Identification and Quantitative Analysis of 2-Phenylethanol as Major Impurity

in Bromadol by HPLC

Identifikasi dan Analisis Kuantitatif 2-phenylethanol sebagai Pengotor Utama di

Bromadol oleh HPLC

Abstract (Abstrak): Bromadol dapat berfungsi sebagai agen yang kuat dan
serbaguna dalam kimia obat. Dalam tulisan ini, 2-phenylethanol pertama kali
diidentifikasi sebagai pengotor utama dalam sampel Bromadol komersial dengan
HPLC. Metode analisis kuantitatif HPLC untuk pengotor 2-fenilethanol di Bromadol
juga telah dibentuk untuk pertama kalinya. Dengan metode analisis HPLC baru,
pengotor 2-fenilethanol ditemukan menjadi 9,6% berat. Diidentifikasi pengotor utama
2-phenylethanol dapat berhasil dihapus oleh pemanasan dengan vakum, yang
memberi cara mudah untuk memurnikan Bromadol untuk produksi massa

Keywords: HPLC, Bromadol, 2-phenylethanol.

1. Introduction (Pengenalan)
Bromadol (Gambar 1) pertama kali dikembangkan oleh Daniel Lednicer di
Upjohn pada tahun 1970 sebagai analgesik narkotik kuat [1].

Penelitian awal menunjukkan bahwa Bromadol sekitar 10'000 kali kekuatan morfin
[2] pada model hewan. Penelitian terbaru [3] diberi nilai x504 morfin untuk lebih aktif
isomer trans Bromadol. Antinociceptive ED50 tikus pada hotplate untuk Bromadol
adalah 13,4 mg /kg[3] dan Ki mengikat nilai untuk μ-opioidreceptor dari Bromadol
1.49 nM [3]. Baru-baru ini, Bromadol disiapkan dan digunakan sebagai regulator
untuk sistem reseptor ligan ORL-1 nociceptin/orphanin FQ [4]. Bromadol juga
derivafat senyawa timbal dari 4-amino-4-arilsikloheksanon [5,6,7,8,9] yang dapat
berfungsi sebagai kelas analgesik ampuh [3,6,7]. Hubungan aktivitas struktur (SAR)
dari senyawa seri ini telah dibahas [10,11]. substitusi halo p mengoptimalkan
kemampuan senyawa untuk mendapatkan akses ke reseptor analgesik, sedangkan m-
OH substitusi diinduksi aktivitas antagonis narkotik [10]. konformasi trans dan
substituen hidrofobisitas pada atom C yang memiliki gugus OH dalam inti
sikloheksanol yang paling penting bagi aktivitas analgesik [11]. Sampai saat ini,
banyak literatur [2,4,7,12,13,14] telah dilaporkan mengenai tentang sintesis
Bromadol. jalan sintesis yang paling banyak digunakan diuraikan dalam skema 1.

Sebagai Bromadol bisa berfungsi sebagai agen yang kuat dan serbaguna dalam kimia
obat, itu sangat penting untuk mengidentifikasi pengotor dalam Bromadol dan
membangun metodologi kontrol kualitas untuk produksi. Namun, beberapa literatur
telah dilaporkan mengenai masalah ini sampai sekarang.

Dalam makalah ini, kami mencoba untuk mempekerjakan HPLC untuk

mengidentifikasi dan analisis kuantitatif pengotor di Bromadol (The Bromadol sampel
disumbangkan oleh Beijing Realchem Technology Co, Ltd sebagai hadiah).

2. Eksperimental
Pertama, sampel Bromadol komersial dilarutkan dalam metanol absolut dan
konsentrasi ditunjukkan pada Tabel 1.
 Larutan kemudian dikenakan analisis HPLC. Spektrum HPLC dan hasil analisis
yang ditunjukkan pada Gambar 2 dan Tabel 2 masing-masing.

Sebuah fase: CH3CN (50%),

fase B: H2O

Deteksi panjang gelombang: Volume Injeksi 250 nm: 10 uL suhu Kolom: 40 ° C

Kolom: Inertsil ODS-SP 5um 4.6x 250 mm

Seperti ditunjukkan dalam Gambar 2 dan Tabel 2, waktu retensi Bromadol adalah
17,392 menit dengan persentase puncak daerah 95,692% (No.7, Tabel 2). Banyak
puncak pengotor juga dapat diamati. Waktu retensi dari puncak pengotor utama
adalah 4,379 menit, 7,312 min, 11,395 min, 14,972 min masing-masing.
Selanjutnya, kami mencoba untuk mengidentifikasi pengotor utama dalam sampel
Bromadol komersial. Seperti pengotror dapat selalu datang dari yang terakhir langkah
sintesis, rute sintesis yang paling banyak digunakan dari Bromadol (Skema 1.) hati-
hati dipelajari. Kami berspekulasi bahwa pengotor utama mungkin 2-phenylethanol
yang mungkin hasil dari hidrolisis bromida phenethylmagnesium.

Sebuah larutan standar 2-phenylethanol dalam metanol absolut disiapkan dan

konsentrasi ditunjukkan pada Tabel 3. Larutan standar 2-phenylethanol menjadi
sasaran HPLC di bawah kondisi analisis yang sama yang telah digunakan untuk
larutan sampel Bromadol komersial. Spektrum HPLC dan hasil analisis dari larutan 2-
phenylethanol standar yang ditunjukkan pada Gambar 3 dan Tabel 4 masing-masing.

Sebuah fase: CH3CN (50%), fase B: H2O

Deteksi panjang gelombang: Volume Injeksi 250 nm: 10 uL suhu Kolom: 40 ° C

Kolom: Inertsil ODS-SP 5um 4.6x 250 mm
Seperti ditunjukkan dalam Gambar 3 dan Tabel 4, waktu retensi dari 2-phenylethanol
adalah 4,375 menit dengan persentase puncak daerah 96,156% (No 2, Tabel 4).
Waktu retensi 2-phenylethanol adalah sama sebagai salah satu pengotor utama dalam
sampel Bromadol komersial (lihat Gambar 2). Hasil ini menunjukkan bahwa salah
satu pengotor utama dalam sampel Bromadol komersial adalah 2-phenylethanol.

Berikutnya, kami mencoba untuk menganalisis pengotor 2-phenylethanol dalam

sampel Bromadol komersial. Larutan sampel Bromadol komersial dan standar
larutan2-phenylethanol menjadi sasaran analisis HPLC selama 3 kali dalam kondisi
yang sama yang telah digunakan sebelumnya. Daerah puncak 2-phenylethanol dari
dua larutan yang ditunjukkan pada Tabel 5.

Dengan data luas puncak dari 2-phenylethanol pada Tabel 1, Tabel 3 dan Tabel 5,
konsentrasi pengotor 2-phenylethanol dalam larutan sampel Bromadol komersial
dihitung menjadi 0,0987 mg \/ml dan akun 2-phenylethanol untuk 9,6% dari sampel
berat komersial Bromadol. 2-phenylethanol adalah minyak tidak berwarna dengan
titik 219 ° C mendidih, kita berspekulasi bahwa hal itu bisa dihapus dari Bromadol
dengan mengeringkan di bawah vakum tanpa menyebabkan dekomposisi Bromadol.
0,5 gram sampel Bromadol komersial ditempatkan ke dalam vakum pengeringan oven
pada 45 ° C selama 12 jam. Setelah pengeringan di bawah vakum, sampel Bromadol
dilarutkan dalam metanol absolut dan konsentrasi ditunjukkan pada Tabel 6.
Bromadol solusi sampel dikeringkan menjadi sasaran HPLC di bawah kondisi analisis
yang sama yang digunakan sebelumnya. Spektrum HPLC dan analisis data yang
ditampilkan pada Gambar 4 dan Tabel 7 masing-masing.

Sebuah fase: CH3CN (50%), fase B: H2O

Deteksi panjang gelombang: Volume Injeksi 250 nm: 10 uL suhu Kolom: 40 ° C

Kolom: Inertsil ODS-SP 5um 4.6x 250 mm
Sampel Bromadol kering kemudian mengalami 1H-NMR analisis dan spektrum 1H-
NMR ditunjukkan pada Gambar 5.

Seperti ditunjukkan dalam Gambar 5, spektrum 1H-NMR sampel Bromadol kering itu
cukup bersih yang juga menunjukkan bahwa pengotor 2-phenylethanol telah berhasil
dihapus. Hasilnya juga memberikan metode yang mudah untuk memurnikan
Bromadol untuk produksi massa.

3. Kesimpulan
Sebagai Bromadol bisa berfungsi sebagai agen yang kuat dan serbaguna dalam kimia
obat, itu sangat penting untuk mengidentifikasi kotoran dalam Bromadol untuk
memberikan instruksi untuk pemurnian dan produksi massa. Hal ini juga penting
untuk membangun metodologi kontrol kualitas yang nyaman dan dapat diandalkan
untuk senyawa ini. Namun, beberapa literatur telah dilaporkan mengenai tentang
masalah ini sampai sekarang.
Pada artikel ini, 2-phenylethanol telah diidentifikasi sebagai salah satu pengotor
utama di Bromadol komersial oleh HPLC untuk pertama kalinya. Pengotor utama ini
harus datang dari yang terakhir langkah sintesis.
HPLC metode analisis kuantitatif untuk 2-phenylethanol di Bromadol juga telah
dibentuk untuk pertama kalinya. Metode baru dapat digunakan untuk pengendalian
kualitas Bromadol. Dengan metode analisis baru, ditemukan bahwa 2-phenylethanol
pengotor menyumbang 9,6% berat dalam sampel Bromadol komersial.
Diidentifikasi pengotor 2-phenylethanol dapat dihilangkan di bawah vakum pada 45 °
C selama 12 jam yang memberikan metode yang mudah untuk memurnikan Bromadol
untuk produksi massal. penelitian lebih lanjut untuk mengidentifikasi kotoran lainnya
dalam Bromadol sedang berlangsung di laboratorium kami dan hasilnya akan
dilaporkan dalam waktunya.