ANALISIS KUANTITATIF

Fe DALAM SERUM
KU BLOK 6
 TUJUAN UMUM PRAKTIKUM
 mahasiswa mampu memahami dan menjelaskan metabolisme Fe di
dalam tubuh

 TUJUAN KHUSUS PRAKTIKUM

mahasiswa mampu :
 Memahami metode analisis kuantitatif Fe dalam serum
 Memahami dan melakukan pemeriksaan Fe secara kolorimetri
 Menganalisis hasil praktikum dikaitkan dengan proses biokimiawi
penyakit tertentu
 Dapat menjelaskan kelainan-kelainan metabolisme Fe
SAMPEL

 SERUM
BAHAN
 HCl 0,35 N
 Larutan trichloroacetat acid (TCA) 20% (untuk mendenaturasi protein
dalam serum/ deproteinizing)
 Larutan kalium asetat 50% (50 gram kalium asetat dilarutkan dalam
100 mL aquabidestilata)
 Larutan hidroquinon 1% (50 mgram dalam 5 mL aquabidestilata)
 Orthophenantrolin 0,1% (100 mg orthophenantroline-HCl dilarutkan
dalam 100 mL aquabidestilata)
 Larutan standar Fe 1 mg%
CARA KERJA
1. Masukkan 1 mL serum ke dalam tabung sentrifuge, kemudian
tambahkan 1 mL aquabidestilata dan 1 mL HCL 0,35 N. campur baik-
baik dan didiamkan selama satu jam pada suhu kamar

2. Tambahkan 1 mL larutan trichloroasetat acid (TCA) 20% campur

dengan menggunakan vortex mixer. Diamkan pada suhu kamar selama
15 menit, kemudian sentrifuge pada kecepatan 2000 rpm selama 15
menit.

3. Siapkan 7 tabung reaksi pada rak trabung dan tambahkan zat-zat

kimia pada tabung tersebut sesuai dengan bagan berikut:
LIHAT SLIDE SELANJUTNYA
CARA KERJA
REAGEN Blanko Sampel Standar Standar Standar Standar Standar
(mL) (mL) (mL) (mL) (mL) (mL) (mL)

Tabung No 1 2 3 4 5 6 7

5 3 4,5 4 3,5 3 2,5

Aquabidestilata
- - 0,5 1 1,5 2 2,5
Larutan standar
- 2 - - - - -
Supernatan
0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25
Kalium asetat
0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15
Hidroquinon 1%
1 1 1 1 1 1 1
Orthophenantrolin
1%
CARA KERJA CONT

4. Campur semua larutan dalam tabung reaksi tersebut

5. Diamkan selama 20 menit pada suhu kamar

6. Baca absorbansinya menggunakan spektrofotometer pada

panjang gelombang 500 nm.
PERHITUNGAN

 SESUAI LANGKAH DI BUKU PETUNJUK PRAKTIKUM

 BISA DIHITUNG DENGAN KURVA REGRESI DI PROGRAM MICROSOFT EXCEL
WASSALAMMUALAIKUM WR.WB
TUGAS MAHASISWA

Buatlah laporan individu dengan tulis tangan yang

berisi:
 Perhitungan kadar Fe sesuai perhitungan Excel
 Analisis hasil perhitungan Fe dibandingkan dengan
nilai normal rujukannya
 Aspek klinis/gangguan/kelainan terkait kadar Fe