ANALISIS KIMIA PROTEIN

1.PENDEKATAN %PROTEIN DARI % NITROGEN

Yaitu Menghitung jumlah protein berdasarkan jumlah nitrogen yang
terdestruksi kemudian dikonversikan
1.Vanslyke :
RNH2 + HNO2 -------ROH +H2O + N2
2. Metode Kjedahl : Destruksi. Destilasi
dan Titrasi . (MAKRO DAN MIKRO)

Dekstruksi
(CHON)

+ On + H2SO4------CO2 +H2O +
(NH4)2SO4
Destilasi
(NH4)2SO4 + 2NaOH ------ Na2SO4 + 2NH3
+ 2H2O
NH3 + H3BO3 -------- NH4H2BO3 (Mikro)
NH3 + HCl ------------ NH4Cl (makro)

Titrasi
NH4H2BO3 + HCl ------- NH4Cl + H3BO3
(mikro)
HCl (sisa) + NaOH ------- NaCl + H2O (makro)
Rumus : % N dan % Protein

2. Metode Formol (Volumetri)

Senyawa Formaldehid menonaktifkan gugus
amina membentuk senyawa dimetilol.
Selanjutnya gugus asam karboksilat dititrasi
dengan NaOH
Standar (susu)
Protein (%) = titran formol x 1,83 (konversi)

3. SECARA SPEKTROFOTOMETRI
3A. Prinsip Metode Lowry : Inti Aromatis dari Asam Amino
akan mereduksi pereaksi Fosfotungstat fosfomolibdat
menjadi molibdenum yang
berwarna biru diukur pada panjang gelombang
600 nm (Standar BSA)
3B. Prinsip Metode Biuret : Bereaksinya dua atau lebih ikatan
peptida dengan ion Cu 2+ dari Tembaga (II) Sulfat
(Pereaksi Biuret dalam alkalis) membentuk senyawa
kompleks yang berwarna ungu diukur pada panjang gel
450 nm