PRAKTEK MIKROBIOLOGI

a. Morfologi Mikrobiologi (Jamur)

1. Bersihkan preparat mengunakan alkohol
2. Ambil jamur pada sampel dengan menggunakan ose lurus yang sudah disterilkan
3. Letakkan jamur pada objek gelas yang sudah ditetesi nafis dan tutup dengan cover
glass
4. Amati morfologi jamur pada sampel dengan menggunakan mikroskop dengan
perbesaran 40 kali.

b. Metode TPC ( analisa kuantitatif bahan makanan )

1. Haluskan bahan makanan sampai lembut
2. Ambil 1 gr sampel kemudian masukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi 9 ml
nafis lalu di vortex
3. Ambil 0,1 ml dari tabung yang telah di vortex, kemudian masukkan ke dalam
tabung reaksi yang berisi 9 ml. Nafis lakukan hingga pengenceran ke-6
4. Dari pengenceran ke-4, 5,6 di plating ke media PCA dengan cara pour plate atau
spread plate. Tunggu hingga beku lalu bungkus dengan kertas buram.
5. Inkubasi pada suhu 300C selama 2 X 24 jam
6. Setelah tumbuh koloni pada media agar dihitung

c. Pewarnaan Gram
1. Ambil preparat, bilas dengan dengan alkohol kemudian
2. Tetesi suspensi kemudian fiksasi dan tetesi gram A
3. Tungu 1 menit kemudian di bilas, lalu di keringkan
4. Tetesi gram B , tunggu 1 menit , bilas lalu keringkan
5. Tetesi gram C sampai tetesan putih, bilas dan keringkan
6. Tetesi gram D , tunggu 45 menit, bilas dan keringkan
7. Tetesi imersi, amati pada mikroskop perbesaran 100X

d. Uji Air
- Uji Penduga
1. Menyerilkan tangan dan meja
2. Menyiapkan sampel air secara steril kemudian dihomogenkan dengan
mengocok sebanyak 25X
3. Memasukkan masing-masing 10 ml sampel ke dalam 3 tabung reaksi yang
masing-masing berisi 10 ml Laktosa Broth
4. Memasukkan masing-masing 1 ml sampel ke dalam 3 tabung reaksi yang
masing-masing berisi 10 ml Laktosa Broth
5. Memasukkan masing-masing 0,1 ml sampel ke dalam 3 tabung reaksi yang
masing-masing berisi 10 ml Laktosa Broth
6. Diinkubasi semua tabung pada suhu 35-370 C selama 2 X 25 jam
7. Mengamati terbentuknya gas tiap 24 jam
8. Mencatat jumlah tabung reaksi yang terbentuk gas (positif terbentuk gas) pada
tiap seri tabung (10 ml, 1 ml, 0,1 ml)
9. Menentukan nilai MPM

- Uji penegasan (Penguat)

1. Ambil hasil MPM
 2. Prosedur yang dilakukan seperti prosedur pewarnaan gram
3. Amati dengan perbesaran 100X

e. Identifikasi bakteri patogen (Hewani dan Nabati)

1. Ambil 1 koloni dengan ose secara aseptis pada hasil uji TPC
2. Letakkan pada kaca preparat yang telah di bersihkan dengan alkohol
3. Lakukan pewarnaan gram
4. Amati dengan mikroskop dengan diberi minyak imersi
5. Amati warna dan bentuknya

f. Antibiotik
1. Masukan media ke dalam cawan petri yang sebelumnya sudah di bagi 4 bagian,
tunggu sampai kering
2. Celupkan ose pada suspensi bakteri, kemudian celupkan ke dalam antibiotik
3. Ambil antiobiotik yang telah di beri suspensi , kemudian goreskan pada kuadran
1, tunggu 0 menit
4. Ambil antiobiotik yang telah di beri suspensi , kemudian goreskan pada kuadran
2, tunggu 5 menit (menit ke 5)
5. Ambil antiobiotik yang telah di beri suspensi , kemudian goreskan pada kuadran
3, tunggu 5 menit ( menit ke 10)
6. Ambil antiobiotik yang telah di beri suspensi , kemudian goreskan pada kuadran
4, tunggu 5 menit ( menit ke 15 )
7. Diinkubasi 48 jam

g. Larutan gula dan garam

1. Masukan media ke dalam cawan petri yang sebelumnya sudah di bagi 4 bagian,
tunggu sampai kering
2. Celupkan ose pada suspensi bakteri, kemudian celupkan ke dalam larutan gula/garam
konsentrasi 0,5 ; kemudian goreskan kepada kuadran 1
3. Celupkan ose pada suspensi bakteri, kemudian celupkan ke dalam larutan gula/garam
konsentrasi 3 ; kemudian goreskan kepada kuadran 2
4. Celupkan ose pada suspensi bakteri, kemudian celupkan ke dalam larutan gula/garam
konsentrasi 10 ; kemudian goreskan kepada kuadran 3
5. Celupkan ose pada suspensi bakteri, kemudian celupkan ke dalam larutan gula/garam
konsentrasi 15 ; kemudian goreskan kepada kuadran 4
6. Diinkubasi 48 jam

h. Pewarnaan sederhana ( Negatif )

1. Teteskan tinta cina pada ujung preparat , sebelahnya teteskan suspensi , lalu di geser
2. Biarkan preparat di udara , jangan di viksasi atau di panaskan
3. Baca mikroskop perbesaran 100 X