AMINO TRANSFERASE

FAKTOR YANG MEMPENGARUHI RX ENZIM

1. Substrat
Satu pengaruh besar pada reaksi enzimatik adalah konsentrasi substrat. Pada tahun 1913, Michaelis dan Menten berhipotesis
peran konsentrasi substrat dalam pembentukan kompleks enzim-substrat (ES). Menurut hipotesis mereka, substrat mudah
mengikat enzim bebas pada substrat dengan konsentrasi rendah. Laju reaksi terus meningkat ketika lebih banyak substrat
ditambahkan, dengan jumlah enzim yang melebihi jumlah substrat.
2. Enzim
Karena enzim mengkatalisasi reaksi fisiologis, konsentrasi enzim mempengaruhi laju reaksi yang dikatalisasi. Asalkan konsentrasi
substrat melebihi konsentrasi enzim, kecepatan reaksi sebanding dengan konsentrasi enzim. Semakin tinggi kadar enzim,
semakin cepat reaksinya akan berlanjut karena lebih banyak enzim yang berikatan dengan substrat.
3. pH
Perubahan pH mungkin menyebabkan denaturasi suatu enzim atau mempengaruhi keadaan ioniknya, menghasilkan perubahan
struktural atau perubahan muatan pada residu asam amino. Karenanya, masing-masing Enzim beroperasi dalam kisaran pH
tertentu dan secara maksimal pada pH tertentu.
Sebagian besar reaksi fisiologis enzimatik terjadi pada kisaran pH 7,0 hingga 8,0, tetapi beberapa enzim aktif dalam rentang pH
yang lebih luas daripada yang lain. Di laboratorium, itu pH untuk suatu reaksi dikontrol dengan hati-hati pada pH optimal dengan
cara penambahan larutan buffer yang tepat.
4. Kofaktor
Kofaktor adalah bahan kimia yang membantu (molekul atau ion), yang terikat enzim untuk meningkatkan
aktivitas biologis enzim.
Ex : NAD sebagai kofaktor dapat direduksi menjadi nikotinamid adenin dinucleotide phosphate (NADP)
5. Suhu
Semakin meningkat suhu semakin meningkatkan reaksi yang meningkatkan kadar yang terdeksi.
5. Inhibitor
Reaksi enzim mungkin tidak berkembang secara normal jika suatu zat tertentu menggaggu reaksi. Inhibitor
kompetitif menghambat kerja enzim dengan menempati sisi aktif enzim sehingga substrat tidak dapat
masuk. Inhibitor ini bersaing dengan substrat untuk berikatan dengan sisi aktif enzim.
Inhibitor non kompetitif
Pada umumnya, inhibitor ini tidak memiliki struktur yang mirip dengan substrat dan bergabung dengan
enzim pada bagian selain sisi aktif enzim. Jika inhibitor ini bergabung dengan enzim maka akan mengubah
bentuk sisi aktif enzim.
 Pengukuran aktivitas enzim
Karena enzim biasanya dalam jumlah yang sangat kecil dalam cairan biologis dan seringkali sulit untuk
diisolasi dari senyawa serupa, metode yang mudah digunakan kuantisasi enzim adalah pengukuran
aktivitas katalitik. Aktivitas kemudian dihubungkan konsentrasi.
 Enzim sebagai reagen
Enzim dapat digunakan sebagai reagen untuk mengukur banyak konstituen nonenzimatik dalam serum.
Misalnya, glukosa, kolesterol, dan asam urat .
Enzim juga digunakan sebagai reagen untuk metode untuk mengukur analit yang merupakan substrat
untuk enzim yang sesuai. Salah satu contoh, laktat dehidrogenase (LDH)
Enzim juga umum digunakan sebagai reagen dalam immunoassay kompetitif dan tidak kompetitif, seperti
yang digunakan untuk mengukur antibodi human immunodeficiency virus (HIV), obat terapi, dan antigen
kanker. Enzim yang umum digunakan meliputi horseradish peroxidase, alkaline phosphatase (ALP), glukosa-
6-fosfat dehydrogenase, dan β-galactosidase.
ASPARTATE AMINOTRANSFERASE
• Aspartate aminotransferase (AST) adalah enzim yang termasuk dalam kelas transferases. Ini biasanya
disebut sebagai transaminase dan terlibat dalam transfer gugus amino antara asam aspartat dan α-keto.
Pyridoxal phosphate berfungsi sebagai koenzim.
• Reaksi transaminasi penting dalam metabolisme perantara karena fungsinya dalam sintesis dan
degradasi asam amino. Ketoasid yang terbentuk oleh reaksi pada akhirnya dioksidasi oleh siklus asam
trikarboksilat untuk menyediakan sumber energi.
• Sumber Jaringan
AST tersebar luas di jaringan manusia. Konsentrasi tertinggi ditemukan dalam jaringan jantung, hati, dan otot rangka,
dengan jumlah yang lebih kecil ditemukan di ginjal, pankreas, dan eritrosit.
• Signifikansi Diagnostik
Penggunaan klinis AST terbatas terutama untuk evaluasi hepatoselular gangguan dan keterlibatan otot rangka.
Di AMI, level AST mulai naik dalam waktu 6 hingga 8 jam, puncaknya pada 24 jam, dan umumnya kembali normal dalam
5 hari. Namun, karena distribusi jaringan yang luas, kadar AST tidak berguna dalam diagnosis AMI. Peningkatan AST
sering terlihat pada emboli paru. Berikut gagal jantung kongestif, kadar AST juga dapat meningkat, mungkin
mencerminkan keterlibatan hati sebagai akibat dari suplai darah yang tidak memadai ke organ itu. AST kadar tertinggi
pada gangguan hepatoselular akut. Pada virus hepatitis, kadarnya mungkin mencapai 100 kali ULN.
Pada sirosis, hanya tingkat sedang — kira-kira empat kali ULN. Gangguan otot rangka, seperti distrofi otot, dan kondisi
peradangan juga menyebabkan peningkatan Level AST (4 hingga 8 × ULN).
• Uji Aktivitas Enzim
Metode pengujian untuk AST umumnya didasarkan pada prinsip metode Karmen, yang menggabungkan
reaksi enzimatik ditambah menggunakan malat dehydrogenase (MD) sebagai reaksi indikator dan
memonitor perubahan absorbansi pada 340 nm terus menerus karena NADH teroksidasi menjadi NAD + .
PH optimal adalah 7,3 hingga 7,8.
• Sumber Kesalahan
Hemolisis harus dihindari karena dapat meningkatkan konsentrasi AST serum. Aktivitas AST stabil dalam
serum selama 3 sampai 4 hari di lemari es suhu.
ALANINE AMINOTRANSFERASE

• Alanine aminotransferase (ALT) adalah transferase dengan aktivitas enzimatik yang serupadengan AST.
khusus, itu mengkatalisis transfer dari kelompok amino dari alanine menjadi α-ketoglutarate dengan
pembentukan glutamat dan piruvat. Itu terminologi yang lebih tua adalah serum glutamic-pyruvic
transaminase (SGPT, atau GPT). Pyridoxal phosphate bertindak sebagai koenzim
• Sumber Jaringan
ALT didistribusikan di banyak jaringan, dengan konsentrasi yang relatif tinggi di hati. Ini dianggap sebagai
enzim transferase yang lebih spesifik untuk hati.
• Signifikansi Diagnostik
Aplikasi klinis uji ALT terbatas terutama untuk evaluasi gangguan hati . Peningkatan yang lebih tinggi
ditemukan pada kelainan hepatoseluler dibandingkan pada gangguan obstruktif ekstrahepatik atau
intrahepatik. Pada kondisi inflamasi akut hati, peningkatan ALT sering lebih tinggi daripada AST dan
cenderung tetap tinggi lebih lama sebagai akibat dari waktu paruh ALT yang lebih lama pada serum (16
dan 24 jam). Jaringan jantung mengandung sejumlah kecil aktivitas ALT, tetapi tingkat serum biasanya tetap
normal pada AMI kecuali kerusakan hati selanjutnya telah terjadi. Level ALT secara historis telah
dibandingkan dengan level AST untuk membantu tentukan sumber yang ditinggikan
• Uji Aktivitas Enzim
• Prosedur uji khas untuk ALT terdiri dari reaksi enzimatik yang digabungkan menggunakan LDH sebagai
enzim indikator, yang mengkatalisasi reduksi piruvat menjadi laktat dengan oksidasi simultan NADH.
Perubahan absorbansi pada 340 nm yang diukur secara terus menerus berbanding lurus dengan
aktivitas ALT. PH optimal adalah 7,3 hingga 7,8.
• Sumber Kesalahan
ALT stabil selama 3 hingga 4 hari pada suhu 4 ° C. Ini relatif tidak terpengaruh oleh hemolisis.
SIKLUS CORI METABOLISME ANAEROB
RATIO DE RITIS (AST/ALT)