TUGAS PAPER

Pengaruh Enzim Isomerasi pada Industri dari

Glukosa Isomerase

DISUSUN OLEH:
ILHAM JAVAR SAPUTRA
(19820062)

FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN

UNIVERSITAS WIJAYA KUSUMA SURABAYA

2020
 PEMBAHASAN

Enzim adalah tenaga kerja seumur hidup. Mereka mengkatalisasi reaksi biokimia yang
merupakan dasar metabolisme pada semua organisme hidup. Rute utama untuk menciptakan
fungsi-fungsi enzim baru adalah duplikasi gen dan evolusi selanjutnya dari satu enzim ke enzim
lain dengan sebuah fungsi novel, meskipun biasanya terkait. Di bawah tekanan bertahan hidup
dan reproduksi, inovasi fungsi-fungsi baru pada tingkat metabolisme memungkinkan organisme
untuk beradaptasi dengan lingkungan yang berubah kondisi kimia misalnya, resistensi bakteri
terhadap bahan kimia buatan manusia seperti obat-obatan atau pestisida(Cuesta,dkk.2014).

Meningkatnya Industri "High-Fructose Syrup" merangsang penelitian intensif terhadap

enzim yang dapat nengisomerisasi glukosa menjadi fruktosa. Penelitian dalam bidang ini telah
dimulai sejak tahun 1957. Glukosa isomerase yang umum digunakan secara komersial adalah D-
xilosa ketol-isomerase (EC.5.3.1.5). Enzim ini terdapat intraselular pada mikroba penghasilnya;
terbentuk dengan induksi xilosa. Serdasarknn kebutuhan ion metal sebsgai aktivator, enzim ini
dapat dibagi menjadi enzim yang memmbutuhkan : ( 1 ) ion Mg (+2), (2) ion Co 2+ ( 3 ) ion
co2+ dan (4.) enzim yang tidak membutuhkan ion metal.

Isomerase hadir dalam metabolisme dan genom dari sebagian besar organisme hidup,
mengkatalisis hingga 4% dari reaksi biokimia yang ada dalam metabolisme pusat, khususnya,
metabolisme karbohidrat (Martinez,dkk.2014). Isomerase mengkatalisasi reaksi isomerisasi
seperti rasemisasi dan epimerisasi. Mereka belum digunakan di banyak aplikasi industri. Namun,
salah satu yang paling sukses proses biokatalitik berbasis enzim melibatkan isomerase:
penggunaan glukosa isomerase untuk produksi sirup jagung fruktosa tinggi (HFCS). HFCS
digunakan sebagai pemanis alternatif untuk sukrosa di industri makanan dan minuman.
Isomerisasi glukosa menjadi HFCS pada skala industri dilakukan dalam reaktor unggun tetap
kontinyu menggunakan isomerase glukosa amobil. Jumlah total HFCS yang diproduksi oleh
glukosa isomerase melebihi satu juta ton per tahun (Paul,dkk.2014).

Menurut Cuesta,2014 Isomerase glukosa yang mengkatalisasi reaksi reversibel antara D-

glukosa dan Dfruktosa ditunjukkan dalam ekstrak bebas sel dari strain Streptomyces sp. diisolasi
dari tanah. Enzim diproduksi ketika strain ditanam di media yang mengandung xilan atau bahan
yang mengandung xilan seperti dedak gandum. Media yang terdiri dari 3% dedak gandum, 2%
cairan curam jagung dan 0,024% CoCI2 • 6H20 direkomendasikan untuk produksi enzim
glukosa isomerase dengan strain. Dengan enzim, • beberapa kondisi untuk konversi D-glukosa
menjadi D-fruktosa juga dipelajari. Metode ini sangat berguna untuk produksi gula invert dari D-
glukosa dan sekarang sedang diterapkan untuk penggunaan praktis.

International Union of Biokimia (1984) telah mengklasifikasikan enzim ke dalam enam

kelas yang berbeda berdasarkan jenis reaksi yang dikatalisis. Isomerase adalah enzim kelas lima
dalam Klasifikasi Enzim. Isomerase adalah kelas enzim yang mengkatalisasi perubahan
geometris atau struktural dalam satu molekul. Menurut jenis isomerisme, mereka dapat disebut
racemases, epimerases, cis-trans-isomerases, isomerases, tautomerases, mutases atau
cycloisomerases. (S.Desai,dkk.2017)

Salah satu enzim isomerase penting dalam industri makanan adalah glukosa isomerase
(GI) yang sangat diminati karena pentingnya dalam produksi komersial sirup jagung fruktosa
tinggi (HFCS). Enzim ini termostabil dan tidak memerlukan kofaktor mahal, seperti NAD atau
ATP untuk aktivitas. Meskipun konversi glukosa menjadi fruktosa dapat dilakukan secara
kimiawi, hal itu mengarah pada pembentukan gula yang tidak dapat dimetabolisme dan
terkadang reaksi itu sendiri tidak spesifik. Fruktosa yang disintesis secara kimia memiliki
aplikasi komersial terbatas karena memiliki rasa yang tidak enak dan mengurangi rasa manis. Di
mana, seperti dalam kasus konversi enzimatik, reaksinya sangat spesifik, dan meskipun
pemanfaatan kondisi lingkungan dari pH dan suhu, produk samping tidak terbentuk. Karena
keuntungan konversi enzimatik ini, metode ini cocok untuk isomerisasi glukosa menjadi
fruktosa. Saat ini, proses yang melibatkan glukosa isomerase (GI) telah mengalami
perkembangan yang signifikan di sektor industri.(H.Bosale, 1996)

1.Glukosa Isomerase

D-Glukosa / xilosa isomerase (D-xilosa ketol isomerase; EC 5.3.1.5) umumnya dikenal

sebagai glukosa isomerase (GI), adalah salah satu enzim nilai tonase tinggi. Ini mengkatalisis
reaksi reversibel D-glukosa menjadi D-fruktosa dan D-xilosa menjadi D-xilulosa. Produksi
xilulosa dari xilosa memenuhi persyaratan diet untuk bakteri saprofitik. Juga, berguna dalam
produksi bioetanol dari selulosa. Isomerisasi glukosa menjadi fruktosa sangat penting bagi
industri dalam produksi sirup jagung fruktosa tinggi. Produksi enzimatik fruktosa dari glukosa
sangat diminati karena proses enzimatis sangat efisien dan sangat selektif. Di sini kebutuhan
energi juga lebih sedikit dan produk samping yang terbentuk lebih sedikit (Yu et al., 2013)
(S.Desai,2016).

Isomerase glukosa (xilosa) mengkatalisasi isomerisasi glukosa menjadi fruktosa yang dapat
dibalik dan yang xilosa menjadi xilulosa. Ini adalah enzim penting yang digunakan dalam
produksi industri sirup jagung fruktosa tinggi (HFCS) (3). Terlepas dari industri makanan, enzim
ini baru-baru ini semakin diminati karena potensinya dalam industri biofuel. Saat ini, etanol
adalah bentuk utama biofuel, dan banyak jumlahnya teknologi telah digunakan untuk
meningkatkan produksinya (1, 19, 26). Selain itu, produksi bahan bakar etanol dari hidrolisat
hemiselulosa oleh Saccharomyces cerevisiae sangat menarik secara ekonomi sebagai alternatif
bahan bakar fosil (18). Sedangkan S. cerevisiae tipe liar dapat memfermentasi xilulosa menjadi
etanol melalui jalur pentosa-fosfat (28), ia tidak dapat memfermentasi xilosa. Xylose adalah
monosakarida utama dalam hidrolisat hemiselulosa tanaman yang dapat menyumbang hingga
30% dari total gula dalam beberapa biomassa tanaman seperti kayu keras dan residu pertanian
(8). Oleh karena itu, isomerase glukosa (xilosa) secara tidak langsung memainkan peran penting
dalam fermentasi etanol biomassa hidrolisat tanaman oleh S. cerevisiae.(S.Desai.2016)

Menurut Wiseman, GI mungkin yang paling penting dari semua enzim industri di
masa depan (184). Isatalatalisasi terbalik dari masing-masing D-glukosa dan D-xilosa menjadi
D-fruktosa dan D-xilulosa, masing-masing (Gbr. 1). Interkonversi xilosa menjadi xilulosa
memenuhi kebutuhan nutrisi dalam bakteri non-organik yang berkembang menjadi bahan tanam
yang baik dan juga membantu dalam biokonversi hemiselulosa menjadi etanol. Isomerisasi
glukosa menjadi fruktosa sangat penting secara komersial dalam produksi sirup jagung fruktosa
tinggi (HFCS). Sukrosa yang berasal dari bit (40%) dan tebu (60%) adalah pemanis utama di
dunia sampai tahun 1976. Produksi HFCS dengan menggunakan glukosa isomerase
dikembangkan pertama kali di Jepang dan kemudian di Amerika Serikat. GI memperoleh
kepentingan komersial di Amerika Serikat karena kurangnya pasokan sukrosa setelah revolusi
Kuba pada tahun 1958, dan terus menjadi salah satu enzim industri yang paling penting hingga
hari ini.

2.Struktur Glukosa Isomerase

Struktur primer dan sekunder glukosa isomerase mengungkapkan bahwa itu adalah
tetramer yang terdiri dari empat polipeptida identik 43.000 Da atau dimer subunit terkait atau
identik (dimer dimmer) yang terhubung dengan ikatan non-kovalen dan tidak termasuk disulfida
antar-rantai ikatan (Gbr. 3). Dua monomer membentuk dimer ketat dan dua dimer membentuk
tetramer ketat. Terlihat bahwa interaksi antara mononer dalam dimer lebih luas daripada
interaksi dimmer dalam tetramer (Farber et al., 1987). Setiap monomer memiliki dua domain:
domain terminal N besar (residu 1-320) dan loop terminal-C kecil (residu 321-387). Hingga 90
persen urutan homologi diamati pada enzim dari Streptomyces sp. (Ramagopal et al., 2003).
Terlihat bahwa struktur tersier bertanggung jawab untuk aktivitas biologis GI daripada struktur
sekunder(Bhosal,1996).

3. PENTINGNYA ISOMERASE GLUKOSA

Menurut H.Bhosale GI berfungsi sebagai model yang menarik untuk mempelajari hubungan
fungsi struktur dengan teknik biokimia dan rekayasa genetika canggih. Selain kepentingan
akademisnya, telah mendapat perhatian yang meningkat oleh industri untuk penggunaannya
dalam memproduksi HFCS dan untuk aplikasi potensial dalam produksi etanol dari
hemiselulosa.

Keuntungan dari Sirup Jagung Fruktosa Tinggi sebagai Pemanis

Meningkatnya permintaan gula halus, ditambah dengan biaya produksi yang tinggi dan
kesadaran akan efek buruk sukrosa dan konsumsi gula terbalik pada kesehatan manusia, telah
mengharuskan pencarian pengganti sukrosa yang dapat diterima. Sejumlah besar pemanis buatan
non-kalori dan non-karbohidrat seperti sakarin, siklamat, asesulfam-K, aspartam, dan thaumatin
telah ditemukan dan diberhentikan atas dasar masalah kesehatan atau kelemahan lainnya.
Memasukkan aspartam ke dalam minuman ringan membuat mereka kurang manis setelah
penyimpanan lama, karena aspartam perlahan dihidrolisis pada pH rendah. Thaumatin, pemanis
protein yang ideal, 2.000 kali lebih manis daripada sukrosa tetapi memiliki rasa yang berbeda
dan tidak menyenangkan. HFCS, campuran kesetimbangan glukosa dan fruktosa (1: 1) 1,3 kali
lebih manis daripada sukrosa dan 1,7 kali lebih manis dari glukosa. Kapasitas pemanis glukosa
adalah 70 hingga 75% sukrosa, sedangkan fruktosa dua kali semanis sukrosa (10). HFCS dibuat
dari bahan yang sama sekali tidak mengandung zat tepung, yaitu, pati. Harga HFCS adalah 10
hingga 20% lebih rendah dari sukrosa berdasarkan kekuatan pemanisnya. HFCS lebih disukai
oleh industri makanan karena tidak menimbulkan masalah kristalisasi seperti yang ditambahkan
dengan sukrosa. Terlebih lagi, D-fructoseplaysanimportantroleasadiabeticsweetener karena
hanya perlahan-lahan diserap kembali oleh lambung dan tidak mempengaruhi kadar glukosa
dalam darah. Kegunaan utama HFCS adalah dalam industri minuman, pembuatan roti,
pengalengan, dan gula-gula.

Produksi Sirup Jagung Fruktosa

Tinggi Perkembangan pasar dalam produksi HFCS ditandai dengan penerimaan HFCS
secara bertahap dan HFCS yang diperkaya (fruktosa 55%) sebagai pengganti sukrosa oleh
produsen minuman ringan. Bahan baku yang paling sering digunakan untuk produksi HFCS di
Amerika Serikat adalah tongkol jagung. diproduksi oleh proses penggilingan basah. Produksi
HFCS dari pati terdiri dari tiga proses utama: (i) pencairan pati oleh a-amilase, (ii) sakari fi kasi
pati oleh aksi gabungan amyloglucosidase dan enzim debranching, dan (iii) isomerisasi glukosa
oleh GI. Produk akhir adalah sirup jagung yang mengandung campuran glukosa dan fruktosa dan
karenanya dengan kapasitas pemanis yang lebih besar daripada sukrosa. Sumber pati lainnya
seperti gandum, tapioka, dan beras digunakan sebagian kecil di belahan dunia lain. Produk
sampingan dari industri penggilingan jagung penting dalam memutuskan ekonomi produksi
HFCS. Konsumsi HFCS dunia tahunan diperkirakan telah mencapai 10 juta ton (berat kering)
pada tahun 1995 (54). Saat ini, HFCS telah hampir sepenuhnya menggantikan sukrosa di
Amerika Serikat, dan hanya tingkat pertumbuhan moderat (3 hingga 4%) dalam produksinya
yang diharapkan secara global.

Production of Ethanol

GI mengkatalisasi isomerisasi glukosa dan xilosa. Sifat enzim ini digunakan dalam
isomerisasi xilosa menjadi xilulosa, yang pada akhirnya dapat difermentasi menjadi etanol oleh
ragi konvensional. Biokonversi biomassa terbarukan menjadi gula dan etanol yang dapat
difermentasi penting mengingat berkurangnya bahan bakar fosil dengan cepat. Biomassa terdiri
dari selulosa (40%), hemiselulosa (30%), dan lignin (30%). Kelayakan ekonomis pemanfaatan
biomassa tergantung pada hidrolisis selulosa dan hemiselulosa menjadi glukosa dan xilosa dan
selanjutnya fermentasi menjadi etanol oleh ragi. Sampai saat ini, upaya penelitian difokuskan
pada biokonversi selulosa. Kemudian kesadaran bahwa efisiensi biokonversi lignoselulosa dan
limbah pertanian bergantung terutama pada pemanfaatan efektif komponen hemiselulosa
biomassa, menggeser perhatian dunia ke seluruh dunia terhadap fermentasi hemiselulosa (181).
Xylan adalah konstituen utama hemiselulosa dan terdiri dari unit xilosa yang dihubungkan oleh
hubungan b (1,4). D-Xylose mudah diproduksi oleh asam atau hidrolisis enzimatik xilan. Strain
ragi industri seperti Saccharomyces cerevisiae umumnya memfermentasi heksosa secara efisien
tetapi D-xilosa tetap tidak digunakan. Beberapa khamir seperti Pachysolen tannophilus, Pichia
stipitis, Candida utilis, dan Candida shehatae diketahui menggunakan pentosa melalui jalur
oksidasi, tetapi laju transfernya menurun (60,61,152,165). Selain itu, toleransi etanolnya rendah
dan katabolisme etanol di hadapan oksigen membatasi aplikasi komersial mereka (58, 59, 113).
GI telah digunakan untuk menghasilkan xilulosa dari xilosa, yang sebaliknya merupakan blok
metabolik utama dalam proses fermentasi xilosa menjadi etanol oleh ragi konvensional seperti
Saccharomyces cerevisiae, Schizosaccharomyces pombe, dan Candida tropicalis (39, 40, 41, 78,
143 , 180, 181). Meskipun laju fermentasi dan hasil produk untuk produksi etanol dari D-
xylosear didesain secara spesifik lebih lambat dari glukosa, teknologi sekarang muncul untuk
meningkatkan proses dengan mentransfer gen GI ke ragi dan melakukan isomerisasi dan
fermentasi xilosa menjadi etanol secara bersamaan.
 PENUTUP

International Union of Biokimia (1984) telah mengklasifikasikan enzim ke dalam enam

kelas yang berbeda berdasarkan jenis reaksi yang dikatalisis. Isomerase adalah enzim kelas lima
dalam Klasifikasi Enzim. Isomerase adalah kelas enzim yang mengkatalisasi perubahan
geometris atau struktural dalam satu molekul. Menurut jenis isomerisme, mereka dapat disebut
racemases, epimerases, cis-trans-isomerases, isomerases, tautomerases, mutases atau
cycloisomerases. Salah satu enzim isomerase penting dalam industri makanan adalah
glukosa isomerase (GI) yang sangat diminati karena pentingnya dalam produksi komersial sirup
jagung fruktosa tinggi (HFCS),serta etanol.
 DAFTAR PUSTAKA

Paul, Pandeeti,dkk.2019. Emerging Trends in the Industrial Production of Chemical Products

by Microorganisms. Recent Developments in Applied Microbiology and Biochemistry
,Chapter 9,107-125.

Bhasin,Shetal,dan A.Modi,H.2012. Optimization of Fermentation Medium for the Production

of Glucose Isomerase Using Streptomycessp.SB-P1. Vol 2012, 10

Asad Rahman,Syed,dkk. 2014.The evolution of enzyme function in the

isomerases.26:121-130

H.Bhosale,Shenalata,dkk.1996. Molecular and Industrial Aspects of Glucose

Isomerase. Vol. 60, No. 2, 280-300

Permanasari,A.R.2019. Fructose syrup production from Onggok with isomerization

process by Mg/Al hydrotalcite catalyst and glucose isomerase enzyme

S.Desai,Savitha,dkk. 2016. Glucose Isomerising Enzymes.69-84