VALIDASI DAN ANALISIS KUANTITATIF KADMIUM DAN TIMBAL

PADA SALAK OLEH API ATOM SERAPAN SPEKTROFOTOMETRI

Abstrak
Salak adalah salah satu buah favorit yang dikonsumsi tidak hanya di Indonesia tetapi
juga di seluruh dunia. Buah salak mungkin terkontaminasi dengan logam berat
beracun seperti kadmium (Cd) dan timbal (Pb). Sebagai akibatnya, metode validasi
analisis untuk penentuan logam berat terus dikembangkan. Api Serapan Atom
Spectrophotometer (FAAS) untuk penentuan Cd dan Pb dalam buah salak telah
divalidasi. Metode yang dikembangkan adalah linear selama rentang konsentrasi
0,01 -1,0 mg / mL (Cd) dan 0,10 - 2,00 ug / mL (Pb). Koefisien korelasi (r) yang
diperoleh untuk kedua regresi lebih tinggi dari 0,99. Batas deteksi (LOD) Cd dan Pb
yang ditemukan 0004 pg / mL dan 0,04 ug / mL masing-masing, sementara batas
kuantitasi (LOQ) yang ditemukan 0,01 ug / mL (Cd) dan 0, 1 mg / mL (Pb), masing-
masing. Metode ini akurat dan cukup tepat untuk penentuan logam berat dalam
sampel buah salak yang ditunjukkan oleh pemulihan dan nilai-nilai rendah relatif
pada standar deviasi. Metode yang dikembangkan telah berhasil digunakan untuk
penentuan tinglat Cd dan Pb pada salak yang tersedia secara komersial di pasar.

Kata Kunci : Metode Validasi, Kadmium, Timbal, FAAS, Salak

Pendahuluan
Sebagai bagian dari sumber gizi manusia, buah-buahan dikonsumsi oleh semua
orang di seluruh dunia. Selain selera mereka yang membuat orang menyukainya,
buah-buahan mengandung berbagai kandungan kimia aktif yang mampu
meningkatkan kesehatan manusia. salak (Salacca zalacca), juga secara lokal dikenal
sebagai "salak", adalah salah satu buah favorit bagi masyarakat Indonesia. "Pondoh"
yang ditanam awalnya di provinsi Yogyakarta lebih populer (dibandingkan dengan
kultivar/jenis lainnya) di kalangan konsumen lokal Indonesia karena intensitas
aroma bahkan sebelum pematangan penuh (Supriyadi et al., 2002). salak juga
mengandung jumlah yang sebanding dengan tinggi dasar senyawa gizi (serat,
protein, lemak dan karbohidrat) dan memiliki aktivitas antioksidan yang tinggi dan
proliferasi (Gorinstein et al., 2009). Penelitian sebelumnya menunjukkan bahwa
buah salak positif mempengaruhi tingkat lipid plasma pada tikus yang diberi diet
yang mengandung kolesterol (Leontowicz et al., 2007).
logam beracun berat dapat terakumulasi dalam buah-buahan dengan berbagai
konsentrasi tergantung pada situs panen buah-buahan (Wagner, 1993). Kadmium
(Cd) dan timbal (Pb) adalah dua logam berat yang berbahaya bagi kesehatan
manusia. Cd telah dilaporkan untuk mengeluarkan nefrotoksik, sitotoksik,
genotoksik, neurotoksik dan karsinogenik efek (Kumar dan Singh, 2010). Kadmium
menstimulasi produksi radikal bebas memulai berbagai kondisi patologis pada
manusia (Waisberg et al., 2003). Selanjutnya, Pb memiliki efek toksik pada sistem
saraf yang berkontribusi terhadap kerusakan permeabilitas sawar darah-otak (Ruan
dan Gu, 1999). Paparan berlebihan Pb juga dapat mengakibatkan penyakit ginjal
stadium akhir (Weeden, 1982). Akibatnya, para ilmuwan terus mengembangkan
metode analisis untuk menentukan Pb dan tingkat Pb di berbagai pola makanan,
termasuk buah-buahan.
Atomic absorption spectrophotometry (AAS) adalah salah satu teknik yang paling
dikenal untuk menentukan logam berat termasuk Cd dan Pb (Caldas dan Machado,
2004; Garcia-Rico et al, 2007.). Cd dan Pb juga dapat ditentukan dengan
menggunakan metode timetri spectro-polarimetrik (Palma dan Pearson, 1970),
ditambah plasma emisi optik spektrometri (Froese et al., 2009), spektroskopi
inframerah-dekat (Li et al., 2011) dan spektrofotometri terlihat (Hashem, 2002).
Kehadiran Cd dan Pb dalam berbagai sampel seperti di ramuan tradisional (Caldas
dan Machado, 2004) dan suplemen (Garcia-Rico et al., 2007) telah dilaporkan.
Namun, dengan menggunakan kajian literatur, tidak ada laporan yang tersedia terkait
dengan penentuan Cd dan Pb dalam buah salak. Oleh karena itu, dalam penelitian
ini, kami mengembangkan dan memvalidasi teknik analisis cepat dan handal Flame
Spektrofotometri Serapan (FAAS) untuk analisis kuantitatif Cd dan Pb dalam buah
salak.

Bahan dan metode

bahan
buah salak dikumpulkan dari pasar tradisional di Yogyakarta. Kadmium (Cd) dan
timbal (Pb) larutan standar (1000 mg / L) dibeli dari Merck (Darmstadt, Jerman)
dalam bentuk Cd (NO3) 2 dan Pb (NO3) 2. Semua reagen dan pelarut yang
digunakan adalah pro analisis (p.a) grade. penyulingan dan air deionisasi digunakan
sebagai pelarut. Semua gelas yang digunakan direndam dalam larutan deterjen,
diikuti dengan membilasnya dengan air suling. Api Spektrofotometri Serapan
(FAAS) dari Analytik Jena® ContrAA 300 (Jena, Jerman) digunakan untuk
mengukur respon analitis. Keseimbangan analisis yang digunakan memiliki
sensitivitas 0,1 mg.

prosedur pencernaan
Satu kilogram salak segar dikupas dan dipotong kecil-kecil. Sampel ini kemudian
mengalami proses pencernaan. Prosedur pencernaan dilakukan sesuai dengan
Voegborlo dan Akagi (2007) dengan sedikit modifikasi. Sebuah sekitar 5 g sampel
buah ular itu akurat ditimbang ke dalam 100 ml labu Erlenmeyer dan ditambahkan
dengan 10 mL campuran reagen pengoksidasi terdiri dari nitrat asam- asam perklorat
(1: 1 v / v). Campuran kemudian dipanaskan pada suhu antara 100-110 ° C sampai
larutan jelas. Larutan sampel kemudian didinginkan dan diencerkan dengan 25 ml
dalam labu volumetrik dengan air suling.

Penentuan Cd dan Pb menggunakan FAAS

instrumen FAAS Analytik Jena® ContrAA 300 dioperasikan di bawah parameter
ame fl berikut: gas pembakaran: C2H2 / udara (50 L / h dan 65 L / jam untuk Cd dan
Pb masing-masing); Jenis burner: 100 mm, dan tinggi burner: 6 mm. tekanan
keluaran asetilena telah disesuaikan pada 80-100 kPa sementara tekanan udara yang
ditetapkan sebesar 300-600 kPa. Sepuluh mililiter larutan sampel kemudian
diperkenalkan ke tabung sampel dan dianalisis pada panjang gelombang 228,8 nm
(Cd) dan 217,0 nm (Pb).

validasi metode
Validasi metode dinilai dengan menentukan beberapa tokoh analitis merit menurut
Konferensi Internasional tentang Harmonisasi (ICH,
Table 1. Regresi Linier dari Kadmium dan Kurva Kalibrasi

* 95% confidence limit

Gambar 1. Hubungan antara konsentrasi (x-axis) dan sesuai absorbansi nilai (y-axis)
Cd dan Pb
1994), yaitu linearitas dan rentang, presisi, sensitivitas yang diungkapkan oleh
penentuan batas deteksi (LOD) dan batas kuantitasi (LOQ), dan akurasi.

Hasil dan Diskusi

Validitas metode yang dikembangkan dievaluasi dengan mendirikan beberapa tokoh
analitis merit untuk penentuan Cd dan Pb dalam buah salak.

linearitas
Linearitas respon dinilai dengan memplot nilai absorbansi (y-axis) (larutan standar
Cd dan Pb terhadap konsentrasi akhir (x-axis). Kisaran konsentrasi yang digunakan
adalah 0,01-1,00 ug / mL dan 0,10-2,00 ug / mL untuk Cd dan Pb, masing-masing.
Sebuah hubungan linear ada untuk kedua persamaan regresi dengan koefisien yang
baik determinasi (R2) (Tabel 1). Menurut Eurachem panduan (1998), respon analitis
adalah linear atas rentang konsentrasi tertentu jika nilai R2 yang diperoleh lebih
tinggi dari 0,995. Gambar 1 menunjukkan plot pencar untuk hubungan antara
konsentrasi Pb dan Cd (x-axis) dan nilai-nilai absorbansi yang sesuai (y-axis).
Penentuan nilai LOD dan LOQ
Sensitivitas dari metode yang diusulkan dilakukan dengan menghitung batas deteksi
(LOD) dan batas kuantitasi (LOQ). Dalam rangka untuk menentukan LOD dan
LOQ, sepuluh sampel kosong diukur. LOD dan LOQ dihitung sebagai 3.3SD / b dan
10SD / b masing-masing, di mana SD adalah standar deviasi dari tanggapan analitis
dan b adalah kemiringan kurva kalibrasi. Ketika kosong sampel tidak dapat
menghasilkan respon apapun, sepuluh kosong sampel independen diperkaya
dilaporkan. Namun, dengan menggunakan kajian literatur, tidak ada laporan yang
tersedia terkait dengan penentuan Cd dan Pb dalam buah salak. Oleh karena itu,
dalam penelitian ini, kami mengembangkan dan divalidasi teknik analisis cepat dan
handal Flame Spektrofotometri Serapan (FAAS) untuk analisis kuantitatif Cd dan
Pb dalam buah salak.
konsentrasi terendah yang dapat diterima analit diukur (Gonzales dan Herrador,
2007). LOD yang ditemukan menjadi 0,004 mg / mL dan 0,04 ug / mL untuk
kadmium dan timbal, masing-masing. Sementara itu, nilai-nilai LOQ ditemukan
adalah 0,01 ug / mL (Cd) dan 0,1 mg / mL (Pb).
Ketelitian
Presisi biasanya diukur sebagai relatif standar deviasi (RSD) dari sekumpulan data.
Ketepatan analisis ditentukan dengan menilai reproduksi respon instrumen untuk
analit. Pengukuran dilakukan di bawah kondisi pengulangan dan presisi menengah
(hari yang berbeda pengukuran). Pengulangan dievaluasi dengan mengukur 10
solusi sampel kosong diperkaya dengan solusi standar Cd (0,65 mg / mL) dan Pb
(0,8 mg / mL) di bawah kondisi yang sama (hari, analis, instrumen, sampel). Nilai-
nilai RSD yang diperoleh 1,36% dan 6,03% untuk Cd dan Pb, masing-masing.
Selanjutnya, presisi menengah dievaluasi dengan melakukan 10 pengukuran dengan
tiga hari yang berbeda. Nilai-nilai RSD diperoleh selama presisi menengah yang
1,33% (Cd) dan 6,35% (Pb), seperti yang ditunjukkan pada Tabel 2. Menurut
Horwitz, seperti dikutip dari Gonzales dan Herrador (2007), nilai RSD maksimum
yang dapat diterima untuk tingkat analit dari 1 mg / mL adalah 16%. AOAC
mengatur maksimum nilai RSD diterima pada 11% untuk tingkat analit yang sama
(Gonzalez dan Herrador, 2007). Oleh karena itu, dapat dinyatakan bahwa metode
yang diusulkan menunjukkan presisi yang baik berdasarkan nilai-nilai RSD
diperoleh.
Ketepatan
Dalam rangka untuk memeriksa akurasi metode analisis, studi pemulihan dilakukan
dalam penelitian ini. Studi pemulihan ini dilakukan untuk mengkonfirmasi
kurangnya tingkat analit karena kerugian atau kontaminasi selama persiapan sampel,
dan gangguan matriks selama tahap pengukuran (Ertas dan Tezel, 2004). Menurut
ICH (1994), penentuan pemulihan dilakukan dengan teknik spiking, yaitu
konsentrasi dikenal larutan standar (Cd dan Pb) ditambahkan ke salak, dan sampel
berduri yang dihasilkan diukur, dihitung, dan dibandingkan dengan diketahui nilai
solusi standar ditambahkan. Semua langkah-langkah analitis dilakukan di tiga
ulangan dengan tiga tingkat yang berbeda dari konsentrasi analit, seperti yang
disarankan oleh ICH. Nilai-nilai recovery untuk studi akurasi ditunjukkan pada
Tabel 3. Menurut penelitian yang diterbitkan sebelumnya (Huber, 1998), yang
diterima persentase pemulihan kisaran 80-110% untuk tingkat analit dari 1 mg / mL.
Oleh karena itu, metode yang dikembangkan adalah akurat untuk kuantifikasi Cd
dan Pb di fruit.s ular diperoleh.

Kuantifikasi Cd dan Pb di salak

Tingkat Cd dan Pb di beberapa sampel salak dipasarkan dikuantifikasi dengan
menggunakan metode maju. Tingkat Cd dan Pb dalam buah ular yang ditunjukkan
pada Tabel 4. kadar Cd dari enam sampel salak dipasarkan ditemukan menjadi 0.060
± 0.004; 0.087 ± 0.003, 0,071 ± 0,001; 0,102 ± 0,004; 0,074 ± 0,005; dan 0,077 ±
0,002 mg / mL, sedangkan kadar Pb tidak terdeteksi dalam semua sampel yang
diteliti. Menurut peraturan pemerintah Indonesia, tingkat maksimum Cd dan Pb
diperbolehkan dalam buah yang 0,2 mg / g dan 0,5 mg / g, masing-masing, (standar
Nasional Indonesia, 2009). Hasil penelitian menunjukkan bahwa tingkat Cd dan Pb
dalam sampel buah salak komersial lebih rendah dari yang ditentukan dalam standar
Indonesia.
Kesimpulan
pengembangan metode analisis Cd dan Pb dalam buah salak menggunakan FAAS
telah dikembangkan. Evaluasi parameter metode analisis termasuk linearitas,
sensitivitas, presisi dan akurasi menunjukkan hasil yang dapat diterima. Selain itu,
metode yang dikembangkan dapat berhasil digunakan untuk penentuan Cd dan Pb
dalam buah-buahan salak yang tersedia di pasar. Tingkat Pb dan Cd dilaporkan lebih
rendah dari yang dibutuhkan oleh pemerintah Indonesia.
Pengakuan
Para penulis terima untuk Penelitian dan Pengujian Terpadu Laboratorium,
Universitas Gadjah Mada (LPPT-UGM) untuk dukungan keuangan dan fasilitas
yang disediakan selama penelitian ini.