MAKALAH

Senyawa triterpenoid dari ekstrak metanol daun mangrove

(Sonneratia alba) dan uji aktivitas antikolesterol

Makalah Ini Diajukan Untuk Memenuhi Ujian Tengah Semester

Mata Kuliah Kimia Bahan Alam

Dosen Pengampu: Prof. Dr. Weny J.A Musa, M.Si

Disusun Oleh:

Fatmawati Kadir (441418044)

UNIVERSITAS NEGERI GORONTALO

JURUSAN KIMIA
PROGRAM STUDI PENDIDIKAN KIMIA
TAHUN PELAJARAN 2020/2021

i
 KATA PENGANTAR

Segala puji serta syukur pada Allah Swt yang telah memberikan kekuatan cinta
hingga seluruh makhluknya bisa merasakan indahnya kebersamaan. Juga kepada rasulullah
Saw kita curahkan selawat dan salam semoga kita mendapatkan syafaatnya di yaumil akhir
nanti. Kita bisa belajar dari sejarah beliau yang memberikan pengetahuan yang luar biasa
untuk setiap insan yang punya mimpi untuk berkarya.

Kali ini penulis menyempatkan untuk menyajikan sebuah tulisan yang cukup ringkas
sebagai kewajiban menunaikan perintah dari dosen pengampu mata kuliah kimia bahan alam
dengan judul makalah “Senyawa triterpenoid dari ekstrak metanol daun mangrove
(Sonneratia alba) dan uji aktivitas antikolesterol”
Semoga penulisan ini bisa memberikan pencerahan pola pikir kita ke arah yang lebih
positif lagi. Amin ya rabb. Jazakallah Khairan katsiron.

Gorontalo,16 Oktober 2021

Fatmawati Kadir

ii
 BAB I

PENDAHULUAN

A. LATAR BELAKANG
Tumbuhan mangrove (Sonneratia alba) adalah grup tumbuhan yang memiliki
tinggi atau perdu dan tumbuh di daerah pantai tropis dan subtropis. Tumbuhan ini
memiliki ciri morfologi yang khas dan dapat bertahan hidup pada lingkungan dengan
salinitas tinggi ( Analuddin dkk. 2018). Beberapa mangrove telah dimanfaatkan sebagai
herbal dan ekstraknya memiliki aktivitas biologis pada manusia, hewan, dan bakteri
patogen.Sonneratia alba merupakan salah satu tumbuhan mangrove dalam famili
lythraceae. Sonneratia alba tersebar luas di wilayah pesisir Asia Tenggara dan Samudera
Hindia. Tanaman ini telah digunakan secara tradisional di masyarakat pesisir Indonesia
untuk mengobati luka, diare, dan penyakit demam (Prabhu & Guruvayoorappan, 2012).
Dalam penelitian sebelumnya, penyelidikan fitokimiaSonneratia albatelah dilaporkan
mengandung triterpenoid, steroid, dan senyawa flavonoid (Kumar dkk. 2011; Musa dkk.
2018).
Tren konsumsi makanan praktis dan instan seperti makanan cepat saji dan
makanan yang diawetkan berkembang pesat di masyarakat. Jenis makanan ini dapat
membahayakan tubuh manusia, karena mengandung asam lemak jenuh dan kolesterol
tinggi. Kolesterol merupakan senyawa penting bagi tubuh untuk mensintesis zat-zat
penting, seperti membran sel, dan bahan isolasi untuk sel saraf, serta hormon seks dan
ginjal anak. Berdasarkan data WHO (2011) penyakit kardiovaskular merupakan penyebab
kematian terbesar di dunia. Dari 57 juta kematian penduduk dunia, 17,3 juta (30%)
kematian disebabkan oleh penyakit kardiovaskular, terutama serangan jantung (7,3 juta)
dan stroke (6,2 juta). Diperkirakan pada tahun 2030 23,6 juta orang di dunia akan
meninggal karena penyakit kardiovaskular.

Pengobatan yang telah dilakukan untuk menurunkan kadar kolesterol adalah

dengan menggunakan obat-obatan sintetik. Obat sintetik memiliki berbagai kelemahan
antara lain harga yang mahal, efek samping yang ditimbulkan, dan ketidaknyamanan
dalam pengobatan. Berdasarkan Oleh karena itu, pencarian senyawa obat dari alam
masih perlu dilakukan (Masek dkk. 2017). Tumbuhan mangrove merupakan sumber daya
hayati yang sangat penting di Sulawesi Tenggara karena mendukung kehidupan satwa
endemik seperti Anoa (Buballus sp) dan Elang Sulawesi serta mengandung antioksidan
dan nutrisi yang potensial untuk dimanfaatkan bagi kesejahteraan manusia (Septian dkk.
2016). Mangrove umbuh di lingkungan yang ekstrim karena kemampuannya menghasilkan
metabolit sekunder dan berperan sebagai antioksidan untuk beradaptasi dengan berbagai
faktor lingkungan ekstrim di pantai.Analudin, ( 2018) melaporkan bahwa ekstrak teh daun
mangrove ( Sonneratia alba) mampu menurunkan kadar kolesterol pada mencit pada
kisaran 33,33 hingga 53,67%. Senyawa triterpenoid diketahui memiliki berbagai aktivitas
seperti antikanker, antitumor, antibakteri, antiinflamasi, dan antikolesterol. Berdasarkan
latar belakang di atas, maka perlu dilakukan isolasi senyawa triterpenoid dari daun
tanaman mangrove dan uji aktivitas antikolesterol dari senyawa hasil isolasi tersebut.
B. RUMUSAN MASALAH
1. Apa saja bahan dan instrumentasi penelitian daun mangrove?
2. Bagaimana ekstraksi dan pemurnian senyawa ?
3. Bagaimana penentuan kolesterol?
4. Bagaimana uji triterpenoid dengan reaksi Libermann-Burchard
C. TUJUAN
1. Untuk mengetahui bahan dan instrumentasi penelitian daun maangrove
2. Untuk mengetahui ekstraski dan pemurnian senyawa
3. Untuk mengetahui penentuan kolesterol
4. Untuk mengetahui uji triterpenoid dengan reaksi Libermann-Burchard
 BAB II

PEMBAHASAN

A. Bahan dan instrumentasi

Spesimen penelitian adalah daun mangrove yang dikumpulkan dari Desa Dulupi,
Kabupaten Boalemo, Provinsi Gorontalo, Indonesia pada bulan Maret 2017. Bahan
kimia yang digunakan dalam penelitian ini adalah etil asetat,n-heksana, metanol, air
suling, silika gel G60 (70-320 mesh), kromatografi lapis tipis (KLT), pelat silika,
octadecylsilane (ODS) RP- 18, H2SO4 10% dalam etanol, alkohol 70%, dan garam
kolesterol.Instrumen yang digunakan erlenmeyer, tabung mikro, pipet mikro,
spektrometer uv-vis, IR, 1-D dan 2- D NMR dan evaporator.

Gambar 1. Kurva kalibrasi pengukuran anti-kolesterol

B. Ekstraksi dan pemurnian senyawa
Daun mangrove kering (1,5 kg) direndam dalam pelarut metanol 5 L selama 2
hari. Campuran lubang kemudian disaring melalui kertas saring dan filtrat kemudian
diuapkan di bawah tekanan reduksi pada 55 °C menggunakan rotavapor Buchi.
Ekstrak disaring melalui sumbat kapas diikuti dengan kertas saring Whatman dan
kemudian dipekatkan dengan menggunakan rotary vacum evaporator untuk menghasilkan
ekstrak kasar metanol. Ekstrak metanol (10 g) menjadi sasaran kromatografi cair di atas
silika gel menggunakan campuran elusi gradien n-heksana-EtOAc (10:0-0:10) sebagai
pelarut elusi, menghasilkan 7 fraksi (A–G). Fraksi C (0,15 g) dilakukan kromatografi
kolom di atas silika gel menggunakan campurann-heksana: EtOAc (9:1) sebagai pelarut
elusi, menghasilkan 30 fraksi (E01– E30) dan memberikan isolasi murni. Hasil pemurnian
senyawa tersebut ditentukan dengan KLT pada silika gel dan ODS dengan beberapa
sistem pelarut dan menunjukkan noda tunggal.

C. Penentuan kolesterol
Penurunan kadar kolesterol senyawa hasil isolasi ditentukan dengan perbandingan
dengan absorbansi blanko (larutan kolesterol). Larutan stok kolesterol dibuat dengan
mencampurkan garam kolesterol (100 mg) dalam 100 mL etanol (1000 ppm) pada suhu 45
 °C dalam penangas air. Untuk 0,025, 0,05, 0,1, 0,2, 0,3, dan 0,4 mL larutan kolesterol
dalam kuvet (BRAN® UV kuvet) ditambahkan asetat anhidrida (2 mL) dan H2JADI4 (0,1
mL) dan diencerkan dengan etanol hingga volume akhir masing-masing 5 mL (larutan
kosong). Ke dalam 0,5 mL larutan kolesterol ditambahkan 0,025, 0,05, 0,1, 0,2, 0,3, dan
0,4 mL senyawa hasil isolasi (1000 ppm), anhidrida asetat (2 mL) dan H2JADI4 (0,1 mL)
dan diencerkan dengan etanol hingga volume akhir masing-masing 5 mL. Setelah
diinkubasi dalam gelap selama 15 menit pada suhu kamar, absorbansi larutan diukur pada
423 nm (Ochani & D'Mello, 2009; Bachmid dkk. 2015). Eksperimen dilakukan secara
independen tiga kali dan rata-rata disajikan. Analisis statistik dilakukan dengan uji t dua
arah tidak berpasangan (Excel). Perbedaan dianggap signifikan pada *P < 0,05, **P <
0,01 dan ***P < 0,001.

D. Uji triterpenoid dengan reaksi Liebermann- Burchard

Beberapa kristal senyawa 1 dan 2 dilarutkan dalam kloroform dan ditambahkan
beberapa tetes asam sulfat pekat diikuti dengan penambahan 2-3 tetes anhidrida asetid.
Dalam hal ini senyawa hasil isolasi berubah menjadi biru ungu dan akhirnya terbentuk
warna hijau yang menunjukkan adanya triterpenoid ( Shanmugapriya dkk. 2012;
Situmeang dkk. 2016;Febrina dkk. 2017; Simorangkir dkk. 2017).

E. Hasil
Daun dari S. alba dikeringkan dan berturut- turut diekstraksi dengan metanol 96%.
Oleh karena itu, analisis fitokimia selanjutnya difokuskan pada ekstrak metanol, yang
dikromatografi di atas kolom yang dikemas dengan silika gel G60 dengan elusi gradien.
Fraksi berulang kali mengalami fase normal dan fase balik kromatografi kolom,
menghasilkan satu pentasiklik triterpenoid. Senyawa (20 mg), muncul sebagai jarum
putih.
Hasil penapisan fitokimia menggunakan pereaksi Liebermann-Burchard
menunjukkan bahwa kandungan isolat murni diduga merupakan senyawa triterpenoid
dengan perubahan warna kemerahan. Hasil IR (KBr) ditunjukkan padaTabel 1. Hasil uji
aktivitas antikolesterol ditunjukkan padaMeja 2. Kurva kalibrasi pengukuran
antikolesterol ditunjukkan pada: Gambar 1.
Senyawa terisolasi: jarum putih. 1H-NMR (500 MHz, CDCl3) : 2,22 (2H, m, H1), 1,65
(2H, m, H5), 1,42 (2H, m, H6), 1,44 (2H, m, H7), 1,07 (1H, H9 ), 140 (2H, m, H11), 1,41 (2H,
m, H12), 0,75 (1H, s, H13), 1,20 (2H, m, H15), 1,39 (2H, m, H16), 0,96 (1H, d, H18), 2,23
(1H, d, H19), 2,25 (2H, m, H21),2,22 (2H, m, H22), 0,94 (3H, s, H23), 0,96 (3H, s,H24), 0,85
(3H, s, H25), 0,75 (3H, s, H26), 1,00 (3H, s , H27), 1,59 (3H, s, H28), 4,58 & 4,60 (2H, s,
H29), 1,69 (3H, s, H30). 13CNMR (125MHz, CDCl3) : 39,7 (CH2, C1), 28,1 (CH2, C2), 79,7
(CH, C3), 40,1 (Cq, C4), (CH, C5), 19,6 (CH2, C6), 35,7 (CH2, C7), 43,3 (Cq, C8), 56,9 (CH,
C9), 38.4 (Cq, C-10), 26.9 (CH2, C11), 28.8 (CH2, C12), 40,2 (CH, C13), 48,6 (Cq, C14), 30,9
 (CH2, C15), 38.3 (CH2, C16), 49.2 (Cq, C17), 52.1 (CH, C18), 50.5 (CH, C19), 152.2 (Cq,
C20), 35.5 (CH2, C21), 42.2 (CH2, C22), 31,8 (CH3, C23), 16,2 (CH3, C24), 16,9 (CH3,
C25), 16,7 (CH3, C26), 15,2 (CH3, C27), 19,5 (CH3, C28), 110,2 (CH2, C29),22.2 (CH3, C30).

Meja 2
Menurunkan Kadar Kolesterol dalam Senyawa Isolat
mengura
konsentrasi (ppm) Daya serap kolesterol ngi
(%)
5 0,722 86,23 13,7
10 0,598 70,53 29,4
20 0,443 50,91 49,0
40 0,356 39,90 60,1
60 0,276 29,77 70,2
80 0,222 22,94 77,0
kendali (-) 0,83 99,90 0,10

F. Diskusi
Spektrum IR (KBr) hasil isolasi menunjukkan frekuensi serapan yang khas pada
3590 dan 1236 cm .-1. Spektrum ini menunjukkan vibrasi ikatan OH dan CO; penyerapan
diamati pada 897cm-1 disebabkan oleh getaran tak jenuh dari bidang CH (Souza dkk.
2011; Situmeang dkk. 2018). Getaran C=C ditunjukkan sekitar 1687cm-1 sebagai pita
yang sangat kuat; vibrasi regangan dan tekuk karena gugus metil diwakili oleh pita
pada 2395 cm-1 dan 1465 cm-1 dan sinyal pada 1385cm-1 disebabkan oleh vibrasi
metilen (Situmeang dkk. 2018). NS1Spektrum H-NMR menunjukkan mengungkapkan
kehadiran tujuh proton metil singlet padaH0.75, 0.85, 0.94, 0.96, 1.00, 1.59 dan 1.69
ppm (terintegrasi untuk 3H). Sebuah sextet dari satu proton di 2,23 ppm yang berasal
dari 19β -H adalah karakteristik lupeol. Proton H-3 menunjukkan kelipatan pada 3,15
ppm sementara sepasang singlet lebar padaH 4.58 danH 4,60 (1H, masing-masing)
menunjukkan proton olefin pada (H-29). Proton metilen Sp3 ditampilkan diH 1,20, 1,39,
1,40, 1,41, 1,42, 1,44, 1,65, 2,22, dan 2,25 ppm. Penugasan ini sesuai dengan struktur
Lup-20(29)- id-3β-ol) senyawa (Silva dkk. 2012; Prakash & Prakash, 2012).
NS 13Spektrum C NMR menunjukkan tujuh gugus metil pada [δc: 31,8 (C-23), 19,5 (C-
28), 16,8 (C-25), 16,7 (C-26), 16,2 (C-24), 15,2 (C-27) dan 22.2 (C-30)]; sinyal karena
gugus eksometilen pada [δc: 110,2 (C-29) dan 152,0 (C-20)]; sepuluh metilen, lima metin
dan lima karbon kuaterner ditugaskan dengan bantuan spektrum DEPT 135º (Waliullah
dkk. 2011). yang terdeshield singnal pada c 79,0 disebabkan oleh C-3 dengan gugus
hidroksil yang melekat padanya (Li dkk. 2018). Analisis spektral sebelumnya dan
perbandingan dengan data yang dilaporkan, membuat kami mengusulkan struktur
senyawa terisolasi sebagai triterpenoid pentacylic (Ara 2). Konfirmasi struktur terisolasi
dilakukan melalui 2D-NMR. percobaan (COSY dan HMBC). NS1H-1Spektrum H COZY
senyawa hasil isolasi menunjukkan beberapa lintas puncak seperti antaraH 2.23, H-19
dan satu Sp3 sinyal proton metilen (δH 2.25, H-21) dan Sp lain3 sinyal proton metin (δH
0,96, H-18); dan antara sinyal proton metin teroksigenasi (δH 1,69, H-30 dan Sp3
sinyal metilen (δH 1,65, H-2)16-19.
Dalam spektrum HMBC, sinyal proton metin padaH 3.15 (H-3) menunjukkan
puncak silang dengan sinyal karbon metil (δc 31,8, C-23) oleh J2 korelasi dan sinyal
karbon metil (δc 19.6, C- 6) oleh J3 korelasi. Sinyal metil sextet pada H 2.23 (H-19)
menunjukkan puncak silang dengan dua sinyal karbon metilen c 35.5 (C-21) dan c 110.2
(C-29)], sinyal karbon metana [δc 52.1 (C- 18), sinyal karbon metil [δc 22.2 (C-30)] dan
sinyal karbon kuaterner [δc 152.2 (C-20)]. Spektrum HMBC senyawa isolat ditunjukkan
padaGambar 3.

Gambar 2 . struktur Lup-20(29)-en-3β-ol) (Silva dkk. 2012).

Gambar 3. Korelasi HMBC senyawa isolat (Prakash & Prakash, 2012).

Pengukuran penurunan kadar kolesterol dilakukan dengan spektrometer UV-Vis.
isolat senyawa triterpenoid memiliki aktivitas terhadap penurunan kolesterol atau tidak.
Ekstrak senyawa triterpenoid pada deret konsentrasi yang sama berturut-turut adalah 5,
10, 20, 40, 60, dan 80 ppm. Dari setiap seri konsentrasi ditambahkan 0,5 mL isolat
senyawa triterpenoid kemudian dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang telah
ditambahkan standar kolesterol 100 ppm.
Setelah direaksikan larutan uji didiamkan di tempat gelap terlindung dari cahaya
selama 15 menit sesuai waktu yang dibutuhkan, didiamkan di tempat gelap terlindung
dari cahaya karena larutan kolesterol bersifat fotodegradasi tidak stabil terhadap cahaya
dan akan berubah menjadi kolesterol (Anggraini & Ali, 2017). Absorbsi diukur dengan
spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang 423 nm. Setelah serapan larutan uji
terbaca maka persen penurunan kolesterol dihitung dengan cara pengambilan kolesterol
awal sebelum ditambahkan pada sampel dikurangi pengambilan kolesterol setelah
ditambahkan ke dalam larutan sampel kemudian dibagi dengan serapan kolesterol awal
dan dikalikan sebesar seratus persen.
Berdasarkan perhitungan persentase penurunan yang dihasilkan, isolat
triterpenoid dengan konsentrasi 5 ppm dapat menurunkan kolesterol dengan cara:
13,7%, pada konsentrasi 10 ppm dapat mereduksi sebesar 29,4%, dengan konsentrasi 20
ppm dapat menurunkan kolesterol sebesar 40,9%, pada konsentrasi 40 ppm dapat
menurunkan kolesterol sebesar 60,1%, pada konsentrasi 60 ppm dapat menurunkan
kolesterol sebesar 70,2%, dan pada konsentrasi 80 ppm dapat menurunkan kolesterol.
menurunkan kolesterol sebesar 77,0 ppm. Hal ini terkait dengan kemampuan senyawa
triterpenoid dalam menurunkan kadar kolesterol. Penelitian olehBachmid dkk.( 2015)
melaporkan bahwa ekstrak etanol patikan

BAB III
PENUTUP
 tanaman bakau (Sonneratia alba) mudah ditemukan di Indonesia Barat dan
Utara. Tanaman mangrove memiliki potensi sebagai obat herbal. Tanaman
mangrove banyak digunakan dalam etnomedis untuk mengobati berbagai penyakit
seperti luka, diare, dan demam. Dalam studi sebelumnya,Ekstrak daun tumbuhan
mangrove dilaporkan memiliki aktivitas antikolesterol. Tanaman ini banyak
digunakan untuk mengobati berbagai penyakit seperti luka, diare, dan demam.
Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi senyawa triterpenoid dari fraksi etil
asetat daun mangrove dan uji aktivitas antikolesterol. Ekstraksi dilakukan dengan
metode maserasi menggunakan metanol96% sebagai pelarut. Isolasi dilakukan
dengan kromatografi kolom menggunakan kombinasin-heksana, etil asetat, dan
pelarut metanol. Penjelasan struktur ditentukan dengan analisis IR,1H-NMR, 13C-
NMR, 2D-NMR, dan spektroskopi MS serta dengan perbandingan dengan literatur.
Uji aktivitas antikolesterol dilakukan secara in vitro. Hasil penelitian menunjukkan
bahwa senyawa triterpenoid (lupeol) mampu menurunkan kolesterol dari
konsentrasi 5, 10, 20, 40, 60, dan 80 ppm adalah 13,7; 29.4; 49.0; 60,1; 70.2; dan
77,0% masing-masing. Karena itu,Saya senyawa solat (lupeol) memiliki aktivitas
antikolesterol.

DAFTAR PUSTAKA

Musa, W., Bialangi , N., Situmeang, B., & Silaban, S. (2019 ). Senyawa triterpenoid dari ekstrak daun
metanol daun mangrove (Sonneratia alba) dan uji aktivitas antikolesterol. JUrnal Pendidikan
Kimia, 18-23.