Laporan Rotasi Mikrobiologi Revisi

LAPORAN KEGIATAN PPDH
ROTASI DIAGNOSA LABORATORIK MIKROBIOLOGI

yang dilaksanakan di
LABORATORIUM MIKROBIOLOGI DAN IMUNOLOGI VETERINER
FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN
UNIVERSITAS BRAWIJAYA MALANG
Oleh :
GELOMBANG X / KELOMPOK 6
Heppy Fani Krismaningrum, S.KH 210130100111042
Fadhilla Putri Wilujeng, S.KH 210130100111043
Ikrar Hakiki, S.KH 210130100111058
David Christian Pratama, S.KH 210130100111083
PROGRAM PENDIDIKAN PROFESI DOKTER HEWAN

UNIVERSITAS BRAWIJAYA
MALANG
2022
LEMBAR PENGESAHAN
LAPORAN KEGIATAN PPDH
ROTASI DIAGNOSA LABORATORIK
yang dilaksanakan di
LABORATORIUM MIKROBIOLOGI DAN IMUNOLOGI VETERINER
UNIVERSITAS BRAWIJAYA MALANG
Malang, 31 Januari – 18 Februari 2022
Oleh :
Heppy Fani Krismaningrum, S.KH 210130100111042
Fadhilla Putri Wilujeng, S.KH 210130100111043
Ikrar Hakiki, S.KH 210130100111058
David Christian Pratama, S.KH 210130100111083
Menyetujui,
Komisi Penguji
Pembimbing Penguji
drh. Indah Amalia Sari, M.Si drh. Gegana Wimaldy Airlangga

NIP. 19870925 201903 2 011 NIP. 19950224 201903 1 008
Mengetahui,
Dekan Fakultas Kedokteran Hewan
Universitas Brawijaya
drh. Dyah Ayu Oktavianie A. P., M.Biotech

NIP. 19841026 200812 2 004
ii
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur kehadirat Allah SWT yang telah memberikan rahmat dan
hidayahNya sehingga penulis dapat menyelesaikan Laporan Kegiatan PPDH Rotasi
Diagnostik Laboratorik yang dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi dan Imunologi
Veteriner dengan baik. Penulis mengucapkan terima kasih kepada segenap pihak yang
telah membantu secara langsung maupun tidak langsung dalam penyusunan laporan ini.
Dalam kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih terutama kepada :
1. drh. Dyah Ayu Oktavianie A. P., M.Biotech sebagai Dekan Fakultas Kedokteran
Hewan Universitas Brawijaya Malang.
2. drh. Nofan Rickyawan, M.Sc sebagai Ketua Program Studi Profesi Dokter Hewan
Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Brawijaya Malang.
3. drh. Sruti Listra Adrenalin, M.Sc sebagai Koordinator Rotasi Diagnostik
Laboratorik di Laboratorium Mikrobiologi dan Imunologi Veteriner Fakultas
Kedokteran Hewan Universitas Brawijaya Malang.
4. drh. Indah Amalia Amri, M.Si sebagai dosen pembimbing sekaligus penguji 1
dalam Rotasi Diagnostik Laboratorik di Laboratorium Mikrobiologi dan
Imunologi Veteriner Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Brawijaya Malang.
5. drh. Gegana Wimaldy Airlangga sebagai penguji 2 dalam Rotasi Diagnostik
Laboratorik di Laboratorium Mikrobiologi dan Imunologi Veteriner Fakultas
Kedokteran Hewan Universitas Brawijaya Malang.
6. Segenap tim dokter hewan dan staf Laboratorium Mikrobiologi dan Imunologi
Veteriner Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Brawijaya Malang.
7. Teman-teman kelompok 6“Rukun Warga 6” dan juga kolega seperjuangan PPDH
FKH UB Gelombang X “Maximus”.
8. Semua pihak yang telah membantu dalam penyelesaian laporan ini yang tidak
dapat penulis sebutkan satu persatu.
Akhir kata, penulis berharap semoga Allah SWT membalas segala kebaikan serta
ketulusan yang telah diberikan. Semoga laporan ini dapat memberikan manfaat dan
menambah ilmu pengetahuan bukan hanya untuk penulis namun juga untuk pembaca lain.
Malang, 14 Februari 2022

Penulis
iii
BAGIAN I
MIKROBIOLOGI
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL..........................................................................................................i
LEMBAR PENGESAHAN..............................................................................................ii
KATA PENGANTAR......................................................................................................iii
DAFTAR ISI.....................................................................................................................v
DAFTAR TABEL...........................................................................................................vii
DAFTAR GAMBAR.....................................................................................................viii
BAB 1 PENDAHULUAN.................................................................................................1
1.1 Latar Belakang.............................................................................................................1
1.2 Tujuan..........................................................................................................................2
1.3 Manfaat........................................................................................................................3
BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA........................................................................................4
2.1 Mastitis........................................................................................................................4
2.2 Isolasi dan Identifikasi Bakteri....................................................................................7
2.2.1 Brain Heart Infusion Broth (BHIB)..............................................................7
2.2.2 Nutrient Agar Plate (NAP)...........................................................................7
2.2.3 Blood Agar Plate (BAP)...............................................................................7
2.2.4 MacConkey Agar Plate (MCA)....................................................................8
2.2.5 Mannitol Salt Agar (MSA)...........................................................................8
2.2.6 Bismuth Sulphite Agar (BSA).......................................................................9
2.2.7 Eosin Methylene Blue Agar (EMBA)...........................................................9
2.3 Uji Reduksi Methylene Blue......................................................................................10
2.4 Uji Solubilitas KOH..................................................................................................10
2.5 Pewarnaan Gram........................................................................................................10
BAB 3 METODOLOGI..................................................................................................12
3.1 Lokasi dan Waktu Pelaksanaan..................................................................................12
3.2 Alat dan Bahan..........................................................................................................12
3.2.1 Alat.............................................................................................................12
3.2.2 Bahan..........................................................................................................12
3.3 Metode Pemeriksaan..................................................................................................12
v
3.3.1 Pengambilan Sampel...................................................................................12
3.3.2 Pemeriksaan CMT......................................................................................12
3.3.3 Pembuatan Media.......................................................................................13
3.3.3.1 Brain Heart Infusion Broth (BHIB)............................................13
3.3.3.2 Nutrient Agar Plate (NAP).........................................................13
3.3.3.3 Blood Agar Plate (BAP).............................................................13
3.3.3.4 MacConkey Agar (MCA)............................................................13
3.3.3.5 Mannitol Salt Agar (MSA).........................................................13
3.3.3.6 Bismuth Sulphite Agar (BSA).....................................................13
3.3.3.7 Eosin Methylene Blue Agar (EMBA).........................................14
3.3.4 Isolasi dan Identifikasi Bakteri...................................................................14
3.3.5 Uji Reduksi Methylene Blue.......................................................................15
3.3.6 Uji Solubilitas KOH....................................................................................15
BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN...........................................................................16
4.1 Hasil...........................................................................................................................16
4.1.1 Uji CMT.....................................................................................................16
4.1.2 Organoleptik...............................................................................................17
4.2 Pembahasan...............................................................................................................18
4.2.1 Sinyalemen.................................................................................................18
4.2.2 Anamnesa...................................................................................................19
4.2.3 Observasi....................................................................................................19
4.2.4 Pembiakan Bakteri pada Media BHIB dan Pewarnaan Gram.....................20
4.2.5 Uji Reduksi Methylene Blue.......................................................................21
4.2.6 Penanaman pada Media Umum..................................................................23
4.2.7 Penanaman pada Media Selektif.................................................................25
4.2.8 Uji Solubilitas KOH....................................................................................28
BAB 5 PENUTUP...........................................................................................................30
5.1 Kesimpulan................................................................................................................30
5.2 Saran..........................................................................................................................30
DAFTAR PUSTAKA......................................................................................................31
vi
DAFTAR TABEL
Tabel 4.1 Hasil Pemeriksaan Uji CMT pada Sampel Susu Sapi.....................................16
Tabel 4.2 Hasil Pemeriksaan Uji Organoleptik pada Sampel Susu Sapi.........................17
Tabel 4.3 Hasil Uji Reduksi Methylene Blue pada Sampel Susu...................................22
Tabel 4.4 Hasil Pewarnaan Gram pada Isolat Bakteri dari Media NAP.........................24
vii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1 Media Mannitol Salt Agar (MSA).................................................................9
Gambar 2.2 Media Eosin Methylene Blue Agar (EMBA)...............................................10
Gambar 4.1 Hasil Pembiakan Bakteri pada Media BHIB...............................................20
Gambar 4.2 Hasil Pewarnaan Gram pada Isolat Bakteri dari Media BHIB....................21
Gambar 4.3 Hasil Penanaman Bakteri pada Media NAP................................................23
Gambar 4.4 Hasil Penanaman Bakteri pada Media BAP.................................................25
Gambar 4.5 Hasil Penanaman Bakteri pada Media MCA...............................................26
Gambar 4.6 Hasil Penanaman Bakteri pada Media MSA................................................27
Gambar 4.7 Hasil Penanaman Bakteri pada Media BSA.................................................27
Gambar 4.8 Hasil Penanaman Bakteri pada Media EMBA.............................................28
Gambar 4.9 Hasil Uji Solubilitas KOH...........................................................................29
viii
BAB 1 PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Susu merupakan cairan putih yang dihasilkan oleh hewan ternak mamalia dan
diperoleh dengan cara pemerahan yang benar dan tanpa ditambahkan zat lainnya. Cairan
ini dihasilkan oleh sekresi kelenjar ambing hewan ternak mamalia yang sehat, umumnya
yakni sapi perah peranakan Friesian Holstein. Sebagai salah satu sumber protein hewani
yang penting, susu dibutuhkan untuk kesehatan dan pertumbuhan tubuh karena
mengandung nilai gizi berkualitas tinggi seperti protein, lemak, karbohidrat, mineral, dan
vitamin. Semua zat tersebut akan dicerna dan diabsorbsi secara sempurna oleh tubuh.
Oleh karena itu kualitas susu sangat penting diperhatikan seperti pengawasan, pengujian
dan pengolahan susu terutama sebelum diedarkan kepada masyarakat luas (Diastari dan
Agustina, 2013).
Salah satu faktor yang mempengaruhi kualitas susu adalah status kesehatan dari sapi
perah. Status kesehatan sapi perah yang buruk dapat menyebabkan penurunan produksi
susu juga dapat terjadi perubahan kandungan susu oleh bakteri kontaminasi hingga
patogen. Selain itu, buruknya manajemen pemeliharaan dapat meningkatkan ancaman
penyakit yang mungkin terjadi pada sapi peah. Penyakit yang sangat sering terjadi pada
sapi perah dan menyebabkan kerugian ekonomi bagi peternak adalah penyakit mastitis.
Mastitis adalah peradangan pada jaringan interna kelenjar susu atau ambing pada sapi
perah yang ditandai dengan perubahan fisik maupun kimia susu dengan atau tanpa disertai
patologis pada kelenjar mammae. Penyakit ini disebabkan oleh gangguan fisiologis,
trauma dan infeksi bakteri (Pratomo dkk, 2011). GrAhn et al. (2004) menyebutkan contoh
bakteri yang dapat menyebabkan mastitis pada sapi perah di antaranya yaitu
Streptococcus sp., Staphylococcus aureus, Escherichia coli (E. coli), E. feundeii,
Aerobacter aerugenes, dan Klebsiella pneumoniae. Bakteri-bakteri ini akan merusak sel-
sel alveoli pada ambing. Selain menginfeksi, bakteri ini akan merusak komposisi susu
sehingga dapat terjadi penurunan kualitas susu.
Di Indonesia, kasus mastitis subklinis lebih banyak terjadi daripada kasus mastitiss
klinis. Mastitis subklinis yang banyak menyerang pada sapi perah tidak menunjukkan
gejala klinis yang jelas sehingga sangat sulit untuk diketahui bahwa sapi tersebut
menderita mastitis. Dalam hal ini pemeriksaan penunjang dan laboratorium sangat
penting untuk mendeteksi dan diagnosa penyakit mastitis. Salah satu pemeriksaan
1
penunjang yang dapat dilakukan untuk menentukan diagnosa awal mastitis di lapangan
adalah uji California Mastitis Test (CMT). Uji ini merupakan satu-satunya screening test
atau uji cepat untuk mastitis subklinis. Prinsip uji CMT yaitu untuk mengetahui reaksi
antara sel somatik dalam susu dengan reagen CMT sehingga dapat diperkirakan tingkat
keparahan mastitis yang ditandai dengan terjadinya aglutinasi sehingga larutan susu dan
reagen CMT menjadi kental (Pratomo dkk, 2011). Selain itu dapat dilakukan pengujian
laboratorium lanjutan berupa isolasi dan identifikasi bakteri penyebab mastitis. Pengujian
ini dilakukan untuk mengetahui bakteri spesifik sehingga dapat ditetapkan terapi
antibiotik yang tepat dalam pengobatan. Rotasi PPDH Mikrobiologi dan Imunologi
Veteriner ini bertujuan untuk melakukan pemeriksaan, isolasi dan identifikasi yang
menyebabkan mastitis serta pengobatan yang tepat berdasarkan sampel susu mastitis yang
didapatkan dari peternakan lokal di Dusun Princi, Desa Gading Kulon, Kecamatan Dau,
Malang dan Desa Kungkuk, Batu.
1.2 Tujuan
Adapun tujuan dari dilaksanakannya kegiatan PPDH Rotasi Diagnostik Laboaratorik
di Laboratorium Mikrobiologi dan Imunologi Veteriner Fakultas Kedokteran Hewan
Universitas Brawijaya Malang ini adalah sebagai berikut :
1. Mengetahui interpretasi uji California Mastitis Test (CMT) pada sampel susu dari sapi
perah.
2. Mengetahui mengetahui bakteri penyebab mastitis pada sapi perah yang diambil dari
sampel susu sapi perah.
2
1.3 Manfaat
Manfaat dari dilaksanakannya kegiatan PPDH Rotasi Diagnostik Laboaratorik di
Laboratorium Mikrobiologi dan Imunologi Veteriner Fakultas Kedokteran Hewan
Universitas Brawijaya Malang ini adalah mahasiswa koasistensi mampu memahami dan
menerapkan langkah-langkah pemeriksaan uji mikrobiologi dalam mendiagnosa dan
identifikasi bakteri penyebab mastitis pada sapi perah.
3
BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Mastitis
Penyakit radang pada kelenjar susu yang dikenal sebagai mastitis, merupakan
masalah utama dalam tata laksana usaha peternakan sapi perah yang sangat merugikan.
Mastits adalah penyakit yang merupakan masalah di seluruh dunia yang mengakibatkan
kerugian besar pada peternakan sapi perah akibat kualitas susu yang buruk, penurunan
produksi susu, peningkatan biaya obat dan pelayanan dokter hewan, tingginya jumlah
ternak yang diafkir sebelum waktunya dan kadang-kadang terjadi kematian akibat
penyakit tersebut (Kumar et al., 2010).
Penyebab utama mastitis pada sapi adalah bakteri Str.agalactiae, Str.dysgalactiae,
S.uberis, Str zooepidermicus. Bakteri lain yang dapat menyebabkan mastitis adalah
Escherichia coli (E.coli), E.feundeii, Aerobacter aerugenes dan Klebsiella pneumoniae
(Subronto, 2008). Hasil penelitian GrAhn YT et.al (2004), menunjukkan sapi perah yang
mendapatkan infeksi Streptococcus spp., S. aureus, A. pyogenes, E. coli, dan Klebsiella
spp. menunjukkan penurunan produksi susu yang paling tinggi. Selain itu terjadi
penurunan kualitas hasil olahan susu,peningkatan biaya perawatan dan pengobatan serta
pengafkiran ternak lebih awal (Shim et al., 2004). Mastitis adalah penyakit yang paling
menghabiskan biaya dan mempengaruhi produksi sapi perah (Halasa et al., 2007).
Mastitis ada dua jenis yaitu mastitis dengan gejala klinis yang jelas (mastitis klinis)
dan yang gejala klinisnya tidak nampak (subklinis). Mastitis subklinis adalah mastitis
yang tidak menampakkan perubahan fisik pada ambing dan susu yang dihasilkan, tetapi
menyebabkan penurunan produksi susu, ditemukannya mikroorganisme patogen dan
terjadi perubahan komposisi susu. Kasus mastitis subklinis pada sapi perah di Indonesia
sangat tinggi sampai akhir 2006 mencapai 75-83% menyebabkan kerugian yang besar
(Sudarwanto dkk, 2006). Demikian juga menurut Andersen et al. (2010), mastitis
subklinis lebih umum terjadi daripada mastitis klinis. Kerugian terjadi akibat adanya
kerusakan pada sel-sel epitel penghasil air susu dan jaringan ikat diantara sel-sel tersebut
yang menyebabkan kapasitas produksi terus menurun secara permanen.
Dalam menghadapi mastitis, umumnya peternak menggunakan antibiotik. Namun
dari beberapa laporan diketahui bahwa penggunaan antibiotik yang kurang tepat pada sapi
perah menimbulkan residu dalam air susu yang dikonsumsi manusia, terjadinya reaksi
alergi dan adanya kasus resistensi terhadap antibiotik dan menurunkan kualitas produk
4
olahan susu. Menurut Sudarwanto dkk (1992), di wilayah Jakarta, Bogor dan Bandung
menunjukkan bahwa 32,52 persen susu pasteurisasi posistif mengandung residu antibiotik
dalam jumlah yang cukup tinggi.
Diagnosa dalam menentukan mastitis perlu dilakukan pemeriksaan penunjang berupa
uji California Mastitis Test (CMT) dan perhitungan jumlah sel somatik dalam susu.
Pemeriksaan awal dapat dilakukan menggunakan uji CMT, yaitu dengan mengambil
sampel susu langsung dari puting dan ditambahkan reagen CMT. CMT memiliki
sensitivitas sebesar 96,7% dan memiliki spesifisitas sebesar 100%, hal tersebut
dikarenakan reagen CMT memiliki kandungan anionic surfaktan (deterjen) yang
digunakan untuk mendeteksi peningkatan sel somatic dalam susu mastitis. Susu yang
direaksikan dengan CMT akan terjadi perubahan pada kekentalan susu dimana akan
ditentukan berdasarkan skoring, (-) tidak ada pengendapan atau susu berkualitas baik, (+)
terdapat sedikit pengendapan pada susu artinya susu berkualitas cukup baik, (++) terdapat
pengendapan yang jelas namun gel belum terbentuk artinya susu masih cukup baik, (+++)
campuran menebal dan mulai terbentuk gel artinya berkualitas jelek, (++++) gel sudah
terbentuk menyebabkan permukaan menjadi cembung artinya susu berkualitas jelek (Nisa
dkk, 2019).
Pengujian CMT merupakan pengujian awal mastitis subklinis sebelum dilakukan
isolasi dan identifikasi bakteri lebih lanjut di laboratorium. Sampel susu yang dibutuhkan
adalah sampel susu dari kuartir yang dicurigai mengalami mastitis. Pengujian
laboratorium dimulai dengan melakukan isolasi bakteri dari sampel positif mastitis yang
kemudian dilakukan kultur bakteri pada media. Hasil kultur bakteri kemudian dilakukan
pengamatan secara mikroskopis dengan pewarna gram. Identifikasi koloni bakteri
berdasarkan karakteristik koloni dan dilanjutkan dengan media selektif dan diferensial
yang bertujuan untuk mengidentifikasi bakteri lebih spesifik. Media yang dapat
digunakan adalah Manitol Salt Agar dan Blood Agar untuk mengisolasi bakteri
Staphylococcus aureus. Hasil dari biakan media tersebut dilanjutkan dengan pengujian
biokimia berupa uji katalase dan koagulase. Uji katalase untuk membedakan antara
Staphylococcus spp. dengan Streptococcus spp., dilanjutkan dengan uji koagulase untuk
mengetahui ada tidaknya ikatan koagulase pada bakteri Staphylococcus spp. Hasil dari
isolasi dan identifikasi bakteri akan didapatkan bakteri spesifik yang menginfeksi mastitis
5
subklinis sehingga dapat diketahui obat yang efektif terhadap bakteri penyebab mastitis
(Manu dkk, 2019).
Masalah lain dalam penanganan mastitis dengan antibiotik adalah penggunaan
antibiotik secara luas di peternakan sapi perah telah menyebabkan terjadinya resistensi
bakteri terhadap antibiotik (Wahyuni dkk, 2005). Menurut hasil penelitian Aslantas dan
Demir (2016), bakteri penyebab mastitis seperti Staphylococcus aureus resisten terutama
pada antibiotika golongan β-lactam (contohnya antara lain penisilin dan sefalosporin).
Selain itu juga resisten terhadap antibiotika golongan tetrasiklin dan eritromisin dalam
tingkatan yang lebih rendah.
Pengobatan dari mastitis dapat dilakukan pemberian antibiotik, pengobatan dengan
antibiotik perlu digunakan dengan bijaksana, dikarenakan dapat meningkatkan residu
antibiotik dalam susu dan memiliki potensi terhadap resistensi antibiotik. Pengobatan
antibiotik sebaiknya diberikan dengan mengetahui bakteri spesifik penyebab mastitis.
Penggunaan antibiotik spektrum luas memiliki keberhasilan yang rendah dan kurang
efektif, selain itu juga memiliki resiko menyebabkan resistensi terhadap jenis antibiotik
tertentu. Pengobatan terhadap mastitis lebih efektif dilakukan saat masa kering dimana
dapat menurunkan bakteri dan dapat meningkatkan hasil produksi susu selanjutnya.
Pemberian antibiotik pada masa kering memiliki tingkat keberhasilan 80 – 90%, dosis
yang diberikan dalam pengobatan dapat lebih tinggi dan aman karena waktu retensi obat
dalam ambing menjadi lebih lama. Pemberian obat pada masa kering juga menurunkan
resiko kontaminasi antibiotik dalam susu karena tidak dilakukan pemerahan. Pengobatan
pada masa kering ini merupakan cara terbaik dalam mengobati mastitis yang sulit
dilakukan saat masa laktasi (Nurhayati dan Martindah, 2015).
Pengendalian dan pencegahan terhadap mastitis memiliki prinsip menurunkan
kemungkinan paparan agen pathogen terhadap puting atau meningkatkan daya tahan
tubuh ternak. Ambing pada dasarnya memiliki pertahanan untuk menjaga susu tetap
dalam keadaan steril, namun memiliki titik terendah saat dilakukan pemerahan
dikarenakan otot sphincter puting akan terbuka selama 2 -3 jam setelah pemerahan,
sementara sel darah putih jumlahnya sangat minim dan antibodi serta enzim habis ikut
terperah. Upaya pengendalian dapat dilakukan dengan selalu memonitoring jumlah sel
somatis pada susu untuk mengetahui mastitis subklinis secara dini. Teat dipping dengan
menggunakan antiseptic setelah pemerahan untuk mengurangi infeksi baru
6
intramammary pada sapi perah. Dipping peralatan pemerahan, desinfeksi kandang juga
dapat menekan adanya infeksi agen pathogen penyebab mastitis. Antiseptic yang dapat
digunakan untuk teat dipping antara lain adalah alcohol 70%, kaporit 60mg/L dan
iodophor 10ml/L memiliki kekuatan sama besar untuk melawan S.aureus daripada
penggunaan fenol selama 10 menit (Nurhayati dan Martindah, 2015).
2.2 Isolasi dan Identifikasi Bakteri
2.2.1 Brain Heart Infusion Broth (BHIB)
Brain Heart Infusion Broth (BHIB) adalah medium cair untuk berbagai
mikroorganisme baik yang aerob dan anaerob dari bakteri, jamur, dan ragi. Medium ini
mendukung pertumbuhan mikroorganisme. Nitrogen, vitamin, dan sumber karbon
disediakan oleh Brain-Heart Infusion dan enzymatic digest dari gelatin di BHI Broth.
Dextrose sebagai sumber karbohidrat, dan natrium klorida yang mempertahankan
lingkungan osmotik serta disodium phosphate sebagai agen penyangga di media ini.
Media BHIB mengandung glukosa, garam NaCl, enzim digesti dari jaringan hewan dan
infusi otak dan jantung yang menyediakan asam amino, nitrogen, karbon, vitamin, dan
mineral untuk pertumbuhan mikroorganisme yang mana ditandai dengan kekeruhan
apabila terjadi pertumbuhan mikroorganisme pada media yang telah diinkubasi pada suhu
37oC selama 24-48 jam (Liofilchem®, 2017).
2.2.2 Nutrient Agar Plate (NAP)
Nutrient Agar (NA) adalah salah satu contoh media yang sering digunakan untuk
menumbuhkan dan mengembangbiakkan bakteri. Sementara itu, Potato Dextrose Agar
(PDA) merupakan media yang sering digunakan untuk menumbuhkan dan
mengembangbiakkan yeast dan kapang. Nutrient Agar (NA) merupakan media biakan
yang dibuat dari ekstrak beef, pepton, dan agar. Menurut Radji (2011), karbohidrat sangat
dibutuhkan oleh bakteri karena karbohidrat merupakan substrat utama untuk metabolisme
bakteri. Hampir setengah berat kering suatu bakteri merupakan unsur karbon. Karbon
dapat ditemukan dalam senyawa karbohidrat, sehingga karbohidrat sangat berperan
penting untuk mendukung pertumbuhan bakteri.
2.2.3 Blood Agar Plate (BAP)
Blood Agar Plate (BAP) adalah media yang diperkaya yang digunakan untuk
menumbuhkan beberapa macam koloni bakteri dan untuk membedakan bakteri
berdasarkan sifat hemolitik bakteri tersebut. Blood Agar Plate (BAP) merupakan media
7
diferensial padat dan juga media yang diperkaya dengan darah domba (5-10%) yang
mengandung banyak nutrien untuk pertumbuhan mikroorganisme. Media BAP digunakan
untuk membedakan bakteri patogenik berdasarkan kemampuannya untuk hemolisis sel
darah merah atau eritrosit dengan interpretasi tiga tipe hemolisis yaitu α yang merupakan
hemolisis parsial, β untuk 10 hemolisis sempurna, dan γ yang non-hemolisis (Turista dan
Puspitasari, 2019).
2.2.4 MacConkey Agar Plate (MCA)
Media MacConkey Agar adalah media selektif dan media diferensial yang
digunakan untuk mengisolasi bakteri batang gram negatif berdasarkan kemampuan
bakteri memfermentasi laktosa atau tidak. Media MacConkey Agar digunakan terutama
untuk famili Enterobacteriaceae dan genus Pseudomonas. Media MacConkey Agar
dikembangkan oleh seorang bacteriologist yang bernama Alfred Theodore MacConkey.
Pepton : untuk menyediakan nitrogen, vitamin, mineral dan asam amino esensial untuk
pertumbuhan bakteri. Laktosa untuk menyediakan karbon dan energi serta untuk
membedakan bakteri yang bisa memfermentasi laktosa dengan bakteri yang tidak
memfermentasi laktosa. Bile salts (garam empedu): sebagai agen selektif yang berfungsi
menghambat pertumbuhan bakteri gram positif. Kristal Violet sebagai agen selektif yang
berfungsi menghambat pertumbuhan bakteri gram positif.. Natrium Klorida untuk
menyediakan elektrolit dan keseimbangan osmotik. Neutral red : sebagai indikator pH,
akan berwarna merah jika pH di bawah ini 6,8 (Holderman et al., 2017).
2.2.5 Mannitol Salt Agar (MSA)
Manitol Salt Agar (MSA) adalah media selektif yang digunakan untuk isolasi,
enumerasi dan diferensiasi staphylococcus dari sampel klinis, makanan, antiseptik. Media
ini adalah media agar selektif dan diferensial. Bakteri Staphylococcus aureus akan
membentuk koloni kuning atau putih dikelilingi dengan zona kuning (Liofilchem®,
2016). Warna kuning tersebut disebabkan karena fermentasi mannitol yang disertai
dengan pembentukan asam dilihat dari indikator phenol red (Dewi, 2013). Media akan
memilih organisme yang dapat hidup di daerah dengan konsentrasi garam yang tinggi
(natrium klorida) dan fermentasi mannitol, yang ditunjukkan dengan indicator pH yang
berubah menjadi kuning (phenol red).
8
Gambar 2.1 Media Mannitol Salt Agar (MSA) (Leboffe dan Pierce, 2011).
2.2.6 Bismuth Sulphite Agar (BSA)

Bismuth sulfite agar (BSA) adalah media selektif diferensial yang digunakan
untuk isolasi spesies Salmonella dari berbagai sampel termasuk makanan dan specimen
klinis. Komponan pertumbuhan media BSA antara lain: pepton, ekstrak daging sapi, dan
dekstrose. Bismuth sulfite dan brilliant blue adalah inhibitor umum yang menghambat
pertumbuhan Sebagian besar bakteri yang memungkinkan bakteri Salmonella unutk
tumbuh. Kandungan besi dimanfaatkan spesies salmonella untuk memproduksi H2S dan
pembentukan besi sulfida, sebuah bentukan yang sulit untuk larut dan diendapkan.
Salmonella akan berwarna coklat kehitaman dan akan berdifusi ke media sekitarnya
(Murray et al., 1999).
2.2.7 Eosin Methylene Blue Agar (EMBA)
Eosin Methylen Blue Agar (EMBA) adalah media mikrobiologi diferensial, yang
dapat menghambat pertumbuhan dari bakteri gram positif dan dapat memberikan
indikator warna yang membedakan antara organisme yang memfermentasikan laktosa
(Misalnya, E. coli) dan yang tidak dapat memfermentasikan laktosa misalnya Salmonella,
Shigella. Media ini penting di laboraturium medis untuk dapat membedakan bakteri
pathogen gram negatif dalam waktu singkat (Indriati et al., 2019). Bakteri yang tidak bisa
memfermentasi laktosa atau sukrosa tetap berwarna normal sesuai dengan bakteri tersebut
atau mengambil warna dari medium (Leboffe dan Pierce, 2011).
9
Gambar 2.2 Media Eosin Methylene Blue Agar (EMBA) (Leboffe dan Pierce, 2011).
2.3 Uji Reduksi Methylene Blue

Pengujian reduktase menggunakan larutan pewarna biru metilen. Pengujian ini
menggunakan konsentrasi biru metilen 10 μl, 20 μl, 30 μl, 40 μl, 50 μl, dan 250 μl dalam
10,250 μl campuran air susu. Memasukkan campuran susu sebelum maupun sesudah
pemanasan dengan larutan pewarna biru metilen sesuai konsentrasi dalam tabung reaksi
secara perlahan dan menghindari pembentukan gelembung udara. menutup tabung reaksi
dan mencampurkan larutan sampai memperoleh warna yang merata dengan cara
membolak-balik tabung, kemudian menginkubasi tabung reaksi dalam penangas air suhu
37°C. Selanjutnya mengamati perubahan warna yang terjadi setiap setengah jam dan
mencatat berapa lama waktu yang dibutuhkan untuk terjadinya perubahan warna
(Widodo, 2003).
2.4 Uji Solubilitas KOH
Seperti reaksi pewarnaan gram, uji KOH didasarkan pada perbedaan kimia dinding
sel bakteri. Dengan adanya kalium hidroksida, dinding sel gram negatif dipecah. KOH
dengan mudah melarutkan lapisan tipis peptidoglikan dinding sel bakteri gram negatif,
melisiskan sel dan melepaskan isinya, termasuk DNA. Akibatnya, bahan kromosom
kental dilepaskan yang menyebabkan suspense bakteri menjadi kental dan berserabut.
Sedangkan bakteri gram positif tidak terpengaruh oleh KOH, karena memiliki lapisan
peptidoglikan yang lebih tebal pada dinding selnya. Dengan demikian, sel-sel tidak
dilisiskan, DNA tidak dilepaskan dan tidak ada viskositas yang diamati (Sagar, 2019).
2.5 Pewarnaan Gram
Pewarnaan Gram adalah prosedur pewarnaan diferensial yang dapat membedakan
jenis bakteri berdasarkan reaksi yang timbul pada struktur dinding sel selama prosedur
pewarnaan. Pewarnaan ini menggunakan gentian violet sebagai zat pewarna, iodin
10
sebagai mordant, dan etanol untuk peluntur. Pemeriksan Gram diindikasikan untuk
memperoleh karakteristik dan klasifikasi bakteri yang berasal dari spesimen, yang akan
digunakan untuk pengambilan keputusan klinis lebih lanjut. Bakteri Gram positif
memiliki lapisan peptidoglikan tebal sehingga akan berwarna biru sampai ungu.
Sedangkan bakteri Gram negatif memiliki lapisan peptidoglikan tipis sehingga akan
berwarna merah sampai merah muda. Pewarnaan Gram tidak memiliki kontraindikasi dan
komplikasi yang spesifik. Kontraindikasi lebih berkaitan dengan kontraindikasi proses
pengambilan specimen (Moyes et al., 2009).
11
BAB 3 METODOLOGI
3.1 Lokasi dan Waktu Pelaksanaan
Pemeriksaan sampel susu mastitis dilakukan pada tanggal 1 – 11 Februari 2022 di
Laboratorium Mikrobiologi dan Imunologi Veteriner, Fakultas Kedokteran Hewan,
Universitas Brawijaya Malang.
3.2 Alat dan Bahan
3.2.1 Alat
Alat yang digunakan untuk pemeriksaan California Mastitis Test (CMT) pada
sampel susu meliputi paddle, dan coolbox untuk menyimpan sampel. Alat yang
digunakan untuk pemeriksaan sampel susu mastitis meliputi inkubator, kulkas, autoclave,
Laminar Air Flow, cawan petri, tabung reaksi, rak tabung, ose bulat, bunsen, object glass,
cover glass, mikroskop, vortex, dan timbangan.
3.2.2 Bahan
Bahan-bahan yang digunakan untuk pemeriksaan sampel susu mastitis berupa
reagen CMT, media Brain Heart Infusion Broth (BHIB), media Nutrient Agar Plate
(NAP), media Blood Agar Plate (BAP), mediaMacConkey Agar (MCA), media Eosin
Methylen Blue Agar (EMBA).. Bahan pewarnaan gram yang digunakan meliputi pewarna
kristal violet, lugol, safranin, aseton alkohol, dan akuades.
3.3 Metode Pemeriksaan
3.3.1 Pengambilan Sampel
Pengambilan sampel dilakukan pada sapi perah yang berada di peternakan Dusun
Princi, Desa Gading Kulon, Kecamatan Dau, Malang dan Desa Kungkuk, Batu. Sapi
perah yang diperiksa dilakukan pencatatan terhadap sinyalemen dan anamnesa melalui
wawancara dengan peternak.
3.3.2 Pemeriksaan CMT
Pemeriksaan pertama mastitis adalah dengan melakukan California Mastitis Test
(CMT) dengan cara mencampurkan sampel susu yang diperoleh pada paddle dan reagen
CMT dengan perbandingan 1:1, kemudian paddle digoyangkan dengan arah horizontal
untuk menghomogenkan sampel selama 10-15 detik dan diamati hasil yang diperoleh.
Interpretasi hasil CMT meliputi (+): terbentuk lendir, (++): lendir kental, (+++): lendir
kental seperti gelatin. Sampel susu yang positif mengalami mastitis dikoleksi
menggunakan tabung falcon dan disimpan pada suhu 4oC.
12
3.3.3 Pembuatan Media
3.3.3.1 Brain Heart Infusion Broth (BHIB) (Zimbro et al., 2009)
- Suspensikan 37 gram bubuk media kedalam 1 liter aquades dan dihomogenkan.
- Dipanaskan hingga mendidih selama satu menit untuk melarutkan bubuk
media dalam aquades hingga sempurna.
- Suspensi media diautoclave dengan suhu 121oC selama 15 menit.
- Suspensi media yang sudah steril dapat dituangkan ke dalam tabung reaksi
steril.
3.3.3.2 Nutrient Agar Plate (NAP) (Zimbro et al., 2009)
- Suspensikan 23 gram bubuk media kedalam 1 liter aquades dan homogenkan.
- Panaskan suspensi media dan dididihkan selama 1 menit untuk melarutkan
bubuk media hingga sempurna.
- Suspensi media disterilkan menggunakan autoclave dengan suhu 121 oC selama
15 menit.
- Suspensi media yang sudah steril dapat dituangkan ke dalam cawan petri steril.
3.3.3.3 Blood Agar Plate (BAP) (Zimbro et al., 2009)
- Suspensikan 40 gram bubuk media kedalam 1 liter aquades dan homogenkan.
- Panaskan suspensi media dan didihkan selama 1 menit untuk melarutkan
bubuk media secara sempurna.
- Autoclave dengan suhu 121oC selama 15 menit.
- Tunggu suspensi media hingga suhu 45-50oC dan tambahkan 5% darah secara
aseptis dan dihomogenkan dengan baik.
- Media yang sudah tercampurkan dapat dituangkan ke cawan petri steril.
3.3.3.4 MacConkey Agar (MCA) (Zimbro et al., 2009)
- Suspensikan 50 gram dalam 1 liter aquades dan homogenkan.
- Panaskan suspensi media hingga mendidih selama satu menit untuk
melarutkan bubuk media dalam larutan suspensi.
- Suspensi media yang sudah steril dapat dituangkan dalam cawan petri steril.
3.3.3.5 Mannitol Salt Agar (MSA) (Zimbro et al., 2009)
- Suspensikan 24,2 gram bubuk media dalam 1 liter aquades dan homogenkan.
- Panaskan dan didihkan media selama satu menit untuk melarutkan bubuk
13
dalam suspensi hingga sempurna.
- Sterilkan dengan autoclave suhu 121oC selama 15 menit.
- Tuangkan suspensi media steril ke dalam tabung reaksi steril dan diamkan
hingga memadat dengan posisi miring.
3.3.3.6 Bismuth Sulphite Agar (BSA) (Zimbro et al., 2009)
- Media ditimbang sebanyak 0,8 g
- Dilarutkan dengan akuades sebanyak 20 ml
- Kemudian media dipanaskan pada air mendidih sampai media menjadi
homogen.
- Lalu tunggu sebentar dan tuang ke dalam cawan petri dan biarkan hingga
beku.
3.3.3.7 Eosin Methylene Blue Agar (EMBA) (Zimbro et al., 2009)
- Suspensikan 37,4 gram bubuk media dengan 1 liter aquades dan homogenkan
dengan baik.
- Panaskan dan didihkan selama 1 menit untuk melarutkan bubuk media dalam
suspensi.
- Suspensi media steril dapat dituangkan kedalam cawan petri steril.
3.3.4 Isolasi dan Identifikasi Bakteri
Sampel susu positif mastitis dibiakkan pada media umum yaitu Brain Heart
Infusion Broth (BHIB) selama 24 jam, kemudian dilakukan isolasi menggunakan media
Nutrient Agar Plate (NAP) dan diinkubasi selama 24 jam dengan suhu 37 oC. Pengamatan
dilakukan pada media NAP terhadap bentuk dan warna koloni yangberbeda, kemudian
koloni bakteri tersebut diberikan pewarnaan gram dengan cara sebagai berikut :
1. Aquades sebanyak 1 ose diambil dan diletakkan pada object glass.
2. Koloni bakteri yang tumbuh pada media NAP diambil menggunakan ose dan
dicampurkan dengan aquades dan difiksasi.
3. Preparat sampel diteteskan kristal violet dan didiamkan selama 1 menit, lalu
dibilas hingga bersih menggunakan aquades, dan diangin-anginkan.
4. Preparat sampel diteteskan lugol dan didiamkan selama 1 menit, kemudian

dibilas hingga bersih.
5. Preparat sampel diteteskan aseton alkohol untuk melunturkan sisa warna dan
14
didiamkan selama 1 menit, kemudian bilas dengan aquades.
6. Preparat sampel diteteskan safranin dan didiamkan selama 1 menit, lalu dibilas.
7. Preparat yang sudah kering diamati dibawah mikroskop dengan perbesaran 400x –
1000x.
Bakteri yang telah diwarnai menggunakan pewarnaan gram, kemudian
diidentifikasi dengan cara melakukan penanaman pada media selektif dan diferensial
Mannitol Salt Agar (MSA), media MacConkey Agar (MCA), Blood Agar Plate (BAP),
dan media Eosin Methylen Blue Agar (EMBA) dengan metode streak menggunakan ose
bulat dan masing-masing media diinkubasi selama 24 jam dengan suhu 37 oC. Pengujian
dilanjutkan menggunakan uji biokimia bagi bakteri gram negatif yang tidak diketahui
berdasarkan morfologi koloni pada media selektif dan diferensial.
3.3.5 Uji Reduksi Methylene Blue

Pengujian ini menggunakan konsentrasi biru metilen 10µl, 20µl, 30µl, 40µl, 50µl,
dan 250µl dalam 10,250µl campuran air susu. Memasukkan campuran susu sebelum
maupun sesudah pemanasan dengan larutan pewarna biru metilen sesuai konsentrasi
dalam tabung reaksi secara perlahan dan menghindari pembentukan gelembung udara.
menutup tabung reaksi dan mencampurkan larutan sampai memperoleh warna yang
merata dengan cara membolak-balik tabung, kemudian menginkubasi tabung reaksi
dalam penangas air suhu 37°C. Selanjutnya mengamati perubahan warna yang terjadi
setiap setengah jam dan mencatat berapa lama waktu yang dibutuhkan untuk terjadinya
perubahan warna.
3.3.6 Uji Solubilitas KOH
Pengujian ini menggunakan larutan KOH yang telah diteteskan 1 – 2 tetes pada
object glass dan kemudian diteteskan 1 tetes dari media yang akan diujikan. Jika hasil
larutan cukup mengental diartikan terdapat gram negative pada pengujian tersebut, akan
tetapi jika hasil larutan tidak mengental dapat diartikan hasil tersebut gram positif.
15
BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil
4.1.1 Uji CMT
California Mastitis Test (CMT) merupakan screening test untuk pengujian cepat
mastitis subklinis pada sapi. Reaksi CMT harus dinilai secara cepat yakni pada 15 detik
pencampuran sampel susu dan reagen karena reaksi lemah akan hilang setelah itu. Reagen
CMT terdiri dari alkyl aryl sulfonate 3%, NaOH 1,5% dan indikaot Broom kresol purple.
Alkyl aryl sulfonate merupakan sebuah deterjen yang merupakan bahan kimia yang juga
terdapat dalam reagen “Scalm Mastitis Test” dan mempunyai sensitivitas tinggi terhadap
pH susu. CMT digunakan untuk pemeriksaan indikasi banyaknya sel leukosit dan bakteri
yang terdapat di dalam susu dengan mekanisme kerja surfraktan yang akan memecah inti
sel bakteri. Prinsip uji CMT adalah reagen yang bertemu dengan sel somatik sehingga
menyebabkan adanya reaksi penggumpalan atau pengentalan. Gumpalan dari jonjot
merupakan hasil reaksi antara sel-sel dalam susu dengan reagen, berwarna putih abu-abu
dalam larutan yang berwarna ungu (Pratomo dkk, 2011).
Pemeriksaan uji mastitis menggunakan 3 sampel susu yang diperoleh dari
Peternakan Sapi Perah Lokal di Dusun Princi, Desa Gading Kulon, Kecamatan Dau,
Malang dan Desa Kungkuk, Batu. Hasil pemeriksaan Uji Mastitis dapat dilihat pada
Tabel 4.1 di bawah ini.
Tabel 4.1 Hasil Pemeriksaan Uji CMT pada Sampel Susu Sapi
No. Gambar Keterangan
1. Sampel Susu 1 : Positif (+++)
mastitis subklinis.
Uji menggunakan reagen CMT pada

puting kiri depan didapatkan hasil
berbentuk lendir yang sangat kental
seperti massa gelatin.
16
2. Sampel Susu 2 : Positif (+++) mastitis
subklinis.

puting kanan belakang didapatkan
hasil berbentuk lendir yang sangat
kental seperti massa gelatin.
3. Sampel Susu 3 : Positif (++) mastitis

subklinis.

puting kiri belakang didapatkan hasil
berbentuk lendir.
4.1.2 Organoleptik
Susu merupakan cairan berwarna putih yang dihasilkan oleh hewan ternak mamalia
dan diperoleh dengan cara pemerahan. Pengujian terhadap kualitas susu salah satunya
adalah uji organoleptik yang meliputi warna, baru, kekentalan, dan kebersihan susu
(Diastari dan Agustina, 2013). Pemeriksaan uji organoleptik menggunakan 3 sampel susu
yang diperoleh dari Peternakan Sapi Perah Lokal di Dusun Princi, Desa Gading Kulon,
Kecamatan Dau, Malang dan Desa Kungkuk, Batu. Hasil pemeriksaan uji organoleptik
dapat dilihat pada Tabel 4.2 di bawah ini.
Tabel 4.2 Hasil Pemeriksaan Uji Organoleptik pada Sampel Susu Sapi
No. Gambar Keterangan Sampel Susu
1. 1:
Uji organoleptik pada sampel susu 1

didapatkan hasil susu berwarna putih
pekat kekuningan, berbau aromatis
khas susu, kental dan bersih.
17
2. Sampel Susu 2 :

pekat kekuningan, berbau aromatis
khas susu, kental dan bersih.
3. Sampel Susu 3 :

kurang pekat, berbau aromatis khas
susu, sedikit kental dan bersih.
4.2 Pembahasan
4.2.1 Sinyalemen
1. Sampel : Sapi 2
Jenis Hewan : Sapi Perah
Ras/Breed : Peranakan Friesian Holstein
Warna : Putih Hitam
Umur : 2,5 tahun
BCS : 3/5
Jenis Kelamin : Betina
Laktasi : 2x
2. Sampel : Sapi 2
Warna : Putih Hitam
Umur : 2,5 tahun
BCS : 3/5
18
Laktasi : 2x
3. Sampel : Sapi 1
Warna : Hitam Putih
Umur : 2,5 tahun
BCS : 3/5
Laktasi : 2x
4.2.2 Anamnesa
Anamnesa dilakukan dengan wawancara kepada peternak atau anak kandang di
peternakan sapi perah lokal. Anamnesa pada sapi 2 dilakukan wawancara dengan Bapak
Sutopo selaku pemilik salah satu peternakan di Dusun Princi, Desa Gading Kulon,
Kecamatan Dau, Malang, sekaligus sebagai yang merawat sapi, didapatkan hasil bahwa
sapi belum pernah diberikan pengobatan dan vitamin. Sapi 2 sudah 2x laktasi dan tampak
sehat juga tidak ada riwayat penyakit. Sedangkan anamnesa pada sapi 1 dilakukan
wawancara dengan Mas Bayu selaku anak kandang yang merawat sapi di peternakan
milik Bapak Ribut di Desa Kungkuk, Batu, didapatkan hasil bahwa sapi sudah pernah
diberikan vitamin. Sapi 1 tampak sehat namun dalam 3 hari ke belakang diketahui
mengalami penurunan nafsu makan. Masing-masing sapi yang diambil sampel susu untuk
pemeriksaan mastitis tidak ada riwayat penyakit dan kondisi ambing tampak normal
yakni tidak ada tanda-tanda inflamasi seperti pembengkakan atau kemerahan.
4.2.3 Observasi
Observasi dilakukan dengan pengamatan secara langsung ke kandang peternakan
sapi dan melakukan wawancara dengan peternak atau anak kandang mengenai status
reproduksi, produksi susu, riwayat penyakit, dan kondisi kesehatan terkini ternak
tersebut. Diketahui kandang sapi selalu dibersihkan setiap pagi dan sore sebelum
dilakukan pemerahan. Selain itu sebelum pemerahan sapi akan dimandikan dan puting
dibersihkan menggunakan air bersih untuk meminalisir adanya kontaminasi. Pemerahan
dilakukan dengan hati-hati dan dalam kondisi tenang agar sapi tidak kesakitan atau kaget.
Selain itu sapi diberikan pakan agar lebih tenang dan tidak memberontak.
19
4.2.4 Pembiakan Bakteri pada Brain Heart Infusion Broth (BHIB) dan Pewarnaan
Gram
Brain Heart Infusion Broth (BHIB) adalah media cair yang digunakan untuk
menumbuhkan mikroorganise yang termasuk bakteri aerob atau anaerob. Media ini
mengandung karbohidrat, glukosa, garam NaCl, enzim digesti dan jaringan hewan dan
ingsui otak serta jantung ung menyediakan asam amino, nitrogen, karbon, vitamin,
vitamin dan mineral untuk pertumbuhan mikroorganisme pada media yang telah
diinkubasi pada suhu 37°C selama 24-48 jam. Menurut Indrayati dan Akma (2018),
adanya pertumbuhan isolat bakteri atau interpretasi hasil positif (+) pada media BHIB
ditandai dengan perubahan warna media menjadi keruh. Sedangkan tidak tumbuhnya
bakteri pada media BHIB atau interpretasi hasil negatif (-) ditandai dengan tidak
terjadinya kekeruhan. Hasil pembiakan bakteri pada media Brain Heart Infusion Broth
(BHIB) disajikan pada Gambar 4.1 di bawah ini.
A B C D
Gambar 4.1 Hasil Pembiakan Bakteri pada Media BHIB. Media BHIB Murni (A), Sampel 1 (B), Sampel
2 (C), dan Sampel 3 (D) (Dokumentasi Pribadi, 2022)
Pewarnaan Gram berfungsi untuk melihat sifat Gram dan morfologi bakteri.
Pewarnaan ini umumnya digunakan untuk identifikasi bakteri Gram Positif dan Gram
Negatif. Pada bakteri Gram Positif akan ditandai dengan warna ungu pada pewarnaan
Gram. Warna ungu ini disebabkan karena pada bakteri Gram Positif akan
mempertahankan warna kristal violet. Sedangkan pada bakteri Gram Negatif akan
ditandai dengan warna merah karena mempertahankan warna Safranin. Perbedaan sifat
Gram ini dipengaruhi oleh struktur pada dinding sel bakteri, yaitu pada bakteri Gram
Positif memiliki struktur peptidoglikan yang lebih tebal jika disbanding dengan bakteri
Gram Negatif (Hayati dkk, 2019). Hasil pewarnaan Gram pada isolat bakteri dari media
BHIB sampel susu 1, 2 dan 3 dapat dilihat pada Gambar 4.2 di bawah ini.
20
A B C
Gambar 4.2 Hasil Pewarnaan Gram pada Isolat Bakteri dari Media BHIB. Bakteri Gram Negatif Coccus
(A), Bakteri Gram Negatif Basil Memanjang (B) dan Bakteri Gram Negatif Basil Memanjang
(D) (Dokumentasi Pribadi, 2022)
Pada isolat bakteri dari media BHIB dilakukan pewarnaan Gram dengan hasil
sampel 1, 2 dan 3 diketahui merupakan bakteri Gram Negatif ditandai dengan warna
merah. Bentuk bakteri pada sampel 1 yaitu coccus atau bulat. Sedangkan pada sampel 2
dan sampel 3 didapati bakteri berbentuk basil atau batang memanjang. Contoh bakteri
Gram Negatif yang mungkin terwarnai Gram pada ketiga sampel yaitu Escherichia coli,
Klebsilla, Shigella, Salmonella sp.
4.2.5 Uji Reduksi Methylene Blue
Uji reduksi methylene blue merupakan uji yang dilakukan pada susu yang bertujuan
untuk mengetahui kualitas dan perkiraan jumlah bakteri yang terdapat pada susu sehingga
dapat mengetahui mutu dari susu. Uji reduksi dilakukan dengan mengamati kemampuan
bakteri dalan susu untuk tumbuh menggunakan oksigen terlarut dengan cara menambah
methylene blue ke dalam susu sehingga menyebabkan penurunan kekuatan oksidasi-
reduksi dari campuran tersebut, akibatnya pewarna biru metilen yang ditambahkan akan
tereduksi menjadi putih metilen. Methylene blue akan tereduksi menjadi putih. Perubahan
warna dari biru menjadi putih menjadi indikator waktu reduksi susu terhadap methylene
blue. Susilawati dan Abduh (2013) menyebutkan bahwa semakin lama hilangnya warna
biru, menunjukkan jumlah bakteri yang semakin sedikit, yang menunjukkan kualitas susu
nya semakin baik. Pada kegiatan PPDH ini, dilakukan uji reduksi methylene blue pada
ketiga sampel susu dan diamati perubahan warna yang terjadi setiap 30 menit. Sampel
susu dimasukkan ke dalam tabung Falcon dan secara urut dari kiri ke kanan yaitu Sampel
1, Sampel 2 dan Sampel 3. Hasil uji reduksi methylene blue disajikan pada Tabel 4.3 di
bawah ini.
21
Tabel 4.3 Hasil Uji Reduksi Methylene Blue pada Sampel Susu
No. Gambar Keterangan Sampel Susu
1. Menit ke-0 :
Uji reduksi methylene blue pada

sampel susu di menit ke-0
menunjukkan sampel susu 1, 2 dan 3
berwarna biru.
2. Sampel Susu Menit ke-60 :

menunjukkan belum ada perubahan
warna pada sampel susu 1, 2 dan 3.
3. Sampel Susu Menit ke-150 :

warna pada sampel susu 1, 2 dan 3.
4. Sampel Susu Setelah 6 Jam :

sampel susu setelah 6 jam
warna menjadi putih pada sampel
susu 1, 2 dan 3.
22
4.2.6 Penanaman pada Media Umum
• Nutrient Agar Plate (NAP)
Nutrient Agar Plate (NAP) adalah media umum padat yang digunakan untuk
menumbuhkan sebagian besar mikroorganisme. Media ini mengandung pepton sebagai
sumber nitrogen terutama asam amino dan peptida, ektstrak daging yang mengandung
komponen larut air seperti karbohidrat, vitamin, komponen nitrogen dan garam, dan agar
sebagai pemadat media yang mana ketiganya merupakan formulasi sederhana yang
menyediakan nutrisi cukup untuk replikasi mikroorganisme. Hasil penanaman bakteri
pada media NAP dapat dilihat pada Gambar 4.3 .
2
3
Gambar 4.3 Hasil Penanaman Bakteri pada Media NAP. Sampel 1 (1), Sampel 2 (2) dan Sampel 3 (3)
(Dokumentasi Pribadi, 2022)
Pertumbuhan bakteri pada media NAP ditandai dengan terbentuknya koloni pada
media. Koloni bakteri dari setiap sampel tumbuh dan memiliki morfologi yang berbeda-
beda. Selain itu pada setiap sampel diketahui membentuk masing-masing 2 koloni
berbeda. Pada sampel 1 koloni A berbentuk titik-titik dengan permukaan kasar,
sedangkan koloni B berwarna kuning dengan permukaan halus. Selanjutnya pada sampel
2 koloni A berwarna lebih transparan, sedangkan koloni B berwarna putih susu. Koloni
A pada sampel 3 berwarna kuning keruh dengan permukaan kasar, sedangkan koloni B
berwarna lebih transparan dengan permukaan halus. Selanjutnya dilakukan pewarnaan
Gram pada masing-masing koloni yang terbentuk. Hasil pewarnaan Gram disajikan pada
Tabel 4.4 di bawah ini.
23
Tabel 4.4 Hasil Pewarnaan Gram pada Isolat Bakteri dari Media NAP
No. Gambar Keterangan Sampel 1
1. A (Koloni A dan B)
Hasil pewarnaan Gram pada sampel 1

terlihat bakteri Gram Negatif berwarna
merah dan berbentuk bulat atau coccus.
Contoh Bakteri :
B
Streptococcus sp.
Staphylococcus sp.
Bacillus sp.
2. A Sampel 2 (Koloni A dan B)

merah dan berbentuk batang memanjang
B atau basil.
Contoh Bakteri :
Escherichia coli
Klebsilla sp.
Shigella sp.
Salmonella sp.
3. A Sampel 3 (Koloni A dan B)

merah dan berbentuk batang memanjang
atau basil.
24
B Contoh Bakteri :
Escherichia coli
Klebsilla sp.
Shigella sp.
Salmonella sp.
• Blood Agar Plate (BAP)

Blood Agar Plate (BAP) merupakan media diferensial padat dan juga media yang
diperkaya dengan darah domba (5-10%) yang mengandung banyak nutrien untuk
pertumbuhan mikroorganisme. Media BAP digunakan untuk membedakan bakteri
patogenik berdasarkan kemampuannya untuk hemolisis sel darah merah atau eritrosit
dengan interpretasi tiga tipe hemolisis yaitu α yang merupakan hemolisis parsial, β untuk
hemolisis sempurna, dan γ yang non-hemolisis. Pada penanaman bakteri di media BAP
didapati hasil pada sampel 1 tidak terbentuk koloni bakteri, sampel 2 terbentuk koloni
bakteri dengan tipe hemolisis γ (non-hemolisis) dan sampel 3 terbentuk koloni bakteri
dengan tipe hemolisis α (hemolisis parsial atau sebagian). Hasil penanaman bakteri pada
media BAP dapat dilihat pada Gambar 4.4.
2 3
Gambar 4.4 Hasil Penanaman Bakteri pada Media BAP. Sampel 1 (1), Sampel 2 (2) dan Sampel 3 (3)
(Dokumentasi Pribadi, 2022)
4.2.7 Penanaman pada Media Selektif

• MacConkey Agar Plate (MCA)
Mc Conkey Agar (MCA) merupakan media selektif dan diferensial yang digunakan
untuk isolasi dan identifikasi bakteri gram negatif, terutama bakteri famili
Enterobacteriaceae dan genus Pseudomonas sp. MCA digunakan untuk isulasi bakteri
gram negatif dan diferensiasi fermentasi laktosa dari bakteri gram negatif. Pertumbuhan
25
koloni bakteri pada media MCA, bakteri yang tumbuh berwarna merah atau merah muda
menunjukkan bakteri tersebut memfermentasi laktosa dari produksi asam yang
dihasilkan. Koloni bakteri berwarna transparan dan tidak merubah warna media
menunjukkan bakteri tersebut tidak memfermentasi laktosa, seperti Shigella sp. dan
Salmonella sp. (Darna dkk, 2018). Penanaman koloni bakteri pada media MCA yang
dilakulan yaitu bakteri gram negatif yang teridentifikasi dari media NAP yaitu sampel 2
dan 3. Terlihat dari pewarnaan gram yang dilakukan, pada sampel 2 dan 3 memiliki
bentuk batang memanjang dan berwarna merah muda, menandakan bakteri tersebut
adalah bakteri gram negatif. Hasil penanaman bakteri pada media MCA dapat dilihat pada
Gambar 4.5.
1 3
2 4
Gambar 4.5 Hasil Penanaman Bakteri pada Media MCA. Sampel 2A (1), Sampel 2B (2), Sampel 3A (3),
dan Sampel 3B (4) (Dokumentasi Pribadi, 2022)
Penanaman bakteri pada media MCA didapati hasil sampel 2A, 2B dan 3B tumbuh
koloni bakteri dengan agar tetap berwarna kemerahan yang berarti bakteri memiliki
kemampuan memfermentasi laktosa. Contoh bakteri jenis ini antara lain E. coli dan
Klebsiella sp. Sedangkan pada sampel 3A koloni bakteri tampak transparan atau colorless
yang berarti bakteri tidak mampu memfermentasi laktosa. Contoh bakteri jenis ini antara
lain Salmonella sp. dan Shigella sp.
• Mannitol Salt Agar (MSA)
Mannitol Salt Agar (MSA) merupakan media yang digunakan untuk menumbuhkan
bakteri gram positif. Manitol adalah sumber karbohidrat yang difermentasi yang
mengarah pada produksi asam. Bakteri gram positif seperti staphylococcus sp akan
tumbuh pada media ini dan memfermentasi maitol untuk menghasilkan koloni
kekuningan. Bakteri selain staphylocuccus atau bakteri gram positif tidak dapat
memfermentasi manitol dan tumbuh sebagai koloni merah kecil. Warna koloni dan media
disebabkan olek reaktifitas phenol red sebagai indikator PH (Rustandi, 2018). Penanaman
26
koloni bakteri pada media MSA yang dilakulan yaitu bakteri gram positif. Terlihat dari
pewarnaan gram yang dilakukan, pada sampel 1A dan 1B memiliki bentuk coccus dan
berwarna ungu, menandakan bakteri tersebut adalah bakteri gram positif. Hasil
penanaman bakteri pada media MSA dapat dilihat pada Gambar 4.6.
Gambar 4.6 Hasil Penanaman Bakteri pada Media MSA (Dokumentasi Pribadi, 2022)
• Bismuth Sulphite Agar (BSA)

Bismuth Sulfite Agar (BSA) adalah media selektif dan diferensial untuk isolasi dan
identifikasi bakteri Salmonella spp terutama Salmonella Typhi. BSA bersifat selektif
karena adanya inhibitor produksi hidrogen sulfida (H2S). Interpretasi bakteri Salmonella
sp pada media BSA yaitu berwarna hitam metalik cemerlang, sedangkan interpretasi
bakteri E. coli pada media BSA yaitu koloni berwarna coklat kehijauan (Kumala dan
Tulus, 2013). Penanaman bakteri pada media BSA dilakukan pada koloni bakteri yang
tumbuh pada media MCA dengan sampel 2A, 2B dan 3B. Pada ketiga sampel didapati
hasil tumbuhnya koloni bakteri berwarna coklat kehijauan. Hasil penanaman bakteri pada
media BSA dapat dilihat pada Gambar 4.7.
1
3
Gambar 4.7 Hasil Penanaman Bakteri pada Media BSA. Sampel 2A (1), Sampel 2B (2) dan Sampel 3B
(3) (Dokumentasi Pribadi, 2022)
27
• Eosin Methylene Blue Agar (EMBA)
Eosin Methylene Blue Agar adalah media selektif dan diferensial. Media ini
mengandung Eosin dan metilen biru, yang menghambat pertumbuhan bakteri gram
positif, maka media ini dipilih untuk bakteri gram negatif. EMBA juga mengandung
karbohidrat laktosa, yang membuat bakteri gram negatif terdiferensiasi berdasarkan pada
kemampuan mereka untuk memfermentasi laktosa. Warna media sebelum pemupukan
bakteri berwarna merah keunguan. Warna hijau metalik ini merupakan indikator dari
bakteri yang dapat memfermtasi laktosa dengan kuat atau bakteri yang dapat
memfermentasi sukrosa seperti E. coli. Pada bakteri yang memfermentasi laktosa dengan
lambat akan menghasilkan asam dengan jumlah yang sedikit sehingga koloni akan
berwarna coklat atau merah muda. Dan pada bakteri yang tidak dapat memfermentasi
laktosa koloni akan berwarna merah muda atau transparan (Kartikasari dkk, 2019).
Penanaman bakteri pada media EMBA dilakukan pada koloni bakteri yang tumbuh pada
media MCA. Pada sampel 2A, 2B dan 3B didapati hasil dominasi koloni bakteri berwarna
hijau metalik. Selain itu koloni bakteri berwarna coklat kehitaman juga ditemukan namun
pada sampel 2A saja. Hasil penanaman bakteri pada media EMBA dapat dilihat pada
Gambar 4.8.
1 3
Gambar 4.8 Hasil Penanaman Bakteri pada Media EMBA. Sampel 2A (1), Sampel 2B (2) dan Sampel
3B (3) (Dokumentasi Pribadi, 2022)
4.2.8 Uji Solubilitas KOH

Uji solubilitas KOH merupakan uji alternatif yang dapat dilakukan untuk
membedakan bakteri gram positif dan negatif. Biakan murni bakteri yang berumur 24-48
jam diambil 1 loop ose ke objek glass, kemudian dicampurkan dengan KOH 3%, lalu
diaduk berulang kali menggunakan ose. Ose diangkat dengan cepat berkali-kali dari
permukaan objek glass, kemudian diamati bentuk suspensi bakteri. Suspensi yang
berubah menjadi lendir, lengket dan terangkat seperti benang menunjukkan bakteri
28
tersebut adalah bakteri gram negatif. Sedangkan apabila suspensi tetap encer dan tidak
terangkat menunjukkan bakteri gram positif. Hasil uji solubilitas KOH dapat dilihat pada
Gambar 4.9.
Gambar 4.9 Hasil Uji Solubilitas KOH (Dokumentasi Pribadi, 2022)
29
BAB 5 PENUTUP
5.1 Kesimpulan
Sampel susu sapi yang diambil dari Dusun Princi, Desa Gading Kulon, Kecamatan
Dau, Malang dan Desa Kungkuk, Batu dilakukan screening test mastitis dengan uji CMT,
anamnesa, gejala klinis, dan dilanjutkan dengan pemeriksaan laboratorium berupa isolasi
dan identifikasi bakteri. Uji CMT menunjukkan sampel sapi 2 positif (+++) mastitis
subklinis dan sampel sapi 1 positif (++) mastitis subklinis. Anamnesa diperoleh dari
wawancara dengan peternak atau anak kandang meliputi status reproduksi, produksi susu,
riwayat penyakit dan kondisi terkini kesehatan ternak. Pengujian mikrobiologi pada
sampel susu mennjukkan bahwa sapi mengalami mastitis yang disebabkan oleh infeksi
bakteri Escherichia coli. Pengobatan yang dapat diberikan pada sapi penderita mastitis
yakni terapi antibiotik dan peningkatan biosekuriti sebagai upaya pencegahan penyakit
mastitis melalui manajemen pemeliharaan yang baik.
5.2 Saran
Kegiatan PPDH Rotasi Diagnostik Laboratorik yang dilaksanakan di Laboratorium
Mikrobiologi dan Imunologi Veteriner Fakultas Kedokteran Hewan Universitas
Brawijaya Malang sudah berjalan dengan baik dan lancar. Saran yang mungkin bisa
diberikan yakni sebaiknya dilakukan uji sensitivitas antibiotik sehingga dapat diketahui
status resistensi bakteri yang teridentifikasi terhadap suatu jenis antibiotik dan dapat
ditentukan jenis antibiotik yang tepat untuk pengobatan sapi penderita mastitis.
30
DAFTAR PUSTAKA
Andersen, S., Dohoo, I., Olde Riekerink, R., Stryhn, H., 2010. Diagnosing Intramammary
Infections: Evaluating Expert Opinions On The Definition Of 421
Intramammary Infection Using Conjoint Analysis. J. Diary Sci. 93, 2966–
2975.
Aslantas, O., Demir, C., 2016. Investigation Of The Antibiotic Resistance And Biofilm-
Forming Ability Of Staphylococcus Aureus From Subclinical Bovine Mastitis
Cases. J Diary Sci 99, 1–7.
Darna, Turnip, M., Rahmawati, 2018. Identifikasi Bakteri Anggota Enterobacteriaceae

pada Makanan Tradisional Sotong Pangkong 2, 7.
Dewi, F.D., 2013. Identifikasi Bakteri Penyebab Infeksi Nosokomial Pada Peralatan
Logam Yang Dipakai Berulang Kali Sebelum Dan Sesudah Sterilisasi Di
Ruang IGD RS. Dr. Wahidin Sudirohusodo (SKRIPSI). Universitas
Hasanuddin, Makassar.
Diastari, I.G.A.F., Agustina, K.K., 2013. Uji Organoleptik dan Tingkat Keasaman Susu
Sapi Kemasan yang Dijual di Pasar Tradisional Kota Denpasar. Indones.
Med. Veterinus 2, 453–460.
GrAhn, Y.T., Wilson, D.J., GonzAilez, R.N., Hertl, J.A., Schulte, H., Bennet, G.,
Schukken, Y.H., 2004. Effect Of Pathogen-Specific Clinical Mastitis on Milk
Yield in Dairy Cows. J Diary Sci 87, 3358–3374.
Halasa, T., Osteras, K., Hogeveen, H., 2007. Economic Effects Of Bovine 457 Mastitis
And Mastitis Management: A Review. Vet. Q. 29, 18–31.
Hayati, L.N., Tyasningsih, W., Praja, R.N., Chusniati, S., Yunita, M.N., Wibawati, P.A.,
2019. Isolasi dan Identifikasi Staphylococcus aureus pada Susu Kambing
Peranakan Etawah Penderita Mastitis Subklinis di Kelurahan Kalipuro,
Banyuwangi. J. Med. Vet. 2, 76.
Holderman, M.V., de Quelioe, E., Rondonuwu, S.B., 2017. Identifikasi Bakteri Pada
Pegangan Eskalator di Salah Satu Pusat Perbelanjaan di Kota Manado. J. Ilm.
Sains 17, 13–18.
Indrayati, S., Akma, S.F., 2018. Peranan Monosodium Glutamat Sebagai Media Penyubur
Alternatif Pengganti Brain-Heart Infosion Broth (BHIB) Untuk Pertumbuhan
Bakteri Escherichia coli, in: 1. Presented at the Seminar Kesehatan Perintis,
Stikes Perintis, Padang.
31
Kartikasari, A.M., Hamid, I.S., Purnama, M.T.E., Damayanti, R., Fikri, F., Praja, R.N.,
2019. Isolasi dan Identifikasi Bakteri Escherichia coli Kontaminan Pada
Daging Ayam Broiler Di Rumah Potong Ayam Kabupaten Lamongan. J.
Med. Vet. 2, 66.
Kumala, S., Tulus, D., 2013. Aktivitas Antibakteri Rebusan Secang (Caesalpinia
Sappan L.) Terhadap Salmonella Thypii Secara In Vivo 33, 7.
Kumar, R., Yadav, B.R.., Singh, R.S., 2010. Genetic Determinants Of Antibiotic
Resistance In Staphylococcus aureus Isolates From Milk Of Mastitic
Crossbred Cattle. Curr Microb. 60, 379–386.
Leboffe, M.J., Pierce, B.E., 2011. A Photographic Atlas for the Microbiology Laboratory
(4th ed.), 4th ed. Morton Publishing.
Liofilchem®, 2017. Brain Heart Infusion Broth. Laboratories Humeau.
Liofilchem®, 2016. Mannitol Salt Agar. Laboratories Humeau.
Manu, K.R., Tangkonda, E., Gelolodo, M.A., 2019. Isolasi dan identifikasi terhadap
bakteri penyebab mastitis pada sapi perah di Desa Benlutu Kecamatan Batu
Putih Kabupaten Timor Tengah Selatan 2, 1–10.
Moyes, R.B., Reynolds, J., Breakwell, D.P., 2009. Differential Staining of Bacteria: Gram
Stain. Current Protocols in Microbiology 5.
Murray, P.R., Baron, E.J., Pfaller, M.A., Tenover, F.C., Yolken, R.H., 1999. Manual of
Clinical Microbiology, 7th ed. ASM, Washington D. C.
Nisa, H.C., Hariadi, M., Sidik, R., Harijani, N., 2019. Analysis Of Factor Affecting
Subclinical And Clinical Mastitis In Dairy Cow 5.
Nurhayati, I.S., Martindah, E., 2015. Controlling Subclinical Mastitis by Antibiotic

Application during Dry Period of Dairy Cow. Indones. Bull. Anim. Vet. Sci.
25, 65–74.
Pratomo, F.A., Zobda, P.R., Shanda, F., Wildan, M., Rizky, D., Putra, E., 2011. Mastech
(Mastitis Detection Technology) Metode Deteksi 7.
Radji, M., 2011. Mikrobiologi. Panduan Mahasiswa Farmasi dan Kedokteran. EGC,
Jakarta.
32
Rustandi, A.F.N., 2018. Ampas Tahu Sebagai Media Alternatif Mannitol Salt Agar
(Msa) Untuk Pertumbuhan Staphylococcus aureus dan Staphylococcus
epidermidis (SKRIPSI). Politeknik Kesehatan Bandung, Bandung.
Sagar, A., 2019. Microbiology info: Potassium Hidroxide Test - Principle, Procedure,
Uses and Interpretation, in: An Atlas for the Microbiology Laboratory.
Morton Publishing.
Sudarwanto, M., Latif, H., Noordin, M., 2006. The Relationship Of The Somatic Cell
Counting To Sub-Clinical Mastitis And To Improve Milk Quality. Presented
at the 1st International AAVS Scientific Conference, Jakarta.
Sudarwanto, M., Sanjaya, W., Trioso, P., 1992. Residu Antibiotika Dalam Susu
Pasteurisasi Ditinjau Dari Kesehatan Masyarakat. J. Ilmu Pertanian.
Indonesia. 2, 37–40.
Susilawati, T., Abduh, S.B.M., 2013. Reduksi Bakteri Dan Biru Metilen, Serta Perubahan
Intensitas Pencoklatan Dan Ph Susu Akibat Pemanasan Pada Suhu 80°C
Dalam Periode Yang Bervariasi 9.
Turista, D.D.R., Puspitasari, E., 2019. The Growth Of Staphylococcus Aureus In The
Blood Agar Plate Media Of Sheep Blood And Human Blood Groups A, B,
AB, and O. J. Teknol. Lab. 8, 1–7.
Wahyuni, A.E.T.H., Wibawan, I.W., Wibowo, M.H., 2005. Karakterisasi Hemaglutinin

Streptococcus agalactiae dan Staphylococcus aureus Penyebab Mastitis
Subklinis Pada Sapi Perah. Junral Sain Vet. 23:25.
Widodo, 2003. Bioteknologi Industri Susu. Lacticia Press, Yogyakarta.
Zimbro, M.J., Power, D.A., Miller, S.M., Wilson, G.E., Johnson, J.A., 2009. DifcoTM &
BBLTM Manual: Manual of Microbiological Culture Media, 2nd ed. Becton,
Dickinson and Company.
33
BAGIAN II
UJI
DIAGNOSTIK
i
DAFTAR ISI
DAFTAR ISI.....................................................................................................................ii
DAFTAR TABEL.............................................................................................................v
DAFTAR GAMBAR........................................................................................................vi
BAB 1 PENDAHULUAN.................................................................................................1
1.1 Latar Belakang..........................................................................................................1
1.2 Rumusan Masalah.....................................................................................................3
1.3 Tujuan.......................................................................................................................3
1.4 Manfaat.....................................................................................................................3
BAB II TINJAUAN PUSTAKA.......................................................................................5
2.1 Avian Influenza (AI)..................................................................................................5
2.1.1 Etiologi.........................................................................................................5
2.1.2 Transmisi......................................................................................................5
2.1.3 Patofisiologi..................................................................................................6
2.1.4 Gejala Klinis.................................................................................................6
2.1.5 Diagnosa.......................................................................................................7
2.1.6 Terapi dan Pencegahan.................................................................................7
2.2 Newcastle Disease (ND)............................................................................................8
2.2.1 Etiologi.........................................................................................................8
2.2.2 Transmisi......................................................................................................8
2.2.3 Patofisiologi..................................................................................................9
2.2.4 Gejala Klinis...............................................................................................10
2.2.5 Diagnosa.....................................................................................................10
2.2.6 Terapi dan Pencegahan...............................................................................10
2.3 Salmonella pullorum................................................................................................11
2.3.1 Etiologi.......................................................................................................11
2.3.2 Transmisi....................................................................................................11
2.3.3 Patofisiologi................................................................................................11
2.3.4 Gejala Klinis...............................................................................................12
2.3.5 Diagnosa.....................................................................................................12
ii
2.4 Chronic Respiratory Disease (CRD).......................................................................13
2.4.1 Etiologi.......................................................................................................13
2.4.2 Transmisi....................................................................................................13
2.4.3 Patofisiologi................................................................................................13
2.4.4 Gejala Klinis...............................................................................................14
2.4.5 Diagnosa.....................................................................................................14
2.5 Brucellosis...............................................................................................................14
2.5.1 Etiologi.......................................................................................................14
2.5.2 Transmisi....................................................................................................16
2.5.3 Patofisiologi................................................................................................17
2.5.4 Gejala Klinis...............................................................................................18
2.5.5 Diagnosa.....................................................................................................19
2.6 Uji Hemaglutinasi (HA) dan Uji Hemagulitnasi Inhibisi (HI)................................21
2.7 Rapid Test................................................................................................................22
2.7.1 Salmonella pullorum...................................................................................22
2.7.2 Mycoplasma gallisepticum (MG)................................................................22
2.7.3 Rose Bengal Test (RBT).............................................................................22
BAB III METODOLOGI...............................................................................................24
3.1 Lokasi dan Waktu Pelaksanaan...............................................................................24
3.2 Alat dan Bahan........................................................................................................24
3.2.1 Alat.............................................................................................................24
3.2.2 Bahan..........................................................................................................24
3.3 Metode Kegiatan.....................................................................................................24
3.3.1 Pengambilan Sampel...................................................................................24
3.3.2 Uji HA........................................................................................................24
3.3.3 Uji HI..........................................................................................................25
3.3.4 Salmonella pullorum...................................................................................25
3.3.5 Mycoplasma gallisepticum (MG)................................................................25
3.3.6 Rose Bengal Test (RBT).............................................................................26
iii
BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN...........................................................................27
4.1 Hasil........................................................................................................................27
4.1.1 Uji HA........................................................................................................27
4.1.2 Uji HI..........................................................................................................28
4.1.3 Rapid Test...................................................................................................29
4.2 Pembahasan.............................................................................................................31
4.2.1 Uji HA........................................................................................................31
4.2.2 Uji HI..........................................................................................................32
4.2.3 Rapid Test...................................................................................................32
BAB 5 PENUTUP...........................................................................................................34
5.1 Kesimpulan..............................................................................................................34
5.2 Saran........................................................................................................................34
DAFTAR PUSTAKA......................................................................................................35
iv
DAFTAR TABEL
Tabel 4.1 Hasil Uji HA...................................................................................................27
Tabel 4.2 Hasil Uji Back Titrasi HA..............................................................................28
Tabel 4.3 Hasil Uji HI.....................................................................................................28
v
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1 Struktur Virus Influenza A............................................................................5
Gambar 2.2 Gejala Klinis pada Avian Influenza...............................................................7
Gambar 2.3 Struktur Virus Newcastle Disease..................................................................8
Gambar 2.4 Gejala Klinis pada Newcastle Disease.........................................................10
Gambar 2.5 Gejala Klinis pada Salmonellosis................................................................12
Gambar 2.6 Gejala Klinis pada Chronic Respiratory Disease.........................................14
Gambar 2.7 Brucella abortus...........................................................................................15
Gambar 2.8 Pemeriksaan Mikroskopis Brucella abortus.................................................16
Gambar 2.9 Jalur Penularan Brucellosis..........................................................................17
Gambar 2.10 Brucellosis pada Sapi.................................................................................18
Gambar 2.11 Brucellosis pada Domba............................................................................19
Gambar 4.1 Hasil Rapid Test Salmonella pullorum........................................................30
Gambar 4.2 Hasil Rapid Test Mycoplasma gallisepticum...............................................30
Gambar 4.3 Hasil RBT....................................................................................................31
vi
BAB 1 PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Industri unggas di Indonesia adalah sektor utama bagi perekonomian nasional, yang
memasok 65% protein hewani dan mempekerjakan 10% tenaga kerja nasional.Ternak
unggas merupakan salah satu sumber penyedia bahan pangan yang bernilai gizi tinggi
terutama protein hewani yang potensial. Selain mampu menyediakan bahan pangan yang
bernilai gizi tinggi, produk ternak unggas sangat diminati masyarakat mulai dari
masyarakat lapisan atas sampai masyarakat lapisan bawah, dari masyarakat perkotaan
sampai masyarakat pedesaan. Penyebarannya cukup merata sehingga mudah diperoleh
konsumen (Ferlito dan Respatiadi, 2019). Penyakit yang disebabkan oleh virus
merupakan penyakit yang sulit dikendalikan karena penyebarannya yang cepat. Penyakit
virus pada unggas yang dapat menimbulkan kerugian yang cukup besar di suatu
peternakan adalah Newcastle Disease (ND), Infectious Laryngo Tracheitis (ILT),
Chronic Respiratory Disease (CRD), Infectious Bronchitis (IB), Infectious Bursal
Disease (IBD), Avian Influenza (AI), dan Fowlpox (Qosimah dkk., 2017). Hewan peka
yang terdeteksi positif AI di Indonesia adalah ayam broiler, layer, puyuh, itik, burung di
Kebun Binatang, dan Babi.
Serangan Avian Influenza (AI), dilaporkan pertama kali sebagai “Fowl Plaque” di
Italia pada 1878 oleh Perrocinto, yang saat ini disebut dengan Highly Pathogenic Avian
Influenza (HPAI). Pada tahun 1997, virus Avian Influenza subtipe H5N1 mewabah di
Hongkong menyerang ayam dan burung peliharaan. Menurut World Health Organization
(WHO) dan Office International des Epizooties (OIE), virus ini dapat menular pada
manusia dan berakibat fatal. Outbreak (wabah) virus AI di kawasan Asia khususnya Asia
Tenggara pada pertengahan tahun 2003 dilaporkan di beberapa negara seperti Indonesia,
Kamboja, Thailand, Republik Demokrasi Rakyat Laos, Malaysia dan Vietnam. Jenis
strain yang teridentifikasi adalah H5N1 dan diklasifikasikan sebagai (HPAI) yang dapat
menyebabkan kematian pada populasi burung, ayam dan itik (WHO, 2007).
Avian influenza adalah penyakit Influenza pada unggas yang disebabkan oleh virus
influenza tipe A subtipe H5N1 yang termasuk dalam famili Orthomyxovirus. Virus ini
berukuran 80–120 nm, berbentuk Pleomorphic, mempunyai amplop, mengandung
Ribonucleatacid (RNA) dengan penjuluran Glokoprotein yang mempunyai aktivittas
haemaglutinasi, neurominidase dan antigenisitas. Penyakit influenza pada unggas
1
bersifat sangat akut yang dapat menyebabkan penurunan produktifitas unggas dengan
gejala klinis berupa gangguan pernafasan bagian atas dan gangguan reproduksi serta
dapat menimbulkan kematian hingga 100% pada kasus virus yang sangat patogen dan
dapat menghasilkan anak ayam yang carrier (Easterday, 1997).
Newcastle Disease (ND) merupakan penyakit endemis yang terjadi di beberapa
negara du dunia sejak tahun 1926. Angka kesakitan dan kematian virus ND yang tinggi
sampai 100% menyebabkan kerugian yang sangat signifikan terhadap perekonomian
perunggasan. Newcastle Disease (ND) merupakan penyakit menular akut yang
menyerang ayam dan jenis ungags lainnya dengan gejala klinis seperti gangguan
pernafasan, pencernaan dan syaraf disertai mortalitas yang tinggi (Hewajuli dan
Dharmayanti, 2011). Diagnosa penyakit pada unggas dapat dilakukan dengan mengamati
gejala klinis dan kelainan patologi anatomi yang dikonfirmasi dengan hasil pemeriksaan
laboratorium. Berdasarkan gejala klinis penyakit Avian Influenza memiliki kemiripan
dengan penyakit New Castle Disease sehingga dapat menyulitkan dalam melakukan
peneguhan diagnosa (Maclachlan and Dubovi, 2011).
Uji serologis yang paling sering digunakan untuk deteksi virus pada ayam adalah uji
hemagglutination assay (HA) dan hemagglutination inhibition assay (HI). Pengujian HA
dan HI merupakan metode yang relatif murah dan sederhana untuk mengukur titer
antibodi hemaglutinin spesifik pada serum ayam yang sudah divaksinasi. Dasar pengujian
HA adalah adanya aglutinasi eritrosit, sedangkan dasar pengujian HI adalah adanya
hambatan aglutinasi dengan menggunakan antiserum yang spesifik. Uji HA digunakan
untuk mengetahui suatu virus yang mempunyai kemampuan mengaglutinasi eritrosit atau
untuk mengetahui titer virus dengan mengamati dasar sumuran paling akhir yang
menunjukan adanya agregat, tanda adanya hemaglutinasi positif. Sedangkan uji HI
dilakukan setelah diperoleh hasil positif pada uji HA dengan prinsip antibodi spesifik
terhadap virus akan mencegah ikatan antara virus dengan sel darah merah sehingga tidak
menimbulkan aglutinasi dan akan menghasilkan endapan di dasar sumuran (Yesica,
2013).
Penyakit lain yang sering ditemukan pada hewan ternak yaitu Brucellosis yang
disebabkan bakteri Brucella sp. Brucellosis memiliki dampak ekonomi sangat tinggi
berkaitan dengan rendahnya produktivitas hewan penderita dan pada manusia tingginya
biaya pengobatan akibat durasi pengobatan yang lama. Brucellosis merupakan salah satu
2
penyakit hewan menular strategis karena penularannya sangat cepat antar batas dan lintas
daerah, sehingga memerlukan pengaturan lalu lintas hewan yang ketat (Novita, 2016).
Menurut Pudjiatmoko (2014), salah satu cara untuk melakukan diagnosa pada kasus
Brucellosis yaitu pemeriksaan serologis dapat dilakukan dengan uji aglutinasi cepat
menggunakan antigen Rose Bengal atau Gantian Violet dan Brilliant green.
Berdasarkan penjelasan diatas maka pelaksanaan kegiatan koasistensi Rotasi
Mikrobiologi Veteriner yang dilaksanakan di Laboraturium Mikrobiologi dan Imunologi
Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Brawijaya Malang Dapat digunakan sebagai
upaya untuk meningkatkan keampuan calon dokter hewan dalam mendiagnosa suatu
penyakit melalui pemeriksaan gejala klinis yang dikonfimasi melalui pemeriksaan
serologis.
1.2 Rumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang diatas sehingga rumusan masalah yang dapat diambil
adalah sebagai berikut:
1. Bagaimana hasil titer antigen pada hasil uji HA dalam mendeteksi antigen virus
Avian Influenza dan Newcastle Disease?
2. Bagaimana hasil titer antibodi pada uji HI dalam mendeteksi antigen virus Avian
Influenza dan Newcastle Disease?
3. Bagaimana hasil deteksi antibody Pullorum, Mycoplasma gallisepticum, dan
Brucellosis menggunakan metode Rapid Test (RBT)?
1.3 Tujuan
Tujuan dari penulisan laporan ini adalah sebagai berikut:
1. Untuk mengetahui hasil titer antigen pada hasil uji HA dalam mendeteksi antigen
virus Avian Influenza dan Newcastle Disease.
2. Untuk mengetahui hasil titer antibodi pada uji HI dalam mendeteksi antigen virus
Avian Influenza dan Newcastle Disease.
3. Untuk mengetahui hasil deteksi antibody Pullorum, Mycoplasma gallisepticum, dan
Brucellosis menggunakan metode Rapid Test (RBT).
1.4 Manfaat
Kegiatan Rotasi Mikrobiologi Pendidikan Rotasi Dokter Hewan (PPDH) dapat
menambah wawasan dan gambaran mengenai pemeriksaan penyakit dan diagnose
3
laboraturium sebagai calon dokter hewan dalam melakukan identifikasi suatu penyakit
virus pada hewan terutama unggas dan ternak.
4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Avian Influenza (AI)
2.1.1 Etiologi
Virus influenza diklasifikasikan dalam tipe A, C atau C berdasarkan perbedaan
sifat antigenik dari nucleoprotein dan matriks proteinnya. Pada virus influenza A dan
B, faktor penentu antigenik terutama berupa glikoprotein transmembrane
hemagglutinin (HA) dan neuroaminidase (NA) yang mampu menimbulkan respon imun
dan respon yang spesifikl terhadap subtipe virus. Hemaglutinin (HA) mempunyai
aktivitas dalam pelekatan reseptor, sedangkan neuroaminidase (NA) mempunyai aktivitas
sialidase yang dibutuhkan untuk melepas progeny virus dari permukaan se. Sedangkan
penyakit flu burung disebabkan oleh virus Avian Influenza merupakan virus influenza
A uang terdiri atas 8 potongan RNA berpilin negatif dan termasuk dalam famili
Orthomyxoviridae. Virus ini pada permukaannya diselubungi oleh sekitar 500
glikoprotein. Virus avian influenza (VAI) mempunyai 18 subtipe HAdan 11 subtipe
NA. Ketahanan virus Avian Influenza tergantung pada suhu, pH serta bahan kimia (Garjito,
2013). Virus Avian Influenza akan mati pada suhu 56°C selama 1 jam, 60°C selama 3 menit
atau selama 1 menit pada suhu 80°C. Virus AI dapat bertahan selama 4 hari pada suhu 22°C
dan pada suhu 0°C selama 30 hari (Elytha, 2011).
Gambar 2.1 Struktur Virus Influenza A (Garjito, 2013)
2.1.2 Transmisi
Penularan AI dapat terjadi melalui kontak langsung dan kontak tidak langsung.
Kontak langsung dapat terjadi antara sesama unggas penderita dan ke manusia. Kontak
tidak langsung yakni kontak dengan lingkungan atau material yang terkontaminasi cairan
tubuh unggas yang sakit atau karier AI. Sedangkan penularan AI secara aerogenic atau
melalui udara belum pernah dilaporkan. Selain itu penularan juga dapat terjadi dari
burung liar yang bermigrasi (Elytha, 2011).
5
2.1.3 Patofisiologi
Varian virus AI dapat diklasifikasikan ke dalam dua kelompok yaitu Highly
Pathogenic Avian Influenza (HPAI) dan Low Pathogenic Avian Influenza (LPAI).
Hemaglutinin HPAI dan LPAI berbeda berdasarkan kepekannya terhadap protease
hospes. Virus AI yang mempunyai patogenisitas tinggi dan rendah juga mempunyai
perbedaan pada urutan asam amino pada tempat pemecahan hemaglutinin. Suatu urutan
pemecahan yang mengandung banyak asam amino dasar akan lebih siap diaktifkan oleh
protease seluler pada berbagai jenis sel yang terdistribusi luas di dalam tubuh dibandingan
dengan suatu urutan pemecahan yang mengandung asam amino dasar tunggal yang hanya
dapat dipecah oleh protease seluler yang terbatas. Hal ini menunjukkan bahwa virus
influenza yang mengandung banyak asam amino dasar mempunyai banyak tempat untuk
replikasi virus pada berbagai tipe sel sehingga menghasilkan infeksi yang lebih berat
dengan motilitas tinggi pada burung dan mamalia (Elytha, 2011).
Infeksi virus H5N1 dimulai ketika virus memasuki sel hospes
setelah terjadi penempelan spikes virion dengan reseptor spesifik yang ada
pada permukaan sel hospes. Virion akan masuk ke sitoplasma sel dan akan
mengintegrasikan materi genetik di dalam inti sel hospesnya, sehingga virus dapat
melakukan replikasi dan membentuk virion-virion baru yang dapat menginfeksi sel
disekitarnya. Fase penempelan atau attachment adalah fase paling menentukan apakah
virus bisa masuk atau tidaknya ke dalam sel. Virus influenza tipe A melalui spikes
hemagglutinin (HA) akan berikatan dengan reseptor yang mengandung sialic acid yang
terdapat pada permukaan sel hospes (Radji, 2006).
2.1.4 Gejala Klinis
Gejala klinis yang muncul berbeda pada HPAI dan LPAI. Pada LPAI, dijumpai
terjadinya sinusitis, tracheitis, aisaculitis, hingga lesi pada organ reproduktif. Sedangkan
pada HPAI dijumpai pendarahan atau bercak-bercak hemoragik pada saluran pencernaan
dan dalam kondisi parah akan segera disusul dengan kematian (Elytha, 2011). Selain itu
gejala-gejala seperti penurunan produksi telur, hemoragis pada permukaan serosa dan
mukosa organ visceral, terutama hemoragis pada jaringan lemak koroner dan otot jantung
(epikardium) juga mengarah pada AI (Isnawati dkk, 2019).
6
Gambar 2.2 Gejala Klinis pada Avian Influenza. (A) Cyanotis pada Kepala, (B) Pendarahan pada Kaki,
(C) Nasal Discharge, dan (D) Pembengkakan pada Kepala (Pudjiatmoko, 2014)
2.1.5 Diagnosa
Penyakit AI (Avian Influenza) terdapat dua macam metode diagnostik yang dapat
dilakukan yaitu metode konvesional dalam aspek virologi dan metode molekuler. Metode
konvensional berupa uji serologi dengan menggunakan sampel serum, pengujian dapat
berupa Haemagglutination (HA) dan Haemagglutination Inhibition (HI). Pengujian ini
berdasarkan dengan sifat virus Avian Influenza yang dapat mengaglutinasi sel darah
merah dan kemampuan antibody spesifik dalam menghambat aglutinasi (Hewajuli dan
Dharmayanti, 2011).
Berdasarkan gejala klinis penyakit Avian Influenza memiliki kemiripan dengan
penyakit New Castle Disease sehingga dapat menyulitkan dalam melakukan peneguhan
diagnosa. Metode diagnostik seperti isolasi virus dan metode pemeriksaan serologis
konvensional memerlukan waktu dan tenaga yang intensif sehingga dapat dilakukan
metode imunologis imunohistokimia untuk mendeteksi keberadaan antigen virus pada
pernafasan unggas. Metode imunohistokimia menggunakan metode streptavidin-biotin
yang akan mendapatkan hasil berwarna coklat kemerahan pada preparat jika terdapat sel
terinfeksi virus (Ekaningtias dkk, 2017).
2.1.6 Terapi dan Pencegahan
Belum ditemukan obat yang dapat menyembuhkan AI. Memperbaiki asupan dan
meningkatkan kondisi tubuh ayam dapat dilakukan untuk membantu membuat ayam
cepat sembuh. Meski demikian, keberhasilannya hanya sedikit. Vaksinasi merupakan
salah satu strategi pemerintah Indonesia untuk mengendalikan penyebaran penyakit AI.
Selain vaksinasi, untuk menurunkan jumlah penyebaran penyakit, pemerintah telah
melakukan berbagai upaya antara lain melalui pelarangan distribusi unggas dewasa dan
hanya mengijinkan dengan persyaratan lalu lintas anak ayam umur satu hari dari daerah
tertular ke daerah bebas (Putra dkk, 2020). Selain itu perlu dilakukan pelaporan jika
7
terdapat peternakan terjangkit AI untuk surveillance dan perencanaan tindakan
pengendalian dari dinas setempat. Peningkatan kesadaran peternak lokal dan masyarakat
sekitar juga sangat penting (Pudjiatmoko, 2014).
2.2 Newcastle Disease (ND)
2.2.1 Etiologi
Penyakit ND (Newcastle Disease) merupakan penyakit menular dengan angka
kematiannya sangat tinggi yang disebabkan oleh virus genus paramyxovirus yang dikenal
sebagai Avian paramyxovirus 1 (AMPV-1). Virus penyakit Newcastle (NDV), juga
dikenal sebagai avian paramyxovirus 1 (APMV-1) yang merupakan virus RNA berkapsul
dengan untai tunggal. Meski sebelumnya diklasifikasikan dalam genus Rubulavirus,
NDV sekarang dikategorikan sebagai Avulavirus dalam subfamili Paramyxovirinae dari
keluarga Paramyxoviridae (Miller and Afonso, 2011).
Gambar 2.3 Struktur Virus Newcastle Disease (Pudjiatmoko, 2014)
Strain NDV diklasifikasikan ke dalam tiga patogen utama berdasarkan

virulensinya pada ayam yaitu, sangat virulen (velogenik), sedang (mesogenik) dan non-
virulen (lentogenik) (Dey et al., 2014). NDV strain lentogenik menyebabkan infeksi
subklinis dengan pernapasan ringan atau penyakit enterik dan dianggap virulen rendah.
Strain NDV mesogenik memiliki virulensi menengah menyebabkan infeksi pernapasan
dengan mortalitas sedang (< 10%), sementara strain NDV velogenik sangat virulen
menyebabkan angka kematian hingga 100%. Strain Velogenik selanjutnya
diklasifikasikan ke dalam viscerotropic velogenic dan strain velogen neurotropik. Strain
velogenik viscerotropik menghasilkan lesi hemoragik yang mematikan di jeroan,
sedangkan strain velogen neurotropik menyebabkan neurologis dan gangguan pernapasan
(Dortmans et al., 2011).
2.2.2 Transmisi
Penularan dari satu tempat ke tempat lain terjadi melalui alat transportasi, pekerja
kandang, burung dan hewan lain, debu kandang, angin, serangga, makanan dan karung
8
makanan yang tercemar. Dapat pula melalui transportasi dari karkas ayam yang tertular
virus ND dan ayam dalam masa inkubasi. Masa inkubasi ND antara 2 - 15 hari atau rata-
rata 6 hari. Ayam tertular virus ND akan mengeluarkan virus melalui alat pemafasan 1 -
2 hari setelah infeksi. Penularan ND dari suatu hewan ke hewan lainnya melalui kontak
(persentuhan) dengan hewan sakit, sekresi, ekskresi dan hewan sakit serta juga bangkai
penderita tetelo. Jalan penularan melalui alat pencernaan dan pernafasan. Virus yang
tercampur lendir atau virus yang ada dalam faeces dan urine tahan sampai 2 bulan, bahkan
dalam keadaan kering tahan lebih lama lagi. Demikian pula virus yang mencemari litter
(jejabah) dan lain-lain perlengkapan kandang. Hal ini merupakan sumber penularan yang
penting (Pudjiatmoko, 2014).
2.2.3 Patofisiologi
Protein HN berperan dalam tahap penempelan virus ND pada reseptor sel inang
atau induk semang yang mengandung sialic acid. Sialic acid ini terdiri dari glikoprotein
dan glikolipid. Penempelan virus dilakukan dengan penyatuan virus dan membran sel
yang diperantarai oleh protein F. Virus RNA kemudian dilepaskan dalam sitoplasma dan
terjadi replikasi. Envelope virus masuk ke dalam sel melalui 2 jalan utama yaitu pertama,
penyatuan secara langsung antara envelope virus dengan membran plasma dan kedua,
diperantarai oleh reseptor endositosis. Penetrasi virus melalui reseptor endositosis
tergantung pada kondisi pHnya. Pada paramyxoviruses, proses penyatuan membran virus
dengan membran plasma inang atau induk semang tidak tergantung pH. Replikasi virus
yang terjadi di limfosit menghasilkan suatu respon imun dan produksi antigen virus yang
cukup dibutuhkan untuk meningkatkan efektivitas sistem imun. Di dalam saluran
pencernaan terdapat faktor-faktor nonspesifik yang mempengaruhi replikasi virus ND.
Enzim protease dan pH yang bervariasi mempunyai pengaruh dalam proses penempelan
virus pada reseptor sel. Dimana keberadaan tripsin pada beberapa bagian saluran
pencernaan dapat mengaktifkan virus ND bentuk tidak virulen setelah virus tersebut
dilepaskan dari sel yang kekurangan enzim protease. Antigen virus ND dideteksi pada
sebagian besar sel epitel saluran pencernaan serta limfosit dan makrofag ditemukan pada
lamina propia beberapa jaringan. Tempat awal replikasi virus ND terutama terjadi di
saluran pencernaan bagian atas yaitu esophagus, tembolok dan proventrikulus apabila
virus ND diinfeksikan melalui mulut, sedangkan replikasi virus ND pada saluran
9
pencernaan bagian bawah yaitu duodenum, jejunum, ileum dan caecum kemungkinan
terjadi sebagai akibat viremia (Hewajuli dan Dharmayanti, 2011).
2.2.4 Gejala Klinis
Penyakit ND pada ayam menyebabkan gangguan yang sangat berat pada sistem
respirasi, syaraf dan pencernaan. Gejalanya ditandai dengan penurunan nafsu makan,
jengger dan pial sianosis, pembengkakan di daerah kepala, bersin, batuk, ngorok, dan
diare putih kehijauan. Infeksi virus strain velogenik bersifat fatal, seringkali diikuti
dengan angka kematian yang tinggi. Gejala tersebut sangat bervariasi, diawali dengan
konjungtivitis, diare serta dikuti dengan gejala saraf seperti tremor, tortikolis, atau
kelumpuhan pada leher dan sayap. Gejala lain mungkin tampak seperti lemah, nafsu
makan berkurang, adanya leleran dari hidung, bulu kusam, sayap terkulai lemas, feses
berwarna putih kehijauan dan mengalami kematian tiga hari setelah muncul gejala
tersebut. Sedangkan perubahan patologi anatomi yang patognomonis pada penyakit ND
ditandai dengan ptechie pada proventikulus, ventrikulus, usus, seka tonsil, trakea, dan
paru-paru (Pranatha dkk, 2018).
Gambar 2.4 Gejala Klinis pada Newcastle Disease. (A) Tortikolis, (B) Pembengkakan dan Hemoragi pada
Sekitar Mata, dan (C) Pembengkakan Kelopak Mata (Pudjiatmoko, 2014)
2.2.5 Diagnosa
Diagnosa ND didasarkan pada tanda-tanda klinis yang tampak, kelainan patologi
anatomi dan diteguhkan dengan pemeriksaan laboratorium. Pemeriksaan laboratorium
yang dapat dilakukan yakni dengan isolasi dari swab yang kemudian diinokulasikan pada
telur ayam berembrio. Setelah 9-11 hari inkubari, cairan alatois diuji HA dan HI.
Sedangkan uji serologi lain yang bisa dilakukan yakni ELISA, uji FAT atau dengan rapid
test kit (Pudjiatmoko, 2014).
Belum ditemukan obat yang dapat menyembuhkan ND. Yang bisa dilakukan
adalah memperbaiki kondisi ayam dengan merangsang nafsu makan dan pemberian
10
vitamin. Antibiotik dapat diberikan untuk menghindari infeksi sekunder, namun dapat
beresiko terjadinya residu antibiotik dalam tubuh ayam. Pengendalian dan pencegahan
dapat dilakukan secara terintergrasi dengan pelaporan pada dinas setempat dan
melaksanakan program vaksinasi secara rutin dan menyeluruh (Pudjiatmoko, 2014).
2.3 Salmonella pullorum
2.3.1 Etiologi
Pullorum disebabkan oleh bakteri Salmonella pullorum, yaitu suatu bakteri gram
negatif, tidak bergerak/ non motil, berbentuk batang, fakultatif aerob dan tidak berspora,
dan mampu bertahan di tanah hingga satu tahun. Bakteri mempunyai ukuran lebar 0,3-
0,5 mikron dan panjang 1-2,5 mikron, umumnya terdapat dalam bentuk tunggal dan
jarang membentuk rantai lebih dari dua sel. Pertumbuhan optimum pada temperatur 37°C
(Pudjiatmoko, 2014).
2.3.2 Transmisi
Transmisi penyakit Pullorum terjadi secara vertikal atau konginetal yakni dari
induk ayam betina ke anak melalui telur, secara horizontal melalui kontak langsung
dengan hewan penderita baik yang menunjukkan gejala maupun kondisi subklinis, secara
tidak langsung melalui benda atau lingkungan yang terkontaminasi (Pudjiatmoko, 2014).
2.3.3 Patofisiologi
Salmonella pullorum menembus pertahanan inang di lambung dan mencapai usus
dan berinteraksi dengan sel non-fagosit seperti mukosa usus. Organisme memiliki faktor
virulensi seperti plasmid virulensi, racun, fimbriae dan flagela yang membantu dalam
proses infeksi. Salmonella pullorum yang tertelan terlebih dahulu harus melewati
lingkungan asam dari proventrikulus inang sehingga dapat berpindah ke small intestine.
Bakteri menginfeksi dan berkembang biak di dalam sel sistem fagositik mononuklear
anak ayam. Tempat utama perkembangbiakan bakteri ini adalah pada saluran pencernaan,
yang dapat mengakibatkan pencemaran lingkungan yang meluas akibat bakteri dari sel
epitel diekskresikan melalui feses. S. Pullorum secara khusus menargetkan bursa
fabricius sebelum menimbulkan peradangan di intestine ayam. Setelah invasi melalui
mukosa usus, cecal, amandel dan bursa fabricius, organisme diambil oleh makrofag dan
akhirnya masuk ke dalam darah menyebabkan bakteremia dan terjadi infeksi secara
sistemik (Berhanu and Fulasa, 2020).
11
2.3.4 Gejala Klinis
Gejala penyakit yang tersifat pada ayam ialah kelihatan mengantuk (mata
menutup), jengger kebiruan, bergerombol pada suatu tempat dan nafsu makan berkurang.
Pada umumnya memperlihatkan diare putih atau coklat kehijau-hijauan dan terdapat
gumpalan seperti pasta di sekitar kloaka disertai kelemahan kaki, sayap menggantung
kusam, lumpuh karena arthritis, dan nampak sesak nafas. Terjadi pembengkakan pada
sendi merupakan gambaran umum pada pullorum. Ayam-ayam yang tahan hidup
mengalami hambatan pertumbuhan. Sedangkan pada ayam dewasa gejala penyakit sukar
dilihat , tetapi kadang-kadang terlihat adanya tanda-tanda depresi, kekurusan, anemia,
diare, dan produksi telur menurun. (Pudjiatmoko, 2014).
Gambar 2.5 Gejala Klinis pada Salmonellosis (Pudjiatmoko, 2014)
2.3.5 Diagnosa
Diagnosa pullorum ditentukan berdasarkan sejarah kelompok, gejala penyakit,
perubahan post infeksi mati, uji serologis, isolasi dan identifikasi di Iaboratorium.
Perubahan post infeksi mati yang terdapat pada sejumlah ayam dipakai sebagai dasar
untuk memberikan diagnosa sementara. Hasil uji serologis dapat memberikan petunjuk
untuk program pengendalian penyakit selanjutnya. Peneguhan diagnosa dilakukan
dengan isolasi dan identifikasi kuman penyebab. Uji serologi yang bisa dilakukan yaitu
Uji Rapid Whole Blood, Uji Aglutinasi Tabung, dan Uji Rapid Serum (Pudjiatmoko,
2014).
Pengobatan yang umum dilakukan adalah penyuntikan antibiotik, namun
keberhasilannya sedikit karena tidak mengatasi gejala namun memperlambat kematian
dari ayam penderita. Tindakan paling baik dilakukan adalah dengan pemusnaha.
Sedangkan pencegahan yang dapat dilakukan yaitu pelaporan kepada dinas setempat,
pembersihan kandang, uji rapid secara rutin, dan jika dalam kondisi banyak ditemukan
kasus pullorum maka harus dilakukan pemusnahan (Pudjiatmoko, 2014).
12
2.4 Chronic Respiratory Disease (CRD)
2.4.1 Etiologi
CRD disebabkan oleh bakteri Mycoplasma gallisepticum (MG) dari famili
Mycoplasmataceae dan Ordo Mycoplasmatales. Mycoplasma gallisepticum berukuran
0,25-0,50 mikron berbentuk pleomorfik, kokus dan tidak mempunyai dinding sel sejati.
Bakteri ini termasuk kedalam kategori gram negatif, dan dapat dibiakkan dalam telur
ayam bertunas, biakan sel, medium buatan yang dilengkapi dengan 10-15% serum babi
atau kuda yang diinaktifkan. M.gallisepticum masih tetap hidup selama 1-3 hari dalam
feses ayam pada suhu 20°C selama 1 hari dan 6 hari pada suhu kamar (Pudjiatmoko,
2014).
2.4.2 Transmisi
Penularan CRD dapat terjadi secara vertikal melalui induk yang terinfeksi ke anak
melalui telur, sedangkan secara horizontal melalui kontak langsung dengan hewan
penderita dan secara tidak langsung melalui pakan, minum, benda maupun lingkungan
yang terkontaminasi (Amanu dan Riyanto, 2004).
2.4.3 Patofisiologi
Bakteri Mycoplasma gallisepticum masuk melalui rongga hidung kemudian
melekat pada reseptor epitel yang disebut sialoglycoprotein (Patron recognition
receptors sites) yang dimediasi oleh adhesin dan protein yang disebut bleb (Pathogen
associate molecular patrons) yang terletak pada ujung organ sel mikoplasma.
Selanjutnya, sel mikoplasma melakukan penetrasi dan merusak mukosa epitel dan
bereplikasi. Dengan perantaraan gerakan silia epitel, sel Mycoplasma bergerak menuju
kantong membran udara abdominal. Mekanisme infeksi M. gallisepticum pada oviduct
menyebabkan penyebaran vertical. Peradangan yang terjadi pada jaringan epitel bukanlah
akibat dari toksin mikoplasma tetapi lebih disebabkan karena respons imun dari induk
semang berupa reaksi peradangan. Peradangan ini menyebabkan terhambatnya
perkembangan sel T helper 1 (Th1 cell) sehingga sel T sitotoksik (killer cytotoxic T cell)
menjadi tidak aktif yang mengakibatkan infeksi patogen menjadi persisten. Akibat lain
yaitu terjadi peningkatan produksi Tumor necrosis factor α (TNFα) yang mengakibatkan
respon sel Th2 menurun, yang mengakibatkan respon netralisasi antibodi terhadap infeksi
bakteri atau virus juga menurun drastis. Kondisi ini yang menyebabkan terjadinya kondisi
imunosupresif pada ayam yang terinfeksi M. gallisepticum (Pudjiatmoko, 2014).
13
2.4.4 Gejala Klinis
Gejala klinis CRD pada uungga terutama ayam menunjukkan adanya batuk,
leleran hidung, sesak napas, timbul suara ngorok, penurunan nafsum makan, berat badan
menurut drastis dan pada ayam petelur produksinyya menurun. Sedangkan pada unggas
lain seperti kalkun, itik, angsa dan entok penyakit berjalan dengan kronis dan gejalanya
tidak jelas (Amanu and Riyanto, 2004).
Gambar 2.6 Gejala Klinis pada Chronic Respiratory Disease (Pudjiatmoko,

2014)
2.4.5 Diagnosa
Selain berdasarkan gejala klinis, diagnosa CRD dapat diteguhkan dengan
pemeriksaan laboratorium. Uji aglutinasi cepat serum digunakan untuk mendiagnosa
CRD pada unggas (Amanu dan Riyanto, 2004).
Obat-obatan yang dapat dipergunakan untuk penyakit ini diantaranya ialah
tylosin, spiramycin, oxytetracyclin, streptomycin, spektinomisin, linkomisin, dan
beberapa golongan kuinolon seperti enrofloksasin dan norflosasin. Pengobatan ini hanya
akan bermanfaat pada tahap permulaan penyakit, untuk mencegah terjadinya radang pada
kantong udara atau sinovitis. Sebaiknya diberi pengobatan suportif seperti pemberian
vitamin yang bertujuan untuk mempercepat proses kesembuhan. Sedangkan pencegahan
yang dapat dilakukan yaitu pelaporan dan peningkatan biosekuriti (Pudjiatmoko, 2014).
2.5 Brucellosis
2.5.1 Etiologi
Brucella sp. termasuk bakteri kelompok gram negatif, tidak berspora, tidak
berkapsul, berbentuk coccobacillus dengan panjang 0,6-1,5 μm, dan tidak berflagella
sehingga tidak bergerak (non motil) (Prawira, 2014). Morfologi Brucella sp. dapat dilihat
pada Gambar 2.7. Bakteri ini bersifat fakultatif intrasesuler yaitu mampu hidup dan
berkembang biak dalam sel fagosit (Handayani dkk, 2020). Berdasarkan hospes spesifik,
Brucella abortus berinang pada ternak ruminansia besar seperti sapi. Bakteri ini memiliki
14
kelompok subspesies yang diidentifikasikan sebagai variasi biovar yaitu biovar 1, 2, 3, 4,
5, 6, dan 9. B. abortus biovar 1 merupakan spesies yang 5 paling patogen pada ternak dan
manusia (Prawira, 2014).
Gambar 2.7 Brucella abortus (Novita, 2016)
Menurut OIE (2018), berdasarkan jenis lipopolisakardia spesies Brucella

dibedakan menjadi dua kelompok besar yaitu Smooth LPS dan Rough LPS. Perbedaan ini
menjadi dasar virulen dan avirulen dari suatu spesies Brucella. Smooth LPS meliputi B.
abortus, B. melitensis, B. suis, B. ceti, dan B. pinnipedialis. Sedangkan B. ovis dan B.
canis termasuk kelompok Rough LPS. Kelompok SLPS bersifat zoonosis karena dapat
menular pada manusia, sedangkan RLPS menyebabkan gejala klinis pada hospes
spesifiknya saja.
Pada kultur bakteri di media Triptone Soya Agar (TSA), koloni Brucella sp. mulai
tumbuh setelah inkubasi selama 2-3 hari. Kemudian setelah inkubasi 4 hari, koloni
berbentuk bulat dengan diameter 1-2 mm, tepi halus, tampak translusen dengan warna
madu pucat. Media padat bekas kultur bakteri tidak boleh langsung dibuang karena jika
tidak terbentuk koloni maka masa inkubasi akan ditambah hingga 7-10 hari, apabila tidak
terbentuk koloni maka hasilnya dapat dinyatakan negatif Brucella. Sedangkan pada
pewarnaan gram menunjukkan bakteri berwarna merah dari pewarna safranin. Struktur
dinding Brucella terdiri dari membran plasma, periplasma, peptidoglikan dan membran
luar. Membran luar tersusun dari fosfolipid, lipopolisakardia (LPS), lipoprotein, dan
protein (Handayani dkk, 2020). Pemeriksaan mikroskopis koloni Brucella sp. pada media
padat dan preparat pewarnaan gram dapat dilihat pada Gambar 2.8.
15
Gambar 2.8 Pemeriksaan Mikroskopis Brucella abortus. (A) Koloni Brucella abortus pada Media TSA,
(B) Brucella abortus dengan Pewarnaan Gram pada Perbesaran 1000x (Pinotoan, 2018).
2.5.2 Transmisi
Penularan Brucellosis pada hewan pada dasarnya dapat melalui jalur oral,
pernapasan atau konjungtiva. Penularan terjadi karena kontak langsung dengan hewan
yang mengalami abortus oleh Brucellosis karena Brucella sp. akan dikeluarkan dalam
jumlah besar melalui cairan membran fetus, cairan reproduksi, urin dan feses yang dapat
mengontaminasi rumput dan air minum sehingga dapat menular pada hewan lainnya
dalam satu kandang. Selain itu penularan dari hewan jantan yang terjangkit Brucellosis
ke hewan betina dapat terjadi melalui perkawinan alami dan inseminasi buatan dengan
semen yang terkontaminasi Brucella (Kristiyanti dan Ui, 2018).
Pada manusia penularan dari hewan terinfeksi terjadi secara tidak langsung karena
konsumsi susu dan produk olahan yang tidak dipasteurisasi atau dimasak dengan
sempurna karena kemampuan daya tahan hidup tinggi yang dimiliki Brucella sp. yakni
cepat tumbuh pada temperatur 20-40°C dengan tambahan karbondioksida 5-10%
(Prawira, 2014). Brucellosis termasuk penyakit yang ditularkan melalui pekerjaan
(Occupational Disease). Risiko penyakit ini terjadi pada bidang pekerjaan seperti dokter
hewan, pekerja laboratorium, petugas rumah potong hewan, dan peternak. Dokter hewan
dapat tertular saat melakukan vaksinasi atau pemeriksaan hewan tertular. Brucellosis juga
merupakan salah satu infeksi laboratorium yang mudah diterjadi sehingga dalam
pengujian Brucella sp. di laboratorium harus menggunakan alat pelindung diri yang benar
(OIE, 2018). Petugas rumah potong hewan dapat tertular saat melakukan pemotongan
hewan ternak yang tertular sehingga kontak langsung dengan cairan tubuh yang
terkontaminasi Brucella. Sedangkan peternak dapat tertular saat melakukan pemerahan
susu atau pembersihan kandang pada hewan tertular. Jalur penularan Brucellosis dapat
dilihat pada Gambar 2.9.
16
Gambar 2.9 Jalur Penularan Brucellosis (Novita, 2016)
2.5.3 Patofisiologi
Antibodi anti-Brucella yakni IgM dan IgG merupakan protein yang menyebabkan
aglutinasi, fiksasi komplemen dan presipitasi saat bereaksi dengan antigen homolognya
yang berasal dari bakteri Brucella. Antibodi IgM adalah antibodi yang pertama kali
muncul ketika terjadi infeksi pada hewan dan akan terus bertambah jumlahnya secara
bertahap. Antibodi IgM dapat diperoleh dari hewan yang telah divaksinasi karena adanya
rangsangan sistem imun untuk mengahasilkan antibodi. Sedangkan antibodi IgG muncul
setelah onset infeksi berakhir dan kehadirannya dipicu oleh protein sitoplasma dari
Brucella yang tidak bisa difagosit oleh makrofag sehingga bakteri patogen tetap berada
dalam tubuh atau jaringan organ dan akan berkembang biak secara instraseluler.
Berdasarkan hal tersebut, pengujian serologi yang dilakukan adalah untuk membedakan
antara host yang terinfeksi dan yang tidak terinfeksi (Dwi dkk, 2018).
Menurut Dwi dkk (2018), proses pembentukan antibodi pada kasus Brucellosis
dimulai dengan masuknya bakteri Brucella sp. pada host melalui pembuluh darah yang
selanjutnya akan merangsang respon imun tubuh untuk melepaskan monosit yang
berperan dalam proses fagositosis bakteri. Makrofag/Antigen Precenting Cell (APC) yang
telah memfragmentasi antigen akan mempresentasikan antigen tersebut kepada sel
limfosit T helper (sel Th) melalui Major Histocompatibility Cell (MHC) kelas II yang
terletak di permukaan monosit. Sel Th akan berinteraksi dengan APC melalui Cluster of
Differentiation (CD4) dan T-cell Receptor (TCR) yang dimiliki oleh sel Th. Setelah sel
Th teraktivasi, sel Th akan berproliferasi dan mengeluarkan sitokin (IL-1) yang bertugas
untuk mengaktivasi sel B menjadi sel plasma yang siap memproduksi antibodi spesifik
terhadap antigen Brucella sp.
17
2.5.4 Gejala Klinis
• Brucellosis pada Sapi
Lokalisasi bakteri Brucella pada sapi jantan dan betina secara spesifik
menyebabkan aborsi dan infertilitas. Pada sapi betina, Brucella abortus banyak
ditemukan pada eksudat di ruang plasenta yang secara pasti menyebabkan infeksi kronis,
plasentitis, kematian fetus hingga aborsi. Sedangkan pada sapi jantan, lesi paling
signifikan yang ditemukan dapat berupa orchitis, seminal vesiculitis dan epididimitis
sehingga produksi semen akan menurun dalam hal volume dan kualitasnya (Poester et
al., 2013).
Gambar 2.10 Brucellosis pada Sapi. (A) Plasentitis, (B) Pleuritis (Poester et al., 2013)
Jalur utama masuknya bakteri Brucella adalah melalui mukosa mulut dan hidung.
Demam tinggi, pneumonia dan pleuritis seperti pada Gambar 2.10 kerap dijumpai
sebagai bentuk infeksi sekunder Brucellosis. Lesi parah yang ditemukan pada uterus
berupa cairan berbau busuk berwarna kecoklatan dan diikuti dengan nekrosis pada
plasenta serta hemoragi multifokal (Poester et al., 2013).
• Brucellosis pada Kambing
Brucellosis pada kambing disebabkan oleh bakteri Brucella melitensis. Berbeda
dari ruminan besar, rute utama infeksi Brucellosis pada kambing adalah mukosa mulut.
Pada kambing betina, aborsi plasentitis menjadi gejala klinis paling jelas dari Brucellosis.
Sedangkan pada kambing jantan, higroma dan inflamasi bernanah pada sendi ekstremitas
ditemukan pada kasus Brucellosis kronis (Poester et al., 2013).
• Brucellosis pada Domba
Infeksi Brucella ovis pada domba secara primer menyebabkan epididimitis baik
unilateral maupun bilateral dan seminal vesiculitis diikuti dengan kulitas semen yang
buruk seperti pada Gambar 2.11. Domba dengan usia seksual matang lebih sering
terinfeksi dibandingkan domba muda. Penularan terjadi akibat kontak langsung dengan
18
permukaan mukosa dan perkawinan menjadi rute utamanya. Sedangkan pada domba
betina, aborsi terjadi pada 30 hari pertama kebuntingan (Poester et al., 2013).
Gambar 2.11 Brucellosis pada Domba. (A) Epididimis, (B) Abses Testis (Poester et al., 2013)
• Brucellosis pada Manusia

Infeksi Brucella sp. pada manusia menyebabkan penyakit demam akut. Kondisi
ini disebut juga Demam Mediterania atau Demam Malta (Handayani dkk, 2020). Menurut
OIE (2018), dalam bentuk yang lebih kronis dapat menyebabkan komplikasi serius yang
mempengaruhi sistem muskuloskeletal, kardiovaskular dan saraf pusat. World Health
Organization (WHO) oleh Corbel (2006) menuturkan bahwa manifestasi klinis yang
muncul pada manusia akibat Brucellosis adalah demam, berkeringat, kelelahan,
kelemasan, anoreksia, penurunan berat badan, sakit kepala dan punggung terutama saat
malam hari.
2.5.5 Diagnosa
Pemeriksaan serologis secara luas digunakan untuk diagnosa Brucellosis.
Menurut Cadmus et al. (2008), antibodi spesifik terhadap Brucella di dalam serum dan
cairan tubuh lainnya dideteksi oleh beragam teknik pemeriksaan secara bertahap untuk
mendapatkan diagnosa penuh pada Brucellosis. Pada pemeriksaan serologis dibutuhkan
sampel berupa cairan tubuh seperti serum, cairan rahim, lendir vagina, susu atau air mani
yang diduga terinfeksi Brucella sp. Pengujian serum darah yang paling umum dilakukan
adalah Rose Bengal Test (RBT), Complement Fixation Test (CFT) dan Enzyme-linked
Immunosorbent Assay (ELISA).
Belum ada pengobatan yang efektif yang dapat dilakukan pada penderita
Brucellosis. Menurut Singh et al. (2014), pengobatan antibiotik yang optimal untuk terapi
brucellosis pada hewan masih diperdebatkan. Salah satu virulensi Brucella adalah
memiliki kemampuan menghindari sistem kekebalan tubuh yakni mencegah fagositosis
19
sehingga infeksi bakteri ini mengakibatkan kematian makrofag (Mecvey and Chengappa,
2013). Hal ini kemungkinan disebabkan oleh sifat intraseluler Brucella sp. dan
kemampuannya untuk dapat beradaptasi dengan kondisi yang dihadapi. Pertimbangan
lainnya yaitu resiko kegagalan pengobatan, tingkat kekambuhan yang tinggi, kombinasi
obat yang sesuai dan tinggi serta lamanya pengobatan. Secara umum pada manusia
pengobatan dilakukan dengan pemberian terapi antibiotik seperti Tetrasiklin, Doksisiklin,
Streptomisin, dan Rifampisin. Terapi antibiotik harus dilakukan minimal enam minggu
hingga enam bulan. Hal ini disebabkan karena Brucella bersifat dorman di dalam tubuh
(Noor, 2006).
Kontrol Brucellosis pada ternak dilakukan dengan kombinasi manajemen
peternakan, program vaksinasi dan pemotongan hewan bersyarat (test and slaughter).
Bentuk kontrol dengan manajemen peternakan adalah apabila terdapat ternak yang
didiagnosis Brucellosis harus segera dipisahkan dari ternak lainnya. Selain itu jika
terdapat kejadian abortus, fetus dan membran fetus harus segera dilakukan pengujian di
laboratorium. Kemudian tempat kejadian abortus didesinfeksi secara menyeluruh dan
berkala (Noor, 2006). Sedangkan pencegahan dapat dilakukan dengan mengurangi
kontak dengan hewan, memakai alat pelindung diri saat berinteraksi dengan hewan, dan
mengolah produk hewan seperti susu dan daging hingga benar-benar matang sebelum
dikonsumsi. Peningkatan sanitasi perlu dilakukan seperti menjaga kebersihan dan
melakukan deinfeksi kandang (Novita, 2016).
Pemberantasan Brucellosis dilakukan dengan menggunakan pendekatan tahapan.
Pendekatan tahapan dilakukan untuk mengendalikan penyakit dari status daerah yang
tidak diketahui menjadi diketahui prevalensinya untuk mencapai status bebas penyakit.
Pendekatan ini terdiri dari metode pendekatan zona dan kompartementalisasi. Pendekatan
zona dilakukan untuk mengklasifikasikan zona berdasarkan tingkat prevalensi
Brucellosis di suatu daerah. Kompartementalisasi untuk pengendalian Brucellosis dapat
digunakan untuk melindungi populasi dari serangan penyakit dan memiliki status
kesehatan yang jelas dan diketahui.
Menurut Kurniawati dan Trisunuwati (2010), program pengendalian dan
pemberantasan Brucellosis pada sapi telah dilakukan oleh pemerintah dengan program
vaksinasi, potong bersyarat (test and slaughter) dan karantina serta pengendalian lalu-
lintas hewan. Sejak tahun 2005, program pengendalian Brucellosis diprioritaskan untuk
20
sapi perah di Pulau Jawa berupa vaksinasi terutama untuk daerah tertular dengan
prevalensi lebih dari 2% dan sapi potong bersyarat dengan prevalensi kurang dari 2%.
Pemerintah saat ini memfokuskan pemakaian vaksin B. abortus RB51 untuk sapi perah.
Meskipun demikian, usaha ini belum cukup efektif untuk membuat wilayah Indonesia
bebas Brucellosis karena kurangnya kesadaran peternak tentang adanya penyakit
Brucellosis menjadi salah satu utama terus terjadinya kasus penularan Brucellosis baik
pada hewan maupun manusia. Hal ini diperkuat oleh Kristiyanti dan Ui (2018), bahwa
tindakan edukasi melalui sosialisasi dan workshop tentang Good Breeding Practice
kepada peternak adalah penting untuk dilakukan secara berkelanjutan.
2.6 Uji Hemaglutinasi (HA) dan Uji Hemagulitnasi Inhibisi (HI)
Pengujian Haemagglutination (HA) dan Haemagglutination Inhibition (HI)
merupakan salah satu uji yang digunakan untuk mendeteksi titer antibodi terhadap virus
Avian Influenza yang menggunakan sampel serum hewan yang diduga terinfeksi. Uji HA
dan HI dilakukan berdasarkan sifat virus Avian Influenza yang dapat mengaglutinasi sel
darah merah dan kemampuan antibodi spesifik untuk menghambat aglutinasi tersebut.
Hemaglutinasi merupakan proses penggumpalan sel darah merah yang akan terlihat
seperti butir – butir pasir. Pengujian HA dan HI merupakan pengujian standar yang
direkomendasikan oleh OIE untuk mendeteksi keberadaan titer antibodi yang terdapat
dari serum yang diperiksa. Uji HI atau Haemagglutination Inhition memiliki prinsip
berupa ikatan antara antibody yang terkandung dalam serum yang diperiksa dan jumlah
titer antigen yang terkandung dalam serum yang digunakan sebanyak 4 HAU
(Haemagglutination Unit). Umumnya uji cukup sensitif dan memberikan hasil yang
spesifik terhadap antigen virus Avian Influenza (Hewajuli dan Dharmayanti, 2011).
European Union (EU) dan World Organization for Animal Health merekomendasikan
pengujian Haemaglutinin (HA) dan Haemaglutination Inhibition (HI) untuk menguji titer
antibodi AI dan mempertimbangakan sebagai “gold standard” dikarenakan uji
Haemaglutination Inhibition (HI) memiliki sensitifitas sebesar 98,8% dan memiliki ke
spesifikan 99,5%. Gold standard merupakan test terbaik yang tersedia, tes tersebut juga
sudah diterima secara luas dan sudah mendekati kebenaran.
21
2.7 Rapid Test
2.7.1 Salmonella pullorum
Prinsip pengujian rapid Salmonella pullorum adalah reaksi antara antigen
Salmonella pullorum dengan antibodi dari serum Prosedur pengujian rapid Salmonella
Pullorum dilakukan dengan mencampur serum yang akan diuji dengan antigen. Sebanyak
20 μl antigen dan 20 μl serum ayam diletakkan pada lempeng kaca dengan posisi
bersampingan menggunakan pipet mikro. Kemudian antigen dan serum dicampur
menggunakan alat pengaduk sehingga serum dan antigen tercampur secara merata.
Pembacaan reaksi aglutinasi dilakukan dua menit setelah pencampuran. Adanya
penggumpalan antara antigen dan serum menunjukkan bahwa serum tersebut
mengandung antibodi terhadap antigen spesifik Salmonella pullorum dan dicatat sebagai
sampel positif.
2.7.2 Mycoplasma gallisepticum (MG)
Prinsip pengujian rapid Mycoplasma gallisepticum adalah reaksi antara antigen
Mycoplasma gallisepticum dengan antibodi dari serum. Prosedur pengujian rapid
Mycoplasma gallisepticum dilakukan dengan cara menyiapkan sampel serum yang akan
diuji dan antigen Salmonella pullorum. Sebelum dilakukan pengujian serum dan antigen
disesuaikan suhunya dengan suhu ruang. Serum dan antigen masing-masing diambil
sebanyak 25 μl dicampur di atas agglutination plate. Hasil pencampuran antigen dan
serum dibaca setelah 2 menit sejak selesainya pencampuran serum dan antigen. Hasil
interpretasi positif atau negatif antibodi terhadap MG ditentukan berdasarkan pada ada
atau tidaknya reaksi aglutinasi.
2.7.3 Rose Bengal Test (RBT)
Rose Bengal Test atau RBT merupakan salah satu pengujian serologis dengan
metode aglutinasi untuk mendeteksi Brucellosis. Prinsip uji ini adalah mendeteksi adanya
antibodi terharap antigen Buffered Brucella sp. (BBA) dengan cara mencampur serum
darah sapi yang diduga terinfeksi Brucella sp. Antigen Brucella yang digunakan pada uji
RBT adalah antigen Brucella koloni halus yang diwarnai dengan Rose Bengal Reagent
dengan larutan penyangga pH 3,65. Kondisi pH netral pada uji RBT dapat mengukur
keberadaan IgM dan IgG, kondisi ini akan mengakibatkan inaktivasi dari IgM sementara
antibodi IgG tetap utuh sehingga akan didapatkan titer antibodi IgG yang akan bereaksi
dengan antigen RBT dan menimbulkan reaksi aglutinasi (Dwi dkk, 2018).
22
Uji RBT mempunyai sensitivitas yang tinggi namun dapat memberikan hasil
positif palsu terhadap vaksin Brucella abortus S19 (Prawira, 2014). Menurut Muslimin
dkk (2017), uji RBT memiliki tingkat sensitivitas mencapai 88% dan spesifitas mencapai
84%. Hal ini lebih tinggi jika dibandingkan dengan uji CFT yang hanya memiliki
sensitivitas 84%. Meskipun demikian RBT memiliki spesifitas 13,4% lebih rendah
disbanding uji CFT. Reaksi silang uji RBT terjadi akibat reaksi dengan antigen bakteri
enteric seperti Vibrio cholerae, Francisella tularensis dan Yersinia enterolitica. Meski
demikian, OIE (2018) menyebutkan bahwa uji RBT tidak dapat digunakan untuk
mendeteksi keberadaan B. ovis dan B. canis karena termasuk dalam kelompok RLPS. Hal
ini diperkuat oleh Nielsen and Wl (2010) yang menyatakan bahwa kelompok RLPS tidak
memiliki Immunosorbent O-Polysaccharide (OPS) seperti yang dimiliki oleh kelompok
SLPS. Komponen kimia ini yang akan berikatan dengan reagen pada uji RBT.
Persiapan alat dan bahan yang digunakan pada uji RBT antara lain reagen RBT,
cawan petri atau keramik putih, pengaduk steril, single channel pipet 10-100 μl, tabung
reaksi steril, kertas label, dan shaker. Sampel darah sapi dimasukkan pada tabung venoject
tutup merah agar terbentuk serum dan diberi label identitas. Suhu serum dan reagen RBT
harus disesuaikan dengan suhu kamar sebelum diuji. Serum dan reagen RBT masing-
masing sebanyak 25 μl diambil menggunakan mikropipet 10-100 μl diletakkan pada
cawan petri atau keramik putih secara bergantian. Cawan petri atau keramik putih
diletakkan di atas shaker selama 4 menit agar tercampur rata agar dapat diamati reaksi
aglutinasi yang terjadi (Prawira, 2014). Menurut Dwi dkk (2018), hasil dari uji RBT
terdiri dari hasil positif (++) yaitu terjadinya aglutinasi berupa pasir halus dengan cairan
jernih berbatas jelas dan hasil positif (+) yaitu terjadinya aglutinasi berupa pasir halus
dengan cairan kurang jernih berbatas tidak jelas. Sedangkan hasil negatif yaitu tidak
terjadi reaksi aglutinasi.
23
BAB III METODOLOGI
3.1 Lokasi dan Waktu Pelaksanaan
Pemeriksaan sampel uji HA HI dan Rapid test dilakukan di Labroratorium
Mikrobiologi dan Imunologi Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Brawijaya Malang
pada tanggal 14 Februari 2022.
3.2 Alat dan Bahan
3.2.1 Alat
Alat yang digunakan dalam pemeriksaan ini adalah microtiter plate, micropipet,
gelas objek, microtube, yellow tip, mechanical vibrator, spuit 3 ml, spuit 5 ml, tabung
falcon.
3.2.2 Bahan
Bahan yang digunakan paga pengujian serologis ini adalah PBS steril, Antigen
Avian influenza (AI), Antigen Newcastle disease (ND), Whole blood ayam 1%, sampel
serum ayam, serum positif Avian influenza (AI),serum positif Newcastle disease (ND),
Antigen Mycoplasma gallisepticum (MG), Antigen Salmonella pullorum, Antigen
Brucella abortus, dan sampel serum sapi.
3.3 Metode Kegiatan
3.3.1 Pengambilan Sampel
Sampel darah ayam dikoleksi dari 2 ayam domestik yang berumur sekitar satu
tahun dari kampus Fakultas Kedokteran Hewan UB Malang. Sampel darah ayam
dikoleksi darahnya melalui vena brachialis menggunakan spuit 3 ml yang sudah diberi
EDTA, kemudian sampel darah disimpan dalam kulkas sebelum dilakukan pengujian.
Sampel darah sapi diambil dari peternakan desa Kungkuk, kota Batu. Pengambilan
sampel darah sapi dilakukan melalui vena jugularis kemudian dikoleksi di tabung
venoject merah untuk mendapatkan serum darah.
3.3.2 Uji HA
Sampel darah ayam yang sudah dikoleksi dikeluarkan dari dalam kulkas,
kemudian dilakukan pemisahan whole blood dan serumnya dengan sentrifus pada
kecepatan 3000 rpm selama 15 menit. Setelah serum dan sel darah terpisah, serum diambil
dengan menggunakan micropipet dan dipisahkan ke tabung falcon lain untuk digunakan
sebagai sampel serum pada uji HI. Whole blood diencerkan menggunakan PBS dengan
perbandingan 1:3, kemudian disentrifus dengan kecepatan 2000 rpm selama 15 menit
24
sebanyak 3 kali. Kemudian RBC dilakukan pengenceran menjadi konsentrasi RBC 1%.
Pengencer PBS dimasukkan 25 µl dalam microplate sumuran A1-A12. Selanjutnya
dilakukan pengenceran antigen dengan cara memasukkan antigen ND dan AI sebanyak
25 µl ke sumuran A1, diambil 25 µl sumuran A1 lalu dimasukkan ke sumuran A2,
seterusnya sampai sumuran A11 dan sisa 25 µl sumuran A11 dibuang. Kemudian
ditambahkan sampel RBC 1% sebanyak 25 µl kedalam sumuran A1-A12. Diinkubasi
dalam suhu ruang selama 30 menit lalu dilakukan pengamatan hasil dan disesuaikan
dengan standart 4HA unit. Untuk memastikan standart titer antigen pada uji HA yang
telah dilakukan, dilakukakn uji back titrasi HA menggunakan antigen ND dan AI yang
sudah diencerkan sesuai pada hasil standart 4HA unit.
3.3.3 Uji HI
PBS sebanyak 25 µl dimasukkan kedalam sumuran microplate A1-A12,
kemudian dilakukan pengenceran sampel serum ayam yang didapatkan sebanyak 25 µl
dengan cara memasukkan serum sampel ayam sebanyak 25 µl ke sumuran A1, diambil
25 µl sumuran A1 lalu dimasukkan ke sumuran A2, seterusnya sampai sumuran A11 dan
sisa 25 µl sumuran A11 dibuang. Selanjutnya ditambahkan antigen ND dan AI hasil uji
HA kedalam sumuran microplate A1-A12 dan diinkubasi dalam suhu ruang selama 30
menit. Setelah 30 menit, ditambahkan RBC 1% kedalam sumuran microplate A1-A12
dan innkubasi kembali dalam suhu ruang selama 30 menit. Kemudian dilakukan
pengamatan hasil HA untuk melihat hasil titer antibodi.
3.3.4 Salmonella pullorum
Object glass yang sudah diberi label disiapkan dibagi menjadi dua bagian, bagian
sampel dan bagian kontrol sebagai perbandingan. Antigen Pullorum diteteskan ke object
glass pada bagian sampel dan kontrol, lalu dicampur dengan sampel serum ayam yang
sudah dikoleksi dengan perbandingan 1:1, kemudian dihomogenkan dan ditunggu selama
kurang lebih 2 menit dan dilakukan interpretasi hasil.
3.3.5 Mycoplasma gallisepticum (MG)
sampel dan bagian kontrol sebagai perbandingan. Antigen Mycoplasma diteteskan ke
object glass pada bagian sampel dan kontrol, lalu dicampur dengan sampel serum ayam
yang sudah dikoleksi dengan perbandingan 1:1, kemudian dihomogenkan dan ditunggu
selama kurang lebih 2 menit dan dilakukan interpretasi hasil.
25
3.3.6 Rose Bengal Test (RBT)
sampel dan bagian kontrol sebagai perbandingan. Antigen Brucella diteteskan ke object
glass pada bagian sampel dan kontrol, lalu dicampur dengan sampel serum ayam yang
sudah dikoleksi dengan perbandingan 1:1, kemudian dihomogenkan dan ditunggu selama
kurang lebih 2 menit dan dilakukan interpretasi hasil.
26
BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil
4.1.1 Uji HA
Tabel 4.4 Hasil Uji HA (Dokumentasi Pribadi, 2022)
Berdasarkan uji HA yang dilakukan pada virus ND (Newcastle disease)

didapatkan hasil uji positif yang ditunjukkan dengan ditemukan adanya hemaglutinasi
dan mendapatkan titer antigen 2 6. Kemudian untuk uji HA yang dilakukan pada virus AI
(Avian influenza) didapatkan hasil uji positif dengan titer antigen 2 5. Dari hasil tersebut
kemudian diencerkan dengan cara :
• Titer Antigen ND : 26
6
Pengenceran = Titer Antigen (HA) = 2 = 24 = 16 µl
4HAU 22
Untuk mendapat antigen virus ND sesuai standart 4HAU maka 1 bagian virus
ditambah dengan 15 bagian PBS.
• Titer Antigen AI : 25
5
Pengenceran = Titer Antigen (HA) = 2 = 23 = 8 µl
4HAU 22
Untuk mendapat antigen virus AI sesuai standart 4HAU maka 1 bagian virus
ditambah dengan 7 bagian PBS
Selanjutnya, untuk memastikan apakah antigen virus ND dan AI yang dihasilkan
dari pengenceran HA benar dan sesuai standart 4HAU, dilakukan uji back titrasi HA.
27
Tabel 4.5 Hasil Uji Back Titrasi HA
Berdasarkan uji back titrasi HA yang dilakukan pada virus ND (Newcastle disease)
didapatkan hasil uji positif yang ditunjukkan dengan ditemukan adanya hemaglutinasi
dan mendapatkan titer antigen 2 2. Kemudian hasil uji pada virus AI (Avian influenza)
didapatkan hasil uji positif dengan titer antigen 2 2. Nilai tersebut sudah sesuai dengan
standart 4HA unit yaitu 22. Kemudian dapat dilanjutkan uji HI menggunakan titer antigen
HA.
4.1.2 Uji HI
Tabel 4.6 Hasil Uji HI
28
Berdasarkan uji HI yang dilakukan didapatkan hasil uji positif yang ditunjukkan
dengan ditemukan adanya endapan eritrosit pada dasar plate. Terjadinya endapan
diakibatkan oleh adanya antibodi spesifik pada sampel serum yang dicampur. Hasil uji
HI sampel 1 didapatkan titer antibodi 2 10 terhadap virus ND dan hasil uji HI sampel 2 ND
didapatkan titer antibodi 29. Pada hasil uji HI sampel 1 tidak didapatkan titer antibodi
terhadap virus AI, sedangkan pada sampel 2 didapatkan titer antibodi sebanyak 2 9. Untuk
membandingkan hasil positif uji HI, dilakukan pengujian kontrol positif pada titer
antibodi terhadap ND dan AI. Kontrol positif uji HI pada ND didapatkan hasil 2 7, dan
kontrol positif HI pada AI didapatkan hasil 24.
4.1.3 Rapid Test
• Salmonella pullorum
Pengujian rapid test Salmonella pullorum menggunakan 3 sampel, yaitu serum
ayam sampel 1, serum ayam sampel 2, dan serum ayam sampel kontrol (+). Sampel
kontrol (+) yang diberikan serum positif Salmonella pullorum didapatkan hasil positif
yang ditandai dengan adanya aglutinasi dan cairan di sekitarnya jernih yang digunakan
sebagai uji pembanding. Hasil dari serum ayam sampel 1 didapatkan hasil negatif yang
ditandai dengan tidak adanya aglutinasi dan pada hasil uji rapid test serum ayam sampel 2
didapatkan hasil negatif yang ditandai dengan tidak adanya aglutinasi. Hasil uji cepat
Salmonella pullorum dapat dilihat pada Gambar 4.1.
29
Gambar 4.1 Hasil Rapid Test Salmonella pullorum (Dokumentasi Pribadi, 2022)
• Mycoplasma gallisepticum
Pengujian rapid test Mycoplasma gallisepticum menggunakan 3 sampel, yaitu
serum ayam sampel 1, serum ayam sampel 2, dan serum ayam sampel kontrol (+). Sampel
kontrol (+) yang diberikan serum positif Mycoplasma gallisepticum didapatkan hasil
positif yang ditandai dengan adanya aglutinasi yang digunakan sebagai uji pembanding.
Hasil dari serum ayam sampel 1 didapatkan hasil negatif yang ditandai dengan tidak
adanya aglutinasi, sedangkan serum ayam sampel 2 juga didapatkan hasil negatif yang
ditandai dengan tidak adanya aglutinasi. Hasil uji cepat Mycoplasma gallisepticum dapat
dilihat pada Gambar 4.2.
Gambar 4.2 Hasil Rapid Test Mycoplasma gallisepticum (Dokumentasi Pribadi, 2022)
• Rose Bengal Test

Hasil uji RBT Brucella sp. menggunakan 3 sampel, yaitu serum sapi sampel 1,
serum sapi sampel 2, dan serum sapi sampel kontrol (+). Sampel kontrol (+) yang
diberikan serum positif Brucella sp didapatkan hasil positif yang ditandai dengan adanya
aglutinasi yang digunakan sebagai uji pembanding. Hasil dari serum sapi sampel 1
didapatkan hasil negatif yang ditandai dengan tidak adanya aglutinasi, sedangkan serum
sapi sampel 2 juga didapatkan
30
hasil negatif yang ditandai dengan tidak adanya aglutinasi. Hasil RBT dapat dilihat pada
Gambar 4.3.
Gambar 4.3 Hasil RBT (Dokumentasi Pribadi, 2022)

4.2 Pembahasan
4.2.1 Uji HA
Uji HA (Hemaglutination Assay) termasuk uji serologis yang berguna untuk
mendeteksi mikrooganisme yang memiliki glikoprotein permukaan hemaglutinin dan
serta untuk mengukur titer mikroorganisme tersebut. Ag bentuk partikel direaksikan
dengan Ab spesifik membentuk aglutinasi. Tujuan Uji HA adalah mendeteksi
perkembangan virus yang mengandung Hemagglutinin (Seperti virus ND dan AI) melalui
sampel eritrosit baik dengan pengujian cepat atau pengujian lambat, dan dapat digunakan
untuk mengukur titer antigen. Faktor yang mempengaruhi adalah tingkat keasaman (pH),
sumber eritrosit, dan suhu merupakan kondisi yang penting untuk diperhatikan karena
mempengahuri keberhasilan kejadian hemaglutinasi oleh virus. Selain itu, peristiwa
hemaglutinasi juga dipengaruhi oleh antibodi spesifik (Yesica, 2013).
Pengujian dilakukan dengan menggunakan sampel darah berupa eritrosit. Jika
terdapat endapan homogen pada dasar object glass, maka dapat dinyatakan HA + (positif).
Sebaliknya jika tidak terjadi perubahan (tidak ada endapan homogen), dapat dinyatakan
dengan HA – (negatif). Penggumpalan eritrosit terjadi karena asam sialat pada permukaan
eritrosit terikat oleh hemagglutinin yang dimiliki oleh virus (Yesica, 2013).
Pada pengujian kali ini didapatkan hasil uji HA yang dilakukan pada virus ND
(Newcastle disease) didapatkan hasil uji positif yang ditunjukkan dengan ditemukan
adanya hemaglutinasi dan mendapatkan titer antigen 2 6. Kemudian untuk uji HA yang
dilakukan pada virus AI (Avian influenza) didapatkan hasil uji positif dengan titer antigen
25.
31
4.2.2 Uji HI
Haemagglutination Inhibiton (HI) atau Hambatan Hemaglutinasi merupakan
pengujian yang ditujukan untuk mengetahui titer antibodi, baik antibodi karena kasus
infeksi maupun antibodi hasil vaksinasi. Uji HI juga bermanfaat untuk melakukan
indentifikasi virus dengan menerapkan prinsip antibodi spesifik. Berbeda dengan uji HA,
uji HI menunjukkan hasil positif apabila terdapat endapan eritrosit. Sedangkan hasil
negatif ditunjukkan tanpa adanya endapan eritrosit (Ernawati, 2019).
Faktor yang mempengaruhi sama seperti uji HA yaitu tingkat keasaman (pH),
sumber eritrosit, dan suhu merupakan kondisi yang penting untuk diperhatikan karena
mempengahuri keberhasilan kejadian hemaglutinasi oleh virus. Tujuan Uji HI dapat
digunakan untuk mengukur titer antibodi atau antiserum agar diketahui status kekebalan
tubuh setelah dilakukan vaksinasi virus. Uji HI dapat digunakan juga untuk
mengidentifikasi suatu virus menggunakan antigen spesifik (Ernawati, 2019).
Berdasarkan uji HI yang dilakukan didapatkan hasil uji positif yang ditunjukkan
dengan ditemukan adanya endapan eritrosit pada dasar plate. Terjadinya endapan
diakibatkan oleh adanya antibodi spesifik pada sampel serum yang dicampur. Hasil uji
HI sampel 1 didapatkan titer antibodi 2 10 terhadap virus ND dan hasil uji HI sampel 2 ND
didapatkan titer antibodi 29. Pada hasil uji HI sampel 1 tidak didapatkan titer antibodi
terhadap virus AI, sedangkan pada sampel 2 didapatkan titer antibodi sebanyak 2 9. Untuk
membandingkan hasil positif uji HI, dilakukan pengujian kontrol positif pada titer
antibodi terhadap ND dan AI. Kontrol positif uji HI pada ND didapatkan hasil 2 7, dan
kontrol positif HI pada AI didapatkan hasil 24.
4.2.3 Rapid Test
Rapid test adalah sebuah metode skrining awal yang digunakan untuk mendeteksi
antibodi, yaitu IgM dan IgG, yang diproduksi untuk melawan virus. IgM
(Immunoglobulin M) merupakan jenis antibodi yang dihasilkan oleh tubuh saat pertama
kali terinfeksi bakteri atau kuman lainnya, yang berperan sebagai garis pertahanan
pertama tubuh untuk melawan infeksi. Peningkatan antibodi IgM akan meningkat dalam
waktu singkat saat tubuh mengalami infeksi. Sedangkan IgG (Immunoglobulin G) adalah
antibodi yang paling banyak terdapat dalam darah dan cairan tubuh lainnya. Antibodi ini
bertugas melindungi dari infeksi dengan “mengingat” kuman, bakteri, atau virus yang
32
pernah hadapi sebelumnya. Jika kuman, bakteri, atau virus kembali, maka sistem
kekebalan tubuh akan melakukan “serangan” (Ernawati, 2019).
Tes cepat atau rapid test yang dimaksud di sini hanyalah sebagai pemeriksaan
skrining atau pemeriksaan penyaring, bukan sebagai pemeriksaan yang dilakukan untuk
mendiagnosa infeksi virus dan bakteri. Prinsip rapid test adalah campuran sampel yang
diberikan serum positif bakteri atau virus yang akan diujikan, jika terdapat aglutinasi
dapat diartikan sampel tersebut hasilnya positif, sedangkan jika tidak adanya aglutinasi
dapat diartikan sampel tersebut hasilnya negative bakteri atau virus tersebut (Ernawati,
2019).
Untuk pengujian rapid test Salmonella pullorum menggunakan 3 sampel, yaitu
serum sampel 1, serum sampel 2, dan serum sampel kontrol (+). Sampel kontrol (+) yang
diberikan serum positif Salmonella pullorum didapatkan hasil positif yang ditandai
dengan adanya aglutinasi dan cairan di sekitarnya jernih yang digunakan sebagai uji
pembanding. Hasil dari serum sampel 1 dan 2 didapatkan hasil negatif yang ditandai
dengan tidak adanya aglutinasi.
Untuk pengujian rapid test Mycoplasma gallisepticum menggunakan 3 sampel,
yaitu serum sampel 1, serum sampel 2, dan serum sampel kontrol (+). Sampel kontrol (+)
yang diberikan serum positif Mycoplasma gallisepticum didapatkan hasil positif yang
ditandai dengan adanya aglutinasi yang digunakan sebagai uji pembanding. Hasil dari
serum sampel 1 didapatkan hasil negatif yang ditandai dengan tidak adanya aglutinasi,
sedangkan serum sampel 2 juga didapatkan hasil negatif yang ditandai dengan tidak
adanya aglutinasi.
Hasil uji RBT Brucella sp. juga sama seperti uji rapid test lainnya yaitu
menggunakan 3 sampel, yaitu serum sampel 1, serum sampel 2, dan serum sampel kontrol
(+). Sampel kontrol (+) yang diberikan serum positif Brucella sp didapatkan hasil positif
yang ditandai dengan adanya aglutinasi yang digunakan sebagai uji pembanding. Hasil
dari serum sampel 1 didapatkan hasil negatif yang ditandai dengan tidak adanya
aglutinasi, sedangkan serum sampel 2 juga didapatkan hasil negatif yang ditandai dengan
tidak adanya aglutinasi.
33
BAB 5 PENUTUP
5.1 Kesimpulan
Pada penelitian ini dilakukan uji HA (Hemaglutination Assay) dan HI
(Haemaglutination Inhibiton) yang akan dilakukan untuk mengetahui hasil titer antigen
pada hasil uji HA dalam mendeteksi antigen virus Avian Influenza dan Newcastle
Disease, mengetahui hasil titer antibodi pada uji HI dalam mendeteksi antigen virus Avian
Influenza dan Newcastle Disease, dan mengetahui hasil deteksi antibody Pullorum,
Mycoplasma gallisepticum, dan Brucellosis menggunakan metode Rapid Test (RBT).
Dan berdasarkan uji HA dan HI, sampel mendapatkan hasil uji positif terhadap virus
Avian Influenza dan Newcastle Disease. Dan untuk Rapid Test, sampel mendapatkan
hasil uji negatif terhadap Pullorum, Mycoplasma gallisepticum dan Brucellosis.
5.2 Saran
Setelah melakukan pengujian ini maka saran yang dapat diberikan adalah perlu
adanya penambahan fasilitas Laboratorium untuk peneguhan diagnosa penyakit Avian
Influenza dan Newcastle Disease, dengan uji Polymerase Chain Reaction (PCR) dan
supaya bisa melakukan pemantauan terhadap penyakit Avian Influenza dan Newcastle
Disease agar bisa menjadi status daerah bebas Avian Influenza dan Newcastle Disease
tersebut.
34
DAFTAR PUSTAKA
Amanu, S., Riyanto, I.B., 2004. Kejadian Infeksi Bakteri Mycoplasma galliseptcum pada
Kalkun, Itik, Entok dan Angsa di Kabupaten Slemanm Daerah Istimewa
Yogyakarta. Jurnal Sain Veteriner 22.
Berhanu, G., Fulasa, A., 2020. Ullorum Disease and Fowl Typhoid in Poultry: A Review.
British Journal of Poultry Sciences, 9, 48–56.
Cadmus, S.I.B., Adesokan, H.K., Stack, J., 2008. The use of the milk ring test and rose
bengal test in brucellosis control and eradication in Nigeria. Journal of the
South African Veterinary Association 79, 113–115.
Corbel, M.M.J., 2006. Brucellosis in humans and animals. WHO Library Catalogue in
Publication Data 1–88.
Dey, S., Chellappa, M.M., Gaikwad, S., Kataria, J.M., Vakharia, V., 2014. Genotype
Characterization of Commonly Used Newcastle Disease Virus Vaccine
Strains of India. PLoS ONE 9.
Dortmans, J.C., Koch, G., Rottier, P.J., Peeters, B.P., 2011. Virulence of Newcastle
Disease Virus : What Is Known So Far? Veterinary Research 42.
Dwi, W.K., Tyasningsih, W., Praja, R.N., Hamid, I.S., Sarudji, S., Purnama, M.T.E.,
2018. Deteksi Antibodi Brucella pada Sapi Perah di Kecamatan Purwoharjo
Kabupaten Banyuwangi dengan Metode Rose Bengal Test (RBT). J. Med.
Vet. 1, 142.
Easterday, B.C., 1997. Influenza dalam Disiase of Poultry. Lowa State University Press
Ames 582–605.
Ekaningtias, M., Wuryastuty, H., Wasito, W., 2017. Pendekatan Diagnosis Avian
Influenza Virus dan Newcastle Disease Virus pada Kasus Lapangan Ayam
Petelur: Imunopatologis Streptavidin Biotin. Jurnal Sain Veteriner 35, 118.
Elytha, F., 2011. Sekilas Tentang Avian I nfluenza (AI). Jurnal Kesehatan Masyarakat
6, 4.
Ernawati, R., 2019. Pemeriksaan Virologik dan Serologik. Universitas Airlangga,

Surabaya.
Ferlito, C., Respatiadi, H., 2019. Reformasi Kebijakan pada Industri Unggas di Indonesia.
Center for Indonesian Policy Studies.
Garjito, T.A., 2013. Virus Avian Influenza H5n1 : Biologi Molekuler Dan Potensi
Penularannya Ke Unggas Dan Manusia. Jurnal Vektora 5, 13.
Handayani, W., Dwi Aristyawan, A., Ega Safitri, O., 2020. Uji In Vitro Interaksi
Cefadroxil dengan Pisang dan Susu terhadap Bakteri Staphylococcus aureus
dengan Metode Difusi Cakram. Pharmasci 5, 87–91.
35
Hewajuli, D.A., Dharmayanti, N.L.P.I., 2011. Patogenitas Virus Newcastle Disease pada
Ayam. WARTAZOA 21.
Isnawati, R., Wuryastuti, H., Wasito, R., 2019. Peneguhan diagnosis Avian Influenza
pada Ayam Petelur yang Mengalami Gejala Penurunan Produksi. Jurnal Sain
Veteriner 37, 1. https://doi.org/10.22146/jsv.40602
Kristiyanti, F., Ui, A., 2018. Oral Presentation ( AEVI-13 ) Investigasi Outbreak Bovine
Brucellosis di Desa Hargobinangun Kecamatan Pakem Kabupaten Sleman
Tahun 2017.
Kurniawati, U., Trisunuwati, P., 2010. Pengaruh Vaksinasi Brucellosis Pada Sapi Perah
Dengan Berbagai Paritas Terhadap Efisiensi Reproduksi 10.
Maclachlan, N.J., Dubovi, E.J., 2011. Fenner’s veterinary virology, 4th ed. Elsevier, AP.
Mecvey, D.S., Chengappa, M.M., 2013. Veterinary Microbiology, 3rd ed. John Willey &
Sons.
Miller, P.J., Afonso, C.L., 2011. Newcastle Disease Virus, in: John Wiley & Sons, Ltd
(Ed.), ELS. Wiley. https://doi.org/10.1002/9780470015902.a0001077.pub3
Muslimin, L., Bangsawan, A.T., Utami, S., 2017. Brucellosis Identification On Farmers In
Pinrang District 6.
Nielsen, K., Wl, Y., 2010. Serological Diagnosis Of Brucellosis 89, 65–89.
Noor, S.M., 2006. Brucellosis: Penyakit Zoonosis yang Belum Banyak Dikenal di
Indonesia 30, 31–39.
Novita, R., 2016. Brucellosis : Penyakit Zoonosis Yang Terabaikan 12, 6.
OIE, 2018. Brucellosis (Brucella abortus, B. melitensis adn B. Suis), in: Terrestrial
Manual.
Pinotoan, A.A.S., 2018. Identifikasi Brucellosis pada Kambing dengan Metode Kultur
Bakteri di Balai Besar Veteriner Maros (SKRIPSI). Universitas Hasanuddin,
Makassar.
Poester, F.P., Samartino`, L.E., Santos, R.I., 2013. Pathogenesis and pathobiology of
brucellosis in livestock. OIE Revue Scientifique et Technique 32, 105–115.
Pranatha, W.D., Irhas, R., Arhiono, H.N.P., Wayan, N., Widyasanti, H., Kardena, I.M.,
2018. Laporan Kasus Newcastle Diseases Dan Avian Influenza Pada Ayam
Buras. Indonesia Medicus Veterinus 10.
Prawira, S.Y., 2014. Pemeriksaan brucella sp. pada sampel penyakit 26.
Pudjiatmoko, 2014. Manual Penyakit Unggas, 2nd ed. Kementerian Pertanian, Jakarta.
36
Putra, I.P.C., Wasito, R., Wuryastuty, H., 2020. Penambahan Water Additive Kimchi
Dapat Mencegah Infeksi Alami Flu Burung (Avian Influenza) pada Ayam
Pedaging. Jurnal Veteriner 21, 8.
Radji, M., 2006. Avian Influenza A (H5N1): Patogenesis, Pencegahan Dan Penyebaran
Pada Manusia. Pharm. Sci. Res. 3.
Singh, S.V., Kumar, A., Gupta, S., 2014. Therapeutic Management of Bovine Brucellosis
in Endemically Infected Dairy Cattle Herd of Native Sahiwal Breed.
Infectious Diseases of Animals and Global Health 1.
WHO, 2007. Influenza Research at The Human and Animal Interface: Report of WHO
Working Group. WHO/CDS/EPR/GIP/2007.3, Switzerland.
Yesica, R., 2013. Deteksi Antibodi Avian Influenza (Subtipe H5) Dengan Uji HI
(Hemagglutination Inhibition) Pada Serum Merpati (Columba livia) Yang
Diambil Dari Pasar Banjaran Kota Kediri (SKRIPSI). Universitas Airlangga,
Surabaya.
37
BAGIAN III
STUDI
KASUS
DAFTAR ISI
DAFTAR ISI......................................................................................................................ii
DAFTAR GAMBAR.........................................................................................................iii
1.1 Etiologi......................................................................................................................1
1.2 Epidemiologi.............................................................................................................1
1.3 Transmisi...................................................................................................................1
1.4 Gejala Klinis..............................................................................................................2
1.5 Diagnosa....................................................................................................................3
1.6 Patogenesis................................................................................................................4
1.7 Patologi.....................................................................................................................4
1.8 Kontrol dan Pencegahan............................................................................................5
1.9 Pengobatan................................................................................................................7
DAFTAR PUSTAKA.........................................................................................................8
ii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1.1 Morfologi Virion Capripox...........................................................................1
Gambar 1.2 Skema Transmisi Lumpy Skin Disease Virus..............................................2
Gambar 1.3 Gejala Klinis pada Penyakit Lumpy Skin Disease.......................................3
iii
1.1 Etiologi
Lumpy Skin Disease Virus (LSDV) merupakan penyakit pada hewan ternak yang
disebabkan oleh virus famili Poxviridae genus Capripoxvirus. Virus ini berikatan erat
secara genetik dengan virus cacar pada domba dan kambing. Dibandingkan dengan
poxvirus lain, genom DNA untai ganda capripoxvirus relatif kecil, rata-rata sekitar 150
kilo-base pair (kbp) (bandingkan dengan genom avipoxvirus sekitar 300 kbp) (Coetzer,
2018).
Gambar 1.1 Morfologi Virion Capripox (Coetzer, 2018).
1.2 Epidemiologi
Lumpy Skin Disease Virus (LSDV) memiliki inang spesifik yaitu sapi dengan jenis
Bos indicus dan Bos taurus, dan kerbau Bubalus bubalis. Virus tidak bersifat zoonosis,
dan pada beberapa kasus dapat menyerang sapi dengan jenis F. Holstein atau sapi
persilangan yang menunjukkan morbiditas dan mortalitas yang lebih tinggi (Alkhamis
and Vander, 2016).
LSDV muncul secara epidemik atau sporadis. Namun infeksi baru sering muncul di
daerah yang jauh dari wabah penyakit tersebut. LSDV seringkali muncul pada saat cuaca
panas dan lembab, namun jarang juga terjadi pada cuaca yang dingin. Vektor serangga
seperti lalat menjadi salah satu vektor utama penyebab penyebaran penyakit LSDV.
Penularan lain seperti kontak langsung, lingkungan juga dapat berkontribusi pada
penyebaran penyakit LSDV (Alkhamis and Vander, 2016).
1.3 Transmisi
LSDV diperkirakan ditularkan oleh vektor arthropoda. Nyamuk, lalat penggigit
(misalnya, Stomoxys calcitrans, Biomyia fasciata), nyamuk Culicoides dan caplak
Amblyomma hebraeum, Rhipicephalus spp. Dianggap sebagai vektor mekanik.
Kelangsungan hidup virus yang berkepanjangan telah dilaporkan di beberapa vektor.
1
Aedes aegypti yang terinfeksi menular selama 6 hari. Kontak langsung juga menjadi
sumber infeksi penyakit ini. Pakan yang terkontaminasi juga kemungkinan menjadi
sumber paparan, dan ternak dapat terinfeksi secara langsung dari nodul kulit atau darah
hewan yang terinfeksi (Neething and Knopyelsiekte, 2017).
Gambar 1.2 Skema Transmisi Lumpy Skin Disease Virus (Sendow dkk, 2021)
Pada sapi, LSDV telah terdeteksi di kulit lesi, air liur, sekresi pernapasan, susu dan
air mani. Hewan yang terinfeksi dapat menularkan LSDV terlepas dari apakah hewan
tersebut terdapat gejala adanya lesi atau tidak. Virus LSDV ini bertahan hingga 35 hari
pada kulit yang kering, 18 hari pada udara, dan selama berbulan-bulan virus ini dapat
bertahan dari sinar matahari. Pada 4°C (39°F), LSDV tetap bertahan selama 6 bulan
dalam kultur jaringan cairan (Neething and Knopyelsiekte, 2017).
1.4 Gejala Klinis
Gejala klinis LSD dipengaruhi oleh umur, ras dan status imun ternak. Tanda klinis
utama LSD adalah lesi kulit berupa nodul berukuran 1-7 cm yang biasanya ditemukan
pada daerah leher, kepala, kaki, ekor dan ambing. Pada kasus berat nodul-nodul ini dapat
ditemukan di hampir seluruh bagian tubuh. Munculnya nodul ini biasanya diawali dengan
demam hingga lebih dari 40.5oC. Nodul pada kulit tersebut jika dibiarkan akan menjadi
2
lesi nekrotik dan ulseratif. Tanda klinis lainnya yaitu lemah, adanya leleran hidung dan
mata, pembengkakan limfonodus subscapula dan prefemoralis, serta dapat terjadi oedema
pada kaki. Selain itu, LSD juga dapat meyebabkan abortus, penurunan produksi susu pada
sapi perah, infertilitas dan demam berkepanjangan (Yadav, 2020).
Gambar 1.3 Gejala Klinis pada Penyakit Lumpy Skin Disease (Yadav, 2020)
1.5 Diagnosa
Diagnosis LSD di lapangan diawali dengan pengamatan gejala klinis dan didukung
dengan data historis lokasi kejadian. Diagnosis definitis LSD hanya dapat dikonfirmasi
melalui pemeriksaan laboratorium. Uji laboratorium yang umum digunakan untuk
konfirmasi kasus LSD adalah Polymerase Chain Reaction (PCR). Sampel terbaik yang
digunakan untuk uji adalah sampel dari lesi kulit. Selain itu, sampel lain yang dapat
digunakan yaitu darah (whole blood), swab hidung dan air liur. Uji lain yang dapat
digunakan untuk deteksi LSD adalah isolasi virus, uji serologis yaitu Enzyme-linked
Immunosorbent Assay (ELISA), Indirect Fluorescent Antibody Test (IFAT), Indirect
Immunofluorescence Test (IIFT), Virus Neutralization Test (VNT), Serum Neutralization
Test (SNT), dan uji Imunohistochemistry (IHC). Pada pemeriksaan post mortem
ditemukan nodul-nodul pada otot, membran mukosa mulut, hidung, saluran pencernaan,
paru-paru, hingga pada testis dan vesika urinaria (Beard, 2016).
Diagnosis banding LSD adalah pseudo-lumpy skin disease yang disebabkan oleh
Bovine Herpesvirus-2 dengan gejala klinis yang lebih ringan dan berlangsung lebih
3
singkat dibanding LSD, dermatophilosis, ringworm, gigitan serangga, rinderpest,
demodekosis, infestasi Hypoderma bovis, bovine papular stomatitis, urtikaria, cutaneous
tuberculosis, dan onchocercosis (Sprygin et al., 2019).
1.6 Patogenesis
Inokulasi subkutan atau intradermal sapi dengan LSDV biasanya menghasilkan
pengembangan pembengkakan lokal di tempat inokulasi setelah empat sampai tujuh hari
dan pembesaran kelenjar getah bening regional sementara erupsi umum nodul kulit
biasanya terjadi tujuh sampai 19 hari setelah inokulasi. diinokulasi secara intravena lebih
cenderung untuk mengembangkan lesi umum dan penyakit yang lebih parah. Namun,
tanda-tanda klinis dan patologi bervariasi setelah infeksi alami dan eksperimental.
Penyelidikan eksperimental awal menunjukkan bahwa viremia bertahan selama sekitar
empat hari. Namun, dalam penelitian yang lebih baru yang menggunakan metode
diagnostik yang lebih sensitif, materi genom virus dapat terdeteksi oleh PCR hingga
delapan hari (Coetzer, 2018).
Setelah infeksi eksperimental LSDV hadir di nodul kulit, kelenjar getah bening, hati,
ginjal, air liur, hidung, mukosa dan semen hewan yang terinfeksi. Tingkat tinggi dan
pelepasan virus juga ditemukan di mukosa hidung hewan yang terkena. Virus telah
didemonstrasikan secara mikroskopis elektron dalam keratinosit di epidermis, dan
fibroblas dan sel endotel dan perisit pembuluh darah di dermis di bagian yang terkena
kulit. Imunohistokimia mengungkapkan bahwa beberapa jenis sel yang berbeda mungkin
mengandung antigen LSDV, termasuk keratinosit, epitel folikel rambut, dan fibroblas dan
makrofag di dermis, subkutis dan kelenjar getah bening (Coetzer, 2018).
1.7 Patologi
Lesi makroskopik dari kasus LSD berat yang khas akan meninggalkan sedikit
keraguan untuk mengidentifikasi penyakit yang sebenarnya, tetapi kasus yang kurang
khas dan lebih ringan harus dibedakan dari kondisi lain. Meskipun badan inklusi
intracytoplasmic di keratinosit di hematoxylin dan eosinstained bagian dari nodul kulit
akut dapat mendukung diagnosis LSD, inklusi ini tidak selalu hadir dalam semua kasus
akut dan tidak terlihat pada lesi kulit subakut dan kronis (Coetzer, 2018).
Metode imunohistokimia yang lebih spesifik, misalnya pewarnaan
imunoperoksidase pada bagian jaringan, dapat digunakan untuk mendemonstrasikan
virus pada lesi dan jaringan kulit yang difiksasi formalin. Imunohistokimia menggunakan
4
antibodi monoklonal digunakan untuk mendeteksi antigen LSDV pada nodul kulit dari
hewan dengan akut LSD, serta dalam beberapa kasus penyakit subakut atau kronis.
Sensitivitas pengujian ini adalah sebanding dengan PCR (Coetzer, 2018).
1.8 Kontrol dan Pencegahan
Menurut WHO, negara-negara dalam Asia Tenggara seperti Brunei Darussalam,
Indonesia, Malaysia, dan Filipina termasuk dalam daerah dengan nilai resiko terjadinya
LSD rendah. Di Indonesia sendiri, belum ada laporan kejadian LSD sehingga dinyatakan
bebas terhadap penyakit ini. Meski demikian, perlu diingat bahwa LSD merupakan
penyakit eksotik bagi Indonesia. Tentunya pengenalan atau penyuluhan tentang penyakit
LSD sangat penting dilakukan oleh dokter hewan lapang kepada pemilik ternak. Sehingga
antisipasi dapat dilakukan lebih awal bisa terdapat penyakit yang dicurigai LSD.
Pencegahan dan pengendalian LSD dapat dilakukan dengan pelaporan aktif kasus
penyakit (disease reporting), vaksinasi, pembatasan lalu lintas ternak, karantina ketat,
kontrol vektor, dan apabila memungkinkan dapat dilakukan stamping out (Sendow dkk,
2021).
• Disease Reporting
Dokter hewan yang menemukan atau mencurigai gejala klinis merujuk LSD pada
ternak harus mengikuti pedoman nasional yang berlaku untuk pelaporan penyakit
(Rosche et al., 2020).
• Vaksinasi
Vaksinasi merupakan langkah terbaik yang memungkinkan secara ekonomi untuk
mengendalikan LSD. Sejauh ini terdapat 3 macam vaksin untuk pencegahan dan
penanggulangan LSD, yaitu vaksin homolog dan heretolog, serta vaksin inaktif yang baru-
baru ini dikembangkan. Vaksin homolog terdiri dari virus LSD live yang dilemahkan.
Vaksin heterolog terdiri dari virus sheep pox atau goat pox yang dilemahkan
(SPPV/GPPV). Namun, perlu dipertimbangkan efek samping seperti penurunan produksi
susu pada pemberian vaksin (umumnya 7 hari pasca vaksinasi). Mengingat DNA vaksin
LSD dapat dideteksi pada nodul, susu, darah dan saliva sapi yang divaksinasi, maka
pemberian vaksin LSD harus tidak dalam keadaan laktasi, dan diamati dengan iklim
lingkungan dan musim, yang berpengaruh terhadap meningkatnya populasi vektor
mekanik. Selain itu, akhir-akhir ini telah dikembangkan vaksin bivalen rekombinan, yang
dilaporkan meminimalkan efek samping (Sendow dkk, 2021).
5
• Pembatasan Lalu Lintas dan Karantina Ternak
Lalu lintas ternak merupakan risiko utama penyebaran LSDV, sehingga diperlukan
karantina sebelum mengizinkan hewan masuk atau keluar dari suatu wilayah. Infeksi
ringan dan hewan subklinis akan menyebarkan penyakit melalui lalu lintas ternak dan
perdagangan. Selain itu hewan yang menunjukkan tanda klinis parah dengan lesi kulit
harus dipisahkan dari ternak yang lain karena nodul ini mengandung titer virus yang
tinggi. Ternak yang belum divaksinasi yang berasal dari zona yang terkena dampak harus
dilarang atau diatur secara ketat (Sendow dkk, 2021).
• Vector Control
Pengendalian vektor merupakan salah satu tindakan yang tidak dapat mencegah
infeksi atau penyebaran LSD namun tetap penting untuk dilakukan mendukung dalam
pencegahan dan pengendalian LSD itu sendiri. Pengendalian vektor dapat dilakukan
penggunaan insektisida secara teratur di area peternakan dan menyeluruh. Pemakaian
senyawa kimia ini harus mempertimbangan waktu pemerahan susu dan pemotongan
daging agar tidak mengkontaminasi dan malah menyebabkan racun bagi hasil ternak.
Selain itu, penggunaan insektisida dalam skala besar tidak dianjurkan karena dapat
membahayakan keseimbangan ekologi dan serangga lain yang berguna seperti lebah
madu. Menurut FAO, jaring yang disemprot atau diberi insektisida dianggap efektif untuk
mengurangi vektor pada kandang sapi (Rosche et al., 2020).
• Stamping Out
Ketika penyakit muncul untuk pertama kalinya di negara bebas penyakit, stamping-
out hewan yang terinfeksi merupakan upaya pencegahan dan pengendalian yang paling
efisien sebelum terjadi wabah. Namun kebijakan ini masih belum dapat diterima dan
diaplikasikan di beberapa negara, terutama pada negara berkembang seperti Indonesia
mengingat dampak ekonomi yang akan mengikutinya. Sehingga biaya yang dikeluarkan
sebagai kompensasi sangat tinggi. Di samping itu, kondisi subklinis pada sapi yang
terinfeksi LSD yakni tanpa menunjukkan gejala klinis, serta waktu viremia yang pendek
akan menyulitkan deteksi penyakit ini. Oleh karena itu, teknik diagnosa yang cepat dan
akurat sangat diperlukan untuk deteksi dini LSD agar penyebarannya juga dapat
diantisipasi (Sendow dkk, 2021).
6
1.9 Pengobatan
Tidak ada pengobatan khusus untuk penyakit Lumpy Skin Disease (LSD), tetapi
perawatan suportif, termasuk antibiotik yang diperlukan untuk infeksi bakteri sekunder,
dapat membantu. Penutupan luka digunakan untuk mengurangi serangan lalat dan infeksi
sekunder (Beard, 2016).
7
DAFTAR PUSTAKA
Alkhamis, M.A., Vander, W.K., 2016. Spatial and Temporal Epidemiology of Lumpy
Skin Disease in the Middle East, 2012–2015. Front. Vet. Sci. 3.
Beard, P.M., 2016. Lumpy skin disease: A direct threat to Europe. Veterinary Record
178, 557–558.
Coetzer, J.A.W., 2018. Lumpy skin disease. University of Pretoria, Private.
Neething, Knopyelsiekte, 2017. Lumpy Skin Disease. Institute for International

Coorperative in Animal Biologics.
Rosche, X., Andriy, R., Damian, T., Akiko, K., Claudia, P., Daniel, B.A., Khadak, B.,
Surendra, K., Jessica, K., Fairouz, L., Eran, R., Sophie, V., Madhur, S.D.,
Keith, S., 2020. Introduction and Spread of Lumpy Skin Disease in South,
East and Southeast Asia: Qualitative Risk Assessment and Management).
FOA Animal Production and Health, Paper 183. FOA, Roma.
Sendow, I., Assadah, N.S., Ratnawati, A., Dharmayanti, N.L.P.I., Saepulloh, M., 2021.
Lumpy Skin Disease: Ancaman Penyakit Emerging bagi Status Kesehatan
Hewan Nasional. WARTAZOA 31, 85–96.
Sprygin, A., Pestoya, Y., Wallace, D.B., Tuppurainen, E., Kononow, A.V., 2019.
Transmission of lumpy skin disease virus: A short review. Virus Research
269.
Yadav, S.K., 2020. Lumpy skin disease (LSD). Technical Bulletin Central Veterinary
Laboratory (CVL) 1.

Laporan Rotasi Mikrobiologi Revisi

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Laporan Rotasi Mikrobiologi Revisi

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

LAPORAN KEGIATAN PPDH

ROTASI DIAGNOSA LABORATORIK MIKROBIOLOGI

PROGRAM PENDIDIKAN PROFESI DOKTER HEWAN

Malang, 31 Januari – 18 Februari 2022

drh. Indah Amalia Sari, M.Si drh. Gegana Wimaldy Airlangga

drh. Dyah Ayu Oktavianie A. P., M.Biotech

Malang, 14 Februari 2022

2.2.6 Bismuth Sulphite Agar (BSA)

2.3 Uji Reduksi Methylene Blue

4. Preparat sampel diteteskan lugol dan didiamkan selama 1 menit, kemudian

3.3.5 Uji Reduksi Methylene Blue

Uji menggunakan reagen CMT pada

Uji menggunakan reagen CMT pada

3. Sampel Susu 3 : Positif (++) mastitis

Uji menggunakan reagen CMT pada

Uji organoleptik pada sampel susu 1

Uji organoleptik pada sampel susu 2

Uji organoleptik pada sampel susu 3

Uji reduksi methylene blue pada

2. Sampel Susu Menit ke-60 :

Uji reduksi methylene blue pada

3. Sampel Susu Menit ke-150 :

Uji reduksi methylene blue pada

4. Sampel Susu Setelah 6 Jam :

Uji reduksi methylene blue pada

Hasil pewarnaan Gram pada sampel 1

2. A Sampel 2 (Koloni A dan B)

Hasil pewarnaan Gram pada sampel 2

Hasil pewarnaan Gram pada sampel 3

• Blood Agar Plate (BAP)

4.2.7 Penanaman pada Media Selektif

• Bismuth Sulphite Agar (BSA)

4.2.8 Uji Solubilitas KOH

Gambar 4.9 Hasil Uji Solubilitas KOH (Dokumentasi Pribadi, 2022)

Darna, Turnip, M., Rahmawati, 2018. Identifikasi Bakteri Anggota Enterobacteriaceae

Liofilchem®, 2017. Brain Heart Infusion Broth. Laboratories Humeau.

Liofilchem®, 2016. Mannitol Salt Agar. Laboratories Humeau.

Nurhayati, I.S., Martindah, E., 2015. Controlling Subclinical Mastitis by Antibiotic

Wahyuni, A.E.T.H., Wibawan, I.W., Wibowo, M.H., 2005. Karakterisasi Hemaglutinin

Widodo, 2003. Bioteknologi Industri Susu. Lacticia Press, Yogyakarta.

Gambar 2.1 Struktur Virus Influenza A (Garjito, 2013)

Gambar 2.3 Struktur Virus Newcastle Disease (Pudjiatmoko, 2014)

Strain NDV diklasifikasikan ke dalam tiga patogen utama berdasarkan

Gambar 2.5 Gejala Klinis pada Salmonellosis (Pudjiatmoko, 2014)

Gambar 2.6 Gejala Klinis pada Chronic Respiratory Disease (Pudjiatmoko,

Gambar 2.7 Brucella abortus (Novita, 2016)

Menurut OIE (2018), berdasarkan jenis lipopolisakardia spesies Brucella

• Brucellosis pada Manusia

Berdasarkan uji HA yang dilakukan pada virus ND (Newcastle disease)

• Rose Bengal Test

Gambar 4.3 Hasil RBT (Dokumentasi Pribadi, 2022)

Ernawati, R., 2019. Pemeriksaan Virologik dan Serologik. Universitas Airlangga,

Novita, R., 2016. Brucellosis : Penyakit Zoonosis Yang Terabaikan 12, 6.

Gambar 1.1 Morfologi Virion Capripox (Coetzer, 2018).

Coetzer, J.A.W., 2018. Lumpy skin disease. University of Pretoria, Private.

Neething, Knopyelsiekte, 2017. Lumpy Skin Disease. Institute for International

Anda mungkin juga menyukai

Novita, R., 2016. Brucellosis : Penyakit Zoonosis Yang Terabaikan 12, 6.