EFEK KAFEIN TERHADAP KONTRAKTILITAS

OTOT POLOS KANDUNG KEMIH

GUINEA PIG IN VITRO

Laporan Penelitian ditulis sebagai salah satu syarat untuk

memperoleh gelar SARJANA KEDOKTERAN

OLEH :
Yesinta Diandra
NIM : 1110103000093

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN DOKTER

FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS ISLAM NEGERI
SYARIF HIDAYATULLAH
JAKARTA
1434 H/ 2013 M
 KATA PENGANTAR

Assalamualaikum Wr. Wb.

Segala puji dan syukur peneliti panjatkan kehadirat Allah SWT yang
senantiasa melimpahkan rahmat dan hidayah-Nya sehingga peneliti dapat
menyelesaikan penelitian yang berjudul “Efek Kafein Terhadap Kontraktilitas
Otot Polos Kandung Kemih Guinea Pig In Vitro” dengan baik dan tepat waktu.
Shalawat dan salam semoga selalu tercurahkan kepada Nabi Muhammad SAW.
Dalam penyusunan penelitian ini, peneliti telah mencurahkan segala
pikiran dan kemampuan yang dimiliki. Namun tetap ada hambatan dan kendala
yang harus dilewati. Peneliti menyadari bahwa penelitian ini tidak akan terlaksana
tanpa adanya bantuan yang tulus dari berbagai pihak. Berkat doa restu, dorongan,
bimbingan serta saran dari berbagai pihak akhirnya peneliti berhasil
menyelesaikan penelitian ini. Dengan tidak mengurangi rasa hormat, peneliti
menghaturkan ucapan terima kasih dan penghargaan kepada :

1. Prof. Dr. (hc). dr. M. K. Tadjudin, SpAnd, selaku dekan Fakultas Kedokteran
dan Ilmu Kesehatan Universitas UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.
2. dr. Witri Ardini, M. Gizi, SpGK., selaku Ketua Program Studi Pendidikan
Dokter Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas UIN Syarif
Hidayatullah Jakarta.
3. dr. Nouval Shahab, SpU, Ph.D, FICS, FACS. dan Ibu Endah Wulandari,
M.Biomed., selaku pembimbing penelitian, terima kasih atas bimbingan,
waktu, serta dukungannya baik secara moril maupun materil.
4. dr. H. M. Djauhari Widjajakusumah, AIF, PFK. dan Ibu Ratna Pelawati,
M.Biomed., selaku penguji sidang laporan penelitian ini.
5. Drg. Laifa Annisa Hendarmin, Ph.D selaku penanggung jawab riset Program
Studi Pendidikan Dokter angkatan 2010.
6. Seluruh dosen dan civitas akademika FKIK UIN Syarif Hidayatullah yang
telah memberikan ilmu yang bermanfaat kepada peneliti

v
7. Almarhum Ayahanda Ir. Bambang Ismutanto tersayang, Ibunda Enny
Setyawati tercinta, Mas Endru, Mas Gerry, Janice dan Azka serta tak lupa
seluruh keluarga besar, peneliti ucapkan terimakasih atas segala dukungan,
baik doa, materi, maupun semangat yang tak pernah henti dicurahkan.
8. Kelompok riset 13, Erwanda Desire Budiman, M. Hazmi Anzhari, M. Hafif
Kusasi, M. Ichsan Pribadi terima kasih atas kerjasama nya selama ini yang
selalu mendukung dan membantu satu sama lain.
9. Mba lilis, mba ai, mba sur, office boy lantai 3, bapak-bapak satpam FKIK,
terima kasih atas perizinannya untuk menggunakan ruangan dan alat-alat
laboratorium sehingga mempermudah kami melakukan penelitian ini.
10. Sahabat-sahabat 2010 dan seluruh warga FKIK terima kasih peneliti ucapkan
karena dukungan dan doanya dalam pembuatan penelitian ini serta ilmu yang
telah dibagi selama tiga tahun belajar bersama.
11. Teman-teman PSPD 2008, 2009, 2011 dan 2012 yang selalu memberikan
dukungan dan doa kepada peneliti.

Peneliti mengharapkan adanya saran dan kritik yang bersifat membangun

bagi peneliti. Semoga penelitian ini dapat bermanfaat bagi para pembaca.

Jakarta, 10 September 2013

Peneliti

vi
 ABSTRAK
Yesinta Diandra. Program Studi Pendidikan Dokter. Efek Kafein Terhadap
Kontraktilitas Otot Polos Kandung Kemih Guinea Pig In Vitro. 2013.

Kafein, sebuah derivat methylxantine, diduga dapat menginduksi kontrasi otot polos,
memiliki efek diuretik dan meningkatkan eksitabilitas neuron. Namun demikian, hanya
sedikit penelitian yang melaporkan efek kafein pada otot polos kandung kemih. Pada
penelitian ini, kami bertujuan untuk mengetahui efek kafein dalam berbagai konsentrasi
terhadap kontraktilitas otot polos kandung kemih guinea pig in vitro dengan
menggunakan instrument organ bath. Hasil penelitian yang diperoleh bahwa kafein
dengan konsentrasi 0,01 µM, 0,1 µM, 1 µM, 10 µM dan 100 µM meningkankan tegangan
otot polos yang sebelumnya diinduksi oleh karbakol dengan hasil yang bermakna
(p<0,05) dalam Independent sample t test.

Kata kunci : kafein, kontraksi otot polos, kandung kemih, organ bath

ABSTRACT
Yesinta Diandra. Medical Education Program. Effect of Caffeine on Bladder
Smooth Muscle in Guinea Pig in Vitro. 2013.

Caffeine, a methylxantine derivative, is believed to induce smooth muscle contraction,

has a diuretic effect and increase neuronal excitability. However, only a few studies
reported the effects of caffein on detrusor smooth muscle contraction. In this study, we
aim to find out the effects of caffein at various concentration on detrusor smooth muscle
contractility of guinea pig in vitro using organ bath instrument. The result demonstrated
that caffein at concentration 0,01 µM, 0,1 µM, 1 µM, 10 µM and 100 µM increased
tension induced by carbachol with significant result (p < 0,05) in Independent sample t
test

Key word : caffeine, smooth musle contraction, urinary bladder, organ bath

vii
 DAFTAR ISI

LEMBAR JUDUL.................................................................................................... i
LEMBAR PERNYATAAN..................................................................................... ii
LEMBAR PERSETUJUAN.................................................................................... iii
LEMBAR PENGESAHAN...................................................................................... iv
KATA PENGANTAR.............................................................................................. v
ABSTRAK................................................................................................................. vii
DAFTAR ISI............................................................................................................. viii
DAFTAR GAMBAR................................................................................................ x
DAFTAR TABEL..................................................................................................... xi
DAFTAR GRAFIK................................................................................................... xii
DAFTAR SINGKATAN.......................................................................................... xiii
DAFTAR LAMPIRAN............................................................................................. xiv

BAB I PENDAHULUAN......................................................................................... 1
1.1 Latar Belakang...................................................................................................... 1
1.2 Rumusan Masalah................................................................................................. 2
1.3 Hipotesis................................................................................................................ 2
1.4 Tujuan Penelitian.................................................................................................. 2
1.4.1 Tujuan Umum.......................................................................................... 2
1.4.2 Tujuan Khusus......................................................................................... 2
1.5 Manfaat Penelitian................................................................................................ 3
1.5.1 Bagi Peneliti....................................................................................... 3
1.5.2 Bagi Institusi........................................................................................ 3
1.5.3 Bagi Masyarakat...................................................................................... 3

BAB II TINJAUAN PUSTAKA............................................................................. 4

2.1 Kandung kemih.............................................................................................. 4
2.1.1 Anatomi............................................................................................. 4
2.1.2 Histologi............................................................................................. 6
2.1.3 Fisiologi berkemih.............................................................................. 7
2.1.4 Otot polos.......................................................................................... 8
2.1.5 Mekanisme kontraksi dan relaksasi....................................................... 9
2.2 Kafein......................................................................................................... 11
2.3 Organ Bath........................................................................................................... 14
2.4 Kerangka Teori..................................................................................................... 16
2.5 Kerangka Konsep................................................................................................. 17
2.6 Definisi Operasional............................................................................................. 18

BAB III METODE PENELITIAN........................................................................ 19

3.1 Desain Penelitian................................................................................................. 19
3.2 Tempat dan Waktu Penelitian.............................................................................. 19
3.3 Alat dan Bahan Penelitian................................................................................... 19
3.3.1 Alat................................................................................................. 19

viii
 3.3.2 Bahan.............................................................................................. 19
3.4 Identifikasi Variabel............................................................................................ 19
3.4.1 Variabel Bebas......................................................................................... 19
3.4.2 Variabel Terikat....................................................................................... 20
3.5 Alur Penelitian..................................................................................................... 20
3.6 Cara Kerja Penelitian........................................................................................... 20
3.6.1 Tahap Persiapan....................................................................................... 20
3.6.2 Tahap Pengujian....................................................................................... 23
3.7 Analisa Data.................................................................................................. 25

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN................................................................ 26

4.1 Efek kontraktilitas otot polos pada pemberian karbakol.................................... 26
4.2 Efek kontraktilitas otot polos pada pemberian kafein dan akuades.................... 27

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN….............................................................. 31

5.1 Kesimpulan.......................................................................................................... 31
5.2 Saran.................................................................................................................... 31

DAFTAR PUSTAKA.............................................................................................. 32
LAMPIRAN.............................................................................................................. 35

ix
 DAFTAR TABEL

Tabel 1 Komposisi larutan krebs-henseleit........................................... 21

x
 DAFTAR GAMBAR

Gambar 1 Kandung kemih................................................................... 4

Gambar 2.a Potongan sagital laki-laki..................................................... 5
Gambar 2.b Potongan sagital perempuan.................................................. 6
Gambar 3 Dinding kandung kemih....................................................... 7
Gambar 4 Mekanisme kontraksi dan relaksasi otot polos.................... 10
Gambar 5 Struktur molekular kafein..................................................... 12
Gambar 6 Alat organ bath...................................................................... 15
Gambar 7 Chamber organ bath............................................................. 23
Gambar 8 Prosedur penelitian karbakol............................................. 24
Gambar 9 Prosedur penelitian perlakuan dan kontrol............................ 25
Gambar 10 Pemberian kafein................................................................... 27
Gambar 11 Pemberian akuades................................................................ 28

xi
 DAFTAR GRAFIK

Grafik 1 Perbandingan persentase kontraksi otot polos kandung 29

kemih kelompok perlakuan (kafein) dan kelompok kontrol
(akuades)..................................................................................

xii
 DAFTAR SINGKATAN

A1 : adenosine 1 receptor
AC : adenylate cyclase
Ach : acetylcholine
AMP 5’ : adenosine monophosphate
ATP : adenosine triphosphate
ATPase : adenosine triphosphatase
CaM : calmodulin
cAMP : cyclic adenosine monophosphate
CCh : carbachol
cGMP : cyclic guanosine monophosphate
CICR : calcium induce calcium release
CO2 : karbon dioksida
DAG : diacylglycerol
IP3 : inositol triphosphate
IP3R : inositol triphosphate receptor
Na : natrium
NE : norepinefrin
NO : nitric oxide
M2 : muskarinik 2 receptor
M3 : muscarinic 3 receptor
MLCK : myosin light chain kinase
MLCp : phosphorylated myosin light chain
MLCP : myosin light chain phosphatase
O2 : oksigen
PDE : phosphodiesterase
PIP2 : phosphatidyl inositol bisphosphate
PKA : protein kinase A
PKC : protein kinase C
PLC : phospholipase C
P2X : reseptor purinergik
RyR : ryanodine reseptor

xiii
 DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1 Bukti transaksi sigma aldrich............................................... 35

Lampiran 2 Surat izin pinjem lab multiguna melakukan penelitian......... 36
Lampiran 3 Data kontraksi strip otot polos dengan kafein...................... 37
Lampiran 4 Data kontraksi strip otot polos dengan akuades................... 38
Lampiran 5 Perbandingan persentase kontraksi otot polos kandung 39
kemih kelompok perlakuan (kafein) dan kelompok kontrol
(akuades)..............................................................................
Lampiran 6 Uji normalitas kafein............................................................. 40
Lampiran 7 Uji normalitas akuades......................................................... 41
Lampiran 8 Hasil data uji statistik independent t test.............................. 42
Lampiran 9 Gambar proses penelitian...................................................... 44
Lampiran 10 Daftar riwayat hidup........................................................ 46

xiv
 BAB 1

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Kafein merupakan stimulan berbagai sumber antioksidan dan komponen
bioaktif lainnya. Kafein banyak terkandung terutama di dalam kopi, oleh karena
itu konsumsi kopi memiliki banyak pengaruh terhadap tubuh. Kafein juga dapat
meningkatkan risiko penyakit jantung karena konsumsi kafein berhubungan
dengan peningkatan low-density lipoptotein cholesterol dan dapat meningkatkan
tekanan darah dalam jangka pendek.1 Tekanan darah dapat meningkat karena
kafein dapat mempengaruhi kontraksi otot polos vaskular dan otot jantung. Selain
itu kafein juga dapat menstimulasi aktivitas peristaltik pada usus.2
Kopi adalah suatu jenis tanaman yang dapat dibuat menjadi minuman.
Selain rasanya yang nikmat, kopi dianggap memiliki efek menghilangkan kantuk
sehingga banyak disukai masyarakat. Di Amerika dan dunia secara luas memilih
kopi sebagai salah satu minuman yang paling sering di konsumsi.1 Hasil
penelitian di Kanada menunjukkan bahwa kopi merupakan minuman yang paling
banyak dikonsumsi oleh orang dewasa diatas usia 30 tahun setelah air mineral.3
Penelitian sebelumnya menunjukkan bahwa kafein memiliki efek diuretik
pada ginjal dengan cara menghambat aktivitas reseptor adenosin (A1) sehingga
reabsorbsi cairan dan natrium pada tubulus proksimal dapat di halangi.4 Selain
menyebabkan diuresis kafein juga dapat menurunkan ambang letup otot polos
detrusor pada saat fase pengisian kandung kemih.5 Kafein diketahui dapat
menstimulasi otot polos detrusor dan meningkatkan sinyal sensorik neuron
kandung kemih.3 Kafein dapat mengeluarkan kalsium dari tempat penyimpanan
intraselulernya, yaitu retikulum sarkoplasma, sehingga dapat menyebabkan
timbulnya efek kontraksi pada otot polos.6
Penelitian lainnya menyatakan bahwa kafein dapat menghambat
phosphodiesterase sehingga kafein secara efektif dapat menghambat respon
kontraksi otot polos.7 Kafein dapat menurunkan sensitivitas kalsium terhadap
filamen kontraktil dan menghambat pemasukan kalsium ke dalam sel sehingga
dapat juga menimbulkan efek relaksasi otot polos.8

1
 2

Organ bath adalah instrumen yang sering digunakan untuk menilai

kontraktilitas otot termasuk otot polos secara in vitro. Dengan menggunakan
instrumen ini jaringan otot polos yang akan dinilai kontraktilitasnya di letakkan
dalam ruangan yang berisi cairan fisiologis yang diatur suhunya serta
oksigenasinya sehingga jaringan otot polos dapat tetap bertahan hidup selama
penelitian berlangsung. Kontraktilitas otot polos dapat direkam dengan
menggunakan software dalam komputer yang terkoneksi dengan transducer.9
Tingginya konsumsi kafein dalam masyarakat mendorong para peneliti
melakukan penelitian untuk mengetahui efek kafein pada berbagai organ tubuh.
Hingga saat ini penelitian yang melaporkan tentang efek kafein terhadap
kontraktilitas otot polos kandung kemih masih terbatas. Latar belakang tersebut di
atas mendorong penulis untuk melakukan penelitian tentang efek kafein terhadap
kontraktilitas otot polos kandung kemih secara in vitro dengan menggunakan
instrumen organ bath.

1.2 Rumusan Masalah

Bagaimana efek kafein terhadap kontraktilitas otot polos kandung kemih?

1.3 Hipotesis
Kafein dapat meningkatkan kontraksi otot polos kandung kemih secara in
vitro.

1.4 Tujuan
1.4.1 Tujuan Umum
Tujuan umum penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh pemberian
kafein terhadap kontraktilitas otot polos kandung kemih secara in vitro.

1.4.2 Tujuan Khusus

1. Menilai efek pemberian kafein terhadap kontraktilitas otot polos kandung
kemih
2. Mengukur seberapa besar kadar kafein yang dapat memberikan efek
terhadap kontraktilitas otot polos kandung kemih secara in vitro.
 3

1.5 Manfaat Penelitian

1.5.1 Bagi Peneliti
Penelitian ini dapat meningkatkan ilmu pengetahuan dan pengalaman
peneliti. Selain itu penelitian ini merupakan media aplikasi dari berbagai teori
pembelajaran yang telah dilakukan. Penilitian ini juga dilakukan sebagai syarat
kelulusan pendidikan preklinik Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Program
Studi Pendidikan Dokter Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta.

1.5.2 Bagi Institusi

Merupakan pelaksanaan Tri Darma Perguruan Tinggi yaitu meningkatkan
aspek penelitian. Peneliti berharap hasil penelitian ini mampu menjadi data dasar
untuk penelitian lebih lanjut mengenai efek kafein terhadap otot polos pada
kandung kemih atau pun efek kafein lainnya.

1.5.3 Bagi Masyarakat

Dari hasil penelitian ini akan didapatkan efek kafein terhadap kontraktilitas
otot kandung kemih yang nantinya dapat digunakan dalam penatalaksanaan pasien
dengan difungsi berkemih, seperti hipotonia kandung kemih. Penelitian ini
diharapkan dapat menjadi sumber informasi bagi masyarakat tentang pengaruh
kafein dalam tubuh.
 BAB 2

TINJAUAN PUSTAKA

2.1. Kandung kemih

2.1.1. Anatomi
Kandung kemih atau disebut juga vesika urinaria adalah sebuah rongga
yang berfungsi sebagai alat penampungan urin sementara. Urin dari ginjal pada
awalnya akan masuk ke kandung kemih melalui ureter. Selanjutnya urin akan
keluar dari tubuh melalui uretra. Secara umum kandung kemih berada di abdomen
bagian tengah bawah atau pada regio suprasimfisis pubis didalam rongga panggul
posterior. Kandung kemih menempel pada peritoneum untuk menjaga posisinya.
Pada laki-laki, kandung kemih berbatasan dengan kelenjar prostat di bagian
inferior dan pada bagian posterior terdapat kelenjar vesikula seminalis yang
menempel dan bersintopi dengan rektum. Pada perempuan, kandung kemih
terletak pada anterior vagina dan inferior uterus.10

Gambar 1 Kandung kemih10

4
 5

Kandung kemih dibagi menjadi dua bagian yaitu bagian badan dan
bagian leher. Bagian badan merupakan bentuk utama kandung kemih yang
merupakan tempat penampungan urin. Bagian leher akan menghubungkan
kandung kemih dengan uretra. Diatas bagian leher terdapat trigonum yang
merupakan tempat masuknya kedua ureter dan terdapat lubang uretra di
bawahnya.11
Pada bagian apex atau bagian paling inferior kandung kemih terdapat
lubang sebagai tempat keluarnya urin. Lubang ini dilapisi oleh otot sfingter
uretra interna yang akan berelaksasi ketika urin yang ditampung telah cukup
banyak, sehingga urin dapat keluar dan terjadilah proses berkemih. Inervasi
kandung kemih diatur oleh serabut postganglionik dari ganglia di pleksus
hipogastrik dan oleh saraf parasimpatis dari intramural ganglia cabang nervus
pelvis.12

Gambar 2.a Potongan sagital laki-laki12

 6

Gambar 2.b Potongan sagital perempuan12

2.1.2. Histologi
Dilihat dari segi histologi dinding dari kandung kemih terdiri dari lapisan
mukosa pada bagian paling dalam dan menempel lamina propria setelahnya. Pada
lapisan mukosa bagian yang berbatasan langsung dengan lumen kandung kemih
tersusun oleh epitel transisional yang dapat berubah bentuk. Rugae merupakan
lipatan lapisan mukosa yang dapat meningkatkan luas permukaan kandung kemih.
Selanjutnya kandung kemih memiliki lapisan muskularis ditengahnya. Lapisan
muskularis terdiri dari tiga lapisan yaitu dua lapis otot polos longitudinal dan satu
lapis otot polos sirkuler yang berada di antara kedua lapis otot polos longitudinal.
Susunan lapisan otot pada kandung kemih ini kita kenal dengan sebutan otot
detrusor. Lapisan yang paling superfisial adalah lapisan adventisia pada bagian
posterior dan inferior.10
 7

Gambar 3 Dinding kandung kemih12

2.1.3. Fisiologi berkemih

Urin terus diproduksi oleh ginjal dan akan memenuhi kandung kemih
secara progresif sampai pada ambang letup keteregangan kandung kemih.
Kemudian timbul refleks berkemih untuk mengosongkan kandung kemih. Jika
tahap ini gagal maka kandung kemih akan sangat penuh dan timbul desakan yang
kuat untuk berkemih.11
Proses pengosongan kandung kemih dapat terjadi melalui mekanisme
refleks berkemih dan kontrol volunter. Mekanisme refleks berkemih terjadi saat
reseptor regang terstimulasi. Semakin kandung kemih terisi oleh urin maka
reseptor regang yang berada di dinding kandung kemih akan terangsang. Serabut
saraf afferen dari reseptor regang yang aktif akan membawa impuls memasuki
medula spinalis yang selanjutnya akan menstimulasi kandung kemih melalui saraf
parasimpatis dan menghambat pemberian rangsang pada sfingter uretra eksterna.
Saraf parasimpatis menyebabkan kandung kemih kontraksi dan perubahan bentuk
kandung kemih menyebabkan sfingter uretra interna terbuka. Pada saat yang
bersamaan, hambatan rangsang pada sfingter uretra eksterna menyebabkan
sfingter relaksasi.13
 8

Dampak peningkatan rangsang regang pada kandung kemih juga

mempengaruhi sistem saraf pusat untuk menstimulasi interneuron yang
menghubungkan sensasi ke talamus dan akhirnya sampai ke korteks serebri.
Karena hal inilah kita akan menyadari adanya tekanan pada kandung kemih dan
muncul sensasi ingin berkemih12
Keinginan untuk berkemih dapat muncul ketika kandung kemih kita terisi
sebanyak 200 ml urin, namun jika belum mau dikeluarkan kandung kemih masih
dapat menampungnya. Ketika volume urin dalam kandung kemih mencapai 500
ml kontraksi kandung kemih akan sangat tinggi dan akan memberikan tekanan
yang cukup kuat untuk membuka sfingter uretra interna. Sfingter uretra eksterna
termasuk otot yang dapat diatur secara sadar sehingga urin masih dapat ditahan
dengan terus mengkontraksikan sfingter. Namun, apabila terlalu banyak volume
urin semakin besar dan kandung kemih sangat teregang, maka desakan berkemih
akan menjadi semakin besar. Urin masih dapat tersisa dalam kandung kemih
setelah proses berkemih, normalnya volume urin yang tersisa tidak lebih dari 10
ml.12
Otot polos terdiri dari sel berbentuk gelendong yang saling berhubungan.
Di dalam otot polos terdapat aktin dan miosin yang tidak tersusun dengan pola
teratur. Otot polos kandung kemih mudah beradaptasi dan bisa meregang hingga
75% dari bentuk awal dan dapat mengeluarkan urin secara maksimal. Jika
kandung kemih kosong akan berisi urin sisa sebanyak 10 ml dengan ukuran 8 cm
sedangkan jika terisi penuh bisa sampai 400 ml dengan ukuran 30 cm.14

2.1.4. Otot polos

Otot polos secara umum dibagi menjadi otot polos viseral dan otot polos
multi-unit. Otot polos viseral berbentuk lembaran yang memiliki taut celah
dengan resistensi rendah sebagai penghubung antar sel otot. Otot polos viseral
dapat ditemukan dalam organ berongga seperti ureter, uterus, dan usus.
Sedangkan otot polos multi-unit merupakan otot yang tidak memiliki jembatan
penghubung dan tidak dapat dikendalikan secara sadar. Contoh otot polos multi-
unit adalah otot polos di iris mata yang dapat berkontraksi secara halus.15
 9

Setiap sel otot polos memiliki bentuk gelendong dengan nukleus di

tengahnya. Selain aktin dan miosin, otot polos juga memiliki filamen cytoskeletal
intermediate yang berfungsi mentransmisikan gaya yang terbentuk saat otot polos
sebelahnya berkontraksi dan berhubungan juga dengan jaringan ikat. Di otot polos
tidak terdapat garis z tetapi digantikan dengan badan padat (dense bodies) dalam
sitoplasma yang berhubungan dengan aktin dan filamen intermediate. Otot polos
detrusor dapat berkontraksi dan relaksasi karena adanya interaksi antara filamen
aktin dan miosin. Filamen aktin berhubungan dengan membran pada dense bands
atau dalam sitoplasma pada dense bodies dan berinteraksi dengan filament miosin
melalui cross bridges dengan molekul miosin.14
Otot polos memiliki retikulum sarkoplasma sebagai tempat penyimpanan
kalsium. Retikulum sarkoplasma tersebut tidak berkembang baik di dalam otot
polos. Untuk memenuhi kebutuhan metabolismenya, otot polos lebih
menggunakan proses glikolisis karena hanya mempunyai sedikit mitokondria. Di
dalam otot polos tampaknya tidak memiliki troponin tetapi mengandung
tropomiosin.15
Otot polos kandung kemih mendapatkan inervasi dari beberapa
kelompok, yaitu dari kolinergik dengan mediator utama berupa asetilkolin,
adrenergik dengan mediator epinefrin dan norepinefrin dan terakhir adalah non
adrenergik dan non kolinergik dengan ATP sebagai mediatornya.16

2.1.5. Mekanisme kontraksi dan relaksasi

Kontraksi otot polos dapat terjadi karena adanya inervasi oleh sistem
saraf otonom. Pada otot polos kandung kemih, inervasi utama yang paling penting
berasal dari saraf parasimpatis postganglion.16 Saraf parasimpatis terminal
mengeluarkan asetilkolin dan akan diterima oleh reseptor M3 yang selanjutnya
akan mengaktifkan protein Gq. Protein Gq dapat mengaktifkan enzim
phospholipase-C (PLC) yang bisa menghasilkan inositol trifosfat (IP3) dan
diasilgliserol (DAG) dari membran phosphoinositides (PIP2).17 IP3 dapat
mengeluarkan kalsium dari tempat penyimpanan intraselulernya dalam retikulum
sarkoplasma sedangkan DAG dapat menyebabkan influx kalsium melalui
nifedipine-sensitive L-type Ca2+ channels dan juga dapat mengaktifkan protein
 10

kinase-C. Kalsium yang masuk dari ekstrasel dapat menginduksi pengeluaran

kalsium dari retikulum sarkoplasma melalui reseptor ryanodin.14
ATP dapat berperan melalui reseptor P2X purinergic yang merupakan
non selective cation channels pada membran. Reseptor P2X menyebabkan
depolarisasi sehingga voltage sensitive Ca2+ channels terbuka. Hal ini
menyebabkan lebih banyak lagi kalsium keluar ke sitoplasma dan menimbulkan
kontraksi otot polos.14
Peningkatan kalsium dalam sel akan berikatan dengan kalmodulin
menjadi CaM sehingga dapat mengaktivasi myosin light chain kinase (MLCK)
sebagai enzim spesifik untuk memfosforilasi myosin light chain (MLC) menjadi
phosphorylated myosin light chain (MLCp) yang aktif.18 MLCp dapat
mengaktivasi miosin ATPase.15 Hal ini menyebabkan miosin dapat berinteraksi
dengan aktin dan menghasilkan pembentukan gaya.14

Gambar 4 Mekanisme kontraksi dan relaksasi otot polos18

Protein G yang aktif selain dapat mengaktivasi PLC, juga dapat

megaktivasi Rho. Rho selanjutnya bekerja sebagai kalsium sensitization yang
dapat menghambat myosin light chain phosphatase (MLCP). Sehingga tetap
mempertahankan kontraksi secara tidak langsung. MLCP memiliki kemampuan
 11

yang berlawanan dari MLCK, yaitu untuk melakukan defosforilasi MLCp

sehingga akan terjadi relaksasi.18
Sistem saraf parasimpatis akan mengeluarkan neurotransmiter berupa
asetilkolin dan akan memasuki sel otot polos melalui reseptor M2. Reseptor M2
berperan untuk mencegah otot polos relaksasi sehingga kontraksi otot polos akan
bertahan. Reseptor M2 akan berikatan dengan protein Gi yang akan menghambat
enzim adenilat siklase. Karena inhibisi ini menyebabkan transformasi ATP
menjadi cAMP menurun. cAMP yang tersisa akan dirubah oleh PDE untuk
menjadi Adenosine monophosphate (AMP 5’) yang tidak aktif.16
cAMP dalam keadaan aktif dapat mengaktifkan protein kinase-A (PKA)
yang dapat menyebabkan MLCP bekerja merubah MLCp menjadi MLC sehingga
akan menimbulkan efek relaksasi pada otot polos.17 Respon kontraksi otot polos
lebih lambat dan bertahan lama dibandingkan otot lainnya. otot polos mampu
menghidrolisis ATP selama proses kontraktil.14
Asetilkolin merupakan sebuah agonis yang dapat menempel pada
reseptor muskarinik dan mengaktifkan kerja seluler, salah satunya adalah
kontraksi pada otot polos. Asetilkolin pada celah sinaps dapat didegradasi oleh
asetilkolinesterase. Karbakol memiliki kemampuan untuk berikatan dengan
reseptor muskarinik juga, namun karbakol tidak dapat di degradasi oleh
asetilkolisesterase. Oleh sebab itu efek karbakol terhadap kerja seluler lebih
bertahan lama16

2.2. Kafein
Nama kimia kafein 3,7-dihydro-I,3,7-trimethyl-IH-purine-2,6-dione. Kafein
memiliki beberapa aksi seluler yaitu sebagai antagonis adenosine pada reseptor
A2A dan A1, kafein menghambat terpecahnya cAMP karena inhibisi PDE, kafein
memblokade reseptor GABA dan dapat memobilisasi depot kalsium intraseluler.
Karena itulah kafein memiliki banyak efek ditubuh manusia.5
Setelah kafein di konsumsi, dengan cepat kafein di absorbsi dari saluran
cerna masuk ke dalam darah. Kafein akan didistribusikan ke seluruh tubuh.
Konsentrasi kafein maksimum dalam darah memerlukan waktu selama 1-1,5 jam.
Kafein dapat menembus sawar darah otak, menembus plasenta sampai ke cairan
 13

konsumsi kafein dapat meningkatkan resiko ketidakstabilan otot detrusor,

terutama pada wanita.19
Kafein termasuk dalam golongan obat methylxanthine bersama dengan
derivat lainnya seperti theophylline yang banyak terkandung dalam teh dan
theobromine yang terkandung dalam kokoa. Selain didalam kopi, teh dan kokoa
kafein juga terkandung dalam soda.21 Kafein dapat berpengaruh dalam
meningkatkan eksitabilitas neuron dengan menurunkan ambang letup untuk
eksitasi neuron. Kafein juga di percaya dapat meningkatkan performa atletik fisik
dan dapat memberikan energi.11
Golongan methylxanthine seperti kafein dan theophylline yang dikonsumsi
secara luas memiliki efek yang banyak bagi tubuh. Pada ginjal, golongan ini dapat
menjadi diuresis dan natriuresis. Golongan methylxanthine merupakan antagonis
reseptor adenosinee nonselektif. Adenosinee sangat penting untuk regulator fungsi
ginjal, terlibat dalam regulasi laju filtrasi glomerulus, transport air dan elektrolit di
ginjal serta masih ada pengaruh lainnya. Mekanisme efek kafein dalam diuretik
dan natriuretik melalui penghambatan aktivitas reseptor adenosine (A1) sehingga
reabsorbsi cairan dan natrium pada tubulus proksimal dihambat.4
Kafein sering dihubungkan dengan kejadian peningkatan resiko terjadinya
gangguan berkemih. Hal ini dapat dijelaskan karena kafein dapat meningkatkan
tekanan otot polos detrusor saat pengisian kandung kemih dan memiliki efek
diuretik.22 Pada saat tidak terjadi kontraksi, retikulum sarkoplasma
mengakumulasi kalsium yang lebih tinggi dari rata-rata yang ada di sitosol.
Kalsium yang tersimpan dalam retikulum sarkoplasma akan keluar saat potensial
aksi yang datang ke membran sel. Pemberian kafein juga dapat menyebabkan
retikulum sarkoplasma melepaskan kalsium ke dalam sitosol.14 Kafein pada
konsentrasi tinggi dapat berperan dalam pelepasan kalsium intraseluler dari
tempat penyimpanannya, sehingga menyebabkan kontraksi otot. Jika hal ini
terjadi pada otot detrusor kandung kemih maka efek kafein ini pada akhirnya
dapat menyebabkan kandung kemih berkontraksi.5
Kafein bersifat iritan terhadap kandung kemih sehingga dapat mendorong
inkontinensia urin untuk muncul. Secara in vitro kafein dapat memberikan efek
eksitasi pada otot polos detrusor manusia. Tidak hanya otot kandung kemih saja,
 14

kafein juga dapat meningkatkan kontraksi otot vaskular dan otot jantung dengan
cara mengeluarkan kalsium dari tempat penyimpanannya ke intraseluler. Kafein
dapat meningkatkan gerakan peristaltik usus serta dapat meningkatkan sinyal
kalsium dalam neuron sensorik.2
Kafein pada konsentrasi rendah dapat meningkatkan frekuensi kontraksi
detrusor. Namun kafein diketahui juga merupakan inhibitor non selektif
phosphodiesterase yang dapat menghambat respon kontraktilitas otot polos
kandung kemih.7

2.3. Organ bath

Organ bath merupakan sebuah alat yang dapat digunakan untuk meneliti
jaringan atau organ secara in vitro.9 Organ yang ingin diteliti akan dibuat menjadi
strip jaringan. Strip jaringan dipersiapkan tanpa ada regangan dengan
menggunakan mikroskop menjadi bentuk longitudinal.23 Lapisan mukosa dan
serosa jaringan otot harus dihilangkan saat persiapan strip jaringan. Strip jaringan
otot selanjutnya akan direndam dalam larutan fisiologis dengan keadaan terikat
pada pengait ke transduser dan sisi lainnya terikat pada arah yang berlawanan agar
otot dapat memendek. Cara tersebut untuk menilai kontraksi isotonik, sedangkan
untuk menilai kontraksi isometrik harus menggunakan transduser isometrik yang
dapat menilai perubahan tegangan tanpa ada pemendekan otot. Perfusi dan
temperatur harus selalu dikontrol.9 Untuk menilai strip otot polos memendek dan
memberikan gaya tarik, otot polos harus dipastikan tergangtung dalam kondisi
tegang.24
 17

2.5. Kerangka Konsep

Variabel terikat : respon besar kontraksi atau relaksasi otot polos kandung kemih
guinea pig
Variabel bebas : kadar larutan ekstrak kafein
 18

2.6. Definisi Operasional

No. Variabel Definisi Operasional Alat Ukur Hasil Ukur Skala

pengukuran
1. Kontraksi Peningkatan tegangan Transduser Tegangan Numerik
lapisan muskularis26 otot (gram)
2. Kafein Obat golongan Molaritas Numerik
methylxanthine26
(akan dilarutkan
dengan akuades)
 BAB 3

METODOLOGI PENELITIAN

3.1 Desain Penelitian

Desain penelitian yang digunakan adalah studi eksperimental secara in vitro.
Penelitian menggunakan variasi kadar kafein pada aktivitas otot polos kandung
kemih guinea pig.

3.2 Tempat dan Waktu Penelitian

Penelitianini dilaksanakan di Ruang Multiguna lantai 3 Fakultas Kedokteran
dan Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri (FKIK UIN) Syarif Hidayatullah
Jakarta dalam waktu sebelas bulan terhitung dari bulan September 2012 - Agustus
2013. Penelitian ini telah diajukan ke kode etik FKIK UIN Syarif Hidayatullah
Jakarta.

3.3 Alat dan Bahan Penelitian

3.3.1. Alat
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah instrument organ bath,
water heater, kulkas, laptop, gunting cawan petri plastik, alat bedah minor, lup,
papan bedah, alkohol, sendok, handscon, benang, dan pengaitnya.

3.3.2. Bahan
Penelitian ini menggunakan larutan ekstrak kafein (sigma aldrich) dan
membutuhkan sampel dari sajian jaringan otot polos kandung kemih guinea pig.
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah larutan Krebs-Henseleit,
akuades, karbakol, tissue, kapas, dan gas karbogen (O2 97%, CO2 3%).

3.4 Identifikasi variabel

3.4.1. Variabel bebas
Variabel bebas pada penelitian ini adalah ekstrak kafein yang akan diatur
konsentrasinya sehingga dapat menimbulkan respon dari sampel penelitian

19
 20

3.4.2. Variabel terikat

Variabel terikat pada penelitian ini adalah menilai respon besar kontraksi
atau relaksasi otot polos kandung kemih guinea pig setelah pemberian bahan uji.

3.5 Alur penelitian

Persiapan dan
Persiapan alat dan pengenceran ektrak
bahan untuk penelitian kafein menjadi
berbagai konsentrasi

Membunuh hewan
penelitian dengan
Pembuatan strip otot
membenturkankepalan
polos kandung kemih
ya pada benda keras
guinea pig
dan segera
menyembelihnya

Melakukan penelitian
Merekam dan
ekstrak kafein dalam
mengolah data
oragan bath

3.6 Cara kerja penelitian

3.6.1 Tahap persiapan
1. Tahap persiapan bahan uji
Penelitian ini menggunakan larutan ekstrak kafein sebagai bahan uji.
Peneliti melakukan pemesanan bahan uji dari katalog Sigma Aldrich.Kemudian
melarutkan serbuk kafein dengan akuades untuk membuat stock solution. Kafein
dengan berat molekul sebesar 194,19 akan diambil sebanyak 0.0194 mg dan
 21

ditambah kan dengan akuades sebanyak 1 ml sehingga mendapatkan larutan

kafein dengan konsentrasi 100 mM.Selanjutnya stock solution kafein tersebut
akan diencerkan menjadi beberapa konsentrasi menggunakan akuades mulai dari
0,01 µM sampai 100 µM. Semua variasi sampel tersebut akan diujikan pada otot
polos kandung kemih guinea pig.

2. Tahap pembuatan cairan fisiologis

Cairan fisiologis yang dipakai dalam penelitian ini adalah larutan Krebs-
Henseleit. Larutan Krebs-Henseleit merupakan campuran berbagai macam
senyawa dalam akuades sehingga mirip dengan cairan dalam tubuh. Larutan
Krebs-Henseleit dapat mensuplai kebutuhan jaringan diluar tubuhnya. Oleh
karena itu, larutan Kresbs-Henseleit sangat diperlukan untuk mempertahankan
hidup strip otot polos. Komposisi larutan Krebs-Henseleit adalah :

Tabel 1 Komposisi larutan krebs-henseleit

Bahan mmol/l

NaCl 121.6
KCl 4.7

NaHCO3 15.4

KH2PO4 1.2

MgCl2 1.2

Glucose 11.5

CaCl2 2.5

3. Tahap preparasi jaringan

Mempersiapkan semua alat dan bahan yang diperlukan untuk penelitian.
Mengkalibrasi organ bath, melarutkan karbakol dan menyiapkan karbogen yang
berisi 97% oksigen dan 3% karbondioksida.
Penelitian ini menggunakan lima ekor guinea pig dengan dua ekor jantan
dan tiga ekor betina. Berat guinea pig sekitar 500-700 gram dan umur rerata enam
bulan. Sebelum hewan uji dibunuh dan diambil kandung kemihnya, peneliti harus
menyiapkan cawan petri yang berisi larutan Krebs Henseleit dengan suhu
 22

4oC.Selain itu peneliti sudah harus siap dengan semua alat yang diperlukan seperti
handscon, gunting dan papan diseksi.
Hewan uji dibunuh dengan membenturkan kepala pada tempat yang keras
dan segera menyembelihnya. Kandung kemih harus diambil secepat mungkin
melalui insisi secara longitudinal pada bagian tengah abdomen bawah. Kandung
kemih langsung dimasukan ke dalam larutan Krebs Henseleit yang dingin
tersebut.
Selanjutnya kandung kemih akan dibagi menjadi dua bagian, pemotongan
tersebut dilakukan dengan prinsip tidak memberikan regangan pada jaringan.
Ambil bagian anterolateralnya kemudian pisahkan lapisan otot dari lapisan
mukosa dan serosa kandung kemih dengan menggunakan alat bedah minor dan
dibantu dengan kaca pembesar. Kandung kemih dipotong dan dibentuk strip otot
polos sebanyak 3-5 strip dengan ukuran 0,5 cm x 1 cm. Ujung strip otot polos
diikat dengan tali pada kedua sisinya.
Kandung kemih digantung secara vertikal dalam chamber organ bath.
Ujung tali bagian atas dihubungkan ke transducer yang tersambung dengan
amplifier serta komputer, sedangkan ujung tali lainnya difiksasi pada bagian
bawah chamber. Preparat menggantung dan tidak menempel pada dinding
chamber. Preparat direndam dalam larutan Krebs Hanseleit sebanyak 50cc dengan
suhu 37oC dan dioksigenasi dengan karbogen (97% O2 dan 3% CO2). Selanjutnya
strip otot polos diberikan tegangan istirahat sebesar 0,5g dan ditunggu selama 60
menit. Transducer tersebut dihubungkan dengan komputer yang memiliki piranti
lunak labchart dari ADInstrumen untuk menilai kontraktilitas strip otot polos.
 24

Gambar 8 Prosedur penelitian karbakol

2. Tahap pengujian bahan ekstrak

Kemudian setelah ditunggu 60 menit lanjutkan penelitian dengan menilai
bahan uji (kafein). Sebelum kafein dimasukan, terlebih dahulu masukan karbakol
sebagai penginduksi awal kontraktilitas otot polos. Kontraksi otot polos yang
meningkat oleh karbakol tersebut dianggap sebagai kontraksi maksimal otot
polos. Ketika memperlihatkan gambaran kontraksi yang sudah datar/ plateu ini
merupakan saat yang tepat untuk memasukan bahan uji (kafein). Bahan uji di
berikan bertahap mulai dari 0,01 µM sampai 100 µM dengan selang waktu lima
menit. Melihat rekaman hasil kontraktilitas otot polos kandung kemih yang
dipengaruhi oleh pemberian bahan uji pada Labchart.
Sebagai kontrol maka kita harus menguji juga bahan pelarut kafein yang di
gunakan untuk melarutkan kafein. Bahan pelarut kafein tersebut adalah akuades.
Hal ini dilakukan untuk menilai apakah pelarut tersebut juga memiliki efek
kontraktilitas terhadap otot polos kandung kemih atau tidak. Prosedur yang sama
seperti penilaian bahan uji diterapkan dalam pengujian bahan pelarut. Prosedur
penelitian dapat dilihat pada gambar 9.
 25

Gambar 9 Prosedur penelitian perlakuan dan kontrol

3.7 Analisis data

Hasil yang telah terekam oleh transduser dan program LabChart v 7.1 akan
diambil. Hasil kontraktilitas yang di induksi oleh karbakol dianggap 100%
sebagai patokan maksimal kontraksi. Nilai besar efek kontraktilitas yang
diberikan oleh perlakuan atau pun kontrol merupakan persentase relatif terhadap
kontraksi maksimal yang diinduksi oleh 1 µM CCh. Data numerik tersebut akan
dimasukan dan dianalisis dengan menggunakan program SPSS16.0 untuk
ditentukan apakah pengujian yang dilakukan tersebut bermakna atau tidak.
Analisis data dilakukan uji Independent Samples t Test bila distribusi
sampel dan kelompok normal, dan Mann-Whitney bila distribusi sampel dan
kelompok tidak normal.
 BAB 4
HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1. Efek kontraktilitas otot polos pada pemberian karbakol

Pada penelitian ini menggunakan guinea pig dengan rerata berat 587,62 ±
14,52. Pada awal penelitian fungsi kontraktilitas otot polos kandung kemih diuji
dengan menggunakan karbakol. Karbakol dapat menginduksi otot polos kandung
kemih untuk berkontraksi karena karbakol merupakan agonis reseptor muskarinik
yang cukup baik dan bekerja lebih tahan lama dibandingkan dengan asetilkolin.
Hal ini dapat terjadi karena karbakol tidak dapat didegradasi oleh
asetilkolinesterase dan dapat terus bekerja pada reseptor muskarinik tersebut.7
Karbakol diuji mulai dari konsentrasi 0,01µM sampai 100µM untuk
mendapatkan konsentrasi yang tepat sebagai penginduksi kontraksi otot polos.
Dalam hasil penelitian terlihat bahwa otot polos kandung kemih memberikan
respon kontraksi yang meningkat seiring dengan peningkatan pemberian
konsentrasi karbakol. Hal ini membuktikan bahwa reseptor muskarinik pada otot
polos kandung kemih guine pig yang masih berfungsi dengan baik. Pemberian
karbakol dengan konsentrasi 0,01 µM menimbulkan efek -2,27 ± 2,66,
konsentrasi 0,1 µM efeknya 7,85 ± 4,08, 1 µM efek kontraksinya 83,71 ± 15,67,
konsentrasi 10 µM sebesar 97,66 ± 21,32 dan konsentrasi 100 µM menimbulkan
kontraktilitas sebesar 55,99 ± 15,81.
Pada pemberian karbakol 10 µM tampak otot polos berkontraksi maksimal
karena efek kontraksi yang ditimbulkan lebih tinggi dari konsentrasi lainnya. Efek
kafein dengan dosis yang tinggi tidak mencerminkan efek yang sesungguhnya
namun dapat memberikan efek non spesifik. Pemberian karbakol dengan
konsentrasi 100 µM tidak melebihi efek kontraksi otot polos kandung kemih yang
ditimbulkan oleh karbakol dengan konsentrasi 10 uM. Hal ini disebabkan oleh
karena efek yang ditimbulkan sudah maksimal atau dengan kata lain sudah
mencapai titik jenuh (saturated). Dalam penelitian ini digunakan karbakol dengan
konsentrasi 1 µM untuk menginduksi kontraksi sebelum diberikan kafein karena
dianggap konsentrasi 1 µM memberikan efek kontraksi setengah dari maksimal
sehingga kita dapat mengevaluasi efek kafein terhadap kontraktilitas otot polos

26
 27

kandung kemih. Setelah pengujian dengan karbakol selanjutnya strip otot polos
dibuang cairannya dan diganti oleh cairan krebs henseleit yang baru kemudian
diistirahatkan selama 60 menit.

4.2. Efek kontraktilitas otot polos pada pemberian kafein dan akuades
Selanjutnya otot polos kandung kemih akan diinduksi oleh karbakol 1 µM,
kemudian memasukan kafein sebagai bahan uji mulai dari konsentrasi 0,01 µM
sampai 100 µM dengan durasi pemberian setiap lima menit. Untuk melihat efek
tunggal kafein, peniliti melakukan pengujian terhadap pelarut kafein yaitu
akuades sebagai kontrol terhadap perlakuan. Pengujian kelompok kontrol
dilakukan dengan proses yang sama seperti pengujian kafein sebagai kelompok
perlakuan.
Pemberian larutan kafein pada strip otot polos kandung kemih terlihat pada
gambar 10. Gambar tersebut memperlihatkan efek dari pemberian kafein terhadap
strip otot polos kandung kemih yang telah diinduksi karbakol sebelumnya. Rerata
presentasi kontraksi saat pemberian kafein dengan konsentrasi 0,01 µM adalah
101,12 ± 1,64 %, konsentrasi 0,1 µM sebesar 75,85 ± 2,19%, konsentrasi 1 µM
menimbulkan efek sebesar 68,94 ± se 2,27%, konsentrasi 10 µM rerata kontraksi
nya 65,78 ± 2,21% dan konsentrasi 100 µM menimbulkan efek 64,30 ± 2,23%.

Gambar 10 Pemberian kafein

Akuades merupakan pelarut kafein yang digunakan dalam penelitian ini.

Pemberian akuades pada strip otot polos kandung kemih dilakukan sebagai
kontrol dalam penelitian. Pemberian kontrol juga dilakukan lima kali sesuai
dengan prosedur yan sama saat menguji kafein. Hasil penelitian menunjukan
bahwa akuades tidak banyak memberikan efek. Setelah di induksi oleh karbakol,
 28

pemberian akuades tidak menambah atau mengurangi kontraksi secara signifikan

dan rekaman kontraksi otot polos tampak datar seperti yang terlihat pada gambar
11.

Gambar 11 Pemberian akuades

Rerata persentase kontraksi otot polos kandung kemih saat pemberian

kontrol 1 sebesar 84,54 ± 3,43%, pemberian kontrol 2 menimbulkan efek sebesar
64,10 ± 2,64%, kontrol 3 sebesar 59,50 ± 1,66%, kontrol 4 rerata presentasi
kontraksinya 56,96 ± 1,21% dan kontrol 5 menimbulkan efek sebesar 54,01 ±
0,81.
Kelompok perlakuan dan kelompok kontrol tersebut dibandingkan. Data
dari kelompok perlakuan dan kelompok kontrol yang didapatkan berupa numerik.
Perbandingan perlakuan dan kontrol diperlihatkan pada grafik 1 Pada gambar ini
tampak jelas perbedaan antara perlakuan dan kontrol. Pemberian kafein
menimbulkan gambaran kontraksi yang lebih tinggi dari pada kontrol. Walaupun
pada gambar 10 kafein tidak memperlihatkan gambaran kontraksi yang tinggi
namun setelah di bandingkan dengan kontrol pada bagan ini tampak jelas bahwa
pemberian kafein memperlihatkan kontraksi yang bermakna.
 29

120
C 101,13 ± 1,64%

100
Kontraksi relatif (%)
75,85 ± 2,19%
v 68,94 ± ,27%
80 65,78 ± 2,21% 64,30 ± 2,23%

84,54 ± 3,43%
60 Kafein
v
v Akuades
64,10 ± 2,64% v v
59,50 ±1,66%
40 56,96 ± 1,21% 54,01 ± 0,81%
p<0.05

20

0
konsentrasi 1 2 3 4 5

Grafik 1 Perbandingan persentase kontraksi otot polos kandung kemih kelompok

perlakuan (kafein) dan kelompok kontrol (akuades)

Hasil analisis data dengan uji Independent Samples t Test pada program
SPSS 16. didapatkan perbedaan bermakna (p<0,05) dalam peningkatan kontraksi
otot polos kandung kemih dengan pemberian kafein. Hal tersebut memperlihatkan
bahwa pemberian kafein saja memberikan efek dalam peningkatan kontraktilitas
otot polos kandung kemih. Akuades sebagai pelarut kafein, jika diberikan tanpa
kafein, tidak memberikan efek pada kontraktilitas otot polos kandung kemih.
Hasil penelitian diatas membuktikan teori yang mengatakan bahwa
pemberian kafein dapat memberikan efek kontraksi pada otot polos karena kafein
dapat menginduksi pengeluaran kalsium dari dalam retikulum sarkoplasma.27, 28

Kafein memiliki kemampuan untuk meningkatkan afinitas kalsium dan ATP pada
reseptor ryanodin sehingga dapat meningkatkan rerata waktu pembukaan reseptor
ryanodine dan meningkatkan kemungkinan reseptor ryanodin terbuka. Pemberian
kafein dapat menyebabkan retikulum sarkoplasma kosong karena mengeluarkan
seluruh kalsium yang disimpan nya.29
 30

Dengan meningkatnya kalsium di intraseluler, maka kalsium akan berikatan

dengan kalmodulin, meningkatkan aktivasi MLCK sehingga menyebabkan MLC
terfosforilasi dan menimbulkan kontraksi otot polos.18
Pada penelitian ini terlihat bahwa kafein dapat menimbulkan kontraksi otot
polos kandung kemih secara bermakna. Efek yang ditimbulkan oleh kafein tidak
terlalu tinggi yang kemungkinan disebabkan oleh karena selain memiliki efek
terhadap pengeluaran kalsium dari retikulum sarkoplasma, kafein juga memiliki
efek sebagai inhibisi aktivitas phosphodiesterase (PDE). Inhibisi PDE dapat
menyebabkan peningkatan cAMP intraseluller. cAMP dapat mengaktivasi PKA
dan MLCP, yang pada akhirnya menimbulkan relaksasi otot polos.17
Watanabe, et al melakukan penelitian menggunakan otot polos aorta
melaporkan bahwa kafein dapat menginhibisi PDE serta diketahui dapat
menurunkan kadar kalsium kembali setelah menginduksi pengeluaran kalsium
dari tempat penyimpanannya.30
Penelitian lain juga melaporkan hal yang sama. Peningkatan kalsium
intraseluler yang diinduksi oleh kafein juga diiringi dengan peningkatan cAMP
sebagai efek lain dari kafein. Oleh karena itu pemberian kafein pada strip otot
polos merupakan resultan dari efek kontraksi dan relaksasi.6 Namun perlu
dilakukan penelitan lebih lanjut untuk mengetahui kedua mekanisme tersebut
ditimbulkan oleh kafein pada otot polos kandung kemih.
Dalam penelitian Yi C R, et al dengan menggunakan tikus yang dibuat sakit
diabetes milletus didapatkan hasil bahwa kafein merupakan agonis reseptor
ryanodin sehingga menyebabkan kalsium keluar dari retikulum sarkoplasma, serta
kafein dapat meningkatkan sensitivitas miofibril dengan kalsium sehingga
terjadilah kontraksi otot detrusor untuk pengosongan urin. Selain itu karena kafein
dapat menghambat PDE maka cAMP dan cGMP akan meningkat. Peningkatan
cGMP karena kafein pada leher kandung kemih dan uretra menyebabkan
terjadinya relaksasi sehingga urin dapat keluar. Oleh karena itu kafein mungkin
dapat memperbaiki kondisi disfungsi kandung kemih pasien dengan diabetes
milletus. Namun masih perlu uji klinis lebih lanjut tentang efek kafein terhadap
tubuh.31
 BAB 5

KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan
Hasil penelitian membuktikan bahwa pemberian kafein pada otot polos
kandung kemih secara in vitro memberikan efek kontraksi. Hal ini dapat dilihat
dari kontraksi yang ditimbulkan oleh kelompok perlakuan lebih tinggi dari pada
kontraksi yang ditimbulkan oleh kelompok kontrol.

5.2 Saran
Saran untuk penelitian selanjutnya dapat dilakukan pengujian efek kafein
secara in vitro terhadap jaringan lain seperti otot jantung dan otot rangka. Selain
itu dapat juga dilakukan pengujian jaringan otot dalam keadaan patologis seperti
hipotonia karena diabetes milletus, stroke, dan obstruksi kronik.

31
 32

DAFTAR PUSTAKA

1. Freedman ND, Park Y, Abnet CC et al. Association of coffee drinking

with total and cause-spesific mortality. NEJM 2012; 366: 1891-904.

2. Kershen R, Mann-Gow T, Yared J et al. Caffeine ingestion causes detrusor

overactivity and afferent nerve excitation in mice. J Urol 2012; 188: 1986-
1992.

3. Garriguet, D. Bevarage consumption canadian adults. Healt report 2008;

19: 82-003-X.

4. Rieg T, Steigele H, Schnermann J et al. Requirement of intact adenosine

A1 receptors for the diuretic and natriuretic action of the methylxanthines
theophylline and caffeine. JPET 2005; 313: 403-409.

5. Lohsiriwat S, Hirunsai M, Chaiyaprasithu B. Effect of cafferine on

bladder function in patient with overactive bladder symptoms. Urology
annals 2011; vol. 3. Issue 1. 14-18.

6. Hockey JS, Wu C and Fry CH. The actions of metabolic inhibiton on

human detrusor smooth muscle contractility from stable and unstable
bladders. BJU Int 2000; 86: 531-537.

7. Mokry J and Nosalova G. In vitro reactivity of urinary bladder smooth

muscle in rabbits influenced by xanthine derivatives. Bratisl Lek Listy
2008; 109: 91-94.

8. Ahn HY, Karaki H and Urakawa N. Inhibitory effects of caffeine on

contractions and calcium movement in vascular and intestinal smooth
muscle. Br. J. Pharmacol 1988; 93: 267-274.

9. Fry CH. Experimental models to study the physiology, pathophysiology,

and pharmacology of the lower urinary tract. Journal of Pharmacological
and Toxicological Methods. J Pharmacol and toxicological methods 2004;
49: 201-210.

10. Tortora GJ, Derrickson B, et al. The urinary system. In : Principles of

anatomy and physiology. 12th ed. USA : John Wiley & Sons, Inc. 2009. p
1018 – 1061.

11. Guyton AC, Hall JE. Textbook of Medical Physiology. 11th ed.
Philadelphia : Elsevier Saunders. 2006.

12. Martini FH, et al. The urinary system. In : Fundamental of anatomy dan
physiology. 9th ed. USA : pearson benjamin cummings. 2012. P 953 –
996.
 33

13. Sherwood L. The urinary system. In : Human Physiology : From cells to

systems. 7th ed. USA : Brooks/Cole. 2010. P 511 – 556.

14. Yoshimura N and Chancellor MB. Physiology and pharmacology of the

bladder and urethra. Chapter 60. In : Campbell-Walsh Urology. 10th ed.
Elsevier. 2011. P 1786 – 1833.

15. Barrett KE et al. Excitable tissue : muscle. In : Ganong’s review of

medical physiology. 23rd ed. USA : Mc Graw Hill. 2010.

16. Mokry J, Jakubesova M, Svihra J et al. Reactivity of urinary bladder

smooth muscle in guinea pigs to acetylcholine and carbachol :
participation of acetylcholinesterase. Physiol 2005; 54: 453-458.

17. Fry CH, Meng E, Young JS. The physiological function of lower urinary
tract smooth muscle. Autonomic Neuroscience 2010; 154: 3-13.

18. Puetz S, Tubomirov LT and Pfitzer G. Regulation of smooth muscle

contraction by small GTPases. Physiol 2009; 24: 342-356.

19. Nawrot P, Jordan S, Eastwood J et al. Effects of caffeine on human health.

Food additives and contaminants 2003; 20: 1-30.

20. Hardman JG, Limbird LE et al. Goodman and gilman, Dasar

Farmakologiterapi. Volume 1. Edisi 10. Jakarta ; EGC ; 2007.

21. Armstrong LE, Pumerantz AC, Roti MW et al. Fluid, electrolyte, and renal
indices of hydration during 11 days of controlled caffeine consumption. Int
J sport nutrition and exercise metabolism 2005; 15: 252-265.

22. Hirayama F and Lee AH. Is caffeine intake associated with urinary
incontinence in japanese adult. J preventive medicine and public health
2012; 45: 204-208.

23. Sibley GN. A comparison of spontaneous and nerve-mediated activity in

bladder muscle from man, pig and rabbit. J Physiol 1984; 354: 431-443.

24. Uvelius B. Length-tension relations of in vitro urinary bladder smooth

muscle strips. J pharmacol and toxicology methods, Elsevier. 2001; 45:
87-90.

25. Fastjer FN and Reid CSW. Constant flow organ-bath techniques. Brit J
Pharmacol 1949; 4: 109-110.

26. Segen JC. Concise dictionary of modern medicine.USA : Mc Graw-Hill.

2006. 110, 163.
 34

27. Lee JG, Wein AJ and Levin RM. The effect of caffeine on the contractile
response of the rabbit urinary bladder to field stimulation. Gen Pharmacol
1993; 24: 1007-1011.

28. Sato K, Ozaki H and Karaki H. Multiple effects of caffeine on contraction

and cytosolic free Ca2+ levels in vascular smooth muscle of rat aorta.
Naunyn-Schmiedeberg’s Arch Pharmacol 1988; vol 338. Issue 4: 443-448.

29. Zalk R, Lehnart SE and Marks AR. Modulation of the Ryanodine

Receptor and Intracellular Calcium. Annu. Rev. Biochem 2007; 76: 367-
385.

30. Watanabe C, Yamamoto H, Hirano K et al. Mechanisms of caffeine-

induced contraction and relaxation of rat aortic smooth muscle. J Physiol
1992; 456: 193-213.

31. Yi CR, Wei ZQ, Deng XL et al : Effect of coffee and caffeine on baldder
dysfunction in streptozotocin-induced diabetic rats. Acta Pharmacol Sin
2006; 27: 1037-1043.
 37

Lampiran 3

Data kontraksi strip otot polos dengan kafein

CCh caff0,01 caff0,1 caff1 caff10 caff100

100 103,27621 64,2579 59,80971 54,30546 53,66291
100 96,663784 63,63771 56,99288 56,00371 53,23883
100 96,507676 82,26759 84,45399 77,05797 77,19446
100 92,14823 67,2327 66,47326 66,45742 64,55089
100 100,10304 72,98709 62,98832 64,99674 63,92675
100 107,02719 75,08358 64,4729 59,50185 59,38739
100 100,23724 84,75194 72,2666 68,44434 60,93825
100 107,16158 75,84696 73,90168 58,10967 63,32613
100 112,47761 85,68767 78,07367 76,52308 76,15974
100 102,69759 76,85445 64,68624 65,11747 61,37573
100 98,597803 79,8737 72,69306 73,04594 65,04909
100 96,635761 81,74291 70,48632 69,85579 72,83964

mean 100 101,12781 75,85202 68,94155 65,78495 64,30415

se 1,6455 2,1945 2,2728 2,2124 2,2378
 38

Lampiran 4
Data kontraksi strip otot polos dengan akuades

Carbachol Kontrol Kontrol Kontrol Kontrol Kontrol

1uM 1 2 3 4 5
100 96,46991 60,61861 59,57022 59,87191 54,74308
100 82,26797 63,37473 61,05027 59,92523 57,90759
100 71,55237 58,39367 56,34776 54,5264 51,8268
100 89,2151 67,5284 67,5284 60,2043 54,11573
100 89,85269 66,60301 60,29509 57,60647 54,65933
100 73,92541 76,65304 58,32557 53,8673 51,44442
100 88,52322 55,52009 53,36903 52,73469 53,36548

mean 100 84,54381 64,09879 59,49805 56,96233 54,00892

se 3,432 2,647 1,6647 1,2106 0,8154
 39

Lampiran 5
Perbandingan persentase kontraksi otot polos kandung kemih kelompok
perlakuan (kafein) dan kelompok kontrol (akuades)

Konsentrasi Rerata persentase Rerata persentase Nilai p

kafein (µM) kontraksi otot polos kontraksi otot polos
dengan pemberian dengan pemberian
kafein akuades
0,01 101,13 ± se 1,64 % 84,54 ± se 3,43% 0.002
0,1 75,85 ± se 2,19% 64,10 ± se 2,64% 0.004
1 68,94 ± se 2,27% 59,50 ± se 1,66% 0.004
10 65,78 ± se 2,21% 56,96 ± se 1,21% 0.003
100 64,30 ± se 2,23% 54,01 ± se 0,81% 0.001
 40

Lampiran 6
Uji normalitas kafein
Tests of Normality
a
Kolmogorov-Smirnov Shapiro-Wilk
Statistic Df Sig. Statistic df Sig.
*
caff0.01 .145 12 .200 .962 12 .811
a. Lilliefors Significance Correction
*. This is a lower bound of the true significance.

Tests of Normality
a
Kolmogorov-Smirnov Shapiro-Wilk
Statistic Df Sig. Statistic df Sig.
*
caff0.1 .126 12 .200 .927 12 .351
a. Lilliefors Significance Correction
*. This is a lower bound of the true significance.

Tests of Normality
a
Kolmogorov-Smirnov Shapiro-Wilk
Statistic Df Sig. Statistic df Sig.
*
caff1 .123 12 .200 .976 12 .961
a. Lilliefors Significance Correction
*. This is a lower bound of the true significance.

Tests of Normality
a
Kolmogorov-Smirnov Shapiro-Wilk
Statistic Df Sig. Statistic df Sig.
*
caff10 .127 12 .200 .951 12 .650
a. Lilliefors Significance Correction
*. This is a lower bound of the true significance.

Tests of Normality
a
Kolmogorov-Smirnov Shapiro-Wilk
Statistic Df Sig. Statistic df Sig.
caff100 .212 12 .144 .924 12 .322
a. Lilliefors Significance Correction
*. This is a lower bound of the true significance.
 41

Lampiran 7
Uji normalitas akuades
Tests of Normality
a
Kolmogorov-Smirnov Shapiro-Wilk
Statistic Df Sig. Statistic df Sig.
*
aqua1 .241 7 .200 .920 7 .468
a. Lilliefors Significance Correction
*. This is a lower bound of the true significance.

Tests of Normality
a
Kolmogorov-Smirnov Shapiro-Wilk
Statistic Df Sig. Statistic df Sig.
*
aqua2 .169 7 .200 .956 7 .787
a. Lilliefors Significance Correction
*. This is a lower bound of the true significance.

Tests of Normality
a
Kolmogorov-Smirnov Shapiro-Wilk
Statistic Df Sig. Statistic df Sig.
*
aqua3 .219 7 .200 .952 7 .746
a. Lilliefors Significance Correction
*. This is a lower bound of the true significance.

Tests of Normality
a
Kolmogorov-Smirnov Shapiro-Wilk
Statistic Df Sig. Statistic df Sig.
*
aqua4 .247 7 .200 .853 7 .130
a. Lilliefors Significance Correction
*. This is a lower bound of the true significance.

Tests of Normality
a
Kolmogorov-Smirnov Shapiro-Wilk
Statistic Df Sig. Statistic df Sig.
*
aqua5 .224 7 .200 .929 7 .543
a. Lilliefors Significance Correction
*. This is a lower bound of the true significance.
 42

Lampiran 8

Hasil data uji statistik independent t test

Group Statistics

Jenisdata N Mean Std. Deviation Std. Error Mean

caff0.01 perlakuan 12 1.01127810E2 5.700362970 1.645553048

kontrol 7 8.45438109E1 9.080933641 3.432270298

caff0.1 perlakuan 12 7.58520171E1 7.601993514 2.194506501

kontrol 7 6.40987933E1 7.005006491 2.647643587

caff1 perlakuan 12 6.89415522E1 7.873556334 2.272899934

kontrol 7 5.94980472E1 4.404548574 1.664762881

caff10 perlakuan 12 6.57849550E1 7.664037083 2.212416937

kontrol 7 5.69623285E1 3.203009541 1.210623813

caff100 perlakuan 12 6.43041507E1 7.752074183 2.237831058

kontrol 7 5.40089192E1 2.157367792 .815408381

 43

(lanjutan)

Independent Samples Test

Levene's
Test for
Equality of
Variances t-test for Equality of Means

95% Confidence
Interval of the
Sig.
Difference
(2- Mean Std. Error
F Sig. t df tailed) Difference Difference Lower Upper

caff Equal variances 1.6583999 3.3673437 9.4795 2.368847

2.785 .113 4.925 17 .000
0.01 assumed 14E1 28 24890 340E1

Equal variances 8.82 1.6583999 3.8063531 7.9467 2.522126

4.357 .002
not assumed 1 14E1 41 36227 206E1

caff Equal variances 1.1753223 3.5178782 4.3311 1.917529

.133 .720 3.341 17 .004
0.1 assumed 84E1 12 49588 809E1

Equal variances 13.5 1.1753223 3.4388770 4.3560 1.915034

3.418 .004
not assumed 80 84E1 47 98543 914E1

caff Equal variances 9.4435049 3.2591306 2.5673 1.631966

3.461 .080 2.898 17 .010
1 assumed 96 09 40468 953E1

Equal variances 16.9 9.4435049 2.8173586 3.4993 1.538764

3.352 .004
not assumed 99 96 14 69508 048E1

caff Equal variances 8.8226264 3.0685089 2.3486 1.529661

4.053 .060 2.875 17 .010
10 assumed 85 37 38528 444E1

Equal variances 15.9 8.8226264 2.5219830 3.4749 1.417031

3.498 .003
not assumed 52 85 92 42398 057E1

caff Equal variances 1.0295231 3.0276926 3.9073 1.668310

4.659 .045 3.400 17 .003
100 assumed 52E1 34 58436 460E1

Equal variances 13.6 1.0295231 2.3817595 5.1753 1.541508

4.323 .001
not assumed 73 52E1 75 77875 516E1
 44

Lampiran 9

Gambar proses penelitian

 45

(lanjutan)
 46

Kampiran 10

Daftar riwayat hidup

Identitas
Nama : Yesinta Diandra
Jenis Kelamin : Perempuan
Tempat, Tanggal Lahir : Jakarta, 20 Agustus 1991
Agama : Islam
Alamat : Jl. Pertanian II no. 60 Lebak Bulus Jakarta
Selatan
e-Mail : yesintadiandra@yahoo.com

Riwayat Pendidikan
 1996-1998 : TKI Al-Izhar Pondok Labu
 1998-2004 : SDI Al-Izhar Pondok Labu
 2004-2007 : SMPI Al-Izhar Pondok Labu
 2007-2010 : SMAI Al-Izhar Pondok Labu
 2010-sekarang : UIN Syarif Hidayatullah Jakarta