stimulated Raman scattering microscopy Introduction • Kanker laring adalah salah satu tumor saluran pernapasan yang paling umum, dan karsinoma sel skuamosa (SCC) adalah keganasan paling umum pada laring. Untuk mengetahui perbedaan antara jaringan normal dengan jaringan SCC dengan mata sangat susah dibedakan, maka dari itu alat imaging sangat dibutuhkan seperti Stimulated Raman Scattering (SRS) microscopy. Methods • Pengumpulan dan persiapan jaringan Semua sampel jaringan dikumpulkan dari pasien di Rumah Sakit Rakyat Provinsi Zhejiang, dan disetujui oleh Komite Etik dengan persetujuan. Jaringan bedah diangkat mengikuti prosedur operasi standar. Jaringan karsinoma sel skuamosa laring berasal dari biopsi klinis yang didiagnosis, dan jaringan normal sebagian besar diambil dari polipus pita suara • Pengaturan mikroskop • Pewarnaan H&E • Image processing • Survey and statistical analysis • Deep-learning model Results • SRS imaging on thin frozen sections of larynx tissues Gambar 3A menunjukkan SCC khas in situ, menunjukkan lapisan mukosa skuamosa menebal dan meningkatkan kepadatan seluler, namun lamina basal tetap utuh. Berbeda dengan SCC in situ, jaringan SCC invasif menunjukkan sel epitel infiltratif yang tersebar di lamina basal ke dalam stroma (Gambar 3B). Lebih jauh, gambar SRS yang diperbesar dapat mengungkapkan fitur diagnostik SCC yang terperinci, termasuk atypia sitologis (Gambar 3C), pengaturan abnormal sel neoplastik dan limfosit (Gambar 3D), sarang kanker (Gambar 3E) dan mutiara keratin (Gambar 3F). Dapat dilihat bahwa mikroskop SRS dengan jelas membedakan fitur histologis utama SCC ini dengan konsistensi tinggi dengan pewarnaan H&E • SRS imaging on thin frozen sections of larynx tissues Result • Gambar 4D menunjukkan inti sel heteromorfik yang khas, termasuk ukuran dan bentuk inti yang beragam, sangat berbeda dengan sel skuamosa normal (Gambar 4A-C). Gambar 4E menunjukkan sel-sel yang tersebar dengan kandungan protein yang diperkaya dalam nukleus (panah kuning), yang dapat dikaitkan dengan angka mitosis sel tumor yang berkembang biak yang mengandung protein tinggi dan tingkat DNA [25]. Gambar 4F menunjukkan sel yang sangat tidak teratur dengan morfologi seluler yang terganggu, menunjukkan displasia tingkat tinggi. Sarang kanker yang dibentuk oleh beberapa sel yang dikelompokkan dapat dengan mudah diidentifikasi pada Gambar 4G. Sarang kanker yang khas dikelilingi oleh serat kolagen dapat dilihat pada Gambar 4H, menunjukkan baik atypia sitologis dan neoplasia struktural. Pada jaringan SCC laring yang sangat berbeda, mutiara keratin tipikal dapat diamati pada Gambar 4I. Discussion • Operasi tumor laring yang ideal adalah untuk mengangkat semua jaringan ganas lokal tanpa sisa sel tumor yang tersisa. Di klinik, setelah reseksi tumor, ahli bedah selalu memotong beberapa potong jaringan pada margin residual untuk dievaluasi oleh ahli patologi. Jika sel-sel kanker masih ada pada margin reseksi, reseksi dan pemeriksaan yang diperluas dituntut untuk mencapai tujuan reseksi tumor lengkap. Margin reseksi dianggap normal akan dipertahankan untuk pelestarian fungsi, terutama untuk SCC laring dini. Namun, sulit untuk mendapatkan penilaian tiga dimensi dari tepi tumor dengan histologi tradisional, dan ekstensi sub-mukosa dapat ditinggalkan dengan risiko kekambuhan tumor meskipun margin reseksi yang tampak jelas. Oleh karena itu dibutuhkan SRS. mikroskop SRS adalah non-invasif, jaringan bedah yang dicitrakan oleh SRS masih dapat digunakan untuk evaluasi molekuler dan histologis lebih lanjut. Conclution • SRS mikroskop dapat memberikan histologi bebas label untuk jaringan laring, mengungkapkan fitur diagnostik utama dengan hasil yang mirip dengan H&E tradisional. Selain itu, SRS yang terintegrasi dengan jaringan saraf dan dapat memberikan cara yang cepat dan akurat untuk diagnosis intraoperatif pada jaringan bedah laring yang baru dan belum diproses. Dengan dataset gambar yang lebih besar di masa mendatang, SRS dapat lebih dioptimalkan untuk prediksi yang kuat dan otomatis yang dapat membantu menginformasikan tujuan bedah dan meningkatkan alur kerja pengambilan keputusan.