ABSTRAK

Teknik pemeriksaan radiografi oleh limfatik struktur limfatik normal regional ke anggota badan
belakang dijelaskan pada monyet kelinci, anjing dan rhesus. Penampakan radiografi kelenjar getah
bening normal dan kemungkinan penerapan pada ilmu kedokteran hewan ditunjukkan.
Mikrostruktur kelenjar getah bening normal diilustrasikan menggunakan injeksi intralymphatic in
vivo dari karet silikon radiopak berwarna cerah. Angiogenesis pada folikel germinal aktif selama
periode respon imun ditampilkan. Aplikasi teknik casting lebih lanjut disarankan.

Introduction

Kelebihan metode in vivo yang aman untuk menampilkan kelenjar panggul dan
retroperitoneal pada manusia termasuk deteksi dini penyakit dan pilihan yang tepat dari situs
optimal untuk biopsi. Selama dua dekade terakhir, pelajari radiografi struktur limfatik yang ada pada
anggota badan, dengan meratakan pembuluh getah bening dan mengenalkan media kontras iodium,
telah menjadi teknik yang mapan pada manusia (14, 15, 22). Karena kelenjar getah bening panggul
dan retroperitoneal tidak dapat diobati, limfatik telah menemukan aplikasi utamanya dalam
mengevaluasi tingkat limfoma ganas dan penyebaran neoplasma melalui struktur limfatik (10-16).

Pada hewan, pembuluh getah bening pertama kali ditemukan oleh Gaspar Aselius (1581-
1626) Milan yang mengenali lakteal di mesenterium anjing selama pembedahan. Topografi dan
anatomi struktur limfatik pada manusia dihargai oleh William Hunter (1784), namun baru pada
tahun 1929 demonstrasi radiografi kawanan getah bening dimungkinkan setelah injeksi media
iodinasi (11). Sejak saat itu, kanulasi getah bening sering dilakukan pada hewan untuk mempelajari
fisiologi aliran getah bening (6, 7). Studi tentang penampilan radiografi penyakit metastasis dari
tumor V2x di nodus popliteal kelinci (21) menyebabkan aplikasi limfadeno yang lebih luas
menggunakan Ultra Fluid Lipiodol, media kontras berminyak, yang menunjukkan pembuluh getah
bening dan nodus (17).

Sampai saat ini penekanan yang tidak semestinya pada kesulitan dalam teknik limfatik telah
menghalangi penggunaan ekstensif dalam praktik kedokteran hewan. Di laboratorium ini, minat
untuk memeriksa kelenjar getah bening kelinci, anjing dan monyet selama reaksi kekebalan muncul
karena kurangnya pemahaman tentang penampilan radiografi pada pria (4). Komunikasi ini
menggambarkan teknik lymphography dan penampilan radiografi yang dihasilkan pada hewan.
Selain itu, penerapan injeksi intralymphatic in vivo dengan menggunakan karet silikon radiopak
berwarna cerah diilustrasikan.

BAHAN DAN METODE

LYMPHOGRAPHY

Cannimulus lymiiphatic - Untuk sedasi, intra muscular Innovar Vet ', 0,25 ml per kg berat
badan di kelinci putih Selandia Baru, dan 0,10 ml per kg pada anjing peliharaan atau monyet rhesus
(Macacca mulatta) digunakan karena sifat minor dari prosedur. Ini mungkin menghindari komplikasi
paru dari anestesi barbiturat yang lebih lama dan dalam. Namun, banyak bentuk lain sedasi atau
anestesi ringan sama-sama cocok dan kerugian dari Innovar Vet termasuk kadang-kadang otot
berkedut dan inkontinensia. Saluran limfatik divisualisasikan dengan menyuntikkan sub-dermat 0,5
ml campuran bagian yang sama dari pewarna Paten Biru V2 dan 1% Lignokain 'ke dalam jaring jari
kaki pada Dorsum masing-masing kaki belakang. Setelah beberapa menit pewarna biru diangkut ke
pembuluh getah bening superfisial yang terlihat jelas melalui kulit kaki.

Dengan anestesi lokal, sayatan kulit 2 cm yang berdekatan dengan batang getah bening
dibuat pada aspek medial hindleg distal. Pewarna biru diperah di atas batang getah bening sehingga
mudah terlihat. Kapal yang paling sesuai untuk cannulation adalah buncit dengan menempatkan
jahitan linen hitam yang terikat erat di sekitar saluran getah bening dan sejumlah kecil jaringan lunak
di dekatnya, di dekat ujung atas sayatan. Penghapusan jahitan ini setelah kanulasi getah bening
difasilitasi dengan memasukkannya melalui tepi kulit dimana bisa dipotong dengan gerakan minimal
(Gambar lA).

Binatang itu kemudian tidak bergerak. Posisi telentang dengan kaki yang melebar sangat
cocok untuk menyelaraskan jarum limfatik dan pembuluh getah bening. Sebagai alternatif, hewan
itu ditempatkan di celah lateral, dan kanapan getah bening di satu sisi diikuti dengan mengubah
hewan dan mengulangi prosedur di kaki yang berlawanan. Pesawat fasia yang menutupi limfatik
dengan lembut memotong ke arah bejana dengan menggunakan pisau bedah yang tajam.
Kerapuhan pembuluh getah bening kontraindikasi mencoba mengisolasi mereka sepenuhnya dengan
mengeluarkan lemak di sekitarnya. Jahitan kemudian ditempatkan di sekitar bejana 1,5 cm disekitar
jahitan occhLiding. Ini akhirnya digunakan untuk mengikat jarum getah bening di dalam lumen,

Ini akhirnya digunakan untuk mengikat jarum getah bening di dalam lumen, dan karena itu
satu simpul longgar dibuat dengan ujung yang tersisa dalam posisi yang mudah dijangkau.
Pengalaman memungkinkan untuk sering memasang jarum lymphography ke lumen limfatik selama
0,5 sampai 1 cm, sehingga tidak diperlukan jahitan dasi.

Sebelum meramalkan bejana getah bening diimobilisasi dengan jarum pengukur berukuran
25 yang dimasukkan dari kiri ke kanan di belakang jaringan lunak sekitarnya (Gambar 1B). Limfatik
dijaga tetap tenang dan sedikit terentang, dan dengan memegang jarum pengukur 30 dengan
tangan kiri dimasukkan ke dalam lumen dan maju kira-kira 0,5 cm dengan tangan kanan (Gambar
1C). Operator harus memastikan bahwa tidak ada ketegangan pada tabung penghubung yang
menyebabkan penarikan atau pemindahan jarum ini saat tangan dilepas untuk mengencangkan
jahitan yang menancapkannya ke dalam lumen. Pada saat ini perban kasa basah kecil - dilapisi pada
tabung yang difasilitasi immobili: ation. Jahitan yang ditutup kemudian dipotong dengan pisau bedah
yang berdekatan dengan tepi kulit yang dilepas tanpa gerakan (Gambar 1D). Kesuksesan cannulation
kemudian bisa disematkan dengan suntikan sejumlah garam z atau garam minim dengan tekanan
minimal pada plunger jarum suntik. Beberapa gelembung udara kecil melalui limfatik atau distensi
kelenjar getah bening berarti sistem utuh yang bisa digunakan untuk membedakan bahan kontras
radiografi.

Radiografi - Lipiodol4 Ultra Cair, campuran 37% yodium yang mengandung Jahitan untuk
menghindari lymphedema berikutnya dan penyembuhan luka lambat. Radiograf ventrikelal
abdomen, panggul dan anggota tubuh hewan menunjukkan batang getah bening dari kedua nodus
poplite ke daerah para-aorta (Gambar 3). Faktor paparan yang sesuai sekitar 90kv dan 200 Mas
menggunakan focal spot 0,3 mm dan jarak fokus film 36 untuk kelinci 3 kg atau 5 kg. Film butiran
RPM5 tidak diputar memberikan definisi radiografi yang sangat baik pada hewan laboratorium kecil,
namun sebuah kaset Dan grid direkomendasikan untuk mata pelajaran yang lebih besar Teknik
perbesaran primer sederhana memberi tambahan tambahan yang berguna untuk detil radiografi (2).

Setelah dua puluh empat jam UFL telah meninggalkan pembuluh getah bening dan terjebak
di dalam parenkim nodus regional yang dapat dilihat pada ventortorsal, Radiografi miring dan
lateral. Kelenjar getah bening yang memiliki kelainan dengan tekstur agak granular dan kontur halus
terlihat pada Mamalia normal (Gambar 4). Simpul ini tetap radiopak selama beberapa bulan dan
dapat diamati pada pemeriksaan radiografi berikutnya untuk mendeteksi perubahan pada pola
kontras yang mengindikasikan penyakit progresif. Hilangnya media yang buram pada bulan-bulan
berikutnya adalah temuan normal, setelah pemeriksaan kedua dapat dilakukan saat studi lebih
lanjut diperlukan.

Perhatian - Teknik bedah aseptik sangat penting untuk mencegah infeksi luka dan jahitan
kulit dikeluarkan setelah sekitar lima hari. Komplikasi yang paling penting yang dijelaskan segera
setelah pengenalan limfiks3 adalah karena pengendapan bahan kontras berlebih yang berlebihan di
tempat tidur vaskular paru-paru (5, 13). Hal ini mengakibatkan pneumonitis kimia (10). Sekuele
semacam itu dalam penelitian kami hampir dapat dihindari dengan teknik yang bagus. Pelabelan UFL
telah menunjukkan bahwa media kontras berminyak sedikit disaring di tempat tidur vaskular paru-
paru setelah semua limfogram (18) dan menyebabkan sedikit perubahan pada fungsi pernafasan (9).
Namun, gunakan Dosis yang dianjurkan, ini tidak signifikan secara klinis dan perubahan paru-paru
karena pemecahan UFL terhadap asam lemak bebas biasanya dihasilkan dari penilaian klinis yang
buruk, seperti kegagalan untuk mengurangi dosis pada subjek dengan penurunan jaringan
limforetikular karena pemberian Obat imunosupresif (3). Reaksi alergi terhadap media kontras yang
mengandung iodium (5), Patent Blue V, atau Lignocaine (10), memberikan manifestasi lokal atau
umum jarang terjadi dengan dosis normal, dan tidak terjadi pada pengalaman kami.

SILICONE RASTING CASTING DARI MIKROKIRKULASI LYMPH

Cannulation limfatik dilakukan dengan metode yang serupa dengan yang telah dijelaskan
untuk limfatik. Mikrofil6, senyawa karet silikon radiopak berwarna cerah, diperkenalkan dengan
menggunakan jarum pengukur 30 dengan berat 4 lb pada plunger semprit (Gambar 2). Hal ini
memungkinkan aliran media casting. Kapal dan nodus pada kelompok poplitea, femoralis dan ilio-
lumbar diisi sekitar 15 menit (Gambar 8). Waktu gel dari media pengecoran radiopak kira-kira 100
menit bervariasi seperti warna yang digunakan. Kelenjar dan pembuluh darah diangkat dengan
diseksi yang hati-hati saat dipasang. Ini dibersihkan dalam alkohol dan metil salisilat sebagai berikut:
(prosedur ini biasanya dilakukan dua sampai tiga jam setelah injeksi) 1. Tissue-containing node
direndam dalam larutan garam selama dua puluh empat jam. 2. Pada hari-hari berturut-turut berikut
spesimen didehidrasi selama dua puluh empat jam masing-masing dengan larutan etil alkohol segar
25, 50, 75 dan 95% serta alkohol absolut pada suhu kamar. 3. Spesimen ditempatkan dalam metil
salisilat sintetis sampai jaringan sekitarnya menjadi transparan. Gips diperiksa menggunakan
mikroskop stereo-binokular pada permukaan luar atau permukaan. Sebuah cast berwarna
mikrosirkulasi limfatik di dalam masing-masing kelenjar getah bening diungkapkan oleh sectioning.
Detil menit dari sistem sinusoidal di dalam kelenjar kemudian bisa diperiksa dengan mikroskop
stereo binokular atau pembesaran foto sederhana.
 RESULT

LYMPHOGRAPHY

Radiografi yang diambil selama atau segera setelah injeksi media kontras, menunjukkan
batang normal afferent dan efferent ke kelenjar popliteal dan aortoiliac pada kelinci (Gambar 3).
Penampilan manik-manik dari bejana karena katup normal terlihat dan dari satu atau dua batang
popliteal eberita berkaliber besar, beberapa limfatik yang lebih kecil berlari di samping bejana utama
sampai ke tingkat pelvis. Pada tingkat yang lebih tinggi, dua atau lebih saluran periaortik melakukan
materi kontras ke duktus toraks yang biasanya tidak divisualisasikan dengan menggunakan dosis
yang dijelaskan. Setelah 24 jam limfadenogram (Gambar 4) menunjukkan kelenjar getah bening
popliteal unilateral tunggal. Kelompok kelenjar femoralis kecil divisualisasikan. Pada tingkat tulang
panggul, dua atau lebih simpul ilio-lumbar yang lebih besar diproyeksikan di atas sakrum di setiap
sisinya. Pada anjing (Gambar 5A, B, C, D) penampilannya serupa dengan kelinci kecuali nodus para-
aorta kecil pada tingkat lumbar bagian atas juga tidak jelas. Dalam keadaan yang tidak biasa, seperti
dugaan cedera pada saluran toraks, sejumlah besar bahan kontras dapat digunakan. Biasanya hal ini
harus dihindari karena UFL yang memasuki saluran toraks akhirnya akan disimpan di paru-paru.
Dalam monyet rhesus, satu atau dua batang saphena panjang divisualisasikan setelah cannulation
limfatik di kaki belakang (Gambar 6). Ini biasanya bercabang di paha bagian atas menjadi beberapa
pembuluh aferen pada kelompok kecil kelenjar getah bening femoral dan iliaka. Batang eferen
menyebabkan saluran peri-aorta dan dari situ ke chyli cisterna pada tingkat Ll di atas dimana saluran
toraks melakukan getah bening ke persimpangan pembuluh darah jugular dan subklavia. Pada 24
jam pembuluh darah itu kosong dan nodus limfatik radiopak (limfadenogram - Gambar 6) terlihat
pada kelompok femoral, iliac dan para-aortik. Tampilan radiografi simpul ini serupa dengan yang ada
pada manusia. Margin yang dibatasi dengan jelas dengan parenkim sedikit berbintik dan defek
radiolusen karena hila mudah diidentifikasi pada kelenjar normal.

SILICONE RASTING CASTING DARI MICROKIRKULASI LYMPH

Pemeran normal kelenjar getah bening kelinci yang diteliti menunjukkan sinus marjinal kira-
kira 50 sampai 100, diameter u di mana banyak sinusoid perantara bergerak mengelilingi folikel ke
jaringan mirip spons di tengah simpul (Gambar 9). Canniculi getah bening ke sistem pada hila nodus
individu mengarah langsung ke satu atau dua batang besar yang lebih besar yang melaluinya
mengalir ke nodus atau pembuluh yang berdekatan. Detil menit sinusoid intranodal * dengan ukuran
sangat kecil (kira-kira 24L) menunjukkan luas permukaan mikrosirkulasi limfatik intranodal.
Penggunaan pemeran semacam itu untuk mempelajari perubahan karena respons imun di daerah
nodus limfatik poplitea terhadap suntikan antigen Keyhole Limpet Hemocyanin7 diilustrasikan
(Gambar 10). Mikrofil disuntikkan untuk mendapatkan kemungkinan perubahan struktur limfatik
selama antibodi diketahui diproduksi oleh kelinci (22, 23). Pembentukan pembuluh getah bening
baru di dalam folikel germinal (angiogenesis) ditunjukkan dengan jelas di nodus popliteal regional
terhadap suntikan antigen setelah periode delapan hari. Temuan menarik ini tidak dapat dideteksi
dengan radiografi in vivo atau in vitro dari keseluruhan kelenjar getah bening dengan teknik saat ini
(Gambar 11). Namun, radiopasitas karet silikon memungkinkan perbandingan secara in vivo dari
radiografi kelenjar getah bening dengan microstrutcture sebenarnya secara in vitro.

Pengetahuan sekarang tentang anatomi kelenjar getah bening diturunkan dari bagian
histologis serial dari keseluruhan irisan simpul atau gambar lucida kamera (6). Gipsum arteri dan gips
limfatik parsial dengan injeksi langsung nodus juga memberikan informasi yang berguna (19).
Metode yang dijelaskan berbeda dari penelitian sebelumnya karena memungkinkan perbandingan
tiga dimensi di dalam keseluruhan kelenjar getah bening dengan radiografi in vivo atau in vitro
setelah pemindahannya. Teknik ini nampaknya sangat berguna untuk menunjukkan mikrosirkulasi
nodus di berbagai daerah yang sudah diketahui oleh penelitian pengambilan sampel timid tipis T3
untuk memiliki perbedaan fungsional (1) yang sangat penting bagi pemahaman mekanisme
kekebalan tubuh. Studi pendahuluan kami, yang menunjukkan bahwa pertumbuhan sinusoidal
limfatik ke pusat germinal aktif terjadi pada respons kekebalan, menggambarkan pembentukan
mekanisme transportasi baru yang penting selama reaksi humoral ini. Ini tidak berbeda dengan
angiogenesis dalam mengembangkan penyakit neoplastik (8). Banyak fitur mikrosirkulasi pada
penyakit, terutama pada keganasan, saat ini belum diketahui. Ini dapat ditunjukkan dengan suntikan
sekuensial pada hewan hidup dari limfatik aferen dan suplai arteri ke kelenjar getah bening yang
memberikan pandangan simultan tentang sinusoid limfatik dan suplai darah. Radiopasitas senyawa
karet silikon yang dideskripsikan membuatnya sangat sesuai untuk pemeriksaan eksperimental
terhadap penampilan radiografi in vivo dan mikrosirkulasi sejati. Prinsip ini tidak hanya berlaku
untuk kelenjar getah bening tapi juga untuk semua organ dan menghindari beberapa perangkap
yang melekat dalam mencoba perbandingan radiografi dengan bagian histologis serial.

UCAPAN TERIMA KASIH

Penulis ingin menyampaikan penghargaan atas bantuan teknis Nyonya Christine Oliver untuk
persiapan spesimen dan radiografi. Foto-foto tersebut ditulis oleh Departemen Ilustrasi Medis
Universitas Toronto, dan manuskrip ini diketik oleh Nyonya Glenys Hodgkinsono dan Miss Cathy
Gammon.

Apresiasi juga diungkapkan kepada Dr. L. R. Christensen, Direktur, Divisi Laboratorium

Animal Science, atas kerjasamanya dalam menyediakan peralatan dan fasilitas.