ISOLASI, ANALISIS STRUKTURAL ALKALOID pada TODDALIA ASIATICA DAN

PERBANDINGAN TEORITIS

Abstrak

Dalam penelitian ini, telah dilakukan suatu untuk menyiapkan ekstrak oleh metanol dari
Toddalia asiatica daun dan mengandung alkaloid. Struktur molekul, gugus fungsi, ikatan
kimia, dll telah dianalisis dengan bantuan spektrum IR, UV dan MS. Perangkat lunak
Gaussian telah digunakan untuk memperkirakan nilai-nilai teoretis frekuensi vibrasi spektrum
IR dan untuk memperoleh struktur yang mungkin dari senyawa tersebut. Nilai-nilai teoritis
berada dalam kesepakatan yang baik dengan nilai-nilai eksperimental dan struktur alkaloid
yang terkonfirmasi.

Kata kunci : Isolasi , IR , UV , MS analisis spektrum , Toddaquinoline alkaloid

I. PENDAHULUAN
Alam adalah sumber perantara obat untuk jumlah obat modern yang mengesankan
selama bertahun-tahun. Telah diamati bahwa Toddalia asiatica, tanaman obat Todda
(Tribal) mengandung flavonoid, steroid, alkaloid, dll. [1] dan digunakan oleh Toddas,
sebuah suku yang tinggal di distrik Nilgiris, Tamilnadu, India. Ekstrak daun tanaman
Toddalia asiatica telah digunakan oleh mereka sebagai obat untuk demam, luka, nyeri
dll, [2]. Chen et.al. [3] telah melaporkan isolasi dan karakterisasi dari alkaloid
toddaquinoline yang tidak biasa [4], yang ditemukan pada kulit akar Toddalia asiatica.
Lebih lanjut David et al. [5] telah mensintesis toddaquinoline dengan langkah kunci
Cobalt (I) menengahi siklisasi radial ke piridin dan tercapai. Kulit akar Toddalia
asiatica, benzo [h] quinoline alkaloid baru telah disintesis [6]. Toddalia asiatica
menyebabkan isolasi 30 senyawa, termasuk coumarin, benzoquinoline, dll [7].
Toddalia asiatica digunakan sebagai obat tradisional di Asia untuk mengurangi rasa
sakit dan stasis [8]. Komposisi kimia dari Toddalia asiatica telah dipelajari secara luas
dan mengidentifikasi toddaquinoline [9]. Larutan berair dari Toddalia asiatica
mengandung gum dan lendir sedangkan ekstrak metanol mengandung alkaloid,
karbohidrat, tanin dan falavonoid, dll., [10].

1
 Dalam penelitian ini, telah dilakukan suatu upaya untuk membandingkan nilai-nilai
eksperimental dengan nilai-nilai teoritis frekuensi vibrasi spektrum IR dari alkaloid
toddaquinoline, dievaluasi menggunakan Perangkat Lunak Gaussian dan struktur
molekul oleh spektrum MS.

II. BAHAN DAN METODE

Koleksi tumbuhan: Toddalia asiatica ditemukan di distrik Nilgiris, Tamilnadu, India

di ketinggian sekitar 2200 meter dari MSL. Spick kecil di seluruh batang dan bagian
bawah daun. Di tanaman ini, alkaloid banyak terdapat pada kulit kayu dan batang
[11]. Sekitar 5kg daun basah, sehat, bebas dari debu dll dikumpulkan dan dikeringkan
dalam bayangan.
Preparasi Sampel: Daun kering 1,5kg dihancurkan secara mekanis dan rendam
dalam n-Hexane selama 72 jam. n-Hexane melarutkan lilin seperti senyawa
kelembaban daun [12] Kemudian daun disaring dari n-Hexane dan dikeringkan. Lagi-
lagi daun direndam dalam Aseton selama 72 jam. Aseton memiliki lebih banyak
polaritas daripada n-Hexane. Oleh karena itu sebagian besar pelembab seperti tar larut
dalam Aseton. Pada akhirnya daun disaring dan dikeringkan sepenuhnya dari aseton
lalu direndam ke dalam metanol dalam wadah kaca selama 72 jam dan kemudian
ekstrak metanol itu sendiri dikumpulkan dalam wadah gelas. Ekstrak metanol
disiapkan untuk dua kali lebih banyak dari daun.
Ekstrak metanol diambil ke dalam labu alas bulat 500ml. Kondensor dan pengaturan
perapian digunakan untuk menguapkan metanol dari ekstrak hingga ke volume 1/6
dan ini disebut konsentrat metanol [Gambar a]. Sekali lagi serbuk daun direndam
dalam metanol, proses di atas diulang sebanyak 4 kali untuk menyiapkan konsentrat
metanol, tanpa mengeringkan daun.
Konsentrat metanol ini mengandung kelembaban, flavonoid, steroid, dll. Oleh karena
itu dicuci oleh n-Hexane [Gambar b]. Konsentrat metanol yang dicuci disaring
berkali-kali oleh kertas waterman No.1 untuk menghilangkan endapan, cairan dan
bubuk daun. Kemudian disebut filtrat [Gambar c]. Filtrat memungkinkan pengeringan
dan penambahan metanol ke dalamnya dan disebut filtrat metanol.

2
 Gambar a. Persiapan Gambar b. Konsentrat Gambar c. Metanol
konsentrat metanol. MeOH. filtrat
Reagen Dragendorff [14], reagen Dragendorff digunakan untuk uji alkaloid. Beberapa
tetes reagen Mayer ditambahkan dengan filtrat, sementara endapan diperoleh.
Endapan coklat diperoleh setelah penambahan beberapa tetes Reagen Dragendorff
[15]. Ini membuktikan adanya alkaloid.

Gambar d. Kolom Gambar e. Tes

Gambar f. Tes TLC
Kromatografi Maye(endapan putih)
III. PEMISAHAN ALKALOID DENGAN METODE KROMATOGRAFI KOLOM

Kromatografi kolom [16] adalah metode fisik terbaik dan cepat untuk pemisahan
individu dari campuran [Gambar d]. Ini adalah pemisahan, yang bekerja dengan baik
untuk alkaloid tropane seperti atropin, kokain, dan skopolamin. Ekstrak Metanol
difraksinasi dengan kromatografi kolom pada SiO2. Ini memisahkan lipid dan
terpenes dari fraksi alkaloid mentah. Fraksi alkaloid dikromatografi (SiO2; CHCl3:
MeOH = 10: 1) untuk mengisolasi alkaloid murni. Kolom itu dikemas dengan
menggunakan suspensi silika gel dalam n-Hexane. Kemudian berbagai kolom yang
berbeda dikumpulkan dan disimpan dalam wadah terpisah dan diberi nama sebagai S1
/ C1, S1 / C2, S1 / C3 dan S3 / C4. Sekali lagi SI / C1, SI / C2, SI / C3 dan S3 / C4 dll
menjalani uji alkaloid dengan reagen Mayer. SI / C3 menunjukkan endapan putih, hal
itu membuktikan adanya alkaloid [Gambar e]. n-Hexana menguap keluar dan

3
 kemudian sampel larut dalam n-Hexane murni. Ini dikumpulkan dalam wadah sampel
dan diberi nama SI / C3.
Tes kemurnian. Pemurnian SI / C3 dikonfirmasi dengan Kromatografi Lapis Tipis
(KLT) [17] dan kromatografi kertas (PLC). KLT disiapkan dengan lempengan kaca
kecil yang dilapisi dengan SiO2 dan titik kecil SI / C3 disimpan tepat di bawah pusat
lempengan kaca dan ditempatkan dengan posisi miring dalam wadah kaca 100ml
dengan 20ml n-Hexana. Wadah kaca ditutup dan dipantau. Setelah 8 jam, titik
bergerak ke atas dan tidak ada titik lebih lanjut dari SI / C3 yang ditemukan [Gambar
f]. Hal ini tidak menunjukkan kelembaban lain terhadap SI / C3. PLC disiapkan
sebagai titik kecil dari SI / C3 yang tersebar di dekat pusat kertas waterman persegi
empat berukuran kecil yang secara vertikal direndam dalam wadah kaca 100ml
dengan 20ml n-Hexana.

IV. BAGIAN PERCOBAAN

Spektrometer SHIMADZU digunakan untuk merekam spektrum IR dan UV.

Spektrum IR sampel dasar cair juga direkam oleh SHIMADZU. Fourier mengubah
spektrometer inframerah menggunakan sel NaCl. Instrumen JEOL GC Mate
digunakan untuk merekam Spektrum Massa [18-19].

V. HASIL DAN DISKUSI

Perangkat lunak Gaussian (v3) digunakan untuk mendapatkan spektrum UV, IR dan
struktur molekul 3D yang paling mungkin dari tata nama senyawa yang diberikan
IUPAC atau diagram molekul. Nama IUPAC Toddaquinoline diperoleh dari perangkat
lunak Chemdool. Nama IUPAC dari toddaquinoline adalah 13.15-Dioxa-3-
azatetracyclo [8.7.0.0.0] heptadeca-1 (17), 2, 4, 6, 8, 10, 12 (16) - heptaen-5-ol.

Nilai teoritis dibandingkan dengan hasil eksperimen dan terdaftar di bawah ini.
Toddaquinoline: IR (cm-1)υmax, Peregangan-3381,3356,3331,3315,3298,3284 (amina
sekunder). C-H Peregangan- 2989,2968,2943,2899,2881,2888, 2864, 2839. C-OH
Peregangan -2750.C = C Peregangan-1647, C-C Merengang dalam cincin aromatik-
1448,1419. C-N Peregangan-1327, 1091, 1055, 1047.C-H loop aromatik-881,802,731.

UV - λ, 265,5,253.5,239.5.

4
 Output perangkat lunak Gaussian: IR (cm-1) , O-H Peregangan 3817, C-H
υmax

Peregangan 3170, 3162, 3193, 3175, 3193,3175, 3216, C-H Peregangan 3250, C-H
Peregangan 3081,3033, 3081, 3033, N-C Peregangan 1664,1482, 1387. C-C
Peregangan 1677, 1461, 1686, 1516,1413, 1686, 1664, 1550, 1387, 1177, 1004, N-C
Peregangan 1305, 1225, C-C Peregangan 1640, 1640,1567, 1664, 1334, 1295, 1413,
1461,1305, O-C Peregangan 1516,1295,1115, 841, 1072,995, 983, C-C-C
Pembengkokan 855, 610, C-O-C Pembengkokan 1072, 983,746, H-O-C
Pembengkokan 1305,1225, 1213, 1177, H-C-N Pembengkokan 1431,1334, H-C-C
Pembengkokan 1664,1225,1213,1207, H-C-C Pembengkokan 1334,1207,
1461,1305,1225,1153, 1516,1251,1213, C-N-C Pembengkokan 486, 417, C-C-C
Pembengkokan 704,506, C-C-N Pembengkokan 1004, Pembengkokan O-C-C506.

VI. GRAFIK SPEKTRUM

Spektrum IR Toddaquinoline.

Spektrum UV Toddaquinoline.

5
Spektrum Massa

Data Spektrum Massal. m / z scan.2174, TIC = 202512, Basis: 3.4FS, # ion =

75, RT = 11.93,

m / z.
106,89,128.32,146.50,161.278,175.3567,191.3012,206.26,241.53,301.68,33
6.73,340.51, 451.00, 469.77, 468.74.

6
Scan. 1313,TIC=164528, Base:1.1%FS, #ion=63,RT=7.59,
m/z -70.85,133.29,170.28, 199.81, 229.28, 276.66,312.95,376.66.

Scan.711,TIC=123392,Base:1.8%FS,#ion=45,RT=4.57,
m/z – 69.01,89.87,105.13,120.07, 140.27, 151.141,174.125,271.12,281.84,346.01,414.45.

7
Scan.2372,TIC=280864,Base5.7%FS,#ion=82,RT=12.92,
m/z:104.33,149.266,177.11,222.16,272.74,344.34,374.09,413.52,456.77

Scan2383,TIC=269824,Base 2%FS, #ion=66,RT=14.99,

m/z:69.126,78.17,90.11,105.049,119.22,132.32,147.56,161.37,176.28,185.39,201.36,220
14, 238.33, 267.81,281.65,314.45, 343.46.

Scan 2870,TIC=254448,Base:8%FS, #ion=72,RT=15.43,

8
m/z:80.054,121.124,134.37,161.38,202.04,219.51,245.34,299.81,327.54.

Scan 4116, TIC=170256,Base:4%FS, #ion=86,RT=21.69,

m/z:83.86,105.017,122.916,149.159,183.57,204.652,247.398,267.616,291.28,344.56,364.
516.

9
 TIC min-4.56, 7.59, 9.07, 11.92, 12.92, 14.98, 15.43, 17.17, 21.69, 23.98.

VII. KESIMPULAN

Nilai-nilai eksperimental IR, UV dan MS digunakan untuk memprediksi struktur

molekul, ikatan atom, gugus fungsi molekuler yang mungkin, dll, untuk konfirmasi
adanya alkaloid toddaquinoline pada tanaman Toddalia asiatica dan terkonfirmasi.
Struktur molekuler ditemukan dengan perangkat lunak Gaussian dan nama IUPAC
dengan perangkat lunak Chemdoole dan dilaporkan sebagai [Gambar j.]

10
REFERENSI
[1] S.Rajan,M.Sethuraman, D.Suresh Baburaj. Ancient science of life. 16(4);360-365, 1997.
[2] Veeramuthu Duraipanddian, Muniappan Ayyanar, Savarimuthu Ignacimuthu. BMC,
Complementary and alternative medicine. :35,
1180/14,
72-6882-6-35, 2006.
[3] Chen, I.S., Tsai,I.L,Wu, S.J.,Sheen,W.S.,Ishikawa, T.,Ishii, H. Phytochem, 34,1449, 1993.
[4] Harrowven, D.C., Nunn, M.I.T., Blumire N.J.,and Fenwick, D.R., Tetrahedron
Lett,49,5975, 1998.
[5] D.C. Harrowven, M.I.T.Nunn, N.J. Blumire, and D.R.Fenwick, Tedrahedro, Elsevier,
2001.
[6] IS Chen, IL Tsai,SJ Wu, WS Sheen,T Ishikawa, H.Ishii, Phytochemistry, Elsevier, 1993
[7] IL Tsai, MF Wun, CM Teng, T Ishikawa, IS Chen- Phytochemistry, Elsevier, 1998.
[8] IL Tsai, SC Fang, T Ishikawa, CT Chang, IS Chen- Phytochemistry, Elsevier, 1997.
[9] XC Liu, HW Dong, L.Zhou, SS du, ZL Lu – Parasitology research, Springer, 2013.
[10] V Madhavan, P Shah, A Murali, Asian Journal of Traditional Medicine. 2010.
[11] Indian drugs 27(4), 257-258, 1990.
[12] P Muthumani, R Meera, P Devi, SA Mohamed Sheik Arabath, LV Seshu kumar Koduri,
Sivaram Manavarthi.
International Journal of Drug Formulation & Research-2010.
[13] T.Ohnishi, R S Gall, MC Mayer. Analytical biochemistry, Elsevier, 1975.
[14] Sreevidya, Narasimhan, Melhrotra, Shanta. Journal of AOAC international (86), 2003.
[15] Huang, JP Charlton.Elsvier. 1972.
[16] Anupam Maurya, Santhosh kumar, Srivastava. Journal of Chromatography. B-Elsevier,
(12), 2008.
[17] B Simonovska, I Vovk. Journal of Chromatography A, Elsvier. 2000.
[18] Hand book of Instrumental Chemistry for Analytical Chemistry. Watson J. Throck. 2nd
Edn, New York. Raven Press-1985.
[19] GC/MS Analysis by Frederic Douglas. Scientific Testimony. Online Journal.

11