PROSEDUR KERJA INTRAMUSCULAR

Timbang berat kelinci

Hitung dosis dan volume larutan yang akan diberikan im. Dosis
50 mg/kg BB (1 ml larutan= 250 mg sulfametoksazol)

Berikan kedalam paha atas dari kaki

 PENGAMBILAN DARAH DENGAN SYRINGE

Ambil disposable syringe steril dan bilas

dengan larutan heparin

Bersihkan bulu-bulu pada daerah telinga di

sekitar vena marginal

Olesi xylol pada daerah sekitar vena

marginal
Ambil darah dengan disposable syringe 1 ml
darah, kocok syringe untuk mencegah
koagulasi

Ambil satu sampel darah sebelum

pemberian obat sebagai blanko
Lakukan pengambilan sampel darah setelah
pemberian obat pada waktu0, 10, 20, 30, 45, 60,
Metode Penetapan Kadar SMZ dalam darah dengan metode Azotasi dari
Bratton Marshal

Sampel + 2,5 ml N
(naftil) etilen
darah 0,5 ml vortex 2' diamina
+ 7,5 ml dihidrokhlorida
aquadest 0,1%

Vortex ad + 0,5 ml
vortex, diamkan
homogen, Ammonium
10'
diamkan 15 Sulfamat 0,5%

+ 2 ml TCA vortex, diamkan

Amati absorban
15% 3 menit

Sentrifuge Ambil
supernatan 5 ml
2500 rpm + 0,5 ml NaNO2
10 0,1%
 TAHAP PERCOBAAN
1. PEMBUATAN LARUTAN BAKU KERJA
Buatlah larutan baku induk 1000 mcg/ml dari 100 mg
SMZ dilarutkan dalam 5 ml NaOH 0,1N dan 25 ml H2SO4
4N (1:5), kemudian tambahkan air suling ad 100 ml

Buatlah larutan baku kerja SMZ dengan cara

mengencerkan larutan baku induk dengan air suling
sampai didapat larutan dengan kadar 10, 20, 30, 50 dan
100 mcg/ml

2. PENENTUAN PANJANG GELOMBANG

Amati 2 larutan baku kerja pada panjang gelombang
antara 510-560 nm
3. PEMBUATAN KURVA BAKU
Lakukan pengamatan serapan dari larutan baku kerja
yang telah direaksikan dg metode Azotasi dari Bratton
Marshal pada panjang gelombang yang didapat.

4. PENETAPAN KEMBALI KADAR SMZ YANG

DITAMBAHAKAN
Digunakan DALAM
larutan baku kerja DARAH
dengan kadar (RECOVERY)
10, 20, 30, 50, 100 mcg/ml.
0,5 ml larutan baku kerja + 0,5 ml darah + air suling 7,0 ml vortex,
diamkan 15 menit +...
direaksikan dengan metode Azotasi dari Bratton Marshal
Amati serapan pada panjang gel maksimum
Tabelkan hasil pengamatan dan buat kurva kadar larutan baku kerja
terhadap serapan pada
kertas grafik berskala sama. Hitung prosen recovery dengan cara sbg
berikut:
Memasukkan nilai serapan larutan baku recovery pada persamaan
kurva baku sehingga
diperoleh kadar SMZ yang diperoleh kembali
Hitung prosen recovery dengan membagi perolehan kembali SMZ dalam
darah dengan
5. PENGUMPULAN SAMPEL DARAH

Lakukan pengambilan sampel darah setelah pemberian

obat pada waktu 0, 10, 20, 30, 45, 60, 90 dan 120 menit

6. PENETAPAN KADAR SMZ DALAM DARAH

Tentukan kadar SMZ dalam cuplikan darah dengan reaksi
azotasi dari Bratton Marshal dan amati serapannya pada
panjang gel maks.
Masukkan data serapan ke persamaan garis recovery
untuk mendapatkan data kadar SMZ dalam darah dari
setiap waktu pengambilan.