(Biodiesel)

Sebagai permintaan biofuel untuk transportasi meningkat, hal ini diperlukan untuk mengembangkan
teknologi yang akan memungkinkan untuk produksi berbiaya rendah biodiesel. Biodiesel konvensional
terutama diproduksi dari minyak sayur oleh kimia transesterifikasi. Produksi ini, namun, memiliki relatif
rendah Tanah-hasil dan bersaing untuk lahan pertanian yang dapat digunakan untuk produksi pangan.
Oleh karena itu, ada minat yang meningkat dalam mengembangkan proses fermentasi mikroba untuk
produksi Biodiesel karena hal ini akan memungkinkan untuk menggunakan berbagai bahan bahan
mentah, termasuk gula tebu, jagung, dan biomassa. Produksi biodiesel oleh fermentasi mikroba dapat
dibagi menjadi dua berbeda pendekatan, produksi biodiesel tidak langsung (1) dari mikroba yang
mengandung minyak oleh secara in vitro transesterifikasi, dan (2) produksi biodiesel langsung dari
pabrik-pabrik didesain ulang sel. Karya ini ulasan baik mikroba pendekatan untuk produksi biodiesel
terbarukan dan mengevaluasi tantangan yang ada dalam dua strategi. Karena pertumbuhan penduduk
dan industrialisasi, permintaan energi meningkat pesat dalam hari tahun, dan konsumsi energi dunia
diproyeksikan meningkat sebesar 49% dari 2007 untuk 2035
(http://www.eia.doe.gov/oiaf/ieo/highlights.html). Namun, penggunaan bahan bakar fosil, saat ini
primer sumber energi, kini secara luas diakui untuk menjadi bahan bakar fosil tidak berkelanjutan
mungkin kelelahan di masa yang akan datang [1]. Selain itu, emisi bahan bakar fosil yang diyakini
merupakan kontributor utama pemanasan global [2]. Akibatnya, keprihatinan di seluruh dunia telah
dibangkitkan untuk mencari berkelanjutan, alternatif dan terbarukan bahan bakar yang memiliki jejak
lingkungan lebih rendah dan yang dapat memenuhi kebutuhan energi di masa depan [1, 3, 4].
Pengembangan biofuel yang berbeda sebagai alternatif, bahan bakar berkelanjutan diharapkan untuk
meringankan saat ini krisis energi [1, 5]. Saat ini, yang paling biofuel yang digunakan adalah biodiesel dan
bioethanol. Namun, bioethanol tidak dipandang sebagai ideal biofuel
masa depan karena energi densitas rendah dan ketidakcocokan dengan infrastruktur bahan bakar yang
ada [6, 7]. Ada banyak menarik bagi memperkenalkan biofuel lainnya, misalnya butanol [7, 8], yang
dapat mudah dicampur ke dalam bensin, non-korosif dan karenanya dapat dilaksanakan dalam bahan
bakar saat ini infrastruktur. Ada juga banyak minat Biodiesel (Ester asam lemak), yang cocok dengan
mudah ke dalam infrastruktur yang ada dan telah benar-benar diuji sebagai bahan bakar alternatif di
pasar. Sebagai bahan bakar, biodiesel mirip dengan petro-diesel di pembakaran properti, memungkinkan
untuk bekerja dengan baik dalam konvensional mesin diesel dan membuatnya kompatibel dengan
infrastruktur bahan bakar yang ada [9]. Selain itu, biodiesel lebih baik daripada petro-diesel di beberapa
karakteristik, seperti ramah lingkungan, renewability, mengurangi emisi, pembakaran lebih tinggi
efisiensi, meningkatkan pelumasan, keselamatan lebih tinggi, dll. [10]. Berdasarkan tuntutan-tuntutan
ini, total dunia produksi biodiesel telah terus meningkat, dengan peningkatan 16-fold selama 10 tahun,
dan diperkirakan berjumlah sekitar 4 milyar gallon pada tahun 2009, terutama diproduksi di Uni Eropa
dan Amerika Serikat [11]. Saat ini, biodiesel adalah terutama dihasilkan dari tanaman minyak oleh
transesterifikasi dengan alkohol (etanol atau metanol) dalam kehadiran basis, asam atau katalis enzim
(Rajah-rajah 1A dan 1D). Minyak nabati terutama terdiri dari triacylglycerol (TAG), yaitu tiga asam lemak
rantai terhubung ke tulang punggung gliserol. Biaya alasan metanol adalah reagen paling sering
digunakan untuk transesterifikasi dalam rasio molar 1:1. Minyak tanaman yang account untuk sebagian
besar persen dari produksi keseluruhan biaya [12]. Saat ini, tinggi
biaya dan ketersediaan terbatas minyak nabati telah menjadi masalah meningkat untuk skala besar
komersial kelangsungan hidup produksi biodiesel, dan cara yang berbeda telah dieksplorasi untuk
mengatasi masalah ini. Untuk contoh, mikroba minyak, yang dimodifikasi secara genetik tanaman,
soapstocks, Minyak jelantah dan lemak hewan bisa bisa dijelajahi sebagai alternatif baku untuk
menurunkan biaya biodiesel [13 – 18]. Selain itu, direkayasa mikroba dapat digunakan untuk
menghasilkan Ester lemak (biodiesel) langsung dari gula sederhana, menghindari menggunakan bahan
baku mahal [17-19]. Produksi biodiesel yang menggunakan mikroorganisme telah dianggap sebagai
solusi alternatif yang menjanjikan untuk produksi biodiesel. Pertama, ini adalah wellknown mikroba yang
banyak, seperti Mikroalgae, bakteri, jamur atau ragi, dapat mengumpulkan intraseluler lipid (terutama
TAG) untuk sebagian besar persen dari mereka biomassa (Tabel 1). Minyak ini berasal dari mengandung
minyak mikroba bisa mewakili menjanjikan mentah bahan untuk produksi biodiesel melalui
transesterifikasi sejalan dengan proses nabati (Rajah-rajah 1B dan 1D) [14, 17, 20]. Secara khusus,
menggunakan cepat tumbuh mikroba itu dimungkinkan untuk menggunakan yang lebih luas berbagai
bahan baku seperti tebu yang memiliki hasil substansial lebih besar per hektar dibandingkan dengan
lobak, dan karena itu memungkinkan untuk produksi biodiesel dengan sedikit penggunaan lahan yang
subur. Di sisi lain, dengan bantuan metabolic teknik dan sintetis biologi, bunga telah tumbuh untuk
insinyur dipelajari mikroba seperti Escherichia coli dan Saccharomyces cerevisiae ke pabrik biodiesel sel
dengan memperkenalkan ester sintesis jalur, yang dapat mengakibatkan memproduksi langsung dari
asam lemak etil Ester (FAEEs) oleh langsung esterifying etanol dengan gugus Asil dari CoA thioesters
asam lemak (1 c rajah-rajah, 1E dan Fig. 2) [19, 21, 22]. Pabrik-pabrik direkayasa sel bisa menghasilkan
biodiesel langsung dari murah dan luas tersedia gula seperti glukosa atau berlimpah lignocellulosic
biomassa mengelakkan perlunya proses transesterifikasi, yang memerlukan kompleks pretreatment
melibatkan isolasi dan pemurnian. Jelas, termasuk transformasi seluruh proses dalam satu langkah akan
yang paling nyaman dan cara efektif untuk skala besar produksi biodiesel. Dalam berikut, kita akan
meninjau dua berbeda pendekatan untuk produksi biodiesel oleh mikroba fermentasi.

Produksi biodiesel langsung dari mikroba mengandung minyak

Mengandung minyak mikroorganisme bisa mewakili baru lipid bahan baku untuk produksi biodiesel.
Minyak dapat diekstraksi dari cepat pertumbuhan mikroorganisme dan transesterified dengan alkohol
rantai pendek, menghasilkan kualitas tinggi biodiesel Ester yang sesuai dengan standar yang saat ini ada
[36, 37]. Selain itu, berbagai macam mikroba lipid membuatnya layak untuk memvariasikan properti
biodiesel sehingga menunjukkan kombinasi sifat bahan bakar yang ditingkatkan seperti nomor cetane
lebih tinggi dan Penghangat Ruangan nilai dan menurunkan kekentalan [38, 39]. Ditambahkan ke
keunggulan ini, menggunakan mengandung minyak mikroba untuk produksi Biodiesel akan memiliki
konsekuensi kurang pada produksi makanan atau produk berasal dari terrestrial tanaman.
2.1 Mikroalgae untuk produksi biodiesel
Mikroalgae adalah fototrof-mikroorganisme yang dapat mengkonversi karbon dioksida langsung ke lipid
yang lebih lanjut dapat digunakan untuk produksi biofuel, terutama untuk biodiesel [1, 23, 40, 41], dan
yang biomassa dapat difermentasi menghasilkan bahan bakar lainnya [1,41-43]. Mikroalgae tampaknya
menjadi salah satu yang paling menjanjikan untuk menyediakan sejumlah besar lipid yang dapat lebih
lanjut diarahkan untuk mensintesis terbarukan biodiesel untuk menggantikan fosil diesel, karena hasil
minyak yang sangat tinggi dan luas tanah sangat rendah diperlukan untuk budidaya (3.4 kali lebih sedikit
tanah diperlukan dalam perbandingan dengan tumbuh jagung). Selain itu, mereka memiliki kandungan
minyak yang lebih tinggi daripada macroalgae [44], mereka tumbuh sangat cepat dan beberapa spesies
yang sangat kaya minyak. Mereka bisa ganda mereka biomassa di 3,5 h selama fase pertumbuhan
eksponensial dalam batch budaya, dan waktu menggandakan mereka umum di sekitar 24 h. Kandungan
minyak Mikroalgae biasanya berkisar antara 20-60% berat biomassa kering (Tabel 1); dan beberapa
genera seperti Botryococcus, Nannochloropsis dan Schizochytrium dapat dekat 80%. Mikroalgae dapat
menghasilkan banyak berbeda jenis lipid, hidrokarbon dan minyak kompleks, tergantung spesies [45].
Lipid dengan panjang karbon rantai memuaskan untuk produksi biodiesel. Minyak yang diproduksi di
Mikroalgae yang terutama asam lemak tak jenuh: palmitoleic (16:1), oleat (18:1), (18:2) linoleic dan
linolenic asam (18:3). Jenuh asam lemak seperti palmitic (16:0) dan stearic asam (18:0) juga hadir dalam
konsentrasi rendah [14]. pada spesies tertentu, asam lemak tak jenuh ganda dapat disintesis [46], tetapi
biodiesel diproduksi dari senyawa ini mengoksidasi lebih cepat daripada minyak diesel, membentuk
sedimen yang mempengaruhi pembakaran mesin. Semakin cepat microalga tumbuh dan semakin tinggi
minyak konten, semakin tinggi biodiesel produktivitas akan. Mikroalgae dapat berisi jumlah tinggi lipid,
tetapi dibandingkan dengan mikroorganisme lainnya mengandung minyak mereka memerlukan kawasan
luas tanah karena mereka fotosintesis aktivitas [14]. Selain itu, karena mereka persyaratan sinar
matahari, variasi harian dan musiman mempengaruhi pertumbuhan mereka. Selain itu, mereka perlu
rendah kepadatan budaya, yang berarti air dalam jumlah yang besar diperlukan, meningkatkan produksi
biaya [27].
2.2 produksi biodiesel bakteri
Bakteri dapat juga digunakan sebagai sumber untuk lipid produksi untuk akhirnya mendapatkan Ester
yang dapat membentuk biodiesel. Bakteri paling menghasilkan terutama kompleks lipid, hanya beberapa
spesies dapat menghasilkan lipid yang dapat digunakan sebagai prekursor biodiesel [47]. Utama sumber
lipid dalam bakteri khusus ini adalah tag, dari yang hanya beberapa genera aktinomycetes kelas dapat
mengumpulkan tingkat tinggi, seperti dalam kasus Acinetobacter [48], Mycobacterium [49] dan
Streptomyces [50]. Tag ini terakumulasi dalam sel. terutama ketika bakteri tumbuh pada karbon
sederhana sumber kondisi stres [29]. Memiliki telah ditemukan bahwa strain Rhodococcus opacus dapat
mengumpulkan hingga 87% (dari beratnya kering) [51]; TAG tubuh dari bakteri ini terutama terdiri dari
Tag (87%), diacylglycerols (~ 5%), asam lemak bebas (~ 5%), fosfolipid (1,2%) dan protein (0,8%) [52]. the
Tag dibentuk terutama oleh Heksadekanoik asam (16:0) dan asam octadecenoic (18:1) [53]. Genus
bakteri lainnya, seperti Gordonia sp. dapat mengumpulkan hingga 72% TAG dengan komposisi yang
dominan docosanoic asam (22:0) dan hexanoic asam (6:0) [30]. Genera seperti Streptomyces
mensintesis Tag, tetapi hanya dalam ketiadaan nitrogen sumber [50]. Dengan advance sistem biologi dan
metabolic rekayasa, ada kemungkinan untuk insinyur host produksi umum seperti E. coli untuk
meningkatkan produksi asam lemak mereka [54]. Metabolik dimodifikasi E. coli dapat menghasilkan
lemak asam di 2.5 g/L dengan mengetuk gen fadD (penyandian sintetase lemak Asil-CoA) dan
overexpressing carboxylase asetil-KoA dan thioesterase. Upaya ini membuka pintu untuk memanfaatkan
beberapa metabolisme alat dalam membangun efisien sel yang memproduksi asam lemak dari
nonoleaginous mikroba. Meskipun bakteri terakumulasi konsentrasi rendah lipid (dibandingkan dengan
Mikroalgae, misalnya), mereka memiliki keuntungan lain terkait untuk produksi biodiesel: mereka
memiliki yang lebih tinggi tingkat pertumbuhan tertentu (biasanya mencapai tinggi tingkat 12-24 h) dan
mereka mudah untuk menumbuhkan.
2.3 jamur untuk produksi biodiesel
Jamur juga dapat digunakan sebagai sumber lemak untuk biodiesel produksi. Beberapa spesies dapat
menghasilkan tinggi konsentrasi lipid seperti Humicola lanuginose (75%) [14]. di lain jamur tingkat yang
berbeda lipid dapat diperoleh: telah dilaporkan bahwa Aspergillus oryzae dapat mengumpulkan lipid
hingga 57% berat kering sel [14], dan Mucor rouxii lipid isi 30% ditemukan, antara lipid ini salah satu
yang hadir pada konsentrasi tertinggi Asam linolenat (3 – 17%) [55]. Biodiesel Ester dapat dihasilkan dari
berserabut jamur Mucor circinelloides, yang lemak konten 19,9% (wt) dilaporkan menggunakan untuk
ekstraksi pelarut campuran kloroform dan metanol (pada rasio 2:1). Ada dua prosedur diikuti untuk
pembentukan Ester: transformasi lipid diekstraksi dan transformasi langsung biomassa jamur kering.
Transesterifikasi reaksi menyadari selama 8 h di 65ºC di kehadiran katalis asam (dalam kasus ini, BF3,
H2SO4 atau HCl). Anehnya, metode langsung yang diproduksi Ester metil asam lemak pada hasil lebih
tinggi dan kemurnian (> 99% untuk semua katalis) daripada menggunakan satu dua langkah proses (91.4-
98.0%). Ester ini diproduksi dapat digunakan langsung sebagai biodiesel [56]. Antara jamur, ragi yang
mengandung minyak dibedakan dengan kapasitas mereka untuk mengumpulkan konsentrasi tinggi
lipid (lebih dari 20% biomassa mereka). Spesies seperti Rhodosporidium toruloides dan Lipomyces
starkeyi telah ditemukan untuk mengumpulkan lipid di sekitar 60 dan 70% dari berat dry cell (Tabel 1);
lipid ini terutama dibentuk oleh TAGs [57]. Selain konvensional batch budaya, lainnya sistem fermentasi
diterapkan Rhodosporidium toruloides dapat mencapai produktivitas tinggi lemak sintesis (0.54 g/L/h
dalam budaya makan-batch). Ini lipid yang terutama oleat, palmitic, dan stearic dan asam linoleat [58].
Lipid dihasilkan dari ragi dapat dikonversi ke Ester merupakan biodiesel. Dalam kasus Trichosporon
fermentans, tinggi metil ester menghasilkan (92%) diperoleh oleh transesterifikasi lemak asam
diekstraksi dari sel-sel [59]. Transesterifikasi langsung proses dari biomassa ragi dapat hasil yang dicapai
tetapi rendah (kurang dari 20%) telah ditemukan. Dalam sebuah studi tertentu, methanolysis l. biomassa
starkeyi dilakukan di bawah mediasi logam alkali hidroksida di bawah pemanasan pada 70 º untuk 24 h
[32]. Pilihan lain yang dapat diterapkan adalah memanfaatkan asam mineral yang berbeda (H2SO4, HCl
dan H3PO4) sebagai katalis. Reaksi dimulai pencampuran bubuk sel-sel dengan larutan methanolic
mineral asam dan dipanaskan di 70 º. Hasil metil ester adalah 60 dan 53%, untuk H2SO4 0.1 m dan HCl
0.2 m, masing-masing, dalam reaksi dengan biomassa: metanol rasio 1:20 (w/v) untuk 16 h [32]. Faktor-
faktor yang mempengaruhi hasil esterifikasi ini katalis asam yang dipilih dan konsentrasi, Tentu saja
waktu reaksi, suhu dan biomassa: rasio metanol. Seperti disebutkan di atas, untuk memproses reaksi
transesterifikasi dengan minyak dari sel-sel mikroba yang mengandung minyak, beberapa unit operasi
harus dilakukan. Secara konvensional, transesterifikasi dilakukan dengan alkohol (metanol) dan
triacylglycerides yang diekstrak dari kering mikroba biomassa, tapi sebuah novel metode satu langkah
telah dikembangkan itu lipid transesterifies oleh alcoholysis langsung dari biomassa mikroba kering,
tanpa sebelumnya lipid ekstraksi (Fig. 3) [25, 32]. Namun, bahkan satu langkah metode memerlukan
tambahan biaya untuk pretreatment biomassa. Itu akan mengurangi biaya murah mikroba yang
mengandung minyak bahan baku, jika metode tanpa pengeringan biomassa dapat dikembangkan. Saat
ini katalis yang digunakan untuk transesterifikasi katalis kimia, karena mereka efisiensi konversi yang
tinggi biaya rendah, tetapi mereka melibatkan operasi kompleks seperti pengobatan air yang
terkontaminasi dan pemulihan biodiesel Ester. Baru-baru ini, biocatalytic teknik transesterifikasi
menggunakan dengan telah disajikan sebagai energi kurang intensif dan metode yang ramah lingkungan,
dan dengan hasil melebihi 90% [60]. Transesterifikasi biocatalytic oleh karena itu telah menerima banyak
perhatian, terutama di daerah Imobilisasi [61] dan whole cell biocatalysis [62, 63]. Produksi biodiesel
langsung 3 dari sel rekayasa pabrik Banyak upaya penelitian telah berfokus pada produksi langsung
Biodiesel melalui mikroba konversi dari sumber daya terbarukan berlimpah dan hemat biaya tanpa
modifikasi tambahan, dan ini menjadi layak dengan penemuan sebuah novel bifunctional lilin ester
sintase/Asil-CoA:diacylglycerolacyltransferase (WS/DGAT), yang bisa mensintesis Ester lilin dari alkohol
dan asam lemak koenzim A thioesters (Asil-CoA) [64]. Biodiesel yang dihasilkan dalam proses ini adalah
terutama FAEEs, yang memiliki kinerja yang lebih baik daripada asam lemak metil ester (James). Selain
itu, methanol digunakan untuk transesterifikasi sebagian besar berasal dari gas alam terbarukan dan
beracun dan berbahaya (Rajah-rajah 1A dan 1B), dan oleh karena itu ada banyak manfaat untuk
memproduksi biodiesel (FAEEs) secara langsung menggunakan sel mikroba yang didesain ulang pabrik
(Fig. 1 c). Saat ini, dua model organisme, E. coli dan S. cerevisiae, yang digunakan untuk mengembangkan
langsung produksi biodiesel. Ide lilin ester produksi pertama kali diterapkan secara efektif oleh
Kalscheuer et al. [21]. Mereka berhasil dinyatakan gen WS/DGAT (atfA) dari ketegangan baylyi
Acinetobacter ADP1 dalam kombinasi dengan gen produksi etanol (pdc dan adhB) dari Zymomonas
mobilis di E. coli dan digunakan rekombinan E. coli untuk produksi biodiesel (Fig. 2). Isi FAEE akhir 1.28
g/l adalah dicapai setelah 72 h fermentasi dilengkapi dengan asam lemak eksogen. Penelitian ini adalah
sangat baik demonstrasi kelayakan untuk langsung produksi asam lemak Ester oleh mikroba meskipun
metabolisme perlu lebih dioptimalkan. Selain itu, Steen et al. [19] dimanfaatkan secara ekstensif
diselidiki metabolisme asam lemak dalam bakteri untuk insinyur Escherichia coli untuk menghasilkan
Biodiesel langsung dari gula sederhana. Fluks melalui asam lemak jalur meningkat menjadi
meningkatkan produksi asam lemak bebas dan Asil- COA dengan menghilangkan ß-oksidasi, oleh
overexpressing ligases thioesterases dan Asil-CoA. Biodiesel diproduksi oleh mengekspresikan sintase
ester lilin dan menghasilkan etanol gen (Fig. 2). Di hadapan glukosa, hasil produksi biodiesel bisa
mencapai 674 mg/L. Oleh selanjutnya memperkenalkan xylanases, engineered E. coli dapat
menghasilkan biodiesel untuk 11.6 mg/L langsung dari hemiselulosa, komponen utama dari tanaman-
berasal biomassa, dengan Selain xylan 2%. Produksi biodiesel langsung dari mikroorganisme juga telah
dilaporkan di paten baru aplikasi [65-67], semuanya dimiliki oleh LS9 Inc (Fig. 2). Secara singkat,
ketegangan metabolik engineered E. coli dimanipulasi untuk menghasilkan biodiesel dan asam lemak
turunannya (pendek dan Panjang rantai hidrokarbon, fatty alkohol alkohol, lilin, dll). Gen memudar
pertama terganggu di E. coli, yang kemudian tidak mampu merendahkan asam lemak dan Asil-COA
lemak. Kemudian, asam lemak penghilangan biosynthesizing kemampuan dan asam lemak derivative
kemampuan produksi yang dicapai melalui berlebih dari beberapa gen pengkodean enzim seperti
thioesterase (tesA), Asil-CoA sintase (fadD), asetil-KoA carboxylase (accABCD), asam lemak sintase (fabH,
fabD, fabG, fabF), Asil pembawa protein (acpP), lilin sintase (atfA), alkohol acyltransferase, alkohol
dehidrogenase, dan berbagai jenis dari lemak alcohol untuk membentuk Asil-CoA reductases. Untuk
meningkatkan produksi asam lemak, gen aceEF telah disarankan untuk mengekspresikan dalam produksi
tuan rumah, disertai dengan menghaluskan gliserol-3 - dehidrogenase fosfat (gpsA), laktat
dehydrogenase (ldhA), piruvat formate lyase saya (pflB), acetyltransferase fosfat (pta), piruvat oksidase
(poxB), asetat kinase (ackA), dan gliserin-3 - fosfat O-acyltransferase (plsB). Kemudian, di AS penemu
paten publikasi 2010 0071259 dari perusahaan yang sama yang menunjukkan bahwa dengan
menambahkan campuran dari setidaknya dua berbeda alkohol untuk media yang mengandung
direkayasa lemak Ester memproduksi Strain e. coli, setidaknya dua berbeda lemak Ester bisa diproduksi.
Secara khusus, dengan memilih berbagai jenis dan/atau jumlah alkohol, hal itu mungkin untuk
menghasilkan komposisi yang diinginkan lemak ester, yakni dirancang Biodiesel, yang akan meningkatkan
bahan bakar properti, seperti titik diinginkan awan, cetane nomor, viskositas dan pelumasan [68]. Di satu
sisi, ini harus diperhatikan bahwa etanol, salah satu dari dua substrat untuk biodiesel, adalah tidak
secara alami diproduksi oleh E. coli. Pembentukan etanol yang heterologous biosintesis merupakan
prasyarat untuk E. coli biodiesel produser. Dalam hal ini, jauh pilihan yang lebih baik dari sel mikroba
pabrik untuk industry produksi biodiesel akan menjadi ragi S. cerevisiae, yang organisma terkenal
digunakan dalam produksi etanol melalui fermentasi glukosa [69]. Menggunakan prinsip yang sama
seperti E. coli, memiliki telah dilaporkan bahwa novel lipid, termasuk FAEEs dan Ester asam lemak
isoamyl (FAIEs), bisa diproduksi di S. cerevisiae H1246 dengan penambahan asam oleat dengan
mengekspresikan A. baylyi bifunctional WS/DGAT enzim [70]. Studi ini menunjukkan bahwa
nonspecificity dari WS/DGAT dari A. calcoaceticus ADP1 dapat menyebabkan biosintesis berbagai macam
lipid di vivo di sejumlah eukariotik ekspresi. Aplikasi paten baru, yaitu kita paten 2009/0117629 oleh
Schmidt-Dannert dan Holtzapple [21] menjelaskan sebuah metode untuk produksi biodiesel dan lilin
Ester oleh ekspresi heterologous dari lilin sintase (WS2) dari Marinobacter hydrocarbonoclasticus di S.
cerevisiae oleh eksogen pasokan asam lemak. WS2 dari M. hydrocarbonoclasticus melakukan aktivitas
sintase lilin yang lebih tinggi untuk etanol dibandingkan baylyi A. bifunctional WS DGAT enzim. Selain itu,
tidak seperti A. enzim WS DGAT bifunctional baylyi, WS2 tidak memiliki kegiatan DGAT, yang
mengkatalisis pembentukan TAG dari asam lemak. Sintesis TAG akan berfungsi sebagai jalur kompetitif
untuk produksi biodiesel. Oleh karena itu, WS2 dari M. hydrocarbonoclasticus sangat cocok untuk
tertentu tujuan untuk menghasilkan biodiesel, dan memberikan titer dari etil oleate untuk sekitar 62
mg/L dalam Oleate menambahkan (0,11%, w/v).
Kesimpulan 4 dan perspektif
Penggunaan biodiesel telah berkembang secara dramatis selama beberapa tahun terakhir, dan dipercaya
untuk meningkatkan bahkan lebih lanjut di masa depan. Produksi konvensional Biodiesel melalui
transesterifikasi Tag berasal dari minyak tanaman memerlukan keterlibatan terbatas sumber daya
tanaman dan petro-kimia berasal metanol (Fig. 1A). Selain itu, tinggi biaya yang terlibat dalam
penggunaan sumber daya tanaman yang terkait, Selain masalah penggunaan makanan/feed kelas
produk untuk produksi bahan bakar, mahal untuk produksi biodiesel skala besar menggunakan
konvensional teknologi. Produksi biodiesel melalui sistem mikroba oleh karena itu menerima perhatian
meningkat sebagai alternatif yang hemat biaya, berkelanjutan. Siaran pers dari beberapa perusahaan
yang berbeda menunjukkan bahwa ada beberapa proyek mikroba biodiesel terus-menerus, misalnya di
ExxonMobil Corp, Dow Chemical Co, Inc LS9, Amyris Biotechnologies Inc, Codexis Inc, BP dan Martek
Biosciences Corp Penerapan mikroorganisme untuk efisien produksi biodiesel akan memerlukan
signifikan de peraturan dari metabolisme lipid, yang mewakili tantangan besar karena kompleksitas dan
pengetahuan yang terbatas dari bidang [19, 71, 72]. Hari kemajuan dalam biologi sintetis dan sistem
biologi telah dipercepat kemampuan untuk menganalisis dan menerapkan metabolik dengan presisi
yang belum pernah terjadi sebelumnya [73-75], dan memberikan strategi yang berguna untuk tingkat
sistem metabolisme teknik dengan menciptakan dan memodifikasi sistem genetik [76, 77]. Lebih penting
lagi, dalam model metabolik silico diaktifkan sistematis penjabaran dan desain sistem biologi dengan
sifat-sifat yang dikehendaki dan lebih mudah diprediksi [76-78], misalnya ditingkatkan akumulasi lemak,
atau direkayasa jalur untuk produksi biodiesel de novo di vivo, membuat mikroorganisme platform yang
ideal untuk produksi biodiesel masa depan.