CRISPR-Cas9: pendekatan rekayasa genetika yang menjanjikan dalam penelitian kanker

Bakteri dan archaea memiliki kekebalan adaptif terhadap materi genetik asing melalui sistem berulang
palindromik berulang (CRISPR). Penemuan sistem bakteri yang menarik ini menandai perubahan
revolusioner di bidang ilmu kedokteran. Mekanisme molekuler berbasis CRISPR dan CRISPR-associated
protein 9 (Cas9) telah diterapkan untuk mengedit genom. Teknik CRISPR-Cas9 ini sekarang mampu
memediasi koreksi atau gangguan genetik yang tepat dalam lingkungan in vitro dan in vivo. Keakuratan
dan keserbagunaan CRISPR-Cas telah dimanfaatkan dalam penelitian biologi dan medis dan membawa
harapan baru untuk penelitian kanker. Kanker melibatkan perubahan yang kompleks dan banyak mutasi,
translokasi dan kehilangan dan keuntungan kromosom. Kemampuan untuk mengidentifikasi dan
memperbaiki mutasi tersebut merupakan tujuan penting dalam pengobatan kanker. Dalam konteks
lanskap genomik kanker yang kompleks ini, ada kebutuhan akan alat genetik sederhana dan fleksibel
yang dapat dengan mudah mengidentifikasi gen driver kanker fungsional dalam waktu yang relatif
singkat. Sistem CRISPR-Cas menunjukkan potensi yang menjanjikan untuk pemodelan, perbaikan dan
koreksi peristiwa genetik pada berbagai jenis kanker. Artikel ini meninjau konsep CRISPR-Cas,
penerapannya dan keuntungan terkait dalam onkologi.
Mutasi genetik dan perubahan epigenetik memainkan peran penting dalam tumorigenesis. Kanker
adalah penyakit multiple-hit yang merupakan hasil mutasi pada gen yang terlibat dalam kontrol fungsi
seluler, pertumbuhan dan pembelahan. Itulah sebabnya mengapa modulasi epigenetik dan editing
genome penting untuk pemodelan kanker dan kemanjuran terapeutik. Data sekuensing seluruh genom
sel kanker manusia menunjukkan kompleksitas genom kanker, termasuk banyak mutasi titik dan
penyusunan ulang genom besar. Model sel dan binatang dapat dibuat menggunakan data ini untuk
memahami mekanisme molekuler yang mendasari respon tumorigenic. Gen kandidat baru yang
dianggap sebagai gen target untuk terapi kanker juga dapat divalidasi melalui model ini.44,45
Gambar 3 menyajikan gambaran umum pemodelan kanker dengan sistem CRISPR-Cas9. Dalam beberapa
tahun terakhir, sistem CRISPR-Cas9 telah menghasilkan revolusi di bidang pemodelan kanker. Sementara
alat pengeditan genome lain - ZFN dan TALEN - didasarkan pada pengenalan urutan melalui interaksi
protein-DNA, metode CRISPR-Cas9 dikenal untuk menargetkan lokus genom spesifik dengan sgRNA.
Selain itu, karena RNA jauh lebih mudah untuk disintesis dan diperkenalkan ke dalam sel daripada
domain protein, alat CRISPR-Cas9 dianggap sebagai cara yang lebih menjanjikan untuk memfasilitasi
modifikasi genom yang ditargetkan.
Sistem CRISPR-Cas9 menunjukkan banyak keunggulan dibandingkan teknologi penargetan gen
konvensional; salah satunya adalah ia dapat langsung memodifikasi genom zigot. Wang dan timnya
menerapkan sistem untuk memodifikasi embrio tikus dengan menyuntikkan mRNA dan sgRNAs Cas9 ke
dalam telur yang dibuahi.52 Jenis tikus modifikasi rekayasa genetika yang membawa beberapa
perubahan di lokus mungkin memiliki peran penting dalam penelitian kanker. Selain itu, para peneliti
telah mengembangkan sel-sel imun yang dimodifikasi secara genetik (misalnya sel-T) yang menunjukkan
kemampuan untuk membunuh sel-sel kanker pada tikus (Gambar 4). Sel-sel dimodifikasi sedemikian
rupa sehingga mereka dapat mengekspresikan reseptor antigen chimeric (CAR) pada permukaannya.
MOBIL dapat mengenali dan menyerang sel kanker, karena sel kanker mengekspresikan antigen yang
sesuai.59
Kanker menyajikan masalah lama dalam sejarah kesehatan manusia dan sejauh ini tidak memiliki solusi
holistik. Para peneliti dari berbagai belahan dunia sedang mencari tanpa henti untuk pendekatan yang
tepat dan efisien berdasarkan teknologi genetik yang dapat memberikan solusi berkelanjutan untuk
penyakit ini. Sistem CRISPR-Cas9 adalah teknologi pengeditan gen mutakhir dengan potensi luas yang
berdiri sendiri di antara teknik sitogenetika lain dari penyuntingan gen pada penyakit terkait kanker.
Teknik ini juga memiliki potensi untuk digunakan dalam setiap bidang ilmu kedokteran dan biologi.
Namun, sejumlah besar pertanyaan etis muncul terkait penerapan teknik ini tanpa perlindungan
terhadap penggunaan yang tidak pantas. Penyalahgunaan teknik ini dapat menciptakan kondisi
mematikan yang dapat menghancurkan peradaban manusia. Mengenai penggunaan teknologi CRISPR-
Cas9 di seluruh dunia, kami menemukan sedikit saja penggunaan teknik ini di negara-negara
berkembang karena kurangnya keahlian dan infrastruktur yang tepat. CRISPR-Cas9 harus menjadi
pendekatan yang disukai dalam mengartikan komponen kompleks ekspresi gen yang mengarah ke
kanker.