Efek Bronchodilatory dan Anti-Inflammatory dari ASM-024, Ligan Reseptor Nikotinik, Dikembangkan

untuk Pengobatan Asma

Evelyne Israe ¨l Assayag1,2, Marie-Jose'e Beaulieu1, Yvon Cormier1,2 *

1Institut Universitaire de Cardiologie et de Pneumologie de Que'bec, Que'bec, QC, Kanada,

2Asmacure Lte'e, Que'bec, QC, Kanada

Abstrak Asma konvensional dan perawatan COPD mencakup penggunaan bronkodilator, terutama
agonis b2-adrenergik, antagonis reseptor muskarinik dan kortikosteroid atau antagonis leukotrien
sebagai agen anti-inflamasi. Obat-obatan aktif ini diberikan secara terpisah atau diberikan sebagai
obat kombinasi dosis tetap ke inhaler tunggal. ASM-024, senyawa homopiperazinium, yang berasal
dari modifikasi struktural difenilmetilpiperazinium (DMPP), telah dikembangkan untuk menawarkan
mekanisme tindakan alternatif yang dapat memberikan kontrol simtomatik melalui sifat
antiinflamasi dan bronkodilator gabungan dalam satu entitas tunggal. Penghambatan inflamasi
seluler tergantung dosis pada cairan lavage bronchoalveolar diamati pada tikus yang peka terhadap
ovalbumin, kemudian diobati selama 3 hari dengan paparan hanya hidung dengan ASM-024 aerosol
pada dosis sampai 3,8 mg / kg (ED50 = 0,03 mg / kg ). Nilai ED250 methacholine menunjukkan bahwa
hiperresponsivenessness jalan nafas (AHR) terhadap methacholine menurun setelah pemberian
ASM-024 dengan inhalasi dengan dosis 1,5 mg / kg, dengan nilai 0,14560.032 mg / kg untuk
kelompok perlakuan ASM 024 dibandingkan dengan 0,08860 0,023 mg / kg untuk tikus yang tidak
diobati. Dalam penelitian isometrik in vitro, ASM-024 memunculkan relaksasi bergantung dosis pada
trakea tikus terisolasi, manusia, dan anjing yang dikontrak dengan trakea methacholine dan kelinci
percobaan yang dikontrak dengan histamin. ASM-024 juga menunjukkan efek perlindungan dosis
dan waktu bergantung pada kontraksi yang disebabkan methacholine. Secara keseluruhan, dengan
kombinasi sifat anti-inflamasi, bronchodilating dan bronchoprotective, ASM-024 dapat mewakili
kelas obat baru dengan pendekatan farmakologis baru yang dapat terbukti bermanfaat untuk
perawatan asma kronis dan, mungkin, COPD.

Citation: Assayag EI, Beaulieu M-J, Cormier Y (2014) Efek Bronchodilatory and Anti-Inflammatory dari
ASM-024, Ligan Reseptor Nikotinik, Dikembangkan untuk Pengobatan Asma. PLoS ONE 9 (1):
e86091. doi: 10.1371 / journal.pone.0086091

Editor: Thomas H. Thatcher, Universitas Rochester Medical Center, Amerika Serikat

Diterima 12 September 2013; Diterima 10 Desember 2013; Diterbitkan 22 Januari 2014 Hak Cipta:?
2014 Assayag et al. Ini adalah artikel akses terbuka yang didistribusikan berdasarkan ketentuan dari
Creative Commons Attribution License, yang mengizinkan penggunaan, distribusi, dan reproduksi
tidak terbatas dalam media apapun, asalkan penulis asli dan sumbernya dikreditkan.

Pendanaan: Karya ini didukung oleh hibah dari Asmacure Lte'e, 2600 boul. Laurier, Suite 880,
Que'bec, QC. G1V 4W2. Para penyandang dana tidak memiliki peran dalam desain penelitian,
pengumpulan dan analisis data, keputusan untuk menerbitkan, atau persiapan manuskrip.

Kepentingan Bersaing: Penulis telah membaca kebijakan jurnal dan memiliki konflik sebagai berikut:
mendanai sumber komersial (Asmacure Lte'e). Studi ini didanai oleh Asmacure Lte'e, EIA dan YC
adalah pemegang saham dan karyawan paruh waktu Asmacure Lte'e; ini tidak mengubah kepatuhan
mereka terhadap semua kebijakan PLOS ONE untuk berbagi data dan materi. Paten yang terkait
dengan materi yang terkait dengan artikel ini: EIA dan YC adalah penemu dan dapat memperoleh
manfaat dari paten berikut yang dimiliki oleh Universite 'Laval, Quebec City, QC. Kanada: Agonis
reseptor nikotin untuk pengobatan penyakit inflamasi # US8377936 B2; US 20110301152 A1;
US8551983 B2; US 8557804 B2. Ini tidak mengubah kepatuhan mereka terhadap semua kebijakan
PLOS ONE untuk berbagi data dan materi. Paten, semua yang terkait dengan paten AS yang dikutip,
diberikan di negara lain (Australia, Kanada, China, Eropa, Israel, Jepang, Meksiko, Selandia Baru,
Rusia dan Korea Selatan). Tidak ada paten lebih lanjut, produk dalam pengembangan atau produk
yang dipasarkan untuk diumumkan.

* E-mail: yvon.cormier@med.ulaval.ca

pengantar

Asma adalah penyakit pernafasan yang ditandai dengan peradangan saluran napas dan
hiperresponsif yang mengakibatkan bronkokonstriksi reversibel yang mempengaruhi antara 8
sampai 10% populasi di negara-negara industri [1]. Pengobatan saat ini sebagian besar didasarkan
pada kortikosteroid inhalasi dan agonis reseptor b2 yang digunakan secara individual atau kombinasi
[2]. Meskipun perawatan ini efektif, setengah dari penderita asma tidak cukup terkontrol [3].
Efektivitas yang dikurangi terkait dengan terlalu banyak penggunaan agonis b2 yang menyebabkan
resistansi tak beradab b2-adrenergik dapat berperan dalam kontrol yang tidak memadai ini pada
penderita asma yang dirawat secara kronis [4,5]. Selain itu, sekitar 5 sampai 10% pasien dengan
asma berat gagal merespons glukokortikosteroid inhalasi atau oral [6-8]. Yang terpenting, dosis
tinggi dan penggunaan jangka panjang kortikosteroid inhalasi telah dikaitkan dengan signifikan dan
terkadang serius

Google Terjemahan untuk Bisnis:Perangkat PenerjemahPenerjemah Situs Web

Tentang Google TerjemahanKomunitasSelulerTentang GooglePrivasi & PersyaratanBantuanKirim

masBahan dan metode

Aktivitas Farmakologis ASM-024 Untuk mengevaluasi efek farmakologis ASM-024, penelitian

dilakukan secara in vivo dengan model tikus peradangan saluran napas alergi dan hiperaktivitas dan
in vitro dengan persiapan trakea atau bronkial yang diperoleh dari tikus, kelinci percobaan, anjing,
dan manusia. Penelitian ini dilakukan sesuai dengan rekomendasi dalam Panduan untuk Perawatan
dan Penggunaan Hewan Laboratorium dari Canadian Council on Animal Care (CCAC) mengenai
prosedur aklimasi, pengayaan lingkungan, dan analgesik dan anestesi. Protokol tersebut disetujui
oleh Komite Etika Eksperimen Hewan Laval di Universite'al. Jaringan dari donor manusia diperoleh
setelah mendapat informed consent dari semua individu sesuai dengan protokol yang disetujui oleh
Internal Review Board di Pusat Penelitian IUCPQ (Institut universitaire de cardiologie et de
pneumologie de Que'bec) di Que'bec, QC (Kanada). Mouse Model peradangan jalan napas alergi dan
hiperaktivitas. Tikus balb / c (n = 7-9 untuk masing-masing kelompok) secara peka secara
intraperitoneal dengan 100 mg / 100 mL ovalbumin (OVA) pada aluminium hidroksida 2% (b / v)
pada hari 0 dan 7. Tikus yang peka terhadap OVA ditantang secara intranasional. dengan OVA
alergen (50 mg / 50 mL) pada hari ke 20-23. Pada hari ke 24, tikus dikorbankan dan bronvealveolar
alveolar lavage (BAL) dilakukan; Jumlah sel total yang ditemukan di BAL digunakan sebagai ukuran
tingkat keparahan peradangan paru-paru. Sel diwarnai dengan Hema 3 Stain Set (Fisher Scientific)
dan sel diferensial dilakukan oleh dua pengamat. Limfosit dibedakan dari makrofag berdasarkan
bentuk, pewarnaan dan morfologi sel dan nukleus. Kontrol positif dan negatif yang tepat dilakukan
bersamaan dengan kelompok perlakuan. Kelompok terpisah tikus yang peka terhadap OVA
digunakan untuk mengukur tingkat hiperaktif. Pengiriman Obat Oral. Hewan yang peka terhadap
OVA diobati dengan berbagai dosis ASM-024 yang dilarutkan dalam air (0,03 sampai 30 mg / kg)
dengan pembuahan oral (p.o.) 100 mL pada hari ke 21-23, 30 menit sebelum tantangan intranasal
OVA. Dalam beberapa eksperimen yang bertujuan mengukur responsivitas saluran napas (AR), obat
diberikan selama 3 atau 7 hari hal. dan AR diukur. Tikus kontrol diobati dengan air saja. Pengiriman
obat inhalasi Tikus peka dan tertantang dengan OVA seperti dijelaskan di atas. Aerosolized ASM-024
atau saline (kendaraan

kontrol) diberikan dengan menggunakan sistem inExpose, menara pemaparan aerosol hidung dari
Scientific Respiratory Equipment Inc. (SCIREQ) (Montre'al, QC, Kanada). Aerosol dikirim dengan
AeronebH Lab Micropump Nebulizer, menghasilkan ukuran partikel 1,8 mm MMAD, GSD 2,0 mm.
Hewan-hewan tersebut terpapar dengan dosis ASM-024 yang berbeda selama 25 menit pada hari ke
20-23. Tantangan OVA dilakukan 30 menit setelah berakhirnya paparan ASC-024 aerosol. Dosis
target adalah 0,03, 0,3 dan 3 mg / kg. Dosis diberikan secara aktual dihitung sesuai dengan rumus
berikut: Estimasi volume terhirup per tikus V1 ðÞ ~ N = VA ðÞ | Estimasi ASM-024 dosis D ~ C | V1 ðÞ
= W Dimana N adalah tingkat nebulisasi, VA adalah aliran udara (2 L / menit), TV adalah volume tidal
(diperkirakan 170 ml), RR adalah laju pernafasan (diperkirakan 150 napas / menit), T adalah durasi
pengobatan, C adalah larutan konsentrasi ASM-024 dan W adalah berat tikus (18-20 g). Berdasarkan
parameter ini, perkiraan dosis yang diberikan adalah 0,038, 0,38, 3,80 mg / kg. Pada Responsivitas
Vivo Airway pada Tikus Sensitisasi Menderita. Pada hari ke 24, tikus OVA peka dan tertantang
terkena dosis tunggal 1,5Mg / kg ASM-024 aerosol, 10 menit sebelum tantangan methacholine. AR
diukur dengan menggunakan alat FlexiVent (SCIREQ, Montre'al, QC, Kanada). Tikus diberi anestesi
dengan ketamine-xylazine, tracheotomised dan diintubasi dengan kateter 18 G dan lumpuh dengan
pancuronium (0,5 mg / kg). Frekuensi pernapasan ditetapkan pada 160 napas / menit, volume tidal
0,2 mL dan tekanan ekspirasi akhir positif 3 mL H2O. Peningkatan konsentrasi methacholine (0-1 mg
/ kg) diberikan secara intravena. Manuver perturbasi Snapshot dipaksakan untuk mengukur tahanan
saluran napas (R). Resistansi resistensi yang lebih rendah terhadap nilai methacholine (R) untuk
perlakuan OVA-peka dan ASM024 dibandingkan dengan tikus yang tidak diobati menunjukkan
responsivitas saluran napas yang lebih rendah. Hasil dinyatakan sebagai persentase kenaikan
resistensi. Dosis efektif methacholine (mg / kg) yang dibutuhkan untuk menginduksi peningkatan
hambatan udara sebesar 250% (ED250) dihitung. In Vitro Smooth Muscle Relaxant dan
Bronchoprotective Effects. Efek ASM-024 pada otot polos jalan nafas diselidiki dalam penelitian
isometrik yang dilakukan pada persiapan trakea dan bronkial. Trakea diisolasi dari tikus naı ¨ ve dan
kelinci percobaan. Bronkus manusia diisolasi dari jaringan paru-paru yang sehat yang diperoleh dari
pasien yang menjalani reseksi untuk kanker paru-paru. Jaringan manusia diperoleh dari situs IUCPQ
Jaringan Jaringan Pernafasan Kesehatan Jaringan FRQS (www.

Tabel 1. Effe

Google Terjemahan untuk Bisnis:Perangkat PenerjemahPenerjemah Situs Web

Tentang Google TerjemahanKomunitasSeluler