Pemeriksaan

Immunokromatogr
afi HBsAg
Kelompok 7
Alda Khoirunnisa
Eriska Nurul Annisa
Eva Yuliana
Natasya Maghfira
Nirmasari
Nurmalia Dini P

Pengertian
Immunokromato
grafi
Imunokromatografi ASSAY (ICA)
atau disebut juga aliran samping
(lateral flow test)atau dengan
singkat disebut uji strip(strip
test)tergolong dalam kelompok
imuno ASSAY berlabel sampel
sepertiimunofluerens(IF)
danimuno enzim(EIA).

Pengertian
HBsAg
Hepatitis virus B merupakan
radang hati yang disebabkan
oleh
infeksi
dengan
virus
Hepatitis B (VHB atau HBV),
yaitu suatu virus hepadna.
Marka
serologic
pertama
ditemukan pada penduduk asli
Australia oleh Blumberg dan
kawan-kawan pada tahun 1965
dan disebut sebagaiAustralian
antigen(Au Ag).

Sejarah
Pada tahun 1968, prince kemudian
melaporkan
adanya
hepatitis
B
surface
antigen
(HBsAg)
pada
penderita
serum
hepatitis
yang
akhirnya
dikenal
sebagai
virus
hepatitis
B
yang
identik
denganAustralian
antigen.
Ada
beberapa macam subtype HBsAg
yaitu: adw, ayw, adr dan ayz yang
amat penting untuk epidemologi
penyakit.
Hepatitis
B
masih
merupakan
masalah
kesehatan
masyarakat di Indonesia.

Pemeriksaan Immunokromatografi
HBsAg
Pengumpulan dan Persiapan
Spesimen

Pra Analitik

Pisahkan serum atau plasma

darah dari darah sesegera
mungkin untuk menghindari
hemolisis. Hanya spesimen
yang
jernih
dan
tidak
hemolisis
yang
dapat
digunakan

Lanjutan

Pra Analitik

Pengujian harus dilakukan segera

setelah
specimen
telah
dikumpulkan.
Jangan
tinggalkan
spesimen di suhu ruangan untuk
memperpanjang periode. Specimen
harus disimpan pada suhu 2o-8oC
agar dapat bertahan 3 hari. Untuk
masa penyimpanan yang lama,
spesimen harus disimpan dibawah
-20oC. specimen ke suhu ruangan
Bawa
lebih
dahulu
untuk
pengujian.
Bekuan spesimen harus sepenuhnya
di cairkan dan dicampur dengan baik
untuk pengujian. Spesimen tidak
boleh
dibekukan
dan
dicairkan
ulang.
Jika spesimen akan dikirim, spesimen
harus dikemas sesuai dengan federal,
negara atau regulasi total untuk
pengiriman agen etiologi.

Penyimpanan dan
Stabilitas
Kit
dapat
disimpan
pada
temperature kamar atau pendingin
(2-30oC). Tes strip tetap stabil
sampai tanggal kadaluarsa yang
tertera pada kemasan,Tes strip
harus tetap dalam kantong tertutup
sampai digunakan
Jangan
digunakan
kadaluarsa.

dibekukan.Jangan
melebihi
tanggal

Tujuan

Untuk pemeriksaan
kualitatif HbsAg dalam
serum atau plasma.

Prinsip
HBsAg One Step Hepatitis B Surface Antigen Test Strip
(Serum/Plasma) adalah tes kualitatif imunologi secara
aliran
lateral
untuk
mendeteksi
HbsAg
pada
serum/plasma. Membran dilapisi dengan anti antibodi
HBsAg poliklonal di garis tes. Selama tes berlangsung
spesimen serum atau plasma berekasi dengan partikel
yang dilapisi dengan anti-HBsAg antibodi monoklonal.
Campuran tersebut akan bergerak sepanjang membran
secara kapilaritas dan bereaksi dengan anti-HBsAg
antibody poliklonal pada membran dan menghasilkan
garis berwarna. Munculnya garis berwarna pada garis
tes mengindikasikan hasil positif dan jika tidak ada
garis berwarna pada garis tes menandakan hasil
negatif. Sebagai prosedur kontrol, garis berwarna harus
selalu muncul pada garis kontrol yang menandakan
volume sampel cukup dan telah mengisi membran.

Dasar teori
HBsAg merupakan suatu tahap secara kualitatif
yang menggunakan serum atau plasma dimana
bertujuan untuk mendeteksi adanya HBsAg
dalam serum atau plasma membrane yang
dilapisi dengan anti HBsAg antibody pada daerah
garis test selama proses pemeriksaan, sampel
serum atau plasma bereksi dengan partikel yang
ditutupi dengan anti HBsAg antibodi, campuran
tersebut akan meresap sepanjang membrane
kromatografi dengan anti HBsAg, anti pada
membrane dan menghasilkan suatu hasil posotif
pada daerah test, jika tidak menghasilkan garis
yang berwarna pada daerah test menunjukan
hasil yang negatif.

Alat dan
Bahan
Tabung Reaksi
Serum
Strip HBsAg

Reagen
Tes
strip
mengandung
partikel antiHBsAg
dan
anti-HBsAg
yang
dilapiskan
pada
membran.

Analiti
k

Pastikan tes strip, spesimen serum atau

plasma, dan/atau kontrol agar sama
dengan suhu kamar (15-300C) sebelum
pemeriksaan.

Bawa kemasan pada suhu kamar sebelum di buka.

Keluarkan tes strip dari kemasan dan segera gunakan.
Hasil terbaik akan diperoleh bila assay dilakukan dalam
satu jam.
Dengan panah menunjuk ke arah spesimen plasma atau
serum. Celupkan tes strip secara vertikal pada serum
atau plasma setidaknya selama 10-15 detik. Jangan
melewati garis batas maksimum (MAX) pada tes strip
saat mencelupkan tes strip. Lihat ilustrasi dibawah.
Tempatkan tes strip pada permukaan datar yang
tidak dapat menyerap, mulai hitung waktu dan
tunggu sampai garis merah muncul. Hasilnya harus
dibaca pada 15 menit.

Catatan :
Konsentrasi HbsAg yang rendah akan
muncul dalam garis lemah pada area
tes (T) setelah melampaui jangka
waktu,
oleh
karena
itu
jangan
membaca hasil setelah lebih dari 30
menit.

Pasca
Analitik
Positi
f

Interpretasi
Hasil

Muncul dua garis merah yang berbeda. Satu baris

harus dalam daerah kontrol (C) dan garis lain harus dalam
daerah tes (T)
*Catatan : Intensitas warna merah di wilayah garis uji (T)
akan bervariasi tergantung pada konsentrasi HBsAg yang
hadir dalam spesimen. Oleh karena itu , apapun warna
merah di wilayah uji (T) harus dianggap positif

Nega
tif

Satu garis merah muncul di daerah

kontrol (C). Tidak muncul garis merah atau
merah muda di wilayah uji (T).

Invali
d

Garis kontrol tidak muncul. Volume spesimen yang

tidak memadai atau teknik prosedural yang salah adalah
alasan yang paling mungkin untuk kesalahn ini. Tinjau
prosedur dan ulangi tes dengan strip tes baru. Jika
masalah berlanjut, segera hentikan menggunakan test kit
dan hubungi distributor lokal Anda

Interpretasi
Hasil

Positif

Negati
ve

Invali
d

Tindakan Pencegahan
Untuk diagnosa in vitro profesional. Jangan
digunakan setelah tanggal kadaluarsa.
Jangan makan, minum atau merokok di
area dimana spesimen atau kit sedang
digunakan.semua spesimen seperti bahan
Perlakukan

infeksius.
Amati
tindakan
pencegahan
terhadap resiko bahaya mikrobiologi seluruh
pengujian dan ikuti prosedur standar untuk
pembuangan spesimen.

Gunakan
pakaian
pelindung
seperti jas laboratorium, sarung
tangan
disposable
dan
pelindung mata ketika spesimen

Terimakasih
Semoga Bermanfaat
Selamat Belajar