Laporan-2018-Loka Litbang Biomedis NAD-Gambaran Penderita T PDF
Laporan-2018-Loka Litbang Biomedis NAD-Gambaran Penderita T PDF
Penyusun :
Abidah Nur, S. Gz
Tim Balai Litbang Kesehatan Aceh
i
SK PENELITIAN
ii
iii
iv
v
vi
PERSETUJUAN ETIK
vii
viii
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur ke hadirat ALLAH SWT karena berkat rahmat dan hidayah-Nya
laporan penelitian “GAMBARAN PENDERITA TUBERKULOSIS PARU DI
KOTA BANDA ACEH DAN KABUPATEN ACEH BESAR” Tahun Anggaran 2018
dapat diselesaikan dengan baik.
Laporan ini memuat informasi tentang gambaran penderita tuberkulosis paru
beserta penyakit penyertanya dari pemeriksaan sampel darah dan dahak. Informasi yang
didapatkan dari sampel dahak adalah Mycobacterium tuberculosis yang diperiksa secara
mikroskopis, PCR dan kultur serta resistensi OAT, dan sampel darah untuk pemeriksaan
HbA1c dan imunitas. Sampel dahak juga disimpan dalam bentuk BBT (Bahan Biologis
Tersimpan) di BBLK (Balai Besar Laboratorium Kesehatan) Jakarta untuk kebutuhan
penelitian lanjutan terkait dengan genetik yang direncanakan di Tahun 2019.
Ucapan terimakasih kepada seluruh anggota tim yang telah bekerja dengan
sungguh-sungguh menyelesaikan kegiatan penelitian ini. Semoga ALLAH SWT
senantiasa melimpahkan rahmat dan petunjukNya serta kekuatan kepada kita semua
dalam melaksanakan penelitian dan pengembangan kesehatan di masa-masa yang akan
datang.
Abidah Nur, S. Gz
ix
RINGKASAN EKSEKUTIF
x
tidak ada penyakit penyerta. Perilaku tentang tuberkulosis adalah baik (87%) jika
dibanding dengan pengetahuan dan sikap yang masih kurang. Kondisi lingkungan fisik
sebagian besar sudah baik, kondisi rumah di dominasi oleh lantai semen, dengan
dinding tembok dan plafon sebagian besar berasal dari triplek (kayu), keadaan
lingkungan sekitar tidak kumuh, dan penggunaan gas untuk memasak. Sebagian besar
hasil pemeriksaan negatif baik secara mikroskopis (80,9%) dan kultur (83,6%).
Pemeriksaan PCR sebagian besar hasilnya positif untuk gen Gen 16s rRNA (81,2%).
Monoresisten OAT paling tinggi diantara resisten OAT yaitu sampai 47,3% dan
isoniazid (INH) adalah yang paling tinggi resistennya dibanding OAT lainnya (26,3%).
Poliresisten terhadap dua OAT yaitu streptomisin dan isoniazid (INH) sebesar 10,5%.
Sebanyak 28,2% penderita TB disertai DM. Untuk pemeriksaan imunitas dari 50 sampel
TB-DM dan 56 sampel TB tanpa DM, didapatkan konsentrasi IFN-γ lebih tinggi pada
kelompok TB DM, sedangkan pada kelompok TB tanpa DM konsentrasi TNF-α
cenderung lebih tinggi. Tingkat kesembuhan pasien tergolong tinggi berdasarkan
pemeriksaan mikroskopis dan kultur. Masyarakat perlu ditingkatkan edukasi tentang
pentingnya pencegahan TB paru, memiliki motivasi yang tinggi untuk memperoleh
pengetahuan tentang TB paru, patuh dalam minum obat sehingga akan lebih baik dalam
penatalaksanaan penyakit ini. Pemerintah perlu memantau penyedia layanan kesehatan
dalam pengobatan TB paru dan menyediakan kualitas obat yang adekuat. Selain itu
pengelola program TB paru perlu terus memantau kepatuhan minum obat pasien
melalui PMO secara berkelanjutan dan terlaporkan setiap hari.
xi
ABSTRAK
xii
terhadap dua OAT yaitu streptomisin dan isoniazid (INH). Penderita TB disertai
DM didapatkan 28,2%. Konsentrasi IFN-γ lebih tinggi pada kelompok TB DM,
sedangkan pada kelompok TB tanpa DM konsentrasi TNF alfa cenderung lebih
tinggi. Tingkat kesembuhan pasien tergolong tinggi berdasarkan pemeriksaan
mikroskopis dan kultur.
Kata Kunci : Mycobacterium tuberculosis, Diabetes mellitus, imunitas
xiii
DAFTAR ISI
Halaman
SK PENELITIAN ................................................................................................. ii
LEMBAR PERSETUJUAN ETIK ....................................................................... vii
LEMBAR PERSETUJUAN ATASAN ................................................................. viii
KATA PENGANTAR .......................................................................................... ix
RINGKASAN EKSEKUTIF ................................................................................. x
ABSTRAK ........................................................................................................... xii
DAFTAR ISI ......................................................................................................... xiv
DAFTAR TABEL.................................................................................................. xvii
DAFTAR BAGAN………………………………………………………………… xviii
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................. xix
DAFTAR LAMPIRAN .......................................................................................... xx
BAB I PENDAHULUAN ..................................................................................... 1
A Latar Belakang ...................................................................................... 1
B Perumusan Masalah .............................................................................. 4
C Tujuan Penelitian ................................................................................... 5
D Manfaat Menelitian ................................................................................ 5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ............................................................................ 6
A Definisi Tuberkulosis ............................................................................. 6
B Cara Penularan Tuberkulosis .................................................................. 6
C Gejala Klinis……………………………………………………………. 7
D Transmisi Tuberkulosis………………………………………………… 7
E Diagnosis Tuberkulosis…………..…………………………………….. 9
F Pengobatan Tuberkulosis……………………………………………….. 11
G Multi Drug Resisten TB ......................................................................... . 11
H Imunitas Penderita TB ........................................................................... . 13
I Status Gizi Penderita TB………………………………………………... 13
J Penyakit Penyerta TB……………………................................................ 14
xiv
BAB III METODE PENELITIAN ......................................................................... 16
A Kerangka Teori ...................................................................................... 17
B Kerangka Konsep ................................................................................... 18
C Definisi Operasional Variabel ................................................................ 18
D Desain Penelitian ................................................................................... 22
E Tempat dan Waktu ................................................................................. 23
F Populasi dan Sampel ............................................................................. 23
G Instrumen Pengumpulan Data ................................................................ 26
H Bahan dan Prosedur Pengumpulan Data ................................................ 26
I Analisa Data........................................................................................... 53
J Persetujuan Etik ..................................................................................... 53
BAB IV HASIL ..................................................................................................... 54
A Karakteristik Responden Penderita TB Paru........................................... 54
B Status Gizi Penderita TB Paru ................................................................ 56
C Penyakit Penyerta Penderita TB Paru………………………………….. 57
D Pengetahuan, Sikap, dan Perilaku (PSP) Penderita TB Paru…………… 58
E Lingkungan Fisik Penderita TB Paru…………………………………… 59
F Keakuratan Diagnosis TB Paru…………………………………………. 61
G Sensitivitas Mycobacterium tuberculosis Terhadap OAT……………… 62
H Proporsi Penderita TB Paru yang Mengalami DM……………………... 63
I Respon Imun Penderita TB-DM dan TB Tanpa DM……………………. 63
J Tingkat Kesembuhan Penderita TB Paru……………………………….. 68
BAB V PEMBAHASAN ....................................................................................... 69
A Karakteristik Responden Penderita TB Paru........................................... 69
B Status Gizi Penderita TB Paru ................................................................ 70
C Penyakit Penyerta Penderita TB Paru…………………………………... 71
D Pengetahuan, Sikap, dan Perilaku (PSP) Penderita TB Paru…………… 71
E Lingkungan Fisik Penderita TB Paru…………………………………… 72
F Keakuratan Diagnosis TB Paru…………………………………………. 72
G Sensitivitas Mycobacterium tuberkulosis Terhadap OAT…………….... 73
H Proporsi Penderita TB Paru yang Mengalami DM……………………... 74
xv
I Respon Imun Penderita TB-DM dan TB Tanpa DM…………………….. 74
J Tingkat Kesembuhan Penderita TB Paru………………………………… 75
BAB VI KESIMPULAN DAN SARAN ............................................................... . 77
A Kesimpulan ........................................................................................... . 77
B Saran...................................................................................................... . 78
DAFTAR KEPUSTAKAAN ................................................................................. . 78
xvi
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. Definisi Operasional ............................................................................... 18
Tabel 2. Pembacaan dan Pelaporan Hasil BTA Mikroskopis Skala IUATLD ........ 35
Tabel 3. Pembacaan Hasil Kultur ......................................................................... 41
Tabel 4. Pertumbuhan Mycobacterium tuberculosis ............................................. 44
Tabel 5. Karakteristik Responden Penderita TB Paru ........................................... 54
Tabel 6. Status Gizi Penderita TB Paru ................................................................ 56
Tabel 7. Konsumsi Zat Gizi Responden TB Paru………………………………….57
Tabel 8. Penyakit Penyerta Penderita TB Paru...................................................... 58
Tabel 9. Pengetahuan, Sikap, dan Perilaku Penderita TB Paru .............................. 58
Tabel 10. Lingkungan Fisik Penderita TB Paru .................................................... 59
Tabel 11. Kondisi Lingkungan Penderita TB Paru .................................................. 59
Tabel 12. Keakuratan Diagnosis TB Paru………………………………………….. 61
Tabel 13. Sensitivitas Mycobacterium tuberkulosis Terhadap OAT………………. 62
Tabel 14. Prevalensi Penderita TB Paru yang Mengalami DM……………………. 63
Tabel 15. Tingkat Kesembuhan Penderita TB Paru……………………... ............... 68
xvii
DAFTAR BAGAN
Halaman
Bagan 1. Alur Diagnosis dan Resisten TB ............................................................ 10
Bagan 2. Kerangka Teori...................................................................................... 16
Bagan 3. Kerangka Konsep .................................................................................. 17
Bagan 4. Alur Kerja Penelitian ............................................................................. 25
xviii
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1. Konsentrasi IFN-γ pada Penderita TB-DM (TB 1) ................................ 64
Gambar 2. Konsentrasi IFN-γ pada Penderita TB tanpa DM (TB 1) ....................... 64
Gambar 3. Konsentrasi IFN-γ pada Penderita TB-DM (TB 2) ................................ 65
Gambar 4. Konsentrasi IFN-γ pada Penderita TB tanpa DM (TB 2) ....................... 66
Gambar 5. Kadar Protein TNF pada Penderita TB tanpa DM ............................... 67
Gambar 6. Kadar Protein TNF pada Penderita TB-DM ........................................ 67
xix
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Biodata Ketua Pelaksana .................................................................... 88
Lampiran 2. Naskah Penjelasan .............................................................................. 90
Lampiran 3. Persetujuan Setelah Penjelasan ........................................................... 92
Lampiran 4. Kuesioner ........................................................................................... 93
Lampiran 5. Dokumentasi Penelitian ...................................................................... 109
xx
BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Tuberkulosis (TB) adalah penyakit yang disebabkan oleh infeksi Mycobacterium
tuberculosis (M.Tb), dapat menyerang berbagai organ terutama paru-paru dan
merupakan penyebab kematian kedua di dunia setelah HIV. 1 Penegakan diagnosis
tuberkulosis dapat dilakukan secara konvensional dan non konvensional. Cara
konvensional antara lain mikroskopis, biakan kuman, dan uji kepekaan terhadap obat,
sedangkan pemeriksaan melalui PCR (Polymerase Chain Reaction) merupakan cara non
konvensional.2 Sumber penularan adalah pasien TB BTA positif, dengan satu pasien
3,4
mampu menularkan M.Tb kepada tiga anggota rumah tangga lain.
Penularan M.Tb dapat terjadi melalui percikan dahak atau ludah penderita. Pasien
yang batuk dapat mengeluarkan 3000 percikan dahak. Ruangan lembab dengan ventilasi
yang kurang tanpa sinar matahari dapat meningkatkan daya tahan kuman TB hingga
beberapa jam.3 Marissa menyebutkan perilaku pasien BTA positif sebagian besar
kurang baik yaitu tidur dengan anggota rumah tangga lain dan tidak menutup mulut
saat batuk/bersin.4 Lebih dari 20% suspek Tb ditemukan dengan hunian yang padat,
lantai tanah, atap bukan genteng/beton, dinding tidak permanen, tidak ada tempat
sampah, tidak pakai pestisida, pelihara unggas, dan air minum tidak baik. 5
Menurut data WHO tahun 2014 telah ditemukan 9,6 juta kasus TB paru baru dan
1,5 juta meninggal.6 Indonesia merupakan negara dengan beban TBC tertinggi urutan ke
tiga di dunia. Riskesdas 2018 menyebutkan prevalensi TB paru berdasarkan diagnosis
dokter di Indonesia adalah 0,4% dan di Aceh 0,5%. 7 Tahun 2013-2014 dilakukan survei
prevalensi TB dengan pemeriksaan tambahan selain mikroskopis dan foto toraks yaitu
pemeriksaan X-ray, gene expert, dan kultur sehingga kasus Tb lebih banyak terjaring.
Prevalensi TB paru dengan konfirmasi bakteriologis di kawasan Sumatera berjumlah
913 per 100.000 penduduk berumur di atas 15 tahun. 8 Profil Kesehatan Indonesia tahun
2015 melaporkan terjadi peningkatan jumlah penderita TB paru dari 324.539 kasus
tahun 2014 menjadi 330.910 kasus dengan proporsi pasien terkonfirmasi bakteriologis
sebesar 57,1%.9 Profil Kesehatan Aceh tahun 2015 terdapat kasus baru BTA positif
sebanyak 4.023. Kota Banda Aceh (594 kasus) dan Aceh Besar (295 kasus) termasuk
dalam sepuluh Kab/Kota dengan kasus TB tertinggi. 10 Pemilihan lokasi di Banda Aceh
1
dan Aceh besar disebabkan secara geografis kedua Kab/Kota tersebut berdekatan yang
memungkinkan terjadinya mobilisasi penduduk yang tinggi sehingga pasien TB yang
berdomisili di Aceh Besar juga berobat ke Banda Aceh. Kota Banda Aceh juga
merupakan kota dengan jumlah rumah sakit terbanyak termasuk rumah sakit rujukan Tb
tingkat provinsi. Menurut sumber dari Sistem Informasi TB Terpadu (SITT) tahun 2016
dilaporkan terdapat 586 kasus TB paru baru dan lama di Kota Banda Aceh dengan 184
kasus baru BTA positif dan 16 kasus kambuh, Aceh Besar memiliki kasus TB dengan
BTA positif sebanyak 303 kasus dan kasus kambuh 5 penderita TB. 11
Diagnosis TB sesuai Permenkes No.67 tahun 2016 adalah pemeriksaan klinis
dan bakteriologis dengan mikroskop atau Tes Cepat Molekuler (TCM). 12 Penelitian oleh
Hadifah tahun 2014 menunjukkan bahwa teknik kultur lebih banyak menjaring
penderita Tb dibanding dengan teknik mikroskopis. 13 Ramadhan tahun 2016
melaporkan hasil pemeriksaan M.Tb pada penderita TB paru aktif menggunakan PCR
diperoleh 59,18% sedangkan mikroskopis 6,12% dari 49 penderita TB dengan masa
pengobatan dua hingga lima bulan keatas.14 Utami menyebutkan tidak terdapat
perbedaan yang bermakna antara hasil pemeriksaan mikroskopis BTA dan PCR dengan
hasil kultur. Sensitifitas dan spesifisitas mikroskopis BTA adalah 77,2% dan 95,8%
sedangkan PCR adalah 90% dan 79% dibandingkan dengan kultur.15 Hasil penelitian
Lestari selisih minus 14% dan minus 10% untuk nilai sensitifitas dan spesifisitas. 16
Profil Kesehatan Indonesia menjelaskan bahwa untuk menemukan pasien menular TB,
perlu dilakukan konfirmasi bakteriologis. Angka yang harus dicapai adalah di atas 70%
dari seluruh pasien yang diobati (berdasarkan bakteriologis dan klinis). Jika lebih
rendah menunjukkan kelemahan diagnosa untuk menemukan pasien menular. Hanya
delapan provinsi yang sudah mencapai target tersebut. Aceh merupakan provinsi yang
belum mencapai target dengan angka konfirmasi bakteriologis di bawah 70% (67,8%).9
TB mudah terinfeksi pada individu dengan penurunan daya tahan tubuh.
Penyakit yang menyerang daya tahan tubuh seperti HIV akan mempercepat penularan
TB. WHO tahun 2013 melaporkan 13% dari 8,6 juta kasus TB pengidap HIV positif. 17
Penderita HIV stadium 1 sampai 3 berisiko 52% terinfeksi TB. 18 Penurunan daya tahan
tubuh juga terjadi pada individu dengan gizi kurang. Penelitian pada pasien TB
menunjukkan status gizi 49% underweight (BMI≤18,5 kg/m2) dan 85% limpopenia.19
2
Faktor risiko TB antara lain riwayat diabetes, umur, jenis kelamin, pendidikan,
ekonomi, merokok, dan lingkungan. Nilai Odds rasio untuk terjangkit TB paru pada
pasien diabetes sebesar 3,94. Hal ini menunjukkan riwayat diabetes merupakan faktor
paling dominan sebagai faktor risiko TB.20,21 Menurut Mihardja, prevalensi diabetes
pada penderita TB 5,4%-44% dengan diabetes sebagai faktor risiko TB (OR: 1,5-8,9).22
WHO melakukan penelitian terkait pencegahan TB pada penderita diabetes. Penegakan
diagnosis TB dapat terjadi sebelum dilakukan pemeriksaan indikator diabetes, seperti
HbA1c. Pengobatan TB yang dilakukan tanpa mengetahui riwayat diabetes dapat
menyebabkan perburukan gejala, meningkatkan keparahan infeksi, meningkatkan
penularan, hingga risiko resistensi kuman. 23 Oleh sebab itu, deteksi dini diabetes pada
pasien TB diperlukan. Penggunaan Obat Anti Tuberkulosis (OAT) akan efektif jika
kadar glukosa darah terkontrol. Etambutol mempunyai efek samping pada mata dan
rifampisin dapat mengurangi efektivitas sulfonil urea (obat anti diabetes). 24
TB merupakan salah satu penyakit yang membutuhkan pengobatan
berkelanjutan hingga kurun waktu enam bulan. Penderita TB yang tidak melakukan
pengobatan akan menimbulkan komplikasi bahkan kematian. Pengobatan TB tidak
tuntas akan menimbulkan resistensi obat. 25 Pemeriksaan M.Tb pada dahak dapat
dilakukan dengan metode mikroskopis, PCR, dan kultur. Kultur merupakan baku emas
2,25–28
penegakan diagnosis tuberkulosis. Pemeriksaan dengan teknik kultur merupakan
tahap awal untuk pemeriksaan sensitivitas M.Tb yang bertujuan mengetahui resistensi
OAT.29
Angka penderita Multidrug Resistant Tuberculosis (MDR-TB) di dunia
diperkirakan 580 ribu kasus dan hanya 20% yang melakukan pengobatan. Indonesia
termasuk lima negara penyumbang lebih dari 60% kasus MDR TB. 29 Belum terdapat
laporan penderita MDR TB di Aceh secara pasti, namun penelitian di Poliklinik
Directly Observed Treatment Short-course (DOTS) atau pengobatan jangka pendek
dengan pengawasan langsung tahun 2013 di RSUDZA terdapat 10 kasus MDR TB. 30
Kekurangan informasi mengenai data MDR TB Aceh menjadi salah satu faktor yang
melatarbelakangi pelaksanaan penelitian ini.
Loka Penelitian dan Pengembangan Biomedis Aceh telah menyusun roadmap
penelitian TB paru pada tahun 2016 yang memiliki tujuan akhir menghasilkan obat dan
vaksin TB. Untuk mencapai tujuan tersebut diperlukan data tentang penderita TB paru
3
yang lengkap termasuk data tentang MDR TB. Hal inilah yang menjadi dasar perlu
dilakukan penelitian ini.
B. Perumusan Masalah
TB masih merupakan masalah kesehatan utama. Besarnya kasus yang berhasil
dideteksi, selain merupakan keberhasilan juga menjadi pekerjaan tambahan untuk
mengupayakan kesembuhan. Obat yang harus diminum setiap hari juga memerlukan
pengamatan tentang kepatuhan penderita dalam mengkonsumsi obat tersebut. Berbagai
faktor lain juga turut berperan dalam proses keberhasilan pengobatan, seperti status gizi,
respon imun, bahkan MDR TB.
Untuk menuntaskan segala permasalahan tentang TB diperlukan kesiapan lintas
sektor. Balai Penelitian dan Pengembangan Kesehatan Banda Aceh berkewajiban untuk
ambil bagian sebagai penyaji data, sesuai salah satu tugas dan fungsinya. Data tentang
gambaran penderita TB di Kota Banda Aceh dan Aceh Besar yang dilihat dari berbagai
aspek belum ada. Apakah pemeriksaan untuk mendiagnosa TB yang dilakukan sudah
akurat, bagaimanakah status gizi, respon imun, kondisi lingkungan, adanya penyakit
penyerta penderita TB. Berdasarkan permasalahan tersebut diatas, maka timbul
beberapa pertanyaan penelitian yaitu :
a. Bagaimana karakteristik penderita TB paru ?
b. Bagaimana status gizi penderita TB paru ?
c. Apa saja penyakit penyerta pada penderita TB paru ?
d. Sejauh mana gambaran pengetahuan, sikap, dan perilaku penderita TB paru ?
e. Bagaimana lingkungan fisik penderita TB paru ?
f. Sejauh mana keakuratan diagnosis TB menggunakan beberapa metode
pemeriksaan (mikroskopis, PCR, dan kultur) ?
g. Apakah M.Tb masih sensitif terhadap OAT (Obat Anti Tuberkulosis) ?
h. Berapa prevalensi penderita TB yang mengalami diabetes mellitus ?
i. Bagaimana respon imun penderita TB-DM dan TB tanpa DM ?
j. Berapakah angka kesembuhan penderita TB berdasarkan pemeriksaan
mikroskopis dan kultur ?
4
C. Tujuan
1. Tujuan Umum
Mendapatkan gambaran penderita TB paru di Kota Banda Aceh dan Kabupaten
Aceh Besar
2. Tujuan Khusus
a. Mendapatkan gambaran karakteristik penderita TB.
b. Mendapatkan gambaran status gizi penderita TB.
c. Mengindentifikasi penyakit penyerta pada penderita TB.
d. Mendapatkan gambaran pengetahuan, sikap, dan perilaku penderita TB.
e. Mendapatkan gambaran lingkungan fisik penderita TB.
f. Mendapatkan keakuratan diagnosis TB menggunakan beberapa metode
pemeriksaan (mikroskopis, PCR, dan kultur).
g. Mendapatkan sensitivitas M.Tb terhadap OAT.
h. Mendapatkan proporsi penderita TB paru yang mengalami diabetes
mellitus.
i. Mendapatkan respon imun penderita TB-DM dan TB tanpa DM.
j. Mendapatkan tingkat kesembuhan penderita TB berdasarkan
pemeriksaan mikroskopis dan kultur.
D. Manfaat Penelitian
1. Program
Tersedianya data profil TB di Kota Banda Aceh dan Kabupaten Aceh Besar
Provinsi Aceh.
2. Penderita
Mendapatkan informasi mengenai penyakit yang diderita dan pencegahan
komplikasi.
3. Rumah Sakit dan Puskesmas
Mendapatkan informasi mengenai kondisi responden dan lingkungan sehingga
dapat ditentukan alternatif tindak lanjut yang akan dilakukan, serta keberhasilan
pengobatan.
5
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
A. Definisi Tuberkulosis
Tuberkulosis adalah penyakit menular langsung yang disebabkan oleh kuman
TB (Mycobacterium tuberculosis). Sebagian besar kuman TB menyerang paru, tetapi
dapat juga mengenai organ tubuh lainnya seperti, tulang, kelenjar dan otak yang biasa
disebut TB ekstra paru. Kuman ini ditemukan oleh Robert Koch di Berlin pada tanggal
24 Maret 1882. Kuman ini berbentuk batang, mempunyai sifat khusus yaitu tahan
terhadap asam pada pewarnaan. Oleh karena itu disebut pula sebagai Basil Tahan Asam
(BTA). Kuman TB cepat mati dengan sinar matahari langsung, tetapi dapat bertahan
hidup dalam jangka waktu lama terutama pada suhu 4oC sampai -70o C. Dalam jaringan
tubuh kuman ini dapat tertidur lama selama beberapa tahun baru setelah itu
menginfeksi.3
B. Cara Penularan Tuberkulosis
Sumber penularan adalah penderita TB BTA positif melalui percik renik dahak
(droplet nuclei) yang dikeluarkan, baik itu saat batuk, bersin, bahkan saat berbicara.
Sekali batuk dapat menghasilkan sekitar 3000 percikan dahak, sedangkan kalau bersin
dapat mengeluarkan sebanyak 4500 – 1.000.000 M.tb. Infeksi akan terjadi apabila orang
3,12
lain menghirup udara yang mengandung percik renik dahak yang infeksius tersebut.
Pada umumnya, penularan akan terjadi di dalam ruangan, dan dalam waktu yang
lama. Dengan adanya ventilasi yang baik, dapat mengurangi jumlah percikan, dan sinar
matahari langsung dapat membunuh kuman. Daya penularan penderita TB ditentukan
oleh berapa banyaknya kuman TB yang dikeluarkan dari paru –parunya. Makin tinggi
derajat positif hasil pemeriksaan dahak, makin menular penderita tersebut. Namun,
bukan berarti bahwa pasien TB dengan hasil pemeriksaan BTA negatif tidak
mengandung kuman dalam dahaknya. Penyakit TB masih mempunyai kemungkinan
untuk ditularkan oleh pasien TB meskipun hasil pemeriksaan dahak BTA negatif.
Tingkat penularan bagi pasien TB BTA positif sebesar 65%, pasien TB BTA negatif
dengan hasil kultur positif adalah 26% sedangkan pasien TB dengan hasil kultur negatif
dan foto Toraks positif adalah 17%.3
6
C. Gejala Klinis
Gejala klinis pada penderita TB meliputi:
a. Gejala utama pasien TB paru adalah batuk berdahak selama 2 minggu atau lebih.
Batuk dapat diikuti dengan gejala tambahan yaitu dahak bercampur darah, batuk
darah, sesak nafas, badan lemas, nafsu makan menurun, berat badan menurun,
malaise, berkeringat malam hari tanpa kegiatan fisik, demam meriang lebih dari
satu bulan. Pada pasien dengan HIV positif, batuk sering kali bukan merupakan
gejala TB yang khas, sehingga gejala batuk tidak harus selalu selama 2 minggu
atau lebih.
b. Gejala diatas juga dijumpai pula pada penyakit paru lain, seperti bronkiektasis,
bronkitis kronis, asma, kanker paru, dan lain-lain. Oleh karena prevalensi TB di
Indonesia masih tinggi, maka setiap orang yang datang ke fasilitas pelayanan
kesehatan dengan gejala tersebut diatas, dianggap sebagai seorang terduga
pasien TB, dan perlu dilakukan pemeriksaan dahak secara mikroskopis
langsung.
c. Selain itu juga perlu dipertimbangkan pemeriksaan pada orang dengan faktor
risiko, seperti: kontak erat dengan pasien TB, tinggal di daerah padat penduduk,
wilayah kumuh, daerah pengungsian, dan orang yang bekerja dengan bahan
kimia yang berisiko menimbulkan paparan infeksi paru.
D. Transmisi Tuberkulosis
Ada 4 tahapan perjalanan alamiah penyakit meliputi paparan, infeksi, menderita
sakit dan meninggal dunia. Seseorang bisa terpapar dengan TB karena berbagai hal
seperti adanya jumlah kasus di masyarakat, peluang kontak dengan penderita, tingkat
daya tular dahak, intensitas batuk sumber penularan, kedekatan kontak dengan sumber
penularan, lamanya waktu kontak dan faktor lingkungan ( konsentrasi kuman di udara:
ventilasi, sinar ultra violet, penyaringan adalah faktor yang dapat menurunkan
konsentrasi). Paparan dengan penderita TB merupakan syarat untuk terinfeksi. 3
Ketika seorang penderita TB paru batuk, bersin atau berbicara maka droplet
nuklei akan jatuh dan menguap akibat suhu udara yang panas, maka kuman tuberkulosis
akan berterbangan di udara dan berpotensi sebagai sumber infeksi pada orang sehat. Hal
ini yang sering disebut sebagai airborne infection. Setelah melewati barrier mukosilier
saluran nafas, basil TB paru-paru akan mencapai bronkiolus distal atau alveoli. Kuman
7
mengalami multiplikasi di paru-paru dikenal sebagai fokus Ghon. Basil juga mencapai
kelenjar limfe hilus, melalui aliran limfe sehingga terjadi limfadenopati hilus. Fokus
Ghon dan limfadenopati hilus akan membentuk kompleks primer. Kompleks primer
berlokasi di lobus bawah karena ventilasi lebih baik di area tersebut. Ghon menemukan
pendistribusian fokus primer yang sama antara lobus atas dan lobus bawah, tetapi lebih
sering pada paru kanan.31
Waktu yang diperlukan sejak masuk kuman TB hingga terbentuk kompleks
primer disebut masa inkubasi. Hal ini berlangsung dalam waktu 4-8 minggu dengan
rentang waktu 2-12 minggu. Selama terjadi proses infeksi, terjadi pertumbuhan kuman
TB sehingga jaringan tubuh yang awalnya belum sensitif terhadap tuberkulin,
mengalami perkembangan sensitivitas. Saat terbentuk kompleks primer maka
dinyatakan infeksi TB primer telah terjadi. Hal ini ditandai dengan munculnya respon
positif terhadap tuberkulin.
32
Pada masa inkubasi, uji tuberkulin masih negatif. Sebelum terbentuk imunitas
seluler, kuman TB menyebar secara limfogen dan hematogen. Penyebaran limfogen c
yaitu kuman menyebar ke kelenjar limfe regional membentuk kompleks primer.
Sedangkan penyebaran hematogen, kuman tersebut masuk dalam sirkulasi darah dan
menyebar ke seluruh tubuh. Adanya penyebaran secara hematogen inilah yang
menyebabkan TB disebut sebagai penyakit sistemik.
Selanjutnya, setelah kompleks primer terbentuk, ada beberapa kemungkinan
dapat terjadi yaitu:
a. Sembuh sama sekali tanpa meninggalkan cacat, karena imunitas seluler tubuh
dibentuk. Bila system imun tubuh baik, begitu sistem imun seluler berkembang,
proliferasi kuman TB terhenti.
b. Sembuh dengan meninggalkan sedikit bekas berupa garis-garis fibrotik,
kalsifikasi di hilus dan dapat terjadi reaktivasi lagi karena kuman yang dormant
karena sejumlah kecil kuman TB tetap hidup dalam granuloma.
c. Kompleks primer bisa juga mengalami komplikasi dan menyebar. Hal ini karena
focus primer di paru membesar dan menyebabkan pneumonitis dan pleuritis.
Kuman yang dormant akan muncul bertahun-tahun kemudian sebagai infeksi
endogen menjadi tuberkulosis dewasa. TB sekunder ini dimulai dengan sarang
dini yang berlokasi di region atas paru. Kuman TB dalam granuloma
8
berkembang menghancurkan jaringan ikat sekitar dan bagian tengahnya
mengalami nekrosis menjadi lembek membentuk perkejuan. Bila jaringan
perkejuan dibatukkan, akan menimbulkan kavitas. 32,33
Faktor resiko untuk menderita TB sangat tergantung dari konsentrasi (jumlah
kuman yang terhirup), lamanya waktu sejak terinfeksi, usia dan daya tahan tubuh.
Hanya sekitar 10% yang terinfeksi TB akan menjadi sakit TB. Apabila daya tahan tubuh
rendah seperti karena gizi buruk dan penderita HIV/ AIDS dan akan memudahkan
berkembangnya TB aktif (sakit TB). Bila jumlah orang terinfeksi HIV meningkat, maka
jumlah pasien TB akan meningkat, dengan demikian penularan TB di masyarakat akan
meningkat pula. 3
Faktor resiko kematian akibat TB dapat terjadi karena keterlambatan diagnosis,
pengobatan tidak adekuat, kondisis kesehatan yang memburuk dan adanya penyakit
penyerta. Pasien TB tanpa pengobatan, 50% akan meninggal dan risiko ini meningkat
pada pasien dengan HIV positif. 3
E. Diagnosa Tuberkulosis
Diagnosis TB ditetapkan berdasarkan keluhan, hasil anamnesis, pemeriksaan
klinis, pemeriksaan labotarorium dan pemeriksaan penunjang lainnysa. Gejala klinis TB
dapat berupa demam, malaise, keringat malam, anoreksia, dan berat badan menurun.
Pada pemeriksaan fisik, kelainan jasmani tergantung dari organ yang terlibat dan luas
kelainan struktur paru.12
Pemeriksaan bakteriologi terdiri dari pemeriksaan dahak mikroskopis langsung,
pemeriksaan tes cepat molekuler (TCM), dan pemeriksaan biakan. Pemeriksaan dahak
selain berfungsi untuk menegakkan diagnosis, juga untuk menentukan potensi penularan
dan menilai keberhasilan pengobatan. Pemeriksaan dahak untuk penegakan diagnosis
dilakukan dengan mengumpulkan 2 contoh uji dahak yang dikumpulkan berupa dahak
Sewaktu-Pagi (SP): a) S (Sewaktu): dahak ditampung di fasyankes. b) P (Pagi): dahak
ditampung pada pagi segera setelah bangun tidur. Dapat dilakukan dirumah pasien atau
di bangsal rawat inap bilamana pasien menjalani rawat inap. Pemeriksaan TCM TB
dilakukan dengan metode Xpert MTB/RIF. TCM merupakan sarana untuk penegakan
diagnosis, namun tidak dapat dimanfaatkan untuk evaluasi hasil pengobatan.
Pemeriksaan biakan dapat dilakukan dengan media padat (Lowenstein-Jensen)
dan media cair (Mycobacteria Growth Indicator Tube) untuk identifikasi
9
Mycobacterium tuberkulosis (M.Tb). Berikut alur diagnosis Tb dan resisten TB
berdasarkan PMK No.67 Tahun 2016.12
Terduga TB
Pasien baru, tidak ada riwayat pengobatan TB, tidak ada riwayat kontak Pasien dengan riwayat pengobatan TB, pasien dengan riwayat
erat dengan pasien TB RO, pasien dengan HIV (-) atau tidak diketahui kontak erat dengan pasien TB RO, pasien dengan HIV (+)
status HIV nya
Pemeriksaan Klinis dan Pemeriksaan bakteriologis dengan Mikroskop atau Tes Cepat Molekuler
(TCM)
(+ +) MTB Pos, Rif MTB Pos, Rif MTB Pos, Rif MTB
(- -) Sensitive Indeterminate Resistance Neg
(+ -)
Pengobatan TB Lini 1
Pemeriksaan tambahan pada semua pasien TB yang terkonfirmasi baik secara bakteriologis maupun klinis adalah
pemeriksaan HIV dan gula darah. Pemeriksaan lain dilakukan sesuai indikasi misalnya fungsi hati, fungsi ginjal, dll)
10
F. Pengobatan Tuberkulosis
Pengobatan TB ditujukan untuk menyembuhkan penderita, mencegah kematian,
mencegah kekambuhan, menurunkan risiko penularan, dan mencegah penyetaraan
kekebalan terhadap obat. Obat anti TB yang dipakai dalam Program Pemberantasan
Tuberkulosis Paru (P2TB) nasional antara lain sebagai berikut: isoniasid (H), rifampicin
(R), pirazinamid (Z), ethambutol (E), dan streptomisin (S).
Obat TB diberikan dalam bentuk kombinasi beberapa jenis serta dalam jumlah
cukup dan dosis tepat selama 6-8 bulan supaya kuman (termasuk kuman persisten)
dapat sembuh. Pengobatan TB diberikan dalam 2 tahap. Tahap intensif dan lanjutan.
Tahap intensif (awal) yaitu penderita mendapat obat setiap hari dan diawasi langsung
untuk mencegah terjadinya kekebalan terhadap semua OAT, terutama rifampisin. Bila
pengobatan tahap intensif tersebut diberikan secara tepat, maka penderita menular
menjadi tidak menular dalam kurun waktu 2 minggu. Sebagian besar penderita TB BTA
positif menjadi BTA negatif (konversi) pada akhir pengobatan intensif. Tahap lanjutan
penderita mendapat jenis obat lebih sedikit, namun dalam jangka waktu yang lebih
lama. Tahap lanjutan penting untuk membunuh kuman persisten (dormant) sehingga
mencegah terjadinya kekambuhan.3,12
Program nasional penanggulangan TB di Indonesia menggunakan OAT
kategori 1 yaitu 2HRZE/ 4H3R3, kategori 2 yaitu 2HRZES/ HRZE/ 5H3R3E3 kategori
3 yaitu 2HRZ/ 4H3R3. Disamping ketiga kategori ini, disediakan panduan obat sisipan
(HRZE). Panduan OAT ini disediakan dalam bentuk paket kombipak, dengan tujuan
untuk memudahkan pemberian obat menjadi kelangsungan pengobatan sampai selesai.
11
Kasus MDR TB dilaporkan pertama di Amerika Serikat, khususnya pada pasien
TB dan AIDS dengan angka kematian mencapai 70% –90% hanya dalam kurun waktu 4
sampai 16 minggu. Penyebaran MDR-TB sangat cepat terjadi di berbagai belahan
dunia. Diagnosa yang tepat, pemberian obat dan kepatuhan penderita dalam minum obat
sangat penting dalam penatalaksanaan MDR-0TB ini.34
Pasien MDR-TB memiliki karakteristik, diantaranya: 1) umur produktif (25-34
tahun), 2) disominasi oleh jenis kelamin laki-laki, 3) penyakit komorbid terbanyak yang
ditemukan adalah diabetes mellitus, 4) resisten OAT terbanyak merupakan jenis resisten
sekunder (77,2%), didominasi jenis resisten terhadap obat isoniazid dan rifampisin
(50,5%), resisiten primer ditemukan cukup tinggi (22,8%). 35
Beberapa penyebab terjadinya resistensi terhadap OAT, antara lain: pengetahuan
pasien yang kurang tentang TB, pemakaian satu obat dalam terapi, paduan obat yang
tidak adekuat, pemberian obat yang tidak teratur, penambahan obat dalam suatu paduan
pengobatan yang tidak berhasil, pencampuran obat kombinasi tidak dilakukan dengan
baik, obat tidak tersedia secara reguler, minum OAT yang lama sehingga menimbulkan
kejemuan, dan kasus MDR-TB rujuk ke dokter ahli paru. Pengobatan terhadap MDR
TB memperhatikan klasifikasi OAT untuk MDR dengan kriteria utama berdasarkan data
biologikal dikelompokkan menjadi 3 OAT, yaitu:
1. obat dengan aktivitas bakterisid seperti: aminoglikosid, tionamid dan
pirazinamid yang bekerja pada pH asam.
2. Obat dengan aktivitas bakterisid rendah seperti: fluorokuinolon.
3. Obat dengan aktivitas bakteriostatik, seperti: etambutol, cycloserin dan PAS.
Golongan obat fluorokuinolon (moksifloksasin, levofloksasin, ofloksasin dan
24
siprofloksasin) dapat digunakan sebagai terapi TB yang resisten terhadap lini-1.
Pengobatan tehadap MDR-TB dianjurkan dengan memberikan 4 sampai 6 jenis obat.
Obat yang diberikan berupa obat lini pertama yang masih sensitif diatambah obat lini
kedua berdasarkan aktivitas intrinsik terhadap M.Tb. Pertimbangan untuk pembedahan
dapat dipertimbangkan jika setelah 3 bulan pengobatan tidak terjadi konversi dahak
negatif. 34 Isoniazid masih digunakan dalam pengobatan karena dianggap dapat kembali
sensitif. 35
12
H. Imunitas Penderita TB
Penurunan aktivitas sel T helper 1 dan sitokinnya yaitu IFN-γ cukup bermakna
untuk mempengaruhi mekanisme imunitas terhadap penyakit TB paru. Pengetahuan
tentang kadar IFN-γ dalam pertahanan tubuh individu terhadap infeksi TB paru sangat
penting. Hasil penelitian menunjukkan pemeriksaan kadar IFN-γ pada serum penderita
36
TB paru didapatkan lebih rendah dibandingkan orang sehat di masyarakat. Sel T-
CD8+ yang mengekspresikan IFN-γ pasien TB paru aktif persentasenya lebih rendah
dibandingkan TB laten dan terdapat perbedaaan yang bermakna.Hal ini disebabkan
karena sel T-CD8+ yang memiliki peran unggul dalam menghasilkan IFN-γ dibanding
laten dan hasil IFN-γ dipengaruhi oleh beberapa faktor lain seperti: genetik, indeks
masa tubuh dan gizi. 37
Berbeda dengan hasil penelitian Novriandi F, kadar IFN-γ cairan pleura pada
semua pasien efusi pleura TB pada penelitian ini jauh lebih tinggi dengan nilai reratanya
38
mencapai 5x nilai cut off point pada referensi yang ada. Pada penderita TB, produksi
IL-10 di dalam tubuh menunjukkan peranan yang sangat penting dalam melihat
progresivitas penyakit TB. 39
TNF-α juga memiliki peran yang penting dalam mencegah reaktivasi TB
persisten, membatasi respons patologis inang dan memodulasi ekspresi pulmonik faktor
40
imunologi spesifik. TNF-α sangat penting dalam mencegah aktifnya TB. TNF-
antagonis telah terbukti efektif dalam mengurangi gejala klinis psoriasis, rheumatoid
diseases dan penyakit Inflammatory Bowel Disease. Pemberian preparat TNF-α
antagonis, ternyata dapat memicu teraktivasinya TB baik pada pasien bebas TB
sebelumnya maupun pasien TB laten. Pemakaian obat yang tepat harus
41
dipertimbangkan sehingga dapat mengurangi risiko terjadinya TB.
13
gizi masyarakat bisa jadi terbukti efektif untuk mengendalikan TB di negara sedang
berkembang di dunia.43
Status gizi pasien TB paru aktif jelek dibandingkan dengan subyek yang sehat,
dimana pada pasien TB paru dengan status gizi jelek lebih banyak yang mengalami
anemia dengan konsentrasi plasma retinol dan zinc yang rendah dalam plasma.
Konsentrasi hemoglobin, retinol dan zinc yang rendah dalam plasma lebih banyak
dilaporkan pada pasien TB dengan malnutrisi. 44
14
Gejala klinis yang sering ditemukan adalah demam dan penurunan berat badan yang
signifikan (lebih dari 10%). Di samping itu, dapat ditemukan gejala lain terkait TB
ekstra paru (TB pleura, TB perikard, TB milier, TB susunan saraf pusat dan TB
abdomen) seperti diare terus menerus lebih dari satu bulan, pembesaran kelenjar limfe
di leher, dan sesak napas. Pada individu yang terinfeksi HIV, terdapatnya infeksi lain
termasuk TB dapat membuat virus HIV berkembang biak dengan lebih cepat sehingga
progresivitas penyakit menjadi lebih cepat.45
15
BAB III
METODE PENELITIAN
A. Kerangka Teori
Gejala Klinis TB
Pemeriksaan Laboratorium
Batuk berdahak 2minggu Pemeriksaan penunjang
atau lebih. (foto thoraks)
Dahak bercampur darah, a. Pemeriksaan
Sesak nafas, bakteriologis
Badan lemas, (Mikroskopis, tes cepat
Nafsu makan menurun, molekuler (TCM),
Berat badan menurun, biakan kuman)
Berkeringat malam hari
tanpa kegiatan fisik, b. Pemeriksaan serologi/
Demam meriang lebih Imunologi
dari satu bulan
Pengobatan TB
16
B. Kerangka Konsep
Kultur/ Uji
sensitivitas
Mikroskopis
Pasien Lingkungan
17
C. Definisi Operasional Variabel
Tabel 1. Definisi operasional
18
6. Pasien lama Pasien yang Wawancara Kuesioner Nominal
pernah berobat 2. Ya
enam bulan 2. Tidak
(kambu) atau
yang putus
obat
Penyakit Penyakit DM Wawancara/ Kuisioner
penyerta dan atau HIV rekam medik Nominal
yang diderita 3. Ya
oleh pasien Tb 2. Tidak
19
TB sebagai 2. Tidak terkontrol
indikator DM (>6%)
Pemeriksaan Pemeriksaan Pemeriksaan ELISA Rasio
TNF-α kadar TNF-α laboratorium
untuk
menentukan
status
imunologis
Pemeriksaan Pemeriksaan Pemeriksaan IGRA Rasio
IFNγ kadar IFNγ laboratorium
untuk
menentukan
status
imunologis
Indeks Massa Keadaan gizi Penimbangan Timbangan Ordinal (3)
Tubuh responden BB dan dan 1. Sangat kurus (<17
penderita TB Pengukuran Mikrotois kg/m2)
TB 2. Kurus (17s/d <18,5
kg/m2)
3. Normal (18,5-25
kg/m2)
4. Gemuk/overweigth
(>25-27 kg/m2)
5. Obes (>27 kg/m2)
Asupan gizi Asupan energi, Wawancara Food recall Rasio
karbohidrat,
protein, dan
lemak
penderita TB
20
(m2) 2. Kurang (<8 m2 per
orang)
1.
Kepadatan Jumlah Observasi Kuesioner Ordinal
kamar individu per 1. Baik (≥8 m2 per
luas kamar orang)
(m2) 2. Kurang (<8 m2 per
orang)
21
rumah 4. Kayu/triplek
penderita TB 5. Anyaman bambu
6. Tidak ada
Kelembaban Kandungan air Observasi Pengukur Rasio
dalam udara di kelembaban 1. Baik (40-60%)
rumah udara 2. Tidak baik (<40 %
penderita TB />60%)51
D. Desain Penelitian
Penelitian ini merupakan penelitian deskriptif analitik. Desain penelitian dengan
pendekatan kohort, variable yang diikuti adalah : Pemeriksaan dignosa TB (kultur,
mikroskopis, dan PCR), data gizi, pengobatan, dan lingkungan. Data yang dikohorkan
dapat dijelaskan sebagai berikut :
22
a. Pengambilan sampel dahak dilakukan pada awal penelitian, dua bulan
pengobatan, dan di akhir masa pengobatan penderita Tb (kultur, pemeriksaan
MDR TB dan mikroskopis).
b. Pengambilan data gizi menggunakan metode food recall dilakukan sebanyak 3
kali (awal masa penelitian 3x 24 jam, selang 2 bulan kemudian 3 x 24 jam, dan
pada akhir masa pengobatan). Form food recall digunakan untuk mencatat
konsumsi makanan 1 x 24 jam terakhir sehingga mengetahui asupan gizi pasien
TB paru.
c. Riwayat pengobatan diwawancarai menggunakan kuesioner sebanyak 2 kali
(selang 2 bulan pengobatan, dan di akhir masa pengobatan).
d. Observasi lingkungan dalam dan di luar rumah dilakukan pada awal dan akhir
masa penelitian.
E. Tempat dan Waktu
Tempat penelitian:
Penelitian ini dilakukan dih Kota Banda Aceh dan Kabupaten Aceh Besar
dengan menelusuri pasien TB dari PRM dan rumah sakit yang telah menerapkan DOTS.
Lokasi pemeriksaan sampel :
- Laboratorium Balai Litbangkes Aceh: mikroskopis, PCR, pemeriksaan TNF-α
dan IFNγ.
- Laboratorium rujukan pemeriksaan kultur TB (BBLK Jakarta): kultur TB dan
sensitivitas OAT
- Laboratorium rujukan pemeriksaan HbA1c (Prodia Banda Aceh): pemeriksaan
HbA1c
Lama penelitian (1 Tahun)
Terkait dengan pengambilan sampel tahun 2018 dimulai Januari – Desember
2018, setiap responden akan diikuti masa pengobatannya dan kesembuhan terhadap TB.
F. Populasi dan Sampel
Populasi adalah seluruh penderita TB paru yang terdata di PRM dan rumah
sakit (menurut data SITT tahun 2016) di Kota Banda Aceh sebanyak 184 kasus baru dan
16 kasus pasien kambuh dan Aceh Besar 303 kasus baru ditambah 5 pasien kambuh.
Populasi kasus TB berjumlah 508 dalam satu tahun.
23
Sampel adalah total populasi sebanyak 508 penderita TB. Pada pemeriksaan
imunologis, jumlah sampel yang digunakan adalah pasien TB yang sudah didiagnosa
22
DM. Penderita TB-DM yang digunakan sebagai responden sebanyak 10% (51orang).
Sebagai pembanding, digunakan sebanyak 51 orang penderita TB tanpa DM, sehingga
untuk pemeriksaan imunologis, jumlah sampel yang digunakan adalah 51 TB-DM dan
51 TB non DM (102 sampel).
Kriteria inklusi sampel sampel penelitian ini adalah:
1. Pasien TB yang sudah terdata di PRM setempat
2. Pasien TB yang mampu mengeluarkan dahak
3. Pasien TB yang tidak menderita kelainan pembekuan darah
4. Berumur ≥15 tahun
5. Bersedia ikut serta dalam penelitian
Sampel yang diambil meliputi semua pasien TB yang melakukan pengobatan.
Pertimbangan pengambilan sampel selama masa pengobatan adalah untuk menjaring
MDR TB dan adanya pasien yang berobat tidak teratur sehingga menyebabkan
kegagalan pengobatan. Penelitian oleh Ramadhan menunjukkan bahwa M.Tb masih ada
meskipun setelah 2 bulan pengobatan. 14
Kriteria eksklusi sampel adalah:
Pasien TB yang menderita sakit berat atau mengalami gangguan komunikasi.
24
Alur kerja penelitian
Penderita
Tb paru
25
G. Instrumen Pengumpulan Data
26
3) Responden diminta untuk mengeluarkan dahak dan menampungnya di pot
dahak yang telah disediakan dengan cara:
Diambil nafas dalam, kemudian tahan selama 5 detik. Secara perlahan, napas
dikeluarkan. Nafas dalam diambil sekali lagi, kemudian dibatukkan secara
keras sehingga keluar dahak dari mulut responden (sebagai dahak sewaktu).
4) Untuk pengambilan dahak kedua di pagi hari, responden harus dijelaskan:
segera setelah responden bangun di pagi hari (sebelum responden makan
atau minum apa pun), gigi disikat dan mulut dibilas dengan air. Cairan
pencuci mulut dilarang untuk digunakan. Jika mungkin, pergilah ke luar
atau buka jendela sebelum sampel dahak diambil. Dengan cara ini orang lain
terbantu terlindungi dari kuman TB ketika responden batuk.
5) Dahak diludahkan ke wadah plastik.
6) Ini terus diulangi sehingga dahak mencapai garis 5 ml atau lebih pada wadah
plastik. Ini kurang lebih sejumlah 1 sendok teh dahak.
7) Tutup pot dahak dipasang dengan kuat agar tidak bocor, kemudian bagian
luar wadah dicuci dan dikeringkan.
8) Tanggal pengambilan dahak dicantumkan pada pot tersebut.
9) Pot dimasukkan ke kotak atau kantung yang telah disediakan dan disimpan
dalam lemari pendingin.
10) Bila dahak tidak keluar, maka metode postural drainase dijelaskan kepada
pasien.
11) Dahak akan diambil pada hari berikutnya. Pada saat dahak diambil,
responden diminta untuk mengeluarkan dahak sekali lagi sebagai dahak
sewaktu yang kedua.
Specimen dahak digunakan untuk pemeriksaan:
1. Pemeriksaan PCR Konvensional (dilakukan oleh Laboratorium Balai
Litbangkes Aceh)
Target gen yang digunakan pada penelitian ini adalah 16S rRNA dan IS61109.
Primer forward 16S rRNA (5’ TTAAAAGCCGGTCTCAGTTC 3’), Primer
reverse 16S rRNA (5’ TTACCGACTTTCATGACGTG 3’). Primer forward
IS61109 (5’ CGTGAGGGCATCGAGGTGGC 3’), primer reverse IS61109 (3’
GCGTAGGCGTCGGTGACAAAA 5’).
27
Alat : Micropipette (1000 µL, 200 µL, 100 µL, 20 µL, 10 µL), aerosol barrier
tips (1000 µL, 200 µL, 100 µL, 20 µL, 10 µL), tube steril, gelas beker, gelas
ukur, mesin PCR (thermal cycler), laminar air flow, heat block, tissue, tube 1,5
mL, collection tube, QIAamp spin column, vortex, spin down, sentrifuge, BSC-
class IIA, microtube 0,2 ml, hot plate, tray gel dan comb, parafilm, chamber
elektroforesis, gel doc, lemari pendingin dan freezer cryo-container.
Bahan : dekon dahak, buffer AL, buffer AW1, buffer AW2, etanol (96-100%,
TE buffer, ddH2O (nuklease free water), PBS, proteinase K, buffer AL, etanol
absolut, buffer AW1, buffer AW2, buffer AE, 10x PCR amplification buffer, 5
mM MgSO4, 10 mm dNTP mixture, forward primer, reverse primer, PCR
grade water, Taq polymerase, buffer TAE 1x, buffer elektroforesis, gel red,
agarosa, DNA loading dye dan DNA leader.
Cara Kerja :
Persiapan Buffer AL
1. Semua pekerjaan dilakukan di dalam ruangan yang bersih
2. Buffer AL disiapkan pada suhu ruang
3. Buffer AL bertahan 1 tahun didalam suhu ruang (15-25oC), maka
ketika segel telah dibuka botol buffer AL agar diberi tanggal, bulan,
dan tahun
4. QIAGEN Protease atau Proteinase K jangan dicampurkan langsung
ke dalam buffer AL
Pengenceran Buffer AW1
1. Semua pekerjaan dilakukan di dalam ruangan yang bersih
2. Buffer AW1 disiapkan yang masih dalam bentuk konsentrat di dalam
suhu ruang
3. etanol (96-100%) disiapkan
4. Etanol 25 ml ditambahkan ke dalam konsentrat buffer AW1 sampai
pada tanda indikator yang terdapat dalam botol buffer AW1
5. Buffer AW1 bertahan 1 tahun dalam suhu ruang (15-25oC), maka
ketika sudah di campur dengan alkohol agar botol buffer AW1 diberi
tanggal, bulan dan tahun
Pengenceran Buffer AW2
28
1. Semua pekerjaan dilakukan di dalam ruangan yang bersih
2. Buffer AW2 disiapkan yang masih dalam bentuk konsentrat di dalam
suhu ruang
3. Etanol (96-100%) disiapkan
4. Etanol 30 ml ditambahkan ke dalam konsentrat buffer AW2 sampai
pada tanda indikator yang terdapat dalam botol buffer AW2
5. Buffer AW2 bertahan 1 tahun dalam suhu ruang (15-25oC), maka
ketika sudah di campur dengan alkohol agar botol buffer AW2 diberi
tanggal, bulan dan tahun
Pengenceran Primer
1. Semua pekerjaan dilakukan di dalam Laminar Air Flow
2. Primer disiapkan untuk diencerkan dengan menggunkan TE buffer
3. Kemasan Primer dilihat yang tercantum seberapa banyak TE buffer
yang digunakan untuk diencerkan (berbeda-beda untuk masing-
masing primer).
4. Tabung primer disiapkan dan dicampurkan TE buffer sesuai dengan
resep (dari nmol diubah menjadi µL, maka x100)
5. Tabung master disimpan didalam almari pendingin dengan suhu -
20oC
6. Tabung steril disiapkan dan dibuat perbandingan pengenceran antara
primer dengan nuklease free water yaitu 10: 90
7. Primer diambil 10 bagian (misalkan 1 µL) dari tabung master,
dimasukkan ke dalam tube steril, lalu ditambahkan 90 bagian
nuklease free water (misalkan 9 µL).
8. Tube steril ditutup dan dilabel dengan nama primer dan
tanggal/bulan/tahun.
9. Primer PCR disimpan didalam almari pendingin dengan suhu -20oC
Isolasi DNA
1. Semua pekerjaan dilakukan di dalam BSC-II dan dalam keadaan steril
2. Heat block dipanaskan hingga suhu 56oC
3. Larutan sampel: 200 µL sampel + 20 µL proteinase K + 200 µL buffer
AL, masukkan ke dalam tube 1,5mL lalu vortex
29
4. Larutan sampel diinkubasikan 56oC selama 30 menit ke heat block
sampai sel lisis dengan komplit.
5. Lalu larutan sampel diinkubasikan 95oC selama 15 menit ke heat
block. Jangan lebih dari suhu 95oC dan lebih dari 15 menit, karena
dapat menyebabkan kerusakan DNA.
6. Lalu di spin down
7. 200 µL etanol absolut ditambahkan ke dalam larutan sampel lalu di
vortex sekitar 15 detik lalu di spin down
8. 500 µL larutan sampel dimasukkan ke QIAamp spin column secara
hati-hati.
9. Kemudian disetrifuge 8000 rpm selama 1 menit
10. Supernatan dibuang dan collection tube diganti
11. 500 µL buffer AW1ditambahkan secara hati-hati.
12. Kemudian disentrifuge 8000 rpm selama 1 menit
13. Supernatan dibuang dan collection tube diganti
14. 500 µL buffer AW2 ditambahkan secara hati-hati.
15. Kemudian disentrifuge 14.000 rpm selama 3 menit
16. Collection tube diganti dengan tube 1,5 mL dan dilakukan secara
hati-hati.
17. 150 µL buffer AE ditambahkan
18. Inkubasi di suhu ruang selama 5 menit
19. Kemudian disentrifuge 8000 rpm selama 1 menit
20. Spin column dibuang, dan disimpan kedalam tube 1,5 mL yang telah
berisi DNA
21. Tabung yang telah berisi DNA dilabel, lalu simpan ke dalam
refrigerator (pada 4oC jika disimpan dalam jangka waktu seminggu;
pada suhu -20 sampai -80oC jika disimpan dalam jangka waktu lebih
dari 1 bulan).
Reaksi PCR
Persiapan Mix. (Biorad T100 PCR Thermal Cycler, Singapura)
1. tube steril disiapkan dan reagensia yang akan digunakan, diletakkan
dalam suhu ruang
30
2. Reagen dicampurkan (mix) yang terdiri dari:
10x PCR amplification buffer 2,5 µL
5 mM MgCl2 2 µL
10 mm dNTP mixture 0,5 µL
Primer forward 1 µL
Primer reverse 1 µL
PCR grade water 13,6 µL
Taq polymerase 0,4 µL
Taq polymerase di campurkan terakhir untuk mencegah rusaknya enzim
Taq Polimerase.
Persiapan sampel
1. DNA dikeluarkan dari hasil ekstraksi ke suhu ruang, kemudian
dibiarkan mencair
2. Lalu di spin down
Prosedur Pelaksanaan PCR
1. PCR mix dibuat sesuai dengan komposisi dan perhitungan
2. kontrol negatif dibuat dengan menambahkan free nuclease water
(ddH2O) sejumlah 4 µL ke dalam 21 µL PCR mix.
3. DNA template ditambahkan sebanyak 4 µL ke dalam masing-masing
PCR tube yang telah di aliquot sehingga akan memberikan volume
akhir masing-masing 25 µL. Penambahan DNA dilakukan di dalam
ruangan yang berbeda dengan ruangan mix.
4. Microtube yang telah berisi mix dan DNA template dimasukkan ke
dalam mesin PCR yaitu Thermal Cycler. Program dan siklus PCR yang
digunakan yaitu :
Inisiasi 95ᵒC 3 menit
Denaturasi 95 ᵒC 3 menit
Annealing 58 ᵒC 1 menit 30 detik
Elongasi 72 ᵒC 1 menit 30 siklus
Post elongasi 72 ᵒC 10 menit
Finish 4 ᵒC
5. Hasil PCR dilanjutkan dengan proses elektroforesis. Apabila
31
elektroforesis tidak dilakukan di hari yang sama maka sampel hasil
amplifikasi disimpan ke dalam almari pendingin dengan suhu 2-8ᵒC.
f. Elektroforesis (Biorad GT Cell, Singapura)
1. Gel agarose dibuat dalam 2%
0,8 gr serbuk agarosa + 40 ml larutan TAE 1x dipanaskan hingga
homogen + 4 µL Gel Red dan dituangkan ke dalam tray
2. Elektroforesis dikondisi pada 80 V, 400 mA selama 60 menit
3. Visualisasi digunakan dengan transiluminasi UV
4. Sampel, loading dye dan marker (DNA Ladder) disiapkan.
5. Lempeng agar dimasukkan ke dalam bagian tengah alat
elektroforesis.
6. Bagian sumuran (well) diatur berada dekat dengan tombol hitam
(katoda), dan jangan terbalik
7. Bak elektroforesis diisi dengan buffer elektroforesis sampai lempeng
agar terendam
8. Loading dye diambil dengan mikropipete sebanyak 1 µl dan letakkan
di atas parafilm
9. Sampel diambil sebanyak 9 µL dan campur hingga homogen dengan
loading dye yang sudah di letakkan di atas parafilm.
10. Campuran dimasukkan yang terdiri dari sampel dan blue juice yang
sudah homogen ke dalam sumuran (well).
11. DNA Ladder dimasukkan sebanyak 10 µL ke dalam sumuran
sebagai marker.
12. Alat elektroforesis ditutup dan disambungkan ke kabel merah dan
hitam pada alat elektroforesis dengan soket pada stavol sesuai
dengan warnanya
13. Elektroforesis ditunggu sampai selesai. Warna loading (biru)
jangan sampai melewati agar.
14. Buffer diganti dalam setiap pemakaian 3 kali proses elektroforesis.
Hasil Analisa Gel Elektroforesis
Hasil positif ditunjukkan oleh munculnya pita yang sejajar dengan pita
positif kontrol (±144 bp gen 16S rRNA dan ±245 bp gen IS6110).
32
g. Pemeriksaan Mikrokospis (dilakukan oleh Laboratorium Loka Litbang
Biomedis Aceh)
a. Pembuatan sediaan BTA
Alat : Kaca sediaan frosted, pensil 2B, ose, lampu spiritus
(bunsen) dan pinset.
Bahan : Alkohol 70%, botol pasir alkohol 70 % yang tertutup,
dan bahan pemeriksaan/dahak
Cara Kerja:
1. Beri nomor identitas tiap sediaan dengan menggunakan pensil
2B pada bagian frosted, pemegangan slide disarankan pada
kedua sisi untuk menghindari sidik jari.
2. Buat hapusan dahak dengan menggunakan ose yang sudah
dipanaskan sampai merah, kemudian didiamkan sampai dingin,
ambil sedikit dahak pada bagian yang kental dan kunung
kehijau-hijauan, kemudian oles secara merata dengan gerakan
spiral kecil dari dalam keluar (jangan terlalu tebal, jangan terlalu
tipis)
3. Masukkan ose kedalam botol yang berisi pasir dan alkohol 70%,
kemudian digoyang-goyangkan untuk melepas partikel yang
melekat pada ose, setelah itu ose dibakar kembali di atas spiritus
hingga kemerahan dan didinginkan, lanjutkan lngkah seperti
sebelummnya untuk sampel selanjutnya.
4. Sediaan dikeringkan di udara terbuka, jangan terkena sinar
matahari langsung/di atas api (butuh waktu 15 – 30 menit)
sebelum di fiksasi. Gunakan pinset untuk mengambil sediaan
yang sudah kering pada sisi berlabel dan sediaan menghadap
keatas. Lalu fiksasi (melewatkan sekitar 2 – 5 detik) sebanyak 3
kali.
5. Simpan dalam kotak sediaan, berdasarkan nonor urut
stiker/label. Bagi dahak yang akan dikultur , setelah dahak
diambil, maka pot dahak harus ditutup rapat kembali.
b. Pewarnaan Sediaan BTA
33
Alat :
Rak untuk pengecatan sediaan, rak pengering, pipet, pinset, timer,
lampu spiritus, air mengalir ( bisa air kran atau air dari botol yang ada
selangnya) dan beberapa rak cadangan.
Bahan :
Botol gelas berwarna coklat berisi larutan carbol fuchsin 0,3%,
botol gelas berwarna coklat berisi alkohol (HCl – alkohol 3 %), botol gelas
berwarna coklat berisi methylen blue 0,3% dan spiritus.
Cara Kerja : 1. Sediaan dahak yang telah di fiksasi diletakkan pada rak,
bagian hapusan dahak menghadap keatas. Buatlah jarak
antar sediaan untuk mencegah terjadinya kontaminasi
antar sediaan.
2. Teteskan larutan carbol fuchsin 0,3% pada hapusan
dahak sampai menutupi seluruh permukaan.
3. Panaskan sediaan hapusan dahak dengan cara dilalui pada
api bunsen, selama 5 menit, tetapi, jangan sampai
mendidih, akan merusak hapusan dahak cukup uapannya
saja. Lalu diamkan selama 5 menit dan dicuci dengan air
yang mengalir pelan hingga zat warna merah terbuang.
4. Sediaan dikeringkan di udara terbuka, jangan terkena
sinar matahari langsung/di atas api (butuh waktu 15 – 30
menit) sebelum di fiksasi., gunakan pinset untuk
mengambil sediaan yang sudah kering pada sisi berlabel
dan sediaan menghadap keatas. Lalu fiksasi (
melewatkan sekitar 2 – 5 detik) sebanyak 3 kali.
5. Simpan dalam kotak sediaan, berdasarkan nonor urut
stiker/label. Bagi dahak yang akan dikultur , setelah
dahak diambil, maka pot dahak harus ditutup rapat
kembali.
c. Pembacaan Sediaan BTA
Alat : Mikroskop binokuler, minyak emersi, kertas tissue, eter
alkohol, kertas lensa dan baki..
34
Cara Pembacaan : 1. Letakkan sediaan diatas meja spesimen mikroskop
2. Cari lebih dahulu lapang pandang objektif 10X
3. Teteskan 1 tetes minyak emersi diatas hapusan dahak,
tidak boleh menyentuh kaca slide
4. Periksa dengan lensa okuler 10X dan 100X.
5. Lakukan pembacaan sediaan apus secara sistemis untuk
memastikan mewakili seluruh bagian sediaan
6. Pembacaan dimulai dari ujung kiri ke ujung kanan
7. Cari Basil Tahan Asam (BTA) yang berbentuk batang
warna merah.
8. Cara menggeser sediaan menurut arah
9. Pembacaan hasil pemeriksaan dahak dilakukan dengan
menggunakan skala IUATLD
10. Catat pemeriksaan mikroskopik pada kolom hasil
pemeriksaan BTA
11. Kaca sediaan yang telah diperiksa kemudian diletakkan
secara terbalik diatas diatas kertas tissue beberapa lapis
dan disusun di sebuah baki, diamkan selama 1 malam
12. Bersihkan lensa mikroskop dengan kapas yang telah
dibasahi dengan eter alkohol
13. Simpan slide tersebut kedalam box slide selesai dibaca.
Tabel 2. Pembacaan dan Pelaporan Hasil BTA Mikroskopis Skala IUATLD
Apa yang terlihat Apa yang dilaporkan
Tidak ditemukan BTA minimal BTA negatif
1 – 9 BTA dalam 100 lapang pandang Tuliskan jumlah BTA yang
ditemukan / 100 lapang pandang
10 – 99 BTA dalam 100 lapang pandang 1+
1 – 10 BTA dalam 1 lapang pandang , 2+
periksa minimal 50 lapang pandang
Lebih dari 10 BTA dalam 1 lapang 3+
pandang , periksa minimal 20 lapang
pandang
35
8. Pemeriksaan Kultur (dilakukan oleh BBLK Jakarta)
a. Pembuatan media Lowenstein-Jensen
Alat : Timbangan analitik, spatula, gelas ukur, gelas beker, pipet
ukur 10 ml dan 25 ml steril, labu erlenmeyer 250 dan 100
ml, botol Mc cartney/serupa, elpiji/bunsen, power
pipet/pipetor, pH meter/kertas pH, autoklaf, inspisator,
blender stailess steel, magnetic stirrer bar steril, gelas ukur
100 ml, corong steril, kain kasa steril, gelas beker 1000 ml
steril, blender stainless steel dengan gelas steril dan sikat.
Bahan : Bahan dasar medium LJ dengan komposisi
- Potassium dihydrogen phospate 2,5 gr
- Magnesium sulfate heptahydrate 0,24 gr
- Tri-magnesium disitrate 14-hydrate 0,6 gr
- L-asparagin 2,6 gr
- Potato meal 30 gr
- Malachite green 2 %
- Aquadest 600 ml
- Glyserol 12 ml
- Telur homogen 1000 ml
Cara Kerja :
1. Homogenisasi telur
- Telur ayam segar (≤ 7 hari) dibersihkan dengan sikat lalu bilas dengan
air dan keringkan.
- telur direndam dengan etanol 70% selama 15 menit
- Tangan dibersihkan sebelum memegang telur (desinfektan)
- telur dipecahkan dan tampung dalam gelas beker steril
- telur diblender ± 2 detik sampai homogen ( jangan terbentuk
gelembung)
- telur disaring dengan corong steril yang telah diberi kasa steril
- dengan menggunakan gelas ukur steril hasil saringan diukur sampai
didapatkan 1 liter ( catatan disarankan untuk tidak menggunakan telur
36
yang didapat dari perternakan besar, lebih disarankan dari peternakan
kecil, homogenisasi telur disarankan dilakukan dalam biosafety
cabinet untuk mencegah kontaminan udara)
2. Pembuatan media LJ
a. garam-garam dilarutkan, L-Asparagine (dan potato meal) media LJ
dalam 600 ml aquadest, pH 6,8-7,0
b. Ditambah 12 ml glycerol dan kemudian 20 ml larutan malachite green
2%
c. Setelah tercampur sempurna, disterilkan dengan otoklaf selama 15
menit pada suhu 121oC
d. Didinginkan sampai suhu ± 50 oC.
e. Ditambahkan telur homogen 1 liter yang telah dipersiapkan secara
steril
f. perlahan-lahan dicampur dan dihindari terbentuknya gelembung.
g. Kemudian dituang dalam Mc Cartney steril 6 – 8 ml
h. ditutup secara rapat dan diletakkan dengan kemiringan 30 oC dalam
inspisator yang telah dipanaskan sampai suhu 85 oC dan koagulasi
selama 45 menit
i. Dikeluarkan dari inspisator dan didiamkan sampai suhu kamar
j. Bila kualitas media tidak baik (perubahan warna, berlubang-lubang
atau gelembung-gelembung pada permukaan) maka media tersebut
tidak dapat digunakan
k. Catatan:
i) Media LJ dapat memakai potato meal atau tidak.
ii) Jika membuat dari media komersial, ikuti petunjuk dari pabrik
iii) Untuk membuat larutan malachite green tersendiri. Lakukan
sebagai berikut:
- 2 gr malachite green kristal ditimbang dalam gelas kimia
- digerus sampai halus dan ditambah aquadest 100 ml, campur
- ditempatkan pada stirring hot plate sampai terlarut sempurna
- lalu disaring dengan kertas saring whatman no. 4.
- Disimpan dalam botol coklat
37
- Larutan tahan 1 bulan pada suhu kamar.
3. Pembuatan Larutan yang diperlukan:
a. Pembuatan larutan NaOH 4% (1 N)
- 40 gr pelet NaOH kering ditimbang dengan cepat
- dimasukan dalam air di beker dan dibiarkan dingin
- dipindahkan ke botol dan diautoclaf pada suhu 121 oC selama 15
menit
- Simpan di suhu ruang
b. Pembuatan 0,067 M PBS pH 6,8
- Na2HPO4 anhidrat 9,47 gr, dilarutkan dalam 1000 ml aquadest atau
Na2HPO4 12H2O sebanyak 23,68 gr dalam 1000 ml aquadest.
- KH2PO4 ditimbang sebanyak 9,07 gr dalam 1000 ml aquadest
- dicampur dalam botol bertutup ulir
- Ditambah asam atau basa agar pH mencapai 6,8
- Dimasukkan kedalam autoclave pada suhu 121 oC selama 15 menit
- Simpan di lemari es
- Catatan: PBS dibuat bentuk konsentrat 10x (larutan kerja dibuat
dengan jalan menambahkan 1 bagian volume PBS 10x dengan 9
bagian volume aquadest.
c. Pembuatan HCl 2 N
- Kedalam volubemetrik dimasukkan 167 ml aquadest
- ditambah 33 ml konsentrat HCl (12 N atau 36%) dengan pipetor
secara pelan-pelan dalam air (hindari percikan dan jangan
menambah air pada asam)
- Beaker akan menjadi panas lalu dibiarkan dingin
- dimasukkan kedalam Autoclaf pada suhu 121 oC selama 15 menit
simpan disuhu kamar
- Catatan: HCl adalah asam keras (jika tumpah segera siram dengan
air sebanyak mungkin)
d. Pembuatan Indikator phenol red 8 mg
- Dengan menggunakan magnetix stirrer bubuk phenol red 8 mg
dilarutkan dalam 20 ml 4% NaOH.
38
- Lalu dipindahkan dalam gelas ukur, dan ditambah aquadest sampai
1000 ml
- Simpan di suhu kamar.
e. Pengolahan dengan NaOH 4%
- Jika dahak lebih dari 10 ml, diambil 10 ml bagian purulen,
berdarah dan mukoid, dituang dalam tabung sentrifuse 50 ml.
- ditambahkan NaOH 4% sama banyak
- Dicampur dengan vortex mixer sampai homogen. Didiamkan
dalam suhu ruang masa kontak dahak dengan NaOH dibatasi 15
menit.
- ditambahkan larutan PBS 50 ml dengan pipet (jangan menuang
langsung PBS ke dalam tabung karena beresiko timbulnya cemaran
silang)
- tabung sentrifuge min 3000 g ditutup rapat selama 15-20 menit
- dibiarkan pada suhu ruang selama 15 menit untuk mengendapkan
aerosol
- supernatant dituang dalam wadah bersisi desinfektan. Diusap
dengan 95% etanol (jangan sampai masuk ke dalam tabung)
- Ditambahkan PBS 1 ml dalam sendimen dikocok agar homogen
- Untuk menguji pH diteteskan 1 tetes phenol red indikator dan
segera dinetralisasi dengan 2 N HCL tetes demi tetes. pH netral
akan terlihat dengan perubahan warna merah menjadi kuning.
- Sediaan siap diinokulasi, dibuat dua sediaan untuk diwarnai dengan
Z-N pada sisa inokulan
- Catatan: jika dalam evaluasi ternayata 4% NaOH terlampau kuat,
ganti dengan NaOH 2%.
2. Inokulasi bahan pada media :
a. Dipipet 100 mikron sedimen ke dalam media LJ dibuat duplo
b. botol ditutup, tetapi jangan terlalu rapat
c. disebarkan secara merata bahan pemeriksaan tersebut di atas
permukaan media dengan cara menggerak-gerakkan botol
39
d. botol-botol diletakkan pada rak dengan kemiringan 30® selama 24
jam pada Incubator dengan suhu 35 - 37°C
e. Setelah 24 jam» dikencangkan tutup botol dan diletakkan
botol pada rak tabung dengan posisi tegak dan
dilanjutkan inkubasi. Jika memakai inkubator C02,
dilihat keterangan sebelumnya
f. Diamati pertumbuhan M. tuberculosis setiap minggu,
Pengamatan dilakukan sampai S minggu. Hasil negatif dinyatakan
Jika tak ada pertumbuhan setelah 8 minggu. Untuk spesimen yang
berasal dari kasus yang telah mendapat OAT atau paudbecilier,
dianjurkan diinkubasi sampai 12 minggu Tanda khas koloni M,
tuberkulosis adalah :
- kemudian Akan tampak pertumbuhan dalam waktu 3-4 minggu
- Koloni bewarna putih kekuning-kuningan (buiT cotoured),
permukaan kering dan rapuh dengan tepi yang tidak beraturan
(seperti bunga kol)
- Konfirmasi dengan membuat sediaan dari koloni dengan
pewarnaan Ziehl- Neelsen. M. tuberculosis akan memberikan
gambaran BTA yang bergerombol berbeniuk khas (seperti cord,
typical cord). Bila hasil BTA negatif, tidak dilanjutkan dengan
subkultur
g. Pengamatan pertumbuhan koloni dilakukan setiap minggu
h. dicatat hasil pengamatan setiap minggu pada buku catatan kultur
6. Subkultur Isolat M. tuberculosis
Subkultur diperlukan untuk memurnikan koloni dan meremajakan kuman
sebelum dilakukan uji kepekaan terhadap OAT, uji identifikasi dan jika
akan disimpan pada -70°C
Alat dan bahan yang diperlukan :
1. Media LJ atau Ogawa
2.Tabung reaksi dengan tutup ulir
3. Glass beads, diameter 1.5-3 mm
4.Vortex mixer
40
5.Aquades steril
6. Micropipette 100 mikron
7. Tip mikropipet
Cara kerja:
1. dipilih botol dengan pertumbuhan koloni yang paling baik untuk
dilakukan subkultur. Minimal satu untuk tes niaclrt, satu untuk uji PNB,
satu untuk uji kataiase, satu untuk uji nitrat, satu untuk disimpan pada -70
eC dan satu untuk uji kepekaan.
2. koloni diambil sebanyak 1 (satu) sengkelit penuh
3. lalu dimasukkan dalam tabung reaksi yang telah diisi dengan 1 ml
aquadest steril
4. tabung reaksi ditutup kembali
5. dicampur dengan menggunakan vortex mixer selama ± 1 menit
6. didiamkan minimal selama 15 menit
7. diambil supernatan sebanyak 100 pi dengan mikropipet
8. diinokulasi dalam botol Mc Cartney yang telah berisi media U
9. disebar secara merata bahan pemeriksaan tersebut di atas permukaan
media dengan cara menggerak-gerakkan botol
10. butir 7 - 9 dilakukan untuk botol lainnya
11. botol-botol pada rak diletakkan dengan kemiringan 30° selama 24 Jam
pada Incubator dengan suhu 35 - 37°C
12. Setelah 24 jam, tutup botol dikencangkan dan letakkan botol pada rak
tabung dengan posisi tegak dan lanjutkan Inkubasi
13. diamati pertumbuhan tiap minggu
Tabel 3. Pembacaan Hasil Kultur
PEMBACAAN PENCATATAN
> 500 koloni 4+
200 - 600 kolohi 3+
100 - 200 koloni 2+
20-100 koloni 1*
1 - 1 9 koloni Jumlah koloni
Tidak ada pertumbuhan Negatif
41
Keterangan:
- Bila terdapat kontaminasi pada kultur dilaporkan segera dan ulangi
pembuatan kultur
- Bila kultur POSITIF dan pertumbuhan dinilai sebagai M.tb,
laporkan segera pada pihak yang berkepentingan
- Pada minggu ke 4 dapat dibuat laporan sementara
- Pada minggu ke 8 dibuat laporan akhir (final)
M. tuberculosis mempunyai sifat:
- Tidak terjadi pembahan warna koloni setelah terpapar cahaya
- Uji akumulasi niasin positif
- Uji reduksi nitrat positif
- Uji katalase tahan panas 68°C negatif'
- Uji PNB negatif
Jika kondisi laboratorium masih tidak memadai, identifikasi M. tubercuiosis
minimal didasarkan pada hasil pewarnaan, kecepatan tumbuh morfologi koloni,
uji PNB dan salah satu uji dari uji niasin, reduksi nitrat, katalasa tahan panas.
ldentifikasi M. tuberculosis
Identifikasi M.tuberculosis harus dikerjakan pada isolat subkultur yang
berumur 2-3 minggu, jangan memakai kultur awal. Bila koloni
terkontaminasi, lakukan dekontaminasi dan sub kultur ulang. Tidak
satupun uji tunggal yang dapat dengan pasti membedakan M. tuberculosis
dengan mycobacteria lainnya. Oleh karena itu, selain pengamatan
morfologi koloni dibutuhkan satu atau lebih uji identifikasi lain. Beberapa
uji yang dianjurkan adalah sebagai berikut:
1. Uji Niasin
Semua mycobacteria menghasilkan asam nikotinat waktu tumbuh.
Kebanyakan galur M. tuberculosis dan beberapa galur M. slmlae dan M.
ohelonae tidak mampu memetabolisme asam nikotinat tersebut Asam
nikotinat terakumulasi dalam media. Jumlah asam nikotinat yang
dibentuk terbanyak pada media LJ dan bukan media lain. Karena Itu uji
niasin memerlukan isolat yang koloninya penuh pada media U. Aerasi
42
saat kultur sangat penting dalam metabolisme niasin, karena itu tutup
tabung kultur harus sedikit longgar selama proses inkubasi
2. Uji Niasin dengan Paper Strip
a. koloni dalam botol LJ ditambah aquadest ± 2 ml
b. botol dimiringkan hingga koloni terendam
c. diautoclave pada suhu 1210C selama 1 jam
d. diambil 1 ml ekstrak, dimasukkan dalam tabung reaksi
e. dimasukkan paper strip (tersedia kit komersial) dan tunggu 15-20
menit pada suhu kamar.
Pembacaan
Positif: warna kuning
Negatif: tidak berwarna
3. Uji Paranitro-Benzoic Acid (PNB)
Alat dan bahan:
1. Media LJ yang mengandung PNB (cara pembuatan media
mengandung PNB dapat dilihat pada cara pembuatan media dengan
obat)
2. Inkubator
3. Rak tabung
Cara kerja:
1. diambil 100 ul suspensi 1 mg/ml stok dan diinokulasi pada media
LJ yang mengandung PNB dan satu tabung tanpa PNB
2. botol ditutup, tetapi jangan terlalu rapat
3. Disebar secara merata bahan pemeriksaan tersebut di atas
permukaan media dengan cara menggerak-gerakkan botol
4. botol-botol diletakkan pada rak dengan kemiringan 30° selama 24
jam pada incubator dengan suhu 35 - 37°C
5. Setelah 24 jam, tutup botol dikencangkan dan letakkan botol pada
rak tabung dengan posisi tegak dan lanjutkan Inkubasi
6. Dilakukan pengamatan pertumbuhan M. tuberculosis setiap
minggu, pengamatan dilakukan sampai 8 minggu
43
7. Jika sesudah minggu ke 4 tidak terlihat adanya koloni, dilanjutkan
inkubasi sampai minggu ke 8 sebelum hasilnya dinyatakan tidak
ada pertumbuhan
8. dicatat hasil pengamatan setiap minggu pada buku catatan kuitur
9. Pertumbuhan M. tuberculosis akan dihambat oleh PNB
Tabel 4. Pertumbuhan Mycobacterium tuberculosis
Organisme Hari Pigmen Morfologi koloni pada LJ
Tumbuh Terang Gelap
Complex. 10-21 Buff Buff Tips, Transparan,
Avium mplex sampai sampai permukaan halus; kadang-
kuning kuning kadang seperti kubah;
beberapa diantaranya
permukaannya kasar dan
berkeriput; tepi meninggi
Bovis 25-90 Tak Tak Permukaan kasar; kering,
Berwarna Berwarna rapuh; bertumpuk ditengah
sampai sampai dengan tepi tipis berjejas;
buff buff kadang-kadang menyebar
Chelonae 3-7 Buff Buff Membulat, permukaan
halus, seperti anyaman,
tepi rata atau bergerigi,
beberapa kasar dan keriput
Forfuifum 3-7 Buff Buff Permukaan halus, seperti
kubah; kadang-kadang
kasar dengan filament
bercabang pada tepinya
Gastrii 10-21 Tak Tak Membulat, permukaan
berwarna berwarna halus, konveks, mengkilat
sampai sampai
buff buff
Gordonae 10-25 Kuning Kuning Membulat, permukaan
sampai sampai halus, konveks, kuning
oranye oranye sampai oranye, mengkilat
M.Konsasi 10-21 Kuning Buff Permukaan halus
meninggi; beberapa kasar
dan keriput
M. Marinum 5-14 Kuning Buff Membulat, permukaan
halus; beberapa keriput
M.dcr 10-14 Kuning Kuning Membulat, permukaan
pulaceum halus, kuning, lembab
M. simiae 7-14 Kuning Buff Permukaan halus, seperti
kubah
Szulgai 14-28 Kuning Kuning Permukaan halus sampai
sampai pada kasae, tepi tak beraturan
oranye 37oC
44
M. Terrae 10-21 Buff Buff Membulat, halus sampai
kasar, mengkilap, beberapa
tak berwarna
Tuberculosis 12-28 Buff Buff Kasar, kering, rapuh,
tengah bertumpuk dengan
tepi berjejas tipis; kadang-
kadang tipis dan menyebar
M. Xenopi 28-42 Kuning Kuning Kecil, seperti kubah,
kuning, halus dan kasar
45
Untuk mendapatkan konsentrasi Pyrazinamid (30, 150, 750 ug/ml) dilakukan
prosedur berikut :
1. 100 mg Pyrazinamid dilarutkan dalam 10 ml Aquadest steril, sehingga
didapatkan konsentrasi Ethambutol 10.000 ug/ml (larutan D).
2. P 30 ug: 0.3 ml larutan D ditambah dengan 100 ml medium.
3. P 150 ug: 1.5 ml larutan D ditambah dengan 100 ml medium.
4. P 750 ug: 7.5 ml larutan D ditambah dengan 100 ml medium.
Cara buat suspensi kuman
Suspensi kuman di buat dengan prosedur berikut :
1. 1 ose koloni kuman dari medium Ogawa 3% diambil dan dimasukkan ke
dalam NaCl fisiologis, diaduk hingga homogen, hingga dicapai kekeruhan
dengan standart Mc Farland I (larutan A).
2. Pengenceran 1/1000 dilakukan dengan cara 0.01 ml larutan A dimasukkan ke
dalam 10 ml NaCl fisiologis, sehingga didapatkan kuman dengan
konsentrasi pengenceran 1/1000 (larutan B), larutan ini akan digunakan
sebagai kontrol.
3. Untuk larutan obat, digunakan suspensi kuman dengan pengenceran 1/100, di
lakukan dengan cara 0.1 ml larutan A dan dimasukkan ke dalam 10 ml NaCl
fisiologis (larutan C).
4. Pada medium kontrol,di masukkan 2 tetes suspensi kuman dengan
konsentrasi 1/1000 (larutan B) dan pada medium obat dimasukkan 2 tetes
suspensi kuman dengan konsentrasi 1/100 (larutan C).
5. Pertumbuhan kuman dilihat 3-4 minggu.
6. Tingkat resistensi dihitung berdasarkan perbandingan antara jumlah koloni
yang tumbuh pada medium kontrol dengan medium tanpa obat (metoda
proporsional).
46
1. Kultur diamati pada hari ke-7 untuk golongan yang tumbuhnya cepat dan
pada minggu ke-4 untuk golongan yang tumbuh lambat.
2. Koloni yang tanpak pada media diperiksa dengan dibuat preparat dan
diwarnai dengan Ziehl Neelsen untuk memastikan BTA.
3. Jika sudah minggu ke-4 tidak terlihat adanya koloni dilanjutkan inkubasi
selama 8 minggu sebelum hasilnya dinyatakan negatif.
Pencatatan dan pelaporan hasil (interprestasi)
Pelaporan dilakukan bukan hanya jumlah koloni yang tumbuh, tetapi juga
bentuk tumbuhnya. Menurut (Aditama & Luthni ,2002) pelaporan hasil biakan
menurut WHO, Technic Guide 67 adalah :
47
i. Pilih bagian vena mediana cubiti atau cephalica. Lakukan perabaan (palpasi)
untuk memastikan posisi vena. Vena teraba seperti sebuah pipa kecil, elastis
dan memiliki dinding tebal.
j. Jika vena tidak teraba maka lakukan pengurutan dari arah pergelangan ke
siku, atau kompres hangat selama 5 menit pada daerah lengan.
k. Kulit dibersihkan pada bagian yang akan diambil dengan kapas alkohol 70%
dan biarkan kering, dengan catatan kulit yang sudah dibersihkan jangan
diraba lagi.
l. Vena di tusuk dengan posisi lubang jarum menghadap ke atas. Jika jarum
telah masuk ke dalam vena, akan terlihat darah masuk kedalam semprit
(flash). Usahakan sekali tusuk vena, lalu torniquet dilepas.
m. Setelah volume darah dianggap cukup, pasien diminta membuka kepalan
tangannya.
n. Kapas di letakkan di tempat suntikan lalu segera lepaskan / tarik jarum. Tekan
kapas beberapa saat lalu plester selama ± 15 menit.
o. Sampel darah dimasukkan dalam tabung reaksi
48
Pemeriksaan TNF-α menggunakan ELISA. Pemeriksaan IFN-γ menggunakan
IGRA
Pemeriksaan TNF-α
Alat : ELISA reader dan ELISA Washer merk Thermoscientific
Bahan : Kit ELISA
Cara Kerja :
a. Reagen, sampel dan standart disiapkan
b. 100 µL standart ditambahkan ke semua well inkubasi 2 jam di suhu 37°C
c. Homogenkan dan 100 uL reagen A Detection ditambahkan, diinkubasi selama
1 jam pada suhu 37°C
d. Homogenkan dan dicuci sebanyak 3 kali
e. 100 µL l reagen B Detection ditambahkan, diinkubasi selama 30 menit pada
suhu 37°C
f. Homogenkan dan dicuci sebanyak 5 kali
g. Substrat solution ditambahkan sebanyak 90 µL, diinkubasi selama 15-25 menit
pada suhu 37°C
h. 50 µL stop solution ditambahkan dan baca pada panjang gelombang 450 nm
Pemeriksaan IGRA
QuantiFERON-TB dibagi kedalam dua tahap besar, pertama diinkubasi darah dan
pemisahan plasma, lalu kedua pemeriksaan IFN-γ dengan metode ELISA.
a. Tes ini menggunakan tabung khusus untuk mengumpulkan darah. Ada tiga
tabung yang digunakan yaitu Nil Control (tutup abu) sebagai kontrol negatif, TB
Antigen (tutup merah) sebagai tabung tes, dan Mitogen Control (tutup ungu)
sebagai kontrol positif (opsional). Kontrol positif digunakan untuk memastikan
kondisi imun tubuh pasien, dan memastikan penanganan sampel serta inkubasi
dilakukan dengan benar
b. Darah vena diambil lalu di shaker dan diinkubasi selama 16 sampai 24 jam pada
suhu 37oC.
c. Darah di sentrifuge, lalu plasma dipisahkan kedalam tabung plasma.
49
e. Hasil tes dikatakan positif jika respon IFN-γ terhadap tabung TB Antigen secara
indeterminate (tak tentu) ketika respon yang sama juga terjadi pada tabung TB
Antigen.
g. Pola seperti ini dapat terjadi karena jumlah limfosit tidak cukup, pengurangan
aktivitas limfosit karena penanganan spesimen yang tidak tepat, tidak benar
ketika memasukan darah / pengocokan tabung mitogen, atau ketidakmampuan
sel limfosit pasien untuk menghasilkan IFN-γ.
10. Penyimpanan BBT untuk penelitian lebih lanjut
Penyimpanan BBT berupa darah/pbmc dan hasil kultur TB positif dilakukan di
BBLK Jakarta dan laboratorium Loka Litbang Biomedis Aceh.
50
3. Masukkan darah kedalam tabung 15 ml yang sudah berisi ficol tadi,
dengan menggunakan pipet 1 ml secara perlahan, sehingga terbentuk 2
lapisan ficol dan darah.
4. Sentrifuge selama 30 menit (tanpa jeda) pada 100 x g di suhu 4 0C
5. Ambil lapisan buffy coat secara hati hati menggunakan mikropipet 1 ml
6. Pengambilan lapisan harus dilakukan segera tanpa jeda (max. 10 menit)
7. Cuci (centrifuge dalam 100 x g selama 10 menit) dua kali dengan 10 ml
PBS steril atau media elang dimodifikasi Dulbecco steril. Perkiraan hasil
sel dari 4 ml darah bervariasi antara 107-108.
Catatan Penting:
1. Gunakan darah heparinised yang baru dikumpulkan. Jika plasma perlu
digunakan untuk tujuan lain, pindahkan plasma dan tambahkan volume
yang sama dengan media Dulbecco’s modified eagle sebelum proses
selanjutnya
2. Rasio antara Ficoll Histopaque dan darah harus 1: 1 untuk darah
manusia. Rasionya bisa berbeda untuk pemurnian PBMC spesies lain.
3. Ficoll Histopaque disimpan pada suhu 4 ° C. Sebelum penggunaan
tabung harus didiamkan pada suhu kamar selama 1-2 jam
51
5. Eppendorf tube 5 ml
Peralatan
1. Mikroskop
2. Mikropipet
Prosedur Kerja
1. Haemocytometer dan cover glass dicuci bersih menggunakan aqua steril dan
dikeringkan
2. Trypan blue sebanyak 80 µl dimasukkan kedalam tabung eppendorf 5 ml
3. Diambil 20 µl PBMC yang telah disentrifugasi kedalam eppendorf 5 ml yang
berisi trypan blue
4. Lakukan penghitungan sel menggunakan haemocytometer
5. Hitung jumlah sel menggunakan rumus :
Jumlah sel TOTAL = jumlah sel terhitung x 5 x 5 x 10.000
6. Jumlah sel yang diharapkan adalah 30 juta sel ( 2,7x10 7), jika sel yang diperoleh
kurang dari jumlah tersebut, maka tube penyimpanan krioreservasi disesuiakan
jumlahnya sehingga memenuhi 30 juta sel.
Penyimpanan Sampel PBMC/Cryoreservasi
Bahan dan Reagen
1. FBS ( fetal bovine serum)
2. DMSO (dimethyl sulphoxide)
3. Nitrogen cair
4. Cryotube
5. Isopropanol
Peralatan
1. Tabung falcon 50 ml
2. Pipet ukur dan rubber bulb
3. Mr. Frosty
4. Frezer -80oC
5. Sentrifuge
Prosedur
1. FBS dan 10% DMSO (jika membuat freezing medium sebanyak 5 ml, maka : 4,5
ml FBS ditambahkan dengan 0,5 ml DMSO).
52
2. Tabung falcon berisi PBMC di letakkan dalam wadah es, kemudian
ditambahkan kedalam falcon tersebut freezing medium dengan rasio 1 ml
freezing medium : 10 juta sel/ml.
3. Campuran dipindahkan didalam cryotube dan diletakkan didalam mr. Frosty
yang telah diisi isopropanol, kemudian disimpan didalam frezer -80oC selama
1x24 jam
4. Pemindahan cryotube ke cryotank dilakukan dengan hati-hati dan menggunakan
topeng/mask tertutup serta sarung tangan khusus untuk pemindahan sampel ke
cryotank.
Pengecekan rutin pada cryotank harus sering dilakukan samapai waktu
pemakaian sampel kembali.
I. Analisis Data
Data yang dihasilkan akan disajkan secara deskriptif meliputi karakteristik
penderita TB paru dan hasil pemeriksaan.
1. Distribusi frekuensi karakteristik penderita TB paru
2. Distribusi frekuensi status gizi penderita TB paru
3. Distribusi frekuensi penyakit penyerta penderita TB paru
4. Distribusi frekuensi pengetahuan, sikap, dan perilaku penderita TB paru
5. Distribusi frekuensi lingkungan fisik penderita TB paru
6. Distribusi frekuensi diagnosis TB paru dengan pemeriksaan mikroskopis,
PCR, dan kultur
7. Distribusi frekuensi sensitivitas M.Tb terhadap OAT
8. Distribusi frekuensi penderita TB paru yang mengalami diabetes melitus
9. Distribusi frekuensi respon imun penderita TB paru dengan diabetes dan
tanpa diabetes
10. Distribusi frekuensi kesembuhan penderita TB paru
J. Persetujuan Etik
Penelitian ini mengikutsertakan manusia sebagai subyek penelitian sehingga
dibutuhkan pesetujuan etik dari Komisi Etik di Badan Litbangkes. Persetujuan etik
diperoleh dari Komisi Etik Penelitian Kesehatan, Badan Litbangkes dengan nomor
LB.02.01/2/KE.162/2018.
53
BAB IV
HASIL
2 Umur (tahun)
< =30 tahun 51 19,7
31-45 tahun 83 31,7
46-60 tahun 83 31,7
>=60 tahun 45 17,2
Jumlah 262 100
3 Pendidikan
Tidak pernah sekolah 14 5,3
Tidak tamat SD 29 11,1
Tamat SD 58 22,1
Tamat SLTP 46 17.6
54
No Variabel Kota Banda Aceh dan Kab. Ahceh
Besar
Tamat SLTA 90 34,4
Tamat D1/D2/D3 25 9,5
Jumlah 262 100
4 Pekerjaan
Tidak bekerja 82 31,3
Petani 35 13,4
Buruh 32 12,2
Pedagang 18 6,9
Swasta 47 17,9
Lainnya 48 18,3
Jumlah 262 100
5 Kategori pasien
Pasien baru 212 80.9
Pasien lama 50 19,1
Pasien yang pernah berobat 6 bulan
(kambuh) (22=8,4%)
Pasien yang putus berobat (28=10,7)
Jumlah 262 100
55
Puskesmas Lhoknga, Puskesmas Lembah Seulawah, Puskesmas Kuta Malaka masing
masing merawat 4 penderita. Puskesmas Jaya Baru, Puskesmas Leupung, Puskesmas Ie
Alang, Puskesmas Mesjid Raya, Puskesmas Blang Bintang masing-masing merawat 3
penderita. RS ZA, Puskesmas Jantho masing-masing merawat 2 penderita, Puskesmas
Lampaseh, dan Puskesmas Peukan Bada masing-masing merawat 1 penderita,
56
Tabel 7. Konsumsi zat gizi responden penderita TB paru
di Kota Banda Aceh dan Kabupaten Aceh Besar, Provinsi Aceh tahun 2018
Tahap dan konsumsi zat gizi Statistik
Minimum Maksimum Rata- Range Standar
rata Deviasi
Tahap 1 (n=108)
- Energi(kcal) 145,33 4.452,23 1.424,93 4306,90 841,33
- Karbohidrat(gram) 23,67 708,13 215,11 684,47 125,66
- Protein(gram) 3,50 195,60 56.10 192,10 36,40
- Lemak(gram) 1,37 162,00 40,59 160,63 33,03
Tahap 2 (n=131)
- Energi(kcal) 408,27 4.706,43 1.425,23 4.298,17 699,62
- Karbohidrat(gram) 53,93 798,53 224,37 744,60 125,22
- Protein(gram) 10,23 253,87 50,67 243,63 28,27
- Lemak(gram) 3,80 109,07 36,30 105,27 22,92
Tahap 3 (n=127)
- Energi(kcal) 205,29 3775,60 1.345,63 3.570,31 639,11
- Karbohidrat(gram) 27,05 704,20 212,66 677,15 112,82
- Protein(gram) 8,25 471,90 52,77 463,65 45,64
- Lemak(gram) 0,90 165,40 34,80 164,50 25,62
Berdasarkan tabel 7, dapat dilihat rata-rata konsumsi energi paling tinggi adalah
tahap 2 (1.425,23), sedangkan yang paling rendah pada tahap 3 (1.345,63). Rata-rata
konsumsi energi pasien TB tahap 1 dan 2 sama, namun pada tahap ketiga berkurang.
Konsumsi energi pasien TB tahap 1 berkisar antara 583 – 2.266 kkal, tahap 2 antara 725
– 2.124 kkal dan tahap 3 antara 706 – 1.984 kkal. Konsumsi zat gizi lain seperti
karbohidrat, protein, dan lemak mempunyai perbandingan yang tidak jauh berbeda
antara ketiga tahap pengobatan. Perbedaan konsumsi dapat dilihat pada nilai minimum
dan maksimum baik energi, karbohidrat, protein maupun lemak.
57
Tabel 8. Penyakit penyerta pada responden gambaran penderita TB paru
di Kota Banda Aceh dan Kabupaten Aceh Besar, Provinsi Aceh tahun 2018
No Variabel Kota Banda Aceh dan
Kabupaten Aceh Besar
N %
1. Penyakit Penyerta
Diabetes mellitus 74 28,2
Bukan Diabetes mellitus 188 71,7
Jumlah 262 100
58
responden yang sikapnya kurang baik terhadap penyakit TB paru. Oleh karena itu,
diperlukan tindakan atau penyuluhan dan pengawasan yang lebih dari pertugas
kesehatan, pengawas minum obat (PMO) atau pendamping lainnya.
Tabel 10. Kondisi lingkungan fisik (kamar, dapur dan ruang keluarga gambaran
penderita TB paru di Kota Banda Aceh dan Kabupaten Aceh Besar, Provinsi Aceh
tahun 2018
Kategori Kepadatan Kondisi kamar Kondisi Kondisi ruang
Kamar tidur dapur keluarga
N % N % N % N %
Baik 106 40,5 217 82,8 215 82,1 222 84,7
Kurang 156 59,5 45 17,2 47 17,9 40 15,3
Total 262 100 162 100 262 100 262 100
Berdasarkan tabel 10, kondisi lingkungan fisik penderita TB paru yang dianalisis
meliputi kondisi kamar dan keadaan rumah. Berdasarkan data dalam Tabel 5 di bawah
ini, 40,5 % responden memiliki kondisi kepadatan kamar (hunian) yang baik, 82,8%
responden memiliki kondisi kamar tidur yang baik, 82,1% responden memiliki kondisi
dapur yang baik dan 84,7% responden memiliki kondisi ruang keluarga yang baik.
Tabel 11. Kondisi lingkungan (lantai, dinding, plavon, lingkungan sekitar, bahan
bakar masak) responden gambaran penderita TB paru di Kota Banda Aceh dan
Kabupaten Aceh Besar, Provinsi Aceh tahun 2018
59
No Variabel Kota Banda Aceh dan
Kabupaten Aceh Besar
Jumlah 262 100
3 Jenis plavon
Beton 8 3,1
Gypsum 6 2,3
Asbes 11 4,2
Kayu/Triplek 147 56,1
Tidak ada 90 34,4
Jumlah 262 100
4 Keadaan lingkungan sekitar
Kumuh 22 8,4
Tidak 240 91,6
Jumlah 262 100
5 Penggunaan bahan bakar untuk masak
Kayu bakar 13 5
Arang 1 0,4
Minyak tanah 7 5,7
Gas 241 92
Listrik 0 0
Jumlah 262 100
Berdasarkan tabel 11, dapat dilihat responden yang rumahnya dengan lantai
keramik/ubin/marmer/semen mencapai 84,4 % yaitu 221 responden. Selebihnya yaitu
40 responden (15,3 %) lantai rumah terbuat dari papan/bamboo/rotan/anyaman bamboo
dan hanya 1 responden yang lantai rumahnya tanah. Sedangkan untuk kondisi dnding
rumah, 187 responden berdinding tembok, 74 responden berdinding kayu
(papan/triplek).
Untuk kondisi plavon rumah, 8 responden plavon rumah terbuat dari beton, 6
rsponden dengan plavon rumah terbuat dari gypsum, 11 responden plavon rumahnya
terbuat dari asbes, dan 147 responden yang plavon rumahnya terbuat dari kayu atau
triplek dan 90 responden tidak memiliki plavon rumah.
Untuk kondisi lingkungan dalam kategori kumuh atau tidak kumuh, hasil
analisis data menunjukkan hanya 22 responden tinggal di wilayah yang kumuh
sedangkan 240 responden menetap di wilayah yang tidak kumuh. Secara umum
responden yang terlibat dalam kegiatan ini, menggunakan gas sebagai bahan bakar
untuk memasak, hanya 13 responden yang memasak menggunakan kayu bakar, 1
responden menggunakan arang dan 7 responden menggunakan minyak tanah.
60
F. Keakuratan Diagnosis TB Paru Menggunakan Beberapa Metode Pemeriksaan
(Mikroskopis, PCR, dan Kultur).
Untuk mengetahui bagaimana keakuratan diagnosis TB paru digunakan
beberapa metode pemeriksaan seperti mikroskopis, PCR dan kultur. Sampel dalam
pemeriksaan ini adalah dahak responden penderita TB paru. Berdasarkan hasil
pemeriksaan diperoleh data terkait hasil pemeriksaan yang dapat dilihat pada tabel 12.
Tabel 12. Keakuratan diagnosis TB dengan pemeriksaan mikroskopis, PCR, dan
kultur gambaran penderita TB paru di Kota Banda Aceh dan Kabupaten Aceh
Besar, Provinsi Aceh Tahun 2018
No Variabel Kota Banda Aceh dan
Kabupaten Aceh Besar
N %
1. Mikroskopis
Positif 43 16,4
Negatif 212 80,9
Tidak ada/tidak teridentifikasi 7 2,7
Jumlah 262 100
2 PCR (Gen 16S rRNA )
Positif 215 82,1
Negatif 42 16,0
Tidak teridentifikasi 5 1,9
Berdasarkan tabel 12, hasil analisis sampel dahak yang diperiksa secara
mikroskopis didapatkan 43 BTA positif, 212 BTA negatif dan 7 tidak teridentifikasi.
Untuk sampel dahak yang diperiksa dengan metode PCR dengan gen 16S rRNA
diperoleh banyak sampel yang positif 215 (82,1%), sedangkan dengan gen IS6110, sampel
yang positif nilainya lebih sedikit 48 (18,3%). Ada 5 sampel yang tidak dapat
diidentifikasi karena sampel terdiri dari air liur dan ada sampel yang sudah kering..
61
Hasil pemeriksaan kultur dahak dari 262 sampel, diperoleh paling banyak hasilnya
negatif (83,6%), sedangkan yang positif 1+ (20-100 koloni) yang terbentuk, yaitu 9,5%,
sedangkan lainnya diperoleh hasil 2+ (100-200 koloni) 1,9%, 1-19 koloni yaitu 3,1 %,
dan 5 sampel tidak dapat didentifikasi karena sampel terdiri dari air liur dan ada sampel
yang sudah kering sehingga tidak di kultur.
Berdasarkan tabel 13, sebanyak 38 sampel dahak yang positif dari hasil kultur
kemudian diuji lagi untuk mengetahui sensitivitas M. Tb terhadap OAT. Dari 38 sampel
dinilai kepekaan terhadap OAT, yaitu streptomisin, isoniazid (INH), rifampisin dan
etambutol. Monoresisten OAT paling tinggi diantara resisten OAT yaitu sampai 47,3%
dan isoniazid (INH) adalah yang paling tinggi resistennya dibanding OAT lainnya
62
(26,3%). Sebanyak 42,1% masih susceptible terhadap OAT dan 10,5% dengan kondisi
poliresisten terhadap dua OAT yaitu streptomisin dan isoniazid (INH).
63
Gambar 1. Rata-rata konsentrasi IFN-γ penderita TB-DM (TB 1) pada
gambaran penderita TB paru di Kota Banda Aceh dan Kabupaten Aceh
Besar, Provinsi Aceh tahun 2018 adalah 2,2863 IU/Ml
64
Berdasarkan gambar 1 dan 2 hasil pemeriksaan kadar IFN-γ yang dilakukan
dengan teknik IGRA pada tabung TB 1 memperlihatkan konsentrasi IFN-γ lebih tinggi
pada kelompok TB DM dibandingkan dengan TB tanpa DM.
65
Gambar 4. Rata-rata konsentrasi IFN-γ penderita TB- tanpa DM (TB 2)
pada gambaran penderita TB paru di Kota Banda Aceh dan Kabupaten
Aceh Besar, Provinsi Aceh tahun 2018 adalah 2,4982 IU/mL
Hasil respon imun responden untuk pemeriksaan TNF-α. dapat dilihat dalam
gambar 5 dan 6 dibawah ini.
66
Konsentrasi Protein TNF-α Pasien TB-DM
67
Berdasarkan gambar 5 dan 6 hasil pemeriksaan kadar TNF-α pada serum
penderita TB-DM dan TB –Non DM dilakukan dengan teknik sandwich ELISA di
peroleh hasil bahwa pada kelompok TB tanpa DM konsentrasi TNF alfa cenderung
lebih tinggi dibandingkan kelompok TB DM. Dengan kata lain pada serum penderita TB-
DM, konsentrasi protein TNF-α lebih rendah dibandingkan dengan penderita TB tanpa DM.
Jumlah 30 100
2. Pemeriksaan Kultur Tahap 3 (akhir)
Positif 1 3,7
Negatif 26 96,3
Jumlah 27 100
Berdasarkan tabel 15, diperoleh hasil pemeriksaan mikroskopis dan kultur tahap
tiga (tahap akhir/bulan ke 6 pengobatan) memperlihatkan tingkat kesembuhan yang
besar dan signifikan berdasarkan banyaknya nilai pemeriksaan yang negatif.
68
BAB V
PEMBAHASAN
Penelitian ini dilakukan di PRM dan rumah sakit yang telah menerapkan DOTS
di Kota Banda Aceh dan Kabupaten Aceh Besar dengan menelusuri pasien TB. Target
sampel yang seharusnya dicapai sebanyak 508 responden (total populasi/ tahun), namun
yang didapatkan hanya 262 responden. Hal ini disebabkan karena pada saat
pengumpulan data untuk pengambilan sampel dimulai dari bulan Juli sampai Desember
2018 (pengumpulan data sudah pertengahan tahun), sehingga jumlah yang terjaring juga
lebih sedikit dari target. Selain itu faktor kurangnya tenaga pengumpul data dan lokasi
yang jauh membuat tim kewalahan dalam mendapatkan data tersebut.
69
hasil analisis data dalam penelitian ini menujukkan bahwa buruh lebih banyak
menderita TB paru.
70
memungkinkan mereka tidak memiliki penghasilan yang layak untuk memenuhi
kebutuhan gizi mereka.
71
memiliki sikap baik dan cukup 11 responden (44%) terhadap pencegahan tuberkulosis
paru.64
72
Dalam penelitian ini amplifikasi PCR menggunakan gen target IS6110 dan 16S
rRNA. Pemeriksaan PCR menggunakan gen 16S rRNA mendapatkan banyak hasil yang
positif dibandingkan dengan gen IS6110. Gen 16S rRNA dapat dijumpai pada setiap
organisme dan merupakan gen yang memiliki sifat lestari. Struktur yang lestari ini membuat
gen 16S rRNA dapat digunakan dalam PCR dan analisis sekuensing. 68 Untuk tujuan klinis
praktis, organisme yang sulit untuk dikultur seperti Mycobacterium tuberculosis, maka
penggunaan biomarker gen 16S rRNA menawarkan metode identifikasi yang lebih mudah
untuk kebutuhan perawatan pasien yang sudah kritis dan mengendalikan epidemi
populasi.69 Pemeriksaan PCR konvensional maupun real-time PCR menggunakan gen target
16S rRNA diperoleh hasil lebih sensitif dalam mendeteksi Mycobacterium tuberculosis
complex.70 Sementara itu, dari hasil penelitian lain menyebutkan uji PCR dengan gen target
IS6110 sensitivitasnya hanya 49,2%.71
Deteksi M. Tb baik dengan teknik PCR maupun dengan pemeriksaan kultur
secara statistik terdapat perbedaan bermakna dari deteksi BTA secara mikroskopik. 28
Studi lain mengungkapkan pemeriksaan molekular cepat seperti PCR lebih dari satu gen
terget & Real Time PCR mempunyai peranan penting untuk diagnosis dini (mengurangi
durasi waktu) untuk kasus-kasus TB ekstra paru yang tidak dapat didiagnosis dengan
metode pewarnaan dan kultur.72 Interpretasi hasil PCR harus dikombinasikan dengan
temuan klinis dan radiologis pasien untuk kasus di mana hasil prosedur konvensional
yang tidak jelas hasilnya.73 Teknik PCR merupakan metode yang cepat dan handal
untuk diagnosis TB paru dan ekstra paru. Hasil positif tertinggi didapatkan dari sampel
sputum dan terendah dari spesimen darah. 74 Namun, sampai saat ini metode kultur
merupakan baku emas pemeriksaan dahak untuk mendiagnosis TB paru berdasarkan
tingkat keakuratan.
73
terjadinya resistensi INH dan hal ini sangat berpotensi menjadi marker genetik untuk
memprediksi MDR-TB.76 Hasil penelitian lain juga menyebutkan telah terjadi resistensi
Mycobacterium sp. terhadap isoniazid, dimana 40% dari total isolat adalah resisten,
20% adalah intermediate resistant dan 40% adalah sensitif.77 Untuk kasus poliresisten
OAT ditemukan juga pada ethambutol dan streptomycin sebesar 47,1%.78
I. Respon Imum Penderita TB Paru dengan Diabetes Mellitus dan TB Paru Tanpa
Diabetes Mellitus
Penyakit DM memberikan dampak terhadap penurunan kualitas sumber daya
manusia dan merupakan penyakit menahun bahkan diderita seumur hidup. Diabetes
mellitus merupakan salah satu fakto risiko paling penting untuk terjadinya perburukan
TB. Diabetes mellitus type 2 merupakan penyumbang terbesar diseluruh dunia. 20
Penelitian yang dilakukan di Jakarta dan Bandung menunjukkan prevalensi DM pada
pasien TB yaitu berturut-turut sebanyak 17,1% dan 11,6 %.46
Diabetes mellitus pada penderita TB paru menyebabkan kegagalan dalam
pengobatan dan memperburuk penyakit dibandingkan dengan TB paru tanpa DM.
Penelitian yang telah dilakukan menunjukkan kaitan DM dengan TB, DM merupakan
faktor risiko yang penting dalam perkembangan TB aktif. DM yang merupakan
penyakit kronis akan melemahkan sistem kekebalan tubuh sehingga kemungkinan
terserang TB aktif menjadi 3 kali lebih tinggi.83 Peningkatan risiko dan tingkat
74
keparahan penyakit TB, DM signifikan memberi dampak negatif terhadap kesehatan
masyarakat, khususnya di negara-negara di mana kedua keadaan tersebut lazim terjadi.
Mengingat kompleksitas mekanisme komplikasi diabetes dan banyak hal yang ikut
terlibat, kemungkinan respon imun terhadap infeksi M. Tb terpengaruh di banyak
tingkatan84
Penyakit TB paru dengan diabetes ditandai dengan meningkatnya respon sitokin yang
mengindikasikan adanya peradangan kronis yang mendasari DM tipe 2. Hal ini
berpotensi untuk memberikan kontribusi terhadap peningkatan patologi kekebalan dan
kontrol yang buruk pada infeksi TB paru.85 Fungsi efektor untuk eliminasi bakteri
dimediasi oleh makrofag yang diaktifkan oleh sitokin yang berasal dari limfosit T,
khususnya IFN-γ dan TNF-α.86 Pemeriksaan IGRA dinilai cocok untuk diagnosa infeksi
TB pada pasien DM dan diperlukan untuk menilai risiko penyakit TB. Sensitivitas
IGRA juga tidak terganggu oleh diabetes pada penderita TB. Meningkatnya jumlah
pasien diabetes yang terpapar M. Tb, IGRA mungkin terbukti menjadi instrumen yang
bernilai untuk membantu pencegahan TB.87
75
pengobatan yang intensif dan tuntas sampai sembuh merupakan cara untuk
menanggulangi penyakit TB paru.91
76
BAB VI
KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan
Gambaran penderita TB paru pada 262 responden di Kota Banda Aceh dan
Kabupaten Aceh Besar adalah :
1. Umumnya TB paru terjadi pada laki-laki, dengan rerata umur 45 tahun,
mayoritas tingkat pendidikan adalah tamat SLTA, tidak bekerja dan paling
banyak merupakan pasien baru.
2. Umumnya status gizi responden tergolong baik.
3. Berdasarkan food recall, kebutuhan energi pasien TB tidak terpenuhi dengan
baik dinilai dari konsumsi energi rata-rata sesuai dengan pedoman gizi
seimbang.
4. Penyakit penyerta pada pasien TB paru terbanyak adalah DM.
5. Pengetahuan dan sikap responden tentang TB paru rata-rata kurang, sedangkan
perilaku rata-rata baik.
6. Kepadatan kamar (lingkungan fisik) dinilai masih kurang, sedangkan untuk
kondisi kamar tidur, dapur dan ruang keluarga rata-rata nilainya baik.
7. Hasil pemeriksaan mikroskopis dan kultur sebagian besar negatif, namun
pemeriksaan dengan PCR sebagian besar menunjukkan hasil yang positif
terutama untuk gen 16S rRNA.
8. Obat anti tuberkulosis sebagian besar masih susceptible dan sebagian kecil telah
terjadi poliresisten untuk jenis OAT streptomisin dan isoniazid (INH).
9. Proporsi penderita TB yang mengalami DM cukup tinggi (28,2%) dari hasil
pemeriksaan HbA1C.
10. Konsentrasi IFN-γ lebih tinggi pada kelompok TB-DM (2,2863 IU/mL)
dibanding kelompok TB tanpa DM (1,9035 IU/mL), sedangkan konsentrasi TNF
α cenderung lebih tinggi pada kelompok TB tanpa DM (0,1585 pg/ mL),
dibandingkan kelompok TB-DM (0,0872 pg/ mL).
11. Tingkat kesembuhan responden penderita TB paru berdasarkan hasil
pemeriksaan mikroskopis dan kultur tahap dua dan tiga memperlihatkan tingkat
kesembuhan yang tinggi.
77
B. Saran
1. Meningkatkan kesadaran masyarakat untuk pencegahan dan penularan penyakit TB
paru.
2. Masyarakat diharapkan memiliki motivasi yang tinggi untuk memperoleh
pengetahuan tentang TB paru sehingga akan lebih baik dalam melakukan
penatalaksanaan TBC.
3. Meningkatkan kelengkapan profil pasien TB paru terutama di Puskesmas.
4. Pemerintah perlu memantau penyedia layanan kesehatan dalam pengobatan TB paru
dan menyediakan kualitas obat yang adekuat dengan kadar terapetik yang tepat.
5. Hasil penelitian dapat menjadi masukan bagi dinas kesehatan untuk terus menemukan
penderita TB paru di masyarakat dan memantau PMO dalam mendampingi pasien
minum obat secara rutin dan teratur.
DAFTAR KEPUSTAKAAN
1. WHO. Global Tuberculosis Report 2014. Vol 2014.; 2014.
doi:10.1155/2014/187842.
6. World Health Organization. World Health Statistics - Monitoring Health for the
SDGs.; 2016. doi:10.1017/CBO9781107415324.004.
78
utama-riskesdas-2018/. Published 2018. Accessed February 27, 2018.
10. Dinas Kesehatan Provinsi Aceh. Profil Kesehatan Provinsi Aceh 2015. Banda
Aceh; 2016.
16. Erma Lestari. Nilai diagnostik pemeriksaan mikroskopis basil tahan asam metode
konsentrasi dibandingkan dengan kultur pada sputum tersangka tuberkulosis
paru. 2005.
18. Roselinda, Setiawaty V. The stages of HIV infection and the risk of opportunistic
Tuberculosis infection. Heal Sci J Indones. 2015;6(2):121-125.
79
19. Sahal YP, Afghani A, Nilapsari R. Hubungan jumlah sel limfosit dengan usia dan
status nutrisi pada penderita tuberculosis. Glob Med Heal Commun.
2014;2(2):73-78.
23. Wulandari DR, Sugiri YJ. Diabetes Melitus dan Permasalahannya pada Infeksi
Tuberkulosis. J Respirasi Indones. 2013;33(2):126-134.
25. Sirait N, Parwati I, Dewi NS, et al. Validitas Metode Polymerase Chain Reaction
GeneXpert MTB / RIF pada Bahan Pemeriksaan Sputum untuk Mendiagnosis
Multidrug Resistant Tuberculosis. Maj Kedokt Bandung. 2013;45(4):234-240.
26. Frida E, Ibrahim S. Tuberculosis (Analysis of Acid Fast Bacilli ( AFB ) Findings
and Concentrated Slides in Suspected Tuberculosis ). Indones J Clin Pathol Med
Lab. 2006;12(2):62-64.
27. Inayati. Nilai Diagnostik Pemeriksaan Mikroskopis Sputum BTA Pada Pasien
Klinis Tuberkulosis Paru Di RS PKU Muhammadiyah Yogyakarta. Yogyakarta;
2016.
80
Ethambutol and Streptomycin of Mycobacterium Tuberculosis Isolates in
Suspected Mulltidrug Resistant Tuber- Culosis Patients in Aceh. Jakarta; 2013.
31. Doucette K, Cooper R. Tuberculosis. In: Grippi MA, Elias JA, Fishman JA, et
al., eds. Fishman’s Manual of Pulmonary Diseases and Disorders. Philadelphia:
McGraw Hill; 2002.
33. Amin Z, Bahar S. Tuberkulosis Paru. In: Aru S, ed. Buku Ajar Ilmu Penyakit
Dalam. Jakarta: FKUI; 2007.
35. Munir SM, Nawas A, Soetoyo DK. Pengamatan Pasien Tuberkulosis Paru
dengan Multidrug Resistant ( TB-MDR ) di Poliklinik Paru RSUP Persahabatan.
J Respir Indo. 2010;30(2):92-104.
36. Teguh WJ, Jasaputra DK, Roostati. RL. Analisis Kadar Interferon Gamma Pada
Penderita Tuberkulosis Paru dan Orang Sehat. J Respir Indo. 2010;30(2):119-
124.
38. Novriandi F. Kadar interferon gamma ( IFN- γ ) cairan pleura pada efusi pleura
tuberkulosis dan non-tuberkulosis. 2016.
39. Setiawan H, Nugraha J. Analisis Kadar IFN-γ dan IL-10 pada PBMC Penderita
Tuberkulosis Aktif, Laten dan Orang Sehat, Setelah di Stimulasi dengan Antigen
ESAT-6. J Biosains. 2016;18(1).
40. Mohan VP, Scanga CA, Yu K, et al. Effects of Tumor Necrosis Factor Alpha on
Host Immune Response in Chronic Persistent Tuberculosis: Possible Role for
Limiting Pathology. Infect Immun. 2001;69(3):1847-1855.
81
doi:10.1128/IAI.69.3.1847.
42. Puspita E, Christianto E, Yovi I. Gambaran Status Gizi Pada Pasien Tuberkulosis
Paru (TB Paru) Yang Menjalani Rawat Jalan Di RSUD Arifin Achmad Pekan
Baru. JOM FK. 2016;3(2):1-16.
45. Kementerian Kesehatan RI. Petunjuk Teknis Tata Laksana Klinis Ko-Infeksi Tb-
Hiv.; 2012.
46. Alisjahbana B, Sahiratmadja E, Nelwan EJ, et al. The Effect of Type 2 Diabetes
Mellitus on the Presentation and Treatment Response of Pulmonary
Tuberculosis. Clin Infect Dis. 2007;45(4):428-435. doi:10.1086/519841.
82
1077/MENKES/PER/V/2011 Tentang Pedoman Penyehatan Udara dalam
Rumah. 2011:1-32.
52. Saraswati LD. Prevalens diabetes mellitus dan tuberkulosis paru. J Kesehat
Masy. 2014;9(2):192-196.
53. Fauziah DF, Basyar M, Manaf A. Insidensi tuberkulosis paru pada pasien
diabetes melitus tipe 2 di Ruang Rawat Inap Penyakit Dalam RSUP Dr . M .
Djamil Padang. J Kesehat Andalas. 2016;5(2):349-354.
55. Mahfuzhah I. Gambaran faktor resiko penderita tb paru berdasarkan status gizi
dan pendidikan di RSUD Dokter Soedarso. Progr Stud Pendidik Dr. 2014.
doi:10.1017/CBO9781107415324.004.
56. Putri wina asri, Munir S melati, Christiano E. Gambaran Status gizi pada pasien
tuberkulosis paru yang menjalani rawat inap di RSUD Arifin Achmad Pekanbaru.
JOM FK. 2016;3(2):1-16.
60. Bailey S Lou, Grant P. The tubercular diabetic: the impact of diabetes mellitus on
tuberculosis and its threat to global tuberculosis control. Clin Med (Northfield Il).
2011;11(4):344-347.
83
62. Manalu HSP, Sukana B. Aspek pengetahuan sikap dan perilaku masyarakat
kaitannya dengan penyakit TB paru. Media Litbang Kesehat. 2011;21(1):39-46.
http://ejournal.litbang.depkes.go.id/index.php.
64. Nugroho FA, Astuti EP. Hubungan tingkat pengetahuan dan sikap dengan
perilaku pencegahan penularan tuberkulosis paru pada keluarga. J STIKES RS
Baptis. 2010;3(1):19-28.
69. Srinivasan R, Karaoz U, Volegova M, et al. Use of 16S rRNA Gene for
Identification of a Broad Range of Clinically Relevant Bacterial Pathogens. PLoS
One. 2015;10(2):1-22. doi:10.1371/journal.pone.0117617.
70. Choi Y, Hong SR, Jeon BY, et al. Conventional and real-time PCR targeting 16S
ribosomal RNA for the detection of Mycobacterium tuberculosis complex. Int J
Tuberc Lung Dis. 2015;19(9):1102-1108. doi:10.5588/ijtld.14.0472.
71. Farzam B, Feizabadi MM, Imani Fooladi AA, Izadi M, Hossaini HM.
Comparison of cyp141 and IS6110 for detection of Mycobacterium tuberculosis
84
from clinical specimens by PCR. J Infect Public Health. 2014;8(1):32-36.
doi:10.1016/j.jiph.2014.08.005.
73. Aryal R, Sah AK, Paudel DS, et al. Polymerase Chain Reaction using the MPB64
fragment for detection of mycobacterium tuberculosis complex DNA in
suspected TB cases. Int J Med Sci Public Heal. 2014;3(11):1421.
doi:10.5455/ijmsph.2014.150820142.
74. Hanif F, Satti L, Ikram A, Roshan M, Abbasi SA. Utility of Polymerase Chain
Reaction in Diagnosis of Tuberculosis in Our Setup: A Ten Years Experience. J
Coll Physicians Surg Pakistan. 2012;22(5):298-301.
76. Siregar MIT. Mekanisme Resistensi Isoniazid & Mutasi Gen KatG Ser315Thr (
G944C ) Mycobacterium tuberculosis Sebagai Penyebab Tersering Resistensi
Isoniazid. Jambi Med J. 2015;3:119-131.
77. Yuni Nur Hidayati D, Nugrahani R. Uji Kepekaan Mycobacterium sp. terhadap
Isoniazid (INH) Menggunakan Metode Rasio Resistensi secara In Vitro
Sensitivity test of Mycobacterium sp. against Isoniazid (INH) Using In Vitro
Resistance Ratio Method. Mutiara Med. 2013;13(3):187-195.
85
Dis Poverty. 2013;2(1):2-9. doi:10.1186/2049-9957-2-6.
81. Singh C. Vitamin and HbA1C status in tuberculosis patients with diabetes and its
association. IJIRMS. 2018;03(07):2108-2113.
82. Bukhary ZA. Rediscovering the association between tuberculosis and diabetes
mellitus: A perspective. J Taibah Univ Med Sci. 2013;3(1):1-6.
doi:10.1016/s1658-3612(08)70047-7.
85. Kumar NP, Sridhar R, Banurekha V V., et al. Type 2 Diabetes Mellitus
Coincident with Pulmonary Tuberculosis Is Associated with Heightened
Systemic Type 1, Type 17, and Other Proinflammatory Cytokines. Ann Am
Thorac Soc. 2013;10(5):441-449. doi:10.1513/annalsats.201305-112oc.
87. Walsh MC, Camerlin AJ, Miles R, et al. The sensitivity of interferon-gamma
release assays is not compromised in tuberculosis patients with diabetes. Int J
Tuberc Lung Dis. 2011;15(2):179-184.
86
89. Rokhmah D. Gender dan penyakit tuberkulosis : implikasinya terhadap akses
layanan kesehatan masyarakat miskin yang rendah. J Kesehat Masy Nas.
2013;7(10):447-452.
90. Suadnyani Pasek M, Suryani N, Murdani PK. Hubungan persepsi dan tingkat
pengetahuan penderita tuberkulosis dengan kepatuhan pengobatan di wilayah
kerja Puskesmas Buleleng. J Magister Kedokt Kel. 2013;1(1):14-23.
87
Lampiran 1
BIODATA KETUA PELAKSANA
NAMA PENGUSUL:
Abidah Nur, S.Gz
ALAMAT:
Kantor : Jl. Sultan Iskandar Muda Lr. Tgk. Dilangga No. 9 Lambaro, Aceh Besar
Telp: (0651)70189
Fax: (0651)70289
Rumah : Jalan Meunasah Lr.,Tgk Dja No.1 Gampong Cot
Telp. / HP : 085277301386
E-mail: abidahnur@yahoo.co.id
PENDIDIKAN PROFESIONAL:
Sarjana Gizi, UGM
PUBLIKASI:
1. Riwayat pemberian Air Susu Ibu dengan penyakit infeksi pada balita. Jurnal Kesmas.
Vol 9 (2). Hal : 144-149. November 2014. ISSN : 1907-7505.
3. Gambaran Bakteri Ulkus Diabetikum di Rumah Sakit Zainal Abidin dan Meuraxa
Tahun 2015. Buletin Penelitian Kesehatan. Vol 44 (3). September 2016. Hal : 187-196.
ISSN : 0125-9695.
4. Hubungan Pola Konsumsi dengan Diabetes Melitus Tipe 2 pada Pasien Rawat Jalan di
RSUD Dr.Fauziah Bireuen Provinsi Aceh. Media Penelitian dan Pengembangan
Kesehatan. Vol 26 (3). September 2016. Hal : 145-150. ISSN : 0853-9987.
5. Ragam kuliner meugang Idul Adha di Aceh tahun 2014. Jurnal Sel. Vol 2 (2).
88
November 2015. Hal : 72-76. ISSN : 2356-2501.
6. Perbedaan kadar kolesterol total sebelum dan sesudah meugang Hari Raya Idul Adha.
Jurnal Sel. Vol 2 (1). Juli 2015. Hal : 29-34. ISSN : 2356-2501.
7. Konsumsi zat gizi makro rumah tangga daerah perkotaan dan perdesaan di Provinsi
Aceh tahun 2012. Jurnal Sel. Vol 2 (1). Juli 2015. Hal : 35-42. ISSN : 2356-2501.
8. Penganan Khas Aceh pada Kejadian Diabetes Melitus. Jurnal Sel. Vol 3 (1). Juli 2016.
Hal : 10-15. ISSN : 2356-2501.
9. Kebiasaan Aktivitas Fisik Pasien Diabetes Mellitus terhadap Kadar Gula Darah di
Rumah Sakit Umum dr. Fauzah Bireuen. Jurnal Sel. Vol 3 (2). November 2016. Hal :
41-48. ISSN : 2356-2501.
89
KEMENTERIAN KESEHATAN R.I
BADAN PENELITIAN DAN PENGEMBANGAN KESEHATAN
LOKA PENELITIAN DAN PENGEMBANGAN BIOMEDIS ACEH
Jl. Sultan Iskandar Muda Blang Bintang Lr. Tgk. Dilangga no. 9 Lambaro Aceh Besar
(0651) 8070189 (0651) 8070289 upf_nad@litbang.depkes.go.id
Lampiran 2
NASKAH PENJELASAN
90
terjadi pada kuman tuberkulosis. Sampel darah digunakan untuk melihat perubahan
gen yang terjadi pada tubuh saudara/i selama menderita penyakit tuberkulosis.
Partisipasi Saudara/i dalam penelitian bermanfaat bagi sendiri dengan
mengetahui hasil pemeriksaan dan keadaan kesehatan. Saudara/i yang menjadi
responden dalam penelitian ini, ikut membantu pemerintah memberikan informasi
bagi program pengendalian penyakit tuberkulosis. Semua informasi yang saudara
berikan kami jaga kerahasiaannya dengan mengganti nama responden dengan kode
sampel dan akan digunakan demi kepentingan ilmiah.
Hasil penelitian akan kami sampaikan kepada PRM dan secara akumulatif
akan kami informasikan ke Dinas Kesehatan setempat dengan tujuan agar lebih
memberikan perhatian terhadap keadaan kesehatan penderita tuberculosis.
Saudara/i dapat menanyakan kepada petugas di PRM bila menginginkan informasi
mengenai hasil penelitian. Atas partisipasi yang Saudara/i berikan, kami
menyediakan pengganti waktu yang tersita untuk mengikuti penelitian ini berupa
uang tunai.
Apabila ada pertanyaan mengenai penelitian ini, dapat menghubungi
Abidah Nur, S.Gz, nomor kontak 085277301386, dengan alamat Jl. Meunasah
Lr.Tgk Dja No.1 Gampong Cot Kecamatan Darussalam Kabupaten Aceh Besar.
Peran serta Saudara/i dalam penelitian ini adalah sukarela, Saudara/i
berhak untuk tidak ikut serta atau menarik diri dari keikutsertaan dalam penelitian
ini setiap waktu dan tanpa ada sanksi. Bilamana ada hal yang kurang jelas jangan
merasa ragu untuk bertanya pada tim penelitian. Apabila Saudara/i menyetujui
untuk berpartisipasi silakan membubuhkan tanda tangan pada lembar persetujuan
(terlampir).
Demikianlah, kami ucapkan terimakasih banyak atas perhatian dan
kerjasamanya.
91
Lampiran 3
menyatakan bahwa saya telah mendapat penjelasan secara rinci dan telah mengerti
mengenai penelitian yang akan dilakukan dengan judul “Gambaran penderita TB paru
di Kota Bandah Aceh dan Kabupaten Aceh Besar”. Saya memutuskan setuju untuk
berpartisipasi secara sukarela dan tanpa paksaan. Selama penelitian ini, bila saya
menginginkan, maka saya dapat mengundurkan diri tanpa sanksi apapun.
………., ..............................2018
Saksi Yang membuat
pernyataan,
(...............................) (.................................)
92
Lampiran 4
KUESIONER TAHAP I
Gambaran penderita TB paru di Kota Banda Aceh dan Kabupaten Aceh Besar
93
PENGOBATAN TB PARU
1. Tahun berapa Bapak/Ibu didiagnosa Tb Paru? ………………
2. Bapak/Ibu adalah :
1. Pasien baru
2. Pasien yang pernah berobat 6 bulan (kambuh)
3. Pasien TB yang putus berobat
4. Lainnya, sebutkan ……………………………..
3. Sebutkan layanan kesehatan yang mendiagnosa Bapak/Ibu terkena TB paru.
1. Puskesmas
2. Rumah Sakit
3. Klinik
4. Layanan kesehatan lainnya, sebutkan …………………………
4. Sebelum didiagnosa TB paru, apakah Bapak/Ibu diperiksa dahak?
1. Ya
2. Tidak
5. Sudah berapa lama Bapak/Ibu didiagnosa TB paru? ………………bulan
6. Apakah sebelum didiagnosa TB paru Bapak/Ibu merasakan gejala batuk-batuk?
1. Ya
2. Tidak
7. Berapa lama gejala tersebut timbul sebelum Bapak/Ibu memeriksakan diri ke
layanan kesehatan?
1. <2 minggu
2. 1 Bulan
3. 2 Bulan
4. >2 Bulan
8. Apakah layanan kesehatan tempat Bapak/Ibu memeriksakan kesehatan
memberikan obat?
1. Ya
2. Tidak lanjut ke pertanyaan no.10
9. Obat apa saja yang diberikan?
1. Isoniazid
2. Ripamfisin
3. Pirazinamid
4. Ethambutol
5. Streptomisin (inj)
6. Lainnya, sebutkan……..
10. Apakah Bapak/Ibu minum obat yang diberikan oleh layanan kesehatan tersebut?
1. Ya
2. Tidak lanjut ke pertanyaan no.10
11. Obat apa saja yang Bapak/Ibu konsumsi?
1. Isoniazid
2. Rifampisin
3. Pirazinamid
4. Ethambutol
5. Streptomisin (inj)
6. Lainnya, sebutkan ……………………………………
12. Apakah Bapak/Ibu minum obat secara teratur (sesuai anjuran dokter)?
1. Ya
2. Tidak
13. Apakah ada keluhan selama Bapak/Ibu minum obat?
1. Ya, sebutkan ……………………………………
2. Tidak
14. Apakah Bapak/Ibu pernah minum obat TB sebelumnya?
94
1. Ya, Sebutkan ……………………….........................................................
2. Tidak
15. Apakah Bapak/Ibu pernah didiagnosa Diabetes Mellitus (DM) oleh tenaga
kesehatan:
1. Ya, Tahun ………………
2. Tidak
16. Apakah Bapak/Ibu mendapatkan obat DM dari layanan kesehatan?
1. Ya
2. Tidak lanjut ke pertanyaan no.14
17. Obat DM apa yang diberikan dari layanan kesehatan?
1. Insulin injeksi
2. Antidiabetik oral
3. Lainnya
18. Pernah didiagnosa HIV/AIDS oleh tenaga kesehatan :
1. Ya, Tahun ………………
2. Tidak
19. Terdapat Anggota Rumah Tangga (ART) lainnya yang didiagnosa TB
1. Ya
2. Tidak
20. Tahun ART didiagnosa TB: ………….
21. Jumlah ART yang didiagnosa TB: …………. hubungan dengan responden ….
22. Penyakit penyerta ………………………
95
PENGETAHUAN
(bacakan poin pertanyaan, berikan tanda silang atau lingkari pada jawaban yang
benar menurut responden)
96
E. Tidak tahu
9. Apa yang [BAPAK/IBU] ketahui tentang TB MDR?
A. TB yang sudah resisten minimal terhadap 1 obat anti TB
B. TB yang sudah resisten minimal terhadap 2 obat anti TB
C. TB yang sudah resisten minimal terhadap 3 obat anti TB
D. TB yang sudah resisten minimal terhadap 4 obat anti TB
E. Tidak tahu
10. Apakah yang menyebabkan TB MDR?
A. Karena tidak minum obat sesuai aturan
B. Karena tidak pernah vaksinasi BCG
C. Karena tidak pernah meminum obat
D. Karena tidak periksa dahak
E. Tidak tahu
SIKAP
Jawablah pernyataan dibawah ini dengan mengisi tanda checklist (√) pada kotak Sangat
Setuju (SS), Setuju (S) dan Tidak Setuju (TS) sesuai pilihan jawaban [BAPAK/IBU].
No Pernyataan SS S TS
1 Saya akan belajar cara pencegahan penularan
penyakit TB paru karena saya sudah didiagnosa
dengan TB paru
2 Meludah dan batuk disembarang tempat tidak akan
menularkan penyakit Tuberkulosis paru kepada
orang lain.
3 Saya membutuhkan PMO pada saat minum obat TB
paru
4 Sinar matahari tidak harus masuk ke dalam rumah
5 Saya akan menyiapkan masker/menutup mulut saat
saya batuk atau bersin didepan orang lain
6 Penderita TB paru akan semakin baik jika mereka
mendapatkan asupan gizi yang baik.
7 Saya akan menjaga jarak bicara dengan keluarga
saya supaya tidak menular ke mereka
8 Saya akan minum obat jika ingat
9 Saya butuh dukungan dari keluarga dan orang sekitar
untuk sembuh
10 Saya akan menjauhi keluarga saya supaya mereka
tidak tertular TB paru
11 Saya harus banyak mencari informasi tentang TB
paru
12 TB resisten obat (MDR) sangat berbahaya, oleh
karena itu saya harus patuh minum obat sesuai aturan
PERILAKU
1. Apa yang [BAPAK/IBU] lakukan untuk mencegah penularan TB paru? (Bacakan
point A sampai dengan D, isikan kode jawaban dengan 1 = Ya atau 2 = Tidak)
A. Memakai masker C. Tidak meludah disembarang
97
tempat
98
B. Tidak
11. Apakah [BAPAK/IBU] sering membuka jendela kamar/ruangan agar sinar matahari
pagi dapat masuk ke dalam ruangan?
A. Ya
B. Tidak, mengapa? (……………………………………………....)
12. Apakah [BAPAK/IBU] pernah menjemur alas tidur/kasur/bantal/guling di bawah
sinar matahari?
A. Ya
B. Tidak, mengapa? (………………………………………………)
OBSERVASI LINGKUNGAN
Dapur
Keluarga
99
2. Arang
3. Minyak tanah
4. Gas
5. Listrik
PEMERIKSAAN
1. Mikroskopis BTA
2. PCR
3. Kultur
100
FORMULIR RECAL 24 JAM
No Responden :
Nama :
Banyaknya
Waktu makan Menu makanan URT Gram
Pagi
Selingan pagI
Siang
Selingan siang
Malam
Selingan malam
101
FORMULIR RECAL 24 JAM
No Responden :
Nama :
Banyaknya
Waktu makan Menu makanan URT Gram
Pagi
Selingan pagI
Siang
Selingan siang
Malam
Selingan malam
102
FORMULIR RECAL 24 JAM
No Responden :
Nama :
Banyaknya
Waktu makan Menu makanan URT Gram
Pagi
Selingan pagI
Siang
Selingan siang
Malam
Selingan malam
103
KUESIONER TAHAP III
Gambaran penderita TB paru di Kota Banda Aceh dan Kabupaten Aceh Besar
BB : ……… kg TB :………. cm
PENGOBATAN TB PARU
1. Apakah Bapak/ibu masih berobat ke Pusat Layanan Kesehatan?
1. Ya
2. Tidak lanjut ke pertanyaan no.7
2. Obat apa saja yang diberikan?
1. Isoniazid
2. Ripamfisin
3. Pirazinamid
4. Ethambutol
5. Streptomisin (inj)
6. Lainnya, sebutkan……..
3. Apakah Bapak/Ibu minum obat yang diberikan oleh layanan kesehatan tersebut?
1. Ya
2. Tidak, alasan …………………………………………………. Lanjut ke no 7
4. Obat apa saja yang Bapak/Ibu konsumsi?
1. Isoniazid
2. Rifampisin
3. Pirazinamid
4. Ethambutol
5. Streptomisin (inj)
6. Lainnya, sebutkan ……………………………………
5. Apakah Bapak/Ibu minum obat secara teratur (sesuai anjuran dokter)?
1. Ya
2. Tidak, alasan……………………………………………….
6. Apakah ada keluhan selama Bapak/Ibu minum obat?
1. Ya, sebutkan ……………………………………
2. Tidak
7. Apakah Bapak/Ibu masih mendapatkan obat DM dari layanan kesehatan?
1. Ya
2. Tidak , lanjut ke observasi lingkungan
8. Obat DM apa yang diberikan dari layanan kesehatan?
1. Insulin injeksi
2. Antidiabetik oral
3. Lainnya
104
OBSERVASI LINGKUNGAN
Dapur
Keluarga
PEMERIKSAAN
1. Mikroskopis BTA
2. PCR
3. Kultur
105
FORMULIR RECAL 24 JAM
No Responden :
Nama :
Banyaknya
Waktu makan Menu makanan URT Gram
Pagi
Selingan pagi
Siang
Selingan siang
Malam
Selingan malam
106
FORMULIR RECAL 24 JAM
No Responden :
Nama :
Banyaknya
Waktu makan Menu makanan URT Gram
Pagi
Selingan pagi
Siang
Selingan siang
Malam
Selingan malam
107
FORMULIR RECAL 24 JAM
No Responden :
Nama :
Banyaknya
Waktu makan Menu makanan URT Gram
Pagi
Selingan pagi
Siang
Selingan siang
Malam
Selingan malam
108
Lampiran 5
DOKUMENTASI KEGIATAN
109
Wawancara pasien Tb Pengambilan sampel darah
110
Pengamatan slide sputum Sampel darah IGRA
111