M. 1. Dr. Sasangka Prasetyawan, MS
Nama Pembimbing
2. Dr. Diah Mardiana, MS
App., Sc
10. Penghargaan dalam 10 tahun Terakhir (dari pemerintah, asosiasi atau institusi lainnya)
Institut Pemberi
No. Jenis Penghargaan Tahun
Penghargaan
- - - -
Semua data yang saya isikan dan tercantum dalam biodata ini adalah benar dan dapat
dipertanggungjawabkan secara hukum. Apabila di kemudian hari ternyata dijumpai ketidak-
sesuaian dengan kenyataan, saya sanggup menerima sanksi.
24
Demikian biodata ini saya buat dengan sebenarnya untuk memenuhi salah satu
persyaratan dalam pengajuan Hibah Penelitian Dosen Pemula
25
B. Anggota
1. Riwayat Hidup
No. Tentang Keterangan
1 Nama Lengkap Lailatul Badriyah, S.Si., M.Sc
2 Jenis Kelamin Perempuan
3 Jabatan Fungsional -
4 NIK 2015.0707
5 NIDN 0706108901
6 Tempat Tanggal Lahir Pati, 06 Oktober 1988
7 E-mail blailatul@gmail.com
8 No. Telp/HP 085640415563
9 Alamat Kantor Jl. Wahid Hasyim No 65 Kediri
10 No Telp Kantor (0354) 773299 ext. 202
11 Lulusan yang Dihasilkan S1 = 0 orang, S2 = 0 orang, S3 = 0 orang
1. Kimia Dasar
12 Mata Kuliah yang Diampu 2. Kimia Organik
3. Kimia Fisik
2. RiwayatPendidikan
S1 S2
Nama PT Universitas Negeri Malang Universitas Gadjah Mada
Bidang Ilmu Kimia Fisik Kimia Fisik
Tahun Masuk-lulus 2007-2012 2012-2014
Pengaruh Temperatur pada
Sintesis dan Karakterisasi Katalis
Reaksi Hidrodenitrogenasi
Judul skripsi/tesis Berbasis Ni-MCM-41 sebagai Perengkah
Piridin dengan Katalis Ni-
untuk Minyak Kelapa Sawit
Mo/Zeolit Alam
1. Prof. Dr. Iip Izul Falah
1. Sri Kadarwati, M.Si 2. Prof. Dra.Wega Trisunaryanti, M.S.,
Nama Pembimbing
2. Harjito, S.Pd., M.Sc Ph.D., Eng
10. Penghargaan dalam 10 tahun Terakhir (dari pemerintah, asosiasi atau institusi lainnya)
Institut Pemberi
No. Jenis Penghargaan Tahun
Penghargaan
- - - -
Semua data yang saya isikan dan tercantum dalam biodata ini adalah benar dan dapat
dipertanggungjawabkan secara hukum. Apabila di kemudian hari ternyata dijumpai ketidak-
sesuaian dengan kenyataan, saya sanggup menerima sanksi.
Demikian biodata ini saya buat dengan sebenarnya untuk memenuhi salah satu
persyaratan dalam pengajuan Hibah Penelitian Dosen Pemula
27
Kediri, 27 Mei 2016
Pengusul,
28
SURAT PERNYATAAN KETUA PELITI/PELAKSANA
Bilamana di kemudian hari ditemukan ketidaksesuaian dengan pernyataan ini, maka saya
bersedia dituntut dan diproses sesuai dengan ketentuan yang berlaku dan mengembalikan seluruh
biaya penelitian yang sudah diterima ke kas negara.
Mengetahui,
Kediri, 27 Mei 2016
Kepala Lembaga Penelitian dan Yang menyatakan,
Pengabdian Masyarakat,
Yohanes Andy Rias, M.Kep., Ns., CWCS Mardiana Prasetyani Putri, M.Si
30