Nama : Komang Trisna Arumdati

NIM : P07134120057

Kelas : IIB

Mata Kuliah : Bakteriologi

SOAL

1. Tuliskan cara membuat hapusan dan cat warna yang dipakai

2. Gabarkan/foto bentuk-bentuk bakteri dengan cat warna yang kalian pakai

JAWABAN

1. Pewarnaan sederhana adalah pewarnaan bakteri dengan menggunakan satu jenis

cat yang bertujuan untuk mengetahui melihat bentuk dan susunan sel bakteri. Sifat
cat yang biasa digunakan adalah bersifat basa agar warna dari cat dapat berikatan
dengan dinding bakteri. Contoh cat yang digunakan dalam pewarnaan sederhana
adalah crystal violet yang akan memberikan hasil warna ungu pada bakteri.
Alat dan bahan yang digunakan pada praktikum ini yaitu ose, lampu spiritus/ lampu
bunchen, jembatan pengecatan, methyleen blue, air garam fisiologis 0,85% (NaCl
0,85%)/aquadest steril, objek glass, dan tissue. Sedangkan, bahan pemeriksaan
adalah koloni bakteri Bacillus.
Tahapan terpenting dalam pewarnaan sederhana adalah proses fiksasi, yang mana
berfungsi untuk mempertahankan posisi sel, membunuh sel, dan melekatkan sel
dengan preparat sehingga sel bakteri tidak hilang ketika proses pencucian. Fiksasi
dilakukan dengan dengan cara melewatkan gelas objek di atas nyala api sebanyak
3-
4 kali. Berikut adalah tahapan pewarnaan sederhana dengan menggunakan
methyleen blue yang akan memberikan hasil berwarna biru pada sel bakteri.
a) Bersihkan kaca objek dengan menggunakan tissue sebelum digunakan. Hal
ini bertujuan agar kaca objek terlepas dari sisa lemak dan kotoran yang
menempel sehingga pengamatan tidak akan terganggu.
b) Fiksasi kaca objek dengan melewatkannya di atas lampu bunchen sebanyak
3-4 kali dan bolak-balik
c) Pada ujung obyek glass yang berbentuk sseperti bunga es diisi nomor atau
tanda yang disepakati dengan pensil glass
 d) Kemudian, ambil ose dan fiksasi di atas lampu bunchen sampai merah, lalu
dinginkan
e) Apabila sampel cair, ambil gunakan ose dan langsung ratakan di permukaan
objek glass secara merata dengan luas lbk 1 cm2. Namun, apabila sampel
koloni, maka perlu diteteskan NaCl secukupnya di atas objek glass dengan
menggunakan ose. Setelah itu, ambil koloni bakteri dengan cara
menggoreskan ose di dasar koloni tanpa melukai media tumbuhnya.
f) Ratakan apusan dengan cara memutar ujung ose tersebut sehingga koloni
bercampur secara merata
g) Apusan difiksasi di atas lampu bunchen agar sel-sel bakteri dapat melekat
dengan objek glass
h) Teteskan cat metilen biru hingga menutupi seluruh permukaan apusan dan
tunggu 1-2 menit
i) Selanjutnya dicuci dengan air mengalir tidak langsung dengan posisi preparat
miring
j) Keringkan kaca obyek dengan kertas hisap atau tissue dengan cara
menempelkan kertas hisap / tissue. Jangan menggesek permukaan apusan.

2. Berikut adalah gambar atau foto hasil pewarnaan sederhana menggunakan

methyleen blue terhadap bakteri Bacillus. Pada gambar terlihat jelas sekumpulan
bakteri yang berwarna biru dan berbentuk batang (basil).