INOKULASI

Fadhil Ghiyats1), Irma Kamaruddin2)

Abstrak
Inokulasi adalah pekerjaan memindahkan bakteri dari medium yang lama dengan tingkat
ketelitian yang sangat tinggi. Untuk melakukan Inokulasi, alat-alat yang digunakan harus
disterilisasikan terlebih dahulu. Hal ini untuk menghindari terjadinya kontaminasi pada
medium. Pengenceran bertingkat adalah memperkecil atau mengurangi kepadatan mikroba
yang tersuspensi dalam cairan. Dalam percobaan ini digunakan tempe, tomat, tape, mangga
busuk, dan pisang busuk.
Kata Kunci: Inokulasi, Bakteri, Pengenceran Bertingkat

I. PENDAHULUAN

I.1 Latar Belakang

Untuk dapat meneliti mikroorganisme
di laboratorium kita harus dapat
menumbuhkan mikroorganisme tersebut .
Mikroorganisme dapat berkembang
secara alami ataupun buatan. Substrat
yang digunakan manusia dalam dalam
mengembangkan dan menumbuhkan
mikroorganisme disebut media . Untuk
itu harus dipahami jenis jenis nutrien
yang diisyaratkan oleh bakteri dan
lingkungan fisik yang menyediakan
kondisi optimum bagi pertumbuhannya.
Alat alat yang digunakan dalam
perkembangbiakan ini harus disterilkan
terlebih dulu , supaya mikroorganisme
yang tidak diinginkan tidak tumbuh ,
sehingga menghambat pertumbuhan
mikroorganisme.
Teknik biakan murni tidak hanya
memerlukan cara memperoleh suatu
biakan yang murni, tetapi juga
memelihara serta mencegah pencemaran
dari luar. Inokulasi dimaksudkan untuk
menumbuhkan, meremajakan mikroba
dan mendapatkan populasi mikroba yang
murni. Pencemaran biasanya berasal dari
udara yang mengandung banyak
mikroorganisme. Pemindahan
mikroorganisme ini dilakukan dengan
teknik aseptik untuk mempertahankan
kemurnian biakan selama pemindahan
secara berulangkali. Pekerjaan
memindahkan bakteri dari media yang
baru membutuhkan banyak ketelitian.
Diusahakan agar semua alat-alat yang ada
sangkut-pautnya dengan media dan
pekerjaan penanaman itu benar-benar
steril. Untuk dapat mempelajari sifat
biakan, morfologi, dan analisis lain, maka
organisme yang akan diteliti harus dapat
dipisahkan. Ini berarti bahwa harus ada
biakan murni yang hanya mengandung
satu jenis bakteri.
Oleh karena itu hal diatas harus
perlu dilakukan saat percoban inokulasi.
I.2 Tujuan Praktikum
Tujuan praktikum ini adalah :
1. Mengetahui fungsi dan tujuan
pengenceran bertingkat
2. Mengetahui teknik inokulasi
3. Mengetahui fungsi media
II. METODOLOGI PERCOBAAN
II.1 Waktu dan Tempat
Praktikum Inokulasi dilaksanakan pada
hari Selasa, 7 Maret 2017 pukul 08.00
12.00 WITA, bertempat di Laboratorium
Mikrobiologi dan Bioteknologi Pangan,
Departemen Teknologi Pertanian,
Fakultas Pertanian Universitas
Hasanuddin.
II.2 Alat dan Bahan
II.2.1 Alat
Alat-alat yang digunakan dalam
praktikum ini adalah cawan petri, pipet
volume, tabung reaksi, rak tabung reaksi,
Hockey stick, bunsen burner, Laminar II.3.3 Inokulasi
air Flow, jarum inokulasi, timbangan A. Metode Pour Plat
digital, vortex, dan bulb. Dituang media sebanyak 1/5 volume
capet. Kemudian ditunggu dingin hingga
II..2.2 Bahan mengeras. Setelah itu, suspensi mikroba
Bahan-bahan yang digunakan adalah 10-3dipipet sebanyak 1 ml ke dalam capet.
media NA, PCA, dan PDA, tempe, tape, Tuang media sebanyak volume capet
pisang busuk, tomat busuk, mangga lalu dinginkan dan diinkubasi.
busuk, alkohol 70%, tissu roll, kertas B. Metode Spread Plat
HVS, kapas, aquades. Media dituang sebanyak 2/3 volume
capet. Kemudian ditunggu hingga
II.3 Prosedur Percobaan
mengeras. Setelah itu, dipipet sebanyak 1
II.3.1 Pembuatan Larutan Fisiologis ml ke dalam capet. Diratakan dengan
NaCl ditimbang sebanyak 6,379 gram, hockey stick lalu diinkubasi.
kemudian ditambahkan aquades 750 ml
dan dimasukkan ke dalam erlenmeyer.
Setelah itu, dihomogenkan dan
disterilisasi dengan menggunakan
Autoclave.
II.3.2 Pengenceran Bertingkat
Bahan 1 gr / 1 ml dimasukkan ke
dalam tabung reaksi 1 dan ditambahkan
larutan fisiologis sebanyak 3 ml. Dipipet
1 ml dari tabung reaksi 1 dan dimasukkan
ke dalam tabung reaksi 2. Kemudian
ditambahkan larutan fisiologis 9 ml.
Setelah itu pengenceran dilakukan hingga
10-3.