Liquid Chromatography – Detector Photodioda Array

Penentuan 6-, 8-, 10-gingerol, dan 6-shogaol dalam jahe segar (Zingiber officinale) dan dalam
ekstrak jahe kering dilaporkan. Ini adalah studi pertama yang melaporkan metode tervalidasi
untuk penentuan 4 analit ini. Beberapa pelarut dan metode ekstraksi diperiksa, dan kombinasi
optimal ditentukan. Sampel diekstraksi pada suhu kamar dengan sonikasi dengan metanol, dan
ekstrak dianalisis dengan kromatografi cair dengan deteksi PDA. Kolom C18 digunakan dengan
fase gerak gradien air-asetonitril. Kuantifikasi berada pada 200 nm. Kadar 6-, 8-, 10-gingerol,
dan 6-shogaol dalam jahe segar masing-masing adalah 9,3, 1,6, 2,3, dan 2,3 mg / g. Tingkat
gingerol yang ditemukan dalam ekstrak jahe kering adalah antara 5 dan 16 kali lebih rendah
daripada dalam jahe segar, tetapi tingkat 6-shogaol lebih tinggi. Alasan konsentrasi 6-shogaol
lebih tinggi dalam ekstrak jahe kering daripada dalam jahe segar adalah bahwa jahe secara termal
tidak stabil; selama proses ekstraksi, yang menggunakan ekstraksi uap bertekanan, 6-gingerol
dikonversi menjadi 6-shogaol. Identitas analit dikonfirmasi oleh ESI-MS / MS ion negatif, di
mana 2 daughter ion dihasilkan untuk memberikan konfirmasi identitas yang kuat. Pemulihan
rata-rata adalah 97% dengan standar deviasi relatif <8%. Batas deteksi untuk 6-, 8-, 10-gingerol,
dan 6-shogaol dalam jahe segar masing-masing adalah 0,22, 0,04, 0,09, dan 0,07 mg / g, dan
dalam ekstrak jahe kering, 0,11, 0,02, 0,02 , dan 0,14 mg / g, masing-masing (Lee et al, 2007).
Ultra-High Performance Liquid Chromatography- Spektrofotometri Massa Tandem
Sebuah metode Ultra-High Performance Liquid Chromatography- spektrofotometri massa
tandem yang cepat dan sensitive dikembangkan dan divalidasi untuk penentuan 6-, 8-, dan 10-
gingerol dalam rimpang Zingiber officinale Rosc. Kromatografi cair berkinerja sangat tinggi
dilakukan dengan instrumen Waters Acquity (Waters Corp, MA, USA) yang dilengkapi dengan
sistem pengiriman pelarut biner, auto-sampler, pengaturan kolom, dan detektor spektrometri
massa (Synapt; Waters, Manchester , UK). Pemisahan kromatografi dicapai secara isokratis
pada kolom C18 (2.1mmx100mm; 1.7 µm) menggunakan fase gerak terdiri dari asetonitril - air
(9: 1 v = v). laju aliran fase gerak dijaga pada 0,25 mL/menit dan 10 µL larutan diinjeksikan.
Detektor yang digunakan adalah spektrometer massa Waters Q-TOF Premier (Micromass MS
Technologies, Manchester, UK). Transisi spektrometri massa untuk 6-gingerol, 8-gingerol, dan
10-gingerol terjadi pada masing-masing m = z 277.2467 / 177.1470, 305.3196 / 177. 1617, dan
333.3614 / 177.1666. Waktu analisis adalah 3,0 menit dan elusi 6-, 8-, dan 10-gingerol terjadi
pada 1,27, 1,51, dan 1,80 menit. Kisaran garis linier didapatkan pada rentang konsentrasi 2 dan
1000ng / mL untuk analit. Batas deteksi dan kuantisasi untuk 6-gingerol, 8-gingerol, dan 10-
gingerol adalah 0,921, 0,856, dan 1,069ng / mL, dan 2,951, 2,727, dan 3,013ng / mL. Deviasi
standar relatif dan akurasi didapatkan hasil yang memuaskan. Hasil penelitian menunjukkan
variasi yang signifikan (0,176% -0.290% w /w) pada jahe di antara dua belas varietas dan bahwa
varietas Patna dan Lucknow mengandung konsentrasi tertinggi dan disimpulkan lebih unggul.
Hasil ini dapat digunakan untuk menyusun strategi untuk budidaya tanaman ini untuk produksi
skala besar (Ashraf et al, 2014)
Densitometri
Metode densitometrik yang sederhana dan cepat telah dikembangkan untuk penentuan 6-gingerol
dan 6-shogaol di beberapa jahe komersial. Setelah mengekstraksi sampel empat kali dengan
metanol, larutan tersebut terlihat pada plat silika gel tlc, yang dielusi dengan campuran n-
heksana-etil eter (4: 6, v / v). Pemindaian densitometri dilakukan dengan Camag TLC-Scanner
II. Kemurnian dan identitas spot analit ditentukan dengan memindai mode absorbansi-reflektansi
dari 400 hingga 800 nm Evaluasi kuantitatif dilakukan dengan mengukur reflektansi absorbansi
dari spot analit pada panjang gelombang 577 nm setelah disemprotkan dengan pereaksi
anisaldehyde-H2SO4.. Parameter pemindaian densitometri adalah: bandwidth 10 nm, lebar celah
4, panjang celah 6, dan kecepatan pemindaian 4 mm S21. Perhitungan untuk identitas,
pemeriksaan kemurnian (rS, M dan rM, E di mana spectrum awal S ¼ , M ¼ tengah, E ¼
spektrum akhir), sdv (deviasi standar relatif) dari kurva linier / kalibrasi, dan kuantifikasi spot
analit dilakukan oleh perangkat lunak (CAMAG) CATS versi 3.17 (1995). Evaluasi kuantitatif
rutin dilakukan melalui area puncak dengan regresi linier, menggunakan kalibrasi eksterna 4-5
poin pada setiap plat (80 hingga 120% dari nilai yang ditargetkan). Setiap ekstrak dari sampel
aliquot terlihat setidaknya dalam percobaan kedua. Metode tlc-densitometrik murah, selektif,
tepat dan akurat dan dapat digunakan untuk analisis rutin jahe di laboratorium untuk kontrol
mutu industri obat herbal (Melianita et al, 2007).
Kesimpulan
Senyawa gingerol yang terdapat dalam jahe dapat dilakukan analisis kuantitatif dengan berbagai
metode seperti kromatografi gas-spektrometri massa, kromatografi lapis tipis kinerja tinggi,
HPLC dengan deteksi absorbansi UV, HPLC dengan deteksi PDA. HPLC digabungkan dengan
spektrometri massa ((LC-MS), atau HPLC digabungkan dengan spektrometri massa tandem (LC-
MS-MS). Dalam proses analisis kuantitatif harus diperhatikan mengenai preparasi sampel dan
ekstraksi sampel karena gingerol merupakan senyawa yang bersifat termolabil, dimana pada
suhu tinggi dapat terdegradasi menjadi senyawa shagaol. Berdasarkan penelitian yang telah
dilakukan, metode HPLC lebih banyak digunakan untuk analisis senyawa gingerol karena
metode ini cepat, sensitif, dan akurat.