LAMPIRAN

Lampiran 1. Pembuatan Media Malt Extract Agar (MEA)

Malt Extract 20 g/L dan Agar 12 g/L

Aquades 1L Diaduk hingga homogen

Ditutup dengan kapas,

kertas coklat, dan
kantong plastik

Disterilisasi suhu 1210C,

15-20 menit

Didiamkan hingga suhu

40-500C

Dituangkan pada
petridish disposible

Didiamkan hingga padat

Ditutup dan dirapatkan

dengan parafilm

Malt Extract Agar

59
Lampiran 2. Pembuatan Media Grain Spawn

Barley 1 kg

Dicuci 2 kali

Aquades 1L Dimasak ±7-10 menit

Ditiriskan/disaring

CaSO4 10
mg, CaCO3 3 Diaduk hingga homogen
mg
Didiamkan sampai suhu
±40-500C

Dimasukkan ke dalam
botol @ 100 g

Disterilisasi suhu 1210C,

15-20 menit

Didiamkan ±24 jam

Disterilisasi suhu 1210C,

15-20 menit

Barley siap diinokulasi

60
Lampiran 3. Pretreatmen pada Jerami Padi

Jerami Padi

Dipotong 1-2 cm

Glukosa Ditimbang 10 g setiap botol

0,586%;1%;2%:
3%;3,414% (g/L)
CaSO4
0,095%;0,25%;0 Ditambahkan
,625%;1%;1,155
%(mg/L)
Aquades Disterilisasi suhu 1210C,
15-20 menit

Didiamkan ±24 jam

Disterilisasi suhu 1210C,

15-20 menit

Didiamkan sampai suhu

±40-500C

Serpula
lacrymans Media Jerami padi
2±0,2 g

Diinkubasi

Hasil

61
Lampiran 4. Ekstraksi Jerami Padi Hasil Inkubasi

Sampel

Aquades
Dicampurkan
800C

Dishaker pada suhu

400C, 150 rpm, 1 jam

Disaring dengan kain

Ampas
saring

Disaring dengan kertas

Kotoran
saring

Ekstrak Sampel

62
Lampiran 5. Pembuatan Larutan Asam Galat dan Sodium Karbonat (Na2CO3)
a. Pembuatan Larutan Asam Galat

500 µg Asam
Galat

Etanol 96%
Dihomogenkan
(10ml)

Ditambahkan
aquades sampai Dihomogenkan
batas 100 ml

Larutan Asam Galat

Konsentrasi 5 µg/ml

b. Pembuatan Sodium Karbonat (Na2CO3)

200 gram
Na2CO3

800 ml
Dilarutkan
aquades

Didihkan (100°C) pada

Stirer

Didinginkan ±40-50°C)

Diinkubasi 24 jam (±30-

35°C)

Disaring dengan kertas

saring

Aquades
Dihomogenkan
sampai 1L

Larutan Na2CO3
Konsentrasi 0,2 g/ml

63
Lampiran 6. Pembuatan dan Pengukuran Absorbansi Larutan Standar Fenol

Mulai

500, 400,
300, 200, Ditempatkan pada tabung
100, 0 µL reaksi terpisah
aquades

0, 100, 200,
Dihomogenkan
300, 400, 500
dengan Vortex
µL asam galat

100µL Larutan Dihomogenkan

Folin Ciocalteu dengan Vortex

Didiamkan 8 menit

400 µL
larutan Dihomogenkan
Sodium dengan Vortex
karbonat
Didiamkan pada suhu 40⁰C
selama 30 menit

Diukur absorbansi pada

panjang gelombang 765 nm

Dicatat nilai
absorbansinya

Dihiitung gradien (m) dan konstanta (c)

dengan Regresi Linier

Persamaan Regresi Fenol

y=mx+c

64
Lampiran 7. Pembuatan dan Pengukuran Fenol Terlarut (TSP) pada Jerami Padi

Sampel

Dipipet masing-masing 50 µL
pada tabung reaksi terpisah

Aquades Dihomogenkan
450 µL dengan Vortex

100µL Larutan Dihomogenkan

Folin Ciocalteu dengan Vortex

Didiamkan 8 menit

400 µL larutan Dihomogenkan

Sodium karbonat dengan Vortex

Didiamkan pada suhu

40°C selama 30 menit

Diukur absorbansi pada

panjang gelombang 765 nm

Dicatat nilai
absorbansinya

Disubstitusikan ke Persamaan
Regresi Fenol (y)

Dihitung Nilai x nya

Hasil

65
Lampiran 8. Pembuatan Larutan DNS, Larutan Glukosa, Larutan DNS dengan
Glukosa dan DNS dengan aquades
a. Pembuatan Larutan DNS

250 ml potassium sodium

tartate (400mg/ml)
50 ml
larutan
dihomogenkan
DNS (100
mg/ml)

50 ml sodium
hidroksida dihomogenkan
(200 mg/ml)

Aquades hingga
dihomogenkan
500ml

Larutan DNS

b. Pembuatan Larutan Glukosa

100 mg Glukosa

Aquades
dihomogenkan
100 ml

Larutan Glukosa konsentrasi

1 mg/ml

66
Lampiran 8. Pembuatan Larutan DNS, Larutan Glukosa, Larutan DNS dengan
Glukosa dan DNS dengan aquades (Lanjutan)
c. Pembuatan Larutan DNS dengan Glukosa

1.8 ml Larutan
Glukosa

Larutan DNS
dihomogenkan
1,8 ml

Larutan DNS dan

Glukosa (1:1)

d. Pembuatan Larutan DNS dengan aquades

1,8ml Larutan
DNS

Aquades
Dihomogenkan
1,8 ml

Larutan DNS 1 v/v

67
Lampiran 9. Pembuatan dan Pengukuran Absorbansi Larutan Standar Gula
Reduksi

Mulai

500, 400, 300,

200, 100, 0 µL Ditempatkan pada tabung reaksi
Larutan DNS terpisah
dan aquades

0, 100, 200,
300, 400, 500 Dihomogenkan
µL larutan DNS dengan Vortex
dan glukosa

500 µL Dihomogenkan
DNS dengan Vortex

Ditutup dengan
aluminium foil

Didihkan selama 15 menit

dengan Waterbath shaker

Didinginkan hinggga suhu

±35-40⁰C

Diukur absorbansi pada

panjang gelombang 540 nm

Dicatat nilai
absorbansinya

Dihitung Nilai gradien (m) dan

konstanta (c) dengan Regresi Linier

Persamaan Regresi Gula Reduksi

(y=mx+c)

68
Lampiran 10. Pembuatan dan Pengukuran Gula Reduksi (TGR) pada Jerami
Padi

Sampel

Dipipet masing-masing 250 µL

pada tabung reaksi

Dihomogenkan
DNS 750 µL
dengan Vortex

Ditutup dengan
aluminium foil

Didihkan selama 15 menit

dengan Waterbath shaker

Didinginkan hingga
suhu ±35-40⁰C

Diukur absorbansi pada

panjang gelombang 540 nm

Dicatat nilai
absorbansinya

Hasil

69