LEMBAR KERJA PRAKTIKUM MAHASISWA

MATA KULIAH MIKROBIOLOGI PANGAN

Topik
Hari/tgl praktikum
Kelompok

: Flora Normal dan Morfologi Mikroorganisme

:
:

Pendahuluan
Secara alamiah berbagai jenis mikroorganisme ada di bahan makanan, bahkan
pada bahan makanan tertebtu terdapat jenis mikroorganisme tertentu pula. Bahan
merupakan merupakan sumber zat gizi bagi metabolisme mikroorganisme. Aktivitas
metabolisme mikroorganisme dalam bahan makanan dapat mendatangkan keuntungan
dan juga kerugian bagi manusia.
Mikrpprganisme dapat dipelajari dengan menetahui bentuk dan sifat-sifatnya yang
khusus. Bakteri mempunyai bentuk yang tetap, sehingga bakteri dapat dipelajari
berdarkan bentuk atau morfologinya. Masing-masing jenis jamus (kapang dan khamir)
mempunyai bentuk hifa dan spora yang khusus, sehingga jamur dapat dipaljari dengan
pengamatan kekhususan bentuk hifa dan sporanya.
Tujuan Praktikum
Diakhir praktikum mahasiswa dapat :
1. menjelaskan jenis mikroflora yang ada di bahan makanan/makanan dengan benar
2. melakukan pewarnaan mikroorganisme dengan benar
3. mendeskripsikan morfologi mikroorganisme dengan benar
Alat dan bahan
1. media biakan (NA, PCA, PDA)
2. bahan makanan (makanan)
3. reagensia pewarna (gram, spora)
4. ose, jarum tanam dan perlatan standar praktikum mikrobiologi
5. gelas obyek dan penutupnya
6. cawan steril
7. oven
8. mikroskop
Metode Kerja
Mikroflora (mikroorganisme di sekitar kita)
a. persiapan media
1. memanaskan agar tegak sampai mencair
2. menuangkan agar tegak yang sudah bersuhu 40 oC ke dalam cawan steril
3. meratakan agar yang telah dituangkan dengan cara menggerakkan cawan
dimeja datar membentuk angka delapangan ( satu kali)
b. Penanaman
1. mengambil sebagian (satu biji, satu iris, satu spatula) bahan
makanan/makanan atau bagian tubuh (rambut/kuku) dengan perlatan yang
telah disterilkan terlebih dahulu
2. memasukkan bahan makanan/bagian tubuh ke dalam agar cawan yang
telah memadat.
3. meningkubasikan di suhu kamar selama 24 jam
4. melakukan pengamatan pertumbuhan mikroorganisme

Morfologi Mikroorganisme
Morfologi Bakteri
- pembuatan olesan bakteri
a. membersihkan gelas obyek dari minyak dengan menggunakan tissu yang
dibasahi dengan alkohol 70 %
b. mengambil 1 tetes (1-2 ose) aqudest steril, dan meletakkannya di atas gelas
obyek
c. mengambil (dengan ose) sedikit kultur bakteri, kemudian ratakan pada air
diatas gelas obyek (diamater 1 cm).
d. mengering-anginkan olesan ( 1 menit) kemudian memfiksasi dengan nyala api
kecil
Pewaranaan Gram
a. meneteskan beberapa tetes larutan kristal violet pada olesan bakteri, dibiarkan
selama 60 detik
b. membilas kelebihan larutan dengan air mengalir (melalui botol)
c. meneteskan larutan lugol, dibiarkan selama 60 detik
d. membilas kelebihan larutan dengan air mengalir (melalui botol)
e. menetskan alkohol asam diatas olesan bakteri, dibirakan selama 15 detik
f. membilas kelebihan larutan dengan air mengalir (melalui botol)
g. meneteskan larutan sfranin diatas olesan bakteri, dibiarkan selama 15 detik
h. membilas kelebihan larutan dengan air mengalir (melalui botol)
i. pengamatan mikroskopis
Pewarnaan Endospora
a. meneteskan beberapa tetes larutan hijau melasit pada olesan bakteri, dibiarkan
selama 5 menit dengan pemansan (20 menit tanpa pemanasan)
b. membilas kelebihan larutan dengan air mengalir (melalui botol)
c. meneteskan larutan sfranin diatas olesan bakteri, dibiarkan selama 30 detik
d. membilas kelebihan larutan dengan air mengalir (melalui botol)
e. pengamatan mikroskopis
Pewarnaan Kapang
a. meneteskan beberapa tetes lactofenol cotton blue diatas gelas obyek bersih
b. mengambil hifa kapang dengan jarum tajam atau pinset steril, kemudian
meletakknya pada larutan tetes lactofenol cotton blue
c. menutup larutan dan kapang dengan cover glass
d. pengamatan mikroskopis
Pewarnaan Kapang
a. meneteskan beberapa biru metili diatas gelas obyek bersih
b. mengambil sedikit kultur khamir (dari suspensi khamir) dengan loop (ose),
kemudian meletakknya pada larutan biru metili
c. menutup larutan dan kapang dengan cover glass
d. pengamatan mikroskopis

LAPORAN HASIL
Setelah 24 atau 48 jam inkubasi, sifat koloi yang tumbuh pada agar cawan adalah :

Dari karakter koloni tersebut, dapat diduga bahwa yang tumbuh di agar cawan yang pada
dasarnya berasal dari bahan yang ditanam adalah (jelaskan argumen dasar Saudara):

Tugas : lakukan pewarnaan mikroorganisme dengan bahan koloni dalam agar cawan
saudara, dan laporkan sifat mikroskopis mikroorganisme hasil pengamatan saudara

Morfologi Mikroorganisme
Jenis mikroorganieme yang diamati :
Nama
:
Sifat
:
Gambar hasil pengamatan

Penjabaran hasil pengamatan