Dosen Pengampu :
Bawon Triatmoko S.Farm., M.Sc., Apt
Disusun oleh:
Rida Astutik (172210101097)
Triana Ardila Sari (172210101138)
Biosavety level
Biological Savety Deskripsi Contoh Klasifikasi CDC
Level (BSL)
BSL-4 Mikroba berbahaya dan Virus ebola dan
eksotis, sehingga berisiko marburg
infeksi tinggi yang
ditularkan melalui
Page |2
sterilisasi yang menggunakan panas tinggi, seperti autoclaving. Protokol panas ini
dipecah menjadi dua kategori utama: sterilisasi panas-kering dan sterilisasi panas-
lembab.
Teknik aseptik dalam laboratorium biasanya melibatkan beberapa protokol
sterilisasi panas kering menggunakan aplikasi langsung dari panas tinggi, seperti
mensterilkan loop inokulasi. Panas kering juga dapat diterapkan untuk jangka waktu
yang relatif lama (setidaknya 2 jam) pada suhu hingga 170 ° C dengan menggunakan
oven. Namun, sterilisasi panas-lembab biasanya merupakan protokol yang lebih efektif
untuk menembus sel lebih baik daripada panas kering.
4.2 Autoklaf
Autoklaf mengandalkan sterilisasi panas-lembab. Teknik ini menggunakan suhu di
atas titik didih air untuk mensterilkan barang-barang seperti peralatan bedah dari sel
vegetatif, virus, dan endospora yang tahan terhadap suhu mendidih, tanpa merusak
barang. Autoklaf masih dianggap metode sterilisasi yang paling efektif. Suhu standar
untuk autoklaf adalah 121 ° C atau 132 ° C, biasanya pada tekanan 15 sampai 20 psi.
Lama paparan tergantung pada volume dan sifat bahan yang disterilkan, biasanya 20
menit atau lebih, dengan volume yang lebih besar membutuhkan waktu pemaparan
yang lebih lama untuk memastikan panas yang cukup dan wadah dibiarkan tertutup
dengan longgar serta dibungkus dengan kertas (Derviş, 2013).
Page |6
Gambar 3. Autoklaf
4.3 Pasteurisasi
Pemanasan dan autoklaf bukan cara ideal untuk mengendalikan pertumbuhan
mikroba dalam makanan karena metode ini dapat merusak konsistensi dan kualitas
organoleptik makanan lainnya. Pasteurisasi adalah bentuk kontrol mikroba untuk
makanan yang menggunakan panas tetapi tidak membuat makanan steril. Pasteurisasi
membunuh patogen dan mengurangi jumlah mikroba penyebab pembusukan dengan
tetap menjaga kualitas makanan. Metode yang digunakan untuk pasteurisasi
menyeimbangkan suhu dan lamanya waktu perawatan. Satu metode, pasteurisasi
waktu singkat suhu tinggi (HTST), memaparkan susu ke suhu 72 ° C selama 15 detik,
yang menurunkan jumlah bakteri sambil menjaga kualitas susu. Alternatifnya adalah
suhu ultra-tinggi (UHT) di mana susu terkena suhu 138 ° C selama 2 detik atau lebih.
Susu pasteurisasi UHT dapat disimpan untuk waktu yang lama dalam wadah tertutup
tanpa didinginkan; Namun, ketika suhunya sangat tinggi mengubah protein dalam susu,
menyebabkan sedikit perubahan dalam rasa dan bau.
Gambar 4
4.5 Tekanan
Paparan tekanan tinggi membunuh banyak mikroba. Dalam industri makanan,
pemaparan tekanan tinggi digunakan untuk membunuh bakteri, ragi, jamur, parasit, dan
virus dalam makanan dengan tetap menjaga kualitas makanan dan memperpanjang
umur simpan. Penerapan tekanan tinggi antara 100 dan 800 MPa cukup untuk
membunuh sel vegetatif dengan denaturasi protein, tetapi endospora dapat bertahan
hidup dengan tekanan tersebut. Terapi oksigen hiperbarik membantu meningkatkan
saturasi oksigen dalam jaringan yang menjadi hipoksia dan peradangan. Peningkatan
konsentrasi oksigen ini meningkatkan respons kekebalan tubuh dengan meningkatkan
aktivitas neutrofil dan makrofag, sel darah putih yang melawan infeksi.
Tingkat oksigen meningkat berkontribusi pada pembentukan radikal bebas
beracun yang menghambat pertumbuhan bakteri yang peka terhadap oksigen atau
anaerob sebagai Clostridium perfringens, penyebab umum gangren gas. Pada infeksi C.
perfringens, terapi oksigen hiperbarik juga dapat mengurangi sekresi racun bakteri yang
menyebabkan kerusakan jaringan. Terapi oksigen hiperbarik juga tampaknya
meningkatkan efektivitas perawatan antibiotik. Pemrosesan tekanan tinggi tidak umum
digunakan untuk desinfeksi atau sterilisasi fomites.
Page |8
4.7 Radiasi
Radiasi dapat digunakan untuk membunuh mikroba atau menghambatnya
pertumbuhan. Radiasi pengion seperti sinar-X, sinar gamma, dan berkas elektron
berenergi tinggi. Radiasi pengion cukup kuat untuk masuk ke dalam sel, di mana ia
mengubah struktur molekul dan merusak komponen sel dengan membuat kerusakan
rantai ganda pada molekul DNA. Ini secara langsung dapat menyebabkan mutasi DNA
dan akhirnya menyebabkan kematian sel. Di laboratorium, radiasi pengion umumnya
digunakan untuk mensterilkan bahan yang tidak dapat diautoklaf. Bumbu kering yang
dikemas juga sering disinari gamma. Karena kemampuannya menembus kertas, plastik,
lembaran tipis kayu dan logam, dan jaringan, harus sangat hati-hati saat menggunakan
sinar-X dan iradiasi gamma.
Jenis radiasi lain, radiasi non-ionisasi, umumnya digunakan untuk sterilisasi dan
menggunakan lebih sedikit energi daripada radiasi pengion. Itu tidak menembus sel atau
kemasan. Sinar ultraviolet (UV) adalah salah satu contoh radiasi non-ionisasi
menyebabkan terbentuk timin dimer berdekatan dalam untaian tunggal DNA dan ini
mengarah pada pembentukan mutasi yang pada akhirnya dapat membunuh
mikroorganisme.
Gambar 6. Radiasi UV
4.8 Sonikasi
Penggunaan gelombang ultrasonik frekuensi tinggi untuk mengganggu struktur sel
disebut sonikasi. Penerapan USG gelombang menyebabkan perubahan tekanan yang
cepat dalam cairan intraseluler, hal ini mengarah pada kavitasi, pembentukan
gelembung di dalam sel, yang dapat mengganggu struktur sel dan akhirnya
P a g e | 10
4.9 Filtrasi
Filtrasi adalah metode pemisahan mikroba secara fisik dari sampel. Udara
umumnya disaring melalui efisiensi tinggi filter partikulat udara (HEPA). Filter HEPA
memiliki ukuran pori efektif 0,3 μm, kecil cukup untuk menangkap sel bakteri,
endospora, dan banyak virus. Ketika udara melewati filter ini, udara hampir steril. Filter
HEPA memiliki beragam aplikasi dan digunakan secara luas dalam klinis.
Selain metode fisik kontrol mikroba, bahan kimia juga digunakan untuk mengontrol
pertumbuhan mikroba. Beberapa bahan kimia yang dapat digunakan untuk mengontrol bahan
kimia yaitu:
5.1 Fenolik
Secara kimia, fenol terdiri dari cincin benzena dengan gugus –OH, dan fenolik
adalah senyawa yang memiliki gugus ini pada bagian dari struktur kimianya. Fenolik
seperti timol dan kayu putih terdapat secara alami pada tanaman. Mereka menghambat
pertumbuhan mikroba dengan mendenaturasi protein dan mengganggu membran.
Sejak zaman Lister, beberapa senyawa fenolik telah digunakan untuk mengendalikan
pertumbuhan mikroba. Fenolik seperti kresol (fenol yang dimetilasi) dan o-fenilfenol
adalah bahan aktif dalam berbagai formulasi Lysol. o-Phenylphenol juga biasa digunakan
dalam pertanian untuk mengendalikan pertumbuhan bakteri dan jamur pada saat
dipanen. Triclosan adalah senyawa bisphenol lain umum digunakan dalam sabun tangan.
a) Merkuri
Senyawa merkuri seperti merkuri klorida terutama bersifat bakteriostatik dan
memiliki spektrum aktivitas yang sangat luas. Berbagai bentuk merkuri berikatan
dengan asam amino dan menghambat fungsinya. Senyawa ini beracun bagi sistem
saraf, pencernaan, dan ginjal pada konsentrasi tinggi, dan memiliki efek negatif
pada lingkungan.
b) Perak
P a g e | 12
Perak telah lama digunakan sebagai antiseptik. Krim yang mengandung perak
digunakan untuk mengobati luka topikal dan sangat membantu dalam mencegah
infeksi pada luka bakar. Perak juga sering dikombinasikan dengan antibiotik.
5.3 Halogen
Bahan kimia lain yang biasa digunakan untuk desinfeksi adalah halogen yodium,
klorin, dan fluor. Yodium merupakan agen pengoksidasi asam amino yang mengandung
sulfur, nukleotida, dan asam lemak, dan destabilisasi makromolekul yang mengandung
molekul-molekul ini. Betadine adalah merek povidone-iodine yang biasa digunakan oleh
dokter untuk antisepsis topikal kulit pasien sebelum sayatan. Klorin adalah halogen lain
yang biasa digunakan untuk desinfeksi. Ketika gas klor dicampur dengan air, ia
menghasilkan oksidan kuat yang disebut asam hipoklorit, yang tidak bermuatan dan
memasuki sel dengan mudah. Gas klorin biasa digunakan di Indonesia pabrik
pengolahan air minum dan air limbah kota. Sodium hipoklorit adalah komponen kimia
digunakan untuk berbagai keperluan disinfektan. Garam hipoklorit, termasuk natrium
dan kalsium hipoklorit, digunakan untuk mendisinfeksi kolam renang. Fluor halogen juga
dikenal memiliki sifat antimikroba yang berkontribusi pada pencegahan karies gigi.
Halogen adalah sekelompok unsur yang sangat reaktif yang atom-atomnya
memiliki tujuh elektron di kulit terluarnya. Dalam mikroorganisme, halogen
menyebabkan pelepasan atom oksigen yang kemudian bergabung dan menonaktifkan
protein sitoplasma tertentu, seperti enzim. Klorin (Cl) efektif terhadap berbagai
organisme, termasuk bakteri gram negatif dan gram negatif, dan banyak virus, jamur,
dan protozoa. Klorin banyak digunakan dalam persediaan air kota dan kolam renang,
dimana ia membuat populasi mikroba pada tingkat rendah.
P a g e | 13
5.4 Alkohol
Alkohol membentuk kelompok bahan kimia lain yang biasa digunakan sebagai
desinfektan dan antiseptik. Mereka bekerja dengan cepat mendenaturasi protein,
menghambat metabolisme sel, dan dengan mengganggu membran, yang mengarah ke
lisis sel. Alkohol biasanya digunakan pada konsentrasi sekitar 70% larutan encer dan,
pada kenyataannya, bekerja lebih baik dalam larutan encer daripada 100% alkohol.
Alkohol yang paling umum digunakan untuk desinfeksi adalah etil alkohol (etanol) dan
isopropil alkohol. Meskipun alkohol bukan sporicidal, mereka menghambat proses
sporulasi dan perkecambahan.
5.5 Surfaktan
Zat aktif permukaan, atau surfaktan, adalah sekelompok senyawa kimia yang
menurunkan tegangan permukaan air. Surfaktan merupakan bahan utama dalam sabun
dan deterjen. Sabun adalah garam dari asam lemak rantai panjang dan memiliki daerah
kutub dan nonpolar, memungkinkan mereka untuk berinteraksi. Mereka dapat
berinteraksi dengan minyak dan minyak nonpolar untuk membuat emulsi dalam air,
melonggarkan dan mengangkat kotoran dan mikroba dari permukaan dan kulit. Sabun
tidak membunuh atau menghambat pertumbuhan mikroba secara mekanis membawa
mikroorganisme secara efektif degerming dari suatu permukaan.
5.6 Bisbiguanides
Bisbiguanides dikenal sebagai molekul kationik (bermuatan positif dengan sifat
antiseptiknya. Salah satu antiseptik bisbiguanide adalah klorheksidin. Memiliki aktivitas
spektrum luas terhadap ragi, bakteri gram positif, dan bakteri gram negatif. Klorheksidin
mengganggu membran sel dan bersifat bakteriostatik pada konsentrasi yang lebih
rendah atau bakterisida pada konsentrasi yang lebih tinggi, di mana menyebabkan
sitoplasma sel membeku. Klorheksidin dapat digunakan sebagai antisepsis topikal untuk
pasien sebelum operasi atau injeksi jarum.
dan biosida spektrum luas yang kuat yang memiliki kemampuan untuk membunuh
bakteri, virus, jamur, dan endospora, yang mengarah ke sterilisasi pada suhu rendah.
5.8 Peroksigen
Peroksi adalah agen pengoksidasi kuat yang dapat digunakan sebagai desinfektan
atau antiseptik. Yang paling banyak digunakan peroksigen adalah hidrogen peroksida
(H2O2), digunakan dalam larutan untuk mendisinfeksi permukaan dan dapat juga
digunakan sebagai agen gas. Hidrogen peroksida bekerja dengan memproduksi radikal
bebas yang merusak makromolekul seluler. Hidrogen peroksida memiliki aktivitas
spektrum luas, bekerja melawan bakteri gram positif dan gram negatif, jamur, virus, dan
endospora. Contoh peroksigen lainnya termasuk benzoil peroksida dan karbamid
peroksida. Benzoil peroksida adalah peroksigen yang digunakan dalam solusi
pengobatan jerawat. Sedangkan karbamid peroksida, bahan yang digunakan dalam
pasta gigi, peroksigen yang memerangi biofilm oral yang menyebabkan perubahan
warna gigi dan halitosis (bau mulut). Contoh lain yaitu ozon.
DAFTAR PUSTAKA
Budsberg S., 2011, Hugo & Russell’s Pharmaceutical Microbiology 8th Edition, Dalam Denyer, S.
P. et al., eds. Blackwell Publishing Ltd, Blackwell Publishing Ltd, pp. 183–209.
Derviş, B. (2013). Chemical and Physical Signatures For Microbial Forensics .In Journal of
Chemical Information and Modeling (Vol. 53).
https://doi.org/10.1017/CBO9781107415324.004
Outline, C. (n.d.). Control of Microbial Growth. 3(3), 337–346.
Ray, B., & Bhunia, A. (2008). Biochemistry of Some Beneficial Traits. In Fundamental food
microbiology (pp. 109–112).