BIOTEKNOLOGI
JURUSAN FARMASI
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS TADULAKO
PALU
2018
Materi :
“Enzymes: principles and biotechnological applications”
“Enzim: prinsip dan aplikasi bioteknologi”
Contoh :
Dalam reaksi ini, jika kita mulai dengan larutan 1 mol l- 1 glukosa dan menambahkan enzim,
maka setelah selesai kita akan memiliki campuran sekitar 0,5 mol l- 1 glukosa dan 0,5 mol
l −1 fruktosa. Ini adalah titik ekuilibrium dari reaksi khusus ini kita juga bisa memulai reaksi ini
dengan larutan fruktosa 1 mol −1 , dan itu akan berjalan ke arah yang berlawanan sampai titik
ekuilibrium yang sama telah tercapai.
Titik ekuilibrium untuk reaksi ini diekspresikan oleh konstanta kesetimbangan K eq sebagai
berikut:
setiap reaksi biokimia yang terjadi in vivo dalam sistem kehidupan tidak terjadi dalam isolasi,
tetapi sebagai bagian dari jalur metabolisme, yang membuatnya lebih sulit untuk
mengkonseptualisasikan hubungan antara reaktan dan reaksi. Reaksi in vivo tidak diizinkan
untuk melanjutkan ke posisi ekuilibrium mereka. Jika mereka melakukannya, reaksi pada
dasarnya akan berhenti (yaitu reaksi maju dan mundur akan menyeimbangkan satu sama lain),
dan tidak akan ada fluks bersih melalui jalur tersebut. Namun, dalam banyak jalur biokimia
kompleks beberapa langkah reaksi individu mendekati kesetimbangan, sedangkan yang lain jauh
dari kesetimbangan, yang terakhir (dikatalisis oleh enzim pengatur) yang memiliki kapasitas
terbesar untuk mengontrol keseluruhan fluks bahan melalui jalur tersebut.
Komplek ES merupakan posisi di mana substrat (S) terikat pada enzim (E) sedemikian rupa
sehingga reaksi (apa pun itu mungkin) dibuat lebih menguntungkan. Segera setelah reaksi terjadi,
molekul produk (P) terdisosiasi dari enzim, yang kemudian bebas berikatan dengan molekul
substrat lainnya. Pada beberapa titik selama proses ini substrat diubah menjadi bentuk peralihan
(sering disebut keadaan transisi) dan kemudian menjadi produk. enzim bertindak untuk
meningkatkan laju reaksi yang berbeda dari satu sistem ke sistem lainnya. Namun, prinsip
umumnya adalah bahwa dengan mengikat substrat ke enzim, reaksi yang melibatkan substrat
dibuat lebih menguntungkan dengan menurunkan energi aktivasi reaksi. Dalam hal energetik,
reaksi dapat berupa eksergonik (melepaskan energi) atau endergonic (mengkonsumsi
energi). Namun, bahkan dalam reaksi eksergonik, sejumlah kecil energi, yang disebut energi
aktivasi, diperlukan untuk memberikan reaksi 'kick start.'
enzim dianggap menurunkan energi aktivasi dari suatu sistem dengan membuatnya enerjik lebih
mudah bagi keadaan transisi untuk terbentuk. Dengan adanya katalis enzim, pembentukan
keadaan transisi secara enerji lebih menguntungkan (yaitu membutuhkan lebih sedikit energi
untuk 'kick start'), sehingga mempercepat laju reaksi yang akan dilanjutkan, tetapi tidak
mengubah tingkat energi secara mendasar baik reaktan atau produk.
Kinetika enzim
Kinetika enzim adalah studi tentang faktor-faktor yang menentukan kecepatan reaksi enzim-
katalis. Uji (pengukuran) aktivitas enzim dapat dilakukan baik dengan cara terputus atau
kontinyu. Metode diskontinyu melibatkan pencampuran substrat dan enzim bersama dan
mengukur produk yang terbentuk setelah jangka waktu tertentu, sehingga metode ini umumnya
mudah dan cepat dilakukan.
Percobaan kinetika enzim pertama kami dapat melibatkan pencampuran larutan substrat
(chromogen) dengan larutan buffer dan menambahkan enzim. Campuran ini kemudian
ditempatkan dalam spektrofotometer dan penampilan produk berwarna akan diukur. Ini akan
memungkinkan kita untuk mengikuti reaksi cepat yang, setelah beberapa detik atau menit,
mungkin mulai melambat. Sehingga hasil yang didapatkan :
Pembentukan produk dalam reaksi enzim-katalis, diplot terhadap waktu berjalan cepat
namun setelah beberapa menit mulai melambat karena substrat di dalam campuran
sedang digunakan, atau mungkin enzim tersebut tidak stabil dan mengalami denaturasi
selama percobaan, atau bisa jadi pH campuran berubah, karena banyak reaksi
mengkonsumsi atau melepaskan proton.
Hubungan antara konsentrasi enzim dan laju reaksi biasanya sederhana. tetapi jika
tambahkan 10% lebih banyak enzim, reaksi akan menjadi 10% lebih cepat, dan jika kita
menggandakan konsentrasi enzim, reaksi akan berjalan dua kali lebih cepat. Jadi ada
hubungan linear sederhana antara laju reaksi dan jumlah enzim yang tersedia untuk
mengkatalisis reaksi.
ketika konsentrasi substrat meningkat, laju reaksi meningkat secara signifikan. Namun,
karena konsentrasi substrat meningkat lebih lanjut, efek pada laju reaksi mulai menurun,
sampai tahap tercapai dimana peningkatan konsentrasi substrat memiliki sedikit pengaruh
lebih lanjut pada laju reaksi.
Pada tahun 1913, Leonor Michaelis dan Maud Menten pertama kali menunjukkan bahwa reaksi
berlangsung melalui pembentukan kompleks ES yang, setelah terbentuk, dapat memisahkan
(produktif) untuk melepaskan produk, atau mendisosiasi ke arah sebaliknya tanpa pembentukan
produk. Michaelis-Menten memiliki 2 asumsi penting. Asumsi pertama adalah bahwa kita
mempertimbangkan kecepatan awal reaksi ( v 0 ), ketika konsentrasi produk akan sangat kecil
(yaitu [S] ≫ [P]), sehingga kita dapat mengabaikan kemungkinan setiap produk kembali ke
substrat. Asumsi kedua adalah bahwa konsentrasi substrat sangat melebihi konsentrasi enzim
(yaitu [S] ≫ [E]). Sehingga Konstanta Michaelis Km dapat didefinisikan sebagai berikut:
Atau
Konstanta Michaelis telah ditentukan untuk banyak enzim yang umum digunakan, dan biasanya
dalam kisaran millimolar yang lebih rendah. Berbagai nilai khas dari konstanta Michaelis
enzim yang mengkatalisis reaksi yang sama, tetapi yang berasal dari organisme yang berbeda,
dapat memiliki nilai K m yang jauh berbeda. Selanjutnya, enzim dengan beberapa substrat dapat
memiliki nilai K m yang sangat berbeda untuk setiap substrat.
Nilai Km yang rendah menunjukkan bahwa enzim hanya membutuhkan sedikit substrat untuk
menjadi jenuh. Oleh karena itu kecepatan maksimum dicapai pada konsentrasi substrat yang
relatif rendah. Nilai Km yang tinggi menunjukkan kebutuhan konsentrasi substrat yang tinggi
untuk mencapai kecepatan reaksi maksimum. Jadi kita umumnya mengacu pada Km sebagai
ukuran afinitas enzim untuk substratnya — sebenarnya itu adalah ukuran terbalik, di
mana Km tinggi menunjukkan afinitas rendah, dan sebaliknya.
Nilai K m memberi tahu kita beberapa hal penting tentang enzim tertentu.
1. Enzim dengan nilai Km rendah yang relatif terhadap konsentrasi fisiologis substrat
mungkin akan selalu jenuh dengan substrat, dan oleh karena itu akan bertindak pada
tingkat yang konstan, terlepas dari variasi dalam konsentrasi substrat dalam rentang
fisiologis.
2. Enzim dengan nilai Km yang tinggi relatif terhadap konsentrasi fisiologis substrat tidak akan
jenuh dengan substrat, dan aktivitasnya akan bervariasi sesuai dengan konsentrasi
substrat, sehingga laju pembentukan produk akan tergantung pada ketersediaan substrat.
3. Jika suatu enzim bekerja pada beberapa substrat, substrat dengan nilai Km terendah
sering diasumsikan sebagai substrat 'alami' enzim, meskipun ini mungkin tidak benar
dalam semua kasus.
4. Jika dua enzim (dengan V maks sama ) di jalur metabolisme yang berbeda bersaing untuk
substrat yang sama, maka jika kita tahu nilai K m untuk dua enzim kita dapat
memprediksi aktivitas relatif dari dua jalur. Pada dasarnya jalur yang memiliki enzim
dengan nilai K m yang lebih rendah cenderung menjadi 'jalur yang disukai', dan lebih
banyak substrat akan mengalir melalui jalur tersebut pada sebagian besar
kondisi. Sebagai contoh, phosphofructokinase (PFK) adalah enzim yang mengkatalisis
langkah berkomitmen pertama dalam jalur glikolitik, yang menghasilkan energi dalam
bentuk ATP untuk sel, sedangkan glukosa-1-fosfat uridylyltransferase (GUT) adalah
enzim di awal jalur mengarah ke sintesis glikogen (molekul penyimpanan energi). Kedua
enzim menggunakan monofosfat heksosa sebagai substrat, tetapi Km PFK untuk
substratnya lebih rendah daripada GUT untuk substratnya. Dengan demikian pada
konsentrasi fosfat heksose seluler yang lebih rendah, PFK akan aktif dan GUT sebagian
besar akan tidak aktif. Pada konsentrasi fosfat heksose tinggi kedua jalur akan aktif. Ini
berarti bahwa sel hanya menyimpan glikogen pada saat banyak, dan selalu memberi
preferensi pada jalur produksi ATP, yang merupakan fungsi yang lebih penting.
Keuntungan ekonomi
Sumber hewan dan tumbuhan biasanya perlu diangkut ke fasilitas ekstraksi, sedangkan ketika
mikroorganisme digunakan fasilitas yang sama umumnya dapat digunakan untuk produksi dan
ekstraksi.Selain itu, enzim hewan dan tumbuhan yang penting secara komersial sering hanya
berada dalam satu organ atau jaringan, sehingga bahan yang tersisa pada dasarnya adalah produk
limbah, pembuangan yang diperlukan.
Keuntungan teknis
Enzim mikroba sering memiliki sifat yang membuat mereka lebih cocok untuk eksploitasi
komersial.Dibandingkan dengan enzim dari hewan dan tumbuhan, stabilitas enzim mikroba
biasanya tinggi.Misalnya, stabilitas suhu tinggi enzim dari mikroorganisme termofilik sering
berguna ketika proses harus beroperasi pada suhu tinggi (misalnya selama pengolahan pati).
Enzim industri
Saat ini, enzim digunakan dalam empat bidang perdagangan dan teknologi yang berbeda :
Imobilisasi enzim
Sistem enzim terimobilisasi, sebaliknya, 'memperbaiki' enzim sehingga dapat digunakan kembali
berkali-kali, yang memiliki dampak signifikan pada biaya produksi. Sebagai contoh yang sangat
sederhana, jika enzim dicampur dengan larutan hangat (tetapi tidak terlalu panas) agar dan ini
diperbolehkan untuk mengatur, enzim akan terperangkap
Keuntungan fisik dari kemudahan penggunaan kembali biokatalis terimobilisasi adalah salah satu
alasan utama mengapa sistem seperti itu disukai secara komersial. Namun, imobilisasi juga dapat
menghasilkan perubahan biokimia yang mengarah pada peningkatan stabilitas biokatalis, yang
dapat dimanifestasikan sebagai:
CSTR dan PBR memungkinkan enzim untuk digunakan kembali berkali-kali sebelum perlu
diganti.Sebagai contoh, dalam produksi sirup fruktosa tinggi, enzim isomerase glukosa
terimobilisasi biasanya akan digunakan terus menerus selama antara 2 dan 4 bulan, dan hanya
setelah waktu ini (ketika aktivitasnya akan turun sampai 25% dari tingkat semula) akan itu perlu
diganti
Teknik immobilisasi
Secara umum teknik-teknik ini dapat diklasifikasikan sebagai milik salah satu dari tiga kategori
Adsorpsi
Adsorpsi fisik enzim ke matriks pendukung adalah metode imobilisasi tertua. Pada awal
1916, JM Nelson dan Edward G. Griffin menggambarkan adsorpsi ragi invertase pada arang
aktif, dan penggunaan berikutnya dari persiapan ini untuk hidrolisis sukrosa. Selama
bertahun-tahun berbagai adsorben telah digunakan, termasuk selulosa, Sephadex, polistiren,
kaolinit, kolagen, alumina, silika gel dan kaca.Prosedur imobilisasi seperti itu sangat mudah
dilakukan, karena adsorben dan enzim hanya diaduk bersama untuk suatu waktu (biasanya
menit ke jam). Gaya pengikatan yang melumpuhkan katalis pada pendukung mungkin
melibatkan ikatan hidrogen, gaya van der Waals, interaksi ionik atau interaksi hidrofobik.
Ikatan kovalen
Imobilisasi enzim oleh ikatan kovalen ke polimer aktif adalah pendekatan yang banyak
digunakan karena, meskipun sering merupakan prosedur yang membosankan, ia mampu
menghasilkan enzim amobilisasi yang terikat erat pada dukungannya. Kisaran polymers dan
prosedur kopling kimia yang digunakan sangat besar. Seringkali lebih efektif untuk tidak
membangun kelompok reaktif ke dalam selulosa itu sendiri, melainkan menggunakan
'jembatan' kimia antara selulosa dan molekul enzim.
Jebakan.
Fitur penting dari teknik jebakan adalah bahwa enzim itu tidak melekat pada apa
pun. Akibatnya tidak ada masalah sterik yang terkait dengan metode kovalen atau adsorpsi
(yaitu kemungkinan pengikatan enzim sedemikian rupa sehingga situs aktifnya terhalang
oleh bagian dari matriks polimer pendukung).
Efek imobilisasi lebih sering karena matriks pendukung mengubah lingkungan mikro di sekitar
enzim dan / atau memperkenalkan kendala difusional yang mengubah aktivitas
katalis. Pertimbangkan, misalnya, imobilisasi enzim oleh adsorpsi ke dukungan polianionik
(bermuatan negatif) seperti selulosa.Jika substrat adalah kation (yaitu bermuatan positif), maka
akan tertarik ke dukungan dan dengan demikian ke enzim. Dalam hal ini enzim mungkin
menunjukkan aktivitas yang lebih tinggi, karena konsentrasi substrat di lingkungan mikronya
akan lebih tinggi daripada di fase curah sekitarnya. Kation lain juga akan tertarik, dan yang
penting ini akan mencakup ion H + . Dengan demikian lingkungan mikro juga akan diperkaya
dengan ion H + , sehingga pH yang mengelilingi enzim akan lebih rendah daripada pH fase
curah. Akibatnya enzim juga akan menunjukkan profil pH yang diubah dibandingkan dengan
yang dari pasangannya yang dapat larut. Selain itu, matriks imobilisasi mungkin bertindak
sebagai penghalang terhadap difusi substrat, produk dan molekul lainnya. Sebagai contoh, jika
pemuatan enzim yang tinggi dimasukkan ke dalam partikel gel dan ini kemudian dicelupkan
dalam larutan substrat, substrat akan berdifusi ke gel dan dengan cepat diubah menjadi
produk. Molekul enzim yang terperangkap lebih dalam di dalam partikel gel mungkin karena itu
tidak aktif hanya karena mereka tidak menerima substrat untuk bekerja (yaitu semua substrat
diubah menjadi produk di lapisan luar partikel).
Hidrolisis laktosa
Dalam industri susu, produksi 1 kg keju membutuhkan sekitar 10 liter susu, dan
menghasilkan sekitar 9 liter whey sebagai produk limbah. Whey adalah cairan
kekuningan yang mengandung 6% bahan kering, dimana hampir 80% adalah
laktosa. Enzim laktase (β-galactosidase) dapat digunakan untuk memecah laktosa
menjadi monosakarida penyusunnya, yaitu glukosa dan galaktosa, yang lebih larut
daripada laktosa, dan memiliki potensi penggunaan sebagai sumber karbon dalam
fermentasi mikroba, dan juga dapat digunakan sebagai kalori pemanis.
Produksi penicillins semi-sintetis
Hasil tinggi penisilin alami diperoleh dari spesies jamur Penicilliummelalui proses
fermentasi. Namun, selama bertahun-tahun banyak patogen mikroba telah menjadi
resisten terhadap penisilin alami, dan sekarang hanya dapat diobati dengan turunan semi-
sintetis. Ini dihasilkan melalui pembelahan penisilin alami, sehingga rantai samping G
atau V dikeluarkan dari inti asam 6-aminopenicillanic (6-APA). Setelah itu, dengan
keterikatan rantai samping yang berbeda secara kimia, produk penisilin semi-sintetis
(misalnya ampisilin, amoksisilin) dapat dibentuk. Selain itu, 6-APA dapat menjalani
ekspansi cincin kimia untuk menghasilkan 7-aminodesacetoxycephalosporanic acid (7-
ADCA), yang kemudian dapat digunakan untuk menghasilkan sejumlah antibiotik
cephalosporin yang penting (misalnya cephalexin, cephradine, cefadroxil).
Perkembangan penisilin G asilase terimobilisasi kembali ke penelitian yang dilakukan
969 oleh University College London dan Beecham Pharmaceuticals di Inggris Penicillin
G asilase adalah enzim intraseluler yang ditemukan di E. coli dan berbagai bakteri lain,
dan proses Beecham melumpuhkan E.enzim coli pada dukungan pertukaran ion
DEAE. Kemudian sistem menggunakan ikatan kovalen permanen untuk menempelkan
enzim ke pendukung
Biosensor
Sebagian besar pengembangan teknologi biosensor telah dimotivasi oleh kebutuhan untuk
mengukur kadar glukosa darah. Pada dasarnya elektron dikeluarkan dari molekul glukosa dan
dilewatkan melalui enzim ke mediator ferrocene, yang kemudian menyumbangkannya ke
permukaan elektroda kerja, menghasilkan pembangkitan arus listrik yang berbanding lurus
dengan laju oksidasi glukosa, dan dengan demikian sebanding dengan konsentrasi glukosa dalam
sampel.
Medisense, yang satu-satunya produknya adalah meteran glukosa darahnya, dibeli oleh Abbott
Diagnostics pada tahun 1996, dan perangkat bermerek Abbott terus menggunakan dan
mengembangkan teknologi ini untuk beberapa waktu.
Pada tahun 1999, Therasense memasarkan meteran glukosa yang mewakili teknologi
penginderaan generasi berikutnya, dan mengintegrasikan enzim bahkan lebih dekat dengan
elektroda. Awalnya dikembangkan oleh Adam Heller di University of Texas pada 1990-an,
elektroda-elektroda kabel-enzim tidak bergantung pada mediator yang dapat larut seperti
ferrocene yang digunakan dalam perangkat-perangkat Medisense. Sebagai gantinya, enzim ini
diimobilisasikan dalam hidrogel polivinil imidazol berbasis osmium di mana elektron dilewatkan
dari enzim ke elektroda oleh serangkaian pusat osmium elektroaktif tetap yang mengangkut
elektron dalam proses yang disebut 'elektron hopping.'
Materi :
“Lactic Acid Bacteria and Bifidobacteria with Potential to Design Natural Biofunctional
Health-Promoting Dairy Foods”
“Bakteri Asam Laktat dan Bifidobacteria dengan Potensi Desain Biofungsional Alami
Makanan Susu Mempromosikan Kesehatan”
Sejumlah sumber komersial menjual formulasi sintetis dari zat bioaktif untuk digunakan sebagai
suplemen diet untuk meningkatkan minat konsumen dalam gaya hidup sehat dan produk alami
yang mempromosikan kesehatan adalah kekuatan pendorong utama untuk meningkatnya
permintaan global makanan olahan biofunctional.. Namun, pengayaan bioaktif makanan yang
berorientasi kesehatan oleh mikroorganisme yang terjadi secara alami selama fermentasi susu
adalah meningkatnya permintaan. Saat berpartisipasi dalam fermentasi susu, bakteri asam laktat
dapat dieksploitasi secara in situ sebagai sumber mikroba untuk memperkaya produk susu alami
dengan berbagai komponen bioaktif yang dapat mencakup berbagai aspek kesehatan. Beberapa
metabolit bioaktif ini penting secara industri dan ekonomi, karena mereka diklaim melakukan
beragam kegiatan promosi kesehatan pada konsumen, seperti anti-hipertensi, anti-inflamasi, dan
anti-diabetes, anti-oksidatif, kekebalan-modulatory, anti -kolesterolemia, atau modulasi
mikrobioma. Ulasan ini bertujuan membahas potensi bakteri yang mendukung kesehatan ini
sebagai kultur awal atau tambahan untuk elaborasi makanan susu dengan spektrum luas dari sifat
fungsional baru dan nilai tambah.
MAKANAN BIOFUNCTIONAL
Makanan fungsional dapat digambarkan sebagai suatu makanan biasa yang memiliki komponen
atau bahan yang ditambahkan untuk memberikan manfaat kesehatan tertentu, selain efek nutrisi
murni. Idealnya, makanan fungsional mengacu pada tradisional yang ada produk makanan yang
dimaksudkan untuk dikonsumsi sebagai bagian dari diet normal dan telah ditunjukkan
menambahkan manfaat fisiologis (Siro et al., 2008). Karena itu, itu tidak bisa dalam bentuk pil
atau kapsul. Konsep makanan biofunctional umumnya digunakan ketika ini biologis yang
diinginkan, medis, atau efek fisiologis yang diberikan oleh mikroorganisme (Gobbetti et al.,
2010). Kesehatan manfaat dari mikroorganisme ini dapat diberikan secara langsung melalui
interaksi mikroorganisme hidup yang dicerna dengan host (efek probiotik), atau secara tidak
langsung dengan menelan mikroba metabolit disintesis selama fermentasi (efek bioaktif)
(Stanton et al., 2005; Gobbetti et al., 2010; Joshi, 2015).
Makanan Probiotik
Bakteri asam laktat (LAB) telah digunakan untuk memfermentasi makanan setidaknya
4000 tahun (Rotar et al., 2007). Meskipun probiotik konsep telah berkembang baru-baru ini, kita
telah secara tidak sadar memakan mikroba yang menguntungkan dengan makanan fermentasi
tradisional sejak zaman kuno. Makanan fermentasi adalah pembawa utama memberikan
probiotik (Gambar 1). Diantaranya, produk susu (dalam susu dan yoghurt fermentasi tertentu)
adalah yang paling banyak efisien dan banyak digunakan (Giraffa, 2012). Keju adalah produk
susu yang memiliki potensi yang baik untuk penggabungan probiotik budaya karena karakteristik
kimia dan fisiknya yang spesifik dibandingkan dengan susu fermentasi (nilai pH yang lebih
tinggi dan titrable yang lebih rendah keasaman, kapasitas buffering yang lebih tinggi, kandungan
lemak yang lebih besar, lebih tinggi ketersediaan nutrisi, kandungan oksigen yang lebih rendah,
dan tekstur yang lebih padat). Pemanfaatan probiotik telah dioptimalkan dalam beberapa varietas
keju seperti Cheddar, Gouda, Camembert, tipe cottage, keju putih, dan keju tradisional, antara
lain (Araujo et al., 2012; Giraffa, 2012; Martinovic et al., 2016; Oh et al., 2016).
Probiotik didefinisikan sebagai 'mikro organisme hidup, yang kapan dikonsumsi dalam
jumlah yang cukup memberi manfaat kesehatan host '(FAO / WHO, 2001). Namun, mengenai
probiotik makanan, beberapa pertimbangan adalah sangat penting. Pertama, tingkat efektif
probiotik hidup dalam makanan yang sesuai matriks pada saat menelan diperlukan. Dalam hal
ini, itu dosis efektif minimum yang mempengaruhi lingkungan usus dan memberikan efek
menguntungkan pada kesehatan manusia dianggap menjadi 106–109 sel mikroba hidup setiap
hari, meskipun ini tergantung pada strain dan bahan makanan tertentu (Williams, 2010; Karimi et
al., 2012; Watson dan Preedy, 2015). Karena probiotik menunjukkan manfaat efek kesehatan
pada tuan rumah sekali dikonsumsi, prasyarat lain untuk strain bakteri yang disebut probiotik
adalah kemampuan untuk bertahan dan berkoloni (setidaknya secara sementara) gastrointestinal
tract (GIT), yang sebagian dibantu oleh kapasitas buffering dari matriks makanan. Dalam
beberapa kasus tertentu, viabilitas bakteri mungkin tidak benar-benar diperlukan. Sebagai
contoh, tidak aktif dan sel LG mati rhamnosus dapat mempertahankan imunologi dan efek
promosi kesehatan (Ghadimi et al., 2008; Lopez et al., 2008).
Vitamin
Ada 13 vitamin yang harus diperoleh secara eksogen ketidakmampuan manusia untuk
mensintesis mereka; dengan demikian mereka nutrisi penting dalam diet manusia, dan meskipun
kecil jumlah, kebutuhan harian diperlukan untuk mencegah kekurangan. Meskipun sebagian
besar vitamin hadir dalam berbagai makanan, manusia Kekurangan vitamin masih terjadi di
banyak negara, terutama karena malnutrisi, bukan hanya karena asupan makanan yang tidak
cukup tetapi juga karena diet yang tidak seimbang (LeBlanc et al., 2011).
Folat (vitamin B9) terlibat dalam beberapa proses vital dan kekurangannya umumnya
terkait dengan cacat tabung saraf, pasti bentuk kanker, kinerja kognitif yang buruk dan jantung
koroner penyakit Meskipun vitamin secara luas hadir dalam makanan, prevalensi defisiensi folat
-terutama di kalangan wanita anak menanggung usia - adalah kekhawatiran yang berkembang
dan dengan demikian fortifikasi folat program telah dilaksanakan di berbagai negara (Divya dan
Nampoothiri, 2015).
Kekurangan cobalamin (vitamin B12) bisa umum, terutama pada vegetarian yang
menghindari konsumsi protein hewani dan menggunakan susu kedelai sebagai pengganti susu
perah (Gu et al., 2015). Hewan, tumbuhan dan jamur tidak mampu menghasilkan ini vitamin,
dan karenanya, secara eksklusif diproduksi oleh mikroorganisme (LeBlanc et al., 2011). Telah
dibuktikan bahwa cobalamin dapat disintesis oleh beberapa bakteri seperti L. reuteri ZJ03,
Propionibacterium freudenreichii, B. animalis Bb12 dalam kedelai-yogurt, susu kefir dan
fermentasi, masing-masing (Van Wyk et al., 2011; Patel et al., 2013, Gu et al., 2015; Moslemi et
al., 2016).
Defisiensi Biotin (vitamin B7) dapat disebabkan oleh tidak adekuat asupan makanan
atau beberapa kelainan genetik bawaan yang memengaruhi metabolisme. Defisiensi subklinis
dapat menyebabkan gejala ringan, seperti rambut menipis atau ruam kulit biasanya di wajah.
Biotin bisa disintesis oleh beberapa LAB dalam produk susu, misalnya, L. Helveticus MTCC
5463 meningkatkan kandungan biotin dalam susu fermentasi (Patel et al., 2013). Beberapa
propionibakteria juga dapat menghasilkan biotin (Hugenholtz et al., 2002).
Vitamin K merupakan promotor tulang dan tulang yang penting kesehatan jantung. Ini
telah dikaitkan dengan penghambatan kalsifikasi arteri dan kaku, dan pengurangan risiko
vaskular. Vitamin ini hampir tidak ada di junk food,
dengan sedikit dikonsumsi bahkan dalam diet Barat yang sehat (Maresz, 2015). Kekurangannya
telah terlibat dalam beberapa penyakit klinis seperti perdarahan intrakranial pada bayi baru lahir
bayi dan kemungkinan patah tulang akibat osteoporosis (LeBlanc et al., 2011). Vitamin K terjadi
dalam dua bentuk: pertama,
phylloquinone (vitamin K1), yang hadir di tanaman hijau, dan kedua, menaquinone (vitamin
K2), yang diproduksi oleh beberapa bakteri usus (LeBlanc et al., 2011). Menaquinone dapat
disintesis oleh beberapa spesies LAB (terutama Lactococcus lactis) umumnya digunakan dalam
fermentasi industri keju, buttermilk, krim asam, keju cottage, dan kefir (Walther et al., 2013).
Enzim
Bakteri asam laktat yang terkait dengan fermentasi susu memiliki enzim yang dapat
diproduksi in situ selama fermentasi makanan olahan susu dan memiliki potensi bioaktif pada
konsumen. Contohnya adalah enzim hidrolitik yang dapat berpotensi efek sinergis pada
pencernaan dan meringankan gejala malabsorpsi usus (Patel et al., 2013). Seorang yang terkenal
Contohnya adalah aktivitas β-galactosidase, yang dapat dicapai degradasi laktosa dan dengan
demikian meningkatkan kesehatan dan mengurangi gejala konsumen intoleransi laktosa. Yogurt
dan lainnya kultur starter konvensional dan bakteri probiotik difermentasi dan produk susu yang
tidak difermentasi meningkatkan pencernaan laktosa dan meringankan gejala intoleransi pada
laktosa malabsorbers. Ini efek menguntungkan adalah karena mikroba β-galactosidase (de Vrese)
et al., 2001).
Materi :
“Role of Recombinant DNA Technology to Improve Life”
“Peran Teknologi DNA Rekombinan untuk Meningkatkan Kehidupan”
Teknologi DNA rekombinan memainkan peran penting dalam meningkatkan kondisi kesehatan
dengan mengembangkan vaksin dan obat-obatan baru. Strategi pengobatan juga meningkat
dengan mengembangkan perangkat diagnostik, perangkat pemantauan, dan pendekatan
terapeutik baru. Sintesis insulin manusia sintetis dan erythropoietin oleh bakteri yang
dimodifikasi secara genetik dan produksi jenis baru tikus muta untuk tujuan penelitian adalah
beberapa contoh utama rekayasa genetika di bidang kesehatan. Demikian pula, strategi rekayasa
genetika telah digunakan untuk mengatasi masalah lingkungan seperti mengubah limbah menjadi
biofuel dan bioetanol, membersihkan tumpahan minyak, karbon, dan limbah beracun lainnya,
dan mendeteksi arsenik dan kontaminan lainnya dalam air minum. Mikroba yang termodifikasi
secara genetik juga efektif digunakan dalam biomining dan bioremediasi
Teknologi DNA rekombinan terdiri dari mengubah materi genetik di luar suatu organisme untuk
mendapatkan karakteristik yang disempurnakan dan diinginkan dalam organisme hidup atau
sebagai produk mereka. Teknologi ini melibatkan penyisipan fragmen-fragmen DNA dari
avarietyofsources, yang memiliki vektor-vektor yang sesuai. Manipulasi dalam genom
organisme dilakukan baik melalui pengenalan satu atau beberapa gen baru dan elemen pengatur
atau dengan mengurangi atau memblokir ekspresi gen endogen melalui gen dan elemen yang
direkombinankan. Pembelahan enzimatik diterapkan untuk mendapatkan fragmen DNA yang
berbeda menggunakan restriction endo-nucleases untuk urutan DNA target spesifik yang diikuti
oleh aktivitas DNA ligase yang menggabungkan fragmen untuk memperbaiki gen yang
diinginkan dalam vektor. Vektor ini kemudian dimasukkan ke dalam organisme inang, yang
ditumbuhkan untuk menghasilkan banyak salinan fragmen DNA yang dimasukka, dan akhirnya
klon yang mengandung fragmen DNA yang relevan dipilih dan dipanen.
Pendekatan cepat ditawarkan oleh teknologi DNA rekombinan untuk meneliti ekspresi genetika
dari mutasi yang diperkenalkan ke gen eukariot melalui penyisipan gen insulin kloning di dalam
fragmen virus simian. Dengan cara yang sama, pertumbuhan tumor dihambat oleh vektor
adenoviral yang mengkodekan endostain bentuk sekresi manusia melalui efek antiangiogenic.
Efek antiangiogenik dapat ditingkatkan dengan dl1520 melalui penyelamatan replikasi Ad-Endo.
Gangguan gen target telah digunakan untuk menghasilkan turunan antitumor pada host lain yang
secara struktural mirip untuk jalur produksi.
Perkembangan Saat Ini
Teknologi DNA rekombinan adalah bidang yang tumbuh cepat dan para peneliti di seluruh dunia
sedang mengembangkan pendekatan, perangkat, dan produk rekayasa baru untuk aplikasi di
berbagai sektor termasuk pertanian, kesehatan, dan lingkungan. Sebagai contoh, Lispro
(Humalog), dibandingkan dengan insulin manusia biasa, adalah insulin rekombinan bekerja lebih
efektif dan cepat. Demikian pula, Epoetin alfa adalah protein rekombinan baru dan dikenali
dengan baik dan dapat secara efektif digunakan dalam menyembuhkan anemia. Penemuan HGH
rekombinan menjadi salah satu perkembangan dalam merawat anak-anak yang kekurangan
kemampuan memproduksi hGH dalam jumlah yang dibutuhkan.
Makanan dan Minuman. Teknologi DNA rekombinan memiliki kegunaan utama yang
memungkinkan pembuatan enzim baru yang sesuai dalam kondisi untuk pengolahan makanan
tertentu. Beberapa enzim penting termasuk lipase dan amilase tersedia untuk produksi spesifik
karena peran dan aplikasi khusus mereka dalam industri makanan. Strain produksi mikroba
adalah pencapaian besar lainnya yang menjadi mungkin dengan bantuan teknologi DNA
rekombinan. Sejumlah strain mikroba telah dikembangkan yang menghasilkan enzim melalui
rekayasa khusus untuk produksi protease. Jenis jamur tertentu telah dimodifikasi sehingga
kemampuan mereka menghasilkan bahan beracun dapat dikurangi. Lysozymes adalah agen yang
efektif untuk menyingkirkan bakteri dalam industri makanan. Mereka mencegah kolonisasi
organisme mikroba. Ini adalah agen yang cocok untuk makanan termasuk buah-buahan, sayuran,
keju, dan daging karena meningkatkan umur simpan bahan.
Investigasi Metabolisme Obat. Sistem kompleks enzim metabolisme obat yang terlibat dalam
metabolisme obat sangat penting untuk diselidiki untuk khasiat dan efek obat yang tepat.
Pendekatan DNA rekombinan baru-baru ini telah berkontribusi perannya melalui ekspresi
heterolog, di mana informasi genetik enzim dinyatakan secara in vitro atau in vivo, melalui
transfer gen
Teknologi DNA rekombinan sebagai alat terapi gen adalah sumber pencegahan dan
penyembuhan terhadap gangguan genetik yang didapat secara besar. Pengembangan vaksin
DNA adalah pendekatan baru untuk memberikan kekebalan terhadap beberapa penyakit. Dalam
proses ini, DNA yang dikirim mengandung gen yang mengkode protein patogen. Terapi gen
manusia sebagian besar bertujuan untuk mengobati kanker. Penelitian telah difokuskan terutama
pada kemanjuran transfeksi tinggi terkait dengan perancangan sistem pengiriman gen. Transfeksi
untuk terapi gen kanker dengan toksisitas minimal, seperti dalam kasus kanker otak, kanker
payudara, kanker paru-paru, dan kanker prostat, masih dalam penyelidikan. Juga transplantasi
ginjal, penyakit Gaucher, hemofilia, sindrom Alport, fibrosis ginjal, dan beberapa penyakit
lainnya sedang dipertimbangkan untuk terapi gen