Diskusi

Secara keseluruhan, penelitian ini terbukti sangat berhasil membuat sebuah protokol
laboratorium biokimia untuk sidik jari DNA pada tingkat sarjana. Tujuan pembelajaran utama yang
dicapai sebagai siswa yang sangat sukses pada 1) mengisolasi DNA genom mereka dari sel pipi epitel
mereka, 2) menggunakan PCR untuk memperkuat set alel pada lokus sasaran STR ( yaitu CSF1PO,
TPOX, THO1), 3) menyelesaikan set alel dengan elektroforesis gel poliakrilamid dan pewarnaan perak,
dan 4) belajar bagaimana cara yg benar untuk menganalisis hasil dalam konteks genetika populasi
manusia dan bagaimana menghitung probabilitas bahwa DNA mereka akan cocok dengan sampel yang
diperoleh dari TKP teoritis. Dari noteworthiness tertentu, siswa berkomentar bahwa motivasi mereka
meningkat mengetahui bahwa mereka sedang melakukan protokol yang sebenarnya digunakan oleh
lembaga informan hukum dan pengadilan dalam menentukan bersalah atau tidak dalam kasus pidana.
Selain itu, penggunaan siswa dari DNA mereka sendiri dalam protokol peningkatan minat mereka
dengan memberikan bukti eksperimental langsung dari sifat alel gen mereka.

Meskipun kami berhasil menggabungkan semua elemen dari total prosedur laboratorium dalam
tiga tahap, mungkin lebih mudah untuk menyebarkan laboratorium selama 4-5 tahap. Mengenai langkah-
langkah tertentu dan protokol, kami menemukan bahwa pengumpulan sampel DNA melalui Buccal
Swab oleh siswa itu langsung, seperti prosedur isolasi DNA selanjutnya menggunakan teknologi
Promega MagneSphere untuk pemisahan magnetik dan bahan terkait. PCR amplifikasi lokus tiga STR
juga mudah dan memberikan siswa kesempatan untuk mendapatkan pengalaman dengan metode penting
yang digunakan secara luas di banyak bidang penelitian ilmiah. Aspek yang paling menantang dari
protokol ini adalah penyusunan dan menuangkan gel akrilamida dari piring kaca besar untuk resolusi
halaman dari band STR. Sebelum instruktur dan asisten pengajar memerintahkan, siswa harus
mempunyai keahlian dan pengalaman yang dibutuhkan dalam menuangkan, pemuatan, dan menjalankan
gel. Persiapan gel besar dapat dicapai pada akhir tahap kedua.

Jika latihan selesai sesuai dengan protokol, sidik jari DNA dapat divisualisasikan cukup jelas (gambar 1
dan 2). Gel poliakrilamida menawarkan resolusi tinggi dari fragmen DNA, dan prosedur pewarnaan perak
menciptakan kontras tinggi untuk visualisasi langsung dari band alel. Alel sesuai dengan STR lokus yang berbeda
relatif dibedakan dengan tangga CTT, dan pola sidik jari DNA yang berbeda bisa diselesaikan (tabel I dan II).
Penentuan penomoran untuk sebagian besar alel, pada perbandingan dengan tangga adalah F IG. 1. Resolusi
HALAMAN DNA STR dari tiga lokus: CSF1PO, TPOX, THO1. PCR produk amplifikasi yang sesuai dengan 16
uals individ-diselesaikan pada 6% polyacryl- gel amida. Jalur yang sesuai untuk setiap individu nomor di atas, dan
jalur dengan CTT tangga alel ditandai dengan huruf L. Dalam disi ad-, berulang STR dari tangga alel
diilustrasikan pada kiri dan kanan oleh bar berwarna. Bar corre- sponding untuk mengulangi CSF1PO ( paling
atas) berwarna hijau, yang untuk TPOX ( tengah) berwarna berwarna merah muda, dan orang-orang untuk THO1
( bawah) berwarna biru. alel yang diperkuat ( yaitu STR mengulangi) dari K562 kontrol dijalankan di jalur 17.
Untuk mendapatkan nomor Band STR ulangi untuk setiap individu, pola pita dibandingkan dengan tangga CTT. F
IG. 2. Resolusi HALAMAN DNA STR dari keluarga dengan satu sampel diketahui un-. gel ini diselesaikan
produk amplifikasi PCR yang cor-menanggapi tiga lokus dari ayah, ibu, dua anak perempuan, paman, kontrol
mahasiswa, dan tidak diketahui. Sampel dikenal un- dijalankan di jalur 9, dan DNA yang sesuai individu dapat
dengan jelas diidentifikasi di jalur 4 ( ayahnya). Keduanya digambarkan oleh kotak pembatas merah. Jalur dengan
CTT al tangga lelic ditandai dengan ter let- L.
 Mudah, tetapi penting untuk dicatat bahwa, karena hanyut normal di gel, harus ada
tidak lebih dari empat jalur sampel antara jalur tangga. Hal ini juga harus dicatat bahwa band
THO1 mungkin muncul sebagai doublet, tapi fakta ini tidak mengganggu analisis sebagai
perbandingan dengan CTT alel tangga diperbolehkan untuk tugas yang relatif ambigu. Satu-
satunya alel yang ditimbulkan masalah penugasan adalah alel 9,3 untuk lokus THO1, tapi
setelah perbandingan hati dengan alel tangga dan kontrol positif, tugas yang benar dibuat
untuk setiap individu.
Meskipun FBI menggunakan 13 lokus khusus untuk keperluan profil tersangka,
analisis dari tiga lokus yang kita dimanfaatkan (CSF1PO, TPOX, THO1) terbukti cukup
untuk mengamati perbedaan antara sidik jari DNA dari puncak-berbeda individu yang
terlibat. Dari 25 individu dianalisis (satu individu adalah umum untuk kedua gel), tidak
memiliki pola pita yang identik. Nilai-nilai yang tercantum dalam Tabel I, kolom paling
kanan, sesuai dengan probabilitas pertandingan acak antara “TKP” sampel dan individu
tertentu. Nilai-nilai berlari dari ratusan rendah ( misalnya termurah 1 di 160, 54) hingga
puluhan ribu ( misalnya paling tinggi 1 di 60, 759.79). rentang nilai ini menunjukkan bahwa
kemungkinan memperoleh pertandingan acak antara “TKP” sampel dan individu yang tidak
terkait dalam kelas laboratorium relatif kecil. Oleh karena itu penggunaan TKP DNA
pseudo-penjahat ( misalnya DNA mahasiswa acak atau DNA profesor) tidak akan
menimbulkan masalah pada perbandingan statistik dengan DNA siswa. Selain itu, analisis
pola alel STR banding dari keluarga (ayah, ibu, dan dua putri) membuktikan bahwa itu
adalah mudah untuk membedah mana alel diwarisi dari setiap orangtua (Gbr. 2 dan Tabel II),
dan dengan demikian ayah ditunjukkan (namun tidak selalu secara statistik terbukti) dalam
kasus keluarga tertentu.
 Secara keseluruhan, hasil sukses dari tiga implementasi dan umpan balik positif berikutnya
dari siswa menunjukkan kelayakan memperkenalkan metode DNA fingerprinting dan
teknologi yang digunakan oleh lembaga penegak hukum dalam kelas laboratorium sarjana.
Pengalaman yang diperoleh dan pengetahuan yang diperoleh akan membantu para pelajar
yang berencana untuk mengejar karir di bidang tumbuh dari ilmu forensik serta bantuan
semua siswa menjadi individu yang lebih baik informasi ketika melakukan tugas warga
negara mereka sebagai anggota juri.