BAB III

METODOLOGI KERJA
3.1 Alat dan Bahan
Alat Bahan
Beaker glass Aquadest
Stirer Paracetamol
Wadah kompartemen 1
Spuit
Gelas ukur
Stopwatch
Spektrofotometer UV

3.2 Prosedur Kerja

a. Membuat Larutan Standar Paracetamol
 Dibuat larutan induk 1000 ppm
 Kemudian ambil 20 ppm
b. Percobaan Menggunakan Alat Kompatemen 1 (keran)
 Masukkan 500 ml aquadest hingga melebihi batas keran
 Atur kecepatan keran setelah dibuka, hitung dalam 1 menit berapa air
yang keluar
 Jika telah mengetahui, tambahkan cairan aquadest dari atas dengan
konstan
 Gunakan stirer dan masukkan larutan standar pct sebanyak air yang
keluar
 Lihat dalam waktu 5, 10, 20, 30, 40, 50 dan 60 menit
 Ambil cairan yang berada dalam wadah yang telah mengandung
sampel dan masukkan aquadest. Keduanya dalam jumlah yang sama di
waktu yang telah ditentukan
 Ukur dengan spektrofotometer UV
c. Percobaan Menggunakan Gelas Beaker (Manual)
 Masukkan 300 ml aquadest
 Gunakan stirer dan masukkan larutan standar parasetamol
 Klirens diambil dalam waktu tiap 1 menit selama 60 menit dalam
jumlah 10 ml
 Lihat dalam waktu 5, 10,15, 20,25, 30, 40, 50 dan 60 menit
 Ambil cairan yang berada dalam wadah yang telah mengandung
sampel sebanyak 10 ml dan masukkan aquadest 10 ml. Keduanya
dalam jumlah yang sama di waktu yang telah ditentukan
 Ukur dengan spektrofometer UV
 BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil
a. Data Kurva Kalibrasi Paracetamol
Konsentrasi Paracetamol Absorbansi
5 0,310
10 0,531
15 0,736
20 0,996
25 1,196

Kurva Kalibrasi Paracetamol

Kurva Kalibrasi y = 0.0447x + 0.0881

R² = 0.9994
1.4

1.2

0.8

0.6

0.4

0.2

0
0 5 10 15 20 25 30

Berdasarkan data absorbansi pada masing-masing interval waktu dan juga

persamaan regresi linear kurva kalibrasi, maka dapat dihitung konsentrasi
paracetamol dengan mendistribusikan nilai absorbansi ke dalam persamaan
regresi. Dimana nilai y merupakan absorbansi dan nilai x adalah konsentrasi
metformin.
y = 0.044x + 0.088
y – 0,088 = 0,044x
 x = (y – 0,088) / 0,044
b. Perhitungan Konsentrasi Paracetamol
Diketahui hasil dari pengukuran spektrofotometer UV yaitu:
Menit Absorbansi Pengenceran Menit Absorbansi Pengenceran
(keran) (Beaker glass)
5 0,684 2x 5 0,650 2x
10 0,550 2x 10 0,631 2x
20 0,641 - 16 0,516 2x
30 0,400 - 20 0,814 -
40 0,246 - 25 0,685 -
50 0,153 - 30 0,579 -
60 0,101 - 40 0,380 -
50 0,267 -
60 0,181 -

 Menggunakan alat kompartemen 1 (Keran)

Waktu Absorbansi Perhitungan Konsentrasi

5 0,684 y = 0,0447x + 0,0881 26,67ppm

0,684= 0,0447x + 0,0881
0,596 = 0,0447𝑥
𝑥 = 13,331 x Fp
𝑥 = 13,333 x2
𝑥 = 26,67µg/ml
10 0,550 y = 0,0447x + 0,0881 20,671 ppm
0,550 = 0,0447x + 0,0881
0,462 = 0,0447𝑥
𝑥 = 10,335 x Fp
𝑥 = 10,333x2
 𝑥 = 20,671µg/ml
20 0,641 y = 0,0447x + 0,0881 12,371 ppm
0,641 = 0,0447x + 0,0881
0,553= 0,0447x
𝑥 = 12,371µg/ml
30 0,400 y = 0,0447x + 0,0881 6,979 ppm
0,400 = 0,0447x + 0,0881
0,312 = 0,0447x
𝑥 = 6,979 µg/ml
40 0,246 y = 0,0447x + 0,0881 3,534 ppm
0,246 = 0,0447x + 0,0881
0,158 = 0,0447x
𝑥 = 3,534µg/ml
50 0,153 y = 0,0447x + 0,0881 1,454 ppm
0,153= 0,0447x + 0,0881
0,065 = 0,0447x
𝑥 = 1,454 µg/ml
60 0,101 y = 0,0447x + 0,0881 0,290 ppm
0,101= 0,0447x + 0,0881
0,013 = 0,0447x
𝑥 = 0,290 µg/ml

 Menggunakan alat Beaker Glass (Manual)

Waktu Absorbansi Perhitungan Konsentrasi

5 0,650 y = 0,0447x + 0,0881 25,140 ppm

0,650 = 0,0447x + 0,0881
0,562 = 0,0447x
𝑥 = 12,570 x Fp
𝑥 = 12,570 x 2
 𝑥 = 25,140µg/ml
10 0,631 y = 0,0447x + 0,0881 24,290 ppm
0,631 = 0,0447x + 0,0881
0,543 = 0,0447x
𝑥 = 12,145 x Fp
𝑥 = 12,145 x 2
𝑥 = 24,290µg/ml
16 0,516 y = 0,0447x + 0,0881 19,145 ppm
0,516 = 0,0447x + 0,0881
0,428 = 0,0447x
𝑥 = 9,573 x Fp
𝑥 = 9,573 x 2
𝑥 = 19,145µg/ml
20 0,814 y = 0,0447x + 0,0881 16,239 ppm
0,814 = 0,0447x + 0,0881
0,726= 0,0447x
𝑥 = 16,239µg/ml
25 0,685 y = 0,0447x + 0,0881 13,353 ppm
0,685 = 0,0447x + 0,0881
0,597= 0,0447x
𝑥 = 13,353µg/ml
30 0,579 y = 0,0447x + 0,0881 10,982 ppm
0,579 = 0,0447x + 0,0881
0,491 = 0,0447x
𝑥 = 10,982 µg/ml
40 0,380 y = 0,0447x + 0,0881 6,530 ppm
0,380 = 0,0447x + 0,0881
0,292 = 0,0447x
𝑥 = 6,530µg/ml
 50 0,267 y = 0,0447x + 0,0881 4,002 ppm
0,267= 0,0447x + 0,0881
0,179 = 0,0447x
𝑥 = 4,002µg/ml
60 0,181 y = 0,0447x + 0,0881 2,078 ppm
0,181= 0,0447x + 0,0881
0,093 = 0,0447x
𝑥 = 2,078µg/ml

Tabel Hasil Konsentrasi

Keran Manual
Menit Cp Ln Cp Menit Cp Ln Cp
(µg/ml) (µg/ml)

5 26,67 ppm 3.283539 5 25,140 3,22446

10 20,671 ppm 3.028732 10 24,290 3,190065

20 12,371 ppm 2.515355 16 19,145 2,952042

30 6,979 ppm 1.942906 20 16,239

2,787416
40 3,534 ppm 1.26243 25 13,353
2,591741
50 1,454 ppm 0.374318 30 10,982
2,396258
60 0,290 ppm -1.23787 40 6,530
1,876407
50 4,002
1,386794
60 2,078
0,731406

c. Kurva Paracetamol
 Menggunakan Alat Kompartemen 1 (keran)
 4

3.5
y = -0.0631x + 3.6987
3
R² = 0.9881
2.5

2 Series1
Linear (Series1)
1.5

0.5

0
0 10 20 30 40 50 60

Dari kurva tersebut, didapatkan persamaan orde satu yaitu :

Nilai Ln Co Keran

y = -0,063x + 3,698
R² = 0,988

Ln C = Ln Co – kt
Ln C = 3,698 - 0,063t

Ln Co = 3,698

K = 0,063/menit

 Menggunakan Gelas Beaker (Manual)

 4

3.5
y = -0.0458x + 3.6452
3 R² = 0.9835

2.5

2 Series1
Linear (Series1)
1.5

0.5

0
0 20 40 60 80

Dari gafik tersebut, didapatkan persamaan orde satu yaitu :

Nilai Ln Co Manual

y = -0,045x + 3,645
R² = 0,983

Ln C = Ln Co – kt
Ln C = 3,645-0,045t

Ln Co = 3,645

K = 0,045/menit

d. Tabel Perbandingan Antara Teoritis dan Eksperimen

 Pada alat Kompartemen (Keran)
Parameter Teoritis Ekserimen
Do 10 ml x 1000 ppm 10 ml x 1000 ppm
10 ml x 1000 µg/ml 10 ml x 1000 µg/ml
10 ml x 1 mg/ml 10 ml x 1 mg/ml
= 10 mg = 10 mg
 Vd 500 ml 𝐷𝑜 10 𝑚𝑔
Vd = 𝐶𝑜 = 0,0403 mg/𝑚𝑙 = 248,13 ml

Co 𝐷𝑜 10 𝑚𝑔 Ln C = Ln Co – kt
= 500 𝑚𝑙 = 20 µg/ml
𝑉𝑑
Ln C = 3,698 - 0,063t
Ln Co = 3,698
Co = 40,36 µg/ml
= 0,0403 mg/ml
Cl 18 ml/menit Cl = k x Vd
= 0,063/ menit x 248,13 ml
= 15,63 ml/menit
K 𝐶𝑙 18 𝑚𝑙/𝑚𝑒𝑛𝑖𝑡 Ln C = Ln Co – kt
= = 0,036 /
𝑉𝑑 500 𝑚𝑙
Ln C = 3,698 - 0,063t
menit
k = 0,063/ menit

t1/2
0,693 0,693 0,693 0,693
t1/2= = 0,036 = 19,25 menit t1/2= = 0,063 = 11 menit
𝑘 𝑘

AUC
𝐶𝑜 = 20 µg/ml 𝐶𝑜 = 40,36 µg/ml
𝐾 0,036/𝑚𝑒𝑛𝑖𝑡 𝐾 0,063/ menit
= 555,56 µg. menit/ml = 640,63 µg. menit/ml

 Pada alat Beaker Glass (Manual)

Parameter Teoritis Ekserimen
Do 10 ml x 1000 ppm 10 ml x 1000 ppm
10 ml x 1000 µg/ml 10 ml x 1000 µg/ml
 10 ml x 1 mg/ml 10 ml x 1 mg/ml
= 10 mg = 10 mg
Vd 300 ml
𝐷𝑜 10 𝑚𝑔
Vd = 𝐶𝑜 = 0,03828 = 261,23 ml
mg/𝑚𝑙

Co 𝐷𝑜 10 𝑚𝑔 Ln C = Ln Co – kt
= 300 𝑚𝑙 = 30 µg/ml
𝑉𝑑
Ln C = 3,645-0,045t
Ln Co = 3,645
Co = 38,28 µg/ml
= 0,03828 mg/ml
Cl 10 ml/menit Cl = k x Vd
= 0,045/ menit x 261,23ml
= 11,75 ml/menit
K 𝐶𝑙 10 𝑚𝑙/𝑚𝑒𝑛𝑖𝑡 Ln C = Ln Co – kt
= = 0,03 / menit
𝑉𝑑 300 𝑚𝑙
Ln C = 3,645-0,045t
K = 0,045 / menit
t1/2
0,693 0,693 0,693 0,693
t1/2= = = 23,1 menit t1/2= = 0,045 = 15,4 menit
𝑘 0,03 𝑘

AUC
𝐶𝑜 = 30 µg/ml 𝐶𝑜 38,28 µg/ml
𝐾 0,03/𝑚𝑒𝑛𝑖𝑡 =
𝐾 0,045/ menit
= 1000 µg. menit/ml
= 850,67 µg. menit/ml