Nama : Lhielcyo Primadyo Mallenthinno Bani

NIM : 20190340072
Kelompok 2 Skills Lab

Novel 20% doxycycline-loaded PLGA nanospheres as adjunctive therapy in

chronic periodontitis in type-2 diabetics: randomized clinical, immune and
microbiological trial
Beberapa penelitian telah menunjukkan bahwa diabetes mellitus (DM) merupakan faktor risiko
penyakit periodontal, yang secara negatif mempengaruhi pembentukan dan perkembangannya serta
respons klinis terhadap perawatan periodontal. Tinjauan sistematis terbaru dan uji coba secara acak
menunjukkan penggunaan terapi antimikroba sistemik dan/atau lokal sebagai terapi tambahan yang
bermanfaat untuk pengobatan mekanis. Namun, efek samping yang terkait dengan penggunaan obat
sistemik ini, seperti gangguan usus, toksisitas obat, resistensi bakteri yang didapat, dan ketergantungan
pada kepatuhan pasien, dapat mempengaruhi kinerja dan membatasi penggunaan antimikroba sistemik.
Selain itu, penderita diabetes sering memiliki penyakit sistemik terkait lainnya dan perlu menggunakan
beberapa obat meningkatkan risiko interaksi obat. Oleh karena itu, pemberian antimikroba lokal dapat
menjadi alternatif penting bagi populasi diabetes.
Doksisiklin, turunan dari tetrasiklin, adalah antibiotik dengan spektrum luas terhadap bakteri
Grampositif dan Gram-negatif anaerobik (termasuk organisme yang terkait dengan penyakit periodontal),
menghambat sintesis protein oleh mikroorganisme, dan dengan demikian memiliki efek bakteriostatik. Ini
juga menunjukkan beberapa fitur penting yang dapat mengganggu perkembangan penyakit periodontal
seperti penghambatan metalloproteinase (MMPs) , penghambatan degranulasi sel polimorfonuklear
(PMN), peningkatan produksi TGFβ1 , dan pengurangan kerusakan kolagen dan resorpsi tulang alveolar.
Baru-baru ini, alat lepas lambat berukuran nano telah terbukti mampu melepaskan doksisiklin secara
perlahan di poket periodontal subjek periodontitis kronis dan situs periimplantitis. Asam laktat-co-glikolat
(PLGA), digunakan sebagai pengantar, memungkinkan doksisiklin untuk dienkapsulasi dalam
nanospheres dan dilepaskan pada tingkat yang konstan dengan difusi melalui polimer. Ukuran
nanospheres kira-kira 1 μm, dan efisiensi enkapsulasi obat dan laju pelepasan dapat dimodulasi dengan
menyesuaikan kondisi formulasi. Pemberian doksisiklin lokal yang terkait dengan kendaraan pelepasan
terkontrol telah terbukti efisien pada pasien non-diabetes dengan periodontitis kronis karena peningkatan
parameter klinis yang signifikan, bila dikaitkan dengan debridemen mekanis. Namun, respon klinis
individu yang rentan terhadap penyakit periodontal (seperti penderita diabetes) belum dipelajari, maupun
efek modulator imun (evaluasi penanda inflamasi) atau mikroba (pengurangan patogen periodontal).
Penelitian ini dirancang sebagai uji klinis paralel, doubleblind, acak, terkontrol plasebo untuk
mengevaluasi efek nanosfer asam laktat-co-glikolat (PLGA) 20% doxycycline sebagai terapi tambahan
dalam pengobatan periodontitis kronis pada 40 orang dengan diabetes melitus tipe-2. Penelitian ini telah
disetujui oleh komite etik Universitas Paulista. Kriteria inklusi adalah diagnosis periodontitis kronis [19];
adanya poket periodontal dan kehilangan tulang radiografik pada pasien berusia 35 tahun atau lebih;
setidaknya delapan gigi berakar tunggal dengan PD≥ 5 mm (di mana saku sedang memiliki kedalaman 5
atau 6 mm, dan situs yang dalam ≥ 7 mm) yang berdarah saat probing (BoP); dan kehadiran setidaknya 15
gigi [20]. Pasien yang terdaftar telah memiliki DM-2 yang didiagnosis oleh dokter selama minimal 5
tahun. Kriteria eksklusi adalah pasien yang sedang hamil atau menyusui; adanya perubahan periapikal
dan pulpa; asupan antibiotik dalam waktu 6 bulan sebelum penelitian; perubahan sistemik (kecuali DM2)
atau penggunaan obat yang dapat mempengaruhi respon pasien terhadap perawatan periodontal;
perawatan periodontal dalam 6 bulan sebelum penelitian; dan hipersensitivitas terhadap doksisiklin dan
PLGA. Semua pasien diberitahu secara menyeluruh tentang sifat dan potensi risiko dan manfaat dari
partisipasi mereka dalam penelitian dan menandatangani dokumen persetujuan. Nanospheres diproduksi
oleh laboratorium biomaterial (Labiomat) di School of Biological Sciences di Pontifical Catholic
University of São Paulo, yang mengandung 1,5 mg nanospheres dari 20% doxycycline atau jumlah yang
sama tanpa doxycycline. Untuk memasukkan nanospheres, area dikeringkan dengan isolasi relatif dan
jarum suntik hipodermik 3 ml digunakan untuk memasukkannya ke bagian bawah poket periodontal,
seperti yang dijelaskan sebelumnya. Tidak ada efek samping yang dilaporkan oleh pasien yang dirawat.
Ukuran sampel dihitung dengan mempertimbangkan perbedaan rata-rata 1 mm antar kelompok,
standar deviasi 1 mm , = 0,05, dan kekuatan 80%, untuk tingkat perlekatan klinis (CAL) di lokasi yang
diterapkan, yang merupakan variabel hasil utama dari penelitian ini. Sampel minimal 15 pasien per
kelompok ditunjukkan. Dengan asumsi bahwa sekitar 20% pasien mungkin hilang selama masa tindak
lanjut, 44 orang terdaftar dalam penelitian ini. Pengukuran klinis mulut penuh (enam lokasi per gigi)
dilakukan pada awal, dan 1, 3, dan 6 bulan setelah perawatan. Probe periodontal (North Carolina, Hu-
Friedy, Chicago, IL, USA) digunakan untuk mengevaluasi parameter berikut: kedalaman probing (PD)
dan tingkat perlekatan klinis (CAL). Posisi margin gingiva (GMP) dihitung dengan mengurangi PD dari
CAL. Ada atau tidak adanya perdarahan saat probing (BoP) dan indeks plak (PI)/indeks plak mulut penuh
(FMPI) dari semua situs juga dievaluasi. Seorang pemeriksa tunggal (GLM), yang tidak mengetahui
terapi, melakukan semua pengukuran selama evaluasi klinis. Untuk melakukan kalibrasi intra-pemeriksa,
dipilih 15 individu non-penelitian yang menunjukkan poket periodontal sedang hingga dalam. Pemeriksa
mengukur CAL dari semua individu dua kali dalam 24 jam. Korelasi intra-kelas adalah 95%. Sampel
dievaluasi secara individual dan disesuaikan untuk volume yang diukur oleh perangkat dan konsentrasi
diperkirakan dari kurva standar menggunakan persamaan polinomial lima parameter dan perangkat lunak
tertentu (Xponent®Millipore Corporation, Billerica, MA, USA). Konsentrasi rata-rata setiap biomarker
dihitung dan dinyatakan sebagai pikogram per mililiter. Variabel hasil utama adalah CAL pada 6 bulan,
dan PD dan BoP diadopsi sebagai variabel sekunder. Selain itu, parameter klinis lainnya dan konsentrasi
mikrobiologis dan sitokin dianggap sebagai hasil variabel kontrol. Situs aplikasi dipertimbangkan untuk
analisis (misalnya mesio-vestibular elemen 16), dan ratarata dari semua rata-rata dianggap sebagai nilai
pasien (yaitu, unit statistik). Awalnya, semua parameter diuji normalitasnya menggunakan uji Shapiro-
Wilk. Pengukuran berulang ANOVA dan uji Tukey digunakan untuk mendeteksi perbedaan dalam setiap
kelompok dari waktu ke waktu untuk parameter klinis dan metabolik. Analisis kovarians (ANCOVA)
dengan penyesuaian nilai dasar digunakan untuk mendeteksi perbedaan antar kelompok. Variabel yang
tidak terdistribusi secara normal (penilaian sitokin dan mikrobiologis) dibandingkan dengan
menggunakan uji Friedman dan MannWhitney. Tingkat signifikansi ditetapkan sebesar 5%. Data
dievaluasi menggunakan analisis per-protokol dan program SAS.
Awalnya, 44 pasien dilibatkan dalam penelitian ini. Satu pasien tidak kembali untuk kunjungan 1
bulan (masalah kesehatan) dan tiga pasien lainnya minum antibiotik sistemik (salah satunya sebelum
kunjungan 1 bulan dan dua pasien sebelum evaluasi 3 bulan). Semua dari mereka dikecualikan. Sebanyak
40 pasien diikuti sampai akhir penelitian. Sebuah diagram alur penelitian yang menunjukkan pasien yang
terdaftar dalam fase pra-studi dan individu yang berkembang ke fase studi dan pemeliharaan periodontal
ditunjukkan pada Gambar. Tidak ada perbedaan signifikan yang diamati antara kelompok mengenai jenis
kelamin, usia, PD mulut penuh, CAL, indeks plak (PI), atau rata-rata BoP pada awal (p > 0,05,). Tidak
ada perbedaan signifikan yang ditemukan antara kelompok pada awal dalam salah satu analisis metabolik
(p > 0,05,). ada penurunan yang signifikan dalam jumlah situs BoP-positif pada kedua kelompok pada 1,
3, dan 6 bulan dibandingkan dengan awal (p < 0,05). Pada 6 bulan, ada perbedaan yang signifikan antara
kelompok untuk BoP, lebih menyukai kelompok DOXY ( p < 0,05). BoP kantong sedang berbeda secara
signifikan antara kelompok hanya pada 6 bulan sementara yang dalam menunjukkan BoP yang lebih
rendah pada kelompok DOXY pada 3 dan 6 bulan (p < 0,05). Persentase perubahan tempat perdarahan
dari awal sampai 6 bulan hanya berbeda secara signifikan antara kelompok untuk kantong sedang (p <
0,05,). Mengenai uji sitokin, kadar IL10, IL-4, dan IL-8 tidak berbeda secara signifikan antara kelompok
atau periode evaluasi (p > 0,05), analisis intragroup menunjukkan bahwa DOXY mempromosikan
penurunan tingkat IL-17 (pada 1 dan 6 bulan), Il-1β (pada 6 bulan), IL-6 (pada 3 dan 6 bulan), dan TNF-α
dan INF -γ (pada semua periode evaluasi ulang) (p < 0,05; Meja4). Memang, PLAC hanya menunjukkan
penurunan TNF-α dan INF- pada follow-up 1 bulan (p < 0,05). Selain itu, perbedaan antarkelompok
diamati dengan kadar TNF-α yang lebih rendah (pada 1 dan 6 bulan), INF- (pada 1, 3, dan 6 bulan), IL-17
(pada 6 bulan), dan IL-6 ( pada 3 dan 6 bulan) (p < 0,05) pada kelompok DOXY. Selain itu, mengenai
MMP-9, tingkat yang lebih rendah terlihat pada kelompok DOXY dibandingkan kelompok PLAC pada 3
dan 6 bulan (p < 0,05).
Penggunaan doksisiklin sistemik menunjukkan penurunan ratarata yang berbeda dibandingkan
dengan publikasi sebelumnya. O'Connel dkk. mencapai pengurangan yang lebih tinggi, sementara Al-
Zahrani et al. [26] (mencapai pengurangan yang lebih rendah. Perbedaan ini tampaknya terkait dengan
tingkat dasar HbA1c: 8,42%, 11,7%, dan 9,7% pada penelitian RCT ini. Dalam penelitian ini, CAL pada
6 bulan diadopsi sebagai hasil utama, sesuai dengan penelitian sebelumnya. Meskipun penelitian ini
menunjukkan peningkatan yang signifikan secara statistik pada PD (variabel sekunder) pada 6 bulan, dan
menyajikan persentase yang lebih tinggi dari situs dengan pengurangan PD dan peningkatan CAL≥ 2 mm
pada 3 bulan mendukung kelompok uji (DOXY), penelitian ini gagal menunjukkan perbedaan yang
signifikan secara statistik antara kelompok dalam hasil utama (CAL) pada 6 bulan (1,5 ± 1,1 untuk
kelompok uji dan 1,9 ± 0,8 untuk kelompok uji dan 1,9 ± 0,8 untuk kelompok uji). Subjek penting untuk
diskusi adalah fakta bahwa gel atau larutan lain mungkin bukan bentuk terbaik untuk menerapkan zat
aktif di lingkungan subgingiva, karena ada bukti bahwa penggunaan antibiotik dalam bentuk bebas, tidak
terkait dengan mekanisme pelepasan terkontrol, tidak menyimpan obat di dalam poket periodontal karena
adanya cairan gingiva. Perlu juga dicatat bahwa penggunaan nanospheres yang mengandung doxycycline
menghasilkan hasil klinis yang paling luar biasa dalam 3 bulan (pengurangan PD dan CAL). Bersamaan
dengan manfaat klinis, ada peningkatan metabolisme (penurunan yang signifikan dalam kadar
hemoglobin terglikasi) pada kelompok DOXY. Selain peningkatan parameter klinis dan status
metabolisme, ada perubahan yang menguntungkan pada profil inflamasi lokal pada subjek DM2. Evaluasi
profil sitokin, perubahan mikrobiologis, status metabolisme, dan parameter klinis menunjukkan bahwa
Aplikasi DOXY adalah pendekatan terapeutik yang menjanjikan untuk mengobati subjek DM2 dengan
penyakit periodontal. Namun, karena ini merupakan terapi tambahan baru, lebih banyak penelitian,
termasuk analisis yang berbeda dan pelengkap, diperlukan untuk mengkonfirmasi hasil kami dan
memungkinkan pengenalan opsi ini ke dalam praktik klinis. Aplikasi DOXY juga bertanggung jawab
untuk pengurangan patogen periodontal yang kuat, terutama pada 1 dan 3 bulan setelah perawatan Dalam
keterbatasan penelitian ini, aplikasi lokal dari 20% PLGA nanospheres doxycycline-loaded mendukung
modulasi sitokin dan pengurangan mikroba dan dapat mengurangi poket dan perdarahan saat probing
pada individu periodontitis kronis dengan DM tipe-2.