PEMERIKSAAN BUN ( BLOOD UREA NITROGEN)

I. Tujuan
1. Untuk dapat melakukan pemeriksaan Blood Urea Nitrogen (BUN) dengan metode enzimatik.
2. Untuk dapat menginterpretasikan hasil pemeriksaan yang diperoleh
II. Metode
Metode yang digunakan adalah enzimatik UV test (Urea - GLDH)
III. Prinsip Percobaan
Reaksi enzimatis
Urea + 2 H
2
O
urease
2NH
4
+
+ HCO
3


2-Oxoglutarat + NH
4
+
+ NADH GLDH L-glutamat + NAD
+
+ H
2
O

IV. Alat dan Bahan
Alat
1. Yellow tip
2. Mikropipet
3. Spektrofotometer ERBA
4. Pipet ukur 1 mL
5. Stopwatch
6. Tabung reaksi
7. Beaker glass

Bahan
1. Aquades
2. Reagen Diasys Urean FS monoreagen (dibuat dengan mencampurkan 4 bagian R1
dengan 1 bagian R2 (20 ml R1 + 5 ml R2), kemudian ditunggu 30 menit)
3. Sampel serum

V. Cara Kerja
1. Disiapkan alat dan bahan yang digunakan serta dikondisikan dalam suhu ruang.
2. Disiapkan 3 buah tabung reaksi yang telah diberi label blanko ,standar, test.
3. Dipipet masing-masing ke dalam tabung :

Blanko Standar Sampel
aquadest 10 l - -
Standar - 10 l -
Sampel - - 10 l
monoreagen 1000 l 1000 l 1000 l

4. Campuran dihohomogenkan, lalu diinkubasi selama 1 menit pada suhu 25
o
C /30
o
C
atau selama 30-40 detik pada suhu 37C.
5. Lalu absorbansi larutan dibaca dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 340
nm.
6. Absorbansi larutan dibaca pada menit ke-1, 2, dan 3.
7. Absorbansi dicatat, lalu dihitung kadar urea pada sampel.

VI. Nilai Normal
Dewasa
Umum : 17 43 mg /dL
Wanita < 50 tahun : 15 40 mg/ dL
Wanita > 50 tahun : 21 43 mg /dL
Laki laki < 50 tahun : 19 44 mg/dL
Laki laki > 50 tahun : 18 55 mg/dL

Anak-anak
1 - 3 th : 11 36 mg/dL
4 13 th : 15 36 mg/dL
14 19 th : 18 45 mg/dL

VII. Perhitungan
Urea (mg/dL) =


x konsentrasi standar (mg/dL)
Konsentrasi standar = 50 mg/dL