See discussions, stats, and author profiles for this publication at: https://www.researchgate.

net/publication/331561360

ANALISIS KUALITATIF DAN KUANTITATIF KANDUNGAN SENYAWA DARI

EKSTRAK HEKSAN, ASETON, ETANOL, DAN AIR HERBA SAMBILOTO
(Andrographis paniculata (Brum F)Nees)

Preprint · March 2019

DOI: 10.13140/RG.2.2.24934.27203

CITATION READS

1 4,891

3 authors, including:

Harrizul Rivai Zikra Azizah

Universitas Andalas Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Padang
212 PUBLICATIONS   313 CITATIONS    22 PUBLICATIONS   23 CITATIONS   

SEE PROFILE SEE PROFILE

Some of the authors of this publication are also working on these related projects:

Analytical Chemistry View project

Preparation and characterization of microcrystalline cellulose from 'jerami padi' View project

All content following this page was uploaded by Harrizul Rivai on 07 March 2019.

The user has requested enhancement of the downloaded file.

 ANALISIS KUALITATIF DAN KUANTITATIF KANDUNGAN SENYAWA DARI
EKSTRAK HEKSAN, ASETON, ETANOL, DAN AIR HERBA SAMBILOTO
(Andrographis paniculata (Brum.F)Nees)

Harrizul Rivai1). Zikra Azizah2), Ria Diati2)

1)
Fakultas Farmasi Universitas Andalas, Padang
2)
Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi (STIFARM) Padang

Email: harrizul@phar.unand.ac.id; riadiati273@gmail.com

ABSTRAK

Andrographis paniculata (Burm. f.) Nees, merupakan salah satu tanaman yang telah banyak diuji baik secara
empiris, pra klinik, dan klinik untuk berbagai penyakit. Tujuan penelitian ini adalah menganalisis kandungan
senyawa kimia dan menentukan kadar senyawa kimia dari ekstrak heksan, aseton, etanol dan air Andrographis
paniculata (Burm. f.) Ness. Ekstrak dibuat dengan maserasi dengan menggunakan pelarut heksan, aseton dan
etanol dan infus untuk ekstrak air. Identifikasi kandungan kimia yang dilakukan terhadap masing-masing
ekstrak untuk mendeteksi golongan kandungan kimia asam amino, karbohidrat, asam lemak, flavonoid, fenol,
tanin, alkaloid, antrakuinon, minyak atsiri, saponin, dan glikosida jantung. Hasil uji menunjukkan bahwa ekstrak
heksan mengandung flavonoid, tanin dan alkaloid, ekstrak aseton dan etanol mengandung fenol dan alkaloid,
sedang kan ekstrak air mengandung flavonoid, dan alkaloid. Penelitian ini juga menunjukkan bahwa kadar
senyawa flavonoid dari ekstrak heksan dan air adalah 1,28 % dan 0,57 %. Kadar senyawa fenol dari ekstrak
aseton dan ekstrak etanol adalah 0,43 % dan 0,34%. Kadar senyawa tanin dari ekstrak aseton dan ekstrak etanol
adalah 0,88 % dan 0,87 %. Kadar senyawa alkaloid dari ekstrak heksan, ekstrak aseton, ekstrak etanol dan
ekstrak air adalah 0,31 %, 5,07 %, 4,98 % dan 0,93 %

Keywords : Kualitatif, Kuantitatif, Herba sambiloto (Andrographis paniculata (Brum.f)Nees)

ABSTRACT

Andrographis paniculata (Burm. f.) Nees, are one of the plants that have been tested empirically, pre-clinically,
and clinically for various diseases. The purpose of this research was to analyze of chemical compounds and
determine the levels of chemical compounds from hexane, acetone, ethanol and water extracts of Andrographis
paniculata (Burm. f.) Ness. Extracts was made by maceration using hexane, acetone and ethanol solvents and
infusions to extract water. Identification of the chemical content of each extract to detect chemical constituents
of amino acids, carbohydrates, fatty acids, flavonoids, phenols, tannins, alkaloids, anthraquinones, essential oils,
saponins, and cardiac glycosides.The results showed that hexane extract contained flavonoids, tannins and
alkaloids, acetone and ethanol extracts contained phenols and alkaloids, while water extracts contained
flavonoids, and alkaloids. This research showed that the levels of flavonoids compounds from hexane and water
extracts were 1.25% and 0.57%. The levels of phenol compounds from acetone extract and ethanol extract were
0.43% and 0.34%. The levels of tannins from acetone extract and ethanol extract were 0.88% and 0.87%. The
levels of alkaloid compounds from hexan extract, acetone extract, ethanol extract and water extract were 0.31%,
5.07%, 4.98% and 0.93%.
Keywords : Kualitatif, Kuantitatif, Herba sambiloto (Andrographis paniculata (Brum.f)Nees)

PENDAHULUAN ditemukan informasi mengenai kandungan

Masyarakat saat ini semakin
memahami penggunaan tanaman sebagai
pengobatan tradisional, kandungan
senyawa kimia yang terdapat pada
tanaman diyakini dapat menyembuhkan
penyakit dan hampir tidak memiliki efek
samping. Salah satu kelemahan obat
tradisional adalah belum banyaknya
kimia dan senyawa yang bertanggung
jawab terhadap aktivitas biologisnya.
Tanaman mengandung metabolit primer
dan metabolit sekunder. Metabolit primer
adalah senyawa pembangun yang
diperlukan untuk pertumbuhan dan
perkembangan tanaman tersebut, seperti
asam amino, karbohidrat dan asam lemak.

1
Metabolit sekunder pada umum nya
memiliki peran utama untuk pertahanan
diri dan memiliki efek farmakologi
(Hanani, 2015). Tanaman yang juga
diketahui banyak mengandung metabolit
sekunder salah satunya adalah sambiloto.
Sambiloto (Andrographis paniculata
(Burm.F) Nees.) termasuk dalam suku
Acanthacea dimana tanaman ini
berkhasiat sebagai antipiretik (Peraturan
Menteri Kesehatan, 2016).
Andrographis paniculata memiliki
kandungan utama lakton diterpen yang
terdiri dari andrografolid, deoksi-
andrografolid, neo-andrografolid,
andrografisid deoksi-andrografisi dan
andropanosid (Peraturan Menteri
Kesehatan, 2016). Sambiloto memiliki
berbagai macam manfaat bagi kesehatan,
Secara tradisional digunakan untuk
pengobatan tifoid, disentri basiler, diare,
radang saluran napas, radang paru,
disentri, hidung berlendir, infeksi telinga,
sakit gigi, demam, Tuberkulosis paru,
faringitis, radang mulut, tonsilitas, batuk
rejan dan darah tinggi (Satya, 2013).
Sambiloto secara farmakologi memiliki
manfaat Hiperlipidemia, Sirosis Hati, dan
ansiolitik, dan telah diuji secara klinik
memiliki manfaat sebagai Pneumonia dan
kolitis ulseratif.
Penelitian sebelumnya Sithara et al.,
(2016), telah dilakukan analisis fitokimia
dari Andrographis paniculata dengan
pelarut eter, kloroform, dan aseton dengan
metode ekstraksi maserasi menggunakan
alat shaker selama 24 jam, sehingga
didapatkan hasil pada pelarut petroleum
eter terdapat flavonoid, alkaloid, dan
saponin tanpa steroid dan tannin. Pada
pelarut kloroform terdapat flavonoid,
alkaloid, steroid, saponin dan tannin,
sedangkan pada aseton tidak ditemukannya
flavonoid, alkaloid, steroid, saponin dan
tanin. Berdasarkan penelitian Rais (2015),
dari isolasi dan penentuan kadar flavonoid
ekstrak etanol herba sambiloto dengan
metode ekstraksi soxletasi didapatkan
ekstrak etanol sambiloto mengandung
2
flavonoid total dengan kadar 46,322 g/kg
(4,63 %) terhadap kuersetin dalam ekstrak.
Penelitian ini bertujuan untuk
melakukan uji analisis kualitatif dan
analisis kuantitatif ekstrak heksan, aseton,
etanol dan air dari herba sambiloto
(Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees.)
Pada pengujian ekstrak heksan, aseton,
etanol, dan air herba sambiloto, didasarkan
kepada tingkat kepolaran nya dimana
heksan merupakan pelarut yang bersifat
tidak polar yang dapat melarutkan
senyawa tidak polar, aseton merupakan
pelarut yang bersifat semi polar yang dapat
melarutkan senyawa semi polar, etanol
merupakan pelarut yang polar yang dapat
melarutkan senyawa polar dan air
merupakan pelarut yang sangat polar.
METODE PENELITIAN
Alat
Alat yang akan digunakan dalam
penelitian ini adalah Spektrofotometer
Ultraviolet – Visible (Shimadzu 1800),
Oven (Memmert), Penguap Putar (IKA®),
Sonikator (Branson 1800), Timbangan
Analitik (Precisa), Kurs Porselen, Cawan
Penguap, Lampu Ultraviolet (Camag),
Tabung Reaksi (Iwaki), Corong Pisah
(Iwaki), Erlenmeyer (Iwaki), Labu Ukur
(Iwaki), Beker Glass (Iwaki), Pipet Ukur
(Iwaki), Kertas pH (Merck), Kertas Saring
Whatmann No. 42.
Bahan
Bahan yang digunakan dalam
penelitian ini adalah serbuk simplisia
kering (Andrographis paniculata
(Brum.f)Nees), heksan p.a (EMSURE®),
aseton (Merck®), etanol p.a (EMSURE®),
air suling (CV. NOVALINDO), amoniak
(EMSURE®), silica gel 60 F254 20 x 20 cm
(Merck®), Larutan warna II LP, asam galat
(Sigma), kuersertin (Sigma), katekin
(Sigma), dan semua pereaksi di beli dari
Merck: alumunium klorida, kloroform,
metanol, etil asetat, asam format, metil etil
keton, asam klorida, larutan
heksametilentetraamin, larutan asam asetat
glasial, ninhydrin, α-naftol, asam nitrat,
asam sulfat, rodamin B, serbuk seng,
serbuk magnesium, serbuk asam borat,
serbuk asam oksalat, besi (III) klorida,
vanilin asam sulfat, vanilin asam klorida,
Folin–Ciocalteau, garam besi (III) klorida,
gelatin, raksa (II) klorida, bismut nitrat,
asam pikrat, amonium molibdrat, iodium,
kalium iodida, asam nitrat, larutan frohde,
eter, kalium permanganat, asam asetat
anhidrida, larutan Baljet, natrium
hidroksida, n– butanol, dietil eter.
Cara Kerja
Penyiapan Sampel
Herba sambiloto yang diambil di Air
Dingin RT/RW 05/09 Balai Gadang Koto
Tangah, Lubuk Minturun, Sumatera Barat,
Indonesia .
Standarisasi Simplisia
Standarisasi simplisia herba
sambiloto (Andrographis paniculata
(Brum.f) Nees) menurut Departemen
Kesehatan Republik Indonesia (1995)
adalah sebagai berikut:
1. Pemeriksaan Makroskopik
2. Pemeriksaan Mikroskopik
3. Pola Kromatografi
4. Penetapan Susut Pengeringan
5. Penetapan Kadar Abu Total
6. Penetapan Kadar Abu Tidak Larut
Asam
7. Penetapan Kadar Sari Larut Air
8. Penetapan Kadar Sari Larut Etanol
Pembuatan Ekstrak
Ekstrak heksan, aseton dan etanol
serbuk simplisia sambiloto dibuat dengan
metode maserasi dengan perbandingan
1:10 w/v. Sebanyak 50 g serbuk sambiloto
(Andrographis paniculata) dimaserasi
dengan 500 mL masing – masing pelarut
(heksan, aseton,dan etanol) selama 6 jam
sambil beberapa kali dikocok kemudian
diamkan selama 18 jam. Kemudian
disaring dengan kain flanel dan ampasnya
diremaserasi sebanyak dua kali dengan
500 mL pelarut (heksan, aseton,dan etanol)
3
kemudian disaring dengan kain flannel.
Maserat dijadikan satu kemudian disaring
dengan kertas saring dan diuapkan dengan
rotary evaporator pada suhu 40° C hingga
diperoleh ekstrak cair.
Untuk pembuatan ekstrak air dari
serbuk simplisia sambiloto dibuat dengan
metode infusa, dengan cara menimbang
sebanyak 50 gram simplisia serbuk herba
sambiloto dan dimasukkan ke dalam panci
infus dan ditambahkan dengan pelarut air
suling sebanyak 500 mL, lalu masukkan ke
dalam penangas air selama 15–20 menit
pada suhu 98 ºC, lalu saring menggunakan
kain flanel hingga diperoleh ekstrak air
herba sambiloto.
Analisis Kualitatif dengan Skrining
Fitokimia
Setelah diperoleh ekstrak herba
sambiloto (Andrographis paniculata
(Brum.f)Nees) dari keempat pelarut
(heksan, aseton, etanol, dan air), kemudian
dilakukan uji skrining fitokimia sebagai
berikut:
1. Uji Asam Amino
a. Larutan 0,1 % Ninhydrin-Aseton
(Hanani, 2015)
2. Uji Karbohidrat
a. Larutan Fehling A dan Larutan
Fehling B (Hanani, 2015)
b. Reaksi Molisch (Hanani, 2015)
3. Uji Asam Lemak
a. Larutan Asam Sulfat 25 % (Hanani,
2015)
b. Larutan 0,5 % Rodamin B (Hanani,
2015)
4. Uji Flavonoid
a. Cara I (Departemen Kesehatan
Republik Indonesia, 1995)
b. Cara II (Departemen Kesehatan
Republik Indonesia, 1995)
c. Cara III (Departemen Kesehatan
Republik Indonesia, 1995)
5. Uji Fenol
a. Garam Besi (III) Klorida (Hanani,
2015)
 b. Larutan Vanilin Asam Sulfat 4. Penetapan Kadar Alkaloid Total
(Hanani, 2015)
c. Larutan Vanilin Asam Klorida HASIL DAN PEMBAHASAN
(Hanani, 2015) Standarisasi Simplisia
6. Uji Tanin
a. Garam Besi (III) Klorida (Hanani, 1. Pemeriksaan makroskopis
2015) Dari hasil pengujian yang didapat
b. Larutan 1 % Gelatin dalam 10 % yaitu dimana simplisia herba
Natrium Klorida (Hanani, 2015) sambiloto bentuk batang pangkal
7. Uji Alkaloid bulat dan bersegi empat berwarna
Reaksi Pengendapan menurut
hijau, bentuk daun bulat
Departemen Kesehatan Republik
Indonesia (1995) : memanjang, ujung daun
a. Pereaksi Bouchardat meruncing, tepi daun rata, tulang
b. Pereaksi Mayer daun menyirip berwarna hijau,
c. Pereaksi Wagner bentuk buah bulat panjang, ujung
d. Pereaksi Dragendroff buah meruncing berwarna hijau
e. Pereaksi Hager dan bentuk biji bulat kecil agak
keras.
Reaksi Warna menurut Departemen
Kesehatan Republik Indonesia (1995) : 2. Pemeriksaan Mikroskopik
a. Larutan Erdman Dari hasil pengujian yang didapat
b. Larutan Asam Nitrat Pekat yaitu yang dilihat dengan
c. Larutan Asam Sulfat Pekat pembesaran 400x didapatkan hasil.
d. Larutan Frohde Epidermis bawah dan stomata dan
8. Uji Antrakuinon sisik kelenjar, epidermis atas,
a. Larutan Asam Klorida 2 N
9. Uji Minyak Atsiri epidermis atas dengan sistolit,
a. Larutan Kalium Permangant rambut penutup, berkas
b. Larutan Asam Asetat Anhidrida pengangkut dan kelopak bunga
10. Uji Saponin dengan tonjolan papila.
a. Uji busa pemeriksaan ini sesuai dengan
11. Uji Glikosida Jantung standarisasi yang terdapat dalam
a. Pereaksi Baljet
Farmakope Herbal Indonesia Edisi
b. Pereaksi Keller-Kiliani
I (2008).
Analisis Kuantitatif Kadar Total 3. Pola kromatografi
kandungan Senyawa Kimia Dari hasil pengujian yang didapat
Setelah dilakukan uji analisis fitokimia yaitu pada plat KLT nilai Rf yang
pada ekstrak tanaman, maka diperoleh diperoleh Rf 1 = 0,54 , Rf 2 = 0,67 ,
hasil positif senyawa kimia yang terdapat Rf 3 = 0,93 nilai–nilai Rf ini sama
dalam masing–masing ekstrak. Kemudian dengan nilai Rf andrografolid 0,54.
dilakukan penentukan kadar pada 4. Susut Pengeringan
metabolit sekunder yang memiliki hasil Dari hasil pengujian yang didapat
positif pada uji skrining yang ada di dalam yaitu 9,88 % ± 0,18 %.
ekstrak herba sambiloto, Seperti Berikut : 5. Kadar Abu Total
1. Penetapan Kadar Flavonoid Total Dari hasil pengujian yang didapat
2. Penetapam Kadar Fenol Total yaitu 9,17 % ± 0,17 %.
3. Penetapan Kadar Tanin Total

4
 LP -
6. Kadar Abu Tidak Larut Asam
Asam
Dari hasil pengujian yang didapat - - + +
Nitrat
yaitu 1,30 % ± 0,06 %. Asam
- - - -
Sulfat
7. Kadar Sari Larut Air Frohde - - - -
Dari hasil pengujian yang didapat Ekstrak+H
yaitu 20,32 % ± 0,16 %. Cl 2N
Antrakuin
panaskan+ - - -
8. Kadar sari Larut Etanol on
eter +
Dari hasil pengujian yang didapat NH3
yaitu 19,18 % ± 0,18 %. KMnO4 - - - -
Minyak Asam
atsiri asetat - - - -
Analisis Kualitatif Ekstrak Heksan, anhidrat
Aseton, Etanol, Dan Air Herba Pembuiha
sambiloto (Andrographis paniculata Saponin - - - -
n
(Brum.f)Nees) Glikosida
Baljet - - - -
Keller-
jantung - - - -
Hasil Ekstrak Killiani
Kandunga
Pereaksi Heks Aset Etan
n kimia air Tabel 1. Hasil Uji Kualitatif Kandungan
an on ol
Asam
0,1 % Senyawa Kimia Dari Ekstrak Heksan,
Ninhidrin- - - - - Aseton, Etanol dan Air Herba Sambiloto
Amino
Aseton
Fehling
Karbohidr
(A+B)
- - - - Dari hasil penelitian kandungan
at senyawa kimia pada ekstrak heksan herba
Molish - - - -
Asam sambiloto (Andrographis paniculata
Asam
Sulfat 25 - - - - (Brum.f)Nees) yaitu flavonid, Tanin dan
% alkaloid, hal ini ditunjukkan dengan
Lemak
Rodamin
- - - - terbentuknya flouresensi kuning dengan
B
Cara I - - - - percobaan cara III untuk senyawa
FLavonoi flavonoid, menggunakan peraksi FeCl3
Cara II - - - +
d
Cara III + - - - terbentuk warna hijau kecoklatan untuk
FeCl3 - - + - senyawa tanin, menurut Setyowati et al,
Folin- C - + - - (2014) terbentuknya warna hijau
Vanilin- kehitaman karena tanin bereaksi dengan
Asam - + + _
Fenol
Sulfat ion Fe3+ (Gambar 1)
Vanilin-
-
Asam - - +
Klorida
FeCl3 + - + -
Tanin Larutan
- - + -
gelatin
Pereaksi Pengendapan
Boucharda
+ + + +
t Gambar 1. Reaksi Reaksi tanin dengan
Mayer - - - - FeCl3 (Setyowati et al, 2014)
Wagner - + - + Sedangkan pada uji alkaloid
Alkaloid
Dragendro
+ + + + terbentuknya endapan dengan
ff
Hager - - - + menggunakan pereaksi bouchardat,
Reaksi Warna wagner, dan dragendroff. Menurut
Erdman - - - Setyowati et al (2014) hasil uji positif

5
dengan penambahan Wagner ditandai
dengan terbentuknya endapan berwarna
coklat muda, diperkirakan endapan
tersebut adalah kalium-alkaloid dimana
iodine bereaksi dengan ion I- dari kalium
iodide menghasilkan ion I3- yang berwarna
coklat, ion logam K+ akan membentuk
ikatan kovalen koordinat dengan nitrogen
pada alkaloid kompleks kalium-alkaloid
yang mengendap (Gambar 2)
Gambar 2. Reaksi alkaloid dengan
pereaksi wagner (Setyowati et al, 2014)
Dan pada uji alkaloid dengan
penambahan pereaksi dragendroff Menurut
Setyowati et al (2014) ditandai dengan
terbentuknya endapan coklat muda sampai
kuning, endapan tersebut adalah kalium-
alkaloid (Gambar 3)
Gambar 3. Reaksi alkaloid dengan
pereaksi Dragendroff (Setyowati et al,
2014)
Pada ekstrak aseton kandungan
senyawa kimia yang terdapat pada herba
sambiloto (Andrographis paniculata
(Brum.f)Nees) yaitu fenol dan alkaloid.
Hal ini ditunjukkan dengan terbentuknya
warna hijau kehitaman menggunakan
pereaksi Folin-C dan terbentuknya warna
kehitaman pada penggunaan peraksi
vanilin-asam sulfat untuk senyawa fenol.
Pada uji alkaloid terbentuknya endapan
pada penggunaan pereaksi bouchardat,
wagner, dan dragendroff.
Pada ekstrak etanol kandungan
senyawa kimia yang terdapat pada herba
6
sambiloto (Andrographis paniculata
(Brum.f)Nees) yaitu fenol, tanin dan
alkaloid. Pada uji fenol terbentuknya
warna hijau kehitaman pada penggunaan
peraksi vanillin-asam klorida dan vanillin-
asam sulfat. Pada uji tanin terbentuknya
endapan dengan menggunakan larutan
gelatin dan terbentukya warna hijau
kecoklatan dengan menggunakan FeCl3
terbentuknya warna hijau kehitaman
karena tanin bereaksi dengan ion Fe3+
(Setyowati et al, 2014). Pada uji alkaloid
terbentuknya endapan pada penggunaan
pereaksi bouchardat, dan dragendroff
sedangkan pada reaksi warna terbentuknya
perubahan warna pada penggunaan dan
asam nitrat.
Pada ekstrak air kandungan senyawa
kimia yang terdapat pada herba sambiloto
(Andrographis paniculata (Brum.f)Nees)
yaitu flavonoid dan alkaloid. Hal ini
ditunjukkan dengan terbentuk nya warna
kuning jingga dengan percobaan cara II
pada uji senyawa flavonoid, Warna kuning
jingga menandakan terbentuknya garam
flavilium saat penambahan serbuk
magnesium dan asam klorida (Setyowati et
al, 2014). Pada uji alkaloid terbentuknya
endapan dengan menggunakan pereaksi
bouchardat, dragendroff, wagner dan
harger, serta terjadi perubahan warna
dengan penambahan asam nitrat
Analisis Kuantitatif Ekstrak Heksan,
Aseton, Etanol, Dan Air Herba
sambiloto (Andrographis paniculata
(Brum.f)Nees)
Penetapan kadar flavonoid total pada
ekstrak heksan dan ekstrak air herba
sambiloto dilakukan menggunakan
spektrofotometri UV-Vis karena flavonoid
mengandung sistem aromatik yang
terkonjunggasi sehingga menunjukkan pita
serapan kuat pada daerah spektrum sinar
ultraviolet dan spektrum sinar tampak
(Harborne, 1987). Penetapan kadar
flavonoid total dihitung sebagai kuersetin
dengan penambahan aluminium klorida,
dimana aluminium klorida 10 % yang
berfungsi untuk memberikan efek
batokromatik dengan melakukan
pergeseran kearah panjang gelombang
yang lebih panjang, sehingga merubah
panjang gelombang standar kuersetin untuk
masuk pada range panjang gelombang UV-
Vis. Disamping itu penambahan aluminium
klorida juga menghasilkan hiperkromatik
atau peningkatan intensitas larutan standar
kuersetin sehingga menghasilkan warna
yang lebih kuning (Chang et, al., 2002).
Dari hasil penetapan kadar flavonoid
total dari masing-masing ekstrak herba
sambiloto dengan kuersetin sebagai
pembanding maka didapatkan Panjang
gelombang 440 nm pada konsentrasi 60
ppm dengan absorban 0,554 (Gambar 4),
dengan persamaan regresi Y= 0,007X +
0,111 dan kurva kalibrasi larutan
kuersetin dalam etanol 80 % dan absorban
larutan kuersetin dengan berbagai macam
konsentrasi dapat dilihat pada (Gambar 5,
Tabel 2 )
Gambar 4. Spektrum larutan kuersetin
ditambah alumunium klorida dalam etanol
80 %
Gambar 5. Kurva Kalibrasi Larutan
Kuersetin ditambah Alumunium Klorida
dalam Etanol 80 %
7
Konsentrasi (ppm) Absorban
20 0,265
40 0,410
60 0,554
80 0,720
100 0,861
Tabel 2. Absorban Larutan Kuersetin
ditambah Alumunium Klorida dalam
Etanol 80 % dengan Berbagai Macam
Konsentrasi
Pengukuran kadar flavonoid total
dengan menggunakan Spektrofotometri
UV-Vis yang dinyatakan dalam katekin
dengan persamaan regresi Y= 0,007X +
0,111 didapakan hasil untuk ekstrak
heksan herba sambiloto adalah 1,28 % dan
untuk ekstrak air herba sambiloto adalah
0,57 %.
Penetapan kadar fenol total pada
ekstrak aseton dan ekstrak etanol
dilakukan dengan menggunakan reagen
Folin–Ciocalteau Pereaksi ini
mengoksidasi fenolat (garam alkali) atau
gugus fenolik – hidroksi mereduksi asam
heteropoli (fosfomolibdat – fosfotungstat)
yang terdapat dalam pereaksi Folin
Ciocalteau menjadi satu kompleks
molibdenum–tungsten. Senyawa fenolik
bereaksi dengan reagen Folin Ciocalteau
hanya dalam suasana basa agar terjadi
disosiasi proton pada senyawa fenolik.
Untuk membuat suasana basa maka
ditambahkan NaOH 1 % . Penetapan kadar
fenol total dihitung sebagai asam galat,
gugus hidroksil pada senyawa fenolik
bereaksi dengan reagen Folin Ciocalteau
membentuk kompleks molibdenum–
tungsten sehingga warna biru yang
dihasilkan semakin pekat (Alfian &
Susanti, 2012).
Pada hasil penetapan kadar fenol
total ekstrak herba sambiloto, dengan asam
galat sebagai pembanding. Didapatkan
panjang gelombang 749 nm pada
konsentrasi 50ppm dengan absorban 0,523
(Gambar 6), dan kurva kalibrasi larutan
asam galat dengan pereaksi Folin
Ciocalteu dan NaOH dalam metanol dan
absorban larutan asam galat dengan
berbagai maca konsentrasi dapat dilihat
pada (Gambar 7, Tabel 3) :
Gambar 6. Spektrum larutan asam galat
dengan pereaksi Folin Ciocalteu dan
NaOH dalam metanol
Pengukuran kadar fenol total
dilakukan dengan spektrofotometri UV-
Vis yang dinyatakan sebagai asam galat
dengan persamaan regresi Y = 0,010x –
0,030 sehingga akan didapat kadar fenol
total ekstrak Aseton yaitu 0,43 %, kadar fenol
total ekstrak etanol 0,34 %
Penetapan kadar tanin total
dilakukan dengan menggunakan metode
spektrofotometri ultraviolet – visible,
dengan pembanding yang digunakan yaitu
katekin. Pada hasil penelitian kadar tanin
total ekstrak heksan adalah 0,88 % dan
ekstrak etanol adalah 0,87 %. Hasil dari
spektrum larutan katekin dalam etil asetat
dan absorban larutan katekin dalam etil
asetat dapat dilihat pada (Gambar 7, Tabel
4)

Gambar 7. Spektrum Larutan Katekin

dalam Etil Asetat
Gambar 7. Kurva Kalibrasi larutan asam
Panjang gelombang Absorban
galat dengan pereaksi Folin Ciocalteu dan
NaOH dalam metanol 280 0,513
Tabel 4. Absorban Larutan Katekin Dalam
Konsentrasi (ppm) Absorbsan
Etil Asetat
30 0,300
40 0,394 Penetapan kadar alkaloid total
ekstrak heksan, aseton, etanol, dan air
50 0,523
herba sambiloto (Andrographis paniculata
60 0,627 (Brum.f)Nees) dengan menggunakan
70 0,728 metode gravimetri, metode ini sangat
Tabel 3. Absorban larutan asam galat sederhana dan mudah dilakukan, juga hasil
dengan pereaksi Folin Ciocalteu dan yang didapatkan spesifik dan akurat (Alasa
NaOH dalam metanol dalam berbagai et, al., 2017) Alkaloid dalam keadaan
konsentrasi . bebas dapat disari dengan pelarut
kloroform, disini akan terbentuk dua
lapisan, paling bawah kloroform
sedangkan lapisan atas adalah asam
8
klorida. Alkaloid dalam ekstrak akan
bereaksi dengan NH3 dan menarik H+ dan
membentuk alkaloid bebas dalam
kloroform sedangkan amoniak akan
terpisah dalam fase lain kemudian
diuapkan hingga dihasilkan residu, yang
merupakan alkaloid total. Maka diperoleh
kadar alkaloid total dari ekstrak heksan
yaitu 0,31 %, ekstrak aseton 5,07 %,
diikuti dengan ekstrak etanol yaitu 4,98 %,
dan ekstrak air yaitu 0,93 %
KESIMPULAN
Dari data hasil penelitian dalam penelitian
ini, dapat disimpulkan bahwa :
a. Kandungan senyawa kimia dari
ekstrak heksan herba sambiloto
(Andrographis paniculata (Burm.
f) Nees) yaitu flavonoid dan
alkaloid. Kandungan senyawa
kimia dari ekstrak aseton herba
sambiloto yaitu fenol dan alkaloid.
Kandungan senyawa kimia dari
ekstrak etanol yaitu fenol, tanin,
dan alkaloid. Dan kandungan
senyawa kimia pada ekstrak air
dari herba sambiloto yaitu,
flavonoid, dan alkaloid.
b. Kadar flavonoid total dihitung
sebagai kuersetin dari ekstrak
heksan 1,28 % dan ekstrak air
0,57 %. Kadar fenol total
dihitung sebagai asam galat dari
ekstrak aseton 0,43 % dan
ekstrak etanol 0,34 %. Kadar
tanin di hitung sebagai katekin
dari ekstrak heksan 0,88 % dan
ekstrak etanol 0,87 %. Kadar
alkaloid total ekstrak heksan
0,31 %, ekstrak aseton 5,07 % ,
ekstrak etanol 4,98 % dan
ekstrak air 0,93 %.
Ucapan Terimakasih
Pada kesempatan ini perkenankan
penulis mengucapkan penghargaan dan
9
terima kasih yang setulusnya atas bantuan,
bimbingan doa, dukungan, semangat dan
perhatian atas terwujudnya tulisan ini.
Selanjutnya penulis ucapkan juga terima
kasih kepada sekolah tinggi ilmu farmasi
(STIFARM) padang yang telah
memberikan saranan serta fasilitas yang
sangat memadai selama penelitian ini
berlangsung.
DAFTAR PUSTAKA
Alasa, A. N., Anam, S., & Jamaludin
(2017). Analisis Kadar Total
Metabolit Sekunder Daun Tamoenju
(Hibiscus surattensis L.). Kovalen.
3(3), 258-268
Alfian, R., & Susanti. H. (2012).
Penetapan Kadar Fenolik Total
Ekstrak Metanol Kelopak Bunga
Rosella Merah (Hibicus sabdariffa
Linn) Dengan Variasi Tempat
Tumbuh Secara Spektofotometri.
Jurnal Ilmiah Kefarmasian, 2(1),
73 - 80
Chang, C., Yang, M., Wen H., & Cern J.
(2002). Estimation of total falvonoid
content in propolis by two
complementary colometric methods.
J food Drug Anal.
Departemen Kesehatan Republik
Indonesia (1995). Materia Medika
Indonesia. (Jilid IV). Jakarta:
Direktorat jendral Pengawasan Obat
dan Makanan
Hanani, E., (2015). Analisis fitokimia.
Jakarta: Buku kedokteran EGC.
Peraturan Menteri Kesehatan Nomor 6.
(2016). Tentang Formularium Obat
Herbal Asli Indonesia. Jakarta:
Mentri Kesehatan Republik
Indonesia
Rais, I., R. (2015). Isolasi dan penentu
kadar flavonoid ekstrak etanolik
herba sambiloto (Andrographis
paniculata (BURM.F). NESS).
Pharmaciana 5(1), 101-106
 Satya, D. S. B,. (2013). Koleksi tumbuhan of Biotechnology and Bioscience. 4
berkhasiat. Yogyakarta: Rapha (8), 28 – 30
Publising
Setyowati, W. A. E., Ariani, S. R. D.,
Ashadi, Mulyani, B., Rahmawati, C.
P,. (2014) Skrining fitokimia dan
identifikasi komponen utama ekstrak
metanol kulit durian (durio
zibethinus Murr.) varietas petruk.
Seminar nasional kimia dan
pendidikan kimia VI. Surakarta, 21
juni 2014
Sithara, N, V, S. Komathi, G. Rajalakshmi,
J. Queen, & D. Bharathi. (2016)
phytochemical analysis of
Andrographis paniculata using
different solvents. European journal

10

View publication stats