infeksi janin Tritrichomonas pada sapi betina dengan melakukan aborsi (keguguran) di

Wyoming, Amerika Serikat

Pengantar: Bovine trikomoniasis telah mewabah di Amerika Serikat sejak penemuannya

pada tahun 1930-an. Pengujian terhadap sapi digunakan pada alat reproduksi saat ini yang
diamanahkan pada 26 negara untuk mengontrol penyebaran penyakit. Meskipun kelaziman
kepala individu yang di Wyoming telah menurun sejak tahun 2000 sejak peraturan negara
dimulai, prevalensi lembu sapi tetap stabil dan penyakit tersebut terus memiliki distribusi
geografis yang luas. Salah satu faktor yang diabaikan dalam peraturan saat ini adalah dampak
yang menginfeksi sapi / sapi dalam masa penularan. Kedua, bisa jadi disebabkan Tritrichomonas
sebagai, organisme penyebabnya, sampai beberapa minggu pasca aborsi / partus. Kemampuan ini
memungkinkan mereka untuk menyebarkan penyakit meskipun tes pada sapi luas.

Presentasi kasus: Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menentukan prevalensi sapi
Wyoming terinfeksi T. fetus yang terdeteksi pada sapi / sapi dengan riwayat melakukan aborsi
dengan sampel telah diuji. Penelitian retrospektif ini mencakup semua kiriman ke Veterinary
Laboratory Wyoming Negara antara tahun 2000 dan 2010. Sapi / sapi dengan riwayat melakukan
aborsi di antara produsen Wyoming dites terhadap trikomoniasis. Secara keseluruhan kelaziman
9,7%. Selanjutnya, 4,5% janin positif digugurkan .

Kesimpulan: Data kami menunjukkan bahwa secara kolektif persentase sapi / sapi yang
baru saja mengalami keguguran positif untuk T. fetus dan dapat memainkan peran penting dalam
menjaga endemisitas trikomoniasis sapi.
Kata kunci: aborsi; sapi potong; trikomoniasis sapi; sapi; Tritrichomonas fetus.

PENDAHULUAN
Trikomoniasis sapi, disebabkan oleh Tritrichomonas fetus, yang merupakan penyakit
kelamin sapi. Sapi terinfeksi / sapi menunjukkan vaginitis, endometritis, aborsi dini dan
kemandulan (Bondurant, 2005; Felleisen, 1999). Penyakit ini memiliki dampak ekonomi yang
signifikan pada para produsen Amerika Serikat dari kedua susu dan sapi potong, terutama karena
berkurangnya hasil panen anak sapi, penurunan kembali pendapatan, pemusnahan dan
penggantian sapi terinfeksi, dan biaya pelayanan kesehatan hewan. Ini diperkirakan pada ternak
sapi sekitar 20-40% T. foetus- sapi positif memiliki pengurangan 14-50% pada hasil panen anak
sapi tahunan, penurunan 4-10% untung Keuangan per kelahiran anak sapi , dan pengurangan 5-
35% dalam mengembalikan modal per ekor (Rae, 1989). Setiap sapi terinfeksi dalam kawanan
perusahaan susu menyebabkan kerugian ekonomi diperkirakan sebesar $ 665 (Goodger &
Skirrow, 1986). Kerugian ekonomi ini juga bisa menjadi faktor penentu untuk kegagalan
keuangan penghasil ternak. Trikomoniasis sapi didistribusikan di seluruh dunia, dengan kasus
yang dilaporkan di Amerika, Asia, Australia, Eropa dan Afrika Selatan dimana pelayanan pada
sapi alami merupakan sarana peternakan (Yao, 2013). T. fetus menjalani hanya tahap trofozoit
dan terutama ditularkan antara ternak dan sapi / sapi oleh hubungan seksual. Hal ini
menunjukkan bahwa layanan tunggal oleh kerbau/sapi terinfeksi mengakibatkan infeksi 95% dari
sebelumnya yang tidak terinfeksi dan sapi nulipara adalah yang mudah terserang (Parsonson et
al., 1976). Menariknya, penularan dari sapi yang terinfeksi / sapi kepada sapi lain tampak kurang
efisien. Clark et al. (1974a) menunjukkan bahwa dibutuhkan 3-6 media untuk T. fetus - sapi
positif untuk menginfeksi ke Hereford sapi berusia lebih dari 4 tahun, dan sembilan perkawinan
menginfeksi satu dari dua sapi berusia 3 tahun. Di sisi lain, sapi langsung menularkan T.foetus
protozoa sejak terinfeksi kepada sapi yang tidak terinfeksi selama kawin jika interval kawin
kurang dari 20 menit, tanpa terkena infeksi dengan sendirinya (Clark et al., 1977).

Trikomoniasis sapi telah ditemukan di banyak negara bagian AS dari seluruh wilayah
negara (Abbitt & Meyerholz, 1979; Bondurant et al, 1990;. Gay et al, 1996;. Hoevers et al,
2003;. Rae et al., 2004; Rhyan et al, 1988, 1999;.. Rodning et al, 2008; Szonyi et al, 2012;.. Yao
et al, 2011). Untuk mengurangi penyebaran penyakit ini, 26 negara memiliki peraturan
trikomoniasis program pengendalian / manajemen di tempat setiap 1 April 2014 (NIAA /
USAHA, 2014). Sebuah komponen utama dari peraturan negara ini adalah bahwa semua sapi
jantan digunakan untuk tes reproduksi negatif untuk T. fetus sebelum di impor, perdagangan atau
digembalakan properti publik. Dokumentasi pada efektivitas peraturan ini dalam membatasi
penyebaran penyakit ini jarang terjadi. Prevalensi individu kerbau/sapi turun dari 1,7% menjadi
0,2% di Wyoming antara tahun 2000 dan 2010 sebagai akibat dari peraturan negara (Yao et al.,
2011). Namun, peraturan tersebut tampaknya memiliki efek yang sangat kecil pada dua
parameter penting yang mengukur pengendalian penyakit, distribusi geografis misalnya
berkurangnya dan menurunnya prevalensi kumpulan kawanan sapi yang berinteraksi dengan
ternak lain yang. Antara 2007 dan 2010, 15 dari 23 kabupaten masih memiliki setidaknya satu
kumpulan kawanan sapi yang berinteraksi dengan ternak lain yang yang positif dan rata-rata
prevalensi kumpulan kawanan sapi yang berinteraksi dengan ternak lain yang adalah 2,2% (Yao
et al., 2011). Akhir-akhir ini, ditemukan melalui kuesioner dari semua Wyoming ternak produsen
yang janinnya terinfeksi T. foetus secara signifikan terkait dengan kumpulan kawanan sapi yang
berinteraksi dengan ternak lain yang yang positif terkena infeksi (s), merumput dan berbaur
bersama dengan kawanan lainnya.

Umumnya, infeksi yang menyerang sapi / sapi bersifat terinfeksi sementara, sering
berlangsung hanya beberapa bulan. untuk waktu yang lebih lama, betina kembali
mengembangkan jangka pendek berlangsungnya kekebalan terhadap infeksi ulang. Setelah
aborsi dini berpuncak pada sekitar 7-10 minggu kehamilan dan tambahan 2-4 minggu untuk
siklus berahi baru, sapi ini / sapi menjadi hamil lagi jika sapi jantan masih tersedia, yang
mengakibatkan musim kawin diperpanjang yang diteliti dalam berbagai T . fetus-yang positif
menginfeksi pada ternak. Namun, beberapa betina yang terinfeksi membawa patogen untuk
jangka waktu lebih lama. Skirrow (1987) menemukan dua dari tujuh ekor sapi yang terinfeksi
dimana Infeksi dipertahankan selama 6 dan 9 minggu masing-masing, setelah kelahiran.

Trikomoniasis sapi ditularkan antara sapi selama hubungan seksual. Ada banyak laporan
tentang infeksi pada sapi jantan. Sebaliknya, hanya beberapa studi tentang trikomoniasis pada
sapi / sapi yang tersedia. Misalnya, survei lavage rahim dikumpulkan dari 21 sapi terbuka dengan
sejarah masalah reproduksi dalam dua ternak di Brazil dan menghasilkan tingkat infeksi 61,8%
oleh T. foetus fetus (Gonzalez-Carmona et al., 2012). Di Argentina, T. foetus fetus diisolasi
masing-msing dari tiga dan dua sapi dari 76 sapi hamil dan 64 sapi yang tidak hamil, (Mancebo
et al., 1995).

Wyoming di Negara Veterinary Laboratory (WSVL) telah mendiagnosis trikomoniasis

sapi ke dokter hewan dan produsen daging sapi di seluruh negara bagian dan beberapa negara
yang berdekatan di WSVL sejak 1980-an, yaitu dua dekade sebelum negara sebenarnya memulai
untuk mengatur penyakit ini. Nomor aksesi, nomor unik yang diberikan untuk setiap batch
spesimen yang diterima, dan nomor sampel meningkat secara signifikan pada pengujian banteng
mandatory pada tahun 2000. Laboratorium telah menguji 6000-8000 sampel sapi yang terinfeksi
T. foetus fetus setiap tahun Sejak saat. Mayoritas sampel ini berhasil dihimpun dari selubung
prepusium lembu dengan fraksi yang lebih kecil berasal dari janin yang digugurkan dan sapi
yang juga keguguran / sapi dengan riwayat aborsi.

Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menentukan prevalensi infeksi T. foetus pada sapi
/ sapi dengan riwayat aborsi terkini dari sampel yang diserahkan ke WSDL untuk pengujian T.
foetus fetus. Pendekatan retrospektif diambil untuk memasukkan semua aksesi sapi / sapi dengan
riwayat aborsi antara tahun 2000 dan 2010 di Laboratorium Sistem Informasi Manajemen
(LIMS) sistem data. Sebuah proporsi yang signifikan dari populasi ini (9,7%) yang positif
terinfeksi T. foetus . Data ini mendukung gagasan bahwa sapi yang terinfeksi / sapi berperan
penting dalam endemisitas trikomoniasis sapi.

METODE

DATA

Bank data yang digunakan adalah data elektronik WSVL di LIMS. Semua nomor aksesi
dan kasus di bank data yang berhubungan dengan trikomoniasis sapi antara tahun 2000 dan 2010
yang positif terinfeksi diambil dan diekspor ke Excel. Kriteria untuk pengambilan data meliputi:
(1) spesies sapi; (2) pengujian trichomoniasis, tidak masalah apakah itu dengan metode kultur
atau PCR; dan (3) rumah pemilik di Wyoming saat pengujian dilakukan, tidak peduli di mana
sampel dilengkapi oleh dokter hewan itu berada. Informasi yang dicari untuk setiap entri
termasuk nomor aksesi, sejarah, jenis sampel dan jumlah sampel, jenis tes yang diminta dan uji
hasilnya. Data tahunan yang positif terinfeksi diekspor ke spreadsheet Excel secara terpisah.
Untuk memvalidasi keakuratan data yang diambil, semua nomor aksesi dan kasus untuk tahun
2010 dimana hard copy yang tersedia secara manual diketik ke Excel oleh dua individu yang
memeriksa pekerjaan satu sama lain untuk meminimalkan kesalahan manusia. Orang-orang ini
dan orang yang mendownload data dibutakan oleh tugas-tugas masing-masing. Seperangkat data
manual yang digunakan sebagai standar yang dibandingkan dengan data diambil dan yang telah
diperiksa. Kecocokan yang lengkap ditemukan di antara dua set data, dan dikonfirmasi
Keakuratan data yang diambil. Setelah itu, data tahunan untuk tahun-tahun antara tahun 2000
dan 2010 secara terpisah diambil menggunakan test yang sama tanpa validasi.

KASUS
Aksesi diidentifikasi dengan mencari kumpulan data tahunan menggunakan kata-kata
kunci yang terdiri dari: debit rahim, fetus, vagina, kematian (meninggal), aborsi, serviks and calf
(betis). Setiap entri diidentifikasi secara manual diperiksa untuk memastikan sampel yang berasal
dari janin yang digugurkan dari sapi / lembu. Sampel dari terakhir ini termasuk buangan rahim,
sampel rahim, lendir serviks dan discharge vagina. Semua entri yang ditabulasikan dari tahun ke
tahun dalam file Excel tunggal, dan item yang berlebihan itu dihapus. Hasil tes dicatat
berdasarkan tahun, host (betina melawan fetus), organ reproduksi wanita (rahim, leher rahim dan
vagina) dan metode pengujian (budaya terhadap PCR). Selain itu, saat aborsi tersebut dilakukan
rekaman (catatan) untuk semua kasus yang berlaku.

PENGUJIAN
Dokter hewan telah menentukan metode pengujian ketika mengirimkan sampel kepada
WSVL menggunakan formulir pengajuan standar. Sampel diuji untuk T. foetus fetus berdasarkan
kultur dari PCR seperti yang dijelaskan sebelumnya (Yao et al., 2011). Secara singkat, sampel
untuk kultur diinokulasi ke dalam media Diamond (Diamond, 1957), dimana telah disiapkan di
rumah, dan diinkubasi pada 37 UC selama 48-72 jam. Biakan diperiksa secara mikroskopis di
tempat gelap untuk trichomonads hidup dengan karakter gerak bergulir . DNA diekstraksi dari
sampel beku dan secara langsung dimasukkan atau dari 24 jam biakan seperti yang dijelaskan
sebelumnya (Chen & Li, 2001). Primer TFR3 dan TFR4 digunakan dalam PCR untuk
memperkuat fragmen DNA 347 bp yang terletak di wilayah genomik yang mencakup 5.8S RNA
ribosom dan ditranskrip pengatur jarak internal seperti yang telah dijelaskan sebelumnya
(Felleisen et al., 1998). Setiap PCR terdiri dari 94 UC selama 5 menit, dan 40 siklus 94 UC
selama 30 s, 67 UC selama 30 s dan 72 UC selama 90 s, diikuti oleh 72 UC selama 15 menit di
hadapan 2,5 mM masing-masing primer. Untuk setiap batch sampel kontrol negatif dari air dan
kontrol positif biakan T. foetus fetus dimasukkan untuk mengukur apakah kedua ekstraksi DNA
dan PCR bekerja dengan baik. Produk PCR fotografi didokumentasikan setelah elektroforesis
pada 1,5% agarosa gel. Hasil positif ditandai oleh kehadiran pita 347 bp.

HASIL
Antara tahun 2000 dan 2010 total 93 sapi yang terinfeksi / sapi dengan karakter aborsi
dites terhadap T. foetus fetus berdasarkan kultur dan / dengan PCR. Sampel dari serviks (n529),
vagina (N511) dan rahim (n553) menghasilkan nol (0%), satu (9,1%) dan delapan (15,1%)
positif yang terinfeksi T. foetus fetus, Prevalensi keseluruhan 9,7%. Salah satu dari 22 janin yang
diaborsi (4,5%) juga diuji . Empat janin yang diaborsi dengan karakter plasenta menyertai telah
disampaikan; satu plasenta diuji (25,0%). Sampel positif hanya terdeteksi pada tahun 2002, 2003
dan 2008. Menariknya, semua hasil menunjukkan positif dari sampel biakan, sedangkan antara
36 sampel yang diuji dengan PCR, tidak ada yang positif (Tabel 1). Catatan dari 17 dari 115
kasus aborsi menyatakan tahap kehamilan saat keguguran terjadi. Delapan hewan diaborsi
kurang dari 90 hari, empat pada 5-6 bulan, dan lima di jangka akhir kehamilan. Empat sapi yang
terinfeksi / sapi dinyatakan positif T. foetus fetus di antara delapan hewan keguguran dalam 90
hari pertama kehamilan, sedangkan semua sembilan binatang keguguran pada 5 bulan atau lebih
menunjukkan hasil negatif.

Diskusi
Di sini kami melaporkan bahwa di Wyoming diantara tahun 2000 dan 2010 prevalensi
keseluruhan terjadinya infeksi T. fetus adalah 9,7% di antara 97 sapi / sapi dengan riwayat
keguguran dimana spesimen telah disampaikan kepada WSVL untuk pengujian trikomoniasis.
Tingkat tertinggi yang positif yaitu (15,1%) ditemukan di dalam rahim, diikuti oleh vagina
(9,1%), sedangkan sampel serviks negatif. Meskipun tidak satu set pengujian dikendalikan dari
sampel, data ini menunjukkan bahwa sampel yang dikumpulkan dari rahim dan leher rahim
merupakan sampel yang terbaik dan terburuk, masing-masing untuk T. fetus pengujian pada sapi
/ sapi dengan riwayat keguguran. Bondurant dkk. (2003) menemukan bahwa adanya lendir
servikovaginal dari keempat sapi eksperimental terinfeksi semua dengan hasil uji positif dengan
PCR. Dalam sebuah studi di Argentina, T. fetus itu ditemukan dari vagina dari semua lima
hewan yang positif terhadap infeksi, sedangkan hanya dua dari lima yang positif berdasarkan
sampel rahim (Mancebo et al., 1995). Dalam studi eksperimental lain yang melibatkan delapan
ekor sapi tewas 15-50 hari setelah infeksi, T. fetus ditemukan dengan biakan di vagina dan leher
rahim dari semua sapi, di rahim dari enam sampel dan di saluran telur dari empat sampel
(Parsonson et al., 1976 ). Sebagai hasil dari perbedaan ini, percobaan yang dirancang dengan
baik dijamin untuk menguji sensitivitas sampel yang dikumpulkan dari vagina, leher rahim dan
rahim yang positif terhadap infeksi T. fetus-pada_ sapi / anak sapi. Protokol saat ini
menyarankan bahwa sampel harus dikumpulkan dari ketiga lokasi untuk memaksimalkan
kemungkinan untuk deteksi adanya infeksi T. fetus.

Data kami juga menunjukkan bahwa 1 (4,5%) dari 22 janin yang diaborsi positif untuk T.
fetus . Keterbatasan dari penelitian ini adalah bahwa sampel tidak bersamaan diuji untuk patogen
aborsi yang disebabkan oleh penyebab lain seperti virus, bakteri, jamur dan parasit (Eaglesome
& Garcia, 1997; Thibier & Guerin, 2000). Dalam sebuah survei patogen oleh PCR dari 80 janin
sapi yang digugurkan di Beijing, Cina, agen infeksi terdeteksi di 45 (56,3%), 22 (48,9%) dari
yang mewakili kejadian infeksi dengan dua atau tiga agen infeksi. Patogen diidentifikasi dan laju
kecepatan infeksi: bovine rhinotracheitis virus (36,3%), Neospora caninum (31,3%), bovine virus
diare virus (7,5%), Brucella abortus (6,3%), T. fetus (5%) dan Toxoplasma gondii (1,3%) (Yang
et al., 2012).

Trikomoniasis sapi menyebabkan terjadinya aborsi dan biasanya terjadi selama awal
kehamilan (Bondurant, 2005). Dalam eksperimen anak sapi yang terinfeksi T. fetus , kematian
hasil konsepsi memuncak pada 50 sampai 70 hari kehamilan (Parsonson et al., 1976). T. fetus
tidak ditemukan di antara 126 janin yang lebih tua dari trimester pertama usia kehamilan
(Campero et al., 2003). Demikian pula, kami melaporkan bahwa di antara delapan riwayat
keguguran pada trimester pertama hanya empat yang terkena T. fetus , sedangkan tak satu pun
dari sembilan dengan riwayat keguguran yang selanjutnya mengalami keguguran. Dalam sebuah
studi dari 13 kasus sapi aborsi yang dikaitkan dengan T. fetus selama 1982-1987 (Rhyan et al.,
1988), janin ditemukan bervariasi dalam usia kehamilan dari jangka 2 bulan . Sebelas dari 12
janin dari usia kehamilan 5 bulan atau lebih, tiga dari mereka berada di bulan kehamilan terakhir.
Para penulis menghubungkan hasil ini untuk kemungkinan terjadinya bias pada pengelola
kawanan sapi yang mungkin tidak dikenali adanya riwayat keguguran dini.

Ringkasnya, data yang disajikan di sini menunjukkan prevalensi keseluruhan 9,7 dan
4,5% terkena T. fetus diantara sapi / anak sapi dengan keguguran dan pengguguran janin,
masing-masing, di Wyoming di antara tahun 2000 dan 2010. Mereka mendukung perlunya untuk
menguji sapi secara terbuka bagi sapi yang positif terkena T. fetus sebagai bagian dari
pendekatan terpadu untuk mengontrol dan menghilangkan ancaman dari trikomoniasis sapi.
Selain menguji banteng (sapi) sebagaimana yang telah disyaratkan oleh aturan negara, langkah-
langkah yang disarankan lainnya termasuk penggunaan inseminasi buatan, menggunakan sapi
jantan berusia di bawah 3 tahun, memelihara ternak secara tertutup, dan merumput secara pribadi
/ jatah rumput pakan juga dipagari (Jin et al., 2014). Semakin banyak pendekatan terpadu yang
disesuaikan, semakin cepat sapi trikomoniasis akan dikendalikan dan akhirnya dihapuskan dari
kasus sapi ternak AS.

Ucapan Terima Kasih (tidak perlu dibahas)

Penulis sangat berterima kasih kepada Mark R. Davidson dan Katherine D. Bardsley dari
Universitas Wyoming untuk men-download data dari LIMS ke Excel dan melakukan pengujian,
masing-masing. Elizabeth A. Litzman dan Mariah L. Hall of University of Wyoming dihargai
atas usaha mereka di input manual data 2010. Drs A. Lee Willingham dan Liza S. Koster dari
Ross University School of Veterinary Medicine sangat dihargai untuk tinjauan kritis mereka dan
proofreading naskah, masing-masing. Saya berterima kasih kepada resensi anonim untuk /
masukan berharga nya dalam membuat naskah lebih ramahreader. Penelitian penulis di
trikomoniasis sapi sebagian didukung oleh USDA (dana Hatch, WYO463-11) dan Ternak
Dewan Wyoming (MOU).