Med Sci Law OnlineFirst, diterbitkan pada 21 Juni 2015 sebagai doi: 10.

1177 / 0025802415590175

Mengulas artikel

Kedokteran, Sains dan Hukum

0 (0) 1–10

Penanda vitalitas luka kulit dalam patologi forensik: ! Penulis (s) 2015 Cetak Ulang dan
izin:

Ulasan terbaru sagepub.co.uk/journalsPermissions.nav

DOI: 10.1177 / 0025802415590175

msl.sagepub.com

Jean-Matthieu Casse 1, Laurent Martrille 2, Jean-Michel Vignaud 1

dan Guillaume Gauchotte 1

Abstrak
Evaluasi usia luka adalah salah satu masalah paling menantang dalam patologi forensik. Pada menit atau jam pertama, pemeriksaan histologis standar mungkin
tidak dapat menentukan apakah luka telah terjadi pada periode sebelum atau sesudah kematian. Walaupun infiltrasi sel darah merah secara klasik dianggap
sebagai tanda reaksi vital, beberapa penelitian menunjukkan bahwa ekstravasasi sel darah juga dapat terjadi setelah kematian dan tidak dapat digunakan
sebagai penanda yang dapat diandalkan dalam diagnosis vitalitas luka. Banyak penelitian tentang vitalitas luka tersedia dalam literatur. Mereka telah
mengevaluasi penanda yang terlibat dalam koagulasi atau peradangan, menggunakan berbagai metode seperti enzim, biologi molekuler atau imunohistokimia.
Dalam pembaruan ini, pertama-tama kami memperkenalkan beberapa prinsip metodologis. Kemudian, kami meninjau studi utama yang tersedia di literatur.
Imunohistokimia tampaknya menjadi metode yang paling berharga, mengingat aplikasinya yang mudah dan kemungkinan untuk menganalisis lokalisasi
molekul yang diinginkan. Beberapa penanda cukup menjanjikan, seperti CD15, TNF Sebuah, IL-6, IL-1 b, TGF Sebuah atau TGF b 1. Sebelum diterapkan
dalam praktik sehari-hari, hasil awal ini perlu dikonfirmasi dengan penelitian lain, yang dilakukan oleh tim independen dan mengintegrasikan banyak kontrol.
Terutama, antibodi harus diuji pada banyak luka postmortem. Memang, ada risiko kritis ekspresi berlebih pada luka post-mortem. Beberapa penanda yang
menjanjikan kemudian dibatalkan karena post-mortem false positive. Akhirnya, nilai sensitivitas dan spesifisitas yang optimal mungkin dapat dicapai dengan
menggabungkan beberapa penanda, divalidasi oleh kelompok besar luka sebelum dan sesudah kematian.

Kata kunci
Luka, vitalitas, penanda, imunohistokimia, forensik, patologi

teknik seperti enzim, imunohistokimia atau biologi molekuler. Sampai

pengantar saat ini, tidak ada penanda yang terbukti efisien dan dapat
diandalkan.
Dalam investigasi medico-legal, perkiraan usia luka tetap menjadi
Memang, hasilnya kontradiktif, karena kurangnya reproduktifitas
perhatian utama dalam banyak situasi. Dalam kasus kematian akibat
atau kinerja diagnostik yang tidak memadai, sementara beberapa
kekerasan, luka kulit dapat diambil sampelnya selama otopsi untuk
studi
menentukan interval waktu antara trauma dan kematian. Yang paling
masih pendahuluan dan kasus dan kontrol yang kurang memadai. 4–6
menonjol, ahli patologi forensik harus membedakan ante-mortem dari
Beberapa penanda baru tampaknya menjanjikan. Namun, penelitian tambahan
luka postmortem, dan mencoba mengevaluasi waktu bertahan hidup
dengan rangkaian kasus besar yang memadai, kontrol, dan
korban.
peneliti independen diperlukan.

Pada menit atau jam pertama, pemeriksaan histologis standar

mungkin tidak dapat menentukan apakah luka telah terinfeksi pada
Dalam ulasan ini, pertama-tama kami memperkenalkan beberapa
periode pra atau post-mortem. Sementara ekstravasasi sel darah merah
prinsip metodologis. Kemudian, kami menyelidiki penanda yang paling
secara klasik dianggap sebagai tanda reaksi vital, beberapa penelitian
menjanjikan dan kegunaan potensinya dalam aplikasi forensik.
menunjukkan bahwa ekstravasasi sel darah juga dapat terjadi setelah
kematian dan tidak mewakili penanda yang dapat diandalkan dalam
diagnosis vitalitas luka. 1–3 Dengan demikian, keberadaan infiltrasi neutrofil
1 Departemen Patologi, CHU Nancy; INSERM U954, Fakultas Kedokteran, Université de
polimorfonuklear (PMN) sampai saat ini merupakan satu-satunya kriteria
Lorraine, Prancis
histologis yang dapat diandalkan untuk membedakan pre-mortem 2 Departemen Kedokteran Hukum, CHU Nancy; Université de Lorraine, Prancis

baru-baru ini dari luka postmortem.

Penulis yang sesuai:

Guillaume Gauchotte, CHU Nancy, Université de Lorraine 29, avenue du Maréchal de Lattre
Studi ilmiah di bidang ini berhubungan dengan penelitian tentang penanda yang
de Tassigny, Nancy, 54000, Prancis. Email: g.gauchotte@chu-nancy.fr
relevan dari asal usul vital, menggunakan tambahan Diunduh dari msl.sagepub.com di University of New England pada tanggal 1 Juli 2015
2 Kedokteran, Sains dan Hukum 0 (0)

Patofisiologi penyembuhan

Proses penyembuhan luka mencakup fase berurutan dan

menyangkut cedera kulit serta kerusakan organ lainnya. 7–9

Pembentukan gumpalan darah memulai proses ini. Ini diikuti oleh

peradangan, untuk merekrut leukosit dan mencegah infeksi. Selama
proses peradangan ini, kerusakan jaringan yang rusak terjadi melalui
nekrosis atau apoptosis. Sel pemulung yang direkrut menghilangkan
puing-puing dan mencapai debridemen jaringan. Kemudian, fase
regenerasi dimulai dengan pembentukan jaringan granulasi di lokasi
luka. Akhirnya, epitel baru menggantikan jaringan granulasi, dan
jaringan yang baru terbentuk ini matang untuk menutupi cacat dan
membentuk bekas luka baru. 9,10

Fase-fase berbeda ini kurang lebih saling tumpang tindih. Banyak faktor
yang dapat memengaruhi proses penyembuhan, 4,11 seperti usia, 12,13 penyakit
yang sudah ada sebelumnya 11 dan pengobatan atau konsumsi obat
sebelumnya. 14,15

Apalagi lokalisasi luka 12 dan lingkar-

Sikap seputar cedera harus diteliti, bersama dengan kondisi lingkungan
saat mayat terpapar dan artefak post-mortem. 11

Akhirnya, pengambilan sampel jaringan dan prosedur laboratorium dapat

memengaruhi analisis.
Berbagai peneliti telah mendeskripsikan penentuan usia cedera
menggunakan kriteria histologis standar melalui kronologi penyembuhan
luka ini. Selain itu, pelepasan beberapa mediator (faktor koagulasi,
sitokin, faktor pertumbuhan, dll.) Oleh jaringan yang rusak dapat
Gambar 1. ( a) Pemeriksaan histologis standar yang menunjukkan infiltrasi
menambah wawasan yang menjanjikan untuk mengidentifikasi indikator
hemoragik (panah) di tepi luka bedah mayat. (b) Neutrofil polimorfonuklear
yang relevan.
perivaskular (mata panah) pada luka tusuk pra-mortem baru-baru ini
(hematoksilin, eosin, dan kunyit, 400).

Histologi konvensional
setelah cedera. Meskipun demikian, ahli patologi harus ingat bahwa sel
Infiltrasi hemoragik dianggap sebagai tanda vital, tetapi beberapa
inflamasi basal dapat diamati pada jaringan yang tidak terluka.
penelitian mengungkapkan bahwa ekstravasasi sel darah merah juga
dapat terjadi setelah henti peredaran darah. 1–3 ( Gambar 1 (a)).
Temuan histologis standar harus ditangani dengan hati-hati
Kehadiran sel inflamasi adalah satu-satunya temuan histologis
karena variasi antar atau intra-individu yang besar. Pada luka baru-
standar yang solid yang berasal dari ante-mortem. 11,16 Granulosit
baru ini, PMN tidak dapat diamati selama beberapa menit atau jam
adalah sel pertama yang bermigrasi ke lokasi luka. Pengamatan
setelah cedera. Akibatnya, peradangan pada luka pra-mortem atau
pertama PMN bervariasi antara 10 menit dan 12 jam, dan dalam
post-mortem membutuhkan teknik tambahan lebih lanjut.
banyak kasus dalam 1-2 jam. 6,7 Reaksi PMN dimulai dengan
marginalisasi sel pada endotelium dan diapedesis melintasi dinding
pembuluh darah. Dengan demikian, bukti infiltrasi granulosit pada
awalnya harus dievaluasi pada area pembuluh kecil dan jaringan
perivaskular (Gambar 1 (b)).
Studi tambahan: Metodologis
prinsip

Sejumlah besar zat disekresikan selama proses penyembuhan.

Secara khusus, penanda yang terlibat dalam langkah pertama
Sel radang lainnya dapat memberikan informasi tambahan untuk
penyembuhan luka (hemostasis, inisiasi peradangan) harus
estimasi interval pasca trauma. 6,7,11,17 Memang, monosit bermigrasi
dipertimbangkan sebagai efektif dalam diagnosis vitalitas luka.
ke daerah luka setelah ekstravasasi dan kemudian berubah menjadi
Deteksi dini dari penanda yang relevan ini mencerminkan pelepasan
makrofag fagositik. Penundaan 4–8 jam sebelum makrofag muncul
molekul yang baru terbentuk atau dibentuk sebelumnya.
dapat diamati. Siderofag (makrofag dengan pengendapan siderin
intraseluler) terjadi setelah 1-2 hari dan endapan hematoidin muncul
Parameter yang dipelajari harus tidak ada dalam kondisi fisiologis
setelah kira-kira 15 hari. Limfosit infiltrasi terlihat jelas dalam 2-3 hari
atau meningkat secara signifikan di lokasi luka. Evaluasi kuantitatif
Diunduh dari msl.sagepub.com di University of New England pada tanggal 1 Juli 2015
2 Kedokteran, Sains dan Hukum 0 (0)
atau semikuantitatif dilakukan dalam kasus terakhir ini,
dan referensi

Diunduh dari msl.sagepub.com di University of New England pada tanggal 1 Juli 2015
Casse dkk. 3

ambang batas harus ditentukan versus pengendalian internal. 4

luka postmortem dilakukan selama otopsi,
Margin of error harus dievaluasi secara statistik dengan menentukan
interval kepercayaan, sensitivitas, spesifisitas, dan nilai prediksi positif
dan negatif. Sampel dalam jumlah besar dibutuhkan untuk
mengurangi interval kepercayaan. Bukti nilai penanda ditetapkan
dengan sensitivitas dan spesifitas: sangat penting untuk mendapatkan
jumlah kasus palsu negatif dan negatif terkecil. Untuk menggunakan
penanda dalam konteks hukum, sensitivitas dan / atau spesifikasi
harus hampir 100%. Selain itu, penggunaan yang tepat dari berbagai
kontrol negatif dan positif diperlukan untuk memvalidasi analisis nilai
diagnostik dan memberikan informasi yang solid. 18

Selanjutnya,
Interval waktu terkecil untuk mendeteksi penanda harus ditetapkan
secara tepat untuk mendokumentasikan usia luka minimum. 4 Saat
menggunakan metode morfologi, analisis juga harus dilakukan secara
independen oleh dua peneliti untuk mengevaluasi reproduktifitas antar
pengamat.

Berbagai metode dapat digunakan untuk mendeteksi indikator ini:

studi mRNA (RT-PCR, hibridisasi in situ), protein (teknik ELISA,
Western blot) atau teknik berorientasi morfologis seperti
imunofluoresensi dan imunohistokimia. 6,18,19 Di

patologi forensik, imunohistokimia adalah metode pilihan karena

keandalannya dan penerapannya yang mudah dalam jaringan yang
tertanam di dalam partikel berformalin. 20

Berlawanan dengan kebanyakan teknik, metode morfologi ini

memungkinkan lokasi zat yang diinginkan di dalam substruktur
jaringan atau sel.
Beberapa studi ilmiah telah dipublikasikan tentang penanda
vitalitas. Pemilihan sampel sangat penting. Studi dirancang menurut
tiga model penelitian. 4 Pertama, sampel otopsi tampaknya menjadi
model yang paling akurat dan realistis, terutama jika waktu
kelangsungan hidup diketahui. Meskipun demikian, informasi ini sering
kali tidak ada atau tidak terdokumentasi dengan baik. Keadaan
peradangan luka juga merupakan faktor yang mempengaruhi; selain
itu, pemilihan sampel yang ketat diperlukan. Misalnya,
membandingkan luka tusuk dengan cedera benda tumpul dapat
menjadi tantangan. Kedua, model penelitian dengan sampel bedah
dapat melibatkan kondisi terkontrol dan standar. Namun, hasilnya
tidak sepenuhnya mirip dengan kenyataan, karena anestesi,
pemberian obat, atau kondisi stres. 18

Eksperimen hewan memiliki keuntungan dari kondisi yang terkontrol

sepenuhnya, 21,22 tetapi hasilnya harus dikonfirmasi dengan data
jaringan manusia sebelum aplikasi dalam patologi forensik.

Evaluasi penanda imunohistokimia pada luka postmortem sangat

penting untuk mengecualikan pelabelan artefak supravital. 23,24 Jika
luka diambil sampelnya secara tegak lurus dengan marginnya,
ekspresi marker dapat dibandingkan dengan margin yang berlawanan
sebagai kontrol internal post-mortem. 18 Selama otopsi, yang lainnya

kemungkinan adalah untuk mengambil sampel jaringan kontrol

pada margin sayatan dada-perut median. Namun, pengendalian
Diunduh dari msl.sagepub.com di University of New England pada tanggal 1 Juli 2015
Casse dkk. 3
seringkali beberapa hari setelah kematian, kurang relevan pada gambar dan tidak adanya referensi lain untuk FVIII dalam
dibandingkan luka yang timbul beberapa menit setelah kematian. literatur membuat kami percaya bahwa penanda ini mungkin antigen
Memang, interval yang lama antara cedera dan kematian dapat terkait FVIII (FVIIIra, juga dikenal sebagai
mengurangi risiko ekstravasasi darah post-mortem artefaktual
dan kemotaksis supravital hipotetis. 25 Sementara beberapa
penelitian telah mengusulkan model hewan untuk evaluasi
cedera yang diderita pada interval post-mortem awal, 26 kami
merancang model manusia ex-vivo asli dari luka
post-mortem baru-baru ini, yang terdiri dari luka yang ditimbulkan
pada spesimen bedah, 5 menit setelah devaskularisasi. 27

Faktor yang terlibat dalam keseimbangan hemostasis

Fase pertama hemostasis dimulai dengan penyempitan

vaskular segera setelah peradangan luka. Endotelium yang
teraktivasi menghasilkan faktor vasokonstriksi seperti amina
untuk membatasi perdarahan dan ekstravasasi sel darah
merah. Hemostasis primer menyebabkan pembentukan
sumbat trombosit dan pelepasan berbagai zat seperti histamin,
serotonin, tromboksan, prostaglandin, faktor pengaktif
trombosit (PAF), faktor pertumbuhan yang diturunkan trombosit
(PDGF), dan faktor pertumbuhan atau sitokin (TGF- b, IL-1,
TNF). Sebagian besar faktor ini juga terlibat dalam permulaan
proses peradangan. 28

Hemostasis sekunder melibatkan faktor pembekuan darah

dan kofaktor dalam kaskade koagulasi yang mengubah
fibrinogen di bawah pengaruh trombin. Hasil akhir dari reaksi
sekuensial ini adalah bekuan yang stabil dengan untaian serat
yang terhubung silang.

Karena pelepasan atau produksi awal, zat yang ada dalam

hemostasis dapat menjadi penanda berharga untuk diagnosis
vitalitas. Namun, di bidang patologi forensik, beberapa penulis
telah mempelajari faktor-faktor yang berhubungan dengan
keseimbangan hemostatik. Dua penanda kunci
didokumentasikan dalam literatur: fibrin dan D-dimer.
Fibrin hadir di lokasi luka beberapa menit setelah luka. Meskipun
fibrin tampaknya menjadi penanda yang cocok untuk asal usul
yang vital dalam beberapa penelitian, 18,29,30 beberapa penelitian
berdasarkan imunohistokimia telah mendokumentasikan
kepositifan fibrin pada cedera post-mortem. 18,29,31

D-dimer, produk degradasi jaringan fibrin, bisa menjadi

penanda vitalitas luka, seperti yang dijelaskan dalam studi uji
ELISA menggunakan jaringan beku. 32 Bukti perbedaan yang
signifikan secara statistik hanya diberikan pada luka kulit yang
diiris, dan bukan pada lecet dan kontusio. Namun,
peningkatan sensitivitas dibandingkan dengan histologi tidak
dijelaskan dan interval waktu antara luka dan kematian tidak
ditentukan. Diperlukan penelitian lebih lanjut tentang penanda
ini.

Selain zat tersebut, Van de Goot 7

melaporkan ekspresi berlebih faktor VIII (FVIII) dalam sel

endotel pada cedera vital dengan teknik imunohistokimia.
Dalam studi ini, ekspresi berlebih endotel yang kuat diamati
Diunduh dari msl.sagepub.com di University of New England pada tanggal 1 Juli 2015
4 Kedokteran, Sains dan Hukum 0 (0)

faktor von Willebrand). Memang, sebuah penelitian tentang lesi serebral

menggambarkan sel-sel endotel yang diwarnai dengan antibodi FVIIIra di
dalam jaringan yang rusak, diidentifikasi paling cepat 3 jam setelah trauma.
33 Pada jaringan normal, FVIIIra menunjukkan reaksi yang lemah atau tanpa
noda. Baru-baru ini, kami menunjukkan pewarnaan interstisial yang kuat
untuk FVIIIra, tetapi tidak ada peningkatan regulasi endotel pada batas luka
kulit pada cedera tusuk vital. 27 Dalam penelitian kami, kami mencatat
sensitivitas 100%, tetapi kami menemukan ekspresi berlebih FVIIIra di
banyak kontrol post-mortem, yang mengarah ke 47% spesifitas. Dengan
demikian, penanda ini tampaknya tidak berguna untuk menegakkan
diagnosis cedera intravital.

Molekul adhesi
Gambar 2. CD15. Beberapa pewarnaan neutrofil polimorfonuklear perivaskular

Molekul adhesi sel adalah protein yang terlibat dalam proses vitalitas luka. 39–42 Bisa jadi fibronektin
penyembuhan luka. Ekspresi zat ini oleh sel endotel memungkinkan
interaksi dengan leukosit, seperti rolling, adhesi, dan diapedesis;
mereka kritis pada fase peradangan awal. Pada fase regenerasi,
protein adhesi lebih penting untuk migrasi sel dalam sel seperti
fibroblas atau keratinosit.

Di antara molekul-molekul ini, molekul adhesi antar sel 1 (ICAM-1)

dan molekul adhesi sel vaskular 1 (VCAM-1) dilaporkan diekspresikan
oleh sel endotel di lokasi cedera. Namun, ICAM-1 dan VCAM-1 tidak
terdeteksi imunohistokimia masing-masing sampai 1 jam 30 menit dan
3 jam. 5,26

Ekspresi selektif tampaknya menjanjikan bila mempertimbangkan

temuan sebelumnya. 5,18,26,34 Deteksi interval waktu untuk E-selektin
bervariasi antara usia luka kulit 1 jam sampai 17 hari; oleh karena itu,
penanda ini tidak tampak lebih efisien daripada histologi standar
dalam mendiagnosis vitalitas luka kulit. Menariknya, P-selektin
dideskripsikan diwarnai sedini mungkin 3 menit setelah cedera.
Namun, Ortiz-Rey dkk. menjelaskan pewarnaan untuk P-selektin pada
sampel kulit postmortem dan menyimpulkan bahwa P-selektin
bukanlah penanda vitalitas luka yang spesifik. 35

Antigen CD15 diekspresikan dalam leukosit, terutama PMN dan

monosit teraktivasi, dan terlibat dalam peristiwa perekat seluler.
Memang, CD15 berkontribusi pada adhesi leukosit melalui interaksi
dengan selektin permukaan endotel. 36 Hausmann dkk. 37

menganalisis ekspresi CD15 dalam kontusio otak manusia dengan

imunohistokimia. Pewarnaan PMN dimulai paling cepat 10 menit
setelah kerusakan otak. Turillazzi dkk. 38 mengkonfirmasi ekspresi
granulosit CD15 pada tanda gantung vital tetapi tidak pada kontrol
post-mortem. Pada luka tusuk, kami menunjukkan ekspresi berlebih
CD15 yang signifikan pada luka vital, dengan interval waktu minimum
9 menit. 27

Sensitivitasnya adalah 47% (Gambar 2). Menariknya, CD15 tidak secara

signifikan diwarnai dalam sampel kontrol atau postmortem, yang mengarah
ke spesifisitas 100%. Variabilitas antar pengamat tergolong tinggi,
mencapai 0,90.
Beberapa penelitian menggambarkan fibronektin sebagai penanda
Diunduh dari msl.sagepub.com di University of New England pada tanggal 1 Juli 2015
4 Kedokteran, Sains dan Hukum 0 (0)
untuk CD15 (panah) dalam sayatan bedah vital (imunohistokimia, 400).

terdeteksi secara imunohistokimia dengan waktu bertahan

hidup beberapa menit. 39–42 Namun, Grellner melaporkan
bahwa pewarnaan fibronektin positif pada luka insisi
postmortem pada model kulit babi. 43

Kemokin,
sitokin, dan
zat pro-
inflamasi

Kemokin dan sitokin adalah mediator kimiawi dan memiliki

peran aktif dalam jalur komunikasi ekstraseluler. Protein
pengatur ini terlibat dalam fase peradangan dan proses
perbaikan luka dengan merekrut leukosit. Dengan cara ini,
infiltrasi PMN dipicu oleh sifat kemoattraktif dari zat ini,
seperti leukotrien B4 (LTB4), PAF dan interleukin 8 (IL-8).
44 Lebih lanjut, karena penanda ini disimpan atau baru
disintesis dengan waktu paruh pendek, ekspresi mereka
harus terjadi pada interval pasca-trauma awal.

Sampai saat ini, data yang tersedia menunjukkan

waktu minimum untuk mendeteksi zat-zat ini lebih dari 4
jam setelah cedera, yang mungkin tidak sesuai untuk
diagnosis vitalitas luka. 5 Kadar protein bisa terlalu
rendah pada menit-menit pertama setelah luka untuk
deteksi efektif dengan teknik terkini.

LTB4 diproduksi sebagai hasil metabolisme

fosfolipid membran leukosit. Dia dan Zhu 45

melaporkan peningkatan regulasi LTB4 pada luka kulit

ante-mortem menggunakan kromatografi cair kinerja tinggi
(HPLC). Untuk menerapkan teknik HPLC, durasi fiksasi
formalin sampel tidak boleh lebih dari 10 hari. Namun,
interval waktu minimum untuk kepositifan tidak dirinci
dalam penelitian ini. Serangkaian spesimen yang lebih
besar diperlukan untuk memastikan hasil ini dan untuk
mengevaluasi apakah LTB4 cocok untuk estimasi vitalitas
luka. Para penulis tidak memberikan bukti ekspresi
berlebih dari leukotrien lain (LTC4, LTD4) atau
prostaglandin. Prostaglandin, seperti prostaglandin F2a
(PGF2a), tampaknya tidak relevan untuk mempelajari
vitalitas luka kulit. Memang, Hernández-Cueto dkk. 46

menyimpulkan

Diunduh dari msl.sagepub.com di University of New England pada tanggal 1 Juli 2015
Casse dkk. 5

penyelidikan mereka dengan menyebutkan kesulitan dan

histamin menginduksi vasodilatasi, peningkatan permeabilitas
kerugian teknis dari analisis PGF2a, seperti biaya tinggi, banyak
vaskular, dan ekstravasasi leukosit. Berbagai penelitian menunjukkan
faktor yang mempengaruhi dan protokol penanganan sampel.
variabilitas yang bergantung pada teknik yang berlebihan. Dengan
teknik HPLC, Raekallio et al. 54 melaporkan ekspresi berlebih setelah
PAF diekspresikan oleh sel endotel yang teraktivasi dan
15-30 menit, sedangkan tingkat histamin imunohistokimia meningkat
terlibat dalam respon inflamasi awal dan hemostasis.
hingga 100% setelah 60 menit. 55 Sebuah studi eksperimental dengan
Sepengetahuan kami, dalam patologi forensik, belum ada hasil
positif terkait zat yang berpotensi menarik ini yang dilaporkan. model murine, menggunakan metode fluorometri mikro, menunjukkan
18
bahwa tingkat histamin kulit diatur setelah 30 menit. Tidak ada
hubungan statistik yang ditemukan antara jumlah sel mast dan tingkat
Faktor nekrosis tumor alfa (TNF Sebuah) bisa menjadi alat yang
histamin. 56 Sampai saat ini, histamin bukanlah penanda yang dapat
berguna untuk estimasi vitalitas luka. Bacci dkk. 47 melaporkan peningkatan
diandalkan dalam patologi forensik.
yang signifikan dari TNF Sebuah-
sel mast positif 15 menit setelah cedera, menggunakan imunofluoresensi.
Lebih lanjut, Grellner et al., 48,49 menggunakan imunohistokimia,
Triptase adalah protease serin yang sebagian besar diekspresikan
menggambarkan pewarnaan sel epidermis setelah bertahan hidup 15
dalam sel mast dan merupakan mediator penting dalam reaksi
menit, mencapai intensitas maksimum setelah 60–90 menit. Investigasi
anafilaksis dan anafilaktoid. 57 Selain proses akut ini, triptase adalah
lain diperlukan untuk memastikan hasil ini.
mitogen yang dikenal untuk fibroblas kulit. Bonelli dkk. 58,59

menggunakan antibodi anti-tryptase dan chymase untuk mengevaluasi

Interleukin 1 beta (IL-1 b) adalah sitokin pro-inflamasi yang telah
kepadatan sel mast pada luka kulit dengan imunofluoresensi. Jumlah sel
disorot lebih awal setelah trauma. Bai et al. 50 melaporkan IL-1 b
mast dermal meningkat secara progresif dalam beberapa jam setelah
Ekspresi berlebih mRNA terjadi sekitar 30 menit setelah trauma, dan
trauma (puncaknya pada 1-3 jam). Namun, faktor yang mempengaruhi
level puncak pada 2 jam, menggunakan reaksi berantai polimerase
seperti pelepasan protein post-mortem dari sel mast perlu disingkirkan.
kuantitatif fluoresen (PCR) real-time. Grellner dkk., 49 menggunakan
Pada bekas kulit akibat gantung, Turillazzi et al., 38 menggunakan
imunohistokimia, menunjukkan IL-1 pertama b peningkatan regulasi
imunohistokimia, melihat ekspresi triptase berlebih di jaringan
setelah 15 menit dan ekspresi yang lebih tinggi antara 30-60 menit.
interstisial. Temuan ini dapat mencerminkan degranulasi sel mast
Pensinyalan sel muncul pertama kali di lapisan germinatif epidermis
pada tanda ligatur vital. Demikian pula, dalam margin luka baru-baru
yang terluka dan kemudian di lapisan granular. Epidermis kulit normal
ini, kami mengamati peningkatan laju degranulasi sel mast (Gambar
menunjukkan label negatif atau kurang dari 25% dari sel lapisan
3), tanpa perbedaan yang signifikan dalam jumlah sel triptase-positif,
germinatif. Terakhir, Grellner dkk. melengkapi pekerjaan mereka
27 mencapai sensitivitas 60% dan spesifisitas 100%. Namun, tingkat
dengan evaluasi interleukin 6 (IL-6), yang diekspresikan secara
degranulasi relatif sulit untuk dievaluasi, menyebabkan penelitian kami
berlebihan di epidermis setelah 20 menit, dengan puncak antara 60
pada koefisien kesepakatan antar pengamat yang buruk (0,42). 27
dan 90 menit. TNF Sebuah, IL-1 b dan IL-6 merupakan penanda
Akhirnya,
ampuh untuk estimasi usia luka. Seri yang lebih besar termasuk
analisis kontrol negatif, terutama sampel kulit post-mortem, diperlukan
untuk memvalidasi penanda ini dan menyingkirkan pewarnaan
supravital.

menggunakan teknik naphthol AS-D chloroacetate esterase

(NAS-DClAE), Oehmichen et al. 60 juga

Takamiya dkk. 51 mempelajari delapan sitokin (IL-2, IL-4, IL-6, IL-

8, IL-10, GM-CSF, IFN g dan TNF Sebuah)
dengan Sebuah multipleks berbasis manik immunoassay.
Peneliti memisahkan sitokin menjadi tiga kelompok sesuai dengan
ekspresi perjalanan waktu mereka: fase awal (IL-10, GM-CSF, IFN g,
TNF Sebuah), fase tengah (IL-6), fase tengah dan akhir (IL-2, IL-4, IL-
8).
Data yang diperoleh tidak secara langsung berlaku untuk patologi
forensik praktis, tetapi penanda ini bisa menjadi target
imunohistokimia potensial untuk penyelidikan di masa mendatang.
Terutama, studi eksperimental pada tikus 52 menunjukkan
peningkatan imunoreaktivitas IL-10, dengan label sel epidermis 1-3
jam setelah insisi. Ohshima dkk. mengamati IL-10mRNA meningkat
setelah 15 menit, dengan reverse transcriptase-PCR. 53

Peptida dan enzim vasoaktif Histamin adalah amina vasoaktif yang dilepaskan oleh basofil dan sel mast.
Diunduh dari msl.sagepub.com di University of New England pada tanggal 1 Juli 2015
Casse dkk. 5

Pada reaksi peradangan akut,

Gambar 3. Triptase. Degranulasi sel mast dalam margin luka bedah, diidentifikasi
oleh sinyal punctiform (panah) yang berdekatan dengan sel mast positif
(imunohistokimia, 400).

Diunduh dari msl.sagepub.com di University of New England pada tanggal 1 Juli 2015
6 Kedokteran, Sains dan Hukum 0 (0)
menekankan pentingnya degranulasi sel mast di tepi luka intravital.
Serotonin adalah monoamine dan neurotransmitter, didistribusikan
secara luas di sistem saraf pusat. Di pinggiran neuromodulator ini,
terutama yang disimpan dalam trombosit dan leukosit, dapat
memengaruhi nosiseptor dan memicu sensasi nyeri. Dengan teknik
HPLC, peningkatan ekspresi setelah 10-30 menit dilaporkan.
Imunohistokimia
serotonin pewarnaan
diamati sedini 5 menit, tetapi sementara dan punah setelah 15 menit.
65 Dalam patologi forensik, penggunaan serotonin akan dibatasi.
Katepsin adalah enzim lisosom yang terlokalisasi dalam sel
inflamasi. Cathepsin A dan D telah dipelajari sebagai penanda vitalitas
potensial. 66–68
Studi eksperimental pada babi dan manusia, menggunakan
spektrofotometri, mencatat peningkatan aktivitas enzimatik
cathepsin beberapa menit setelah luka kulit diterima. Peneliti
menekankan manfaat yang diharapkan dari cathepsin D. Dalam
praktiknya, penggunaan penanda ini perlu penyelidikan lebih lanjut.
Faktor pertumbuhan dan molekul yang
berhubungan dengan penyembuhan luka
Selama proses penyembuhan luka kulit, faktor pertumbuhan sangat
penting untuk mengatur dan menstimulasi perbaikan jaringan.
Molekul-molekul ini hadir dalam sebagian besar langkah
penyembuhan: angiogenesis dengan faktor pertumbuhan endotel
vaskular (VEGF) dan faktor pertumbuhan serat dasar (bFGF),
proliferasi keratinosit dengan faktor pertumbuhan epidermal (EGFs)
dan faktor pertumbuhan transformasi Sebuah ( TGF Sebuah),
proliferasi serat dan produksi matriks ekstraseluler dengan TGF b 1
dan faktor pertumbuhan fibroblast (FGFs). 5,6,18,69
TGF Sebuah dan TGF b 1 adalah penanda paling menjanjikan dalam
kelompok molekul ini. Memang, Grellner dkk. 70
menyelidiki relevansinya untuk estimasi usia luka kulit. Di satu sisi, TGF
Sebuah-
sel positif diamati antara 10 dan 20 menit, dengan reaksi yang lebih
kuat antara 30 dan 60 menit setelah peradangan luka. Pewarnaan
melibatkan keratinosit lapisan spinosus (lapisan epidermis median).
Kulit normal tidak bereaksi terhadap TGF Sebuah antibodi, atau hanya
bereaksi sedikit. Investigasi kontrol kulit dari individu yang sama perlu
dilakukan untuk menghilangkan variasi ekspresi basal. Tidak ada
informasi yang diberikan tentang pewarnaan kontrol post-mortem; oleh
karena itu, hasil yang menarik ini harus dikonfirmasi.
Di sisi lain, TGF b 1 juga dianalisis oleh Grellner et al. dan mereka
mengamati ekspresi TGF yang berlebihan b 1 setelah beberapa menit
paling awal, dengan puncak antara 30 dan 60 menit. Pola pewarnaan
berkaitan dengan lapisan epidermis basal dan spinosus, terutama
pada area kulit yang mengalami trauma. Reaktivitas ditekankan pada
daerah perdarahan dan di dermis atas. Namun, penulis tidak
sepenuhnya yakin akan keandalan penanda ini pada cedera post-
mortem: reaksinya mungkin juga positif pada post-mortem.
Diunduh dari msl.sagepub.com di University of New England pada tanggal 1 Juli 2015
luka dengan perdarahan berturut-turut. Memang, penyelidik lain
sebelumnya telah melaporkan post-mortem TGF b 1 kepositifan.
71
Dalam proses penyembuhan luka, banyak zat lain yang
diperhitungkan seperti komponen matriks ekstraseluler (kolagen tipe
III, IV, V dan
VI, laminin, dll.) Atau penanda jenis sel tertentu seperti aktin otot
dulu
polos untuk sel mioid (miofor, miosit, dll.). 5,18 Zat-zat ini tampaknya
18,61–
tidak relevan untuk penilaian vitalitas luka, karena ekspresinya yang
terlambat, setelah beberapa hari.
Diskusi
Sampai saat ini, teknik yang berbeda dapat diterapkan pada spesimen
forensik untuk memperkirakan usia luka. Ahli patologi forensik mungkin
mempertimbangkan imunohistokimia sebagai metode yang paling cocok
karena aksesnya yang mudah dan penggunaannya dengan jaringan yang
tertanam dengan paralon yang telah difiksasi. Selain itu, metode morfologi ini
memungkinkan lokalisasi penanda ditentukan secara akurat dalam
substruktur jaringan atau sel.
Berbagai penelitian tentang ekspresi sitokin seperti TNF Sebuah,
IL-1 b dan IL-6 atau faktor pertumbuhan seperti TGF Sebuah telah
menunjukkan hasil yang menjanjikan, dengan pewarnaan positif dalam
menit pertama setelah peradangan luka (Tabel 1). Investigasi
independen lain diperlukan untuk memastikan hasil ini sebelum
digunakan dalam praktik sehari-hari. Selanjutnya, untuk menyingkirkan
reaksi supravital perlu dilakukan evaluasi penanda pada luka
postmortem. Memang, karena penanda harus menyajikan spesifikasi
yang optimal untuk digunakan dalam prosedur hukum, risiko kepositifan
palsu sangat penting. Beberapa zat, seperti fibronektin atau P-selektin,
tidak dapat diandalkan karena temuan positif palsu dalam kasus
post-mortem. Salah satu kriteria standar utama dalam evaluasi
penanda imunohistokimia adalah reproduktifitas antar pengamat.
Namun, tidak ada data tentang reproduktifitas yang ditemukan di
sebagian besar penelitian.
Poin penting lainnya adalah mengevaluasi keandalan penanda ini
dalam spesimen yang diubah. Memang, pembusukan sering terjadi
dalam konteks mediko-legal, dan dalam situasi ini histologi standar
sering gagal mendeteksi temuan morfologis seperti menginfiltrasi sel
inflamasi. Sangat sulit dalam bidang ini untuk mendapatkan protokol
eksperimental yang dapat diterapkan pada patologi diagnostik forensik.
18 Bangkai hewan dapat digunakan, dengan hasil yang sebanding
dengan pembusukan alami, tetapi temuan ini perlu dikonfirmasi pada
spesimen manusia. Pembusukan ex-vivo yang terkendali dapat
digunakan dengan jaringan manusia, meskipun ini tidak secara
keseluruhan sebanding dengan pembusukan seluruh tubuh manusia,
terutama karena
komposisi mikroba fl ora dan gas pembusukan tidak dapat secara ketat
dialihkan ke protokol ex-vivo. Kami sebelumnya menguji protokol
pengeringan dan pembusukan ex-vivo, yang menunjukkan
imunohistokimia yang tidak dapat diandalkan pada spesimen yang
diubah. 27 Kami melakukan sampel kulit manusia pada 1, 2 dan 3
minggu untuk dikeringkan di udara terbuka
 Ca
Tabel 1. Penanda vitally imunohistokimia utama dipelajari dalam patologi forensik (spesimen yang tertanam parafin). Positif palsu ditentukan oleh ekspresi berlebih pada luka post-mortem dan negatif palsu dengan kurangnya ekspresi pada sampel kulit
ss
yang terluka. e
dk
Marker Lokasi Menunda Sampel ( n) Kontrol ( n) Positif palsu Negatif palsu Referensi k.

FVIIIra Pengantara ND Otopsi (12) dan pembedahan (58) Lesi post mortem (8) dan Ya (17/32) Tidak Gauchotte, 2013
sampel kontrol bedah (24)

E-selectin Vaskular 1j Otopsi dan pembedahan (197) Lesi post-mortem (31) Tidak Ya (96/197) Dressler, 1999

Vaskular 1j Otopsi (194), operasi (100), Lesi post-mortem (31) ND ND Dressler, 2000
model murine (140)

P-selektin Vaskular 3mn Otopsi dan pembedahan (197) Lesi post-mortem (31) Ya (4/31) Tidak Dressler, 1999

Vaskular 3mn Otopsi (194), pembedahan (100), model Lesi post-mortem (31) ND ND Dressler, 2000
murine (140)
Diu
nd
uh Vaskular ND Bedah (24) Lesi post-mortem (14) Ya (ND) ND Ortiz-Rey, 2008
dar
i
CD15
msl
.sa
Leukosit 9mn Otopsi (12) dan pembedahan (58) Lesi post mortem (8) dan Tidak Ya (37/70) Gauchotte, 2013
ge
pu sampel kontrol bedah (24)
b.c
om
diFibronektin
Uni
Pengantara Beberapa mn (mnt), ND (53) Lesi post-mortem (6) Tidak Ya (7/53) Betz, 1992
ver
sity 30mn (maks)
of
Ne
w
En
Pengantara Beberapa mn Otopsi (13) Lesi post-mortem (13) Ya (ND) Tidak Betz, 1993
gla
nd
pa
Pengantara ND (bedah mayat) Model babi Lesi post-mortem (36) Ya (18/36) ND Grellner, 1999
da
tan
gg TNF Sebuah Sel tiang 15mn Otopsi (40) Lesi post mortem (10) dan Tidak Ya (ND) Bacci, 2006
al 1
Juli
20
biopsi bedah (10)
15

Keratinosit 15mn (mnt), Otopsi dan pembedahan (105) Pengendalian internal * (105) ND Ya (ND) Grellner, 2002
60-90mn (maks)

IL-1 b Keratinosit 15mn (mnt), Otopsi dan pembedahan (105) Pengendalian internal * (105) ND Ya (ND) Grellner, 2002
30–60mn (maks)

IL-6 Keratinosit 20mn (mnt), Otopsi dan pembedahan (105) Pengendalian internal * (105) ND Ya (ND) Grellner, 2002
60–90mn (maks)

Triptase Sel tiang

1mn Otopsi (12) dan pembedahan (58) Lesi post mortem (8) dan Tidak Ya (28/70) Gauchotte, 2013
sampel kontrol bedah
(24)
TGF Sebuah Keratinosit Otopsi dan pembedahan (74) Pengendalian internal * (74) ND Ya (33/74) Grellner, 2005
10mn (mnt),
30–60mn (maks)

TGF b 1 Keratinosit
Beberapa mn (mnt), Otopsi dan pembedahan (51) Pengendalian internal * (51) ND Ya (5/51) Grellner, 2005
30–60mn (maks)

h: jam; mn: menit; ND: tidak didokumentasikan; min: interval waktu minimum; maks: interval waktu maksimum; *: situs yang tidak terluka dalam spesimen yang sama.

7
8 Kedokteran, Sains dan Hukum 0 (0)

botol, dan pembusukan buatan dalam darah manusia yang diperoleh 15. Mann M dan Bednár B. Pengaruh usia dan obat yang berbeda pada
dari spesimen kolektomi. Namun, pewarnaan untuk triptase dan CD15 proses penyembuhan luka di kulit manusia.
Gerontologia 1977; 23: 277–289.
tidak dapat dianalisis dengan akurat dalam sampel yang diubah ini.
16. Ksatria B. Patologi forensik. Judul Utama Arnold
Hodder Group, 2004, 136–173.
Sebagai kesimpulan, meskipun beberapa penelitian tentang penilaian
17. Perper J. Diagnosis mikroskopis dalam patologi
vitalitas tersedia dalam literatur, beberapa penanda tampaknya sensitif
forensik. Springfield IL: Penerbit Charles C Thomas
dan / atau cukup spesifik, serta mudah diidentifikasi, untuk penggunaan
LTD,
sehari-hari dalam patologi forensik. Sampai saat ini, belum ada penanda 1980, hlm. 17–34.
yang secara pasti divalidasi, karena jumlah kontrol positif dan negatif yang 18. Cecchi R. Memperkirakan usia luka: Melihat ke masa depan. Int J Legal Med
terlalu kecil, atau karena tidak adanya evaluasi reproduktifitas 2010; 124: 523–536.
antar-pengamat. Akhirnya, menggabungkan beberapa penanda mungkin 19. Betz P. Parameter imunohistokimia untuk perkiraan usia luka kulit
akan berkontribusi pada sensitivitas dan spesifisitas yang memadai untuk manusia. Sebuah review. Am J Forensik Med Pathol 1995; 16: 203–

menggunakan analisis ini sebagai bukti di pengadilan. 209.

20. Dettmeyer RB. Peran histopatologi dalam praktik forensik: Gambaran umum.
Forensik Sci Med Pathol 2014; 10: 401–412.

Pendanaan
21. Kondo T dan Ohshima T. Dinamika sitokin inflamasi dalam proses
Penelitian ini tidak menerima hibah khusus dari lembaga pendanaan mana penyembuhan luka kulit tikus: Studi pendahuluan untuk
pun di sektor publik, komersial, atau nirlaba. kemungkinan penentuan usia luka. Int J Legal Med 1996; 108: 231–
236.
Referensi
1. Prinsloo I dan Gordon I. Artefak bedah mayat pada leher; diferensiasi
mereka dari memar antemortem. South Afr Med J Suid-Afr Tydskr Vir 22. Sato Y dan Ohshima T. Ekspresi mRNA sitokin proinflamasi selama
Geneeskd 1951; 25: 358–361. penyembuhan luka kulit pada tikus: Sebuah studi pendahuluan
untuk estimasi usia luka forensik (II). Int J Legal Med 2000; 113:
2. Strejc P, Pilin A, Klı́r P, dkk. [Asal, distribusi dan relokasi 140–145.
perdarahan supravital]. Lek keras
2011; 56: 18–20. 23. Madea B dan Grellner W. Vitalitas dan supravitalitas dalam
3. Pollanen MS, Perera SDC dan Clutterbuck DJ. Pewarnaan hemoragik Kedokteran Forensik. Lubeck: Schmidt Romhld, 1996, hlm. 259–
pada leher: Induksi terkontrol dari perdarahan hipostatik postmortem. 282.
Am J Forensik Med Pathol 2009; 30: 322–326.
24. Fieguth A, Kleemann WJ, von Wasielewski R, dkk. Pengaruh perubahan
4. Grellner W dan Madea B. Tuntutan studi ilmiah: Vitalitas luka dan postmortem pada reaksi imunohistokimia di kulit. Int J Legal Med 1997;
estimasi usia luka. 110: 18–21.
Forensik Sci Int 2007; 165: 150–154.
5. Kondo T. Waktu terjadinya luka kulit. Leg Med Tokyo 25. Grellner W, Madea B, Kruppenbacher JP, dkk. Interleukin-1 alpha (IL-1
Jpn 2007; 9: 109–114. alpha) dan N-formyl-methionyl-leucyl-phenylalanine (FMLP) sebagai
6. Oehmichen M. Vitalitas dan perjalanan waktu penginduksi potensial kemotaksis supravital. Int J Legal Med 1996;
luka. Forensik Sci Int 2004; 144: 221–231. 109: 130–133.
7. Van De Goot F. Penanggalan kronologis cedera. Di:
Dasar-dasar praktik otopsi. London: Springer- 26. Dressler J, Bachmann L, Strejc P, dkk. Ekspresi molekul adhesi pada

Verlag, 2008, hlm. 167–181. luka kulit: Nilai diagnostik dalam pengobatan legal. Forensik Sci Int

8. Martin P. Penyembuhan luka - bertujuan untuk regenerasi kulit yang 2000; 113: 173–176.

sempurna. Ilmu 1997; 76: 75–81.

27. Gauchotte G, Wissler MP, Casse JM, dkk. FVIIIra, CD15, dan kinerja
9. Penyanyi AJ dan Clark RA. Penyembuhan luka kulit.
triptase dalam diagnosis vitalitas luka tusuk kulit dalam patologi forensik.
N Engl J Med 1999; 341: 738–746.
Int J Legal Med 2013; 127: 957–965.
10. Kilau AD. Kemokin - sitokin kemotaktik yang memediasi peradangan. N Engl
J Med 1998; 338: 436–445.
28. Elalamy I dan Samama M. Physiologie de
l'hémostase. Encycl Méd-Chir 2001.
29. Laiho K. studi imunohistokimia tentang fibrin pada perdarahan subkutan
vital dan postmortem.
Ann Acad Sci Fenn 1967; 128: 1–85.
30. Laiho K dan Uotila U. Demonstrasi fibrin pada perdarahan jaringan. Alam 1966;
11. D
R. Forensik 212: 1580–1581.
e
t histopatologi.
t Berlin,
m
e
y
e
r
Heidelberg: Springer-Verlag, 2011. luka dan luka, pencegahan tetanus].
12. Nerlich ML dan Bosch U. [Perawatan Orthopade 1988; 17: 11–16.
Diunduh dari msl.sagepub.com di University of New England pada tanggal 1 Juli 2015
8 Kedokteran, Sains dan Hukum 0 (0)

31. Fracasso T, Brinkmann

13. Raekallio J dan B, Beike J, dkk. Darah
Mäkinen PL. menggumpal sebagai
Pengaruh penuaan tanda keracunan
pada reaksi vital alkohol: Sebuah studi
enzim histokimia. Z retrospektif.
Für Diisi Ulang J Int J Legal Med 2008; 122: 157–
Leg Med 1974; 75: 161.
105–111. 32. Hernández-Cueto C,
Vieira DN, Girela
14. Bode G, Garbe G, Stöckigt E, dkk.
W, dkk. [Pengaruh Kemampuan
hipnotik pada diagnostik D-dimer
perkembangan morfologi dalam
dan reaksi luka biokimia pembentukan
(terjemahan penulis)]. Z vitalitas luka.
Für Diisi Ulang J Leg Med Forensik Sci Int
1979; 82: 337–347. 1995; 76: 141–
149.

33. Hausmann R dan Betz

P. Kursus waktu
respon vaskular untuk
cedera otak manusia -
studi imunohistokimia.
Int J Legal Med 2000;
113: 288–292.

Diunduh dari msl.sagepub.com di University of New England pada tanggal 1 Juli 2015
Casse dkk. 9

34. Penjahit J, Bachmann L, Koch R, dkk. Peningkatan ekspresi selektin dengan immunoassay berbasis manik multipleks untuk estimasi usia luka.
pada luka kulit manusia. Int J Legal Med 1999; 112: 39–44. Int J Legal Med 2008; 122: 143–148.
52. Zhang H, Zhu S dan Qin Q. [Studi imunohistokimia dan morfometri pada
35. Ortiz-Rey JA, Suárez-Peñaranda JM, San Miguel P, dkk. Analisis ekspresi interleukin-10 (IL-10) di bagian ekspresif yang berbeda
imunohistokimia P-Selectin sebagai penanda kemungkinan vitalitas selama penyembuhan luka kulit pada tikus]. Fa Yi Xue Za Zhi
pada luka kulit manusia.
J Kaki Forensik Med 2008; 15: 368–372. 2004; 20: 70–72.
36. Lo SK, Golenbock DT, Sass PM, dkk. Keterlibatan antigen Lewis X 53. Ohshima T dan Sato Y. Ekspresi mRNA interleukin-10 (IL-10) yang
(CD15) menghasilkan aktivasi monosit. Darah 1997; 89: 307–314. bergantung pada waktu selama fase awal penyembuhan luka kulit
sebagai indikator vitalitas luka. Int J Legal Med 1998; 111: 251–255.
37. Hausmann R, Kaiser A, Lang C, dkk. Sebuah studi imunohistokimia
kuantitatif pada kursus yang bergantung pada waktu dari respons 54. Raekallio J dan Mäkinen PL. Kandungan serotonin dan histamin
seluler inflamasi akut terhadap cedera otak manusia. Int J Legal Med sebagai reaksi vital. II. Pemeriksaan otopsi. Zacchia
1999; 112: 227–232. 1970; 6: 403–414.
55. Berg S. Praktische Erfahrungen mit der biochemischen
38. Turillazzi E, Vacchiano G, Luna-Maldonado A, dkk. Tryptase, CD15 dan IL- Wundaltersbestimmung. Beitr Gerichtl Med 1971; 28: 108–
15 sebagai penanda yang dapat diandalkan untuk penentuan vitalitas 114.
tanda pengikat lunak dan keras.
Histol Histopathol 2010; 25: 1539–1546. 56. Zhong FC dan Zhen ZJ. Lokalisasi dan kuantifikasi histamin pada kulit yang
terluka sebagai parameter waktu terjadinya luka. Forensik Sci Int 1991;
51:
39. Betz P, J, et 163–171.
Nerlich SEBUAH, Al.
Wilske
Lokalisasi imunohistokimia
57. Abraham WM. Tryptase:
dari fibronektin sebagai alat
Peran potensial dalam
untuk penentuan usia luka
pembengkakan dan
kulit manusia.
renovasi saluran napas. Am
Int J Legal Med 1992; 105:
J Physiol Lung Cell Mol
21–26.
Physiol 2002; 282: L193 –
L196.

40. Fieguth A, Feldbrügge H, Gerich

58. Bonelli B,
T, dkk. Ekspresi fibronektin,
MRP8, MRP14
SEBUAH, Bacci S, et

Vannelli Al.
dan defensin yang bergantung
Lokalisasi imunohistokimia
waktu pada luka kulit manusia
sel mast sebagai alat untuk
yang dirawat dengan
membedakan lesi vital dan
pembedahan.
postmortem. Int J Legal
Forensik Sci Int 2003; 131:
Med 2003; 117: 14–18.
156–161.
41. Bohnert M, Anderson J,
59. Bonelli A, Bacci S dan
Rothschild MA, dkk.
Norelli GA. Analisis
Ekspresi imunohistokimia
sitokimia afinitas sel
dari fibronektin di paru-paru
mast pada lesi kulit: Alat
korban kebakaran
yang memungkinkan
membuktikan reaksi intravital
untuk menilai waktu lesi
pada luka bakar yang fatal.
setelah kematian. Int J
Int J Legal Med 2010; 124:
Legal Med 2003; 117:
583–588.
331–334.

42. Balazic J, Grajn A, Kralj E,

60. Oehmichen M, Gronki T,
dkk. Ekspresi bunuh diri
Meissner C, dkk. Reaktivitas
fibronektin pada luka
sel mast di tepi luka kulit
tembak. Forensik Sci Int
manusia: Penanda sel awal
2005; 147 (Suppl): S5 – S7.
kelangsungan hidup luka?
Forensik Sci Int

43. Grellner
S dan 2009; 191: 1–5.
Dimmeler

Membuat
sebuah
Deteksi imunohistokimia dari
fibronektin pada luka
Diunduh dari msl.sagepub.com di University of New England pada tanggal 1 Juli 2015
B.
sayatan postmortem pada kulit
babi. Forensik Sci Int
Casse dkk. 9

1998; 97: 109–116. penanda baru vitalitas

61. Fernández P, Bermejo
44. Neutrofil polimorfonuklir luka. Studi banding
AM, López-Rivadulla M,
manusia Gougerot- dengan histamin dan
dkk. Diagnosis biokimia
Pocidalo M. Rev Fr Lab serotonin. Z Für Diisi
dari luka kulit yang
2002; 340: 44–51. Ulang J Leg Med 1987;
berasal dari intravital.
45. He L dan Zhu J. 98: 95–101.
Forensik Sci Int 1994;
Membedakan antemortem
68: 83–89.
dari cedera postmortem
dengan kuantifikasi LTB4.
62. Liu M, Wu J, Zhang Z, dkk.
Forensik Sci Int 1996; 81:
[Studi imunohistokimia
11–16.
dari 5-HT pada luka
tembak pada kulit
46. Hernández-Cueto C, Vieira
manusia]. Hua Xi Yi Ke
DN, Girela E, dkk.
Xue Xue Bao 1995; 26:
Prostaglandin F2a
420–423.
(PGF2a): Penanda yang
tidak memadai untuk
63. Vanĕrková H, Klıŕ P,
vitalitas luka? Int J Legal
Jezková J, dkk.
Med 1994; 106: 312–314.
[Deteksi histamin dan
serotonin bebas dalam
47. Bacci S, Romagnoli P,
evaluasi reaksi vital
Norelli GA, dkk.
pada cedera]. Lek
Peningkatan awal sel
keras 1997; 42: 39–42.
mast yang
mengandung TNF-alfa
64. Lai Y, Liao Z, Liu M,
pada lesi kulit.
dkk. [Analisis
Int J Legal Med 2006; 120:
kuantitatif tingkat 5-
138–142.
hydroxytryptamine
48. Grellner W, Georg T dan
pada tepi kulit tikus
Wilske J. Analisis
yang diiris]. Hua Xi
kuantitatif sitokin
Yi Ke Xue Xue Bao
proinflamasi (IL-1beta,
1998; 29: 189–191.
IL-6, TNF-alpha) pada
65. Raekallio J dan Mäkinen
luka kulit manusia.
PL. Rekonstruksi biokimia
Forensik Sci Int
dari tiga kasus kematian -
hasil kerja sama
2000; 113: 251–264.
internasional. Forensik
49. Grellner W. Deteksi
Sci 1978; 12: 25–32.
imunohistokimia
tergantung waktu dari
66. Hernandez-Cueto C,
sitokin proinflamasi (IL-
Luna-Maldonado A dan
1beta, IL-6, TNF-alpha)
Villanueva Canadas E.
pada luka kulit manusia.
Studi aktivitas cathepsin
Forensik Sci Int 2002; 130:
A dan D dan kadar Ca,
90–96.
Mg, Cu, Zn, Fe, Na dan
K pada kulit babi
50. Bai R, Wan L dan Shi M.
sebagai alat untuk
Ekspresi tergantung waktu
diagnosis banding
dari IL-1beta, COX-2, MCP-
antara dan luka kulit
1 mRNA pada luka kulit
postmortem. Acta Med
kelinci. Forensik Sci Int
Leg Soc (Bawahan)
2008; 175: 193–197.
1984; 34: 174–178.

51. Takamiya M, Fujita S,

Saigusa K, dkk. Deteksi
67. Hernández-Cueto C,
simultan delapan sitokin
Lorente JA, Pedal I, dkk.
pada luka kulit manusia
Cathepsin D sebagai
penanda vitalitas pada
luka kulit manusia. Int J
Legal Med 1993; 106:
145–147.

68. Lorente JA, Hernandez-

Cueto C dan Villanueva E.
Cathepsin D: Sebuah
Diunduh dari msl.sagepub.com di University of New England pada tanggal 1 Juli 2015
10 Kedokteran, Sains dan Hukum 0 (0)

69. Kondo T dan Ishida Y. Patologi molekuler penyembuhan luka. Forensik 71. Wang HJ, Ruan HG dan Huang GZ. [Sebuah studi pendahuluan tentang
Sci Int 2010; 203: 93–98. perubahan ekspresi PDGF-beta, PDGFR-beta, TGF-beta 1, TGFR,
70. Grellner W, Vieler S dan Madea B. Mengubah faktor bFGF dan hubungannya dengan usia luka dalam penyembuhan luka].
pertumbuhan (TGF-alpha dan TGF-beta1) dalam penentuan Fa Yi Xue Za Zhi 2001; 17: 198–201, 204.
dari daya hidup dan luka usia:

Studi imunohistokimia pada luka kulit manusia.

Forensik Sci Int 2005; 153: 174–180.

Diunduh dari msl.sagepub.com di University of New England pada tanggal 1 Juli 2015