Tujuh jenis peptida penghambatan angiotensin I-converting enzyme (ACE)

diisolasi dari hidrolisat wakame (Undaria pinnatifida) oleh Protease S “Amano”

(dari Bacillus stearothermophilus) dengan menggunakan kromatografi cair tiga
langkah berkinerja tinggi (HPLC) pada fase balik kolom. Peptida ini diidentifikasi
dengan analisis komposisi asam amino, analisis urutan, dan spektrometri massa
kromatografi cair (LC-MS), sebagai Val-Tyr (IC50) 35.2 íM), Ile-Tyr (6.1 íM), Ala-
Trp (18,8 íM), Phe-Tyr (42,3 íM), Val-Trp (3,3 íM), Ile-Trp (1,5 íM), dan Leu-Trp
(23,6 íM). Peptida ini memiliki ketahanan terhadap protease gastrointestinal in
vitro. Setiap peptida itu bertekad untuk memiliki efek antihipertensi setelah
pemberian oral tunggal secara spontan tikus hipertensi (SHR). Di antara mereka,
tekanan darah menurun secara signifikan oleh Val-Tyr, Ile- Tyr, Phe-Tyr, dan Ile-
Trp dengan dosis 1 mg / kg berat badan (BB). Penelitian ini menunjukkan bahwa
efek antihipertensi dalam hidrolisis wakame oleh Protease S "Amano" dikaitkan
dengan ini peptida.

Pendahuluan

Rumput laut adalah bahan makanan tradisional yang populer di Jepang. Antara
rumput laut, wakame (Undaria pinnatifida) adalah yang paling banyak makan
rumput laut coklat. Dalam masakan sehari-hari, disajikan dalam salad, sebagai
aditif untuk sup miso atau mie, dan sebagai hiasan. Wakame diketahui
mengandung sejumlah besar serat makanan terlarut, dan menjadi kaya dalam
berbagai jenis mineral (1). Wakame punya beberapa efek fisiologis: pencegahan
hiperlipidemia pada tikus (2), supresi tumor mammae yang diinduksi kimia pada
tikus (3), dan efek hipotensi pada manusia hipertensi (4).

Tekanan darah yang meningkat tampaknya menjadi salah satu yang utama faktor risiko
yang terkait dengan kejadian stroke apoplektik di manusia. Angiotensin I-converting enzyme
(ACE) memainkan sebuah peran penting dalam sistem renin-angiotensin, yang mengatur
tekanan darah. Obat antihipertensi seperti kaptopril dan enalapril adalah inhibitor ACE yang
poten (5, 6). Baru-baru ini, beberapa Peptida inhibisi yang berasal dari protein makanan
telah diisolasi dari, misalnya, kasein (7), zein (8), sake (9), susu asam (10),

otot sarden (11), ikan asin kering (12), bonito kering (13), dan kedelai Korea (14).
Kami mencatat bahwa wakame memiliki efek antihipertensi di manusia
hipertensi. Kami melaporkan bahwa wakame dihidrolisis oleh berbagai protease,
dan aktivitas penghambatan hidrolisat untuk ACE diukur. Di antara mencerna,
Protease S "Amano" (dari Bacillus stearothermophilus) mencerna menunjukkan
aktivitas penghambatan paling kuat. Kami juga melaporkan bahwa hipertensi
pada tikus hipertensi spontan (SHR) adalah ditekan baik dalam tes administrasi
lisan tunggal dan jangka panjang tes makan dengan wakame hidrolisat oleh
Protease S "Amano" (15). Dalam penelitian ini, kami melaporkan isolasi dan
identifikasi Peptida inhibisi ACE dari digest Protease S “Amano” dari wakame.
Kami juga telah menyelidiki perlawanan ACE peptida penghambatan terhadap
protease gastrointestinal in vitro, dan apakah peptida mereka dari intisari acara
wakame tindakan hipotensi dengan pemberian oral di SHR.

BAHAN DAN METODE

Material. The wakame dihidrolisis oleh Protease S "Amano" adalah disiapkan

seperti yang dijelaskan sebelumnya (15). Pepsin (dari lambung babi mukosa),
tripsin (dari pankreas bovin), chymotrypsin (dari bovine
pankreas), ACE (dari paru-paru kelinci), hippuryl-L-histidyl-L-leusin dan
valyl-tyrosine dibeli dari Sigma Chemical Co. (St. Louis,
MO). Isoleucyl-tyrosine, isoleucyl-tryptophan, leucyl-tryptophan, dan
phenylalanyl-tyrosine dibeli dari BACHEM AG, (Bubendorf,
Swiss). Valil-tryptophan dibeli dari Research Organics
Inc., (Cleveland, OH). Alanyl-tryptophan dibeli dari Tokyo
Kasei Co., Ltd. (Tokyo, Jepang).
Uji untuk Aktivitas Penghambatan ACE.