FAKULTAS KEDOKTERAN

UNIVERSITAS TADULAKO

PANDUAN PRAKTIKUM

BLOK 8
“REPRODUCTION HEALTH”

DEPARTEMEN PATOLOGI KLINIK

FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS TADULAKO
2018

Praktikum Patologi Klinik Blok 8

PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 1
 MATERI PRAKTIKUM :
1. TES KEHAMILAN
2. ANALISIS SPERMA

Praktikum Patologi Klinik Blok 8

PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 2
 PREGNANCY TEST

TUJUAN
 Siswa dapat melakukan tes kehamilan, membaca hasilnya dan
menginterpretasikan hasil berdasarkan anamnesis dan kinerja pasien.
 Ada beberapa tipe tes kehamilan. dan dalam praktikum, siswa akan melakukan
tes kehamilan strip.

UJI KEHAMILAN LATEX

Pendahuluan
Human chorionic gonadotropin (hCG) adalah hormon glikoprotein yang disekresi
oleh plasenta berkembang tak lama setelah implantasi. HCG dapat dideteksi dalam urin dan
serum dari wanita hamil pada usia 6 sampai 15 hari setelah pembuahan. Konsentrasi
meningkat hCG untuk implantasi 5-50 mIU / ml satu minggu pos, mencapai sekitar 100
mIU / ml pada saat periode menstruasi pertama tidak terjawab, dan puncak pada 100.000 -
200.000 mIU / ml pada akhir trimester pertama. hCG dengan demikian merupakan penanda
yang sangat baik untuk konfirmasi awal kehamilan.

Prinsip
hCG dalam sampel urin dari wanita hamil bereaksi dengan monoklonal Anti-hCG
antibody tes terikat dengan manik-manik/breads lateks dan terjadi rekasi yang akan
menghasilkan aglutinasi.

Sampel
Spesimen urin pagi
jika pengujian tertunda, Urin dapat disimpan pada 2-8 ° C hingga 72 jam.
Untuk sampel penyimpanan lama dapat membeku pada -20 ° C sampai satu tahun.

Praktikum Patologi Klinik Blok 8

PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 3
Reagen Komposisi
1. Lateks Reagen (penetes biru)
2. Kontrol positif (topi merah)
3. Negatif Control (topi putih)

Prosedur
Menggunakan pipet segar untuk setiap tes, tempat pada masing masing lingkaran tes
slide.
Campur dan menyebar dengan menggunakan pipet dan mengisi lingkaran tes. Putar
slide dan mengamati aglutinasi yang harus dilaksanakan dalam waktu dua menit.
Jika terjadi Aglutinasi Ditandai menunjukkan hasil positif. Tidak ada aglutinasi
dalam waktu dua menit menunjukkan hasil negatif.

UJI KEHAMILAN STRIP

Prinsip
Merupakan pemeriksaan kualitatif yang memperlihatkan rekasi hCG di urin pada dua
sisi strip test. Membrannya dilapisi dengan anti-hCG pada daerah test.

Reagen dan bahan

Uji strip: strip dilapisi dengan anti hcg kelinci dan berwarna koloid emas monoklonal
anti tikus mouse anti hCG dikonjugasi di pad

Prosedur
1. Siapkan alat, bahan serta specimen
2. Buka strip dari kemasan
3. Celupkan strip test pada urin sampai batas maximal selama 10-15 detik
4. Angkat dan tempatkan secara horizontal
5. Tunggu hasil dari strip tes membentuk pita warna untuk menentukan interpretasi
selama 15-10 menit
6. Interpretasikan hasil yang didapat
7. Catat dan laporkan

Praktikum Patologi Klinik Blok 8

PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 4
Hasil
1. Negatif: jika hanya muncul satu garis / band pada daerah kontrol
2. Positif: jika muncul dua garis / dua band pada daerah kontrol dan daerah tes
3. Valid: tidak ada garis atau band yang muncul

Nilai yang diharapkan

HCG dapat dideteksi dalam urin dan serum dari wanita hamil pada usia 6 sampai 15
hari setelah pembuahan. Konsentrasi meningkat hCG untuk impintation 5-50 mIU / ml satu
minggu pos, mencapai sekitar 100 mIU / ml pada saat periode menstruasi pertama tidak
terjawab, dan puncak pada 100,000-200,000 mIU / ml pada akhir trimester pertama.

PERANGKAT UJI hCG

Penggunaan
Untuk penentuan cepat dari human chorionic gonadotropin (hCG) dalam urin. Test kit
digunakan untuk memperoleh hasil, visual kualitatif dan dimaksudkan untuk penggunaan
profesional.

Prosedur
1) Bacalah petunjuk Spesimen Koleksi.
Perangkat tes, sampel pasien, atau kontrol harus dibawa ke suhu kamar (18 - 30 ° C)
sebelum pengujian
2) Lepaskan perangkat uji dari dalam bungkus pelindungnya (membawa perangkat ke
suhu kamar sebelum membuka kantong untuk menghindari kondensasi kelembaban
pada membran). Label pasien perangkat dengan atau identifikasi kontrol.

Praktikum Patologi Klinik Blok 8

PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 5
 3) Menggambar sampel urin ke baris ditandai pada pipet (sekitar 0,2 mL). Mengeluarkan
seluruh isi ke dalam sampel juga. Atau, memegang pipet dalam posisi lurus ke atas
dan ke bawah - bukan sudut. Dispense 5 tetes (sekitar 0,2 ml) dari spesimen atau
kontrol ke dalam sampel juga. Untuk setiap sampel atau kontrol, menggunakan pipet
yang terpisah dan perangkat.
4) Tunggu band berwarna muncul. Tergantung pada konsentrasi hCG, hasil positif dapat
diamati di sesingkat 40 detik. Namun, untuk mengkonfirmasi hasil negatif, waktu
completerection (5 menit) diperlukan. Jangan menginterpretasikan hasil setelah 5
menit.

Catatan tentang interpretasi hasil

Hasil uji negatif pada pasien diduga hamil harus diuji ulang dengan sampel diperoleh
48 sampai 72 jam kemudian, atau dengan melakukan uji kuantitatif. Ketika pengujian dengan
spesimen urin, spesimen pagi pertama akan berisi konsentrasi hCG tertinggi.
Borderline sampel (yang menampilkan baris yang sangat samar di wilayah uji) yang
kemudian tes negatif mungkin disebabkan jatuh kadar hCG setelah aborsi spontan atau
diinduksi. Pemutusan alami terjadi di 22%, dari klinis kehamilan yang belum diakui.
Sebaliknya, sampel garis batas yang kemudian menunjukkan intensitas warna yang lebih
besar dibanding band referensi mungkin disebabkan kadar hCG meningkat.
Bayangan merah muda di wilayah band (T) tes akan bervariasi tergantung pada
konsentrasi hadi. Namun, baik nilai kuantitatif maupun tingkat kenaikan hCG dapat
ditentukan dengan tes kualitatif.

Praktikum Patologi Klinik Blok 8

PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 6
LATIHAN SOAL
1. Jenis pemeriksaan uji kehamilan dan intepretasinya ?

Praktikum Patologi Klinik Blok 8

PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 7
LAPORAN PRAKTIKUM

Praktikum Patologi Klinik Blok 8

PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 8
KOMENTAR DOSEN PEMBIMBING

NAMA/PARAF DOSEN PEMBIMBING

ANALISIS SPERMA

Tujuan
Siswa dapat melakukan tes sperma analisis, membaca hasilnya dan
menginterpretasikan hasil berdasarkan anamnesis dan kinerja pasien.

UJI ANALISIS SPERMA

Pendahuluan
Analisis sperma merupakan bagian penting dari penyelidikan infertilitas pria. Sperma
temuan yang sangat berkorelasi dengan hypofertility atau infertilitas termasuk sangat
meningkat atau menurun ejakulasi vol ¬ ume, jumlah sperma yang sangat rendah, motilitas
sperma sangat menurun, dan lebih dari 20% dari sperma menunjukkan morfologi abnormal.
Namun, organisasi kesehatan dunia (WHO) baru saja mengubah definisi dari air mani
morfologi kelainan, dan sekarang menganggap spesimen yang abnormal jika lebih dari 70%
dari sperma memiliki morfologi normal.

Praktikum Patologi Klinik Blok 8

PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 9
Ada beberapa metode uji analisis sperma:
1. Macroscopis tes
2. Microscopis tes
3. Uji biokimia
4. Spesifik uji

Persiapan pasien
 Pantang 2-7 hari
 Mengumpulkan air mani dengan coitus masturbasi dengan kondom, coitus
interruptus
 Semen harus disimpan pada suhu tubuh dan dikirim ke laboratorium segera setelah
itu mengumpulkan sebanyak mungkin, waktu tidak boleh melebihi 1 jam setelah
emisi.

Contoh sperma:
Jumlah: semua ejakulasi (jangan tumpah keluar)
Catatan: Dorong menjauh bila sampel tidak dapat memenuhi kualifikasi.
1. Prinsip
a. Macroscopis
Membuat catatan dari warna, bau, durasi pencairan, volume, viskositas sperma.
b. Microscopis
Membuat catatan dari angka leukosit, jumlah sperma, jumlah sel benih yang belum matang,
motilitas, vitalitas, aglutinasi setelah hitungan diferensial tercatat morfologi.

2. Reagen
 Giemsa stain (Romanovski - Giemsa)
 Buffer fosfat pH 6,9
 Metanol (Fiksasi)
 pH kertas (6,0-10,0)
Praktikum Patologi Klinik Blok 8
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 10
  Physiologis NaCI 0,9%
 Pengenceran menghitung sperma
 Noda Supranatan: Metilen biru 1% atau eosin 0,5%

3. Peralatan
 Improved Naubauer hitung hemositometer (kamar terus bertambah)
 Mikroskop
 Obyek kaca
 Deck kaca 22 x 22 mm
 Pipet 5,9 Ml
 Stop Watch
 Tabung
 Tongkat
 Beaker kaca / tabung kerucut
 Mikropipet

PROSEDUR DAN PARAMETER PEMERIKSAAN

Nama Pasien:
Contoh:
Mengumpulkan: () Full () Unfull
Ekskresi oleh: () Masturbasi () Coitus interruptus
Wadah: () Kaca () plastik
Pantang: () 2 () 3 () 4 () 5 () 6 () 7 hari.

Macroscopis
1. Periksa setelah liquifaction selesai, jika sampai 1 jam tidak liquifaction, catatan
kondisi sampel.
2. Siapkan alat bahan dan spesimen

Praktikum Patologi Klinik Blok 8

PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 11
  Volume ml (≥ 2,0 ml), digunakan gelas ukur, kemudian catat beberapa volume
sperma yang dikeluarkan
 Bau , () seperti bunga Acacia () tidak spesifik.
 Warna lihat warna dari cairannya (keabu-abuan normal)
() Memurnikan: Jumlah sperma rendah
() Coklat: eritrosit Positif
() Kuning: Pasien icteric / minum obat
 pH : celupkan kertas lakmus pada cairan semennya kemudian interpretaskan
pada indikator warna pH yang disediakan(Normal ≥ 7,2).
 Viskositas Gunakan pipet pasteur untuk mengambil cairan kemudian teteskan
perlahan, lihat dan perkirakan panjang kekentalan cairan (normal d "2,0 cm).
Catat hasil yang didapatkan

Microscopis
 Motilitas sperma
1. Berisihkan objeck glass dan cover glass
2. Teteskan sperma dengan pipet pasteur pada object glass
3. Kemudian tutup dengan cover glass
4. Amati pergerakan sel sperma pada mikroskop 10 x -100 x
5. Catat dan interpretasikan hasil

 Menghitung Sperma
1. Buat pengenceran, 10 mikroliter cairan sperma + 200 mikroliter pengencer
sperma dalam tabung reaksi
2. Siapkan improved neuber chamber/bilik hitung pada mikroskop (menggunakan
bilik hitung eritrosit)
3. Ambil hasil pengenceran tadi, kemudian teteskan menggunakan pipet pasteur pada
bilik hitung secara merata
4. Tunggu sampai larutan terisi pada bilik hitung sampai merata
5. Amati serta hitung sperma pada mikroskop dengan perbesaran 10x-100x

Praktikum Patologi Klinik Blok 8

PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 12
 6. Catat hasil dan masukkan kedalam rumus
7. Intrepretasikan hasil

Hasil Perhitungan Sperma

Jumlah rata-rata sperma
() Daya 0/High:
- Semua centrifuge sperma 3000g (± 4700 rpm) 15 menit.
- Ketika berubah 0/HP 1 mengulang penghitungan: Azoospermia
() > 1-2/HP:
- Centrifuge semua sampel 6000 g (2000 - 2300 rpm) 15 menit.
- Ketika 1-2/HP tidak berubah, ulangi penghitungan: tidak. sperma <2 juta ml.
- Jika unhomogen sampel: campuran dan ulangi menghitung.
() 15/HP:
- Tanpa sentrifugasi, cairan / fiksasi, sampel dengan metanol (tabel 1)
– Hitung sperma oleh Improved Naubauer pada ruang eritrosit.

Perhitungan:
rata-rata jumlah sperma di kotak tengah:
<10/MS, terus selanjutnya sampai 25 MS
0 sampai 40/MS, selanjutnya 10 MS
> 40/MS, terus selanjutnya 5 MS
*MS  Middle Square

Hitung sperma yang menyentuh garis arbitery, jika mengukur sisi atas dan kiri.
Hitung rata-rata jumlah sperma di atas dan bawah dari ruang penghitungan.
Perbedaan penghitungan harus <5% atau di bawah kurva toleransi.
Jika perbedaan > 5% dan dari kurva toleransi; mengulang penghitungan dengan sampel
homogenisasi.

e.q penghitungan:

Praktikum Patologi Klinik Blok 8

PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 13
Jumlah sperma di ruang atas dan ruang bawah masing-masing 247 dan 213 (total 460).
Perbedaannya = 34 (34/460x = 7,4%) lebih besar dari> 5%, ulangi memeriksa sperma.
Libatkan kurva penggunaan toleransi. Jumlah perbedaan jumlah sperma 460 adalah <42:
dapat ditoleransi.

Jumlah sperma juta / ml = Rataan sperma x faktor konversi

 Misalnya :
Jumlah sperma: 40 sampai 200 / HP
Pengenceran: 20 x
Jumlah rata-rata sperma / MS = 10 sampai 40/middle square
Jumlah dari ruang tengah kotak = 10 kotak
Jumlah sperma = 162 dan 170
Rata-rata jumlah sperma = 166
Faktor pengenceran tabel = 2
Sperma total = 166/2 = 83 juta / ml

 Vitalitas
1. Bersihkan objek glass dan cover glass
2. Ambil 10 mikroliter cairan sperma + 10 mikroliter eosin teteskan pada objek glass
3. Campurkan secara merata
4. Tutup menggunakan cover glass
5. Tunggu sampai 30 menit
6. Lihat dibawah mikroskop dengan perbesaran 40 x
7. Amati dan hitung sel sperma yang hidup (kepala putih) dan yang mati (kepala
berwarna merah/orange)
8. Masukkan kedalam rumus hasilnya
9. Interpretasikan hasil
Interpretasi :
misalnya Jumlah sperma hidup og = 40
Vitalitas presentase = 40/200 X 100% = 20%
normal ≤ 75%.

Praktikum Patologi Klinik Blok 8

PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 14
  Immature germ cell
1. Bersihkan objek glass dan cover glass
2. Ambil 20 mikroliter cairan sperma + 10 mikroliter metylin blue teteskan pada
objek glass
3. Campurkan secara merata
4. Tutup menggunakan cover glass
5. Tunggu sampai 30 menit
6. Lihat dibawah mikroskop dengan perbesaran 40 x
7. Amati sel-sel pada preparat (leukosit, eritrosit, immature germ celldan sel sel
epitel )
8. Interpretasikan hasil
Interpretasi
misalnya N = 3 leukosit tersebut (germcell) di 200 sperma
S = 45 juta / mI
Leukosit / sel benih = 3 x 45/200 = 0,7 juta / ml
(Normal: 1 juta / ml)

 Morfologi
1. Bersihkan objek glass dan buat spreader
2. Teteskan cairan sperma 5 mikroliter/1 tetes pipet pasteur
3. Buat apusan dengan dorongan spreader secara merata
4. Keringkan dengan suhu ruangan
5. Fixasi dengan methanol selama 5 menit
6. Warnai preparat dengan giemsa selama 30 menit
7. Bilas menggunakan buffer fosfat
8. Keringkan dengan suhu ruangan atau tiriskan
9. Lihat morfologi sel sperma dengan mikroskop perbesaran 100x
10. Catat dan interpretasikan hasil

Interpretasi
misalnya: - Normal (Kepala, Leher / Midpiece, ekor) = 140; 140/200 X 100% = 70
Praktikum Patologi Klinik Blok 8
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 15
- Piri = 5; 5/200 x 100% = 3%
- Lupto / tapered = 10; 10/200 X 100% = 5%
- Terato = 5; 5/200 x 100% = 3%.
- Makro = 15; 15/200X 100% = 7%.
- Mikro = 12; 12/200 X 100% = 6%
- Double = 10; 10/200 X 100% = 5%
- Tail defect = 3; 3/200 X 100% = 1%
- Midpiece defect =0
- Tetesan sitoplasma =0

Kesimpulan
Normospermia: Normal jumlahtersebut, motilitas, morfologi
Oligospermia: Jumlah sperma <20 milliom / ml
Asthenospermia: Sempurna <25%, Excellent dan baik <50%
Teratospermia: morfologi normal <30%
Oligoasthenoteratozoospermia: abnormal dari jumlah, motilitas, morfologi
Oligoasthenozoospermia: abnormal jumlah dan motilitas
Oligoteratozoospermia: abnormal jumlah dan morfologi
Asthenoteratozoospermia: motilitas abnormal
Azoospermia: sperma negatif pada ejakulasi
Aspermia: sperma negatif

LATIHAN SOAL
1. Jenis dari pemeriksaan sperma ?
2. Interpretasi dari hasil pemeriksaan sperma ?

Praktikum Patologi Klinik Blok 8

PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 16
LAPORAN PRAKTIKUM

Praktikum Patologi Klinik Blok 8

PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 17
KOMENTAR DOSEN PEMBIMBING

NAMA/PARAF DOSEN PEMBIMBING

Praktikum Patologi Klinik Blok 8

PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 18