Nama:Dimas Hendra Kusuma

NIM:H3116022
Kelas:THP(A)

Gamma Irradiation and Autoclave Sterilization Peat and Compost as

the Carrier for Rhizobial Inoculant Production
Panlada Tittabutr1, Kamonluck Teamthisong2, Bancha Buranabanyat1, Neung Teaumroong1 & Nantakorn
Boonkerd1

Rhyzobium adalah sebuah biofertilizer untuk tanaman polongan .Untuk merumuskan pupuk ,
proses sterilisasi sangat penting dilakukan . Karena itu , tujuan penelitian ini adalah untuk menjelaskan
proses pada gamma radiasi dan autoclaving gambut dan kompos operator untuk produksi rhizobial
inoculant didasarkan dengan 10 % kelembaban konten kemasan di tas polietilena dapat efisien disterilkan
oleh radiasi di 10-20 kg , atau dengan autoclaving pendekatan ( autoclaving dengan tyndallization dua
kali di satu baris pada 121 C selama 60 min , dengan kurun waktu 18 jam setelah setiap kali dari
autoclaving ) .Jumlah bradyrhizobium sp .Terpantau dalam kisaran prc008 dari 108-109 cfu / g di kedua
diradiasi dan autoclaved penyimpanan gambut setelah 6 bulan. Namun , jumlah bradyrhizobial di sel
berkurang kompos disterilkan oleh kedua metode setelah satu bulan penyimpanan .Hasil ini menunjukkan
bahwa bahan pembawa memiliki pengaruh penting pada kualitas inoculant , sementara proses sterilisasi
menggunakan dengan tyndallization gamma radiasi dan autoclaving pendekatan dapat digunakan untuk
efisien rhizobial inoculant pembawa produksi dengan gambut didasarkan.

Menggunakan rhizobial inoculant adalah penggunaan teknologi pertanian yang berkelanjutan

.Inoculants rhizobial telah digunakan sebagai sebuah sumber pupuk nitrogen yang ramah lingkungan
untuk beberapa dekade untuk mengurangi menempatkan nitrogen pupuk kimia ke dalam tanah , serta
biaya produksi legum .Ada beberapa bentuk rhizobial inoculant yang tersedia di pasar , padat atau cair
bentuk yang termasuk dapat terus kelangsungan hidup efektif rhizobia di tingkat 108 sel / g untuk paling
singkat 6 bulan ( stephens & amp; rask , 2000 ) .Walaupun orang-orang bentuk cair dari rhizobial
inoculants diterapkan dalam proses produksi lebih mudah daripada bentuk padat , sel kelangsungan hidup
yang rhizobial dalam cairan inoculants tergantung pada dan strain rhizobia polimer dimasukkan ke dalam
cairan inoculants zat aditif perumusan ( tittabutr et al . , 2007 ) . Dengan demikian, inoculants padat,
terutama yang digunakan pembawa peat-based, masih populer bagi biofertilizer inoculant produksinya
karena dapat mendukung ke arah kelangsungan hidup gambut bakteri dalam jangka waktu panjang
penyimpanan ( dengan kishore et al. , 2005; okon & amp; labandera-gonzalez, 1994 ).Namun, gambut
terbatas di banyak negara termasuk thailand, karena itu sangat perlu untuk mendapatkan perusahaan
penerbangan yang adalah secara lokal tersedia untuk produksi berskala komersial.Bahan yang tepat untuk
digunakan sebagai upaya induk di rhizobial atau biofertilizer inoculant bahan yang tidak beracun produksi
harus, kapasitas air memegang sudah baik, mendukung pertumbuhan bakteri dan kelangsungan hidup,
dalam bentuk bubuk mudah disiapkan, netral dan telah mendekati ph ( albareda et al. 2008; khavazi et
al, . , 2007; smith, 1992 ).Beberapa material yang telah diuji sebagai alternatif rhizobial inculants
pembawa source selama, seperti tanah, batubara, vermiculite, perlite, attapulgite, sepiolite, silika amorf,
gabus kompos, anggur bagasse, dan tanaman lain composts ( albareda et al. 2008; fer , Namun , kualitas
inoculant bervariasi menurut physicochemical dan biologis sifat dari bahan serta sterilisasi metode
diterapkan untuk pembawa ( khavazi et al . , 2007; swelim et al . , 2010 ) .Kontaminasi mikroorganisme
merupakan masalah utama yang mempengaruhi kualitas dan kehidupan rhizobial inoculant , sangat
diperlukan penyeterilan untuk sebelum injeksi yang murni. Rhizobial angkutan umum yang steril
biasanya dengan radiasi gamma autoclaving atau , tergantung pada peningkatan aksesibilitas dan
ketersediaan alat .Mekanisme autoclaving oleh sterilisasi dengan wanita itu membunuh mikroorganisme
di bawah suhu tinggi ( 121 ) c tekanan tinggi dan ( 15 / kolam inch2 ) untuk jangka waktu tertentu ,
tergantung pada jumlah dan susunan materi .Namun , masalah yang membentuk spora kontaminasi
mikroorganisme yang tersisa di kapal induk autoclaving setelah itu masalah utamanya menggunakan
metode sterilisasi ini .Meskipun mekanisme sterilisasi dengan radiasi gamma itu karena adanya kerusakan
langsung dari dua untai dna , atau yang terjadi pada molekul yang terionisasi air bentuk radikal bebas dan
mengganggu sistem biologis di dalam sel ( & hansen; amp shaffer , 2001 ) .Sterilisasi pembawa rhizobial
harus dipertimbangkan oleh ilmu kimia dan perubahan dari bahan yang tidak menghasilkan atau
mengeluarkan zat zat beracun yang menghancurkan dan tidak ada dalam bahan nutrisi. Diperhatikan
adalah efisiensi lain metode sterilisasi, sejak tingginya angka mencemari mikroorganisme secara
signifikan rhizobial inoculant mengurangi kualitas.Meskipun radiasi di tempat dosis gamma bi berada
lebih efektif daripada autoclaving, jumlah rhizobia di penyelenggara jaminan tidak jauh berbeda setelah 6
bulan penyimpanan ( khavazi et al. , 2007 ).Pembawa dosis diperlukan untuk mensterilkan bahan
bervariasi dengan properti, kepadatan, kelembaban konten, konfigurasi awal mencemari memuat dan
kemasan.Namun, dosis lebih tinggi tingkat sinar gamma mungkin menyebabkan beracun kerusakan
produk dari lebih tinggi bahan kapal induk itu, dan beberapa spora membentuk mikroorganisme masih
ditemukan ketika menyimpan pengangkut jangka waktu ( yardin et al. , 2000 ).Meskipun dosis rate lebih
dari 50 kgy ini biasanya digunakan untuk efisien pembawa sterilisasi, Dosis lebih rendah bi berada
diperlukan untuk mengurangi energi dan waktu sterilisasi serta mengurangi racun zat yang mungkin bisa
dihasilkan ketika menggunakan dosis tinggi gamma radiasi.Studi ini bertujuan untuk mencari tahu proses
persiapan untuk mencapai pembawa terendah dosis rate yang secara efektif disterilkan gamma pembawa
oleh radiasi.Pembawa faktor kelembaban konten dan kontainer adalah elucidated jenis plastik.Serta
strategi membunuh geminated spora membentuk mikroorganisme dengan penerapan tyndallization
pendekatan dengan autoclaving sterilisasi juga ditentukan dalam rangka untuk meminimalkan mencemari
mikroorganisme dalam kompos dan gambut untuk inoculant menggunakan sebagai rhizobial induk di
produksi.

Pembawa dua tipe , gambut dan kompos , yang digunakan di seluruh percobaan adalah .Gambut
berasal dari departemen pertanian ( doa ) , thailand , sementara kompos adalah suranaree teknologi
diperoleh dari universitas .Kompos berasal dari campuran limbah pertanian , seperti singkong peel , kue
filter , kotoran dan kotoran sapi ayam .Ph tanah gambut dan kompos adalah 4,5 dan 7.49 , secara berturut-
turut .Kedua gambut dan kompos yang pertama machined dan melewati sebuah 100-mesh saringan ,
sebelum ph dari gambut adalah disesuaikan dengan hampir 7.0 dengan menggunakan caco3 .Gambut dan
kompos dikirim ke laboratorium tanah , teknologi produksi sekolah dari tanaman , univeristy suranaree
teknologi , thailand untuk menentukan karakteristik fisik dan kimia operator sesuai dengan standar
metode .

Isi kelembaban pembawa telah disesuaikan untuk 10 , 20 , dan 30 % oleh menggunakan air , dan
80 g dari setiap naik ke 5 pembawa adalah 8 ( inci ) kantong plastik , baik menggunakan ( pe ) atau
polipropilen polietilena ( pp ) pundi-pundi dan ketebalan 0,08 mm sebelum sterilisasi .Setiap paket
sembako tersebut telah ketebalan 0,8 cm .Pembawa kadar air dan jenis kantong plastik wadah beragam
menurut setiap percobaan. Paket pembawa disterilisasi dengan pusat radiasi gamma radiasi di thailand ,
thailand institute of teknologi nuklir ( nakhon na-yok , thailand ) .Cobolt-60 digunakan sebagai salah satu
sumber radiasi .Paket dengan dosis yang berbeda disterilisasi gamma radiasi di 5 , 10 , 15 , 20 , dan 25
kgy .Dosis diterima di berbagai kedalaman dan tersebut selama ini diukur dengan menggunakan
dosimeter untuk menjamin jumlah dosis radiasi .Gamma paket iradiasi yang telah disampaikan kepada
suranaree teknologi universitas dari dalam waktu satu minggu untuk penetapan jumlah kontaminan di
mikroba gamma sterilisasi pembawa setelah .
Operator adalah dibasahi dengan 10 % sebelum pengepakan 80 g dari setiap pembawa ke dalam
5 - 8 ( inci ) dari tas pe .Pendekatan itu sudah dilakukan untuk yang tyndallization pembawa sterilisasi
.Orang-orang autoclave dioperasikan untuk 2 kali di satu baris pada 121 c selama 60 min , masa iddah
setelah sementara dari autoclaving setiap kali berbeda-beda di 18 dan 24 h.

Jumlah kontaminan di disterilkan mikroba paket adalah ditetapkan di pembawa 1 minggu setelah
sterilisasi oleh aseptically menghapus 10 g pembawa dari setiap tas , dan pembawa adalah diencerkan
dalam 90 ml disterilkan air , dan terguncang di 200 rpm selama 30 min .Adalah 10-fold sampel serial
dilarutkan dalam disterilkan air dan berlapis rangkap dua ke piring menghitung agar-agar ( pca ) dan
kentang dekstrosa agar-agar ( pda ) untuk bakteri dan enumerasi cetakan , secara berturut-turut .Koloni
dianggap setelah inkubasi pada 28 c selama 5 hari , log jumlah dan diperhitungkan sebagai koloni
membentuk unit ( cfu ) / g kering pembawa berat .Pembawa yang robek paket mereka termasuk dari
percobaan

Bradyrhizobium sp.Prc008, diperoleh dari doa, thailand telah biasanya telah digunakan sebagai
sebuah inoculum ketegangan untuk inoculant produksi oleh doa.Ketegangan ini mungbean disarankan
kepada digunakan dengan ( vigna radiata l. ) untuk menekan penggunaan pupuk kimia nitrogen.Dalam
studi ini, prc008 adalah berbudaya dalam sebuah ragi ekstrak manitol ( yem tahap log ) kaldu sampai
akhir.Budaya adalah diencerkan 10 kali, dan 20 ml budaya adalah aseptically diencerkan disuntikkan ke
dalam tas yang mengandung 80 g dari pembawa disterilkan dengan 20 % kelembaban konten.Tas juga
secara menyeluruh diremas oleh tangan, konten yang terakhir kelembaban pembawa berumur 40 persen
per langkah ini.Kemudian, tas juga incubated mencapai 28 c selama 1 minggu dan kemudian pergi pada
suhu kamar ( 28-30 c ) selama 6 bulan.

Jumlah efektif bradyrhizobium sp .Prc008 ditetapkan setiap bulan selama 6 bulan setelah injeksi dengan
menggunakan tanaman infeksi menghitung berdasarkan prinsip yang mendasari most-probable-number
asumsi ) ( mpn metode ( somasegaran & amp; hoben , 1994 ) .

Radiasi gamma itu sebuah teknik yang digunakan untuk sterilisasi jalur busway dari berbagai macam
produk , seperti obat obatan dan produk obat obatan , hasil pertanian , produk makanan atau paket
sembako .Namun , sterilisasi dengan radiasi gamma dengan gambut atau kompos , yang memiliki struktur
yang kompleks carbon-based dan tinggi biasanya berisi permukaan tubuh dari beban harus menentukan
tingkat yang sesuai dosis dan faktor lain yang mempengaruhi efisiensi sterilisasi .Faktor dari bahan apa
kelembaban ( 10 , 20 , dan 30 % ) dan jenis wadah plastik ( pp dan ) pe yang meneliti dalam rangka untuk
menggunakan tarif terendah dosis radiasi gamma untuk sterilisasi .Karena terbatasnya jumlah gambut
dalam eksperimen ini , kompos selain digunakan untuk menentukan sesuai dengan kadar kelembaban dan
bahan yang dikemas dalam tas pp sebelumnya yang terpapar radiasi gamma.Penelitian ini adalah
didukung oleh suranaree ttg dan oleh universitas pendidikan yang lebih tinggi universitas penelitian
promosi dan national research proyek dari thailand , kantor komisi pendidikan tinggi .kami juga berterima
kasih thailand institute of ttg melakukan gamma radiasi nuklir untuk , Dan departemen pertanian ( doa ) ,
thailand untuk menyediakan gambut dan rhizobial ketegangan di sepanjang percobaan .
Journal of Agricultural Science; Vol. 4, No. 12; 2012
ISSN 1916-9752 E-ISSN 1916-9760
Published by Canadian Center of Science and Education
59
Gamma Irradiation and Autoclave Sterilization Peat and
Compost as
the Carrier for Rhizobial Inoculant Production
Panlada Tittabutr1, Kamonluck Teamthisong2, Bancha Buranabanyat1, Neung Teaumroong1 & Nantakorn
Boonkerd1
1 School of Biotechnology, Suranaree University of Technology, Nakhon Ratchasima, Thailand
2 The Center for Scientific and Technological Equipment, Suranaree University of Technology, Nakhon Ratchasima,
Thailand
Correspondence: Nantakorn Boonkerd, School of Biotechnology, Suranaree University of Technology, Nakhon
Ratchasima, Thailand. Tel: 66-4422-4501. E-mail: nantakon@sut.ac.th
Received: August 1, 2012 Accepted: August 28, 2012 Online Published: November 15, 2012
doi:10.5539/jas.v4n12p59 URL: http://dx.doi.org/10.5539/jas.v4n12p59
Abstract
Rhizobium is a biofertilizer for leguminous crops. To formulate this form of fertilizer, the suitable sterilization
processes of carrier are important. Therefore, the aim of this research was to elucidate the process of gamma
irradiation and autoclaving on peat and compost based carriers for rhizobial inoculant production. Carriers with 10%
moisture content packing in polyethylene bag could be efficiently sterilized by irradiation at 10-20 kGy, or by
autoclaving with tyndallization approach (autoclaving two times in a row at 121ºC for 60 min, with waiting period
of 18 hours after each time of autoclaving). The number of Bradyrhizobium sp. PRC008 was in the range of
108-109 cfu/g in both irradiated and autoclaved peat after 6 months storage. However, the numbers of
bradyrhizobial cell were reduced in compost sterilized by both methods after one month storage. These results
indicated that carrier material had an important influence on inoculant quality, while sterilization processes using
gamma irradiation and autoclaving with tyndallization approach could be used for efficient rhizobial inoculant
production with peat based carrier.
Keywords: autoclaving, gamma irradiation, rhizobial inoculant, sterilization, tyndallization
1. Introduction
Using rhizobial inoculant is a clean technology for sustainable agriculture. Rhizobial inoculants have been used as
an environmental friendly source of nitrogen fertilizer for several decades to reduce putting chemical nitrogen
fertilizer into the soil, as well as the cost of legume production. There are several forms of rhizobial inoculant
available in the market, including solid or liquid forms that can maintain the survival of effective rhizobia at the
level of 108 cells/g for at least 6 months (Stephens & Rask, 2000). Even though the liquid form of rhizobial
inoculants is applied in the production process more easily than solid form, the survival of rhizobial cell in liquid
inoculants depends on strain of rhizobia and polymeric additive substance incorporated into liquid inoculants
formulation (Tittabutr et al., 2007). Thus, solid inoculants, especially those using peat-based carrier, are still
popular for biofertilizer inoculant production because peat could support the survival of bacteria in long term
storage (Kishore et al., 2005; Okon & Labandera-Gonzalez, 1994). However, peat is limited in many countries
including Thailand, so it is necessary to find carriers that are locally available for commercial scale production.
The appropriate material to be used as a carrier in rhizobial or biofertilizer inoculant production should be
non-toxic material, have good water holding capacity, support bacterial growth and survival, be easily prepared in
powder form, and have nearly neutral pH (Albareda et al., 2008; Khavazi et al., 2007; Smith, 1992). Several
materials have been tested as an alternative carrier source for rhizobial inculants, such as soil, coal, vermiculite,
perlite, attapulgite, sepiolite, amorphous silica, cork compost, grape bagasse, and other plant composts (Albareda
et al., 2008; Ferreira & Castro, 2005; Khavazi et al., 2007). However, the quality of inoculant is varied according
to the physicochemical and biological properties of material as well as the sterilization method applied to carrier
(Khavazi et al., 2007; Swelim et al., 2010). Since contaminant microorganism is the main problem that affects the
quality and shelf-life of rhizobial inoculant, sterilized carrier is necessary to be accomplished prior injection of the
pure culture of rhizobia into carrier.