Membuat sediaan darah

malaria
STIKES MUHAMMADIYAH
BANJARMASIN
Membuat sediaan darah
malaria
1. Cara Pembuatan sediaan darah (SD)
2. Cara pewarnaan SD dengan cat
Giemsa
1. Cara Pembuatan sediaan darah (SD)
 Terlebih dahulu di lakukan pembuatan sediaan
tipis dan sediaan tebal

 Perhatikan kebersihan dari alat – alat dan bahan

pada pembuatan sediaan.

 Pemeriksaan malaria ini di perlukan darah tepi

yang diambil dari ujung jari atau daun telinga
yang telah dibersihkan dengan kapas berlakohol
70% sbg desinfektan dan pembersih zat lemak
pada permukaan kulit.
Lanjutan………
 Gunakan lencet atau jarum Franke secara cepat dan ckup
dalam (jng terlalu dlm).

Rasional: agar aliran darahnya lancar, karena kalau

tusukan tidak cukup dalam, maka darah dapat keluar
hanya dengan pemujitan jari.

 Pembuatan harus dilakukan dengan cepat dan tepat, karena

darah yang keluar akan cepat membeku.

 Bila menggunakan darah vena maka tambahkan zat anti

koagolan (misalnya; heparin), cara ini sering berakibat
distorsi parasit.
a. Cara membuat SD tipis
 SD harus benar – benar tipis, dng satu lapis sel – sel darah
yng tersebar merata dan tidak saling menumpuk.

 Pada SD tipis plasmodium dpt di lihat, sedangkan pada

sediaan tebal tidak dapt dilihat dng detail.

Caranya:
 Satu tetes darah ditempatkan pd ujung sebelah kanan dari
kaca SD

 Dengan segera SD kaca yang lain (spreader) letakkan

ujungnya di sebelah kiri dari tetesan darah tadi.
Lanjutan……….
 Geserkan ke kanan spreader sampai menyentuh tetesan
darah sehingga tetesan darah akan menempati pertemuan
kedua kaca SD tersebut.

 Lalu kedua kaca SD ini dibuat sudut 30-450 serta dng

kecepatan tetap kaca spreader di geser ke kiri, sehingga
didaptkan SD darah yg cukup tipis merata.

 Setelah itu SD darah di keringkan pada temperatur kamar,

dan lakukan pewarnaan.

Catatan : SD yg baik berbentuk seperti ekor komet.

b. Cara membuat SD tebal
Caranya:
 2 atau 3 tetes darah ditempatkan pd SD yg bersih,

 Ratakan menjadi sebuah bulatan dng diameter 1 cm.

 Di keringkan dalam temperatur kamar selama + 1 jam

 Lakukan pewarnaan

Catatan :
 Dlm pengeringan tidak blh di panasi karena tindakan
ini menyebabkan eritrosit skur dihemolisis pada
proses pewarnaan.
 Pewarnaan tidak lebih dr 24 jam setelah kering,
karena jika terlalu lama didiamkan eritrosit sukar
dihemolisist pada proses pewarnaannya.
Pewarnaan Sediaan
Cara pewarnaan dengan cat giemsa
a. Bahan –bahan yang di perlukan :
 SD tipis/tebal yg sudah kering

 Larutan buffer (penyangga) untuk zat hemolisis

eritrosit
 Metil alkohol murni untuk memfiksasi

 Larutan Giemsa: dibuat dari cat giemsa induk

diencerkan 30 – 50 kali dng lautan pengencer ph
7,2.
 Campurkan zat Giemsa induk satu bagian dalam
30 – 50 bagian larutan pengencer.
 Larutan pencuci (air leiding)
1. Cara pewarnaan dengan cat Giemsa untuk
SD tipis
 SD tipis yg sudah kering difiksasi dng metil-alkohol
murni selama 1 – 5 menit.
 Cuci dng air mengalir (air pipa), kemudian keringkan
pd temperatur kamar.
 Letakkan SD pd raka yng datar untuk di genangi larutan
Giemsa selama 30 – 60 menit.
 Cuci sebentar dng air mengalir.
 Keringkan pada temperatur kamar dan sediaan I
sandarkan miring.
 Diperiksa di bawah miksroskop dengan lensa obyektif
100x, dan memakai minyak immersi (annisol)
2. Cara pewarnaan dengan cat Giemsa untuk SD
tebal
 SD tebal yg dibuat tidak boleh terlalu tebal dan harus sudah
kering. SD tidak difiksasi dahulu, langsung digenangi
larutan penyangga selama 5 menit sampai SD menjadi
bening terhemolisis. Keringkan pd temperatur kamar.

 Genangi dng larutan Giemsa selama 30 – 50 menit.

 Setelah itu dicuci dng air mengalir secara hati – hati

 Keringkan dalam temperatur kamar.

 Diperiksa di bawah miksroskop dengan lensa obyektif

100x, dan memakai immersi (annisol)
Jika pembuatan SD dan pewarnaanya cukup baik
maka tampak dalam SD tersebut:
 Eritrosit bewarna merah muda

 Lekosit berwarna lembayung muda

 Protoplasma plasmodium menjadi biru

 Butir – butir khromatin dlm inti Plasmodium

berwarna merah karmin.
Thank you banget,,,,,!!!!!!!!!!