Tugas Baca Jurnal Divisi Dermatologi &Venerologi

Nama/NPM : Afifah Faizah Dinillah/1102015009

Judul : Perbandingan RPR dan ELISA dengan TPHA untuk
Diagnosis Sifilis: Implikasi untuk Memperbarui Tes Point -of-
Care Sifilis di Ethiopia
Tempat/Waktu : RSUD Kab. Bekasi/28 Juni 2019
Pembimbing : dr. Evy Aryanti, Sp.KK

Perbandingan RPR dan ELISA dengan TPHA untuk

Diagnosis Sifilis: Implikasi untuk Memperbarui

Tes Point-of-Care Sifilis di Ethiopia

ABSTRAK

Latar Belakang: Sifilis adalah penyakit menular seksual (PMS) yang

disebabkan oleh Treponema pallidum spirochete, dan tetap menjadi masalah
kesehatan utama masyarakat di Afrika, termasuk Ethiopia. Diagnosis sifilis
ditentukan oleh non treponemal atau treponemal, meskipun di negara-negara
berkembang diagnosis sebagian besar bergantung pada tes tidak spesifik karena
beberapa alasan. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menilai sensitivitas,
spesifisitas, nilai-nilai prediktif, dan persamaan reagin plasma cepat (RPR) dan
enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) dengan Treponema pallidum
hemagglutination assay (TPHA) sebagai gold standar untuk diagnosis sifilis.

Hasil: Sensitivitas, spesifisitas, dan nilai positive predictive value dan negative
predictive value ECOTEST-RPR masing-masing adalah 100%, 80,8%, 76,2%,
dan 100%. Namun, sensitivitas, spesifisitas, dan nilai positive dan negative

1

 predictive value DIALAB-ELISA adalah masing-masing 98,4%, 94,9%, 92,3%,
dan 98,9%. Persamaan antara DIALAB-ELISA dan Randox-TPHA sangat baik
(nilai kappa: 0,96) dibandingkan dengan ECOTEST-RPR dan uji Randox-
TPHA (kappa nilai: 0,88).

Kesimpulan: Kami menemukan karakteristik variabel yang khas dari tes

DIALAB-ELISA dan tes konvensional ECOTEST-RPR yang saat ini tersedia
di wilayah penelitian. Penggunaan ECOTEST-RPR sebagai tes diagnostik
dihadapkan pada kesalahan pada kepositifannya (false positive). Dengan
demikian, baik ECOTEST-RPR maupun tes DIALAB-ELISA tidak dapat
digunakan sebagai satu-satunya skrining atau tes konfirmasi untuk diagnosis
tunggal infeksi sifilis. Oleh karena itu, penelitian yang komprehensif harus
dilakukan dengan tujuan perubahan skema diagnostik di masyarakat yang lebih
baik.

2

 1. Latar Belakang

Sifilis adalah penyakit menular seksual (PMS) yang disebabkan

oleh Treponema pallidum spirochete (T. pallidum) yang dapat ditularkan
melalui kontak seksual, melalui transfusi darah, dan melalui transmisi
vertikal [1]. Sifilis mempengaruhi 12 juta orang setiap tahun dan
menghasilkan morbiditas yang signifikan. Di sub-Sahara Afrika, sifilis
tetap menjadi masalah kesehatan masyarakat yang serius. Prevalensi
infeksi sifilis aktif di antara negara-negara Afrika menunjukkan 12,8% di
Tanzania dan Kenya [2,3]. Namun besarnya sifilis pada donor darah di
Gondar (Ethiopia) adalah 1,3% pada tahun 2010 [4].
Diagnosis sifilis dapat dilakukan dengan beberapa metode. Selain
metode diagnostik serologis, mikroskop lapangan gelap (dark field
microscope) tempat spirochete diperiksa dan diamati dari lesi di bawah
mikroskop bidang gelap juga merupakan metode yang dapat digunakan
[5-7]. T. pallidum, secara etiologis merupakan agen sifilis, menghasilkan
setidaknya dua jenis antibodi pada infeksi manusia: yaitu antibodi
treponemal yang terdeteksi oleh penyerapan antibodi treponemal
fluorescent (FTA-ABS) dan antibodi nontreponemal (reagin) dapat
dideteksi dengan antigen RPR atau tes VDRL. Tes nontreponemal seperti
tes Veneral Disease Research Laboratory (VDRL) dan Rapid Plasma
Reagin (RPR) didasarkan pada reaksi kardiolipin dengan antibodi tidak
spesifik yang diproduksi tubuh sebagai respons terhadap infeksi sifilis.
Namun, tes ini tidak memiliki sensitivitas dan spesifisitas yang baik
karena beberapa alasan diantaranya pada kehamilan, penyakit autoimun,
infeksi, dan stadium infeksi sifilis. Karena itu, tes spesifik treponemal
seperti enzim immunoassay (EIA), T. pallidum hemaglutinasi (TPHA),
mikrohemaglutinasi, uji fluoroscent antibodi treponemal (FTA-abs), dan
uji Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA) yang mendeteksi
antibodi IgG terhadap komponen antigenik T. pallidum digunakan

3

 terutama untuk mengkonfirmasi diagnosis sifilis pada pasien dengan tes
nontreponemal yang reaktif. Meskipun ketersediaan tes relatif sensitif
dan perawatan yang terjangkau, penyakit ini tetap merupakan masalah
kesehatan global [13-14].
Sifilis tetap menjadi penyebab utama morbiditas reproduksi dan
kecacatan pada bayi baru lahir di negara-negara berkembang termasuk
Ethiopia. Pada 80% wanita hamil yang terinfeksi, mengakibatkan bayi
lahir meninggal dan aborsi spontan (40%), kematian perinatal (20%), dan
infeksi neonatal yang serius dan kelahiran bayi dengan berat badan
rendah (20%) [15-17]. Sifilis juga memiliki potensi baru untuk morbiditas
dan mortalitas melalui hubungannya dengan peningkatan risiko infeksi
HIV [18].
Skrining ibu hamil, donor darah, dan pekerja sosial (pengemudi
dan pekerja sosial yang baru dipekerjakan) untuk sifilis adalah kegiatan
rutin di semua institusi kesehatan di Etiopia. Untuk tujuan ini, karena
efektifitas biaya, RPR yang biasanya digunakan sebagai alat skrining di
Ethiopia dipertanyakan validitasnya. Namun, terlepas dari laporan kinerja
diagnostik yang disediakan oleh produsen, data pada uji kinerja RPR di
wilayah penelitian tetap terbatas. Dengan demikian, tujuan dari penelitian
ini adalah untuk menilai sensitivitas, spesifisitas, nilai-nilai prediktif, dan
persamaan ECOTEST-RPR dan DIALAB-ELISA dengan Randox-
TPHA assay sebagai gold standar untuk diagnosis sifilis di antara pasien
yang diduga sifilis yang terdapat di Rumah Sakit Universitas Gondar
(UGH), Barat Laut Ethiopia.

4

 2. Metode
2.1. Desain, Periode, dan Wilayah Studi. Cross-sectional berbasis
fasilitas. Penelitian dilakukan di UGH, mulai November 2015 hingga Juni
2016. Rumah Sakit Universitas Gondar adalah salah satu rumah sakit
pendidikan perintis di Ethiopia, yang terletak di Wilayah Amhara,
Ethiopia Barat Laut. Rumah sakit ini memiliki delapan bagian
laboratorium yang berbeda, termasuk Serologi, yang menyediakan
layanan pengajaran, diagnostik, dan penelitian untuk komunitas
universitas, penduduk kota Gondar, dan populasi di Woreda dan
sekitarnya.

2.2. Peserta penelitian. Setelah mendapatkan informed consent, total

160 peserta dimasukkan dalam penelitian ini. Dari mereka, 80 peserta
didiagnosis positif untuk infeksi sifilis dengan teknik yang biasa
digunakan (ECOTEST-RPR) di Laboratorium Rumah Sakit Pendidikan
Universitas Gondar. Status semua pasien telah direview untuk menilai
apakah terapi spesifik telah dimulai. Sebanyak 80 individu yang
tampaknya sehat tidak memiliki riwayat penyakit menular seksual
diambil dari Pusat Bank Darah Gondar.

2.3. Pengumpulan dan Pemrosesan Spesimen. Sampel darah

dikumpulkan dari setiap peserta dan disentrifugasi sampai serum
terpisahkan, dan serum disimpan pada suhu -20 °C sampai tes
laboratorium diagnosis sifilis dilakukan. Sebelum memulai RPR, ELISA,
dan TPHA, sampel serum yang disimpan dicairkan pada suhu 37 °C
dalam bak air sampai es yang terbentuk sepenuhnya larut. Setelah itu, tes
RPR, ELISA, dan TPHA dilakukan sesuai prosedur dan didapatkan
hasilnya. Spesimen yang menunjukkan hasil samar-samar untuk salah
satu tes diuji ulang. Penelitian ini dilakukan sesuai dengan Standar untuk
Pelaporan Studi Akurasi Diagnostik (STARD) hal penting untuk
melaporkan studi diagnostik yang akurat (http:
//www.equatornetwork.org / pedoman pelaporan / stard).

5

 2.3.1 ECOTEST-RPR.
[Prinsip] Antigen yang digunakan dalam kit ECOTEST-RPR
(Assure Tech, Hangzhou, China) adalah amodifikasi antigen
VDRL, yang mengandung mikropartikulat arang untuk
meningkatkan perbedaan visual antara yang positif dan hasil
negatif. Serum pasien dicampur dengan antigen kardiolipin
partikel yang telah dikombinasikan dengan kolesterol, lesitin, dan
arang yang akan menghasilkan secara makroskopis presipitasi
tipe flokulasi yang terlihat jika serum pasien mengandung reagin
— antibodi yang terbentuk melawan kardiolipin (Prosedur
terperinci dapat diakses dari instruksi alat, Assure Tech,
Hangzhou, Cina.) Interpretasi untuk setiap tes dilakukan dengan
menggunakan kontrol (positif dan negatif) sesuai dengan instruksi
produsen sebagai reactive (R), jika gumpalan terlihat, atau
nonreactive (NR) –suspensi yang halus, tidak ada penggumpalan,
atau sedikit gumpalan.

2.3.2 The DIALAB Syphilis IgG / IgM ELISA.

[Prinsip] Menggunakan metode antigen-linked sandwich
enzyme-linked (ELISA), Tes ELISA sifilis IgG / IgM ini
(DIALAB, Jerman) dapat mendeteksi antibodi anti-TP. Strip
microwell Polystyrene adalah precoated dengan antigen
Treponema pallidum rekombinan diproduksi dalam E. coli.
Antigen TP rekombinan yang terkonjugasi konjugat
horseradish peroxidase (HRP) diinkubasi di microwell dengan
sampel. Yang dipreparasi antigen menunjukkan epitop yang
sama dengan konjugat HRP antigen, tetapi inang berbeda. Jika
terdapat sample anti-TP selama inkubasi, yang terkonjugasi dan
antigen yang diendapkan akan terikat pada domain antibodi dua
variabel, dan apa yang ditangkap pada fase padat adalah spesifik
immunocomplex antibodi-antigen. Penting bahwa kromogen
solusi yang mengandung tetramethylbenzidine (TMB) dan urea
peroksida ditambahkan ke dalam well (sumuran) setelah fase
pencucian untuk menghapus sampel dan konjugat yang tidak

6

 terikat. Kromogen yang tidak berwarna dihidrolisis oleh
konjugat HRP terikat untuk produk berwarna biru ketika
terdapat kompleks antigen-antibodi sandwich. Pada titik ini,
warna biru berubah warna menjadi kuning. Ini terjadi setelah
reaksi dengan asam sulfat dihentikan. Kemudian di titik ini
dapat diukur secara proporsional jumlah antibodi dalam sampel
dengan jumlah warna. Well (sumuran) tidak berwarna
menunjukkan sampel anti-TP negatif (Prosedur terperinci dapat
diakses dari instruksi pabrik, DIALAB, Jerman.)
(1) Interpretasi Hasil. Setiap microplate seharusnya
dipertimbangkan secara terpisah saat menghitung dan
menafsirkan hasil pengujian, terlepas dari jumlah plates yang
diproses secara bersamaan. Hasilnya dihitung dengan
menghubungkan nilai masing-masing sampel kepadatan optik
(OD) ke nilai cut-off (CO) plates. Jika pembacaan cut-off
didasarkan pada filter plate reader, hasilnya harus dihitung
dengan mengurangi nilai OD well (sumuran) kosong dari nilai
laporan cetak sampel dan kontrol. Dalam hal bacaan didasarkan
pada pembaca plate dual-filter, tidak dikurangi OD kosong dari
laporan cetak nilai sampel dan kontrol.

2.3.3. Randox TPHA. [Prinsip] TPHA (Laboratorium Randox,

UK) reagen digunakan untuk mendeteksi antibodi serum manusia
untuk T. pallidum dengan cara metode hemaglutinasi tidak
langsung (IHA). Eritrosit unggas yang diawetkan dilapisi dengan
komponen antigenik patogen T. pallidum (Nichols strain). Sel-sel
ini menggumpal terhadap antibodi T. pallidum spesifik dan
menunjukkan pola karakteristik di plate mikrotitrasi. Setiap reaksi
tidak spesifik terjadi dideteksi menggunakan sel kontrol, yang
merupakan eritrosit unggas, tidak dilapisi dengan antigen T.
pallidum. Reaksi tidak spesifik juga diserap menggunakan sel
kontrol ini. Antibodi terhadap treponema non-patogen diserap
oleh ekstrak treponema Reiter, termasuk dalam suspensi sel. Hasil
tes diperoleh dalam 45-60 menit, dan pola sel yang aglutinasi

7

 mudah dibaca dan tahan lama. (Prosedur terperinci dapat diakses
dari instruksi alat, Randox Laboratories, UK.) (1) Interpretasi
Hasil. Ketika tes well (sumuran) positif, sumuran kontrol harus
diperhatikan. Sel-sel pada kontrol seharusnya membentuk bulatan
yang padat. Sehingga seharusnya tidak digunakan sebagai
perbandingan untuk pola serum yang tidak reaktif karena sel
kontrol akan memberikan pola yang lebih padat dan jelas daripada
sel yang diujikan. Aglutinasi pada well (sumuran) kontrol
menunjukkan keberadaan dari aglutinin non-spesifik dalam
sampel; tes harus dilaporkan tidak valid. Serum yang memberikan
hasil ini mungkin diserap menggunakan sel kontrol seperti yang
dijelaskan di bawah penyerapan spesifik. Reaksi yang meragukan
seharusnya dilaporkan sebagai tidak pasti.

2.4. Analisis statistik. Data itu diolah dan diinput dua kali
pada Excel Spreadsheet dan SPSS versi 20. JavaStat software
analisis tabel kontingensi dua arah
(http://statpages.org/ctab2x2.html) juga digunakan untuk
menghitung sensitivitas, spesifisitas, dan nilai prediktif dan
kappa. Hasil tes ECOTEST-RPR dan DIALAB-ELISA
dibandingkan dengan hasil metode referensi (Randox-TPHA).
Nilai kappa ditentukan untuk dievaluasi persamaan antara
ECOTEST-RPR, DIALAB-ELISA, dan Randox-TPHA.

8

 3. Hasil
Sebanyak 160 peserta terlibat dalam penelitian ini. 80
peserta (50%) dari mereka telah didiagnosis dengan sifilis
menggunakan RPR sebagai tes diagnostik di daerah penelitian.
Namun, 80 peserta (50%) di antaranya adalah peserta yang sehat
dan negatif untuk sifilis oleh semua jenis tes (ECOTEST-RPR,
DIALABELISA, dan Randox-TPHA). Rentang usia peserta
berusia 20 hingga 52 tahun, dan sebagian besar (77%) adalah
antara 22 hingga 32 tahun. Di antara peserta, 84 peserta (52,5%)
dari mereka adalah laki-laki dan 76 peserta (47,5%) adalah
perempuan. Kebanyakan subyek penelitian 107 peserta (66,9%)
berasal dari daerah pedesaan di penduduk terdekat, dan 53 peserta
(33,1%) dari subyek penduduk kota (Tabel 1). Di antara 40 pasien
yang didiagnosis memiliki sifilis oleh uji RPR, 2 pasien menderita
sifilis primer, dan 9 pasien menderita sifilis sekunder dengan
manifestasi klinis ruam makulopapular yang tidak lengket,
kondiloma lata, dan limfadenopati generalisata sedangkan data
klinis pasien RPR-positif sisanya tidak sepenuhnya
didokumentasikan di status medis.
Sensitivitas, spesifisitas, dan nilai prediksi ECOTEST-
RPR dan DIALAB-ELISA dalam penelitian ini dievaluasi dengan
menggunakan Randox-TPHA sebagai gold standar untuk
diagnosis sifilis. Dengan demikian, sensitivitas dan spesifisitas
ECOTEST-RPR untuk deteksi sifilis adalah masing-masing
100% dan 80,8%. Nilai positive predictive value (PPV) dan
negative predictive value (NPV) masing-masing adalah 76,2%
dan 100%. Persamaan antara tes Randox-TPHA dan ECOTEST-
RPR dengan nilai kappa 0,88 (Tabel 2).
Sensitivitas dan spesifisitas DIALAB-ELISA untuk
deteksi sifilis adalah masing-masing 98,4% dan 94,9%. Nilai

9

 positive predictive value (PPV) dan nilai negative predictive
value (NPV) masing-masing adalah 92,3% dan 98,9%. Persamaan
antara tes TPHA dan ELISA hampir sempurna nilai kappa 0,96
(Tabel 3).
Dalam studi ini, kami telah merevisi grafik medis masing-
masing peserta dan menemukan bahwa semua pasien dengan
ECOTEST-RPR positif memulai pengobatan yang tepat. Bahkan,
kami menemukan dua sampel dengan hasil uji samar-samar untuk
DIALAB-ELISA tetapi analisis ulang sampel ini dengan
DIALAB-ELISA dan Randox-TPHA memberikan hasil positif
hasil pada kedua tes. Demikian pula, kami melaporkan 15
perbedaan hasil (mis., ECOTEST-RPR-positif tetapi DIALAB-
ELISA negatif) sebagai hasil negatif setelah analisis ulang dan
diverifikasi sebagai negatif oleh Randox-TPHA.

4. Diskusi
Infeksi sifilis dapat didiagnosis menggunakan tes treponemal atau
tes nontreponemal (reagin). Teknik amplifikasi asam nukleat (NAAT)
seperti polymerase chain reaction (PCR) telah membuka peluang yang
sangat baik bagi pengembangan tes diagnostik khusus dan sensitif.
Namun, penggunaan metode NAAT di negara-negara berkembang
terbatas karena ketersediaan, biaya dan teknik yang kompleks yang
digunakan sebagai alat diagnostik. Selain itu, tes diagnostik sifilis yang
definitif berdasarkan deteksi IgG spesifik Treponema telah tersedia.
Namun, teknik nontreponemal seperti RPR adalah yang paling banyak
digunakan terutama di wilayah penelitian ini, meskipun tidak dapat
diandalkan karena hasil positif belum tentu mengindikasikan infeksi
treponemal. Sehingga penerapan pada skrining donor darah, wanita

10

 hamil, dan pekerja sosial telah dipertanyakan. Oleh karena itu, kami
menilai kinerja dari uji ECOTEST-RPR dan DIALAB-ELISA dengan
Randox-TPHA sebagai uji diagnostik gold standar untuk sifilis.
Dalam penelitian ini, sensitivitas dan spesifisitas keseluruhan
ECOTEST-RPR dibandingkan dengan Randox-TPHA adalah maing-
masing 100% dan 80,8%. Dalam penelitian ini, sensitivitas dan
spesifisitas RPR sebanding dengan temuan dilaporkan dari Portugal,
Korea, dan Nepal [19-21]. Namun, sensitivitas saja jauh lebih tinggi
dibandingkan dengan laporan dari beberapa penelitian [22-26].

11

 Penyebab dari sensitivitas (100%) yang tinggi pada penelitian ini
dapat dilihat sebagai berikut: Pertama, peserta kami mungkin tidak hanya
terinfeksi sifilis dapat juga infeksi lainnya, menunjukkan reaktivitas
silang ECOTEST-RPR dengan kolesterol, lesitin, dan antigen kardiolipin
ditemukan dalam proses penyakit lain sebagai akibat penghancuran
seluler. Kedua, mungkin karena variasi dalam protokol dari berbagai
produsen juga; sebenarnya, seharusnya tidak dilupakan bahwa kinerja
diagnostik RPR sangat dipengaruhi oleh tahap stadium infeksi sifilis,
yaitu tidak sepenuhnya dibahas dalam penelitian ini. Berdasarkan
penelitian ini, sensitivitas tertinggi (100%) dianggap sebagai batasan tes
serologis ECOTEST-RPR sebagai false positive karena reaksi silang
antibodi. Selain itu, kasus sifilis juga tidak terdeteksi pada stadium yang
berbeda terjadi karena dari efek prozon. Sensitivitas yang tinggi dari RPR
memiliki implikasi negatif pada individu yang salah didiagnosis dan
meminum obat bersama dengan pasangan seksualnya (jika terdapat
pasangan seksual); fenomena ini menghasilkan masalah ekonomi,
resistensi obat, dan dampak sosial di masyarakat. Selain itu, darah dari
donor yang salah didiagnosis dan berlabel positif akan dibuang. Oleh
karena itu, karena adanya keterbatasan ini dan dengan ketersediaan tes
skrining yang lain, pemanfaatan uji ECOTEST-RPR yang dilakukan
secara rutin sebagai metode diagnostik tetap menjadi perhatian di bidang
penelitian.
Meskipun demikian, spesifisitas tes dalam penelitian ini
menunjukkan kinerja terendah dibandingkan dengan India dan Afrika
Selatan (96,96% dan 100%, resp.) [22, 27] dan lebih tinggi dibandingkan
dengan dari Turki dan Latvia (0%) [23, 28]. Berbeda dengan temuan dari
penelitian lain dengan spesifisitas RPR yang tingi [20, 27, 28], dan kami
menemukan spesifisitas yang rendah dari tes ECOTEST-RPR secara
manual. Penyebab yang mungkin adalah karena variasi dalam jenis
metode antara penelitian ini dan penelitian lain. Meskipun RPR umumnya

12

 merupakan tes nontreponemal, kami menggunakan metode manual
konvensional uji ECOTEST-RPR sementara metode mereka adalah uji
RPR otomatis, yang menunjukkan bahwa yang otomatis telah
mengurangi perbedaan interpersonal dan perancu lainnya. Selanjutnya,
tahap stadium klinis peserta (sifilis primer, sekunder, dan tersier)
mempengaruhi spesifisitas tes karena fenomena prozon. Terutama sejak
melaporkan hasil tes RPR (sebagai positif atau negatif) didasarkan pada
pengamatan, variasi subjektif (interpersonal) dan keputusan selanjutnya
antara analis laboratorium berpotensi memengaruhi spesifisitas dari hasil
tes.
Baik pendekatan konvensional atau lainnya, mengevaluasi kinerja
tes ELISA dengan mengacu pada metode yang lebih baik adalah
kewajiban. Berbeda dengan tes ECOTEST-RPR, tes DIALAB-ELISA
telah diketahui memiliki kinerja yang lebih baik dengan mengacu pada
Randox-TPHA. Dalam penelitian ini, kami menemukan 5 positif palsu
dengan tes DIALAB-ELISA memberikan tingkat diagnostik positif palsu
sebesar (8%); Hal ini sepertinya nilai terkecil dibandingkan dengan RPR
(31%).
Sensitivitas dan spesifisitas DIALAB-ELISA dibandingkan
dengan Randox-TPHA, masing-masing adalah 98,4% dan 94,9%. Hasil
yang diperoleh dari beberapa penelitian telah memperlihatkan sensitivitas
dan spesifisitas mulai dari 90% hingga 100%, sejauh ini hasil yang selaras
dengan penelitian ini [23, 28-32]. Meskipun terdapat persamaan, tidak
boleh dilupakan bahwa hasil lainnya [33-35] pada kinerja tes ELISA
cukup berbeda dengan hasil penelitian saat ini. Alasan yang paling
mungkin untuk variasi kinerja ini mungkin disebabkan oleh jenis
imunodominan protein sifilis yang dimasukkan ke dalam well (sumuran)
kit ELISA.
Selama evaluasi prediksi komparatif kit diagnostik dengan
standar referensi, beberapa masalah akan terjadi mempengaruhi

13

 interpretasi hasil mereka dimana prevalensi / besarnya penyakit adalah
faktor yang paling penting [36].
Dalam penelitian saat ini, nilai PPV dan NPV ECOTEST-RPR
adalah masing-masing 76,2% dan 100%. Variabilitas pada peserta
penelitian (mempertimbangkan 50% dari peserta positif untuk
ECOTEST-RPR dalam penelitian ini), beberapa penelitian dengan nilai
prediksi ECOTEST-RPR mirip dengan penelitian saat ini [19, 21, 26]
sedangkan nilai prediksi ECOTEST-RPR berbeda telah dilaporkan dari
penelitian lain [23]. PPV dan NPV dari DIALAB-ELISA masing-masing
adalah 92,3% dan 98,9%, dalam penelitian ini. Demikian juga, laporan
dari penelitian menunjukkan PPV dan NPV yang sebanding dengan
penelitian ini, sedangkan nilai prediktif variabel terlihat dari penelitian di
Turki. Seperti yang telah kami nyatakan sebelumnya, prediksi nilai dalam
penelitian ini (untuk ECOTEST-RPR dan DIALAB-ELISA) sebanding
dan variabel saat membandingkan dengan PV dari beberapa penelitian;
titik penting adalah prevalensi mempengaruhi PVs dari setiap tes
diagnostik. Ini menunjukan bahwa alat diagnostik yang sama akan
memiliki hasil yang berbeda sesuai dengan klinis / sifat peserta penelitian.
Kinerja tes yang dilaporkan dari DIALAB-ELISA (sensitivitas,
spesifisitas, dan nilai-nilai prediktif) dalam penelitian ini mendorong dan
membuat pilihan tes yang lebih baik untuk pendekatan diagnosis pada
kasus yang diduga sifilis. Bahkan, persamaan antara DIALAB-ELISA
dan TPHA adalah hampir sempurna (nilai kappa 0,96) dibandingkan
dengan ECOTEST-RPR dan Randox-TPHA (nilai kappa 0,88).
Selain kinerja yang unggul, teknik ELISA juga memiliki banyak
keuntungan dibandingkan tes skrining flokulasi konvensional (RPR).
Metode ini dirancang dengan pembacaan hasil yang otomatis yang
biasanya dilakukan oleh analis pembaca plate microtiter, sehingga
membuat interpretasi hasil yang obyektif, tidak seperti tes RPR yang
subjektif dan karenanya membutuhkan pengalaman yang luas. Tidak

14

 seperti tes RPR, kekhawatiran seperti fenomena prozon dan tahap
stadium infeksi sifilis tidak mempengaruhi metode ELISA. Terlepas dari
semua manfaat di atas, peneliti ingin menjelaskan pembaca untuk tidak
meremehkan kekurangan dari metode ELISA.

5. Kesimpulan
Penelitian ini mengulas tentang variabel diagnostik tes DIALAB-
ELISA dan yang saat ini tersedia yaitu tes ECOTEST-RPR konvensional
di Ethiopia dibandingkan dengan gold standar tes Randox-TPHA. Kit
ELISA dengan antigen rekombinan T. pallidum memiliki daya tarik
tersendiri sebagai alat diagnostik. Namun, peneliti mengingatkan
keefektifan baik ECOTEST-RPR dan ELISA sebagai tes skrining/
diagnostik untuk infeksi sifilis jika digunakan sebagai tes diagnostik
tunggal. Sebagai tambahan, penting untuk menggarisbawahi bahwa
petugas kesehatan harus melakukan tinjauan menyeluruh terhadap klinis
pasien dan riwayat perawatan sambil memilih jenis tes dan menafsirkan
hasil tes RPR dan ELISA IgG / IgM untuk mendiagnosis infeksi sifilis.
Konsekuensinya, penelitian yang menyeluruh harus dilakukan, dengan
tujuan untuk perubahan dalam skema diagnostik saat ini yang digunakan
di masyarakat.

15

 6. Daftar Singkatan

7. Ketersediaan Data
Penulis mengkonfirmasi bahwa semua data yang mendukung
penelitian terkandung dalam naskah dan sepenuhnya tersedia tanpa
batasan.

8. Persetujuan Etik
Izin etik diperoleh dari Komite Etik Penelitian Universitas
Gondar. Partisipasi bersifat sukarela, dan informed consent diperoleh dari
semua subjek yang diterima untuk berpartisipasi dalam penelitian ini.
Kesediaan peserta diminta secara lisan setelah menjelaskan tujuan
penelitian secara singkat, risiko dan manfaat prosedur, dan hak untuk

16

 tidak berpartisipasi dalam penelitian menggunakan bahasa daerah lokal
mereka. Penulis menerima persetujuan yang diinformasikan secara lisan
sebelum menyertakan salah satu peserta dalam penelitian ini. Persetujuan
tertulis tidak didapatkan karena peserta dengan infeksi sifilis positif
direkrut dari departemen laboratorium rawat jalan dari Rumah Sakit
Universitas Gondar tempat mereka dikirim untuk menjalani tes antibodi
sifilis. Demikian pula, 80 peserta yang sehat tanpa riwayat penyakit
menular seksual direkrut dari bank darah rumah sakit; demikian, pada
kedua kelompok, kami tidak mengambil spesimen tambahan melainkan
menggunakan sampel darah yang sudah disediakan yang mereka berikan
di laboratorium rumah sakit dan bank darah. Pengumpulan data sosial-
demografi adalah prosedur non-invasif tanpa risiko yang terkait
dengannya. Dalam penelitian ini, hanya persetujuan lisan yang diperoleh
dalam penelitian ini. Oleh karena itu, hanya peserta yang secara sukarela
bersedia memberikan persetujuan lisan (setuju untuk berpartisipasi)
direkrut ke dalam penelitian.

9. Konflik Kepentingan
Para penulis menyatakan bahwa mereka tidak memiliki minat
bersaing berkaitan dengan penelitian ini.

10. Kontribusi Penulis

Markos Negash dan Demeke Geremew menyusun konsep
penelitian dan merancang penelitian; Markos Negash dan Tadelo
Wondmagegn melakukan pengumpulan data dan analisis laboratorium;
Demeke Geremew dan Tadelo Wondmagegn mengawasi pengumpulan
data dan analisis laboratorium; Markos Negash, Demeke Geremew, dan

17

 Tadelo Wondmagegn menganalisis data dan menyiapkan naskah
pertama; dan
Markos Negash dan Demeke Geremew mengulas draft tersebut. Semua
penulis membaca dan menyetujui naskah final.

11. Ucapan Terima Kasih

Penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada asisten teknis, Mister
Amare Kifle, untuk bantuan teknis nya selama pelaksanaan penelitian. Terima
kasih penulis juga berikan untuk semua peserta dalam penelitian dan Rumah
Sakit Universitas Gondar. Penulis juga berterima kasih kepada Staf Pusat Darah
Bank Gondar untuk dukungan mereka selama penelitian.

18

 12. Referensi

[1] P. Murray, K. Rosenthal, G. Kobayashi, and M. Pfaller, Medical

Microbiology, Mosby company St. Loius, 4th edition, 2002.
[2] J. Todd, K. Munguti, H. Grosskurth et al., “Risk factors for active
syphilis and TPHA seroconversion in a rural African population,”
Sexually Transmitted Infections, vol. 77, no. 1, pp. 37–45, 2001.
[3] M. Temmerman, K. Fonck, F. Bashir et al., “Declining syphilis
prevalence in pregnant women in Nairobi since 1995: another success
story in the STD field?,” International Journal of STD & AIDS, vol. 10,
no. 6, pp. 405–408, 1999.
[4] B. Tessema, G. Yismaw, A. Kassu et al., “Seroprevalence of HIV,
HBV, HCV and syphilis infections among blood donors at Gondar
University Teaching Hospital, Northwest Ethiopia: declining trends over
a period of five years,” BMC Infectious
Diseases, vol. 10, no. 1, 2010.
[5] S. A. Lasren, B. M. Steiner, and A. H. Rudolph, “Laboratory diagnosis
and interpretation of tests for syphilis,” Clinical Microbiology Reviews,
vol. 8, no. 1, pp. 1–21, 1995.
[6] Syphilis, January 2003, from
http://www.niaid.nih.gov/factsheets/stdsyph.htm.
[7] E. C. Tramont, “Treponema pallidum (syphilis),” in Mandell,
Douglas, and Bennett’s Principles and Practice of Infectious Diseases, G.
L.Mandell, J. E. Bennett, and R. Dolin, Eds., pp. 2474–2490, Churchill
Livingstone, Philadelphia, 5th edition, 2000.
[8] A. F. Luger, “Serological diagnosis of syphilis: current methods,” in
Immunological Diagnosis of Sexually Transmitted Diseases, H. Young
and A. McMillan, Eds., pp. 250–259, Dekker, New York, 1988.

19

 [9] F. T. Fischbach, “Syphilis detection tests,” in A Manual of Laboratory
& Diagnostic Tests, pp. 581–583, Lippincott, Philadelphia, 6th edition,
2000.
[10] M. C. Cummings, S. A. Lukehart, C. Marra et al., “Comparison of
methods for the detection of Treponema pallidum in lesions of early
syphilis,” Sexually Transmitted Diseases, vol. 23, no. 5, pp. 366–369,
1996.
[11] H. Young, A. Moyes, L. Seagar, and A. McMillan, “Novel
recombinant-antigen enzyme immunoassay for serological diagnosis of
syphilis,” Journal of Clinical Microbiology, vol. 36, no. 4, pp. 913–917,
1998.
[12] B. Carlsson, H. S. Hanson, J. Wasserman, and A. Brauner,
“Evaluation of the fluorescent treponemal antibody-absorption (FTA-
Abs) test specificity,” Acta Dermato-Venereologica, vol. 71, no. 4, pp.
306–311, 1991.
[13] World Health Organization, Prevalence and incidence of selected
sexually transmitted infections, Chlamydia trachomatis, Neisseria
gonorrhoeae, syphilis, and Trichomonas vaginalis: methods and results
used by WHO to generate 2005 estimates,
WHO, Geneva, Switzerland, 2011.
[14] R. W. Peeling and E. W. Hook, “The pathogenesis of syphilis: the
great mimicker, revisited,” The Journal of Pathology, vol. 208, no. 2, pp.
224–232, 2006.
[15] World Health Organization, “Action for the global elimination of
congenital syphilis: rationale and strategy,” in WHO Department of
Reproductive Health and Research, WHO, Geneva, 2005.
[16] World Health Organization, “Detecting sexually transmitted
infections: reproductive tract infections,”
http://www.who.int/reproductivehealth/publications/rtis/9241592656/en
/.

20

 [17] World Health Organization, “Sexually transmitted infections:
reproductive tract infection assessment in pregnancy, childbirth and the
postpartum period,” January 2008,
http://www.nacp.go.tz/site/download/stitrainerguideline.
[18] A. B. Olokoba, L. B. Olokoba, F. K. Salawu, A. Danburam, O. O.
Desalu, J. K. Midala et al., “Syphilis HIV co-infection in northeastern
Nigeria,” International Journal of Tropical Medicine, vol. 3, no. 3, pp.
70–72, 2008.
[19] S. P. Dumre, G. Shakya, D. Acharya, S. Malla, and N. Adhikari,
“Diagnostic dilemma of the single screening test used in the diagnosis of
syphilis in Nepal,” Nepal Medical College Journal, vol. 13, no. 4, pp.
238–240, 2011.
[20] J.-H. Lee, C. S. Lim, M.-G. Lee, and H.-S. Kim, “Comparison of an
automated rapid plasma reagin (RPR) test with the conventional RPR
card test in syphilis testing,” BMJ Open, vol. 4, no. 12, article e005664,
2014.

21