Nama : Ni Nyoman Della Yanti

Nim : 1308505047

BAB I
RUMUSAN MASALAH

Rumusan Masalah
- Bagaimana prinsip analisis suatu senyawa menggunakan metode spektrofotomettri
FTIR ?
- Bagaimana tingkat validitas dari metode yang digunakan ?
- Apakah spektroskopi FTIR mampu mendeteksi lemak babi yang dicampurkan
dengan minyak kelapa sawit sebagai basis minyak pada formulasi lotion kosmetik
?
BAB II
PREPARASI SAMPEL

Persiapan Sampel Lemak Babi

Lemak babi disiapkan sesuai dengan yang dibutuhkan kemudian diekstraksi
dengan Proses rendering yang dilakukan pada suhu 90-100C selama 2 jam dalam
oven konvensional. lemak yang meleleh disaring dengan kain muslin yang telah
dilipat, dikeringkan dengan Na2SO4 anhidrat, dan disentrifugasi pada 3.000 rpm
selama 20 menit. Lapisan lemak didekantasi, dikocok kuat dan disentrifugasi kembali
sebelum disaring menggunakan kertas saring Whatman. Lemak yang diperoleh
disimpan dalam wadah tertutup rapat pada lemari es dan digunakan untuk persiapan
krim kosmetik.
Formulasi lotion kosmetik
Diambil 50 gram lotion kosmetik yang akan digunakan, yang terdiri dari asam
stearat 1,5 gram; Lemak babi atau minyak sawit dan campuran lainnya 5 gram; setil
alkohol 0,25 gram; cera flava 0,25 gram; parafin cair 0,05 gram; propil paraben 0,1
gram; butylated hydroxytoluene 0,1 gram; lanolin 0,1gram; dimetikon 0,1 gram; air
suling 39,4 gram; Na2EDTA 0,5 gram; gliserin 1,25 gram; parfum 0,25 gram dan
trietanolamin 0,9 gram. Formulasi lotion disiapkan dengan menimbang setiap bahan
pada keseimbangan analitis. Setil alkohol, stearat asam, propil paraben, lanolin,

dimetikon dan minyak yang digunakan kemudian dipanaskan pada suhu 70C (fase
minyak). Triethanolamine bersama-sama dengan air dipanaskan pada suhu 70C (fase
air). fasa minyak dituangkan ke dalam fase air dan diaduk dengan magnetik stirer
sampai mencapai suhu kamar 30 menit. Parfum ditambahkan ke lotion yang telah
diperoleh kemudian dilakukan proses ekstraksi yaitu ekstraksi pelarut untuk ekstrak
lemak atau minyak dari formulasi lotion.

Ekstraksi lemak
Ditimbang Sampel lotion sebanyak 10 gram ditambahkan 5 ml HCl pekat dan
20 ml air dan kemudian dikocok dengan kuat. Filtrat dipindahkan dengan
menggunakan corong pisah dan diekstraksi menggunakan 2 x 15 ml kloroform.
ekstrak kloroform digabungkan dan dimasukkan sebanyak 250- ml kedalam labu
alas bulat dan diuapkan menggunakan vakum evaporator rotary pada suhu 40C,
sampai kloroform benar-benar hilang. Ekstrak lipid yang diperoleh dianalisis dengan
menggunakan spektrometer FTIR.
Analisis Instrumental
Spektrum FTIR dipindai menggunakan Spektrofotometer FTIR sebuah ABB
MB 3000 yang dilengkapi dengan detektor DTGS beresolusi 4cm-1, jumlah scan 32
menambahkan dalam 400-4,000 cm-1 wilayah. Spectra diperoleh dengan
menggunakan Software Horizon MB FTIR versi 3.0.13.1 ( ABB, Kanada ). Sampel
yang ditempatkan dalam kontak dengan horisontal Total reflektansi dilemahkan (
HATR ) elemen ( ZnSe kristal ) pada suhu ambien dikontrol ( 20C). semua spektra
dibandingkan dengan baground spektrum udara. Setelah setiap scan, referensi
spektrum dan baground udara baru diambil. Spektrum ini dicatat sebagai nilai
absorbansi pada setiap titik data dalam rangkap tiga.
Kemometrika
Diperoleh PLS dan PCA yang dicapai dengan menggunakan Horizon MB FTIR
software versi 3.0.13.1 Leave-one-out Prosedur validasi digunakan untuk
memverifikasi Model kalibrasi. Nilai-nilai ( RMSEC ) dan koefisien determinasi ( R2
) yang diperoleh dari kalibrasi digunakan sebagai kriteria validitas untuk model
kalibrasi. Kemampuan prediksi model kalibrasi PLS digunakan untuk menghitung
validasi atau prediksi sampel.

BAB III
KALIBRASI DAN VALIDASI METODE

Untuk kalibrasi sampel, pada laboratorium disiapkan lotion sampel dengan

konsentrasi Lemak babi dalam beberapa konsentrasi tertentu. persentase berat rasio
dari lemak babi dan minyak sawit yang digunakan adalah sebagai berikut :

F = Formula
Serangkaian sampel lotion disiapkan secara merata di laboratorium, perbedaan
konsentrasi pada masing-masing formula tersebut digunakan untuk tujuan
mengetahui perbedaan serapan spektrum serapan pada saat dilakukan analisis dengan
FTIR dari masing-masing komposisi lemak babi dan minyak kelapa sawit tersebut.
Penentuan kalibrasi dan validasi metode analisis lemak babi (LD) dan minyak kelapa
sawit dilakukan untuk menentukan kesahihan data hasil analisis yang diperoleh.
Lemak babi dan minyak kelapa sawit serta campurannya dalam formulasi lotion
selanjutnya diekstraksi menggunakan kloroform, penggunakan kloroform sebagai
agen pengektraksi karena lemak babi dan minyak kelapa sawit merupakan asam
lemak yang memiliki ikatan rangkap tak jenuh yang banyak memiliki gugus karbon
rangkap dan sedikit gugus polar sehingga lemak babi dan minyak kelapa sawit dapat
dilarut dalam pelarut organik yang salah satunya adalah pelarut kloroform,
selanjutnya diuapkan, penguapan tersebut bertujuan untuk menghilangkan pelarut
yang digunakan agar kesembilan sampel tersebut dapat dianalisis menggunakan
FTIR. Pada analisis, spektra yang terbentuk dari hasil FTIR selanjutnya dianalisis
lebih lanjut untuk mengembangkan PLS dan model PCA.

BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN

Ekstrak lipid hasil ekstraksi sebelumnya diuji dengan menggunakan

spektroskopi FTIR. Spekroskopi inframerah adalah sebuah metode analisis
instrumentasi pada senyawa kimia yang menggunakan radiasi sinar infra merah.
Spektroskopi inframerah berguna untuk mengetahui gugus fungsi yang terdapat pada
senyawa organik. Bila suatu senyawa diradiasi menggunakan sinar infra merah, maka
sebagian sinar akan diserap oleh senyawa, sedangkan yang lainnya akan diteruskan.
Serapan ini diakibatkan karena molekul senyawa organik mempunyai ikatan yang
dapat bervibrasi.Vibrasi molekul dapat dialami oleh semua senyawa organik, namun
ada beberapa yang tidak terdeteksi oleh spektrometri IR. Spektroskopi FTIR adalah
teknik pengukuran dengan mengumpulkan spektrum inframerah. Energi yang diserap
sampel pada berbagai frekuensi sinar inframerah direkam, kemudian diteruskan ke
inferometer. Sinar pengukuran sampel diubah menjadi interferogram (intensitas vs
waktu) perhitungan secara matematika Fourier Transform untuk sinyal interferogram
tersebut akan menghasilkan spektrum yang identik pada spektroskopi inframerah
(intensitas vs frekuensi).
Analisis spektrum Gambar 1 menunjukkan spektrum FTIR dari Lemak babi dan
minyak sawit di mid-infrared ( MIR ) wilayah (4,000-650 cm-1). pemilihan dari
minyak sawit sebagai campuran minyak dalam penelitian ini (formulasi lotion)
didasarkan pada popularitas sebagai salah satu baru komponen yang digunakan dalam
lotion kosmetik, khususnya di Indonesia. Kedua spektra terlihat sangat mirip dan
khas karakteristik penyerapan band muncul untuk lemak dimakan umum dan minyak.
Setiap puncak dalam spektrum FTIR sesuai dengan kelompok fungsional
bertanggung jawab untuk IR. penyerapan puncak bersama-sama dengan kelompokkelompok fungsional yang bertanggung jawab untuk penyerapan puncak pada
Gambar. 1 ditunjukkan pada Tabel 1. Kedua spektrum tampak sangat mirip, namun
mereka mengungkapkan sedikit perbedaan dalam hal intensitas band dan frekuensi
yang tepat di mana absorbansi maksimum yang dihasilkan untuk setiap lemak dan
minyak, karena berbeda Sifat dan komposisi lemak dievaluasi dan minyak terutama
pada daerah bilangan gelombang dari 3006 (a), 1117 (k) dan 1098 cm-1. Wilayah
frekuensi 3006 cm-1 ini disebabkan oleh C-H, sementara frekuensi dari 1117 dan
1098 cm-1 berasal dari peregangan getaran dari hubungan ester dalam trigliserida.
Penentuan komposisi asam lemak dari dipelajari sampel (minyak sawit dan lemak
babi) mengungkapkan bahwa kedua minyak memiliki jumlah yang cukup tinggi asam
oleat Namun, dibandingkan untuk kelapa sawit, lemak babi terkandung dua kali lebih

banyak hasil linolenat kelompok minyak sawit. Hal ini tercermin dalam spektrum
lemak babi, di mana sebuah band yang lebih tajam diamati pada frekuensi 3006 cm-1
dibandingkan dengan spektrum kelapa sawit. Lemak dengan proporsi yang tinggi dari
kelompok hasil linolenat dan linoleat menunjukkan frekuensi yang lebih tinggi untuk
band ini dibandingkan dengan proporsi yang tinggi kelompok hasil oleat
Spektrum Analisis Spektroskopi FTIR

Gambar 1. Spektrum FTIR dari minyak babi (LD) dan minyak kelapa sawit pada
pertengahan inframerah (MIR) daerah (4,000-650 cm-1).

Tabel 1. Keterangan Gambar 1 Spektrum FTIR dari minyak babi (LD) dan minyak
kelapa sawit pada pertengahan inframerah (MIR) daerah (4,000-650 cm-1).

Lemak babi dan kelapa sawit menunjukkan spektrum tumpang tindih dua
puncak yang memiliki serapan maksimum pada daerah frekuensi 1117 cm-1 (k) dan
1098 cm-1(l). Ketinggian puncak ini ditunjukkan untuk berbanding terbalik dengan
proporsi kelompok hasil jenuh dan kelompok hasil oleat, masing-masing. Lard
memiliki proporsi kira-kira sama jenuh antara kelompok hasil dan kelompok asil
oleat yang tercermin dalam spektrum lemak babi, di mana puncak dari 1.117 (k) dan
1.100 cm-1 (l) muncul, memiliki sama tinggi. memiliki konsentrasi yang lebih tinggi
kelompok hasil jenuh dari gugus hasil oleat, menunjukkan ketinggian yang tidak
sama dari puncak pada 1117 (k) dan 1.100 cm-1 (l). Selain itu, lemak babi dan kelapa
sawit juga dapat dibedakan di frekuensi 3006-cm-1 (a). Didalam wilayah, lemak babi
memiliki absorbansi tinggi dari kelapa sawit. Yang dimana intensitas puncak
(absorbansi) lemak babi dan minyak sawit yang sedikit berbeda yang lebih dipilih
untuk dioptimalkan untuk analisis lemak babi di lotion formulasi.
Kuantifikasi LD dalam campuran dengan minyak kelapa sebagai minyak dasar
dalam lotion kosmetik dilakukan dengan menggunakan multivariat kalibrasi PLS di
wilayah frekuensi gabungan 1,200-1,000 cm-1 Wilayah ini dipilih karena memiliki
kemampuan untuk menawarkan nilai yang lebih tinggi dari R2 dan nilai yang lebih
rendah dari RMSEC, dibandingkan dengan daerah frekuensi lain ( yaitu 3,100-3,000
cm-1 dan frekuensi gabungan daerah 3,100-3,000 cm-1 dan 1,200-1,000 cm - 1).
Keuntungan utama dari PLS adalah karena kemampuannya untuk mengembangkan
korelasi antara spektrum FTIR dan analit kepentingan, bahkan ketika tidak ada
perbedaan secara visual diamati di FTIR Data spektra. Model kalibrasi PLS adalah

dikembangkan berdasarkan standar kalibrasi.Spektrum FTIR dengan berbeda

konsentrasi LD dan minyak sawit yang digunakan untuk membuat kalibrasi Model
yang ditunjukkan pada Gambar. 2. Menggunakan tiga PC, yang hubungan antara nilai
aktual ( x-axis ) terhadap FTIR nilai prediksi ( y-axis ) dari LD dalam campuran
dengan minyak kelapa di lotion formulasi ditunjukkan pada Gambar. 3 dengan R2
dari 0,99059.
PLS Model kalibrasi selanjutnya mengalami silang validasi menggunakan
leave-one-out teknik. validasi (RMSECV) diperoleh relatif rendah (1,72% v/v).
Untuk validasi atau Prosedur prediksi, sampel lainnya disiapkan di laboratorium yang
digunakan untuk meminimalkan kesalahan prediksi dan untuk memberikan perkiraan
ketelitian keseluruhan prediksi.Verifikasi daerah spektral digunakan untuk
melaksanakan kalibrasi PLS dilakukan dengan menghitung prediksi jumlah kesalahan
residual kuadrat (PRESS) nilai untuk komponen yang berbeda pokok (PC) atau
faktor. PRESS dihitung dari kesalahan prediksi di kalibrasi sampel standar oleh lintas
validasi dan kemudian diplot dengan sejumlah faktor dieksploitasi di kalibrasi Model.
Jumlah optimal faktor adalah tiga yang sesuai ke titik di mana PRESS mencapai
minimum atau mulai tingkat off. Hasil ini menunjukkan bahwa Spektroskopi FTIR
dikombinasikan dengan PLS adalah teknik yang handal untuk deteksi dan
kuantifikasi LD dengan deteksi membatasi sesedikit 1% v / v.

Klasifikasi Formulasi Lotion Kosmetik yang Mengandung Lemak

Gambar 2. Model kalibrasi dari spektrum FTIR dengan konsentrasi yang berbeda
dari minyak babi (LD) dan minyak sawit.

Gambar 3. Kombinasi spektroskopi FTIR dengan PLS

Gambar 4. Plot Skor PCA untuk Klasifikasi Produk Lotion dengan Minyak Babi
(LD) dan Minyak Kelapa Sawit pada Formulasi Sampel

Gambar 5. Spektrum Hasil Evaluasi Sampel Produk Lotion Supermarkert dan

Farmasi dengan Spektroskopi FTIR

FTIR spektrum formulasi lotion tersedia secara komersial di supermarket dan

farmasi analisis ( PCA ). Analisis komponen utama ( PCA ) adalah salah satu teknik
pengenalan pola tanpa pengawasan yang digunakan dalam analisis multivariat. PCA
memproyeksikan data asli dimengurangi dimensi didefinisikan oleh komponen utama
( PC ). Teknik ini berguna ketika ada korelasi hadir di antara Data . Dalam penelitian
ini, PCA dicapai dengan menggunakan spektrum FTIR absorbansi lotion
mengandung lemak babi dan minyak sawit di wilayah frekuensi 1,200-1,000 cm-1 .
Gambar 4 menunjukkan plot skor PCA dari lemak babi dan lotion sawit mewakili
proyeksi sampel didefinisikan oleh komponen pertama ( PC 1 ) , komponen kedua (
PC 2 ) dan komponen ketiga. Menggunakan proyeksi ini lotion baik dipisahkan,
bahwa PCA dapat mencapai klasifikasi antara lotion yang mengandung lemak babi
dan minyak kelapa sawit. Selanjutnya, sampel lotion diketahui diduga mengandung
satu dari kedua lemak babi dan minyak sawit dapat dinilai. Keputusan itu dibuat
untuk apakah sampel yang tidak diketahui jatuh dekat dengan lemak babi atau kelapa
sawit lotion. Semakin dekat jarak, semakin tinggi kemungkinan sampel tidak
diketahui jatuh ke salah satu dari dua kelompok.
Metode yang dikembangkan adalah lebih digunakan untuk analisis persiapan
lotion tersedia secara komersial di beberapa supermarket dan apotek di Yogyakarta.
Untuk spektrum sampel lotion yang dipilih akan ditampilkan pada Gambar. 5. Semua
sampel dievaluasi tidak mengandung lemak babi dalam proses pembuatannya. Dari
kesimpulan ini, dapat dilihat bahwa pada frekuensi wilayah 1,200-1,000 cm -1 tidak

ada dua puncak yang memiliki ketinggian yang sama. Namun, jika sampel komersial
yang dibubuhi lemak babi, puncak yang sesuai akan muncul.
BAB V
KESIMPULAN

Dari hasil pengamatan dan pembahasan dapat disimpulkan bahwa

spektroskopi FTIR dengan kemometrika Partial Least Square dapat digunakan untuk
menganalisis keberadaan lemak babi (LD) dalam formulasi lotion kosmetik. Hasil ini
tentunya dapat digunakan lebih luas untuk berbagai jenis sediaan kosmetik topikal
yang menggunakan minyak sebagai bahan dasar dalam formulasinya. Analisis ini
juga memiliki keunggulan yaitu mengehemat waktu pengerjaan dan menghindari
penggunaan pelarut yang berlebihan.