a.

Kromatografi Adsorpsi
Pada jenis kromatografi adsorpsi, prinsip pemisahan berdasarkan proses
adsorpsi analit dalam permukaan padatan fase diam. Padatan fase diam
dapat berupa silika gel atau alumina yang memiliki luas permukaan relatif
besar. Kromatografi adsorpsi merupakan salah satu metode kromatografi yang
cukup lama. Pemisahan didasarkan pada perbedaan sifat afinitas adsorpsi dari
komponen sampel pada permukaan padatan aktif. Kromatografi adsorpsi
menggunakan fase gerak cairan maupun padatan yang mampu teradsorp
pada permukaan fase diamnya. Pada gambar dibawah ini ditunjukkan interaksi
adsorpsi antara analit pada fase gerak dengan permukaan fase diamnya.

Metode kromatografi adsorpsi memiliki beberapa kelemahan dia antaranya

yang pertama adalah keterbatasan jumlah adsorben yang dapat digunakan
untuk melakukan pemisahan. Kedua adalah koefisien distribusi terhadap
adsorpsi yang seringkali tergantung pada konsentrasi total komponen yang
akan dipisahkan, sehingga mengakibatkan pemisahan kurang sempurna.

b. Kromatografi Partisi
Kromatografi partisi adalah kromatografi dimana proses pemisahannya
berdasakan kemampuan adsorpsi analit pada lapisan tipis cairan yang
dilapiskan pada partikel padatan inert fase diamnya. Prinsip utama pemisahan
berdasarkan perbedaan kelarutan antara komponen sampel pada fase
diamnya (gas chromatography), atau berdasarkan perbedaan kelarutan
komponen dalam fase gerak dengan fase diamnya (liquid chromatography).
Keuntungan metode kromatografi partisi ini adalah distribusinya tidak
bergantung pada konsentrasi, sehingga pemisahan dapat terjadi lebih baik.

c. Kromatografi Pertukaran ion

Pada kromatografi penukar ion, ion terpisahkan berdasarkan gaya
elektrostatiknya membentuk grup fungsional yang bermuatan pada fase diam.
Kromatografi penukar ion menggunakan resin sebagai padatan fase diam
yang berguna untuk mengikat anion atau kation. Larutan ion bermuatan pada
fase gerak akan berikatan denga resin yang memiliki muatan berlawanan
melalui gaya elektrostatik.

d. Exclusion Chromatography
Exclusion Chromatography merupakan tipe kromatografi yang tidak banyak
dipengaruhi oleh interaksi antara fase diam dengan zat terlarutnya. Proses
pemisahan berdasarkan volume hidrodinamik dari molekul atau partikel. Dalam
 teknik ini, gel nonionik dengan ukuran pori yang sama digunakan untuk
memisahkan campuran berdasarkan perbedaan ukuran molekulnya (BM).

Molekul-molekul yang kecil akan memasuki pori-pori dari gel sedangkan

molekul besar akan melewati sela-sela gel lebih cepat bila dibandingkan
dengan molekul yang melewati pori-porinya. Jadi urutan elusi mula-mula
adalah molekul yang lebih besar, molekul sedang, dan terakhir molekul yang
paling kecil. Apabila fasa diamnya adalah gel yang hidrofil maka teknik ini
disebut gel filtration chromatography dan bila digunakan gel yang hidrofob
(polystyrene-divinylbenzene) disebut gel permeation chromatography.

e. Affinity Chromatography
Kromatografi afinitas bekerja berdasarkan pada interaksi spesifik antara satu
jenis molekul zat terlarut dengan jenis molekul lain yang terimmobilisasi dalam
fase diam. Sebagai contoh, molekul yang terimmobilisasi dapat menjadi
antibodi untuk beberapa protein yang spesifik. Saat zat terlarut yang
mengandung campuran protein melewati molekul ini, hanya protein tertentu
saja yang akan bereaksi dengan antibodi yang terimmobilisasi pada fase
diam.

Metode analisis kimia farmasi dibagi menjadi 2 yaitu

o Metode klasik atau metode konvensional
Metode konvensional terdiri atas Gravimetri dan Volumetri.
Metode Gravimetri berdasarkan penimbangan berat konstan suatu senyawa yang dianalisis
sedangkan volumetri merupakan metode analisis yang didasarkan pada engkuran volume larutan
baku yang bereaksi dengan senyawa yang akan dianalisis dan reaksinya berlangsung secara
kuantitatif
o Metode Modern
Keunggulan metode modern lebih unggul dibandingkan metode konvensional karena metode
modern memiliki kepekaan yang tinggi (batas deteksinya kecil) jumpah sampel yang diberikan
sedikit dan waktu pengerjaannya relatif cepat. Kelemahan dari metode modern adalah analisisnya
harus dilakukan dengan menggunakan baku rujukan

F. Pemeriksaan Fisik

1. Inspeksi: apakah ada kemerahan, bentol-bentol dan terdapat gejala adanya

urtikaria,angioderma,pruritus dan pembengkakan pada bibir
2. Palpasi: ada nyeri tekan pada kemerahan
3. Perkusi: mengetahui apakah diperut terdapat udara atau cairan
4. Auskultasi: mendengarkan suara napas, bunyi jantung, bunyi usus( karena pada oarng yang
menderita alergi bunyi usunya cencerung lebih meningkat)
G. Pemeriksaan Penunjang

1. Uji kulit: sebagai pemerikasaan penyaring (misalnya dengan alergen hirup seperti tungau,
kapuk, debu rumah, bulu kucing, tepung sari rumput, atau alergen makanan seperti susu,
telur, kacang, ikan).
2. Darah tepi: bila eosinofilia 5% atau 500/ml condong pada alergi. Hitung leukosit 5000/ml
disertai neutropenia 3% sering ditemukan pada alergi makanan.
3. IgE total dan spesifik: harga normal IgE total adalah 1000u/l sampai umur 20 tahun. Kadar
IgE lebih dari 30u/ml pada umumnya menunjukkan bahwa penderita adalah atopi, atau
mengalami infeksi parasit atau keadaan depresi imun seluler.
4. Tes intradermal nilainya terbatas, berbahaya.
5. Tes hemaglutinin dan antibodi presipitat tidak sensitif.
6. Biopsi usus: sekunder dan sesudah dirangsang dengan makanan food chalenge didapatkan
inflamasi / atrofi mukosa usus, peningkatan limfosit intraepitelial dan IgM. IgE ( dengan
mikroskop imunofluoresen ).
7. Pemeriksaan/ tes D Xylose, proktosigmoidoskopi dan biopsi usus.
8. Diit coba buta ganda ( Double blind food chalenge ) untuk diagnosa pasti