Makanan dan Kimia Toksikologi 122 (2018) 132-142

Daftar isi tersedia di ScienceDirect

Toksikologi Makanan dan Kimia

Beranda Jurnal: www.elsevier.com/locate/foodchemtox

Pendekatan pengaturan FDA terhadap steviol glikosida

Judith D. Perrier, Ph.D., RD ∗ , Jeremy J. Mihalov, MS, Susan J. Carlson, Ph.D.

Administrasi Makanan dan Obat AS, O ffi ce Keamanan Pangan Aditif, Divisi Bioteknologi dan Ulasan GRAS Notice, 5001 Campus Drive, College Park, MD, 20740, USA

ARTICLEINFO ABSTRAK

Kata kunci: Stevia rebaudiana ( Bertoni) Bertoni, umumnya dikenal sebagai stevia, adalah tanaman asli Amerika Selatan yang telah dibudidayakan selama ratusan tahun. Pada
FDA tahun 1995, FDA merevisi peringatan impor pada daun stevia dan ekstrak untuk memungkinkan penggunaannya sebagai bahan makanan dalam suplemen
Umumnya diakui sebagai Pemanis GRAS makanan. Pada tahun 2007, Komite Bersama FAO / WHO untuk Aditif Makanan menetapkan tingkat asupan dan spesifisitas yang aman fi kation untuk steviol
Stevia yang aman
glikosida yang mencakup kemurnian minimum 95% dari tujuh bernama steviol glikosida. Pada 2008, FDA merespons tanpa pertanyaan pada pemberitahuan
Umumnya Diakui sebagai Aman (GRAS) untuk penggunaan yang sangat murni fi ed steviol glikosida yang diperoleh dari daun stevia sebagai pemanis tujuan umum
dalam makanan. Karena peringatan impor yang ada, FDA fi memimpin, mengevaluasi, dan tidak keberatan dengan lebih dari 50 pemberitahuan GRAS untuk
Steviol glikosida
penggunaan berbagai glikosida steviol dengan kemurnian tinggi sebagai pemanis dalam makanan. Dalam makalah ini, kami menyoroti praktik FDA untuk fi ling dan
mengevaluasi pemberitahuan GRAS untuk steviol glikosida. Kami juga memberikan ringkasan data dan informasi yang disajikan dalam pemberitahuan GRAS
untuk steviol glikosida di GRAS Noti fi program kation. FDA telah menerima gelombang baru pemberitahuan GRAS yang mencakup metode bioteknologi alternatif
untuk produksi glikosida steviol.

1. Pendahuluan
Stevia rebaudiana ( Bertoni) Bertoni, umumnya dikenal sebagai stevia, adalah tanaman asli
Amerika Selatan yang telah dibudidayakan selama ratusan tahun. Daun tanaman stevia, dan ekstrak
yang dibuat darinya, memiliki rasa manis. Steviol glikosida adalah konstituen daun stevia yang
bertanggung jawab atas rasa manis, namun ada di ff ereksi dalam rasa dan intensitas rasa manis di
antara berbagai glikosida steviol. Sejak 2008, FDA telah menerima pemberitahuan GRAS untuk puri fi ed
glikosida steviol dari
Stevia daun yang termasuk steviol glikosida dan puri terisolasi fi ed campuran steviol glikosida yang
memiliki di ff rasa dan karakteristik rasa manis. Daun stevia diekstraksi dan dapat dikenakan puri
tambahan fi kation dan modi fi langkah-langkah kation untuk mendapatkan glikosida steviol yang
diinginkan yang dapat mencakup satu atau lebih glikosida steviol.
Status peraturan glikosida steviol untuk digunakan dalam makanan telah berkembang sejak
diperkenalkan ke pasar AS. Sejumlah faktor, termasuk pertumbuhan tubuh pengetahuan tentang
keamanan puri fi konstituen ed berasal dari daun S. rebaudiana, berbentuk lanskap peraturan untuk
glikosida steviol. Antara tahun 1970 dan
1997, FDA menerima banyak pertanyaan dan beberapa aditif makanan dan GRAS sebuah FFI petisi
knis untuk penggunaan stevioside atau stevia daun sebagai
pemanis dalam makanan. Tak satu pun dari aditif makanan atau GRAS sebuah FFI petisi knis diterima
untuk fi ling, dan karena itu tidak secara resmi Ulasan, karena de fi ketidakefisienan dalam data dan
informasi yang diperlukan untuk menunjukkan bahwa zat tersebut aman untuk digunakan dalam
makanan. Makanan aditif menggunakan memerlukan tinjauan premarket dan persetujuan oleh FDA
melalui proses petisi, yang menghasilkan peraturan yang mencakup identitas dan kondisi
penggunaan aditif makanan. Sebuah petisi aditif makanan harus mengandung data dan informasi
yang diperlukan untuk mendukung kesimpulan bahwa zat ini aman di bawah kondisi penggunaannya.
Sebuah deskripsi data, informasi, dan format yang diperlukan untuk sebuah petisi aditif makanan
diuraikan di bawah Judul 21 dari US Code of Federal Regulations (21 CFR 171.1)
( https://www.accessdata.fda.gov/scripts/cdrh/cfdocs/
cfcfr / CFRSearch.cfm? fr = 171,1 ). Antara tahun 1970 dan 1987, FDA menerima tiga petisi aditif
makanan untuk penggunaan stevioside sebagai pemanis dalam makanan. Pada tahun 1972, FDA
menerima petisi aditif makanan untuk penggunaan daun stevia sebagai pemanis. Tak satu pun dari
petisi ini memberikan informasi yang diperlukan untuk menjadi fi dipimpin, dan karena itu, tidak secara
resmi ditinjau oleh FDA.
Sepanjang 1980-an dan awal 1990-an, ada upaya untuk menyelesaikan masalah keamanan
bahan stevia yang diturunkan melalui GRAS sebuah FFI petisi knis. 1 Pada tahun 1989, FDA menerima
petisi warga untuk penggunaan

* Penulis yang sesuai.

Alamat email: Judith.Perrier@fda.hhs.gov (JD Perrier), Jeremy.Mihalov@fda.hhs.gov (JJ Mihalov), Susan.Carlson@fda.hhs.gov (SJ Carlson).
1 FDA dievaluasi zat GRAS bawah GRAS sebuah FFI Proses petisi knis dari sekitar 1973 sampai 1997. Pada berhasil menyelesaikan petisi, FDA menerbitkan peraturan dalam Kode Peraturan Federal. Pada tahun 1997,

FDA menerbitkan aturan yang diusulkan menguraikan noti GRAS fi Proses kation untuk menggantikan GRAS sebuah FFI Proses permohonan knis.

https://doi.org/10.1016/j.fct.2018.09.062
Menerima September 2018 17; Diterima 25 September 2018
Tersedia online 27 September 2018
0278-6915 / Diterbitkan oleh Elsevier Ltd Ini adalah artikel akses terbuka di bawah lisensi CC BY (http://creativecommons.org/licenses/BY/4.0/).
JD Perrier et al.
stevioside sebagai pemanis dan kemudian redesignated sebagai GRAS sebuah FFI knis petisi.
Namun, permohonan itu tidak fi memimpin karena kurangnya informasi yang diperlukan untuk
penerimaan untuk fi ling. Pada tahun 1992, FDA menerima GRAS sebuah FFI knis permohonan
penggunaan stevia daun sebagai fl avoring bahan dalam teh, co ff EES, dan produk minuman lain
sebagai GRAS. Setelah meninjau awal permohonan dan informasi tambahan dari pemohon, FDA
menyimpulkan bahwa permohonan ini tidak memberikan informasi yang diperlukan untuk penerimaan
untuk fi ling. Pada tahun 1994, FDA menerima GRAS sebuah FFI knis permohonan penggunaan stevia
daun di herbal dan
fl teh avored. Petisi ini, serta informasi tambahan yang disediakan oleh pemohon, juga tidak
memberikan informasi yang diperlukan untuk penerimaan untuk fi ling oleh FDA.
Antara 2008 dan 2018, O FDA FFI ce dari Aditif Makanan Keselamatan dievaluasi lebih dari 50
GRAS pemberitahuan melalui GRAS Noti fi Program kation untuk berbagai glikosida steviol yang FDA
menanggapi dengan tidak ada pertanyaan tentang noti yang fi kesimpulan er (suatu “ tidak ada
pertanyaan ” surat). Publikasi GRAS fi Aturan nal pada 17 Agustus 2016 diubah dan klari fi ed kriteria
dalam peraturan kami untuk saat penggunaan zat dalam makanan GRAS (81 FR 54.960, Federal
Register 17 Agustus
2016 ). 2 Termasuk dalam GRAS fi Aturan nal adalah informasi mengenai kondisi di mana FDA akan fi le
pemberitahuan GRAS. Sebuah pengecualian untuk praktek standar FDA untuk fi ling GRAS
pemberitahuan adalah untuk glikosida steviol. FDA menganggap identitas banyak glikosida steviol
yang merupakan subjek pemberitahuan GRAS Ulasan di program untuk menjadi serupa, namun
pemberitahuan GRAS untuk glikosida steviol secara rutin fi memimpin bahkan ketika pemberitahuan
sebelumnya untuk bahan termasuk data yang sama dan informasi dan tujuan penggunaan yang
sama. 3 Alasan untuk praktek saat ini FDA fi ling GRAS pemberitahuan untuk glikosida steviol adalah
untuk memastikan produsen yang bahan-bahan mereka mematuhi peringatan impor.
O FDA FFI ce dari Peraturan A ff mengudara telah ditempatkan dan direvisi alert impor relevan
dengan seluruh daun stevia dan daun stevia ekstrak sejak tahun 1991.
Gambar. 1 menyediakan waktu tindakan regulasi FDA pada bahan-bahan stevia yang diturunkan dari
tahun 1970 hingga saat ini.
The peringatan impor yang dikeluarkan pada tahun 1991 melarang impor daun stevia, stevioside
(ekstrak daun stevia) dan makanan yang mengandung stevia karena informasi toksikologi yang tidak
memadai. Dengan pelaksanaan suplemen diet Kesehatan dan Pendidikan Act of 1994, 1991 impor
peringatan itu modi fi ed pada tahun 1995 untuk memungkinkan daun stevia, stevioside, atau produk
yang mengandung stevioside harus diimpor jika mereka secara eksplisit diberi label sebagai
suplemen makanan atau digunakan hanya sebagai bahan makanan dalam produk suplemen
makanan. Penggunaan bahan makanan dalam suplemen makanan dikeluarkan dari de yang fi Definisi
dari aditif makanan, dan dengan demikian memenuhi syarat untuk kesimpulan GRAS ( FDA 2017 ). 4 FDA
menyelesaikan evaluasi atas fi pertama terkait stevia pemberitahuan GRAS pada tahun 2008 untuk
rebaudioside A.
Untuk memfasilitasi impor makanan yang mengandung aman stevia leafderived bahan ke AS
dengan peringatan impor yang ada di tempat, FDA memilih untuk mengubah standar prosedur
pemberitahuan GRAS untuk memungkinkan fi ling dari semua pemberitahuan GRAS diformat dan
lengkap untuk glikosida steviol, bahkan dalam kasus di mana noti yang fi ed substansi, metode
manufaktur, dan tujuan penggunaan adalah sama seperti yang dijelaskan dalam pemberitahuan
GRAS sukses sebelumnya. negara FDA dalam GRAS fi Aturan nal bahwa dengan
2 The GRAS fi Aturan nal juga merubah peraturan FDA untuk menggantikan sukarela GRAS sebuah FFI
Proses petisi knis dengan noti sukarela fi Prosedur kation (yang GRAS Noti fi Program kation) di mana
setiap orang dapat memberitahukan FDA dari kesimpulan mereka bahwa zat adalah GRAS bawah
kondisi digunakan.
3 Ini adalah praktek FDA untuk melakukan review awal dari setiap pemberitahuan GRAS,
yaitu, meninjau sebelum menerima pengajuan sebagai pemberitahuan GRAS (75 FR 32.632, Federal
Register 28 Desember 2010 ). Ini fi Praktek ling adalah codi fi ed di 21 CFR 170,265.
4 Sebagaimana dijelaskan dalam dokumen pedoman ini de yang fi definisi dari “ makanan aditif ” di bagian 201 (s)
dari Federal Food, Drug, dan Kosmetik Act excepts bahan makanan di atau dimaksudkan untuk digunakan dalam
suplemen makanan. Dengan demikian, penggunaan zat sebagai bahan makanan dalam suplemen makanan tidak
memenuhi syarat untuk klasifikasi fi kation sebagai GRAS.
133
Makanan dan Kimia Toksikologi 122 (2018) 132-142
Berkenaan dengan kesamaan dalam proses manufaktur, kemungkinan akan menerapkan
faktor-faktor yang sama yang digunakan untuk menyarankan industri untuk menerapkan ketika
menilai e ff Ects dari signi fi tidak bisa perubahan proses manufaktur pada keselamatan dan status
peraturan bahan makanan ( Federal Register, 2016 ). 5 FDA juga menyatakan dalam GRAS fi Aturan nal
bahwa mungkin memutuskan untuk menanggapi pengajuan sebagai korespondensi umum, setelah
berkomunikasi dengan submitter yang sesuai, daripada fi le untuk evaluasi sebagai pemberitahuan
GRAS, jika subjek pengajuan adalah: (1) sudah subjek pemberitahuan GRAS, dan kami telah
menanggapi bahwa pemberitahuan GRAS dengan “ tidak ada pertanyaan surat, ” atau (2) campuran
zat yang sudah merupakan subjek pemberitahuan GRAS, dan FDA telah menanggapi mereka
pemberitahuan GRAS dengan “ tidak ada pertanyaan ” huruf ( Federal Register, 2016 ). Namun, karena
peringatan impor, praktik FDA adalah untuk fi le setiap steviol glikosida pengajuan daripada
mengeluarkan surat menyurat.
peraturan FDA stevia bahan daun yang diturunkan meliputi tindakan kepatuhan untuk
penegakan peringatan impor untuk daun stevia dan ekstrak mentah. isu FDA surat peringatan ke fi rms
untuk misbranding dan pemalsuan pelanggaran ketika label produk mereka gagal untuk menyertakan
deklarasi pada bagian dari tanaman dari mana bahan stevia berasal, atau apakah bahan stevia
adalah ekstrak stevia mentah atau puri sebuah fi ed ekstrak pertemuan didirikan tertentu fi kation. Revisi
terbaru yang paling FDA peringatan impor dikeluarkan pada tahun 2018, dan update Speci fi bahasa c
untuk kembali fl dll lebih baru pemberitahuan GRAS dan informasi peraturan.
Penerapan teknologi baru merupakan proporsi pertumbuhan pemberitahuan GRAS untuk
glikosida steviol dievaluasi oleh FDA. Selain produk yang terbuat dari ekstrak daun stevia, teknik
termasuk modi enzim fi kation dan produksi glikosida steviol oleh fermentasi. glikosida steviol dibuat
dengan menggunakan metode inovatif kini menjadi bagian dari pasar yang berkembang pemanis
berbasis stevia ( Philippe et al., 2014 ; Jain et al., 2014 ). Mengingat intensif e ff orts terkait dengan
proses dan puri fi kation komponen dari tanaman stevia, serta permintaan untuk konstituen minor dari
daun tanaman stevia, produsen mengambil keuntungan dari metode bioteknologi, seperti produksi
konstituen stevia dengan fermentasi. Metode ini dapat memanfaatkan modi enzim fi kation dan
fermentasi teknik untuk menghasilkan konstituen yang identik dengan atau modi sebuah fi kasi yang
berasal dari daun stevia.
Pada artikel ini, kami memberikan perspektif kita tentang bagaimana berhubungan dengan stevia
pemberitahuan GRAS dievaluasi di bawah FDA GRAS Noti fi Program kation.
2. Impor peringatan untuk daun stevia, “ Ekstrak kasar Stevia Daun dan Makanan Mengandung Stevia
Daun atau Stevia Ekstrak ”
FDA fi pertama mengeluarkan peringatan impor pada tahun 1991 untuk mencegah impor produk
stevia ke Amerika Serikat dan merevisinya pada tahun 1995 sebagai Impor Siaga # 45-06:
"Penahanan tanpa Pemeriksaan Fisik dari Stevia Daun, Crude Ekstrak Stevia Daun dan Makanan
Mengandung Stevia Daun atau Stevia Ekstrak" Siaga Impor ini diperbarui pada tahun 2017 dan yang
terbaru pada tahun 2018, http://www.accessdata.fda.gov/cms_ia/importalert_
119.html . FDA Impor Siaga # 45-06 memberikan panduan saat ini pada kriteria yang digunakan untuk
menentukan apakah glikosida steviol atau makanan yang mengandung glikosida steviol dapat diimpor
ke Amerika Serikat. Berkenaan untuk digunakan dalam makanan konvensional, daun stevia dan
ekstrak mentah yang mengandung kurang dari 95% glikosida steviol yang tidak disetujui sebagai
aditif makanan, mereka juga tidak seorang FFI rmed sebagai GRAS untuk setiap penggunaan. Hasil
studi toksikologi pada hewan dan manusia mendukung keselamatan kemurnian tinggi glikosida steviol
( ≥ 95%) ( Abdel-Rahman et al., 2011 ). Dengan demikian, produk stevia yang diturunkan dengan
kurang dari 95% glikosida steviol tidak dapat diimpor ke AS untuk digunakan sebagai bahan
makanan.
glikosida steviol dengan ≥ 95% kemurnian dapat diimpor, asalkan
5 FDA memberi bimbingan kepada industri yang menggambarkan faktor yang perlu dipertimbangkan ketika
menentukan apakah signi fi Perubahan tidak bisa di proses manufaktur ada untuk suatu zat makanan yang sudah
di pasar ( FDA 2014 ).
JD Perrier et al.
Gambar. 1. Timeline untuk tonggak peraturan yang berkaitan dengan stevia.
importir memiliki dokumentasi untuk menunjukkan bahwa mereka memenuhi kemurnian minimum.
FDA “ tidak ada pertanyaan ” surat tanggapan atas Pemberitahuan GRAS dapat digunakan sebagai
dokumentasi, tetapi tidak diperlukan. Atau, sesuai peringatan impor FDA, perusahaan dapat
memberikan dokumentasi untuk impor produk yang mengandung glikosida steviol ke AS untuk
menunjukkan bahwa glikosida steviol memenuhi kondisi waspada impor. Beberapa contoh
dokumentasi ini adalah certi sebuah fi cate analisis dan / atau informasi manufaktur yang menunjukkan
bahwa persiapan Anda memenuhi didirikan tertentu fi kation.
3. Ringkasan GRAS pemberitahuan untuk glikosida steviol
Sebuah pemberitahuan GRAS untuk penggunaan bahan glikosida steviol mungkin sudah
ditutupi oleh pemberitahuan GRAS yang ada. Karena GRAS Noti fi Program kation bersifat sukarela,
dan GRAS pemberitahuan tidak dimaksudkan untuk menjadi produk-spesifik fi c lisensi atau
pendaftaran untuk produsen, pengajuan baru tidak diperlukan jika kondisi tertentu terpenuhi,
misalnya, jika persiapan memiliki yang sama (1) identitas dan spesifik fi kation, (2) metode pembuatan,
atau (3) penggunaan yang dimaksudkan. Jika bahan glikosida steviol melibatkan metode baru
pembuatan atau penggunaan yang dimaksudkan, pengajuan pemberitahuan GRAS ke FDA GRAS
Noti fi Program kation dibenarkan.
Daftar pemberitahuan GRAS untuk glikosida steviol dan menggunakan mereka dimaksudkan
disediakan di Tabel 1 - Ringkasan Pemberitahuan GRAS untuk Penggunaan steviol Glikosida.
Informasi tambahan yang berkaitan dengan lebih dari 50 pemberitahuan GRAS dibahas dalam
4.1.1. glikosida steviol puri fi ed dari daun tanaman stevia
publikasi ini tersedia di dicari FDA GRAS Pemberitahuan Inventory ( FDA, 2018 ). ( https://www.accessdata.fda.gov/
scripts / FDCC /? set = GRASNotices & sort = GRN_No & order = DESC & startrow = 1 & type =
canggih & search =% C2% A4% C2% A4steviol% 20rebaudioside% C2% A4 )
4. Evaluasi GRAS pemberitahuan untuk glikosida steviol
tinjauan FDA pemberitahuan GRAS termasuk pertimbangan kimia, toksikologi, dan jika sesuai,
keamanan mikrobiologi (misalnya, jika enzim mikroba yang diturunkan digunakan dalam proses
produksi), dan review peraturan. Informasi kimia membahas identitas substansi (ilmiah yang fi c nama,
komposisi, dan sumber), tujuan penggunaan dan teknis e ff dll, diperkirakan paparan makanan,
intensitas rasa manis relatif terhadap sukrosa, metode pembuatan, dan spesifik fi kation untuk
komposisi dan kontaminan potensial. Informasi toksikologi alamat studi yang dilakukan dengan noti
yang fi ed bahan atau artikel uji sebanding, tingkat yang dapat diterima paparan diet, data keamanan
untuk setiap enzim yang digunakan, dan studi setiap yang berhubungan dengan keselamatan steviol
134
Makanan dan Kimia Toksikologi 122 (2018) 132-142
glikosida diterbitkan sejak terakhir pemberitahuan GRAS Ulasan. Penilaian mikrobiologi membahas
penggunaan mikroorganisme atau enzim mikroba yang diturunkan dalam produksi glikosida steviol.
peraturan tinjauan ilmuwan FDA berfungsi sebagai manajer proyek dari proses peninjauan untuk
memastikan bahwa sesuai peraturan, kebijakan, dan ilmiah fi masalah c dipertimbangkan dan
diselesaikan dalam jangka waktu yang ditetapkan. Selain mengevaluasi pemberitahuan GRAS untuk
kepatuhan terhadap peraturan dan ilmiah fi akurasi c, ilmuwan tinjauan regulasi berfungsi sebagai titik
kontak untuk setiap pertemuan pra atau pasca-pengajuan dengan FDA.
4.1. Nama yang digunakan dalam surat tanggapan GRAS
Pada tahap awal proses evaluasi pemberitahuan GRAS, FDA memberikan nama untuk subjek
pemberitahuan tersebut. Namun, dalam menanggapi pemberitahuan GRAS, FDA tidak berpendapat
tentang nama-nama umum atau biasa sesuai untuk menyatakan substansi sesuai dengan
persyaratan pelabelan FDA. peraturan pelabelan FDA mengharuskan nama umum atau biasa harus
digunakan untuk bahan (21 CFR 101,4). produsen makanan harus daftar nama umum atau yang
biasa, atau jika tidak ada, nama deskriptif yang tepat yang tidak menyesatkan, karena bahan-bahan
kecuali ada peraturan yang menyediakan untuk di a ff jangka erent. FDA memberikan panduan tentang
label yang tepat dari makanan (A Food Pelabelan Panduan: Pedoman untuk Industri, FDA, 2013 ). O
FDA FFI ce dari Aditif Makanan Keselamatan digunakan nama-nama berikut dalam surat tanggapan
GRAS untuk mengidentifikasi subyek pemberitahuan masing-masing (dikelompokkan berdasarkan
sumber):
• Puri fi glikosida steviol ed
• Rebaudioside A puri fi ed dari daun Stevia rebaudiana
(Bertoni) Bertoni
• Rebaudioside C puri fi ed dari daun Stevia rebaudiana
(Bertoni) Bertoni
• Rebaudioside D puri fi ed dari daun Stevia rebaudiana
(Bertoni) Bertoni
• Rebaudioside M puri fi ed dari daun Stevia rebaudiana
(Bertoni) Bertoni
• glikosida steviol dengan rebaudioside A dan stevioside sebagai komponen utama
• glikosida steviol dengan rebaudioside A sebagai komponen utama
• glikosida steviol dengan stevioside sebagai komponen utama
• stevioside puri fi ed dari daun Stevia rebaudiana ( Bertoni) Bertoni
 Tabel 1
Ringkasan GRAS pemberitahuan untuk penggunaan glikosida steviol.
JD Perrier et al.

GRN Nama-nama dalam Surat Response Nama disingkat dalam Surat spesifik fi ed steviol glikosida Content Sumber Penggunaan yang dimaksudkan Manisnya Intensitas (kali dari
Response (Kering Berat) sukrosa)

000.252 rebaudioside A puri fi ed dari Stevia rebaudiana rebaudioside A ≥ 95% rebaudioside A daun S. rebaudiana Pemanis dalam berbagai kategori makanan, serta digunakan sebagai 200-300
(Bertoni) Bertoni table top pemanis
000.253 rebaudioside A puri fi ed dari Stevia rebaudiana rebaudioside A ≥ 97% rebaudioside A daun S. rebaudiana Tujuan umum pemanis dalam makanan, termasuk daging dan produk unggas, 200
(Bertoni) Bertoni pada tingkat yang ditentukan oleh praktek-praktek manufaktur yang baik saat
ini
000.275 Puri fi ed glikosida steviol dengan rebaudioside A SG-R ≥ 95% glikosida steviol daun S. rebaudiana Tabel pemanis atas 200-300
sebagai komponen utama
000.278 rebaudioside A puri fi ed dari daun rebaudioside A ≥ 97% rebaudioside A daun S. rebaudiana Pemanis dalam berbagai kategori makanan, serta digunakan sebagai 400
Stevia rebaudiana ( Bertoni) Bertoni table top pemanis
000.282 rebaudioside A puri fi ed dari daun rebaudioside A ≥ 97% rebaudioside A daun S. rebaudiana Tujuan umum pemanis dalam makanan, termasuk daging dan produk unggas, 200
Stevia rebaudiana ( Bertoni) Bertoni pada tingkat yang ditentukan oleh praktek-praktek manufaktur yang baik saat
ini
000.287 Puri fi ed glikosida steviol dengan rebaudioside A SG-RS > 95% glikosida steviol Daun S. rebaudiana Tujuan umum pemanis dalam makanan, termasuk daging dan produk unggas, 200
dan stevioside sebagai komponen utama pada tingkat yang ditentukan oleh praktek-praktek manufaktur yang baik saat
ini
000.303 rebaudioside A puri fi ed dari daun rebaudioside A ≥ 95% rebaudioside A daun S. rebaudiana Tujuan umum pemanis dalam makanan, termasuk daging dan produk unggas, 275-325
Stevia rebaudiana ( Bertoni) Bertoni pada tingkat yang ditentukan oleh praktek-praktek manufaktur yang baik saat
ini
000.304 Puri fi ed glikosida steviol dengan rebaudioside A SG-RS > 95% glikosida steviol daun S. rebaudiana Tujuan umum pemanis dalam makanan, termasuk daging dan produk unggas, 200-310
dan stevioside sebagai komponen utama pada tingkat yang ditentukan oleh praktek-praktek manufaktur yang baik saat
ini
000.318 rebaudioside A puri fi ed dari daun rebaudioside A ≥ 95% rebaudioside A daun S. rebaudiana Tujuan umum pemanis dalam makanan, termasuk daging dan produk unggas, 400
Stevia rebaudiana ( Bertoni) Bertoni pada tingkat yang ditentukan oleh praktek-praktek manufaktur yang baik saat
ini, serta digunakan sebagai pemanis atas meja

135
000.323 Puri fi ed glikosida steviol dengan rebaudioside SG-RS ≥ 95% glikosida steviol daun S. rebaudiana Tujuan umum pemanis dalam makanan, termasuk daging dan produk unggas, 200
A dan stevioside sebagai komponen utama pada tingkat yang ditentukan oleh praktek-praktek manufaktur yang baik saat
ini, serta digunakan sebagai pemanis atas meja

000.329 rebaudioside A puri fi ed dari daun rebaudioside A ≥ 97% rebaudioside A daun S. rebaudiana Tujuan umum pemanis dalam makanan, termasuk daging dan produk unggas, 200
Stevia rebaudiana ( Bertoni) Bertoni pada tingkat yang ditentukan oleh praktek-praktek manufaktur yang baik saat
ini
000.337 Enzim-modi fi glikosida steviol ed EMSGP > 95% glikosida steviol enzim modi fi ed steviol glikosida dari daun Tujuan umum pemanis dalam makanan, termasuk daging dan produk unggas, 100
persiapan S. rebaudiana pada tingkat yang ditentukan oleh praktek-praktek manufaktur yang baik saat
ini
000.348 Stevioside puri fi ed dari daun Stevia stevioside ≥ 95% Stevioside daun S. rebaudiana Tujuan umum pemanis dalam makanan, termasuk daging dan produk 250-300
rebaudiana ( Bertoni) Bertoni unggas dan susu formula, pada tingkat yang ditentukan oleh praktek
manufaktur yang baik, serta digunakan sebagai table top pemanis

000.349 Puri fi ed glikosida steviol dengan rebaudioside A SG-RS ≥ 97% glikosida steviol daun S. rebaudiana Tujuan umum pemanis dalam makanan, termasuk daging dan produk NA atau 200a
dan stevioside sebagai komponen utama unggas dan susu formula, pada tingkat yang ditentukan oleh praktek
manufaktur yang baik, serta digunakan sebagai table top pemanis

000.354 rebaudioside A puri fi ed dari daun rebaudioside A ≥ 97% rebaudioside A daun S. rebaudiana Tujuan umum pemanis dalam makanan, termasuk daging dan produk 300-400
Stevia rebaudiana ( Bertoni) Bertoni unggas dan susu formula, pada tingkat yang ditentukan oleh praktek
manufaktur yang baik, serta digunakan sebagai table top pemanis

000.365 rebaudioside A puri fi ed dari daun rebaudioside A ≥ 97% rebaudioside A daun S. rebaudiana Tujuan umum pemanis dalam makanan, termasuk daging dan produk 250-450
Stevia rebaudiana ( Bertoni) Bertoni unggas dan susu formula, pada tingkat yang ditentukan oleh praktek
manufaktur yang baik, serta digunakan sebagai table top pemanis
Makanan dan Kimia Toksikologi 122 (2018) 132-142

( bersambung ke halaman berikutnya)

 Tabel 1 ( continued)

GRN Names in Response Letter Abbreviated Names in Speci fi ed Steviol Glycoside Content Source Intended Use Sweetness Intensity (times
JD Perrier et al.

Response Letter (Dried Weight) that of sucrose)

000367 Puri fi ed steviol glycosides with rebaudioside A SG-RS ≥ 95% Steviol glycosides Leaves of S. rebaudiana General purpose sweetener in foods, excluding meat and poultry 200-300
and stevioside as the principal components products and infant formulas, at levels determined by good
manufacturing practice, as well as use as a table top sweetener

000369 Rebaudioside A puri fi ed from the leaves of Rebaudioside A ≥ 97% Rebaudioside A Leaves of S. rebaudiana General purpose sweetener in foods, excluding meat and poultry 200a
Stevia rebaudiana ( Bertoni) Bertoni products and infant formulas, at levels determined by good
manufacturing practice, as well as use as a table top sweetener

000375 Enzyme-modi fi ed steviol glycosides EMSG > 95% Steviol glycosides Enzyme treatment of steviol glycosides General-purpose sweetener in foods, excluding meat and poultry 137
from the leaves of S. rebaudiana products, at levels determined by current good manufacturing practices

000380 Rebaudioside A puri fi ed from the leaves of Rebaudioside A ≥ 95% Rebaudioside A Leaves of S. rebaudiana General purpose sweetener in foods, excluding meat and poultry 300-400
Stevia rebaudiana ( Bertoni) Bertoni products and infant formulas, at levels determined by good
manufacturing practice, as well as use as a table top sweetener

000388 Rebaudioside A puri fi ed from the leaves of Rebaudioside A ≥ 95% Rebaudioside A Leaves of S. rebaudiana General purpose sweetener in foods, excluding meat and poultry 300-400
Stevia rebaudiana ( Bertoni) Bertoni products and infant formulas, at levels determined by good
manufacturing practice, as well as use as a table top sweetener

000389 Steviol glycosides with stevioside as the SG-S ≥ 95% Steviol glycosides Leaves of S. rebaudiana General purpose sweetener in foods, excluding meat and poultry 300-400
principal component products and infant formulas, at levels determined by good
manufacturing practice, as well as use as a table top sweetener

000393 Rebaudioside A puri fi ed from the leaves of Rebaudioside A ≥ 97% Rebaudioside A Leaves of S. rebaudiana General purpose sweetener in foods, excluding meat and poultry 275-325
Stevia rebaudiana ( Bertoni) Bertoni products and infant formulas, at levels determined by good

136
manufacturing practice, as well as use as a table top sweetener

000395 Puri fi ed steviol glycosides with rebaudioside A SG-RS ≥ 95% Steviol glycosides Leaves of S. rebaudiana General purpose sweetener in foods, excluding meat and poultry 275-325
and stevioside as the principal components products and infant formulas, at levels determined by good
manufacturing practice, as well as use as a table top sweetener

000418 Rebaudioside A derived from Stevia rebaudiana Rebaudioside A ≥ 98% Rebaudioside A Leaves of S. rebaudiana General-purpose sweetener in foods, excluding meat and poultry 400a
(Bertoni) Bertoni products, at levels determined by current good manufacturing practices

000448 Enzyme-modi fi ed steviol glycosides EMSG ≥ 95% Steviol glycosides Enzyme treatment of steviol glycosides General purpose sweetener in foods, excluding meat and poultry 80-120
from the leaves of S. rebaudiana products and infant formulas, at levels determined by good
manufacturing practice, as well as use as a table top sweetener

000452 Enzyme-modi fi ed steviol glycosides EMSG ≥ 95% Steviol glycosides Enzyme treatment of steviol glycosides General purpose sweetener in foods, excluding meat and poultry 120-190
from the leaves of S. rebaudiana products and infant formulas, at levels determined by good
manufacturing practice, as well as use as a table top sweetener

000456 Rebaudioside D puri fi ed from the leaves of Rebaudioside D ≥ 95% Rebaudioside D Leaves of S. rebaudiana General purpose sweetener in foods, excluding meat and poultry 270
Stevia rebaudiana ( Bertoni) Bertoni products and infant formulas, at levels determined by good
manufacturing practice, as well as use as a table top sweetener

000461 Rebaudioside A puri fi ed from the leaves of Rebaudioside A ≥ 97% Rebaudioside A Leaves of S. rebaudiana General purpose sweetener in foods, excluding meat and poultry 200a
Stevia rebaudiana ( Bertoni) Bertoni products and infant formulas, at levels determined by good
manufacturing practice, as well as use as a table top sweetener

000467 Rebaudioside A puri fi ed from the leaves of Rebaudioside A ≥ 98% Rebaudioside A Leaves of S. rebaudiana General purpose sweetener in foods, excluding meat and poultry 200a
Makanan dan Kimia Toksikologi 122 (2018) 132-142

Stevia rebaudiana ( Bertoni) Bertoni products and infant formulas, at levels determined by good
manufacturing practice, as well as use as a table top sweetener

( continued on next page)

 Table 1 ( continued)

GRN Names in Response Letter Abbreviated Names in Speci fi ed Steviol Glycoside Content Source Intended Use Sweetness Intensity (times
JD Perrier et al.

Response Letter (Dried Weight) that of sucrose)

000473 Steviol glycosides with rebaudioside M as the SG-RM ≥ 95% Steviol glycosides Leaves of S. rebaudiana General purpose sweetener in foods, excluding meat and poultry 200-350
principal component products and infant formulas, at levels determined by good
manufacturing practice, as well as use as a table top sweetener

000493 Puri fi ed steviol glycosides with rebaudioside A SG-RS ≥ 95% Steviol glycosides Leaves of S. rebaudiana General purpose sweetener in foods, excluding meat and poultry 280-380
and stevioside as the principal components products and infant formulas, at levels determined by good
manufacturing practice, as well as use as a table top sweetener

000512 Rebaudioside M puri fi ed from the leaves of Rebaudioside M ≥ 95% Rebaudioside M Leaves of S. rebaudiana General purpose sweetener in foods, excluding meat and poultry 380
Stevia rebaudiana ( Bertoni) Bertoni ≥ 97% Steviol glycosides products and infant formulas, at levels determined by good
manufacturing practice, as well as use as a table top sweetener

000516 Steviol glycosides with rebaudioside A and SG-RS ≥ 99.5% Steviol glycosides Leaves of S. rebaudiana General purpose sweetener in foods, excluding meat and poultry 200a
stevioside as the principal components products and infant formulas, at levels determined by good
manufacturing practice, as well as use as a table top sweetener

000536 Rebaudioside C puri fi ed from the leaves of Rebaudioside C Preparation 1: ≥ 95% Rebaudioside C Leaves of S. rebaudiana General purpose sweetener in blends with rebaudioside A at levels of 10 40-45(140-230 as part of a blend
Stevia rebaudiana ( Bertoni) Bertoni Preparation 2: ≥ 95% steviol glycosides to 50% rebaudioside C, in foods excluding meat and poultry products with rebaudioside
with ≥ 80% rebaudioside C and infant formula, at levels determined by good manufacturing A)
practices, as well as use as a table top sweetener

000548 Rebaudioside D puri fi ed from the leaves of Rebaudioside D ≥ 95% Rebaudioside D Leaves of S. rebaudiana General purpose sweetener in foods, excluding meat and poultry 230
Stevia rebaudiana ( Bertoni) Bertoni products and infant formulas, at levels determined by good
manufacturing practice, as well as use as a table top sweetener

137
000555 Puri fi ed steviol glycosides with rebaudioside A SG-R > 95% Steviol glycosides Leaves of S. rebaudiana General purpose sweetener in foods, excluding meat and poultry 235
as the principal component > 60% Rebaudioside A products and infant formulas, at levels determined by good
manufacturing practice, as well as use as a table top sweetener

000607 Enzyme-modi fi ed steviol glycosides EMSG ≥ 80% steviol glycosides ( ≥ Enzyme treatment of steviol glycosides Flavor modi fi er in foods, excluding infant formula and products under 60-125
95% steviol glycosides in from the leaves of S. rebaudiana jurisdiction of the USDA, at a maximum level of 600 mg/kg in food and
production intermediate) 1500 mg/kg in chewing gum

000619 Puri fi ed steviol glycosides SGs > 95% Steviol glycosides Leaves of S. rebaudiana General purpose sweetener in foods, excluding meat and poultry 200-350
products and infant formulas, at levels determined by good
manufacturing practice, as well as use as a table top sweetener

000626 Puri fi ed steviol glycosides from Saccharomyces SGs > 95% Steviol glycosides Saccharomyces cerevisiae engineered General purpose sweetener in foods, excluding meat and poultry 200
cerevisiae for production of steviol glycosides products and infant formulas, at levels determined by good
manufacturing practice, as well as use as a table top sweetener

000632 Puri fi ed rebaudioside A from Yarrowia Rebaudioside A ≥ 95% Rebaudioside A Yarrowia lipolytica engineered for production General purpose sweetener in foods, excluding meat and poultry 200-300
lipolytica of steviol glycosides products and infant formulas, at levels determined by good
manufacturing practice, as well as use as a table top sweetener

000638 Rebaudioside A puri fi ed from the leaves of Rebaudioside A ≥ 97% Rebaudioside A Leaves of S. rebaudiana General purpose sweetener in foods, excluding meat and poultry 200-300
Stevia rebaudiana ( Bertoni) Bertoni products and infant formulas, at levels determined by good
manufacturing practice, as well as use as a table top sweetener

000656 Enzyme-modi fi ed steviol glycosides EMSG > 95% Steviol glycosides Enzyme treatment of steviol glycosides General purpose sweetener in foods, excluding meat and poultry 130
Makanan dan Kimia Toksikologi 122 (2018) 132-142

from the leaves of S. rebaudiana products and infant formulas, at levels determined by good
manufacturing practice, as well as use as a table top sweetener

( continued on next page)

 Table 1 ( continued)

GRN Names in Response Letter Abbreviated Names in Speci fi ed Steviol Glycoside Content Source Intended Use Sweetness Intensity (times
JD Perrier et al.

Response Letter (Dried Weight) that of sucrose)

000662 Enzyme-modi fi ed steviol glycosides EMSG > 95% Steviol glycosides Enzyme treatment of steviol glycosides General purpose sweetener in foods, excluding meat and poultry 167
from the leaves of S. rebaudiana products and infant formulas, at levels determined by good
manufacturing practice, as well as use as a table top sweetener

000667 Rebaudioside M Rebaudioside M ≥ 95% Rebaudioside M Enzyme treatment of steviol glycosides General purpose sweetener in foods, excluding meat and poultry 200
from the leaves of S. rebaudiana products and infant formulas, at levels determined by good
manufacturing practice, as well as use as a table top sweetener

000702 Steviol glycosides puri fi ed from the leaves of SG-R ≥ 95% - ≥ 98% Steviol Leaves of S. rebaudiana General purpose sweetener in foods, excluding meat and poultry 200
Stevia rebaudiana ( Bertoni) Bertoni with rebaudioside A glycosides products and infant formulas, at levels determined by good
as the principal component ≥ 60% - ≥ 98% Rebaudioside A manufacturing practice, as well as use as a table top sweetener

000715 Rebaudioside D obtained by enzyme treatment Rebaudioside D ≥ 95% Rebaudioside D Enzyme treatment of steviol glycosides General purpose sweetener in foods, excluding meat and poultry 202
of steviol glycosides puri fi ed from the leaves of from the leaves of S. rebaudiana products and infant formulas, at levels determined by good
Stevia rebaudiana ( Bertoni) Bertoni manufacturing practice, as well as use as a table top sweetener

000733 Steviol glycosides with rebaudioside A and SG-RS > 95% Steviol glycosides Leaves of S. rebaudiana General purpose sweetener in foods, excluding meat and poultry 280-320
stevioside as the principal components products and infant formulas, at levels determined by good
manufacturing practice, as well as use as a table top sweetener

000744 Steviol glycosides from Saccharomyces SGs > 95% Steviol glycosides Fermentation process using yeast cells from General purpose sweetener in foods, excluding meat and poultry 250
cerevisiae Saccharomyces cerevisiae products and infant formulas, at levels determined by good
manufacturing practice, as well as use as a table top sweetener

000745 Enzyme modi fi ed steviol glycosides obtained EMSG > 95% Steviol glycosides Enzyme treatment of steviol glycosides General purpose sweetener in foods, excluding meat and poultry 200

138
by enzyme treatment of steviol glycosides
puri fi ed from the leaves of Stevia rebaudiana
(Bertoni) Bertoni
000759 Rebaudioside M from Yarrowia lipolytica
from the leaves of S. rebaudiana products and infant formulas, at levels determined by good
manufacturing practice, as well as use as a table top sweetener
Rebaudioside M ≥ 95% Rebaudioside M Yarrowia lipolytica engineered for production Flavor and general purpose sweetener in foods, excluding meat and 200
of steviol glycosides poultry products and infant formulas, at levels determined by good
manufacturing practice, as well as use as a table top sweetener

000764 Rebaudioside D obtained by enzyme treatment Rebaudioside D ≥ 95% Rebaudioside D Produced via enzymatic conversion of > General purpose sweetener in foods, excluding meat and poultry 250
of rebaudioside A puri fi ed from the leaves of 95% rebaudioside A extracted from products and infant formulas, at levels determined by good
Stevia rebaudiana ( Bertoni) Bertoni stevia leaf manufacturing practice

000768 Puri fi ed steviol glycosides SGs > 95% Steviol glycosides Leaves of S. rebaudiana General purpose sweetener in foods, excluding meat and poultry 200-350
products and infant formulas, at levels determined by good
manufacturing practice, as well as use as a table top sweetener

000780 Rebaudioside M obtained by enzyme Rebaudioside M ≥ 95% Rebaudioside M Enzyme treatment of steviol glycosides General purpose sweetener in foods, excluding meat and poultry 208
modi fi cation of steviol glycosides puri fi ed from the leaves of Stevia from the leaves of S. rebaudiana products and infant formulas, at levels determined by good
rebaudiana ( Bertoni) Bertoni manufacturing practice
Makanan dan Kimia Toksikologi 122 (2018) 132-142
JD Perrier et al.
Gambar. 2. struktur molekul glikosida steviol.
4.1.2. glikosida steviol berasal dari modi enzim fi kation
• Enzim-modi fi ed steviol glikosida.
• Rebaudioside D diperoleh dengan perlakuan enzim glikosida steviol
4.1.3. glikosida steviol yang diperoleh fermentasi mikroba
• Puri fi ed rebaudioside A dari Yarrowia lipolytica
• Puri fi ed rebaudioside M dari Yarrowia lipolytica
• Puri fi ed steviol glikosida dari Saccharomyces cerevisiae
4.2. Identitas dan komposisi
Daun dari tanaman stevia mengandung glikosida steviol, sekelompok glikosida diterpen
manis-mencicipi, dengan variabel rasa pro fi les dan potensi manis. Daun Stevia mengandung
campuran kompleks glikosida steviol di di ff kenai konsentrasi yang dapat diekstrak dan diproses untuk
memperoleh bahan-kemurnian tinggi. Semua glikosida steviol berbagi aglycone steviol yang sama
dan di ff er sehubungan dengan jenis dan jumlah unit glikosida (misalnya, glukosa, rhamnose, xylose,
fruktosa, atau deoxyglucose) dan ketertiban ikatan (lihat Gambar. 2 ).
glikosida steviol individu dan campuran dari glikosida steviol yang dimaksudkan untuk digunakan
dalam makanan memiliki minimal 95% dari total glikosida steviol, atau dalam beberapa kasus
menengah manufaktur dapat memenuhi kriteria minimum ini dan kemudian mengalami proses
tambahan. Misalnya, dalam GRN 000.607, noti yang fi substansi ed mengandung ≥ 80% glikosida
steviol; Namun, perantara dalam proses manufaktur mengandung> 95% glikosida steviol dan
kemudian mengalami proses lebih lanjut yang menghasilkan produk yang ≥ 80% steviol glikosida dan ≤
20% dekstrin.
4.3. Metode pembuatan dan spesifik fi kation
Untuk saat ini, FDA menerima GRAS pemberitahuan untuk tiga kategori umum dari produk
stevia pemanis yang meliputi 1) sangat puri fi ed ekstrak dari daun tanaman stevia, 2) puri fi ekstrak ed
dari daun tanaman stevia yang kemudian Modi fi ed enzimatis, dan 3) steviol glikosida diisolasi dari
mikroorganisme rekayasa genetika untuk menghasilkan glikosida steviol.
Metode manufaktur untuk glikosida steviol melibatkan ekstraksi daun S. rebaudiana. Daun dapat
diekstraksi dalam air atau alkohol, dan ekstrak kemudian mengalami puri fi langkah kation
139
Makanan dan Kimia Toksikologi 122 (2018) 132-142
untuk mengisolasi glikosida steviol. Metode puri fi kation mungkin termasuk penggunaan fl occulant, fi filtrasi,
resin pertukaran ion, resin adsorpsi yang mempertahankan glikosida steviol, dan teknik rekristalisasi.
Metode untuk modi enzimatik fi kasi glikosida steviol dijelaskan dalam pemberitahuan GRAS,
seperti GRN 000.662, dan disebut sebagai enzim-modi fi ed steviol glikosida. Misalnya, modi yang fi kation
dijelaskan dalam GRN 000.662 melibatkan pengobatan glikosida steviol dengan glucotransferase
yang menghasilkan gugus glukosa tambahan konjugasi struktur induk steviol glikosida melalui α- ( 1 - 4)
hubungan dan fi produk akhir yang merupakan campuran dari glikosida steviol mengandung sampai
dua puluh gugus glukosa tambahan. Evaluasi keselamatan enzim-modi fi glikosida ed steviol
mencakup pertimbangan keselamatan enzim yang digunakan dan keselamatan sumber enzim. enzim
modi fi kasi glikosida steviol juga mencakup produksi tertentu fi glikosida c steviol yang biasanya
komponen kecil dari daun stevia. Misalnya, dalam GRN 000.715, strain ragi ( Pichia pastoris) yang
mengungkapkan GLUKOSILTRANSFERASE yang digunakan untuk mengkonversi rebaudioside A ke
rebaudioside D. ragi ini tumbuh dalam budaya, dipanen, dan dikombinasikan dengan puri sebuah fi ed
ekstrak daun stevia mengandung rebaudioside A. modi fi ed glikosida steviol kemudian dapat diisolasi
dengan puri fi metode kation mirip dengan yang dijelaskan di atas untuk glikosida steviol diekstrak dari
daun stevia.
Penggunaan metode bioteknologi untuk menghasilkan glikosida steviol merupakan
perkembangan baru. Puri fi ed glikosida steviol dapat diproduksi biosynthetically menggunakan strain
ragi direkayasa untuk mengekspresikan mereka. Dalam GRN 000.632, rebaudioside A diproduksi
menggunakan strain rekayasa genetika dari Yarrowia lipolytica yang mengekspresikan gen yang
terlibat dalam produksi glikosida steviol. Ragi tidak aktif dihapus, dan glikosida steviol terisolasi
menggunakan puri fi metode kation mirip dengan yang dijelaskan di atas untuk glikosida steviol
diekstrak dari daun stevia.
spesifik fi kation ditetapkan untuk de fi ne artikel perdagangan dan kriteria minimum yang
diperlukan untuk menunjukkan bahwa bahan ini cocok untuk digunakan dalam makanan. spesifik fi kation
dapat mencakup deskripsi dari metodologi analitis atau kutipan untuk metode diterbitkan.
Metode-metode analisis yang digunakan untuk mengkarakterisasi dan con fi rm identitas, kemurnian,
dan kualitas bahan makanan, dan mungkin termasuk sifat fisik dan kimia dan batas konstituen
individu, kontaminan lingkungan yang potensial, dan reagen sisa atau pelarut yang digunakan dalam
pembuatannya. spesifik fi kation untuk bahan dapat didirikan oleh produsen atau mungkin sesuai
dengan yang ditetapkan sebelumnya oleh badan pengawas atau organisasi perdagangan. spesifik fi kation
untuk glikosida steviol dari S. rebaudiana sebelumnya ditujukan pada 63 rd
(2004), ke-68 (2007) ke-69 (2008), ke-73 (2010), dan 82 (2016) FAO / WHO Joint Committee Expert
on Food Additives (JECFA) pertemuan. -63 JECFA didirikan persyaratan sementara untuk isi
menyimpulkan stevioside dan rebaudioside A minimal 70% dengan kemurnian minimal 95% dari total
glikosida steviol, spesifik fi Cally, rebaudioside A, stevioside, rebaudioside C dan dulcoside A. ke-68
JECFA kemudian membentuk identifikasi fi kation spesifik fi kation yang rebaudioside A atau stevioside
menjadi komponen utama dari produk dan spesifik fi ed kemurnian 95% untuk total tujuh glikosida
steviol. de The fi Definisi dari glikosida steviol dan kemurnian tertentu fi kasi 95% diperluas di JECFA-73
untuk menyertakan dua glikosida steviol tambahan untuk total sembilan. de The fi Definisi itu lebih
diperluas pada pertemuan ke-82 dari JECFA pada tahun 2016 untuk menyertakan campuran
senyawa yang berasal dari daun S. rebaudiana yang berisi tulang punggung steviol terkonjugasi ke
sejumlah atau kombinasi dari gugus gula utama dalam salah satu orientasi yang terjadi di daun S.
rebaudiana termasuk glukosa, rhamnose, xylose, fruktosa, dan deoxyglucose. spesifik fi kation
termasuk isi minimum total glikosida steviol ( ≥ 95%) dan batas untuk kelembaban ( ≤ 6%), abu ( ≤ 1%),
timbal ( ≤ 1mg / kg), arsen ( ≤ 1mg / kg), etanol ( ≤ 0,5%), dan metanol ( ≤ 0,02%). Pada pertemuan
ke-82, JECFA juga mendirikan tertentu fi kation untuk rebaudioside A dari beberapa donor gen
diekspresikan dalam Y. lipolytica yang mencakup minimal 95% rebaudioside A.
JD Perrier et al.
4.4. tujuan penggunaan dan teknis e ff dll
Tujuan penggunaan utama dari glikosida steviol adalah sebagai pemanis dalam makanan,
termasuk susu formula dan produk daging dan ayam, pada tingkat yang ditentukan oleh
praktek-praktek manufaktur yang baik, dan sebagai komponen pemanis meja. Namun, pada bulan
Juni 2018, FDA menerima pemberitahuan GRAS (GRN 000.790) yang mencakup penggunaan
glikosida steviol di daging sapi dan babi dendeng. Untuk makanan, seperti daging dan produk
unggas, yang jatuh di bawah kewenangan Departemen Pertanian AS, Keamanan Pangan dan
Inspeksi Service (USDA / FSIS), selama evaluasi dari pemberitahuan GRAS, koordinat FDA dengan
USDA / FSIS. Karena manisnya intens glikosida steviol, tingkat penggunaan dalam makanan adalah
membatasi diri. Oleh karena itu, tingkat penggunaan aktual dari bahan steviol glikosida dalam
makanan yang diberikan ditentukan oleh rasa yang diinginkan dan intensitas manisnya relatif.
4.5. paparan diet
penilaian risiko tujuan penggunaan zat dalam makanan termasuk perkiraan eksposur diet
kemungkinan mereka untuk konsumen. Renwick (2008) menjelaskan metode yang didasarkan pada
substitusi pemanis untuk memperkirakan eksposur diet untuk rebaudioside A. Metode ini
menggunakan data tentang konsumsi pemanis intensitas tinggi dan manis relatif mereka diterbitkan
dibandingkan dengan sukrosa. Paparan formulasi pemanis yang diberikan dihitung berdasarkan
intensitas manisnya relatif (yaitu, tingkat penggunaan yang diperlukan untuk mencapai tingkat yang
sama manis) dan asumsi yang menggantikan penggunaan pemanis lainnya. Misalnya, rebaudioside
A dilaporkan dua kali semanis glikosida steviol dicampur, dan intensitasnya bisa berkisar hingga 400
atau lebih kali dari sukrosa. Sebaliknya, enzim-modi fi ed steviol glikosida mungkin 100 kali lebih manis
dari sukrosa. Intensitas manisnya relatif glikosida steviol individu atau campuran akan menentukan
konsentrasi yang digunakan dalam makanan, dan kemudian, paparan zat ini oleh konsumen. Metode
dipublikasikan Renwick untuk estimasi paparan rebaudioside A umumnya dimanfaatkan oleh GRAS
noti fi ers untuk estimasi paparan pemanis stevia yang diturunkan lainnya. Karena semua glikosida
steviol diharapkan akan akhirnya dimetabolisme untuk steviol, perkiraan paparan steviol glikosida
yang dinormalisasi dengan konversi ke steviol setara membandingkan dengan asupan harian yang
dapat diterima (ADI) untuk steviol. Konversi ke steviol setara didasarkan pada rasio berat molekul
glikosida steviol individu untuk steviol. Misalnya, steviol setara dihitung dari paparan diperkirakan
untuk rebaudioside A menggunakan faktor 0,33, yang didasarkan pada rasio berat badan mereka
perkiraan molekul 318: 967. Renwick memperkirakan keseluruhan eksposur rata-rata dan atas
persentil ke rebaudioside A menjadi
0,4 dan 1.1mg / kg berat badan (bb) / hari di steviol sebuah Setara dasar, masing-masing, dan
tertinggi paparan dihitung menjadi 1.7mg / kg bb / hari untuk anak-anak di persentil atas.
Laporan dari pertemuan ke-82 JECFA ( WHO, 2016 ) Mengandung
Ringkasan dari penilaian paparan diet dianggap oleh panitia dan termasuk yang dilakukan oleh Otoritas
Keamanan Makanan Eropa (2011 . 2015 ), Standar Makanan Australia Selandia Baru (2008) , Serta
penelitian yang diterbitkan lain dari paparan diet untuk steviol glikosida, termasuk Renwick, 2008 .
Berdasarkan perkiraan per kapita Konsumsi gula diet dan substitusi dengan glikosida steviol,
eksposur ke steviol glikosida bagi penduduk di di ff daerah erent dunia dilaporkan di kisaran 0,5 - 7.2mg
/ kg bb / hari, dinyatakan sebagai steviol setara. JECFA mencatat bahwa metode berdasarkan
substitusi gula cenderung melebih-lebihkan paparan diet karena semua gula dalam makanan tidak
akan digantikan oleh pemanis intens dan pemanis intens lainnya yang digunakan di pasar. JECFA
menyatakan bahwa perkiraan paparan diet untuk steviol glikosida untuk populasi Eropa, Australia dan
Selandia Baru yang berdasarkan data konsumsi pangan dan tingkat penggunaan maksimum
sebanding, dan mengakibatkan perkiraan eksposur untuk anak-anak sampai
4.4mg / kg bb / hari, dinyatakan sebagai steviol setara.
140
Makanan dan Kimia Toksikologi 122 (2018) 132-142
4.6. Keamanan
Keamanan glikosida steviol secara luas dipelajari dan dilaporkan dalam ilmiah fi c sastra. Semua
glikosida steviol berbagi struktur kimia steviol aglycone yang sama dan diharapkan untuk menjalani
nasib metabolik yang sama setelah konsumsi. Pada manusia, glikosida steviol tidak dihidrolisis oleh
enzim pencernaan dari saluran pencernaan bagian atas dan tidak diserap melalui bagian atas saluran
pencernaan ( Geuns et al., 2007 ). glikosida steviol memasuki usus utuh, di mana mereka tunduk pada
degradasi mikroba oleh bakteri dari Bacteroidaceae keluarga, mengakibatkan pelepasan steviol ( Renwick
dan Tarka 2008 ).
Beberapa studi toksikologi pada hewan bersama dengan studi klinis pada manusia dilakukan
pada kemurnian tinggi ( ≥ 95%) glikosida steviol. Dalam review yang dipublikasikan, Carakostas et al.
(2008) membahas penggunaan sejarah dan membahas masalah-masalah keamanan yang berkaitan
dengan steviol pemanis glikosida yang dilontarkan oleh beberapa studi yang diterbitkan. Peneliti
melakukan studi klinis pada pasien hipertensi melaporkan bahwa pemberian stevioside di 1500mg /
hari mengakibatkan signi fi pengurangan tidak bisa tekanan darah ( Chan et al., 2000 ; Hsieh et al.,
2003 ). Dalam sebuah studi akut, peneliti menemukan penurunan kadar glukosa dan glukagon pada
pasien dengan diabetes melitus tipe 2 setelah asupan 1 g stevioside dengan makanan tes ( Gregersen
et al., 2004 ). Hasil penelitian tersebut mengangkat pertanyaan apakah glikosida steviol dapat
menimbulkan merugikan e ff Ects di konsumen dengan normal tekanan darah rendah atau diabetes
tipe 2. Namun, studi tambahan pada manusia yang meneliti konsumsi jangka panjang glikosida
steviol tidak melaporkan farmakologis e ff Ects pada tekanan darah atau homeostasis glukosa ( Maki et
al., 2008a . 2008b ;
Barriocanal et al., 2008 ; Jeppeson et al., 2006 ). Dalam sebuah penelitian yang lebih baru, peneliti
menyimpulkan bahwa rebaudioside A dan erythritol tidak mengubah homeostasis glukosa pada
konsumen dengan intoleransi glukosa ( Shin et al., 2016 ). Keamanan glikosida steviol dibahas dalam
review yang diterbitkan oleh Abdel-Rahman et al. (2011 ). Ulasan ini termasuk diskusi tentang studi
toksikologi sebelumnya pada tikus yang diberikan mentah atau sebagian puri fi ed ekstrak daun stevia
dan mengakibatkan merugikan reproduksi, ginjal, dan jantung e ff CFU. Para penulis juga membahas
lebih toksikologi baru-baru ini in vivo Studi pada hewan model serta studi klinis pada manusia
menggunakan produk yang mengandung> 95% glikosida steviol. Hasil studi toksisitas kronis pada
tikus dengan puri fi ed stevioside atau rebaudioside A menunjukkan tidak ada yang merugikan e ff CFU.
Selain itu, studi klinis pada manusia untuk mengevaluasi potensi farmakologi e ff Ects dari
rebaudioside A dan stevioside pada tekanan darah dan kadar glukosa darah menunjukkan tidak ada
yang merugikan e ff CFU.
JECFA, dalam review-nya glikosida steviol pada pertemuan ke-69 di
2008, mendirikan ADI dari 4 mg / kg bb / hari secara steviol setara. JECFA rea FFI rmed ADI ini pada
pertemuan ke-82 ( JECFA, 2016 ). Berdasarkan jalur metabolisme yang sama untuk semua glikosida
steviol pada tikus dan manusia, JECFA berdasarkan nya ADI dari 4 mg / kg bb pada
no-observedadverse-e ff Tingkat dll dari 970mg / kg bb / hari (383mg / kg bb / hari sebagai steviol) dari
sebuah studi 2 tahun pada tikus ( Toyoda et al., 1997 ) Dan faktor keamanan 100 untuk
memperhitungkan intra dan inter-spesies di ff perbedaan-perbedaan. Demikian pula,
FSANZ (2008) dan EFSA (2011) kedua membentuk ADI untuk glikosida steviol dari 4 mg / kg bb /
hari (dinyatakan sebagai steviol setara).
4.7. Teknologi baru
Beberapa produsen sedang mengembangkan metode alternatif untuk menghasilkan glikosida
steviol yang tidak melibatkan ekstraksi tanaman stevia. Sekarang ada metode bioteknologi produksi
yang memanfaatkan teknologi fermentasi tanpa perlu menggunakan daun stevia dalam proses
manufaktur. Metode ini dapat membantu untuk memenuhi permintaan untuk glikosida steviol,
terutama yang konstituen minor dari tanaman stevia (misalnya, rebaudioside M). Contoh metode
alternatif produksi termasuk penggunaan spesies ragi rekayasa genetika, yaitu, S. cerevisiae dan Y.
lipolytica, bahwa gen ekspres yang terlibat dalam biosintesis glikosida steviol. strain tersebut
JD Perrier et al.
ragi berasal dari garis orang tua yang dikenal non-patogenik dan non-toksigenik, dan ditandai dengan
baik. ragi yang tumbuh dengan fermentasi dan kemudian dipisahkan dari kaldu fermentasi yang
mengandung glikosida steviol disintesis oleh ragi. Glikosida steviol kemudian diisolasi dari kaldu
menggunakan puri fi metode kation mirip dengan yang digunakan untuk pengobatan ekstrak daun
stevia. teknik fermentasi bioteknologi digunakan untuk menghasilkan glikosida steviol memiliki potensi
untuk produksi scalable yang melampaui keberlanjutan pertanian ( Philippe et al., 2014 ).
5. Diskusi dan kesimpulan
FDA terus mengevaluasi pemberitahuan GRAS untuk penggunaan glikosida steviol dalam
makanan. Poin penting adalah bahwa GRAS pemberitahuan tidak produk-spesifik fi lisensi c atau
pendaftaran untuk produsen. Penggunaan puri sebuah fi ed steviol glikosida ditutupi oleh
pemberitahuan GRAS yang ada jika memiliki identitas yang sama, metode pembuatan, spesifik fi kation,
penggunaan yang dimaksudkan, dan paparan makanan. sementara “ tidak ada pertanyaan ” Surat
tanggapan dari FDA dapat digunakan sebagai dokumentasi untuk memungkinkan untuk impor
glikosida steviol, bentuk lain dari dokumentasi yang menunjukkan kesesuaian dengan kemurnian
dapat digunakan. Penggunaan metode baru atau signi fi Perubahan tidak bisa dalam pembuatan atau
sumber glikosida steviol, misalnya, merupakan dasar yang tepat untuk pengajuan ke GRAS Noti fi Program
kation.
Kami telah dijelaskan praktik FDA untuk mengevaluasi pemberitahuan GRAS terkait stevia.
Sebuah pemberitahuan GRAS untuk penggunaan glikosida steviol diperiksa untuk memastikan data
dan informasi yang menunjukkan bahwa penggunaan yang dimaksudkan aman dan bahwa kriteria
GRAS - untuk kedua ketersediaan umum dan penerimaan umum - adalah satis fi ed (21 CFR 170,30).
Kriteria GRAS mengharuskan setiap kesimpulan status GRAS didasarkan pada pengetahuan umum
di seluruh ilmiah ahli fi c masyarakat berpengetahuan tentang keamanan zat langsung atau tidak
langsung ditambahkan ke makanan, dan bahwa ada kepastian yang memadai bahwa substansi yang
tidak berbahaya di bawah kondisi penggunaan yang dimaksudkan (lihat 21 CFR 170,30 (a)). Dalam
kasus tertentu kesimpulan status GRAS melalui ilmiah fi prosedur c, kriteria GRAS mengharuskan
kesimpulan status GRAS didasarkan pada data, informasi, dan metode yang umumnya tersedia (lihat
21 CFR 170,30 (b)). Identitas, komposisi, dan spesifik fi kation dari bahan yang dinilai untuk
memastikan itu adalah food grade dan su FFI sien untuk mengevaluasi penggunaan yang aman.
spesifik fi kation untuk noti yang fi substansi ed harus memenuhi atau melebihi didirikan spesifik fi kation
(misalnya, JECFA). Metode manufaktur dievaluasi untuk memastikan bahwa sumber, reagen, alat
bantu pengolahan, dan bahan dan metode yang digunakan adalah su FFI sien dijelaskan untuk
mengidentifikasi potensi bahaya dan memastikan kepatuhan terhadap peraturan yang sesuai. proses
manufaktur yang melibatkan biosintesis glikosida steviol oleh mikroorganisme atau penggunaan
produk enzim mikroba yang diturunkan dievaluasi untuk memastikan bahwa mereka aman untuk
digunakan dalam makanan. Berkenaan dengan keselamatan, noti fi ers meliputi data dan informasi
tentang metabolisme glikosida steviol dan kesamaan metabolisme untuk semua glikosida steviol
pada tikus dan manusia. Perkiraan paparan diet untuk bahan stevia yang diturunkan berada dalam
JECFA ini didirikan ADI dari 4 mg / kg bb / hari secara steviol setara. Akhirnya, FDA menganggap
bahasa yang relevan dan bimbingan, termasuk penggunaan FDA nama bahan dan penggunaan
makanan dengan standar identitas. FDA menyelesaikan proses evaluasi dan mengeluarkan surat
tanggapan atas noti yang fi er. Kesimpulannya, pengembangan dan diversi fi kasi glikosida steviol
bahan melalui penggunaan teknologi baru terus menarik di FDA GRAS Noti fi Program kation.
Penolakan
Artikel re ini fl ECTS pandangan penulis dan tidak dapat dianggap mewakili pandangan atau
kebijakan FDA.
Pengakuan
Para penulis ingin mengakui individu berikut untuk
141
Makanan dan Kimia Toksikologi 122 (2018) 132-142
diskusi mereka membantu dan tinjauan kritis dari draft naskah: Dr. Paulette M. Gaynor, Dr. Ronald F.
Chanderbhan, dan Dr. Negash Belay.
dokumen transparansi
Dokumen transparansi terkait dengan artikel ini dapat ditemukan secara online di
https://doi.org/10.1016/j.fct.2018.09.062 .
Referensi
Abdel-Rahman, A., Anyangwe, N., Carlacci, L., Casper, S., Danam, RP, Enongene, E.,
Erives, G., Fabricant, D., Gudi, R., Hilmas, CJ, Hines, F., Howard, P., Levy, D., Lin,
Y., Moore, RJ, Pfeiler, E., Thurmond, TS, Turujman, S., Walker, NJ, 2011. keselamatan dan regulasi produk
alami yang digunakan sebagai makanan dan bahan makanan. Toxicol. Sci. 123 (2), 333 - 348 .
Barriocanal, L., Palacios, M., Benitez, M., Benitez, S., Jimenez, JT, Jimenez, N., Rojas, V.,
2008. kurangnya semu dari farmakologis e ff dll glikosida steviol digunakan sebagai pemanis pada manusia.
Sebuah studi pilot eksposur berulang pada beberapa individu normotensif dan hipotensi dan Tipe 1 dan Tipe 2
penderita diabetes. Regul. Toxicol. Pharmacol. 51 (1), 37 - 41 .
Carakostas, MC, Curr, LL, Boileau, AC, Brusick, DJ, 2008. Ikhtisar: sejarah,
Fungsi teknis dan keamanan rebaudioside A, glikosida steviol alami untuk digunakan dalam makanan dan
minuman. Makanan Chem. Toxicol. 46 (7), S1 - S10. Suplemen.
http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0278691508002342 .
Chan, P., Tomlinson, B., Chen, Y., Liu, J., Hsieh, M., Cheng, J., 2000. Sebuah double-blind
studi plasebo-terkontrol e ff efektivitas dan tolerabilitas stevioside oral pada hipertensi manusia. Br. J. Clin.
Pharmacol. 50, 215 - 220 .
Keamanan Makanan Eropa Authority, 2011. Pernyataan EFSA penilaian eksposur Revisi untuk
glikosida steviol untuk penggunaan diusulkan sebagai aditif makanan atas permintaan dari Komisi Eropa,
Pertanyaan No. EFSA- Q-2.010-01.214, yang diterbitkan pada 13 Januari 2011. EFSA J. 9 (1), 1 - 19 1972 .
Eropa Otoritas Keamanan Makanan, 2015. Ilmiah fi pendapat c tentang keamanan perpanjangan
Penggunaan glikosida steviol (E 960) sebagai aditif makanan. EFSA J. 13 (6), 4146. https: // efsa.
onlinelibrary.wiley.com/doi/10.2903/j.efsa.2015.4146 .
FDA, 2013. Sebuah Panduan label makanan: pedoman untuk industri. https://www.fda.gov/
download / Makanan / GuidanceRegulation / GuidanceDocumentsRegulatoryInformation / UCM265446.pdf ,
Tanggal Diakses: 16 Juli 2018.
FDA, 2014. Bimbingan untuk industri: menilai e ff Ects dari signi fi manufaktur tidak bisa
perubahan proses, termasuk teknologi yang sedang berkembang, tentang keamanan dan status peraturan
bahan makanan dan zat kontak makanan, termasuk bahan makanan yang warna aditif. https://www.fda.gov/Food/GuidanceRegula
GuidanceDocumentsRegulatoryInformation / ucm300661.htm , Tanggal Diakses: 27 Juni 2018.
FDA, 2017. Bimbingan untuk industri: kerangka peraturan untuk zat dimaksudkan untuk digunakan
dalam makanan manusia atau makanan hewan di dasar umumnya diakui sebagai aman (GRAS) penyediaan
makanan federal, Obat, dan UU kosmetik. https://www.fda.gov/Food/ GuidanceRegulation /
GuidanceDocumentsRegulatoryInformation / ucm583858.htm , Tanggal Diakses: 27 Jun 2018. FDA, 2018. GRAS
persediaan pemberitahuan. https://www.accessdata.fda.gov/scripts/fdcc/?set=
GRASNotices & sort = GRN_No & order = DESC & startrow = 1 & type = dasar & mencari = Stevi , Tanggal
Diakses: 3 April 2018.
Federal Register, 2010. Federal Register / Vol. 75, No. 248 / FDA, 28 Desember 2010 /
Aturan yang diusulkan, Zat Umumnya Diakui sebagai Aman; Pembukaan kembali dari Periode Komentar. pp. 32.632 .
Federal Register, 2016. Federal Register / Vol. 81, No. 159 / FDA, 17 Agustus 2016 / Aturan
dan Peraturan, Zat Umumnya Diakui sebagai Aman. pp. 54.960 .
Standar Makanan, Australia Selandia Baru (FSANZ), 2008. laporan penilaian akhir appli
kation A.540. Dalam: steviol Glikosida Pemanis sebagai Intens. 6 Agustus 2008 .
Geuns, JMC, Buyse, J., Vankeirsbilck, A., Temme, EHM, 2007. Metabolisme Ste-
vioside oleh subyek sehat. Exp. Biol. Med. 232 (1), 164 - 173 .
Gregersen, S., Jeppeseon, PB, Holst, JJ, Hermansen, K., 2004. antihiperglikemik-upaya
fects stevioside tipe 2 mata pelajaran diabetes. Metabolisme 53, 73 - 76 .
Hsieh, MH, Chan, P., Sue, YM, Liu, JC, Liang, TH, Huang, TY, Tomlinson, B., Chow,
MS, Kao, PF, Chen, YJ, 2003. E FFI keampuhan dan tolerabilitas stevioside oral pada pasien dengan hipertensi
esensial ringan: dua tahun, acak, terkontrol placebo. Clin. Ther. 25, 2797 - 2808 .
Jain, P., Kachhwaha, S., Kothari, SL, 2014. Bioteknologi dan rekayasa metabolik
Stevia rebaudiana ( Bert) Bertoni:. Perspektif dan kemungkinan. Int. J. Hidup Sci. Biotechnol. Pharma
Res. 3 (3), 1 - 23 .
Jeppeson, PB, Barriocanal, L., Meyer, MT, Palacios, M., Canete, F., Benitez, S., Logwin,
S., Schupmann, Y., Benitez, G., Jimenez, JT 2006. E FFI keampuhan dan tolerabilitas stevioside oral pada pasien
dengan diabetes tipe 2: jangka panjang acak, studi double-buta, terkontrol plasebo. Diabetologia 49 (S1), 511 - 512
.
Komite Bersama Eropa pada Aditif Makanan, 82 JECFA, 2016. FAO JECFA WHO
laporan teknikal. http://apps.who.int/food-additives-contaminants-jecfa-database/ chemical.aspx? chemID =
267 .
Maki, KC, Curry, LL, Carakostas, MC, Tarks, SM, Reeves, MS, Farmer, MV,
McKenney, JM, Toth, PD, Schwartz, SL, Lubin, BC, Dicklin, MR, Boileau, AC, Bisognano, JD, 2008a. The
hemodinamik e ff Ects dari rebaudioside A pada orang dewasa sehat dengan tekanan darah normal dan
rendah-normal. Makanan Chem. Toxicol. 46 (7S), S40 - S46 .
Maki, KC, Curry, LL, Reeves, MS, Toth, PD, McKenney, JM, Farmer, MV, Schwartz,
SL, Lubin, BC, Boileau, AC, Dicklin, MR, Carakostas, MC, Tarka, SM, 2008b. konsumsi kronis rebaudioside A,
glikosida steviol, pada pria dan wanita dengan
JD Perrier et al.
tipe 2 diabetes mellitus. Makanan Chem. Toxicol. 46 (7S), S47 - S53 .
Philippe, RN, De Mey, M., Anderson, J., Ajikumar, PK, 2014. Bioteknologi pro
duksi pemanis nol kalori alami. Curr. Opin. Biotechnol. 26, 155 - 161 .
Renwick, AG, Tarka, SM, 2008. Mikroba hidrolisis glikosida steviol. Makanan Chem.
Toxicol. 46 (7, Suppl. L), S70 - S74 .
Renwick, AG, 2008. Penggunaan metode substitusi pemanis untuk memprediksi mantan diet
posures untuk intens pemanis rebaudioside A. Food Chem. Toxicol. 46, S61 - S69 .
Shin, DH, Lee, JH, Kang, MS, Kim, TH, Jeong, SJ, Kim, CH, Kim, SS, Kim, IJ,
142
Makanan dan Kimia Toksikologi 122 (2018) 132-142
2016. Glikemik e ff Ects dari rebaudioside A dan Erythritol pada orang dengan intoleransi glukosa. Diabetes
Metabol. 40 (4), 283 - 289 .
Toyoda, K., Shoda, T., Uneyama, K., Takahashi, M., studi 1997. Karsinogenisitas dari β-
siklodekstrin pada tikus F344. Makanan Chem. Toxicol. 35, 331 - 336 .
Organisasi Kesehatan Dunia, 2016. Evaluasi Aditif Makanan tertentu: Delapan puluh detik
Laporan FAO / WHO Komite Bersama Ahli Food Additives. WHO laporan teknis seri tidak ada. 1000 .