PEMELIHARAN & KALIBRASI

MIKROPIPET
SEMESTER IV-ABK 2019
 TOPIK PEMBAHASAN

• DEFINISI MIKROPIPET
• CARA MENGGUNAKAN MIKROPIPET
• PEMELIHARAAN MIKROPIPET
• KALIBRASI MIKROPIPET
 TUJUAN PEMBELAJARAN

1. SISWA MENGENAL ALAT DAN DAPAT MENGGUNAKAN MIKROPIPET SESUAI

PROSEDUR
2. SISWA MAMPU MELAKUKAN PEMELIHARAAN MIKROPIPET
3. SISWA MAMPU MELAKUKAN KALIBRASI MIUKROPIPET
 DEFINISI
• MIKROPIPET :
 TIPE MIKROPIPET (1)
AIR DISPLACEMENT PIPETTES
AIR DISPLACEMENT PIPETTING MEMILIKI APLIKASI STANDAR AKURASI YANG
TINGGI. NAMUN
KONDISINYA SEPERTI TEKANAN ATMOSFER SAMA DENGAN GRAFITASI DAN
VIKOSITAS DARI
CAIRAN, MAY EFFECT THE PERFORMANCE OF AIR DISPLACEMENT PIPETTES.
 TIPE MIKROPIPET (2)
POSITIF DISPLACEMENT
TIPS MICROSYRINGE STEPPER SEKALI PAKAI MEMILIKI PISTON DIDALAM UNIT
SILINDER
HAL INI BERGUNA UNTUK MENGHINDARI KONTAMINASI SILANG PADA SAMPEL
(CARRY OVER)
KONTAMINASI EFEK DARI AEROSOL.
BAGAIMANA CARA MENGGUNAKAN
MIKROPIPET
PENGGUNAAN MIKROPIPET & PEMILIHAN TIPS

• 1. ATUR VOLUME YANG AKAN DIGUNAKAN

PENGGUNAAN MIKROPIPET & PEMILIHAN TIPS
 ISTILAH DALAM PEMIPETAN
1. ASPIRATE : UNTUK MENARIK CAIRAN KEDALAM UJUNG TIP
2. DISPENSE : UNTUK MENGELUARKAN CAIRAN DARI UJUNG TIP
3. BLOW OUT : UNTUK MENGELUARKAN CAIRAN RESIDUAL DARI TIP
4. CALIBRATION CHECK : UNTUK MEMERIKSA PERBEDAAN VOLUME CAIRAN
YANG DIPIPET DENGAN UKURAN VOLUME YANG DIPILIH
5. ADJUSTMENT : MENGUBAH PENGATURAN PIPET SEHINGGA VOLUME YANG
DIGUNAKAN SESUAI DENGAN SPESIKASI
 TEKNIK FORWARD (1)
1. FORWARD PIPETTING
- TEKAN TOMBOL OPERSIONAL (READY POSITION
1) KE TEKANAN YANG PERTAMA (FIRST STOP)
- CELUPKAN KEDALAM CAIRAN SAMPAI KEDALAM
AN 1 CM DAN PERLAHAN LEPASKAN TOMBOL
ATAS (READY POSISI 2) TARIK CAIRAN DARI\
UJUNG TIP, MENYENTUH SISI MEDIA (TABUNG)
UNTUK MENGILANGKAN KELEBIHAN CAIRAN
 TEKNIK FORWARD (2)

- KELUARKAN CAIRAN KEDALAM WADAH DENGAN MENEKAN

TOMBOL OPERASIONAL KE BAWAH KE POSISI FIRST STOPDigunakan untuk
memipet dan
SAMPAI KE SECOND STOP (READY POSISI 3) UNTUK MENGSO
mencampurkan sampel
NGKAN CAIRAN.
atau reagen kedalam
- LEPASKAN TOMBOL KEPOSISI SIAP (READY POSISI 4) cairan lain

Rekomendasi : larutan
berair seperti : buffer
cairan asam dan alkalis
 TEKNIK REVERSE (1)
2. PEMIPETAN METODE REVERSE
- TEKAN TOMBOL OPERASIONAL (READY POSITION1)
PADA TEKANAN PERTAMA FIRST STOP SAMPAI
SECOND STOP .
- CELUPKAN KEDALAM CAIRAN SAMPAI KEDALAM
CAIAN 1 CM DAN PERLAHAN LEPASKAN TOMBOL
OPRASIONAL (READY POSISI 2) TARIK CAIRAN DARI\
UJUNG TIP, MENYENTUH SISI MEDIA (TABUNG)
UNTUK MENGILANGKAN KELEBIHAN CAIRAN
 TEKNIK REVERSE (2)
3. KELUARKAN CAIRAN KEDALAM WADAH DENGAN MENE
KAN TOMBOL OPERASIONAL SAMPAI PEMBERHENTIAN
Digunakan untuk menghidari
PERTAMA, TAHAN TOMBOL DIPOSISI INI. BEBERAPA CAIR
resiko percikan dan
AN DIUJUNG JANGAN DIKELUARKAN. pembentukan busa dan
gelembung
4. CAIRAN YANG TERSISA BIAS DIKEMBALIKAN KEMBALI
ATAU DIBUANG.
Rekomendasi :larutan dengan
5. LEPASKAN TOMBOL OPERASI KE POSISI SIAP vikositas tinggi dan untuk
pemipetan ukuran kecil
menggunakan air displacement
 TEKNIK REPETITIVE (1)
1. TEKAN TOMBOL OPERASONAL SAMPEL KE TEKANAN
KEDUA (SECOND STOP)
2. CELUPKAN KEDALAM CAIRAN SAMPAI KEDALAM
CAIRAN 1 CM DAN PERLAHAN LEPASKAN TOMBOL
OPRASIONAL (READY POSISI 2) TARIK CAIRAN DARI\
UJUNG TIP, MENYENTUH SISI MEDIA (TABUNG)
UNTUK MENGILANGKAN KELEBIHAN CAIRAN
 TEKNIK REPETITIVE (2)
3. KELUARKAN CAIRAN KEDALAM WADAH DENGAN MENE
KAN TOMBOL OPERASIONAL SAMPAI PEMBERHENTIAN
PERTAMA, TAHAN TOMBOL DIPOSISI INI. BEBERAPA CAIR
Digunakan untuk
AN DIUJUNG JANGAN DIKELUARKAN menambahkan reagen ke
dalam sumur plate mikro
4. LANJUTKAN PEMIPETAN DENGAN MENGULANGI LANG
KAH 2 DAN 3
Metode ini juga disarankan
untuk pemipetan verulang
dengan volume sama
 PEMELIHARAAN MIKROPIPET
• TUJUAN :
KONDISI MICROPIPETTE DAPAT TERJAGA DENGAN BAIK SEHINGGA DAPAT
MENGHASILKAN
VOLUME YANG TETAP AKURAT.
• TAHAPAN
1. JANGKA PENDEK
2. JANGKA PANJANG
 JANGKA PENDEK
• CEK MICROPIPETTE SETIAP HARI SEBELUM DAN SESUDAH DIGUNAKAN
• BERSIHKAN DENGAN TISSUE BERSIH UNTUK BAGIAN LUAR MICROPIPETTE
• LETAKKAN MIROPIPET PADA RAKNYA ATAU SIMPAN DALAM KOTAKNYA
• PERHATIAN KHUSUSNYA PADA BAGIAN TIP CONE
• GUNAKAN ETANOL 70% UNTUK MEMBERSIHKAN TIP CONE
 JANGKA PANJANG

• PEMBERSIHAN DENGAN MELAKUKAN PEMBONGKARAN MIKROPIPET

• PERSIAPAN KALIBRASI
 PEMBERSIHAN MICROPIPET (1)

• CARA MEMBERSIHKAN MIKROPIPET

1. BUKA MICROPIPETTE DENGAN MENGGUNAKAN MAINTENANCE TOOL YANG
TERSEDIA.
2. BERSIHKAN DARI DEBU DAN KOTORAN DENGAN MENGGUNAKAN TISSUE
BERSIH.
3. GUNAKAN ALKOHOL 70% UNTUK STERILISASI.
4. TIP CONE & TIP EJECTOR DAPAT DIRENDAM DALAM ALKOHOL SELAMA 12
JAM.
 PEMBERSIHAN MICROPIPET (2)

5. OLESI PISTON DAN BAGIAN YANG SUDAH DIBERSIHKAN DENGAN PELUMAS

SILICON YANG
TERSEDIA
6. PASANG KEMBALI MICROPIPETTE SEPERTI SEMULA.
7. SIMPAN MICROPIPETTE DALAM POSISI TEGAK.
KOMPONEN-
KOMPONEN
MIKROPIPET
 A

C KETERANGAN :
A.
B.
D C.
D.
E.
B
E F.
F
TROUBLE SHOOTING (1)
TROUBLE SHOOTING (2)
 PRAKTIKUM

• MEMPRAKTEKAN TEHNIK PEMIPETAN

• VALIDASI PROSES PEMIPETAN
• PEMELIHARAN (PEMBERSIHAN MIKROPIPET)