ABSTRAK

Makalah ini menjelaskan studi fisikokimia yang dilakukan pada tanaman hias, Rudbeckia triloba
(Asteraceae). Untuk tujuan ini, minyak atsiri, infusa, dekok, dan maserasi hidroalkohol yang diperoleh
dari bagian udara berbeda dari Rudbeckia triloba dianalisis. Konstituen fitokimia utama yang
diidentifikasi dengan analisis GC-MS ditemukan α-pinene (pada daun kering (46,0%) dan bunga
(40,1%)) dan β-phellandrene (dalam minyak atsiri dari infloresensi kering (26,09%)). Uji Folin-
Ciocalteu dan quercetin mengungkapkan nilai yang berbeda dari total kandungan fenolik dan
flavonoid dari kelopak, daun, dan biji sebagai fungsi dari pelarut yang digunakan dan prosedur
ekstraksi. maserasi hidroalkohol dari kelopak ditemukan untuk menyajikan kandungan fenolik dan
flavonoid maksimum (130,29 ± 5,58 mg setara asam galat / g bahan nabati kering dan 30,72 ± 1,35
mg setara kuercetin / g bahan nabati kering, resp.) Dan juga menunjukkan nilai yang lebih rendah
EC50 (0,32% (v / v)), diperoleh dengan menerapkan uji DPPH⋅. Membandingkan metode ekstraksi
yang diterapkan, maserasi ditemukan menjadi yang paling efektif untuk senyawa fenolik,
kemungkinan besar karena pelarut (etanol 70%). Penggunaan campuran air-alkohol mengarah pada
peningkatan hasil ekstraksi senyawa fenolik (termasuk yang memiliki berat molekul lebih tinggi)
dibandingkan dengan menggunakan air sebagai pelarut ekstraktif, dalam kasus infusa dan dekok

PENGENALAN

Selama berabad-abad, tanaman herbal digunakan sebagai sumber obat. Organisasi Kesehatan Dunia
(WHO) melaporkan bahwa populasi dunia menggunakan obat tradisional untuk kebutuhan
perawatan kesehatan utama mereka. Dalam konteks ini, produk alami, seperti ekstrak tumbuhan,
baik sebagai senyawa murni atau sebagai ekstrak terstandarisasi, memberikan peluang tak terbatas
untuk penemuan obat baru. Juga, bahan nabati digunakan dari zaman kuno sebagai sumber perasa,
minuman, wewangian, dan produk kosmetik. Ini karena bahan tanaman memiliki sifat unik untuk
mensintesis senyawa aktif biologis yang dihasilkan sebagai metabolit dari apa yang disebut
metabolisme sekunder. Di antara empat kelas utama metabolit sekunder bioaktif (terpen, fenolik,
glikosida, dan alkaloid), senyawa fenolik (yang berasal dari metabolisme sekunder dari asam amino
aromatik) memiliki aktivitas antioksidan, antikarsinogenik, dan antimutagenik, yang sangat penting
bagi kesehatan manusia. Mereka juga diketahui mengurangi risiko kardiovaskular. Studi
epidemiologis menunjukkan kemampuan polifenol tanaman untuk menawarkan perlindungan
terhadap perkembangan kanker, penyakit kardiovaskular, diabetes, osteoporosis, dan penyakit
neurodegeneratif . Grup fenolik dalam polifenol menerima elektron untuk membentuk radikal
fenoksil yang relatif stabil, mengganggu reaksi oksidasi berantai dalam komponen seluler. Fenolik
mewakili berbagai macam senyawa seperti fenol sederhana, asam fenolat, kumarin, flavonoid,
stilbena, tanin terhidrolisa dan terkondensasi, lignan, dan lignin. Perlu dicatat bahwa flavonoid
merupakan salah satu fenol alami yang paling penting. Kelas senyawa penting lainnya yang terjadi
dalam bahan tanaman diwakili oleh terpenoid, yang memainkan peran penting dalam
pengembangan sistem kehidupan. Kebanyakan dari mereka adalah zat yang mudah menguap dan
umumnya hadir dalam minyak esensial yang diperoleh dengan metode ekstraktif.

Tidak hanya tanaman tahunan tetapi juga tanaman kultur dipelajari dalam hal sifat farmakologisnya.
Di antara tanaman kultur, spesies dekoratif Rudbeckia hadir di taman-taman tertentu atau publik.
Berasal dari Amerika Utara, Rudbeckia adalah tanaman berbunga dari keluarga Asteraceae,
ditemukan di 25 spesies abadi, tahunan, atau dua tahunan berbeda. Varietas yang paling umum dari
tanaman ini adalah Rudbeckia fulgida, Rudbeckia hirta, Rudbeckia laciniata, atau Rudbeckia triloba.
Yang terakhir ini dilaporkan di Austria pada tahun 1970-an, sementara di Rumania, telah ditemukan
untuk pertama kalinya di Maramures dan kabupaten Neamt.

Beberapa penelitian tentang sifat biokimia varietas Rudbeckia dilaporkan . Dengan demikian, minyak
atsiri daun dari tiga anggota herba dari keluarga Asteraceae, Rudbeckia fulgida, Rudbeckia hirta, dan
Symphyotrichum novae-angliae, diperoleh dengan hidrodistilasi dan dianalisis dengan kromatografi
gas-spektrometri massa. Komponen utama dalam minyak atsiri Rudbeckia fulgida adalah
hidrokarbon seskuiterpen (germacrene D (30,1%) dan cad-cadinene (17,8%)); komposisi serupa
dilaporkan dalam kasus minyak daun Rudbeckia hirta, dengan 23,6% germacrene D dan 16,2% cad-
cadinene. Minyak daun dari ekstrak ini ditemukan tidak aktif untuk aktivitas antimikroba. Studi lain
melaporkan komposisi kimia, mineral, dan efek antioksidan Rudbeckia laciniata [12]. Komponen
umum Rudbeckia laciniata adalah protein kasar. Kandungan mineral tertinggi adalah kalium, diikuti
oleh kalsium dan magnesium, menunjukkan bahwa Rudbeckia laciniata adalah bahan alkali.
Kandungan senyawa fenolik dan flavonoid total dan aktivitas pembersihan radikal DPPH dari
Rudbeckia laciniata juga dilaporkan. Profil kimia Rudbeckia hirta didirikan dengan teknik kromatografi
lapis tipis (KLT) dan dengan cara total konten polifenol. Seperti tentang tindakan terapi dari spesies
genus Rudbeckia, mereka relatif bervariasi. Senyawa aktif atau ekstrak tanaman ini menunjukkan
efek anti-inflamasi (Rudbeckia hirta), antimycobacterial (Rudbeckia subtomentosa), antileukemic
(Rudbeckia mollis), antitusif (Rudbeckia fulgida), aktivitas antioksidan, antibakteri, antivirus,
antijamur, dan sitotoksik (Rudbeckia laciniata).

belum ada penelitian yang melaporkan dalam literatur tentang komposisi kimia dan aktivitas
antioksidan dari Rudbeckia triloba. Dalam tulisan ini, bagian udara yang berbeda dari Rudbeckia
triloba digunakan untuk mendapatkan minyak atsiri, infusa, decoct, dan maserasi hidroalkohol.
Bahan padat tanaman (daun kering dan perbungaan), minyak esensial dari perbungaan kering, dan
ekstrak air atau hidroalkohol yang diperoleh diperoleh dari kelopak, daun, dan biji kering yang
dikarakterisasi dengan metode kromatografi atau / dan spektrofotometri.

PERCOBAAN

Pengumpulan Bahan Tumbuhan

Rudbeckia triloba dikumpulkan pada Agustus 2016 dari kebun-kebun tertentu yang ditempatkan di
daerah pedesaan batas Bucharest, Rumania. Pabrik itu dikonfirmasi di Kebun Raya Bukares, tempat
spesimen voucher disimpan (406406 / 30.03.2017). Setelah dikumpulkan, bahan tanaman dipisahkan
menjadi komponen udara utamanya: perbungaan, kelopak, daun, dan biji yang dicuci bersih dengan
air untuk menghilangkan kotoran. Kemudian, bahan nabati tersebut dikeringkan pada suhu kamar.
Komponen kering tanaman dipotong kecil-kecil dan disimpan dalam paperbag sampai percobaan
lebih lanjut.

1. Preparasi bahan tanaman

Infusa, dekok, dan maserasi diterapkan pada tiga bagian udara tanaman, yaitu, kelopak, biji, dan
daun.
Sebelum infusa dan dekok, jumlah bahan sayuran kering yang ditimbang (1 g) direndam dengan
volume kecil bi-distilled water (air suling rangkap) dingin dan didiamkan selama 10 menit. Prosedur
pendahuluan ini memungkinkan sel-sel tanaman untuk berkembang dan dengan demikian
melepaskan bahan aktifnya ketika menyiapkan infusa atau dekok.

Infusa disiapkan dengan menambahkan 50 mL air bidistilled matang/sudah dididihkan ke bahan

sayuran basah.

Campuran ditutup dengan kaca arloji, dibiarkan selama 15 menit.

Dekok dibuat dengan merebus bahan tanaman basah dengan 50 mL air selama 10 menit. Setelah itu,
campuran dibiarkan selama 15 menit.

Ekstrak hidroalkohol dibuat dengan memaserasi 0,5 g bahan nabati dalam 50 mL etanol 70% selama
7 hari, dalam keadaan gelap, pada suhu kamar.

Kemudian, setiap ekstrak tanaman disaring melalui kertas saring.

Filtrat secara kuantitatif dipindahkan ke labu ukur 100 mL dan dibawa ke perlakuan dengan air
bidistilled (dalam perlakuan infusa dan dekok) dan dengan etanol 70% (dalam perlakuan maserasi),
agar mendapatkan ekstrak encer.

Bagian dari ekstrak filtrat yang diperoleh disimpan pada suhu -45 ° C untuk analisis lebih lanjut.

Minyak atsiri diisolasi dari perbungaan kering, dengan hidrodistilasi dalam peralatan tipe Clevenger,
selama 4 jam, menggunakan prosedur standar.

Minyak atsiri dikeringkan pada Na2SO4 anhidrat dan disimpan pada + 4 ° C.

Kuantitas minyak atsiri dari tanaman dinyatakan dalam persentase (v / w), sebagai rata-rata nilai yang
diperoleh dari lima ekstraksi.

2. Persiapan larutan Reagen Analitik

Larutan induk asam galat (GA) 500 μg / mL disiapkan dengan melarutkan 0,0125 g asam galat dalam
air suling, dipindahkan ke 25 mL dalam labu volumetrik.

Larutan kerja asam galat 50 μg / mL diperoleh dengan pengenceran dari Larutan induk.

Larutan induk quercetin (Q) 1 mg / mL dibuat dengan melarutkan 0,0250 g Quercetin dalam etanol
96% dan dipindahkan ke dalam labu volumetrik 25ml.

Larutan kerja quercetin 100 μg / mL diperoleh dari Larutan induk, dengan pengenceran dengan
etanol 96%.

Larutan etanol 0,05% dari DPPH⋅ disiapkan sebelum digunakan.

3. Analisis GC-MS

Analisis GC-MS dilakukan dengan sistem Thermo Electron (kromatografi GC focus digabungkan
dengan detektor massa perangkap ion Quercetin Polaris).

Kolom kapiler DB-5MS (25 mx 0,25 mm; ketebalan film 0,25 m) digunakan dengan helium sebagai gas
pembawa (1 mL / menit).
Oven GC diprogram pada suhu awal 60 ° C selama 3 menit.

Temperatur ditingkatkan hingga 200 ° C pada kecepatan 10 ° C / menit, dijaga konstan selama 2
menit, dan kemudian meningkat hingga 240 ° C pada kecepatan 12 ° C / menit dan ditahan pada 240
° C selama 2 min.

Kedua suhu injektor dan detektor dijaga pada 250 ° C.

Mode ionisasi dampak elektronik adalah 70 eV, dan deteksi dilakukan dalam kisaran 35-300 amu
(mode scan penuh).

Identifikasi komponen dilakukan dengan menggunakan software Xcalibur®, NIST Mass Spectral
Library, dan data literatur MS.

Indeks retensi (RI) dari senyawa ditentukan relatif terhadap waktu retensi larutan standar n-alkana
untuk GC (C8-C20).

Persentase relatif dari masing-masing komponen dihitung berdasarkan area puncak GC tanpa
menggunakan faktor koreksi.

Untuk analisis GC-MS, minyak esensial hidrodistilled diencerkan dalam heksana (1: 100) dan 1 μL
diinjeksikan.

Triplus HS Autosampler (Thermo Electron) digunakan untuk analisis headspace, sejumlah 1 g

perbungaan atau daun dimasukkan dalam botol sampel (ukuran 20 mL) dan disegel dengan septum
karet silikon dan tutup aluminium.

Botol headspace yang mengandung bahan tanaman dipanaskan hingga 80 ° C selama 10 menit, dan
500 μL gas headspace diinjeksikan ke dalam kolom.

Analisis GC-MS dilakukan dengan cara yang sama seperti untuk minyak atsiri.

Penentuan kadar Fenolik total (TPC)

1. Semua pengukuran absorbansi dilakukan pada spektrometer UV-Vis (Jasco V-530, Jasco,
Jepang), dilengkapi dengan sel kuarsa (panjang jalur cahaya 1 cm).
2. Uji spektrofotometri Folin-Ciocalteu (F-C) digunakan untuk menentukan kandungan total
polifenol. Aliquot (0,1-0,5 mL) dari larutan kerja asam galat (50 μg / mL) dimasukkan ke
dalam serangkaian labu terkalibrasi 5 mL.
3. Kemudian, 2,5 mL dari 10% reagen Folin-Ciocalteu ditambahkan. Campuran diinkubasi dalam
keadaan gelap selama 5 menit.
4. Kemudian, 2 mL larutan natrium karbonat 7,8% ditambahkan ke setiap sampel, dan volume
total ditambahklan 5 mL air suling.
5. Setelah dihomogenkan, campuran diinkubasi dalam keadaan gelap selama 30 menit sebelum
mengukur absorbansi pada 760 nm terhadap larutan kosong (diperoleh tanpa ditambahkan
asam galat).
6. Kurva kalibrasi standar disiapkan dalam kisaran konsentrasi 1-5 μg / mL asam galat.
7. Untuk menentukan kadar fenolik total dalam ekstrak, alikuot dari masing-masing ekstrak
encer digunakan sebagai pengganti asam galat, dan prosedur F-C diterapkan.
8. Kadar fenolik total dihitung dalam hal setara asam galat per gram bahan sayuran kering (mg
GAE / g), dengan menerapkan persamaan regresi dari kurva kalibrasi A = 0,0968CGA + 0,0197
dengan R2 = 0,9998, di mana A adalah absorbansi dan CGA adalah konsentrasi larutan asam
 galat (μg / mL). Pengukuran spektrofotometri untuk setiap sampel dilakukan dalam rangkap
tiga.

2.7. Penentuan kadar Flavonoid total (TFC)

1. Kadar flavonoid ditentukan secara spektrofotometri, berdasarkan pembentukan kompleks Al (III)

-flavonoid.

2. Quercetin digunakan sebagai flavonoid standar, dan prosedur yang dikutip diterapkan dengan
sedikit modifikasi. 3

3. Aliquot (0,1-0,5 mL) dari larutan kerja quercetin (100 μg / mL) atau sampel ekstrak yang
diencerkan dan etanol (hingga 2 mL campuran alkohol) ditambahkan dalam serangkaian labu
terkalibrasi 5 mL.

4. Selanjutnya, 0,1 mL aluminium klorida 10%, 0,1 mL larutan kalium asetat 1M, dan air ditambahkan
ke setiap sampel untuk membuat volume total 5 mL.

5. Campuran dihomogenkan dan didiamkan selama 30 menit pada suhu kamar.

6. Kemudian, absorbansi diukur pada 427 nm terhadap reagen kosong (untuk setiap sampel,
campuran kosong disiapkan, tanpa penambahan AlCl3).

7. Kadar flavonoid total dari bahan nabati dihitung dalam hal setara kuersetin per gram bahan nabati
kering (mg QE / g), dengan menerapkan persamaan regresi dari kurva kalibrasi A = 0,0652CQ +
0,0804 dengan R2 = 0,9992, di mana CQ adalah konsentrasi larutan kuersetin (μg / mL).

8. Pengukuran spektrofotometri untuk setiap sampel dilakukan dalam rangkap tiga.

2.8. DPPH⋅ Radical Scavenging Assay

1. Aktivitas pembersihan radikal bebas DPPH⋅ dari ekstrak herbal yang diperoleh ditentukan.

2. Aliquot dari ekstrak filtrat (0,01-0,3 mL) dicampur dengan etanol hingga 1,9 mL.

3. Kemudian, 0,1 mL larutan etanol 0,05% dari DPPH⋅ ditambahkan ke masing-masing sampel hingga
total volume 2 mL.

4. Larutan standar yang mengandung 0,1 mL 0,05% DPPH⋅ dan 1,9 mL etanol juga disiapkan.

5. Campuran dihomogenkan dan disimpan dalam keadaan gelap selama 30 menit, pada suhu kamar.

6. Kemudian, pengukuran absorbansi dilakukan pada 517 nm terhadap reagen kosong (untuk setiap
sampel, campuran kosong disiapkan tanpa menambahkan DPPH⋅).

7. larutan DPPH⋅ baru disiapkan dan disimpan di lemari es sampai digunakan.

8. Nilai EC50 diperoleh dengan mengatur atau menempatkan absorbansi pada 517 nm dibandingkan
konsentrasi larutan ekstrak. Konsentrasi (%, v / v) larutan sampel yang menurunkan absorbansi awal
DPPH⋅ sebesar 50% mewakili EC50.

3. Hasil dan Pembahasan

3.1. yield Minyak Esensial

 Kandungan rata-rata dalam minyak esensial perbungaan Rudbeckia triloba adalah 0,300% (mL
minyak atsiri / 100 g tanaman). Minyak esensial berwarna kuning muda dengan bau tertentu.

3.2. Hasil Analisis GC-MS

Analisis GC-MS mengungkapkan bahwa jumlah komponen volatil dari minyak esensial
hydrodistilled dari perbungaan adalah berbeda dari bahan tanaman kering (daun dan
perbungaan) yang mengalami ekstraksi headspace. Tabel 1 menunjukkan kandungan relatif
senyawa volatil dari daun, perbungaan, dan minyak esensial perbungaan Rudbeckia triloba yang
tumbuh di Rumania, dinyatakan sebagai persentase dari total area. Dengan demikian,
menggunakan headspace, dua puluh dua senyawa yang diidentifikasi dalam daun menyumbang
99,0% dari total komponen yang diidentifikasi, dengan α-pinene (46,0%), β-phellandrene
(24,6%), sabinene (9,6%), dan germacrene D ( 6.1%) sebagai komponen utama. Bunga-bunga
Rudbeckia triloba mengandung tiga puluh tiga komponen (98,6%), dengan konstituen utama
yang sama, tetapi dalam persentase yang berbeda: α-pinene (40,1%), germacrene D (24,0%), β-
phellandrene (13,9%), dan sabinene (9,7%). Jumlah total komponen yang diidentifikasi dari
minyak esensial perbungaan adalah empat puluh satu, mewakili 95,9% dari total area.
Kandungan arau kompenen yang sama adalah senyawa volatil utama dari minyak atsiri, dengan
β-phellandrene (26,09%), germacrene D (21,6%), α-pinene (16,3%), dan sabinene (12,0%).

Table 1: Compounds identified by GC­MS technique in the Rudbeckia triloba.

Compositionb (%)
Inflorescences
Number Compound RIa
Leaves Dry Essential
material oil

1 α-Thujene 924 0.2 0.2 —

2 α-Pinene 940 46.0 40.1 16.3
3 Camphene 957 0.2 0.5 0.3
4 Sabinene 978 9.6 9.7 12.0
5 β-Pinene 982 0.8 0.7 —
6 β-Myrcene 991 2.9 1.5 1.7
7 α-Phellandrene 1006 1.1 0.8 1.3
8 3-Carene 1013 0.1 0.2 —
9 α-Terpinene 1018 — — 0.2
10 p-Cymene 1026 0.6 0.2 —
11 β-Phellandrene 1031 24.6 13.9 26.0
12 Z-β-Ocimene 1046 0.3 0.4 0.6
13 Butyl-2-methylbutanoate 1048 0.2 — —
14 E-β-Ocimene 1055 0.3 0.3 —
15 γ-Terpinene 1059 0.2 0.0 0.4
16 cis-Sabinene hydrate 1071 — 0.1 —
17 α-Terpinolene 1088 0.8 — 0.2
18 Linalool 1094 0.3 0.1 —
19 trans-para-Mentha-2,8-dien-1-ol 1108 — 0.7 —
20 Α-Campholenal 1127 — 0.7 0.3
21 cis-p-Mentha-2,8-dien-1-ol 1136 — — 0.1
22 Sabinol 1142 0.2 0.2 0.2
23 cis-Verbenol 1147 — 0.3 0.6
24 Lavandulol 1165 — — 0.2
25 trans-2-Caren-4-ol 1172 — 0.1 0.3
26 Terpinen-4-ol 1179 — — 0.5
27 Cryptone 1190 — 0.6 1.0
28 Verbenone 1216 — 0.2 —
29 trans-Carveol 1219 — — 0.1
30 Butanoic acid, 2-methyl-, hexyl ester 1230 0.6 — —
31 Cumin aldehyde 1244 — — 0.4
32 Phellandral 1281 — — 0.2
33 δ-Elemene 1339 — — 0.1
34 α-Terpineol acetate 1345 2.5 — —
35 Cyclosativene 1374 — — 0.1
36 Α-Copaene 1379 — — 0.1
37 Β-Maaliene 1388 — — 0.1
38 Β-Cubebene 1392 — 0.2 0.5
39 β-(E)-Caryophyllene 1427 0.4 1.2 1.7
40 Β-Gurjunene 1435 — 0.3 0.6
41 cis-β-Farnesene 1450 — — 0.3
42 Humulene 1461 — 0.2 0.4
43 Γ-Gurjunene 1464 — 0.2 0.4
44 Γ-Muurolene 1480 — 0.2 0.6
45 Germacrene D 1490 6.1 24.0 21.6
46 Α-Muurolene 1503 — 0.3 0.5
47 Γ-Cadinene 1523 — 0.3 0.9
48 Δ-Cadinene 1526 — — 0.2
49 Spathulenol 1588 — — 0.9
50 Caryophyllene oxide 1597 — 0.1 0.7
51 Cedr-8-en-13-ol 1656 — — 0.2
52 Cadalene 1680 1.0 0.1 —
6-Isopropenyl-4,8a-dimethyl-
53 1,2,3,5,6,7,8,8a-octahydro- 1694 — — 2.2
naphthalen-2-ol
54 Hexahydrofarnesyl acetone 1747 — — 0.9
  Total (%)   99.0 98.6 95.9
  Monoterpene hydrocarbons   87.7 68.6 59.0
  Oxygenated monoterpenes   3.0 2.9 3.9
  Sesquiterpene hydrocarbons   7.5 27.0 28.0
  Oxygenated sesquiterpene   — 0.1 4.9
  Nonterpene ester   0.8 — —

Atas dasar analisis GC-MS, orang dapat menyimpulkan bahwa Rudbeckia triloba merupakan
sumber α-pinene yang penting. Hidrokarbon monoterpen ini diketahui memiliki sifat ansiolitik
dan obat penenang. Ini juga bertindak sebagai bronkodilator. Dilaporkan bahwa terpene ini
memiliki khasiat untuk mengurangi ukuran tumor kanker.

3 kadar total Fenolik dan Flavonoid

Bagian utama dari penelitian yang dilaporkan menyimpulkan bahwa polifenol (flavonoid menjadi
keluarga terbesar senyawa polifenol) adalah senyawa utama yang bertanggung jawab untuk
aktivitas antioksidan dari ekstrak tanaman yang diuji. Tabel 2 menyajikan TPC dan TFC dari
ekstrak yang diperoleh (infusa, dekok, dan maserasi hidroalkoholik dari bagian udara berbeda
dari Rudbeckia triloba).
Table 2: Total phenolic content (TPC) and total flavonoid content (TFC) of extracts
obtained from different aerial parts of Rudbeckia triloba.

Vegetabl TFC (QE, mg/g dry vegetable) TPC (GAE, mg/g dry vegetable)
e
material Infusaion Decoct Macerate Infusaion Decoct Macerate

8.66 ±  12.69 ±  30.72 ±  40.51 ±  73.53 ±  130.29 ± 

Petals
0.52 0.52 1.35 2.11 3.51 5.58
3.22 ±  21.72 ±  15.02 ±  62.06 ± 
Leaves 2.37 ± 0.11 93.43 ± 4.85
0.22 1.22 0.82 3.12
0.64 ±  70.64 ± 
Seeds 2.82 ± 0.23 6.65 ± 0.34 5.51 ± 0.32 70.14 ± 3.45
0.06 3.25

Nilai TPC dan TFC maksimum diperoleh dengan maserasi bahan nabati diikuti dengan dekok dan
infusa. Semua prosedur ekstraksi menunjukkan nilai maksimum TPC dan TFC dalam kelopak.
Perbandingan antara infusa dan dekok menunjukkan bahwa dekok lebih efisien daripada infusa
dalam ekstraksi polifenol. Perilaku ini dapat dijelaskan sebagai berikut. Baik infusaa dan dekok
adalah prosedur termal yang cocok untuk mengekstraksi senyawa yang stabil terhadap panas
yang menyebabkan perbedaan kandungan fenolik total dari infusaa dan dekok. Konsentrasi total
total fenolik yang lebih tinggi dalam dekok daripada dalam infusaa, diperoleh dengan
memanaskan campuran air-nabati untuk waktu yang cukup lama (15 menit), dapat dijelaskan
sebagai berikut: kerusakan konstituen seluler serta hidrolisis tanin terjadi. Degradasi tanin fenolik
kompleks serta proses oksidasi enzimatik atau nonenzimatik menyebabkan kandungan tambahan
dari senyawa fenolik dalam dekok. Pada saat yang sama, selama dekok, reaksi Maillard terjadi,
menghasilkan senyawa fenolik baru.

Juga, membandingkan tiga prosedur ekstraksi yang diterapkan (infusa, dekok, dan maserasi),
maserasi tampaknya lebih efisien daripada infusa dan dekok untuk mengekstraksi polifenol
(etanol 70% dipilih untuk maserasi, menjadi pelarut yang paling sering digunakan untuk
mengekstraksi senyawa fenolik dari tanaman). Perilaku ini dapat disebabkan oleh kemungkinan
pembentukan kompleks beberapa senyawa fenolik, memiliki lebih banyak gugus fenol atau
memiliki ketinggian molekul yang lebih tinggi daripada fenolik dalam air. Senyawa ini tampaknya
larut dalam ekstrak hidroalkohol. Juga, kandungan lebih banyak senyawa nonfenol, seperti
terpene, asam organik, gula, dan protein yang larut, dalam infusa daripada dimaserasi dapat
mengganggu uji TPC. Ini juga dapat disebabkan oleh kemungkinan pembentukan kompleks
beberapa senyawa fenolik dalam ekstrak makerat yang larut dalam campuran etanol-air. Senyawa
fenolik ini mungkin memiliki lebih banyak gugus fenol atau mungkin memiliki berat molekul lebih
tinggi daripada fenolat dalam ekstrak air. Seperti dilaporkan, campuran air-alkohol yang
digunakan dalam prosedur ekstraksi mengarah ke peningkatan pembengkakan bahan tanaman,
 memastikan kontak intim antara matriks tanaman dan pelarut dan akibatnya peningkatan hasil
ekstraksi . Selain itu, bahan tanaman mengandung berbagai macam senyawa fenolik yang
memiliki jumlah kelompok fenolik yang berbeda dengan reaktivitas yang berbeda terhadap
reagen Folin-Ciocalteu.

terkait flavonoid, dari data yang dilaporkan dalam literatur, uji utama untuk penentuan kadar
total flavonoid umumnya didasarkan pada absorbansi senyawa Al (III) -flavonoid. Perbedaan
antara dua metode spektrofotometri yang paling banyak diterapkan adalah media reaksi: (a) di
hadapan NaNO2, dalam media alkali dan (b) di hadapan CH3COOK atau CH3COONH4 (tanpa
nitrit). Dalam pekerjaan kami, metode spektrofotometri tanpa menggunakan nitrit . Metode
yang terakhir ini hanya dapat digunakan untuk menentukan kandungan flavonol (quercetin, rutin,
kaempferol, dan morin) dan luteolin (dari keluarga flavones). Mengenai korelasi antara TPC dan
TFC, ditemukan signifikan dalam kasus infusa dan maserasi. Berdasarkan data literatur, korelasi
seperti itu menunjukkan bahwa flavonoid merupakan bagian penting dari fenol dalam ekstrak
tanaman. Hasil pada Tabel 2 menunjukkan bahwa infusa dan maserasi yang diperoleh dari
kelopak dan daun tampaknya mengandung persen flavonoid yang signifikan.

Table 3: Correlations   between   total   phenolic   content   and   flavonoids   content   of

extracts obtained from different aerial parts of Rudbeckia triloba.

Extract Correlation (R2)

Infusaion y = 0.2259x – 0.4251 (0.9971)

Decoct y = 0.7059x – 42.568 (0.5212)
Macerate y = 0.3739x – 17.183 (0.9147)

3.4. Free radical scavenging activity

Seperti disebutkan, senyawa polifenol dan flavonoid dianggap memiliki sifat antioksidan yang
signifikan terutama karena kandungan penting dalam kelompok hidroksil. Zat-zat ini dapat
bertindak sebagai pengumpulan radikal karena gugus fenolik hidroksil adalah antioksidan
penyumbang H yang baik, yang mencari spesies oksigen reaktif dan menghentikan produksi
radikal baru. Radikal DPPH⋅ yang stabil sering digunakan untuk menilai aktivitas pembersihan
radikal dari banyak senyawa aktif biologis. DPPH⋅ memiliki sifat untuk menerima elektron dari
antioksidan. Reaksi redoks ini menyebabkan penurunan warna ungu dari radikal DPPH ⋅. Total
reaksi antioksidan-DPPH⋅ mengarah ke larutan berwarna kuning. Nilai EC50 yang rendah
menunjukkan aktivitas pembersihan yang tinggi. Seperti yang diamati pada Tabel 4, ekstrak yang
diperoleh dari kelopak menyajikan nilai terendah EC50 dengan minimum dalam kasus ekstrak
maserasi. Mengenai hubungan antara nilai-nilai EC50 dan TPC, umumnya, korelasi linear negatif
dilaporkan dalam literatur. Tetapi, tidak selalu ada korelasi linier antara dua parameter analitik
 ini. Dalam penelitian kami, korelasi linear negatif diperoleh dalam kasus infusa dan ekstrak
maserasi pada tabel 5. Cheynier et al. mengasumsikan bahwa selain pemulungan radikal,
aktivitas antioksidan juga dapat dikaitkan dengan mekanisme lain yang berbeda seperti
pengikatan katalis ion logam transisi atau penguraian peroksida. Pada saat yang sama, aktivitas
pembilasan radikal polifenol tergantung pada struktur molekulnya, masing-masing, pada
ketersediaan hidrogen fenolik dan kemungkinan stabilisasi radikal HO dan NO yang dihasilkan
melalui sumbangan hidrogen.

Table 4: Total antioxidant capacity of extracts obtained from different aerial parts
of Rudbeckia triloba.

EC50 (% (v/v))
Vegetable material
Infusaion Decoct Macerate

Petals 0.51 ± 0.03 0.61 ± 0.03 0.32 ± 0.02

Leaves 1.01 ± 0.05 2.52 ± 0.13 0.62 ± 0.03
Seeds 2.22 ± 0.11 3.41 ± 0.17 0.88 ± 0.04

Table 5: Correlations between total antioxidant capacity and total phenolic content
of extracts obtained from different aerial parts of Rudbeckia triloba.

Extract Correlation (R2)

Infusaion y = −18.132x + 42.952 (0.7760)

Decoct y = −1.8133x + 72.736 (0.1939)
Macerate y = −86.751x + 152.73 (0.9504)

4. Kesimpulan

Hasil yang diperoleh pada ekstrak Rudbeckia triloba menunjukkan aktivitas antioksidan yang
signifikan, terutama maserasi kelopak (dihasilkan dengan menerapkan Folin-Ciocalteu, total
flavonoid, dan tes DPPH⋅). Juga, daun, perbungaan, dan minyak esensial perbungaan Rudbeckia
triloba ditemukan kaya akan hidrokarbon monoterpen (terutama, α-pinena dalam daun dan
perbungaan dan β-phellandrene dan germacrene D, dalam minyak esensial perbungaan).