Abstrak
Pediococcus acidilactici UP02 digunakan sebagai starter untuk fermentasi tempoyak (Durian
Murr.), Seorang buah fermentasi tradisional Indonesia. Rasa tempoyak dibandingkan dengan
orang-orang dalam fermentasi spontan (tidak Starter ditambahkan). Hasil penelitian
menunjukkan bahwa penambahan P. acidilactici UP02 dalam fermentasi tempoyak penurunan
kuantitas komponen sulfur, mengurangi kadar gula, dan peningkatan berbagai senyawa nonsulfur serta, non-volatile keasaman dan isi asam organik (laktat, malat, dan asetat). Evaluasi
sensori menunjukkan bahwa tidak ada yang signifikan. Perbedaan antara sampel untuk asam dan
aroma. Namun, sampel P. acidilactici UP02-diinokulasi lebih diterima dari sampel dengan
perlakuan tanpa-starter. Berdasarkan hasil GC-MS, komponen rasa tempoyak dengan pengobatan
P. acidilactici UP02 diamati memiliki 48 senyawa, terutama terdiri dari dimetil disulfide dan
dietil disulfida diikuti oleh etana, 1-1-bis ethylthio.
Pendahuluan
Tempoyak (Durian Murr.) Adalah fermentasi durian, yang merupakan lauk populer dan bumbu di
Malaysia dan Indonesia, terutama di Sumatera dan Kalimantan islands1,2. Produk ini krim,
yellowwhite dalam warna, dan memiliki aroma yang khas. Itu adalah disiapkan dengan
menempatkan durian bubur dalam stoples yang garam (2-15%) ditambahkan dan hati-hati
dicampur. Guci yang kemudian tertutup rapat dan disimpan selama 7 d untuk membiarkan
spontan fermentasi untuk mengambil place3,4. Selama fermentasi, tekstur perubahan durian
bubur dari padat ke semipadat massa disertai dengan rasa yang kuat; itu. Rasa adalah hasil dari
kombinasi unik dari berbagai gula, asam organik serta berbagai senyawa organik yang mudah
menguap.
Volatile organic senyawa dalam tempoyak terdiri dari belerang yang mengandung senyawa; 3,5dimetil-1,2,4 trithiolane menjadi tertinggi, dan non-sulfur senyawa dengan butanoic Asam, 2metil etil ester yang highest4 tersebut. Tiga asam organik meliputi asetat, laktat dan malat; malic
yang paling abundant5. Asam organik tersebut tidak hanya berkontribusi untuk rasa senyawa,
tetapi juga meningkatkan keasaman tempoyak. Keasaman tempoyak diproduksi di Malaysia
adalah 3,6% (asam asetat) dengan pH akhir dari 3,8-4,6 sedangkan, kandungan keasaman
tempoyak dari Indonesia 2.55 dan 2.56% (seperti laktat asam) 6-8. Ini keasaman tinggi tempoyak
dikaitkan dengan Bakteri asam laktat (BAL) 4,9,10. Beberapa peneliti telah mengisolasi banyak
spesies LAB dari tempoyak.
Lactobacillus plantarum, L. brevis, L. mali dan L. fermentum telah ditemukan di Malaysia
tempoyak10,11, sedangkan L. plantarum, L. casei dan L. corynebacterium telah ditemukan di
tempoyak dari Indonesia12. Sebuah durianis spesies baru, Lactobacillus, diisolasi dari tempoyak
Malaysia, juga telah reported13. LAB lain yang ditemukan di tempoyak adalah Leuconostoc
mesenteroides12, Pediococcus acidilactici dan Weissella mesenteroides4. Historis spesies
Lactobacillus, Leuconostoc, Pediococcus, dan Streptococcus adalah spesies utama LAB.
Ada banyak contoh dikendalikan fermentasi menggunakan LAB sebagai starter untuk
pengolahan makanan, seperti, hijau zaitun, susu kedelai yang difermentasi, dan cincang makarel
production14-16. Penggunaan starter Budaya memberikan konsistensi dan keandalan kinerja.
Laporan pada LAB sebagai starter untuk tempoyak terbatas. Fermentasi, menggunakan starter,
dapat mempengaruhi rasa tempoyak. LAB dapat bervariasi Reaksi metabolit yang memproduksi
berbagai compounds17-19. Senyawa ini penting sebagai senyawa. Senyawa ini penting karena
mereka menanamkan rasa khas dan aroma ke final produk. Tujuan dari penelitian ini adalah
untuk mengevaluasi rasa di tempoyak menggunakan P. acidilactici UP02 sebagai starter, yang
memiliki sifat bersifat homofermentatif dan yang asal dari tempoyak telah dilaporkan dalam
sebelumnya studi.
Bahan dan Metode
Persiapan inoculum Pediococcus acidilactici UP02 diperoleh dari Institut Sains dan Teknologi
Pangan, University of the Philippines, Los Banos, Filipina. Isolat ini adalah berbudaya dan subkultur anaerob dalam media MRS (Difco, USA). Itu kultur disentrifugasi selama 15 menit pada
3000 rpm dan disuspensi dalam larutan garam (NaCl 0,85%) untuk menghasilkan 108CFU / mL
untuk starter kerja.
Persiapan Tempoyak
Daging durian aseptis diambil dan dibagi menjadi dua set empat perlakuan perwakilan terdiri
dari baik dengan dan tanpa pemula, dan jumlah fermentasi hari (0,4,8 dan 12). Dua ulangan
dipertahankan dalam percobaan ini. Garam ditambahkan ke setiap perawatan di tingkat 3% (w /
w), berdasarkan berat durian daging, dan setiap lot (200 g) dikemas dalam wadah plastik. Satu
lot adalah diinokulasi dengan P. acidilactici UP02 dan banyak lainnya secara alami difermentasi
(tanpa menambahkan pemula). Itu Tingkat inokulasi adalah 1%, berdasarkan berat buah durian.
Sampel kemudian disimpan dalam lemari di suhu kamar (27 1oC) untuk evaluasi. Sampel dari
masing-masing perlakuan ditarik pada 0, 4, 8, dan 12 d fermentasi untuk analisis total asam
volatil, asam dan mengurangi gula non-volatile. Data yang dihitung sebagai rata-rata dari dua
ulangan.
Analisis Tempoyak
Prosedur yang dijelaskan oleh AOAC20 digunakan untuk Pemeriksaan total asam volatil dan
non-volatile, sedangkan mengurangi gula ditentukan oleh Nelson-Method21 Samogyi. Evaluasi
senyawa rasa dilakukan dengan menggunakan fase padat ekstraksi mikro (SPME) metode
menjebak dan kuantifikasi asam organik individu dengan HPLC22 serta sensorik Analisis
dilakukan pada 8 d sampel fermentasi. Untuk menilai perkembangan rasa selama tempoyak
fermentasi, evaluasi sensorik pada aroma dan asam dilakukan dengan mencetak tes, meskipun
orang-orang di penerimaan umum dilakukan oleh uji hedonik.
Evaluasi Individu Asam Organik
Sebuah 20 uL sampel tempoyak disuntikkan setelah penyaringan melalui filter 0,45 pM
membran dalam Seppack C-18 cartridge (Waters Madya, USA). Kondisi HPLC adalah sebagai
berikut: Merck Polysphere OA HY Kolom (6 mm x 300 mm); fase gerak 0.01 N H2SO4; laju alir
0,8 mL / menit. Daerah puncak setiap asam organik dalam sampel dihitung dari sistem integrator
dari stasiun data yang HPLC. Standar asam organik yang digunakan adalah laktat, malat, asam
asetat, suksinat dan sitrat.
Penentuan Jumlah Content Asam Volatile
Untuk sampel homogen sekitar 10 g terkandung dalam labu penyulingan, 100 mL air suling air
ditambahkan. Distilasi dilakukan dengan cepat sampai 100 mL destilat dikumpulkan. Distilat
dititrasi saat masih panas dengan standar 0,1 N NaOH, menggunakan fenolftalein sebagai
indikator. Hasil telah dinyatakan sebagai mg asam malat / g sampel (basah dasar).
asetat (1,63 mg / mL). Tambahan starter, bagaimanapun, menunjukkan peningkatan jumlah asam
organik. Temuan ini mengindikasikan bahwa spesies LAB memiliki reaksi khusus mereka sendiri
dan bisa bervariasi dengan kondisi fermentasi. Asam suksinat dan sitrat dilaporkan sebagai
umum asam non-volatile di salah satu produk LAB seperti Kimchi Korea (dongchimi lobak),
bersama dengan malat, laktat dan asetat acids22. Konversi gula ke asam organik dipengaruhi
oleh jenis LAB dan kemampuannya untuk memfermentasi karbohidrat. Produksi asam laktat
adalah karakteristik umum di homofermentatives3 dan P. acidilactici dikelompokkan
sebagai homofermentative24. Namun, hasil ini Penelitian menunjukkan bahwa asam malat lebih
tinggi dari laktat acid. The LAB bersifat homofermentatif diproduksi terutama asam laktat dari
metabolisme gula, tapi signifikan perubahan pembentukan produk dapat terjadi dengan gula
Keterbatasan dan aerasi. Co-metabolisme gula dan asam organik adalah umum dan sering
menyebabkan produksi product18 yang berbeda.
Asam organik yang ada dalam tempoyak tidak diidentifikasi dalam studi sebelumnya.
Keuntungan dari Temuan ini adalah bahwa asam laktat dan asam asetat isi secara individual
diselidiki menggunakan HPLC yang berbeda dari orang lain. Kebanyakan authors7-9
melaporkan kedua asam sebagai total keasaman melalui metode titrasi. Itu Total keasaman
tempoyak dinyatakan sebagai asetat (3.6%) dan asam laktat (2,55-2,56%) 6,8.
Total Konten Asam Volatile dan Non-volatile
Tabel 1 menunjukkan bahwa nilai keasaman non-volatile
starter dan tidak ada-starter perawatan pada awal fermentasi adalah 3,55 mg malat sampel asam /
g. Pada Tanggal Hari-4 dari fermentasi, keasaman non-volatile nilai meningkat secara signifikan
untuk 9,72 dan 13.27 mg malat Asam / g sampel tanpa-starter dan pemula perawatan, masingmasing. Tren ini juga diamati untuk stabil keasaman. The non-volatile keasaman memiliki nilai
tertinggi di hari-empat fermentasi dan berbeda nyata pada semua lokasi. Sampel dengan P.
acidilactici UP02 pengobatan memiliki nilai tertinggi non-volatile keasaman, diikuti oleh
perlakuan tidak-starter. Setelah hari-4 fermentasi, nilai keasaman non-volatile semua sampel
secara bertahap menurun (Tabel 1). Ini adalah mungkin karena reaksi awal asam dengan alkohol
dalam pembentukan metabolit lain.
Nilai asam volatil dari semua sampel, seperti yang ditunjukkan pada Tabel 1, pada awal
fermentasi, adalah 0,24 asam asetat / g. Diamati bahwa keasaman volatile nilai kedua perawatan
meningkat secara signifikan pada Hari-4 fermentasi (0,63-2,79 mg asam asetat / g). Sampel
dengan P. acidilactici UP02 starter memiliki rendah Nilai keasaman volatil (0.63 mg asam
asetat / g, sedangkan, pengobatan tidak-starter memiliki keasaman tinggi yang mudah menguap
Nilai (2.79 mg asam asetat / g), setara dengan 0,28%. Nilai ini tidak begitu berbeda
dibandingkan volatile Asam dilaporkan dalam kubis fermentasi, yaitu sekitar 0,33%; nilai
tertinggi dicapai setelah 21 d fermentation25. Volatile keasaman dalam tempoyak adalah juga
mungkin disumbangkan oleh oktanoat, etana dithioic, asam hexanoic dan ethylthiobutanoic,
selain asetat asam, seperti yang dianalisis dengan GC-MS4.
Volatile Flavour Senyawa
Analisis sampel 8-d-lama tempoyak diinokulasi dengan dan tanpa P. acidilactici UP02 untuk
Senyawa sulfur volatil dan rasa buah komponen menunjukkan bahwa ada yang berbeda
perbedaan jumlah komponen flavor (Tabel 2 & 3). Komponen rasa tempoyak dengan pengobatan