LAPORAN AKHIR PRAKTIKUM

PENGANTAR BIOTEKNOLOGI PERTANIAN

OLEH:
RIDWAN HASIM
2006110868

JURUSAN AGROTEKNOLOGI
FAKULTAS PERTANIAN UNIVERSITAS RIAU
PEKANBARU
2021

i
 KATA PENGANTAR

Puji dan syukur saya panjatkan atas kehadirat Allah yang maha esa.
Karena atas berkat rahmatnya saya dapat menyelesaikan praktikum serta laporan
akhir pengantar bioteknologi pertanian.

Adapun isi dari laporan akhir ini adalah kumpulan dari setiap laporan
mingguan selama praktikum berlangsung. Laporan ini merupakan syarat untuk
dapat mengikuti ujian praktikum dan merupakan syarat dalam mengontrak mata
kuliah pengantar bioteknologi pertanian.

Saya juga tidak lupa untuk mengucapkan banyak terimakasih kepada

dosen serta asisten dosen mata kuliah pengantar bioteknologi yang selalu
mengajari saya dalam melaksanakan dan dalam menyusun laporan ini. Serta
semua pihak yang membantu saya dalam hal penyusunan laporan ini.

Laporan ini masih sangat jauh dari kesempurnaan oleh karena itu kritik
serta saran yang membangun masih saya harapkan untuk penyempurnaan laporan
akhir ini. Semoga laporan akhir pengantar bioteknologi pertanian ini dapat
bermanfaat bagi semua pihak. Juga bermanfaat bagi kami selaku penulis

Pekanbaru, 24 november
2021

Ridwan Hasim

ii
 DAFTAR ISI

KATA PENGANTAR ............................................................................................ ii

DAFTAR ISI .......................................................................................................... iii
DAFTAR GAMBAR .............................................................................................. v
DAFTAR TABEL .................................................................................................. vi
BAB I ...................................................................................................................... 7
PENDAHULUAN .................................................................................................. 7
1.1 Latar belakang ............................................................................................... 7
1.2 Tujuan ............................................................................................................ 8
BAB II ..................................................................................................................... 9
TINJAUAN PUSTAKA ......................................................................................... 9
2.1 Bioteknologi umum ....................................................................................... 9
2.2 Kompos ....................................................................................................... 11
2.3 Perbanyakan in vitro .................................................................................... 13
2.4 Larutan stok ................................................................................................. 15
2.5 Sterilisasi dan penanaman ........................................................................... 16
2.6 Pengamatan ................................................................................................. 17
2.7 Subkultur ..................................................................................................... 19
2.8 Aklimatisasi ................................................................................................. 21
BAB III ................................................................................................................. 23
METODOLOGI .................................................................................................... 23
3.1 Waktu dan tempat ........................................................................................ 23
3.2 Alat dan bahan ............................................................................................. 23
3.2.1 Pembuatan kompos ............................................................................... 23
3.2.2 Pembuatan larutan stok ......................................................................... 23
3.2.3 Pembuatan media .................................................................................. 23
3.2.4 Perbanyakan tanaman secara in vitro.................................................... 23
3.2.5 Subkultur dan pengamatan.................................................................... 24
3.2.6 Aklimatisasi .......................................................................................... 24
3.3 Cara kerja .................................................................................................... 24

iii
 3.3.1 Pembuatan kompos ............................................................................... 24
3.3.2 Pengenalan alat laboratorium................................................................ 24
3.3.3 Pembuatan larutan stok dan media ....................................................... 25
3.3.4 Sterilisasi dan penananman secara in vitro ........................................... 25
3.3.5 Cara kerja subkultur dan pengamatan ................................................... 26
3.3.6 Cara kerja aklimatisasi .......................................................................... 27
BAB IV ................................................................................................................. 28
HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................................. 28
4.1 HASIL ......................................................................................................... 28
4.1.1 Pembuatan kompos ............................................................................... 28
4.1.2 Pengenalan alat-alat laboratorium ........................................................ 28
4.1.3 Pembuatan larutan stok media .............................................................. 30
4.1.4 Perbanyakan dengan kultur in vitro ...................................................... 30
4.1.5 Subkultur dan pengamatan botol .......................................................... 30
4.1.6 Aklimatisasi .......................................................................................... 31
4.2 PEMBAHASAN ......................................................................................... 31
4.2.1 Pembuatan kompos ............................................................................... 31
4.2.2 Pengenalan alat laboratorium................................................................ 32
4.2.3 Pembuatan larutan stok media .............................................................. 35
4.2.4 Perbanyakan dengan kultur in vitro ...................................................... 36
4.2.5 Sub kultur dan pengamatan botol ......................................................... 38
4.2.6 Aklimatisasi .......................................................................................... 39
BAB V................................................................................................................... 41
PENUTUP ............................................................................................................. 41
5.1 Kesimpulan .................................................................................................. 41
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 43
LAMPIRAN .......................................................................................................... 47

iv
 DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. pembuatan kompos.............................................................................. 12

Gambar 2 perbanyakan dengan teknik in vitro ..................................................... 14
Gambar 3 pembuatan larutan Stok ........................................................................ 15

v
 DAFTAR TABEL

Table 1. Alat-alat Laboratorium ........................................................................... 30

Table 2. Pengamatan Botol Subkultur .................................................................. 31
Table 3 alat-alat laboraturium ............................................................................... 34
Table 4 pengamatan botol kultur .......................................................................... 39
Table 5 kebutuhan media MS ............................................................................... 47

vi
 BAB I
PENDAHULUAN

1.1 Latar belakang

Bioteknologi merupakan salah satu ilmu terapan yang berkembang
sangat pesat mengikuti tuntutan arus globalisasi dunia yang juga telah
menimbulkan dampak semakin kompleksnya problematika yang dihadapi
oleh manusia.Bioteknologi memiliki peranan yang sangat penting dalam
mewujudkan kemakmuran dan kesejahteraan suatu bangsa, harapannya
bioteknologi mampu menjadi solusi dari permasalahan terkait dengan
pemenuhan kebutuhan manusia akan pangan, sandang, papan
(lingkungan), kesehatan dan energi yang sasarannya bermuara pada
peningkatan kesejahteraan manusia di dunia.

Bioteknologi dapat dikelompokkan menjadi bioteknologi

konvensional dan modern. Rekayasa yang masih dalam tingkat terbatas
dan mudah diaplikaskan dalam masyarakat umum (misalnya di bidang
pangan: tempe, tape, roti, bir) merupakan bioteknologi konvensional.
Sedangkan bioteknologi modern telah menggunakan teknik rekayasa
tingkat tinggi dan memiliki pengaruh besar terhadap kehidupan manusia
(Abdurrahman, 2008). Karena sifatnya yang multidisipliner, lebih banyak
bersifat aplikatif dan abstrak sehingga bioteknologi modern membutuhkan
penguasaan konsep dasar yang benar. Alasan inilah yang mendasari
peneliti untuk menjadikan bioteknologi modern sebagai fokus materi yang
dikembangkan.

Bioteknologi adalah teknologi yang memanfaatkan agen hayati

atau bagian-bagiannya untuk menghasilkan barang dan jasa dalam skala
industri untuk memenuhi kebutuhan manusia. Penerapan dalam ilmu
bioteknologi pada umumnya selalu mencakup proses produksi sel dan juga
perubahan di dalam transformasi kimia.

7
 Ada beberapa pengertian mengenai Bioteknologi Menurut Para
Pakar, atau ahli diantarnya;

1. Bull (1982), menjalasakan bahwa bioteknologi merupakan

penerapan suatu ilmu pengetahuan alam yang bercampur dengan
rekayasa berupa teknologi yang menghasilakan barang atau jasa.
2. Primrose (1987), bioteknologi didefiisikan sebagai eksploitasi yang
bernilai komersial seperti contohnya dalam bentuk sel.
3. Menurut OECD (1982), Bioteknologi adalah enerapan prinsip-
prinsip ilmu pengetahuan saintek berupaka kerekayasaan yang
menghasilkan barang atau jasa.
4. Menurut (1982), Bioteknologi adalah teknik pemanfaatkan
mikroganisme dengan upaya memperoleh barang atau jasa.
5. Louis Pasteur (1857-1876), dalam bahasannnya bioteknologi bisa
berupa produksi bahan makanan melalui fermentasi

1.2 Tujuan
1. Untuk mengetahui salah satu metode pemanfaatan boteknologi tradisional
yaitu pembuatan biofertilizer dan biodecomposer memanfaatkan limbah
pertanian dan rumah tangga.
2. Untuk menghemat bahan kimia dan efisiensi tempat dan teknik pekerjaan,
untuk mengurangi resiko kesalahan dalam penimbangan dan memudahkan
untuk menghitung media agar akurat
3. Untuk mengetahui teknik perbanyakan tanaman jeruk dan papaya secara in
vitro
4. Untuk mengetahui bagaimana proses subkultur
5. Agar praktikan mampu menganalisis data pengamatan terhadap proses
kultur jaringan
6. Agar praktikan mengetahui cara aklimatisasi dan mengetahui pentingnya
aklimatisasi

8
 BAB II
TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Bioteknologi umum

Bioteknologi adalah cabang ilmu yang mempelajari pemanfaatan
makhluk hidup atau bakteri fungi dan lain-lain untuk menghasilkan barang
dan jasa kultur jaringan tanaman merupakan perbanyakan tanaman secara
vegetatif konsep utama dalam kultur jaringan adalah perbanyakan tanaman
dengan menggunakan bagian vegetatif tanaman menggunakan media
buatan yang dilakukan di tempat steril kegiatan yang dilakukan di
laboratorium biotek dengan menggunakan berbagai macam peralatan
Penggolongan alat merupakan langkah pertama sebelum melakukan
kegiatan praktikum mengenal alat kita dapat menggunakan alat tersebut
dengan baik nantinya ketika melakukan praktikum dan juga nantinya
mengetahui fungsi dari masing-masing alat laboratorium dan jika sudah
mengetahui fungsi cara kerja dari alat laboratorium maka dapat nantinya
melakukan praktikum dengan baik agar hasil yang didapat juga maksimal
berdasarkan hasil dari praktikum kali ini dapat diketahui beberapa alat dan
bahan.

Bioteknologi berasal dari kata: Bios: hidup; Teuchos; alat; Logos: ilmu;
sehingga bioteknologi dapat diartikan sebagai cabang ilmu yang
mempelajari pemanfaatan makhluk hidup (bakteri, fungi, virus, dan lain-
lain) maupun produk dari makhluk hidup (protein bioaktif, enzim, vitamin,
asma basa organik, alkohol, dan lain-lain) dalam proses produksi untuk
menghasilkan barang dan jasa dalam meningkatkan kesejahteraan umat
manusia (Nugroho, 2018).

Bull, et al., (1982) menyatakan bahwa: Istilah bioteknologi mempunyai

pengertian sebagai penerapan teknik-teknik biologi, biokimia dan rekayasa
dalam pengolahan bahan dengan memanfaatkan agensia jasad hidup
dankomponankomponen untuk menghasilkan barang dan jasa (Triwibowo

9
Juwono, 2001). Secara umum, bioteknologi dapat diklafikasikan menjadi
dua aras yaitu: bioteknologi konvensional dan bioteknologi modern.

Aplikasi bioteknologi sesungguhnya telah berlangsung cukup lama,

dalam peradapan manusia; seperti upaya produksi antibiotik, fermentasi,
alcohol, pangan dan teknologi pengolahan limbah ; yang kesemuanya
dapat dikelompokan ke dalam biteknologi konvensional. Tetapi mengapa
nampaknya biteknologi baru saja berkembang pada kurun abad ke dua
puluh ini? Karena secara implisit yangdimaksud bioteknologi adalah
biteknologi modern, yang intinya adalah rekayasa genetik, dengan teknik
gen kloning yang berkembang berdasar penemuan struktur dan fungsi
DNA oleh Watson dan Creck.

Dalam perkembangannya, bioteknologi telah mencapai tingkat

rekayasa yang lebih terarah, sehingga hasilnya dapat dikendalikan. Dengan
teknik yang dikenal sebagai teknik DNA rekombinan, atau secara popular
dikenal sebagai rekayasa genetika. Para ilmuan dapat menyambung
molekul-molekul DNA yang berbeda menjadi suatu molekul DNA
rekombinan yang inti prosesnya adalah “kloning gena”

1. Bioteknologi konvensional Ciri-ciri bioteknologi konvensional;

kurang steril, jumlah sedikit (terbatas), kualitas belum terjamin. Contoh:
industri tempe, tape, anggur, yoghurt, dsb.

2. Bioteknologi modern Ciri-ciri bioteknologi modern; steril, produksi

dalam jumlah banyak (massal), kualitas standar dan terjamin. Selain itu,
bioteknologi modern tidak terlepas dengan aplikasi metode-metode
mutakhir bioteknologi (current methods of biotecnology) seperti:

1) Kultur jaringan merupakan suatu metode untuk memperbanyak

jaringan/sel yang berasal atau yang didapat dari jaringan orisinal tumbuhan
atau hewan setelah terlebih dahulu mengalami pemisahan (disagregasi)
secara mekanis, atau kimiawi (enzimatis) secara in vitro (dalam tabung
kaca).

10
 2) Teknologi DNA rekombinan (recombinant DNA technology) adalah
suatu metode untuk merekayasa genetik dengan cara menyisipkan (insert)
gena - 11 - Diktat Bioteknologi yang dikehendaki ke dalam suatu
organisme. Transgenik adalah suatu metode untuk. Rekayasa protein
(protein engineering).

3) Hibridoma adalah suatu metode untuk menggabungkan dua macam sel

eukariot dengan tujuan mendapatkan sel hibrid yang memiliki kemampuan
kedua sel induknya.

4) Kloning adalah suatu metode untuk menghasilkan keturunan yang

dikehendaki sama persis dengan induknya.

5) Polymerase chains reaction (PCR) merupakan metode yang sangat

sensitif untuk mendeteksi dan menganalisis sekuen asam nukleat. RT-PCR
untuk memperbanyak (amplifikasi) rantai RNA menjadi DNA; tissue/cells
→ extracted → RNA/mRNA → rT-PCR → copy DNA (cDNA).

6) Hibridisasi DNA adalah metode untuk menyeleksi sekuen DNA dengan

menggunakan probes DNA untuk hibridisasi (pencangkokan) rantai DNA.
Pita ganda

2.2 Kompos
Kompos adalah hasil penguraian, pelapukan dan pembusukan
bahan organik seperti kotoran hewan, daun maupun bahan organik lainnya.
Bahan kompos tersedia disekitar kita dalam berbagai bentuk. Beberapa
contoh bahan kompos adalah batang, daun, akar tanaman, serta segala
sesuatu yang dapat hancur (Soeryoko, 2011).

Beberapa kegunaan kompos adalah memperbaiki struktur tanah,

memperkuat daya ikat agregat (zat hara) tanah berpasir, meningkatkan
daya tahan dan daya serap air, memperbaiki drainase dan pori-pori dalam
tanah. menambah dan mengaktifkan unsur hara (Susetya, 2016).

Pengomposan ialah proses biologis yang menggunakan

mikroorganisme sebagai dekomposer untuk mempercepat proses

11
penguraian dari bahan-bahan organik Proses pengomposan bisa terjadi
secara aerobik atau memakai oksigen ataupun anaerobik atau tanpa
oksigen proses yang dijelaskan sebelumnya merupakan proses aerobik
proses pengomposan dapat juga menggunakan cara anaerobik tetapi jarang
digunakan karena baunya tidak sedap proses anaerobik menciptakan
senyawa-senyawa yang berbau tidak sedap seperti asam-asam organik atau
asam asetat hasil akhir dari pengomposan sendiri adalah rumus dan
temperatur normal dan tidak mengeluarkan bau hasil ini yang cocok
digunakan sebagai pupuk bagi tanaman.

Gambar 1. pembuatan kompos

Kompos memiliki banyak manfaat yang ditinjau dari beberapa
aspek: Aspek Ekonomi :

1. Menghemat biaya untuk transportasi dan penimbunan limbah

2. Mengurangi volume/ukuran limbah

3. Memiliki nilai jual yang lebih tinggi dari pada bahan asalnya Aspek
Lingkungan : 1. Mengurangi polusi udara karena pembakaran limbah dan
pelepasan gas metana dari sampah organik yang membusuk akibat bakteri
metanogen di tempat pembuangan sampah 2. Mengurangi kebutuhan lahan
untuk penimbunan Aspek bagi tanah/tanaman: 1. Meningkatkan kesuburan
tanah 7 2. Memperbaiki struktur dan karakteristik tanah 3. Meningkatkan
kapasitas penyerapan air oleh tanah 4. Meningkatkan aktivitas mikroba
tanah 5. Meningkatkan kualitas hasil panen (rasa, nilai gizi, dan jumlah
panen) 6. Menyediakan hormon dan vitamin bagi tanaman 7. Menekan
pertumbuhan/serangan penyakit tanaman 8. Meningkatkan

12
 retensi/ketersediaan hara di dalam tanah Peran bahan organik terhadap
sifat fisik tanah di antaranya merangsang granulasi, memperbaiki aerasi
tanah, dan meningkatkan kemampuan menahan air.

Peran bahan organik terhadap sifat biologis tanah adalah

meningkatkan aktivitas mikroorganisme yang berperan pada fiksasi
nitrogen dan transfer hara tertentu seperti N, P, dan S. Peran bahan organik
terhadap sifat kimia tanah adalah meningkatkan kapasitas tukar kation
sehingga memengaruhi serapan hara oleh tanaman (Gaur, 1980).

2.3 Perbanyakan in vitro

Kultur adalah budidaya jaringan sekelompok sel yang mempunyai
bentuk dan fungsi yang sama. Kultur jaringan berarti membudidayakan
suatu jaringan tanaman menjadi tanaman kecil yang mempunyai sifat
seperti induknya. Kultur jaringan disebut sebagai tissue culture. Kultur
jaringan tanaman merupakan teknik yang digunakan untuk menumbuh
kembangkan bagian tanaman, baik berupa sel, jaringan atau organ dalam
kondisi aseptik yang dilakukan secara in vitro (Yusnita, 2003).

Manfaat dari kultur jaringan yaitu dapat menghasilkan tanaman

baru dalam jumlah besar serta dalam waktu singkat, dengan sifat dan
kualitas yang sama . Perlakuan secara in vitro mengacu pada reaksi-reaksi
biokimia yang berlangsung di luar sel hidup. Sedangkan in vivo mengacu
ke reaksi-reaksi yang berlangsung dalam sebuah sel hidup. Menurut
Wetherell (1982) bahwa sel atau jaringan tanaman pada dasarnya dapat
ditanam secara terpisah dalam suatu kultur (in vitro). Sistem in vitro dapat
digunakan pada perbanyakan secara masal genotipe yang diseleksi secara
tidak terbatas bila memang diinginkan. Jika suatu genotipe yang
diinginkan diseleksi, baik di dalam atau di luar lingkungan kultur, maka
hasil seleksi tersebut dapat dibiakkan, digandakan dan diregenerasikan
menjadi tanaman (Nasir, 2002).

Pada dasarnya kultur In Vitro adalah metode untuk mengisolasi

bagian-bagian tanaman seperti sel, jaringan atau organ yang ditumbuhkan

13
di atas medium secara aseptik dalam ruangan yang terkendali, sehingga
bagian tanaman tersebut dapat memperbanyak diri dan meregenerasi
menjadi tanaman yang lengkap. Prinsip kultur In Vitro terdapat pada teori
sel yang dikemukakan oleh dua orang ahli biologi dari German yaitu
Schleiden dan Schwann. Teori tersebut menyatakan bahwa sel tumbuhan
bersifat autonom dan bersifat totipotensi. Sel bersifat autonom artinya
dapat melakukan metabolisme, tumbuh dan berkembang secara mandiri
jika diisolasi tunas dari jaringan induknya. Totipotensi diartikan sebagai
kemampuan dari sel untuk tumbuh dan meregenerasi menjadi tanaman
lengkap kembali (Indriyanto, 2003)

Gambar 2 perbanyakan dengan teknik in vitro

Perbanyakan tanaman melalui kultur jaringan sangat dipengaruhi
oleh media, lingkungan dan zat pengatur tumbuh yang digunakan. Salah
satu zat pengatur tumbuh yang sering digunakan ialah auksin dan sitokinin
yang mempunyai fungsi untuk mengontrol pertumbuhan dan pembelahan
sel. Perbandingan auksin dan sitokinin merupakan sebuah aturan penting
dalam inisiasi tunas dan perpanjangan tunas. Khusus kultur jaringan akan
berhasil dengan baik apabila syarat-syarat yang diperlukan bagi proses
pembiakan tersebut dapat terpenuhi. Syarat-syarat tersebut meliputi
perlakuan komposisi ZPT yang tepat, pemilihan eksplan atau bahan
tanaman, penggunaan media yang cocok, pengaturan udara yang baik dan
keadaan aseptik (Nugroho, 2002).

14
2.4 Larutan stok
larutan stok merupan larutan yang berisi satu atau lebih komponen
media yang konsentrasinya lebih tinggi daripada konsentrasi komponen
tersebut dalam formulasi media yang akan dibuat. Larutan stok biasanya
dibuat dengan konsentrasi 10, 100, atau 1000 kali lebih pekat. Jika larutan
stok dibuat pembuatan media dapat dilakukan dengan cara mengambil
sejumlah larutan stik sehingga konsentrasinya menjadi sesuai dengan yang
terdapat pada formulasi media yang dikehendaki (Yusnita,2003)

Pembutan larutan stok dimaksudkan untuk memberi kemudahan pekerjaan

dalam pembutan media salnjutnya antara lain;

1. Menghemat pekerjaan menimbang bahan media setiap kali ingin

membuat media
2. Mengatasi kesulitan penimbangan dalam jumlah yang sangat kecil
3. Mengurangi kerusakan bahan kimia akibat terlau sering dibuka dan
ditutup (Marlin dkk, 2007).

Gambar 3 pembuatan larutan Stok

Pembuatan larutan stok berdasarkan pengelompokan dalam : Stok
makro, stok mikro, stok Fe, stok vitamin dan stok hormone terutama bila
larutan stok tidak disimpan terlalu lama (segera digunakan habis). Stok
hormone dapat disimpan antara 2-4 minggu, sedangkan stok hara dapat
disimpan 4-8 minggu. Dengan adanya larutan stok, pembuatan media
selanjutnya hanya dengan teknik pengenceran dan pencampuran saja.

15
2.5 Sterilisasi dan penanaman
Sterilisasi merupakan upaya yang dilakukan untuk menghilangkan
semua mikroorganisme (bakteri, jamur, parasit, dan virus) termasuk
endospora bakteri dari benda-benda mati atau instrument yang menempel
(Sursilah, 2010). Sterilisasi adalah proses untuk mematikan atau
menonaktifkan spora dan mikroorganisme sampai ke tingkat yang tidak
memungkinkan lagi berkembang biak atau menjadi sumber kontaminan
selama proses perkembangan berlangsung.

Proses sterilisasi yang tidak sempurna akan menimbulkan adanya

kontaminasi. Kontaminasi yang umum terjadi adalah kontaminasi oleh
cendawan dan bakteri. Komposisi medium kultur jaringan yang
mengandung gula, vitamin, asam asam amino, garam-garam anorganik,
air, zat pengatur tumbuh, dan bahan pemadat sangat menguntungkan untuk
pertumbuhan cendawan dan bakteri. Bila diberi kesempatan maka
organisme tersebut akan tumbuh dengan cepat, dan dalam waktu singkat
akan menutupi permukaan medium dan eksplan yang ditanam. Selanjutnya
organisme ini menyerang eksplan melalui bekas luka pemotongan pada
saat perlakuan sterilisasi. Beberapa jenis mikroorganisme melepaskan
senyawa beracun ke dalam medium kultur yang dapat menyebabkan
kematian eksplan (Zulkarnain, 2009).

Teknik penanaman kultur jaringan sangat sederhana, yaitu suatu sel

atau irisan jaringan tanaman yang sering disebut eksplan secara aseptik
diletakkan dan dipelihara dalam medium pada atau cair yang cocok dan
dalam keadaan steril. dengan cara demikian sebaian sel pada permukaan
irisan tersebut akan mengalami proliferasi dan membentuk kalus.
Apabila kalus yang terbentuk dipindahkan kedlam medium diferensiasi
yang cocok, maka akan terbentuk tanaman kecil yang lengkap dan
disebut planlet. Dengan teknik kultur jaringan ini hanya dari satu irisan
kecil suatu jaringan tanaman dapat dihasilkan kalus yang dapat
menjadi planlet dalam jumlah yang besar (Anonim,2009).

16
 Eksplan yang telah ditanam, agar dapat tumbuh menjadi kalus dan
kemudian menjadi planlet, membutuhkan pemeliharaan yang rutin dan
tepat. Artinya, eksplan atau kalus yang sudah waktunya untuk dipindahkan
ke dalam media tanam yang baru harus segera dilaksanakan, tidak boleh
sampai terlambat. Pemindahan yang terlambat dapat menyebabkan
pertumbuahn eksplan atau kalus dapat terhenti atau dapat
mengalami brownig atau terkontaminasi oleh jamur atau bakteri.Sebelum
digunakan, enkas harus diterilisasi dengan menggunakan hand sprayer
berisi spirtus atau campuran formalin 10% dan alkohol 70%, dengan
perbandinga 1:1. setelah disemprot kemudian dibiarkan terlebih dahulu
kurang lebih 10 menit, baru kemudian boleh digunakan. Alat-alat
dissecting –set dan glass ware yang akan digunakan untuk kultur jaringan,
setelah dicuci dan dikeringkan kemudian dibungkus dengan kertas payung
dan disterilisasi di dalam autoklaf dengan suhu 121 oC, tekanan 15 lb, dan
lama sterilsiasi 20-30 menit.Botol-botol eksplan yang sudah berisi medium
setelah ditutup dengan alumunium foil, kemudian disterilisasi. Sterilisasi
medium lebih sedikit waktunya dibandingkan dengan sterilisasi alat-alat,
yakni 15 menit, tetapi suhu dan tekannya sama (Hendra,2007).

2.6 Pengamatan
a. Waktu muncul tunas (HSK)

Waktu muncul tunas diamati dengan cara mengamati waktu

pertama kali muncul tunas dari eksplan yang ditanam. Pengamatan waktu
muncul tunas dilakukan sejak tanam hingga muncul tunas. Kriteria tunas
yang baru muncul adalah terdapat tonjolan kecil dipermukaan eksplan
yang mengarah keatas. Pembentukan mata tunas ditandai dengan
munculnya tonjolan kecil dari sisi eksplan, biasanya muncul 5 MSK dan
terbentuk sempurna setelah 8 MSK (Chatri dkk., 2011).

b. Jumlah Tunas (pucuk/tunas)

Jumlah tunas diamati dengan cara menghitung tunas dalam botol

kultur pada setiap tanaman yang hidup. Pengamatan jumlah tunas eksplan

17
tanaman pisang barangan dilakukan setiap dua minggu sekali pada umur 2
MSK, 4 MSK, 6 MSK dan 8 MSK. Pada akhir bulan kedua, eksplan dapat
menumbuhkan 2-4 tunas aksilar (Sulistiani dan Yani, 2012).

c. Jumlah Daun (helai)

Jumlah daun diamati dengan cara menghitung daun dalam botol

kultur pada setiap tanaman yang hidup. Daun dapat dihitung apabila
eksplan tanaman pisang barangan sudah membentuk daun sempurna
(helai). Pengamatan jumlah daun dilakukan setiap dua minggu sekali pada
umur 2 MSK, 4 MSK, 6 MSK dan 8 MSK. 24

d. Tinggi tanaman (cm)

Tinggi tanaman diamati dengan cara mengukur tinggi planlet

dalam botol kultur pada setiap tanaman yang hidup. Pengamatan tinggi
tanaman dilakukan setiap dua minggu sekali pada umur 2 MSK, 4 MSK, 6
MSK dan 8 MSK dengan menggunakan penggaris.

e. Waktu muncul akar (HST)

Waktu muncul akar diamati dengan cara mengamati waktu pertama

kali muncul akar dari eksplan yang ditanam. Pengamatan dilakukan sejak
tanam hingga muncul akar.

f. Jumlah akar (buah)

Jumlah akar diamati dengan cara menghitung akar dalam botol

kultur pada setiap tanaman yang hidup. Pengamatan dilakukan setiap dua
minggu sekali pada umur 2 MSK, 4 MSK, 6 MSK dan 8 MSK..

Pengamatan Penunjang:

a. Kondisi lingkungan ruang inkubasi Pengamatan kondisi lingkungan

ruang inkubasi dilakukan dengan mengamati dan mengukur suhu,
kelembaban dan intensitas cahaya pada proses inkubasi. Pengamatan suhu
dan kelembaban dilakukan setiap hari menggunakan thermohigrometer

18
 sejak eksplan ditanam, sedangkan pengamatan terhadap intensitas cahaya
dilakukan pada awal masa kultur menggunakan lux meter.

b. Persentase eksplan hidup (%) Pengamatan dilakukan dengan cara

mengamati dan menghitung jumlah eksplan yang masih hidup, yang
ditandai dengan pertumbuhan eksplan yang terus berlanjut, tidak
mengalami kontaminasi dan tidak mati secara fisiologis dengan interval
pengamatan satu minggu sekali. Presentase hidup eksplan dihitung dengan
menggunakan rumus sebagai berikut: % 𝑒𝑘𝑠𝑝𝑙𝑎𝑛 ℎ𝑖𝑑𝑢𝑝 = ∑𝑒𝑘𝑠𝑝𝑙𝑎𝑛
ℎ𝑖𝑑𝑢𝑝 ∑ 𝑠𝑒𝑙𝑢𝑟𝑢ℎ 𝑒𝑘𝑠𝑝𝑙𝑎𝑛 𝑥 100% (Sudiyanti et al., 2017)

c. Persentase kontaminasi (%) Pengamatan dilakukan dengan cara

mengamati dan menghitung jumlah eksplan yang terkontaminasi oleh
jamur, bakteri maupun keduanya dengan interval pengamatan satu minggu
sekali. Presentasi hidup eksplan dihitung dengan cara sebagai berikut: 26
% 𝑘𝑜𝑛𝑡𝑎𝑚𝑖𝑛𝑎𝑠𝑖 = ∑ 𝑒𝑘𝑠𝑝𝑙𝑎𝑛 𝑡𝑒𝑟𝑘𝑜𝑛𝑡𝑎𝑚𝑖𝑛𝑎𝑠𝑖 ∑ 𝑠𝑒𝑙𝑢𝑟𝑢ℎ 𝑒𝑘𝑠𝑝𝑙𝑎𝑛 𝑥
100% (Sudiyanti et al., 2017)

d. Persentase eksplan mati fisiologis (%) Pengamatan dilakukan dengan

cara mengamati dan menghitung jumlah eksplan yang mati fisiologis
ditandai dengan terlihatnya pencoklatan pada eksplan dengan interval
pengamatan satu minggu sekali. Persentasi hidup eksplan dihitung dengan
cara sebagai berikut: % 𝑒𝑘𝑠𝑝𝑙𝑎𝑛 𝑚𝑎𝑡𝑖 𝑓𝑖𝑠𝑖𝑜𝑙𝑜𝑔𝑖𝑠 = ∑ 𝑒𝑘𝑠𝑝𝑙𝑎𝑛 𝑚𝑎𝑡𝑖
𝑓𝑖𝑠𝑖𝑜𝑙𝑜𝑔𝑖𝑠 ∑ 𝑠𝑒𝑙𝑢𝑟𝑢ℎ 𝑒𝑘𝑠𝑝𝑙𝑎𝑛 𝑥 100% (Sudiyanti et al., 2017)

e. Persentase eksplan browning (%) Pengamatan dilakukan dengan cara

mengamati eksplan yang ditandai dengan berubahnya warna menjadi
coklat. Pengamatan eksplan browning dilakukan setiap minggu dan
dilakukan perhitungan persentase eksplan browning dengan menggunakan
rumus berikut: % 𝑒𝑘𝑠𝑝𝑙𝑎𝑛 𝑏𝑟𝑜𝑤𝑛� � 𝑛𝑔 = ∑ 𝑒𝑘𝑠𝑝𝑙𝑎𝑛 𝑏𝑟𝑜𝑤𝑛𝑖𝑛𝑔 ∑
𝑠𝑒𝑙𝑢𝑟𝑢ℎ 𝑒𝑘𝑠𝑝𝑙𝑎𝑛 𝑥 100% (Sudiyanti et al., 2017)

2.7 Subkultur
Sub kultur merupakan salah satu tahap dalam perbanyakan
tanaman melalui kultur jaringan. Prinsip dasarnya sub kultur ialah

19
memotong, membelah dan menanam kembali eksplan yang telah tumbuh
sehingga jumlah tanaman akan bertambah banyak (Hendrayono, 1994).
Sub kultur adalah memindahkan eksplan ke media
multiplikasi dengan tujuan perbanyakan atau pengakaran suatu eksplan.
Sub kultur dilakukan jika eksplan pada medium kultur mengalami browing
sebagai indikasi dari kematian sel dan ketidakpratisan fungsi media (Yann
dkk., 2012). Eklspan yang baru saja ditanam dan diinkubasikan dalam
ruangan incubator akan menghasilkan kalus. Bila kalus sudah cukup umur
maka dapat dilakukan sub kultur. Kalus yang terlambat disub-kulurkan
tidak dapat berkembang dengan baik.
Subkultur adalah usaha untuk mengganti media tanam kultur
jaringan dengan media yang baru, sehingga kebutuhan nutrisi untuk
pertumbuhan kalus atau protokormus dapat terpenuhi. Sub kultur
dilakukan atas dasar suspensi atau kandungan nutrisi dalam media tidak
mencukupi untuk pertumbuhan planlet, baik dipengaruhi oleh hilangnya
nutrisi yang menyebabkan perlunya penambahan nutrisi dalam medium
dan hilangnya karbohidrat yang kesemuanya dibutuhkan dalam proses
metabolisme (Boisson dkk., 2012).
Kegiatan sub kultur disesuai dengan jenis tanaman yang
dikulturkan. Setiap tanaman memiliki karakteristik dan kecepatan tumbuh
yang berbeda-beda yang menyebabkan cara dan waktu sub kultur juga
berbeda-beda. Secara garis besar teknik sub kultur dibagi menjadi 4 yaitu:
1. Teknik sub kultur untuk tanaman yang harus segera atau cepat di
sub kultur.
2. Teknik sub kultur untuk tanaman yang relatif lama di sub kultur.
3. Teknik sub kultur untuk tanaman yang diperbanyak dengan
multifikasi tunas, maka subkultur dapat dilakukan dengan
memisahkan anakan tanaman dari koloninya atau melakukan
penjarangan.
4. Untuk tanaman yang tipe pertumbuhannya dengan pemanjangan
batang maka sub kultur bisa dilakukan dengan memotong tanaman
per ruas tanaman yang ada. Namun jika ada planlet yang masih

20
 terlalu kecil dan beresiko tinggi untuk dipotong, maka sub
kulturnya cukup dilakukan dengan dipisahkan dari induknya dan
ditanam kembali secara terpisah (Hendrayono, 1994).

2.8 Aklimatisasi
Aklimatisasi merupakan kegiatan akhir teknik kultur jaringan.
Aklimatisasi adalah proses pemindahan planlet dari lingkungan yang
terkontrol (aseptik dan heterotrof) ke kondisi lingkungan tidak terkendali,
baik suhu, cahaya, dan kelembaban, serta tanaman harus dapat hidup
dalam kondisi autotrof, sehingga jika tanaman (planlet) tidak
diaklimatisasi terlebih dahulu tanaman (planlet) tersebut tidak akan dapat
bertahan dikondisi lapang. Aklimatisasi dilakukan untuk mengadaptasikan
tanaman hasil kultur jaringan terhadap lingkungan baru sebelum ditanam
dan dijadikan tanaman induk untuk produksi dan untuk mengetahui
kemampuan adaptasi tanaman dalam lingkungan tumbuh yang kurang
aseptik. Aklimatisasi adalah suatu proses dimana suatu tanaman
beradaptasi sengan perubahan lingkungan (Torres, 1989).
Pada tahap ini (aklimatisasi) diperlukan ketelitian karena tahap ini
merupakan tahap kritis dan seringkali menyebabkan kematian planlet.
Kondisi mikro planlet ketika dalam botol kultur adalah dengan
kelembaban 90-100 %. Beberapa sumber menuliskan penjelasan yang
berkaitan dengan hal tersebut.Bibit yang ditumbuhkan secara in vitro
mempunyai kutikula yang tipis dan jaringan pembuluh yang belum
sempurna (Wetherell, 1982).
Kutikula yang tipis menyebabkan tanaman lebih cepat kehilangan
air dibanding dengan tanaman yang normal dan ini menyebabkan tanaman
tersebut sangat lemah daya bertahannya. Walaupun potensialnya lebih
tinggi, tanaman akantetap menjadi layu karena kehilangan air yang tidak
terbatas (Pospisilova et al, 1996). Kondisi tersebut menyebabkan tanaman
tidak dapat langsung ditanam dirumah kaca (Wetherelll, 1982).
Selain itu, tanaman juga memerlukan akar untuk menyerap hara
agar dapat tumbuh dengan baik sehingga dalam tahap aklimatisasi ini

21
diperlukan suatu media yang dapat mempermudah pertumbuhan akar dan
dapat menyediakan hara yang cukup bagi tanaman (planlet) yang
diaklimatisasi tersebut. Media yang remah akan memudahkan
pertumbuhan akar dan melancarkan aliran air, mudah mengikat air dan
hara, tidak mengandung toksin atau racun, kandungan unsur haranya
tinggi, tahan lapuk dalam waktu yang cukup lama. Media aklimatisasi
bibit kultur jaringan krisan dan kentang di Indonesia saat ini adalah media
arang sekam atau media campuran arang sekam dan pupuk kandang
(Marzuki, 1999).

22
 BAB III
METODOLOGI

3.1 Waktu dan tempat

Kegiatan praktikum pengantar bioteknologi pertanian dilakukan pada hari
kamis pada tanggal 7 oktober 2021 sampai dengan 11 november 2021. Kegiatan
praktikum dilakukan di laboratorium fakultas pertanian universitas riau dan
dirumah masing-masing.

3.2 Alat dan bahan

3.2.1 Pembuatan kompos

Alat dan bahan yang digunakan dalam pembuatan aktifator dan pembuatan
kompos adalah wadah, cangkul, dan composer. Bahan yang digunakan adalah 1
liter bioaktivaor, 1 kg gula merah, 1 liter air kelapa, 1 liter air cucian beras, 1/5 kg
terasi, latutan aktifator EM4, 10-15 kg limbah pertanian dan rumah tangga.

3.2.2 Pembuatan larutan stok

Alat dan bahan yang digunakan dalam pembuatan larutan stok adalah
timbangan analitik, gelas beker, magnetic stirrer, aluminium foil, label, dan
wadah. Bahan yang digunakan adalah bahan kimia, aquades.

3.2.3 Pembuatan media

Alat dan bahan pembuatan media adalah botol kultur, magnetig stirrer,
ph meter, batang katoda, panic, aluminium foil, plastic wrap, label, dan kompor.
Bahan yang digunakan adalah aquades, dan agar-agar 8 gr.

3.2.4 Perbanyakan tanaman secara in vitro

Alat dan bahan yang digunakan adalah petridish, scalpel, pinset,
gunting, bunsen, tisu handsprey. Bahan yang digunakan adalah biji jeruk, bunga
papaya yang masih kuncup, alcohol, dan media.

23
3.2.5 Subkultur dan pengamatan
Alat dan bahan yang digunakan adalah pisau, gunting, cawan petri,
lampu spiritus, laminar air flow cabinet, pinset, scalpel, botol kultur. Bahan yang
di gunakan adalah media, eksplan tanaman yang sudah siap disubkultur, alkohol.

3.2.6 Aklimatisasi
Alat dan bahan yang digunakan adalah media tanam, plantlet, dithan,
pot dan rumah kaca

3.3 Cara kerja

3.3.1 Pembuatan kompos

1. Pembuatan larutan activator
1) Campurkan bahan-bahan activator dalam wadah tertutup.
2) Simpan kurang lebih 12 jam
2. Pembuatan kompos
1) Siapkan peralatan dan bahan yang digunakan untuk membuat kompos
2) Cacah limbah pertanian dan rumah tangga menggunakan pisau atau
gunting sepanjang 2-4 cm, lalu tambahkan serbuk gergaji dan dedak ke
dalam wadah
3) Aduk bahan kompos dan tuangkan activator EM4 yang sudah diaktifkan
4) Masukkan sampah sayuran ke dalam composer lalu tutup rapat
5) Bahan kompos diaduk setiap dua hari sekali
6) Jika sedikit berbau semprot sesekali bahan dengan larutan EM4 aktif
7) Kompos dapat didigunakan setelah 14-21 hari tergantung dari jenis
sampah dan kandungan bahan yang digunakan

3.3.2 Pengenalan alat laboratorium

Cara kerja dalam praktikum ini adalah dengan memerhatikan pengenalan
alat laboratorium yang diperagakan oleh asisten praktikum secara daring melalui
aplikasi zoom/google meet. Lalu menulis nama alat laboratorium berserta fungsi
dan cara kerjanya

24
3.3.3 Pembuatan larutan stok dan media
1. Pembuatan larutan stok
1) Timbang bahan kimia yang akan digunakan menggunakan timbangan
analitik. Stok A= 4,95 g, stok B= 5,7 g, stok C=1,32 g
2) Larutkan dengan aguades. Cara ukur aquades sebanyak 90 ml untuk stok
A, homogenkan dengan magnetic stirrer dengan keceatan 600mpm,
masukkan sisa dari aquades tadi
3) Siapkan wadah masukkan larutan tadi lalu tutup dengan aluminium foil
lalu diber label
4) Begitu juga untuk larutan stok-stk lainnya
2. Pembuatan media
1) Timbang gula sebanyak 30 g
2) Siapkan larutan stok yang akan digunakan pastikan botol kultur steril
3) Larutkan gula dan aquades 510 ml masukkan ke magnetic stirrer diputas
600 mpm
4) Siapkan larutan stok A 30 ml dan stok B 30 ml setelah larutan stok A
kemudian lakukan secara bertahap untuk stok B
5) Tambahkan sampai larutannya 900 ml
6) Jika sudah pas tambahkan menjadi 1000 ml
7) Setelah itu homogenkan selanjutnya panaskan larutan dengan agar-agar 8
gr menggunakan panic dan masak hingga menggelembung
8) Masukkan ke dalam botol kultur dalam keadaan panas 25 ml tutup
botolnya dengan aluminium foil dan plastic wrap
9) Beri label pada botol dan jangan sampai terkontaminasi

3.3.4 Sterilisasi dan penananman secara in vitro

1. Sterilisasi
1) Sterilisasi alatdan bahan terlebih dahulu
2) Biji jeruk diambil dari buah jerk lalu ditambahkan dilten seujung spatula
dan tunggu 15menit
3) Bilas biji dilten 3x dengan aquades
4) Lakukan langkah yang sama dengan buah pepaya
2. Penanaman biji jeruk

25
 1) Hidupkan uv, blower dan lampu laminar air flow
2) Letakkan alat dan bahan ke dalam laminar
3) Sebelum penanaman pinset disterilisasi menggunakan Bunsen sebanyak
3x
4) Ambil biji jeruk dan letakkan dipetri
5) Rendam dalam Clorox selama 1menit
6) Bilas dengan aquades keringkan dengan tisu
7) Kulit ari dipisahkan dari biji menggunakan pisau yang sudah disterilkan
8) Sterilkan media(botol) dengan cara membakar mulut botol
9) Tanam eksplan ke dalam media pastiakn tertancap
10) Sterilisasi mulut botol mulut botol dan aluminium foil
11) Tutup mulut botol dengan aluminium foil den plastic wraps
12) Beri label (nama, tgl, jenis tanaman) dan letakkan diruang inkubasi
3. Penanaman anter papaya
1) Sterilisasi bunga papaya dengan dilewatka diapi
2) Kupas bunga dan ambil anter
3) Sterilakan media dengan membakar mulut botol
4) Ambil anter dan tanah ke dalam media
5) Bakar mulut botol dan aluminium foil
6) Tutup dengan aluminium foil dan plastic wrap
7) Beri label (nama, tgl, jenis tanaman) dan letakkan diruang inkubasi

3.3.5 Cara kerja subkultur dan pengamatan

1) Proses kerjanya dilakukan dalam laminar dengan keadaan dosis larutan,
stok, dan media yang sama.
2) Eksplan yang digunakan diambil secara steril
3) Eksplan ditanam pada media yang baru dan disimpan diruang kultur
4) Perkembangan jaringn diamati setiap hari

26
3.3.6 Cara kerja aklimatisasi
1) Pilih plantlet yang sudah cukup kriterianya, lalu platlet dikeluarkan dari
botol dan direndam selama 5-10 menit dengan dithan
2) Sediakan media berupa tanah dicampur pasir 1:1
3) Lalu plantlet disusun dalam 1 pot sebanyak 2-3 plantlet
4) Kemudian pot diletakkan dirumah kaca.

27
 BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 HASIL
4.1.1 Pembuatan kompos
Hasil dari praktikum ini adalah mahasiswa mengetahui kompos yang baik,
yaitu kompos yang baik, yaitu kompos yang tidak berbau busuk, berwarna coklat
kehitaman, tidak memicu tumbuhnya gulma, gembur, dan jika dites dengan cara
dimasukkan kedalam air maka air tersebut tidak kotor dan tetap jernih.

4.1.2 Pengenalan alat-alat laboratorium

NO. NAMA ALAT FUNGSI CARA KERJA
1. Tuangkan zat cair ke gelas
Mengukur volume ukur.
1. Gelas ukur
zat cair 2. Lalu amati berapa volume
air tersebut.
1. Tuangkan cairan atau larutan
Untuk mengukur dan kedalam labu ukur.
2. Labu ukur menghomogenkan 2. Amati volumenya, jika ingin
cairan dan larutan menghomogenkan larutan,
aduk secara perlahan.
Untuk mengukur dan
3. Erlenmeyer menghomogenkan Sama seperti labu ukur
larutan.
Untuk mengukur dan
4. Gelas beaker menghomogenkan Sama seperti labu ukur
larutan
Sebagai tempat
meletakkan sampel, Letakkan sampel didalam
5. Cawan petri
seperti sampel kultur cawan petri.
jaringan.
Tempat menanam
Botol kultur Letakkan/ tanam kultur
6. eksplan kultur
jaringan jaringan didalamnya.
jaringan
Menghancurkan dan 1. Letakkan bahan yang akan
Lumpang dan
7. menghaluskan zat dihaluskan kedalam lumpang.
alu
padat. 2. Haluskan dengan alu
Jepit bahan yang ingin
Memindahkan dan
8. Pinset dipindahkan dengan ujung
mengambil eksplan
pinset.
Potong eksplan yang akan
9. Skalpel Memotong eksplan
dipotong.

28
 Mengambil bahan
10. Spatu kimia dalam ukuran -
kecil.
1. Masukkan zat cair yang akan
Menyemprotkan zat disemprotkan kedalam botol
11. Botol semprot
cair. semprot.
2. semprotkan zat cair tersebut
1. Hidupkan lampu bunsen
Untuk sterilisasi alat dengan menyalakan apinya.
12. Lampu bunsen
dan media. 2. Letakkan alat yang akan
disterilkan
1. Hidupkan kompor
Untuk memasak atau
13. Kompor 2. Lalu panaskan larutan
memanaskan larutan.
diatasnya
Untuk mendinginkan
bahan labor, Letakkan alat atau bahan yang
Kulkas atau
14. mensterilkan alat akan di sterilkan, didinginkan,
freezer
labor, dan atau diawetkan didalam kulkas.
mengawetkan bahan.
Meletakkan botol
Letakkan sampel, botol kultur
kultur jaringan, dan
15. Ruang inkubasi jaringan, dll yang akan
sebagai ruang steril
diinkubasi.
untuk sampel.
1. Sambungkan batang kable
ke ph meter, pastikan batang
Mengukur ph dan kabel bersih.
Ph meter dan
16. media kultur 2. Bilas batang kabel dengan
batang kabel
jairngan aquades lalu lap hingga kering
3. Lakukan proses kalibrasi.
4. Alat siap digunakan
1. Colokkan alat kelistrik.
2. Letakkan gelas beaker yang
berisi larutan.
Menghomogenkan
17. Magnetik spiral 3. Letakkan batang pengaduk
suatu larutan
4. Atur kecepatan putaran dan
tunggu hingga larutan
tercampur rata.
1. Pastikan alat berisi air,
masukkan alat atau bahan yang
ingin disterilkan.
2. Tutup autoclaf, jangan
Untuk mensterilkan
terlalu rapat (ruang untuk uap
alat dan media
18. Autoclaf keluar).
dengan sistem uap
3. Atur waktu autoclaf 15
(dikukus).
menit, tekan tombol on, lalu
tunggu hingga selesai.
4. Setelah selesai, diamkan
selama 30 menit, baru alat atau

29
 bahan tersebut dapat
dipindahkan keluar.
1.Pastikan gelombang udara
berada ditengah, colokkan alat
ke listrik, lalu tekan tombol on
dan didiamkan selama 3-4
Untuk menimbang
menit.
Timbangan massa media atau
19. 2. Atur satuan yang dimau.
analitik bahan kiia dalam
3. Setelah timbangan
jumlah kecil.
menunjukkan 0,0
4. Masukkan bahan.
5. Ambil data, setelah selesai
tekan tombol off.
Buka tutup laminar, sterilkan
dengan alkohol 70%.
Masukkan alat atau bahan, lalu
Tempat penanaman
tutup, colokkan listrik agar
Laminar air kultur jaringan yang
20. laminar airflow dapat
flow steril, ruang steril
dihidupkan.
bagi sampel.
Tekan tombol on dan UV,
tunggu selama 30 menit,
hidupkan laminar dan blower
Table 1. Alat-alat Laboratorium
4.1.3 Pembuatan larutan stok media
Hasil dari praktikum ini adalah stok media yang sudah jadi dan siap
digunakan dalam kultur jaringan

4.1.4 Perbanyakan dengan kultur in vitro

-

4.1.5 Subkultur dan pengamatan botol

Botol Kondisi botol Kondisi eksplan
1 Steril Hijau
2 Steril Hijau
3 Steril Hijau
4 Steril Coklat dan berlendir.
5 Ada misellium putih Hijau
6 Steril Kuning
7 Steril Kuning

30
 8 Ada misellium putih Kuning
9 Steril Kuning
10 Steril Kuning
11 Steril Bersih
12 Steril Bersih
13 Steril Bersih
14 Steril Bersih
15 Steril Bersih
Table 2. Pengamatan Botol Subkultur
4.1.6 Aklimatisasi
-

4.2 PEMBAHASAN
4.2.1 Pembuatan kompos
Kompos adalah hasil penguraian parsial/ tidak lengkap dari campuran
bahan-bahan organik yang dapat dipercepat secara artisifal oleh populasi berbagai
macam mikrob dalam kondisi lingkungan yang hangat, lembap, dan bersifat
aerobik/anaerobik. Kompos merupakan pupuk yang terbuat dari sampah organik
yang sebagian besar berasal dari sampah rumah tangga. Untuk membuat pupuk
kompos diperlukan proses pengomposan. Pengomposan adalah proses biologis
yang menggunakan mikroorganisme sebagai dekomposer untuk mempercepat
penguraian dari bahan-bahan organik.

Proses pengomposan bisa terjadi secara aerobik (menggunakan osigen),

dan secara aaerobik (tanpa menggunakan oksigen). Namun proses aerobik jarang
digunakan karena menghasilkan bau yang tidak sedap dan sangat menyengat.
Proses pengomposan secara simpel bisa dipecah menjadi sesi aktif dadn sesi
pematangan. Sepanjang proses pengomposan hendak terjadi penyusutan volume
ataupun biomassa bahan bahan yang dapat mencapai hingga 30-40% pengurangan
dari volume awalnya.

Hasil akhir dari pengomposan merupakan berupa humus dengan

temperatur normal dan tidak memiliki bau. Hasil ini merupakan hasil kompos
yang baik. Karna ciri-ciri kompos yang baik adalah kompos yang tidak berbau

31
busuk, berwarna coklat kehitaman, tidak memicu tumbuhnya gulma, gembur, dan
jika di tes dengan cara dimasukkan kedalam air maka air tersebut tidak kotor dan
tetap jernih. Dengan hasil yang baik, kompos dapat langsung digunakan untuk
pemupukan tanaman. Pupuk kompos termasuk kedalam jenis pupuk organik yang
baik bagi tanah.

4.2.2 Pengenalan alat laboratorium

Pengenalan alat laboratorium adalah langkah pertama sebelum kita
melakukan kegiatan pengamatan di laboratorium. Pengenalan alat laboratorium
bertujuan agar para praktikan mengetahui nama alat yang digunakan pada saat
dilaboratorium, berserta fungsi dan cara kerjanya. Hal ini bertujuan agar praktikan
tidak salah dalam menggunakan alat dilaboratorium. Hal ini juga bertujuan agar
praktikan dapat mengoperasikan alat laboratorium sesuai dengan cara yang benar
yang telah diajarkan oleh asisten laboratorium. Alat-alat laboratorium digunakan
untuk mempermudah kerja praktikan di laboratorium. Dengan menggunakan alat
laboratorium dapat memperlancar prose kerja dilaboratorium, sehingga dapat
mempercepat jalannya suatu percobaan atau penelitian yang dilakukan
dilaboratorium.

NO. NAMA ALAT FUNGSI CARA KERJA

1. Tuangkan zat cair ke gelas
Mengukur volume ukur.
1. Gelas ukur
zat cair 2. Lalu amati berapa volume
air tersebut.
1. Tuangkan cairan atau larutan
Untuk mengukur dan kedalam labu ukur.
2. Labu ukur menghomogenkan 2. Amati volumenya, jika ingin
cairan dan larutan menghomogenkan larutan,
aduk secara perlahan.
Untuk mengukur dan
3. Erlenmeyer menghomogenkan Sama seperti labu ukur
larutan.
Untuk mengukur dan
4. Gelas beaker menghomogenkan Sama seperti labu ukur
larutan
Sebagai tempat
meletakkan sampel, Letakkan sampel didalam
5. Cawan petri
seperti sampel kultur cawan petri.
jaringan.

32
 Tempat menanam
Botol kultur Letakkan/ tanam kultur
6. eksplan kultur
jaringan jaringan didalamnya.
jaringan
Menghancurkan dan 1. Letakkan bahan yang akan
Lumpang dan
7. menghaluskan zat dihaluskan kedalam lumpang.
alu
padat. 2. Haluskan dengan alu
Jepit bahan yang ingin
Memindahkan dan
8. Pinset dipindahkan dengan ujung
mengambil eksplan
pinset.
Potong eksplan yang akan
9. Skalpel Memotong eksplan
dipotong.
Mengambil bahan
10. Spatu kimia dalam ukuran -
kecil.
1. Masukkan zat cair yang akan
Menyemprotkan zat disemprotkan kedalam botol
11. Botol semprot
cair. semprot.
2. semprotkan zat cair tersebut
1. Hidupkan lampu bunsen
Untuk sterilisasi alat dengan menyalakan apinya.
12. Lampu bunsen
dan media. 2. Letakkan alat yang akan
disterilkan
1. Hidupkan kompor
Untuk memasak atau
13. Kompor 2. Lalu panaskan larutan
memanaskan larutan.
diatasnya
Untuk mendinginkan
bahan labor, Letakkan alat atau bahan yang
Kulkas atau
14. mensterilkan alat akan di sterilkan, didinginkan,
freezer
labor, dan atau diawetkan didalam kulkas.
mengawetkan bahan.
Meletakkan botol
Letakkan sampel, botol kultur
kultur jaringan, dan
15. Ruang inkubasi jaringan, dll yang akan
sebagai ruang steril
diinkubasi.
untuk sampel.
1. Sambungkan batang kable
ke ph meter, pastikan batang
Mengukur ph dan kabel bersih.
Ph meter dan
16. media kultur 2. Bilas batang kabel dengan
batang kabel
jairngan aquades lalu lap hingga kering
3. Lakukan proses kalibrasi.
4. Alat siap digunakan
1. Colokkan alat kelistrik.
2. Letakkan gelas beaker yang
berisi larutan.
Menghomogenkan
17. Magnetik spiral 3. Letakkan batang pengaduk
suatu larutan
4. Atur kecepatan putaran dan
tunggu hingga larutan
tercampur rata.

33
 1. Pastikan alat berisi air,
masukkan alat atau bahan yang
ingin disterilkan.
2. Tutup autoclaf, jangan
terlalu rapat (ruang untuk uap
Untuk mensterilkan
keluar).
alat dan media
18. Autoclaf 3. Atur waktu autoclaf 15
dengan sistem uap
menit, tekan tombol on, lalu
(dikukus).
tunggu hingga selesai.
4. Setelah selesai, diamkan
selama 30 menit, baru alat atau
bahan tersebut dapat
dipindahkan keluar.
1.Pastikan gelombang udara
berada ditengah, colokkan alat
ke listrik, lalu tekan tombol on
dan didiamkan selama 3-4
Untuk menimbang
menit.
Timbangan massa media atau
19. 2. Atur satuan yang dimau.
analitik bahan kiia dalam
3. Setelah timbangan
jumlah kecil.
menunjukkan 0,0
4. Masukkan bahan.
5. Ambil data, setelah selesai
tekan tombol off.
Buka tutup laminar, sterilkan
dengan alkohol 70%.
Masukkan alat atau bahan, lalu
Tempat penanaman
tutup, colokkan listrik agar
Laminar air kultur jaringan yang
20. laminar airflow dapat
flow steril, ruang steril
dihidupkan.
bagi sampel.
Tekan tombol on dan UV,
tunggu selama 30 menit,
hidupkan laminar dan blower
Table 3 alat-alat laboraturium
Pada praktikum pengantar bioteknologi pertanian ini alat laboratorium
yang digunakan adalah alat untuk melakukan kultur jaringan pada tanaman.
Kultur jaringan adalah suatu teknik memperbanyak tanaman secara vegetatif.
Prinsip perbanyakan dengan teknik kultur jaringan adalah menggunakan bagian
vegetatif tanaman di media buatan yang dilakukan ditempat yang steril. Oleh
karna itu kultur jaringan dilakukan dilaboratorium yang tempatnya bisa dibilang
steril dari lingkungan luar.

34
4.2.3 Pembuatan larutan stok media
Media merupakan faktor penentu dalam perbanyakan dengan kultur jaringan.
Komposisi media yang digunakan tergantung dengan jenis tanaman yang akan
diperbanyak. Media yang digunakan biasanya terdiri dari garam mineral, vitamin,
dan hormon. Selain itu, diperlukan juga bahan tambahan seperti agar, gula, dan
lain-lain. Zat pengatur tumbuh (hormon) yang ditambahkan juga bervariasi, baik
jenisnya maupun jumlahnya, tergantung dengan tujuan dari kultur jaringan yang
dilakukan. Media yang sudah jadi ditempatkan pada tabung reaksi atau botol-botol
kaca. Media yang digunakan juga harus disterilkan dengan cara memanaskannya
dengan autoklaf.
Perbanyakan tanaman secara in vitro yaitu memperbanyak tanaman
menggunakan bagian-bagian tanaman seperti jaringan, sel dan organ yang
dikulturkan dalam media buatan yang kaya akan sumber nutrisi dan zat pengatur
tumbuh (ZPT) serta dalam kondisi yang aseptik sehingga tanaman dapat
memperbanyak diri dan beregenerasi menjadi tanaman lengkap. Media yang
digunakan dalam perbanyakan tanaman secara in vitro ada beberapa jenis, salah
satunya yaitu Murashige and Skoog (MS), media ini terdiri dari unsur hara makro,
mikro, zat besi, vitamin, serta dilengkapi dengan zat pengatur tumbuh (ZPT) guna
menunjang pertumbuhan eksplan. Keberhasilan perbanyakan tanaman secara in
vitro dipengaruhi oleh beberapa faktor antara lain media yang digunakan, jenis
eksplan, dan zat pengatur tumbuh (Fauziah, 2019).
Larutan media dasar (media MS) ditambahkan glukosa sebanyak 20 g/l,
kemudian diberi ZPT sesuai dengan kombinasi dan taraf konsentrasi perlakuan
yaitu 2,4-D (0, 0,5, dan 1 ppm) dan kinetin (0, 1, dan 2 ppm) untuk induksi kalus.
Kertas pH meter digunakan untuk mengukur tingkat keasaman media. Pengaturan
tingkat keasaman media dilakukan dengan penambahan HCl atau NaOH sehingga
pH media 5,6-5,8. Setelah pH larutan sesuai, larutan media ditambahkan dengan
3,5 g/l gelrite sebagai zat pemadat. Media tersebut kemudian dipanaskan hingga
mendidih dan diaduk sampai homogen. Selanjutnya media dituang dalam botol
kultur sebanyak 20 ml/botol. Botol berisi media ditutup rapat kemudian
dimasukkan ke dalam autoklaf dengan suhu 121oC selama 20 menit. Setelah
selesai, media disimpan dalam ruang penyimpanan media (Hendriyani, 2020)

35
 Setiap tanaman dalam pertumbuhannya membutuhkan paling sedikit 16
unsur hara. Ada unsur yang dibutuhkan dalam jumlah besar yang disebut unsur
makro dan ada pula yang dibutuhkan dalam jumlah sedikit tetapi harus tersedia
yang disebut unsur mikro. Jenis-jenis yang termasuk unsur makro adalah Nitrogen
(N), Fosfor (P), Kalium (K), Sulfur (S), Calsium (Ca), dan Magnesium (Mg).
unsur-unsur makro ini biasa diberi-kan dalam bentuk NH4NO3, KH2PO4, KNO3,
MgSO4.7H2O, CaCl2.2H2O. Sedangkan jenis-jenis unsur hara mikro adalah Klor
(Cl), Mangan (Mn), Besi (Fe), Tembaga (Cu), Seng (Zn), Boron (B), dan
Molibdenum (Mo). Unsur-unsur mikro ini diberikan dalam bentuk MnSO4,
4H2O, ZnSO4 4H2O, H3BO3, KI, NaMo4 2H2O, CuSO4 5H2O, dan CaCl2
6H2O. Disamping unsur hara makro dan mikro seperti yang telah disebutkan di
atas media tumbuh ini juga dilengkapi dengan penambahan gula (sukrosa),
vitamin (myoinositol, thiamin HCl, pyridoksin HCl, niacin), asam amino (glysin).
Bahan pemadat yang paling banyak digunakan adalah agar-agar karena agar-agar
mempunyai kelebihan diantaranya:
1. Agar-agar membeku pada suhu 45o C dan mencair pada suhu 100o C.
2. Tidak dicerna oleh enzim tanaman.
3. Tidak bereaksi dengan persenyawaan penyusun media.
Beberapa jenis agar yang dapat digunakan adalah : agar batangan, agar serbuk
(seperti agar swallow), gelrite, pytagel (Suwirmen, 2020).

4.2.4 Perbanyakan dengan kultur in vitro

Pada dasarnya kultur In Vitro adalah metode untuk mengisolasi bagian-bagian
tanaman seperti sel, jaringan atau organ yang ditumbuhkan di atas medium secara
aseptik dalam ruangan yang terkendali, sehingga bagian tanaman tersebut dapat
memperbanyak diri dan meregenerasi menjadi tanaman yang lengkap. Prinsip
kultur In Vitro terdapat pada teori sel yang dikemukakan oleh dua orang ahli
biologi dari German yaitu Schleiden dan Schwann. Teori tersebut menyatakan
bahwa sel tumbuhan bersifat autonom dan bersifat totipotensi. Sel bersifat
autonom artinya dapat melakukan metabolisme, tumbuh dan berkembang secara
mandiri jika diisolasi tunas dari jaringan induknya. Totipotensi diartikan sebagai

36
kemampuan dari sel untuk tumbuh dan meregenerasi menjadi tanaman lengkap
kembali (Indriyanto, 2003).
Tujuan dari kultur In Vitro adalah untuk memperbanyak tanaman dengan
waktu relatif singkat, sebagai langkah dalam pemuliaan tanaman serta
menghasilkan jenis tanaman yang kita inginkan. Berbagai jenis tanaman dapat
dibudidayakan melalui kultur di antaranya ialah tanaman Pisang Raja Bulu
Kuning (Musa Paradisiaca. L) . Keuntungan dari kultur In Vitro ialah untuk
pengadaan bibit tidak tergantung lagi pada musim, bibit dapat diproduksi dalam
jumlah besar dengan waktu yang relatif cepat, bibit yang dihasilkan bersifat
seragam, bebas terhadap penyakit (Nurheti, 2010).
Perbanyakan tanaman melalui kultur jaringan sangat dipengaruhi oleh
media, lingkungan dan zat pengatur tumbuh yang digunakan. Salah satu zat
pengatur tumbuh yang sering digunakan ialah auksin dan sitokinin yang
mempunyai fungsi untuk mengontrol pertumbuhan dan pembelahan sel.
Perbandingan auksin dan sitokinin merupakan sebuah aturan penting dalam
inisiasi tunas dan perpanjangan tunas. Khusus kultur jaringan akan berhasil
dengan baik apabila syarat-syarat yang diperlukan bagi proses pembiakan tersebut
dapat terpenuhi. Syarat-syarat tersebut meliputi perlakuan komposisi ZPT yang
tepat, pemilihan eksplan atau bahan tanaman, penggunaan media yang cocok,
pengaturan udara yang baik dan keadaan aseptik (Nugroho, 2002).
Keuntungan kultur jaringan:
1. Menghasilkan tanaman anakan yang serupa persis dengan tanaman induk
2. Menghasilkan tanaman anakan dengan lebih cepat
3. Menghasilkan tanaman langka yang susah tumbuh dari benih
4. Dapat mengendalikan kualitas yang dihasilkan
Kerugian kultur jaringan:
1. Tidak ada keragaman genetik pada tanaman anakan
2. Tidak dapat menghasilkan varietas baru
3. Akar tanaman dari metode seperti pencangkokan lebih lemah

Kegagalan pada teknik kultur jaringan sering disebabkan oleh adanya

kontaminan pada eksplan dan media kultur. Sterilisasi merupakan salah satu

37
upaya untuk menghilangkan mikoorganisme penyebab kontaminan pada eksplan.
Kontaminasi merupakan faktor dominan yang mempengaruhi keberhasilan dalam
teknik kultur jaringan terutama pada eksplan. Beberapa bahan kimia yang dapat
digunakan untuk mensterilkan permukaan eksplan adalah sunligth cair, clorox,
(NaOCl), HgCl2 , AgNo3 dan alkohol. Sugiharto et al., (2007) menggunakan
larutan clorox dengan konsentrasi 5% selama 3 menit kemudian dilakukan
pembilasan berulang menggunakan aquades steril. Eksplan dari jenis tanaman
yang berbeda, kadangkala berbeda pula teknik dan bahan sterilannya, sehingga
perlu pengkajian.
Pada dasarnya kultur In Vitro adalah metode untuk mengisolasi bagian-
bagian tanaman seperti sel, jaringan atau organ yang ditumbuhkan di atas medium
secara aseptik dalam ruangan yang terkendali, sehingga bagian tanaman tersebut
dapat memperbanyak diri dan meregenerasi menjadi tanaman yang
lengkap. Totipotensi diartikan sebagai kemampuan dari sel untuk tumbuh dan
meregenerasi menjadi tanaman lengkap kembali . Tujuan dari kultur In Vitro
adalah untuk memperbanyak tanaman dengan waktu relatif singkat, sebagai
langkah dalam pemuliaan tanaman serta menghasilkan jenis tanaman yang kita
inginkan. Keuntungan dari kultur In Vitro ialah untuk pengadaan bibit tidak
tergantung lagi pada musim, bibit dapat diproduksi dalam jumlah besar dengan
waktu yang relatif cepat, bibit yang dihasilkan bersifat seragam, bebas terhadap
penyakit. Kegagalan pada teknik kultur jaringan sering disebabkan oleh adanya
kontaminan pada eksplan dan media kultur. Sterilisasi merupakan salah satu
upaya untuk menghilangkan mikoorganisme penyebab kontaminan pada eksplan.

4.2.5 Sub kultur dan pengamatan botol

Botol Kondisi botol Kondisi eksplan
1 Steril Hijau
2 Steril Hijau
3 Steril Hijau
4 Steril Coklat dan berlendir.
5 Ada misellium putih Hijau
6 Steril Kuning

38
 7 Steril Kuning
8 Ada misellium putih Kuning
9 Steril Kuning
10 Steril Kuning
11 Steril Bersih
12 Steril Bersih
13 Steril Bersih
14 Steril Bersih
15 Steril Bersih
Table 4 pengamatan botol kultur
4.2.6 Aklimatisasi
Kultur Jaringan (TC) merupakan teknologi yang dapat digunakan untuk
menghasilkan bibit berkualitas tinggi bukan menggunakan stek tradisional.
Memiliki fekunditas tinggi, memproduksi ribuan propagul seperti teknik
konvensional (Yusnita, 2003).
Aklimatisasi merupakan kegiatan akhir teknik kultur jaringan. Aklimatisasi
adalah proses pemindahan planlet dari lingkungan yang terkontrol (aseptik dan
heterotrof) ke kondisi lingkungan tidak terkendali, baik suhu, cahaya, dan
kelembaban, serta tanaman harus dapat hidup dalam kondisi autotrof, sehingga
jika tanaman (planlet) tidak diaklimatisasi terlebih dahulu tanaman (planlet)
tersebut tidak akan dapat bertahan dikondisi lapang. Aklimatisasi dilakukan untuk
mengadaptasikan tanaman hasil kultur jaringan terhadap lingkungan baru sebelum
ditanam dan dijadikan tanaman induk untuk produksi dan untuk mengetahui
kemampuan adaptasi tanaman dalam lingkungan tumbuh yang kurang aseptik.
Aklimatisasi adalah suatu proses dimana suatu tanaman beradaptasi sengan
perubahan lingkungan (Gunawan, 1985).
Pada tahap ini (aklimatisasi) diperlukan ketelitian karena tahap ini
merupakan tahap kritis dan seringkali menyebabkan kematian planlet. Kondisi
mikro planlet ketika dalam botol kultur adalah dengan kelembaban 90-100 %.
Beberapa sumber menuliskan penjelasan yang berkaitan dengan hal tersebut.Bibit
yang ditumbuhkan secara in vitro mempunyai kutikula yang tipis dan jaringan
pembuluh yang belum sempurna (Zulkarnaen, 2009).

39
 Kutikula yang tipis menyebabkan tanaman lebih cepat kehilangan air
dibanding dengan tanaman yang normal dan ini menyebabkan tanaman tersebut
sangat lemah daya bertahannya. Walaupun potensialnya lebih tinggi, tanaman
akantetap menjadi layu karena kehilangan air yang tidak terbatas. Kondisi tersebut
menyebabkan tanaman tidak dapat langsung ditanam dirumah kaca.
Mengacu pada penjelasan tersebut di atas maka planlet terlebih dahulu harus
ditanam didalam lingkungan yang memadai untuk pertumbuhannya kemudian
secara perlahan dilatih untuk terus dapat beradaptasi dengan lingkungan
sebenarnya di lapang. Lingkungan yang tersebut secara umum dapat diperoleh
dengan cara memindahkan planlet kedalam plastik atau boks kecil yang terang
dengan terus menurunkan kelembaban udaranya. Planlet-planlet tersebut
kemudian diaklimatisasi secara bertahap mengurangi kelembaban relatif
lingkungannya, yaitu dengan cara membuka penutup wadah plastik atau boks
secara bertahap pula (Yusnita, 2003).
Selain itu, tanaman juga memerlukan akar untuk menyerap hara agar dapat
tumbuh dengan baik sehingga dalam tahap aklimatisasi ini diperlukan suatu media
yang dapat mempermudah pertumbuhan akar dan dapat menyediakan hara yang
cukup bagi tanaman (planlet) yang diaklimatisasi tersebut. Media yang remah
akan memudahkan pertumbuhan akar dan melancarkan aliran air, mudah
mengikat air dan hara, tidak mengandung toksin atau racun, kandungan unsur
haranya tinggi, tahan lapuk dalam waktu yang cukup lama. Media aklimatisasi
bibit kultur jaringan krisan dan kentang di Indonesia saat ini adalah media arang
sekam atau media campuran arang sekam dan pupuk kandang (Marlin, 2009).

40
 BAB V
PENUTUP

5.1 Kesimpulan
Kompos adalah hasil penguraian parsial/ tidak lengkap dari campuran
bahan organik yang biasa didapatkan dari sampah rumah tangga yang proses
penguraiannya dipercepat dengan bantuan mikrob-mikrob lainnya yang bekerja
sebagai dekomposer. Kompos yang baik adalah kompos yang tidak berbau busuk
dan menyengat, gembur, berwarna coklat kehitam-hitaman, dan tidak mengotori
air jika dicampurkan kedalam air.

Pengenalan alat labor diperlukan sebelum kita melakukan kegiatan di

labor. Kita harus mengetahui nama fungsi dan cara kerja alat- alat laboratorium
agar tidak salah dalam mengoperasikannya. Pada praktikum bioteknologi ini kita
mempelajari tentang kultur jaringan pada tanaman, oleh karna itu kita harus
mengetahui alat laboratorium yang akan digunakan pada teknik kultur jaringan
pada tanaman.

Pada dasarnya kultur In Vitro adalah metode untuk mengisolasi bagian-

bagian tanaman seperti sel, jaringan atau organ yang ditumbuhkan di atas medium
secara aseptik dalam ruangan yang terkendali, sehingga bagian tanaman tersebut
dapat memperbanyak diri dan meregenerasi menjadi tanaman yang
lengkap. Totipotensi diartikan sebagai kemampuan dari sel untuk tumbuh dan
meregenerasi menjadi tanaman lengkap kembali . Tujuan dari kultur In Vitro
adalah untuk memperbanyak tanaman dengan waktu relatif singkat, sebagai
langkah dalam pemuliaan tanaman serta menghasilkan jenis tanaman yang kita
inginkan. Perbanyakan tanaman melalui kultur jaringan sangat dipengaruhi oleh
media, lingkungan dan zat pengatur tumbuh yang digunakan. Salah satu zat
pengatur tumbuh yang sering digunakan ialah auksin dan sitokinin yang
mempunyai fungsi untuk mengontrol pertumbuhan dan pembelahan
sel. Perbandingan auksin dan sitokinin merupakan sebuah aturan penting dalam
inisiasi tunas dan perpanjangan tunas.
Keuntungan kultur jaringan:

41
 5. Menghasilkan tanaman anakan yang serupa persis dengan tanaman induk
6. Menghasilkan tanaman anakan dengan lebih cepat
7. Menghasilkan tanaman langka yang susah tumbuh dari benih
8. Dapat mengendalikan kualitas yang dihasilkan
Kerugian kultur jaringan:
4. Tidak ada keragaman genetik pada tanaman anakan
5. Tidak dapat menghasilkan varietas baru
6. Akar tanaman dari metode seperti pencangkokan lebih lemah

Kegagalan pada teknik kultur jaringan sering disebabkan oleh adanya

kontaminan pada eksplan dan media kultur. Kontaminasi merupakan faktor
dominan yang mempengaruhi keberhasilan dalam teknik kultur jaringan terutama
pada eksplan. Sterilisasi dapat dilakukan dengan menggunakan larutan clorox
dengan konsentrasi 5% selama 3 menit kemudian dilakukan pembilasan berulang
menggunakan aquades steril.
Aklimatisasi merupakan kegiatan akhir teknik kultur jaringan. Aklimatisasi
adalah proses pemindahan planlet dari lingkungan yang terkontrol ke kondisi
lingkungan tidak terkendali, baik suhu, cahaya, dan kelembaban, serta tanaman
harus dapat hidup dalam kondisi autotrof, sehingga jika tanaman tidak
diaklimatisasi terlebih dahulu tanaman tersebut tidak akan dapat bertahan
dikondisi lapang. Kondisi mikro planlet ketika dalam botol kultur adalah dengan
kelembaban 90-100 %. Beberapa sumber menuliskan penjelasan yang berkaitan
dengan hal tersebut.Bibit yang ditumbuhkan secara in vitro mempunyai kutikula
yang tipis dan jaringan pembuluh yang belum sempurna .

42
 DAFTAR PUSTAKA

Amaliah, R. 2016. Pengaruh Berbagai Konsentrasi NAA dan BAP terhadap

Pertumbuhan Rumput Gajah Mini (Pennisetum purpureum cv. Mott)
secara In Vitro. Skripsi. Fakultas Peternakan. Universitas Hasanuddin
Makassar. Makassar.

Anas, Subarnas., (2011),Produksi Katarantin Melalui Kultur Jaringan,

Pandiangan, Dingse, Bandung.

Anitasari, F., R. Sarwitri dan A. Suprapto. 2015. Pengaruh Pupuk Organik Dan
Dolomit Pada Lahan Pantai Terhadap Pertumbuhan Dan Hasil Kedelai.
The 2nd University Research Coloquium, 2 (1) : 315 – 324.

Crawford. J.H. Composting of Agricultural Waste. In Biotechnology Applications

and Research, Paul N, Cheremisinoff and R. P.Ouellette (ed). p. 68-77.
FFTC (Food and Fertilizer Technology Center). 2003. Bioactivator do
Decompose Agricultural Waste. Soil and fertilizer PT 2003 – 23.

Dwiyani, R. 2015. Kultur Jaringan Tanaman. Pelawa Sari: Bali.

Fauzi, F., Mansyur., A. Husni. 2016. Pengaruh Penggunaan Media Murashige

dan Skoog (MS) dan Vitamin Terhadap Tekstur, Warna dan Berat Kalus
Rumput Gajah (Pannisetum purpureum) CV. Hawai Pasca Radiasi Sinar
Gamma pada Dosis Ld50 (In-Vitro). Skripsi. Fakultas Peternakan.
Universitas Ppadjadjaran. 22.

Fauziah, dkk. 2020. Lilium longiflorum Plant Growth with a combination of

Naphthylacetic Acid (NAA) and 6- Benzylaminopurine (BAP) In Vitro.
JOURNAL TROPICAL CROP SCIENCE AND TECHNOLOGY
Volume 1, Nomor 2, Oktober 2019. 78-92
Gangga, A. 2013. Penerapan Model Pembelajaran Project Based Learning dalam
Meningkatkan Motivasi dan Hasil Belajar. Artikel Prodi Pendidikan
Teknologi dan Kejuruan, FT: Tidak Diterbitkan.
Gunawan, L. W. 1988. Teknik Kultur Jaringan Tumbuhan. Bogor: Laboratorium
Kultur Jaringan Tanaman Pusat Antar Universitas Bioteknologi IPB –
Lembaga Sumberdaya Informasi IPB

Gunawan, W.L. 1985. Budidaya Tanaman. Penebar Swadaya. Jakarta.

43
Hendriyani, dkk. 2020. PENGARUH JENIS EKSPLAN DAN KOMBINASI
ZAT PENGATUR TUMBUH (ZPT) TERHADAP INDUKSI KALUS
Begonia bimaensis Undaharta & Ardaka SECARA IN VITRO. Buletin
Kebun Raya 23(1): 82–90
Indrianto, A. 2003. Kultur Jaringan Tumbuhan. Fakultas Biologi Universitas
Gadjahmada, Yogyakarta.
Jumin, H.B. 2002. Agronomi. Raja Grafindo Persada. Jakarta.
Khaniyah, N. 2012. Pertumbuhan Kalus Daun Dewa (Gynura procumbens (Lour)
Merr.) dengan Kombinasi 2,4- Dichorophenoxyacetic Acid dan Kinetin
secara In Vitro. Jurnal Biosaintifika, Vol: 4(2): 112-115

Marlin, Usman K J, Atra R. 2009. Penuntun Praktikum Teknik Kultur Jaringan

Tanaman.Departemen Pendidikan Nasional. Universitas Bengkulu,
Bengkulu.

Mirsadiq, Lucky. 2013. Laporan Praktikum Migrobiologi Pertanian. Universitas

Sebelas Maret. Surakarta

Nugroho, Arinto dan Heru Sugito. 2002. Pedoman Pelaksanaan Teknik Kultur
Jaringan. Jakarta: Penebar Swadaya.

Nurheti. 2010. Kultur Jaringan Tanaman Skala Rumah Tangga. Yogyakarta: Lily
Publisher.

Rahardja, N. 1995. Peranan Beberapa Zat Pengatur Tumbuh (ZPT) Tanaman Pada
Kultur In Vitro. Jurnal Sains dan Teknologi Indonesia.

Rahman ZA, Ramli A, Hosni H, Kamaruzaman R, Seman ZA, Othman AN,

Zainal Z, Uddain J, Subramaniam S (2015) Efficient plant regeneration
of Malaysian aromatic rice (Oryza sativa L.) through somatic
embryogenesis. Emirates J Food Agric 27: 857-863. doi:
10.9755/ejfa.2015-07-535

Rainiyati, Jasminarni, Neliyati dan Henny. 2011. Proses Penyediaan Bahan Setek
Kentang Asal Kultur Jaringan untuk Produksi Bibit Kentang Mini pada

44
 Kelompok Tani Kentang di Kecamatan Kayu Aro Kabupaten Kerinci
Provinsi Jambi. Jurnal Pengabdian pada Masyarakat, No. 52.

Rizqiani, N., F.A. Erlina & W.Y. Nasih. 2007. Pengaruh Dosis dan Frekuensi
Pemberian Pupuk Organik Cair Terhadap Pertumbuhan dan Hasil Buncis.
Jurnal Ilmu Tanah dan Lingkungan VII (1) : 43-45.

Rohendi, E. 2005. Lokakarya Sehari Pengelolaan Sampah Pasar DKI Jakarta.

Jakarta: UI-press.

Sarief, S. 1985. Ilmu Tanah Pertanian. Pustaka Buana. Bandung.

Simanjuntak P J. 1998. Pengantar Ekonomi Sumberdaya Manusia. Jakarta: FE

Suwirmen, dkk. 2020. PELATIHAN PENINGKATAN KOMPETENSI DAN
PROFESSIONAL GURU BIOLOGI DALAM KETERAMPILAN
PRAKTIK LABORATORIUM. LAPORAN PENGABDIAN
MASYARAKAT.
Syahid, S.F dan Natalini N.K. 2007. Induksi dan Regenrasi Klaus Keladi Tikus.
(Typonium flagelliforme Lodd.) Secara In Vitro. Jurnal Litri 13 (4): 142-
146.UI.

Waluyo, L., 2004, Mikrobiologi Umum, Malang, UMM press

Wati, T., Astarini. I. A, Pharmawati. M, and Hendriyani. E. 2020. Propagation Of

Begonia Bimaensis Undaharta & Ardaka Using Tissue Culture
Technique. Journal of Biological Sciences 7(1): 112-122. DOI:
10.24843/metamorfosa.2020.v07.i01.p1 5

Yusnita. 2003. Kultur Jaringan Cara Memperbanyak Tanaman Secara Efisien.

Agromedia Pustaka. Jakarta.

Yusnita. 2003. Kultur Jaringan. Cara Memperbanyak Tanaman Secara Efesien.

Agro Media Pustaka. Jakarta.

Yusnita. 2012. Pemuliaan Tanaman Untuk Menghasilkan Anggrek Hibrida

Unggul. Lembaga Penelitian Universitas Lampung. Lampung.

Zulkarnain, H. 2009. Kultur Jaringan Tanaman. Solusi Perbanyakan Tanaman

Budidaya. PT Bumi Aksara. Jakarta.

45
Zulkarnain. 2009. Kultur Jaringan. Solusi Perbanyakan Tanaman Budidaya. Bumi
Aksara. Jakarta. 250 halaman.

46
 LAMPIRAN

a. Rumus Larutan Stok

� �
Kebutuhan Bahan Kimia (gram) = × Kepekatan
�

� �
Kebutuhan Larutan Stok =

b. Komposisi Media MS

Table 5 kebutuhan media MS

c. Dokumentasi Praktikum

47
 Jamur Bakteri

Browning Media mengkerut

Media kering diserap oleh pisang Kalus tumbuh pada lidah mertua

48
 c. Kesan dan Pesan Asprak

Untuk Kak Nurhidayah Safitri :

 Kesan : selama praktikum sama kakak dalam mata kuliah pengantar
bioteknologi pertanian, kakak mengajarnya sangat baik dan sedikit tegas .
Mungkin itu ciri khas kakak dalam mengajar ya. Terima kasih kak atas
ilmu yang telah kakak berikan kepada kami semua semoga dapat
bermanfaat bagi kami dan jadi amalan baik buat kakak seterusnya.
 Pesan : pesan dari saya buat kak Nurhidayah Safitri kalo bisa ngajarnya
jangan galak-galak ya kak, semoga kakak cepet lulus dan sukses selalu kak
dan mudah mudahan dengan kemurahan hati kakak nilai saya aman kak.
Untuk Kak Olivia Shahertian :
 Kesan : kesan yang saya dapat selama praktikum dengan kakak di mata
kuliah pengantar bioteknologi pertanian ini ialah kakak itu orangnya baik,
jarang marah, dan selalu pake masker dalam menjelaskan materi
praktikum yang membuat kami jadi kurang terdengar dengan jelas suara
kakak. Walaupun demikian ilmu yang kami dapatkan dari kakak itu
bermanfaat bagi kami dan menjadi amalan baik buat kakak. Terima kasih
kak
 Pesan : pesan saya buat kak Olivia Shahertian kalo bisa dalam
menjelaskan materi masker kakak dibuka ya biar kami bisa dengar dengan
jelas kak, dan semoga kakak cepet lulus dan sukses selalu kak.

49
50