PENGARUH VARIASI METODE EKSTRAKSI SECARA MASERASI DAN

DENGAN ALAT SOXHLET TERHADAP KANDUNGAN KURKUMINOID

DAN MINYAK ATSIRI DALAM EKSTRAK ETANOLIK KUNYIT (Curcuma
domestica Val.)

DISUSUN OLEH :

Desy Nelsari (16334046)

PROGRAM STUDI

FAKULTAS FARMASI

INSTITUT SAINS DAN TEKNOLOGI NASIONAL

2019
 KATA PENGANTAR

Puji syukur saya panjatkan kehadirat Tuhan Yang Maha Esa karena dengan rahmat,
karunia, serta taufik dan hidayah-Nya saya dapat menyelesaikan makalah ini dengan baik
meskipun banyak kekurangan didalamnya.

Saya sangat berharap makalah ini dapat berguna dalam rangka menambah wawasan serta
pengetahuan untuk kita. Saya juga menyadari sepenuhnya bahwa di dalam makalah ini terdapat
kekurangan dan jauh dari kata sempurna. Oleh sebab itu, saya berharap adanya kritik, saran dan
usulan demi perbaikan makalah yang telah kami buat di masa yang akan datang, mengingat tidak
ada sesuatu yang sempurna tanpa saran yang membangun.

Semoga makalah sederhana ini dapat dipahami bagi siapapun yang membacanya. Sekiranya
makalah yang telah disusun ini dapat berguna bagi saya sendiri maupun orang yang
membacanya. Sebelumnya saya mohon maaf apabila terdapat kesalahan kata-kata yang kurang
berkenan dan saya memohon kritik dan saran yang membangun dari Anda demi perbaikan
makalah ini di waktu yang akan datang.

Jakarta, Januari 2019

Penyusun

ii
 DAFTAR ISI

KATA PENGANTAR .........................................................................................................................................ii

DAFTAR ISI......................................................................................................................................................... iii
BAB I ......................................................................................................................................................................... 1
PENDAHULUAN ................................................................................................................................................. 1
1.2. Latar belakang ........................................................................................................................................ 1
1.2. Rumusan masalah .................................................................................................................................. 2
1.3. Tujuan ....................................................................................................................................................... 2
BAB II ....................................................................................................................................................................... 3
TINJAUAN PUSTAKA ..................................................................................................................................... 3
2.1 Taksonomi ............................................................................................................................................... 3
2.2 Metode Ekstraksi ................................................................................................................................... 3
2.3. Destilasi .................................................................................................................................................. 10
BAB III ................................................................................................................................................................... 13
METEDEOLOGI PENELITIAN ................................................................................................................ 13
3.1. Metode .................................................................................................................................................... 13
BAB IV .................................................................................................................................................................... 14
PEMBAHASAN .................................................................................................................................................. 14
4.1. Preparasi Bahan Baku......................................................................................................................... 14
4.2. Ekstraksi Minyak Atsiri Daun Zodia dengan Metode Maserasi ............................................ 14
4.3. Ekstraksi Minyak Atsiri Daun Zodia dengan Metode Distilasi Air ...................................... 15
4.4. Pengujian GC-MS Minyak Atsiri Daun Zodia ............................................................................ 16
Bab V ....................................................................................................................................................................... 20
PENUTUP ............................................................................................................................................................. 20
5.1. Kesimpulan ............................................................................................................................................ 20
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................................................................ 21

iii
 PENGARUH VARIASI METODE EKSTRAKSI SECARA MASERASI DAN
DENGAN ALAT SOXHLET TERHADAP KANDUNGAN KURKUMINOID DAN
MINYAK ATSIRI DALAM EKSTRAK ETANOLIK KUNYIT (Curcuma domestica
Val.)

ABSTRACT

Rhizome turmeric plant (Curcuma domestica Val.) have been used from
generation to generation by Indonesian society as a traditional medicine. Active
compounds in the rhizome of turmeric, which is often used as traditional medicine is
curcuminoid as anti-inflammatory and essential oils efficacious to prevent the release
of excessive stomach acid.

This is a quasi -experimental research to compare the content of

curcuminoid in turmeric and essential oils obtained by maceration and with tool of
Soxhlet. The aim is to help the producers of traditional medicines to obtain the
maximum curcuminoid and essential oils.

The rhizome of turmeric was extracted with two kinds of methods such as
maceration and with tool of Soxhlet using ethanol then thickened with a rotary
vacuum evaporator. Curcuminoid then determined by visible spectrophotometer and
essential oils levels set by distillation Stahl in % v/b.

The results are curcuminoid obtained from the maceration method

46.2636%, and with Soxhlet tool method 54.7162%. The essential oils content
obtained from the maceration method is 17.2210% and with Soxhlet tool method is
19.3105%. The t-test result shows that the with Soxhlet tool extraction method is the
best method to obtained curcuminoid from turmeric. The essential oils can use both
extraction methods.

Key words : maceration, tool of Soxhlet, curcuminoid, essential oil, turmeric

 BAB I
PENDAHULUAN

1.2. Latar belakang

Indonesia merupakan Negara yang kaya akan sumber daya alam, terutama

tanaman obat. Tanaman obat penggunaannya dapat dalam bentuk segar, tunggal

maupun campuran, serta dapat berupa ramuan yang lebih dikenal sebagai obat

tradisional. Berdasarkan pengalaman nenek moyang obat tradisional relatif aman

dikonsumsi manusia. Meskipun demikian pembuktian ilmiah tetap diperlukan

(Suharmiati dan Handayani, 2006).

Undang-undang nomor 23 tahun 1992 menyebutkan bahwa obat tradisional

adalah bahan atau ramuan bahan yang berupa bahan tumbuhan, bahan hewan, bahan

mineral atau campuran dari bahan tersebut yang secara turun-temurun telah

digunakan untuk pengobatan berdasarkan pengalaman (Anonim, 1992).

Perkembangan teknologi mengakibatkan industri obat-obatan dan obat

tradisional berkembang pesat. Bahan baku berupa simplisia banyak sekali diminati

oleh industri, salah satunya rimpang kunyit (RK) (Rukmana, 1994). Simplisia adalah

bahan alamiah yang dipergunakan sebagai obat yang belum mengalami pengolahan

apapun juga dan kecuali dinyatakan lain, berupa bahan yang telah dikeringkan

(Anonim, 2005). Kebutuhan industri terhadap kunyit tinggi yaitu 1.355 ton/tahun

berat segar (Kemala et al ,2000).

 Berdasarkan hasil survei tahun 2003, kebutuhan RK berdasarkan

jumlahnya yang diserap oleh industri obat tradisional di Jawa Timur menduduki

peringkat pertama dan di Jawa Tengah termasuk lima besar bersama-sama dengan

bahan baku obat lainnya (Kemala et al, 2000).

Kunyit (Curcuma domestica Val.) termasuk salah satu tanaman rempah

dan obat yang sering dimanfaatkan untuk menyembuhkan berbagai penyakit.

Sebagian besar jamu yang beredar di Indonesia, Malaysia, dan beberapa Negara

lain selalu menggunakan kunyit sebagai salah satu bahan baku (Nugroho, 1998).

Kunyit sudah digunakan dalam pengobatan tradisional bagi beberapa

penyakit misalnya antiinflamasi, alergi dan antibakteri. Bagian tanaman kunyit

yang paling banyak digunakan adalah rimpang (Nurfina, 1998). RK juga

berkhasiat untuk mengobati sakit perut, diare, asma, sakit kepala, keputihan, haid

tidak lancar, dan sebagai ekspektoran (Duke, 2008).

RK mengandung senyawa aktif yang berkhasiat sebagai obat yaitu

kurkuminoid (Oomah, 2000) dan minyak atsiri (MA) (Rukmana, 1994). Warna

kuning dari kunyit disebabkan adanya senyawa kurkuminoid yang merupakan

komponen utama tumbuhan kunyit dan memiliki peran penting dalam aktivitas

antiinflamasi (Chattopadhyay, Biswas, Bandyopadhyay Banerjee, 2004; Sumiati

dan Adnyana, 2004). Zat warna kuning tersebut larut dalam alkohol dan asam

asetat glasial, tetapi tidak dapat larut dalam air dan eter (Tarujaya, 1992;

Windholz, 1981). Senyawa ini terdiri dari campuran senyawa-senyawa kurkumin,

desmetoksikurkumin, dan bidesmetoksi kurkumin. Dari ketiga senyawa

kurkuminoid tersebut, kurkumin merupakan komponen terbesar, yaitu sebesar 50-

60% dari total kurkuminoid. Kadar total kurkuminoid sering dihitung sebagai

presentase kurkumin (Sumiati et al, 2004).

Kurkuminoid tergolong senyawa fenol yang memiliki dua cincin fenol

simetris dan dihubungkan dengan satu rantai heptadiena (Suwanto, 1983 yang

diacu dalam Sihombing, 2007) sehingga sering dikatakan juga bahwa

kurkuminoid termasuk golongan polifenol (Oomah, 2000).

Kunyit mengandung senyawa minyak atsiri (MA) (6%) yang terdiri dari

sejumlah monoterpen dan keton seskuiterpen, termasuk zingiberen, kurkumen, α-

dan β-turmeron, tumeon, zingiberen, felandren, sabinen, borneol, sineol

(Wikipedia, 2007; Anonim, 1999). MA dari RK berkhasiat untuk mencegah

keluarnya asam lambung yang berlebihan dan mengurangi peristaltik usus yang

terlalu kuat (Tampubolon, 1981). Selain mengandung kurkuminoid seperti yang

telah disebutkan (Sumiati et al, 2004), kunyit juga mengandung protein, fosfor,

kalium, besi dan vitamin C (Soedibjo, 1998).

Sesuai dengan perkembangan zaman, industri obat –obatan dan obat

tradisional maju pesat, sehingga obat tradisional pun telah berhasil membuat

sediaan galenik atau pembuatan ekstrak. Pembuatan sediaan ekstrak dimaksudkan

agar zat berkhasiat yang terdapat di simplisia terdapat dalam bentuk yang

mempunyai kadar yang tinggi dan hal ini memudahkan zat berkhasiat dapat diatur

dosisnya. (Anief, 1997).

Dalam membuat suatu sediaan galenik, diperlukan peningkatan kualitas

ekstrak. Bila kualitas ekstrak meningkat, maka kualitas sediaan obat tradisional

ikut meningkat. Peningkatan kualitas ekstrak dapat dimulai dari metode ekstraksi
yang digunakan untuk dapat menghasilkan ekstrak dengan kandungan senyawa

aktif yang maksimal.

Ekstraksi merupakan kegiatan penarikan kandungan kimia yang dapat

larut sehingga terpisah dari bahan yang tidak dapat larut dengan pelarut cair

(Anonim, 1986). Metode ekstraksi dibagi menjadi dua jenis, antara lain cara

dingin dan cara panas. Metode ekstraksi yang tergolong cara dingin adalah

maserasi dan perkolasi sedangkan metode ekstraksi yang tergolong cara panas

adalah refluks, dengan alat Soxhlet, digesti, dan infus (Anonim, 2000).

Untuk menunjang peningkatan kualitas ekstrak yang menghasilkan

ekstrak dengan kandungan senyawa aktif secara maksimal, maka pada penelitian

ini dilakukan ekstraksi RK dengan menggunakan metode pembuatan ekstrak RK

secara maserasi dan sokletasi yang akan memberikan hasil yang berbeda, sehingga

dari perbedaan tersebut dapat diketahui metode pembuatan ekstrak yang paling

baik. Senyawa aktif yang diekstraksi dengan kedua metode ekstraksi tersebut

adalah kurkuminoid dan MA sebagai kandungan utama kunyit (Rukmana, 1994).

Maserasi merupakan cara penyarian yang sederhana (Anonim, 1986) bila

dibandingkan dengan metode ekstraksi lainnya. Hal ini dikarenakan cara

pengerjaannya sederhana dan peralatannya mudah diusahakan, sederhana, dan

tidak memerlukan alat khusus (Indraswari, 2008; Runadi, 2007).

Pembuatan ekstrak secara maserasi merupakan proses paling cepat

dimana digunakan untuk simplisia yang sudah halus dan memungkinkan direndam

hingga meresap dan melunakkan susunan sel, sehingga zat –zatnya akan larut

(Ansel, 1985; Voigt, 1971) dan digunakan untuk penyarian simplisia yang
mengandung zat aktif yang mudah larut dalam cairan penyari (Anonim, 1986).

Remaserasi merupakan bagian dari maserasi. Remaserasi merupakan pengulangan

penambahan pelarut setelah dilakukan penyaringan maserat pertama, dan

seterusnya (Anonim, 2000).

Pembuatan ekstrak dengan alat Soxhlet digunakan untuk simplisia yang

bertekstur lunak dan tidak tahan pemanasan secara langsung karena suhu

pemanasan dapat diatur (Utami, 2009).

RK termasuk simplisia yang lunak, mudah diserbuk sehingga halus dan

memungkinkan perendaman sehingga metode maserasi cocok untuk

mengekstraksi RK. Kandungan kurkuminoid yang terkandung di dalam RK tidak

tahan pemanasan secara langsung karena akan terurai sehingga metode dengan

alat soxhlet cocok digunakan untuk mengekstraksi RK.

Digunakan metode ekstraksi RK secara maserasi (cara dingin) dan

dengan alat Soxhlet (cara panas) untuk mengetahui metode ektraksi terbaik di

antara kedua metode ekstraksi tersebut dalam mengekstraksi kurkuminoid dan

MA yang terkandung dalam RK setelah kurkuminoid dan MA dari masing-masing

metode ekstraksi ditetapkan kadarnya secara spektrofotometri visible pada

panjang gelombang yang sesuai (Anonim, 1993). Kadar MA dapat ditentukan

dengan membaca jumlah volume MA yang tertampung dalam buret berskala pada

rangkaian alat destilasi air dengan metode destilasi Stahl. Kemudian banyaknya

MA yang telah dibaca dibuat kadarnya dalam % v/b (Anonim, 2004).

Pelarut yang digunakan dalam ekstraksi ini adalah etanol 95%.

Digunakan etanol sebagai pelarut karena etanol merupakan pelarut yang universal
 yang dapat menarik hampir sebagian besar senyawa kimia yang terkandung di dalam

herba (Runadi, 2007). Pertimbangan lainnya adalah etanol sebagai penyari karena

lebih selektif, kapang dan kuman sulit tumbuh, tidak beracun, netral, dan panas yang

diperlukan untuk pemekatan relatif lebih sedikit (Anonim, 1986), juga etanol tidak

menyebabkan pembengkakan membran sel dan mampu mengendapkan albumin dan

menghambat kerja enzim (Voigt, 1994).

Parameter kadar kurkuminoid yang baik dalam RK adalah 33,9% dan MA

kunyit 3,2% (Anonim, 2004). Berdasarkan hal tersebut diharapkan RK penelitian ini

baik dengan menggunakan metode ekstraksi maserasi (MEM) maupun metode

ekstraksi dengan alat Soxhlet (MES) mengandung kurkuminoid dan MA sesuai

dengan parameter yang baik pada Anonim, 2004.

1.2. Rumusan masalah

a. Adakah pengaruh metode yaitu maserasi dam dengn alat Soxhlet terhadap kadar
kurkuminoid dalam extrak etanolik RK?
b. Adakah pengarhuh variasi metode yaitu maserasi dan dengan alat Soxhlet terhadap kadar
MA dalam extrak etanolik RK?

1.3. Tujuan

a. Untuk mendapatkan ekstrak RK yang paling baik diantara kedua metode extraksi , yaitu
maserasi dan dengan alat Soxhlet

b. Untuk mengetahui adanya pengaruh variasi metode ekstraksi secara maserasi dan dengan
alat Soxhlet terhadap kandungan krkuminoid dan MA extrak RK dengan etanol 95%
 BAB II
TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Taksonomi

A. Uraian Kunyit

Kunyit merupakan tanaman obat berupa semak dan bersifat tahunan

(perenial) yang tersebar di seluruh daerah tropis. Tanaman kunyit tumbuh subur

dan liar di sekitar hutan/bekas kebun. Tanaman ini banyak dibudidayakan di Asia

Selatan khususnya di India, Cina Selatan, Taiwan, Indonesia (Jawa), dan Filipina

(Anonim, 2006).

Kunyit merupakan herba yang memiliki terklasifikasi sebagai berikut :

Divisio : Spermatophyta

Subdivisio : Angiospermae

Classis : Monocotyledonae

Ordo : Zingiberales

Familia : Zingiberaceae

Spesies : Curcuma domestica Valleton

Sinonim : Curcuma longa Linn; Amomum curcuma Jacq; Stissera

curcuma Raevsch; Curcuma domestica Rumph; Curcuma

longa Auct; Amomum Curcuma Murs (Anonim, 2006).

Kunyit memiliki sebutan berbeda dimasing-masing daerah. Beberapa

nama yang digunakan untuk menyebut Kunyit adalah sebagai berikut.

a. Nama Indonesia : Kunyit (Rukmana, 1994)

b. Nama Inggris : Turmeric (Duke, 2008)

 c. Nama daerah : Kakunye (Sumatera), Kunir (Jawa Tengah), Jange

henda (Kalimantan), Kunyit (Nusa Tenggara), Uinida (Sulawesi), Kurlai (Maluku), Rame

(Irian), Koneng (Sunda) (Anonim, 1985).

2. Uraian rimpang kunyit

RK adalah rimpang Curcuma domestica Valleton (Anonim, 1977).

Pemerian. Bau khas aromatik; rasa agak pahit, agak pedas, lama kelamaan

menimbulkan rasa tebal (Anonim, 1977).

Makroskopik. Kepingan : Ringan, rapuh, warna kuning jingga, kuning

jingga kemerahan sampai kuning jingga kecoklatan; bentuk hampir bundar sampai

bulat panjang, kadang–kadang bercabang; lebar 0,5 cm sampai 3 cm, panjang 2

cm sampai 6 cm, tebal 1 mm sampai 5 mm (Anonim, 1977).

Mikroskopik. Epidermis; Satu lapis sel, pipih berbentuk poligonal,

dinding sel menggabus. Korteks dan silinder pusat: parenkimatik, terdiri dari sel-

sel besar, penuh berisi pati. Butir pati: Tunggal, bentuk lonjong atau bulat telur

dengan satu sisi membulat; Sel sekresi: Banyak tersebar, bentuk bulat atau

lonjong berisi minyak berwarna kuning jingga yang sebagian mendamar dan

berwarna coklat kekuningan. Berkas pembuluh: Kolateral, tersebar tidak beraturan

pada korteks dan pada silinder pusat, berkas pembuluh di bawah endodermis

tersusun dalam lingkaran, kadang-kadang berkas pembuluh dikelilingi sel

parenkim yang tersusun menjari (Anonim, 1977).

3. Kandungan kimia

Zat warna curcuminoid suatu senyawa diarylheptanoide 3 – 4% terdiri

dari curcumin, desmetoxycurcumin dan bidesmethoxy-curcumin. MA 2-5% terdiri

dari seskuiterpen dan turunan phenylpropane yang meliputi turmeron, ar-

turmeron, alfa dan beta turmeron, curlon, curcumol, atlanton, turmerol (minyak

turmerin yang menyebabkan aroma dan wangi kunyit), beta-bisabolen, beta –

sesquiterphenalendren, zingiberen, ar-curcumen, humulen, arabinosa, fruktosa,

glukosa, pati, tanin dan damar serta mineral, yaitu Mg, Mn, Fe, Cu, Ca, Na, K, Pb,

Zn, Co, Al, dan Bi (Sudarsono, 1996).

Ada pula literatur yang mengatakan bahwa kunyit mengandung

senyawa MA (6%) yang terdiri dari sejumlah monoterpen dan keton seskuiterpen,

termasuk zingiberen, kurkumen, tumeon, felandren, sabinen, borneol, sineol,

selain yang telah dijelaskan oleh Sudarsono, 1996 (Wikipedia, 2007). Basis warna

kunyit (5%) disebabkan adanya kurkuminoid, 50 – 60% merupakan campuran dari

kurkumin, monodesmetoksikurkumin, dan bisdemetoksikurkumin (Anonim,

1999), kunyit juga mengandung protein, fosfor, kalium, besi, dan vitamin C

(Soedibjo, 1998).

4. Khasiat dan kegunaan

RK berkhasiat untuk mengobati sakit perut, diare, asma, sakit kepala,

keputihan, haid tidak lancar, dan sebagai ekspektoran (Duke, 2008). Selain itu

efek farmakologis lainnya, yaitu melancarkan peredaran darah, mempermudah

persalinan, antiradang (anti-inflammatory), antibakteri, memperlancar

pengeluaran empedu (kolagogum), pelembab (moisturizer), antioksidan, dan dapat

 meningkatkan aktivitas seksual (Winarto, 2003). Khasiat kunyit lainnya, yaitu

sebagai penawar racun (antidota), penguat lambung dan penambah nafsu makan

(Rukmana, 2004).

B. Uraian Kurkuminoid

Kunyit memiliki senyawa yang berkhasiat obat yang disebut dengan

kurkuminoid. Kurkuminoid adalah senyawa yang memberikan warna kuning pada

kunyit (Chattopadhyay et al, 2004 ; Sumiati et al, 2004; Dandekar dan Kaikar,

2002) oleh sebab itu kurkuminoid (kebanyakan berupa kurkumin) banyak menjadi

pusat peneliti (Dandekar et al, 2002). Kurkuminoid terdiri atas kurkumin

sebanyak 50 – 60%, desmetoksikurkumin, dan bidesmetoksikurkumin (Anonim,

1999). Kurkumin merupakan komponen terbesar dari kurkuminoid sehingga

sering kadar total kurkuminoid dihitung sebagai % kurkumin (Sumiati et al,

2004). Kurkumin murni sangat sulit diperoleh langsung dari RK karena seringkali

tercampur dengan dua turunannya, yaitu demetoksikurkumin dan

bisdemetoksikurkumin (Donatus, 1994).

Kurkumin merupakan senyawa kandungan utama tanaman kunyit

(Curcuma longa L.) terdapat juga dalam tanaman temulawak (Curcuma

xanthorrhiza, Roxb.) dan pada tanaman temugiring (Curcuma heyneana, Val. &

Ziep.) (familia Zingiberaceae) (Tonnesen, 1989; Masuda, Isobe, Jitoe, dan

Nakatani, 1992; Masuda et al, 1993; van der Goot, 1997).

Kurkumin (1,7 – bis(4’hidroksi-3 metoksifenil)-1,6 heptadien, 3, 5-dion

(Jaruga, 1998 ; Pan, 1999) memiliki berat molekul 368, 126 (Tonnesen, &
Karlsen, 1983; Wikipedia, 2007). Kurkumin tergolong senyawa diarilheptanoid

dengan rumus molekul C21O6H2O (Tonnesen et al, 1985).

Pertama kali kurkumin ditemukan pada tahun 1815 oleh Vogel dan

Pelletier (van der Goot, 1997). Kristalisasi kurkumin pertama kali dilakukan oleh

Daube pada tahun 1870 dan elusidasi struktur kimia dilakukan pada tahun 1910

oleh Lampe. Sintesis kurkumin pertama kali dilakukan oleh Lampe dan

Milobedzka pada tahun 1913 (Roughly and Whiting, 1973). Struktur kimia

terlihat pada gambar sebagai berikut.

O O

H3CO OCH3

R
R1 2

Keterangan :

R1 = R2= OCH3 Kurkumin

R1 =H R2= OCH3 Demetoksikurkumin

R1 =R2= H Bisdemetoksikurkumin

Gambar. I Struktur molekul kurkuminoid (Roughly et al, 1973)

Stabilitas kurkumin sangat dipengaruhi oleh pH lingkungan. Dalam

larutan berair dengan pH basa kurkumin mengalami reaksi hidrolisis dan

degradasi pada gugus metilen aktif pada senyawa tersebut (Tonnesen et al., 1985).

Kurkumin akan terdegradasi pada pH di atas 7,2 (Bermawie, Rahardjo, Wahyuno,

dan Ma’mun, 2005). Instabilitas kurkumin juga dipengaruhi oleh adanya cahaya
yang menyebabkan terjadinya degradasi fotokimia senyawa tersebut (van der

Goot, 1997; Supardjan, dan Meiyanto, 2002) dan oleh sinar ultraviolet

(Bermawie, et al., 2005).

Kurkumin larut dalam asam asetat glasial, alkohol, (Windholz, 1981;

Tarujaya, 1992) dan aseton (Joe, Vijaykumar, Lokesh, 2004; Chattopadhyay et al,

2004; Araujo dan Leon, 2001) tetapi tidak dapat larut dalam air, eter (Windholz,

1981; Tarujaya, 1992).

Kurkuminoid mempunyai aktivitas antiinflamasi (Timmerman, 1995;

Kohli, 2005). Kurkuminoid menghambat senyawa eicosanoid seperti

prostaglandin, tromboksan dan prostasiklin dengan cara menghambat aktivitas

enzim cyclooxygenase (COX). Kurkuminoid juga menghambat pembentukan

senyawa leukotrien dengan menghambat aktivitas enzim lipoxygenase (LOX)

(Kohli, 2005). Dari tiga senyawa kurkuminoid, kurkumin mempunyai aktivitas

antiinflamasi yang paling kuat dibandingkan senyawa turunannya (Agnam,

Samhoedi, Timmerman, Venie, Sugiyanto, Goot, 1995; Bermawie, 2006; Hadi,

1985; Majeed, Badmaev, Shivakumar, Rajendran, 1995; Punithavathi,

Venkatesan, Babu, 2000; Siddiqui, Cui, Wu, Dong, Zhou, Hu, Simms, Wang,

2006; Goot, 1997).

Kurkumin merupakan golongan senyawa fenol yang sangat penting

sebagai antioksidan (Majeed et al, 1995; Osawa, Sugiyama, Inayoshi, dan

Kawakishi, 1995) karena memiliki dua cincin fenol simetris dan dihubungkan

dengan satu rantai heptadiena (Suwanto, 1983 yang diacu dalam Sihombing,

2007). Kurkumin memiliki dua gugusan hidroksi atau dua gugusan fenol, maka
 sering disebut sebagai senyawa polifenol (Madigan, 2005; Oomah, 2000;

Wikipedia, 2007).

Kurkumin yang bercampur dengan kedua turunannya yang juga berwarna

kuning yaitu bisdemetoksikurkumin dan desmetoksikurkumin ditetapkan sebagai

kadar kurkuminoid dengan menggunakan spektrofotometri visible (Anonim, 1977;

Anonim, 1993).

c. Uraian Minyak Atsiri

MA merupakan salah satu hasil proses metabolisme dalam tanaman

(Anonim, 1985). MA adalah zat berbau yang terdapat dalam berbagai bagian

tanaman, karena menguap bila dibiarkan di udara pada suhu kamar, maka disebut

minyak menguap, minyak eteris, atau minyak esensial (Claus, 1959).

MA terdapat pada bagian khusus tanaman, tergantung pada tanaman

tersebut. Pada tumbuhan Zingiberaceae MA terdapat dalam sel –sel rimpang.

Kunyit merupakan salah satu tumbuhan Zingiberaceae sehingga bagian

rimpangnya yang digunakan untuk mengambil MA (Tyler, Brady, Robbers,

1988).

MA atau minyak terbang banyak digunakan dalam industri sebagai bahan

pewangi atau penyedap (flavoring). Selain itu, MA juga banyak digunakan dalam

bidang kesehatan. Beberapa jenis MA dapat digunakan sebagai bahan antiseptik,

analgesik, haemolitik, sedatif, stimulan untuk obat sakit perut, dan bakterisida

(Guenther, 1948). Selain digunakan untuk obat, MA juga digunakan dalam

parfum dan kosmetik, sebagai penyedap rasa makanan (Tyler et al, 1988).
 Kunyit mengandung MA 2-5% terdiri dari seskuiterpen dan turunan

phenylpropane yang meliputi turmeron, ar-turmeron, alfa dan beta turmeron,

curlon, curcumol, atlanton, turmerol (minyak turmerin yang menyebabkan aroma

dan wangi kunyit), beta-bisabolen, beta – sesquiterphenalendren, zingiberen, ar-

curcumen, humulen, Arabinosa, fruktosa, glukosa, pati, tanin dan damar serta

mineral, yaitu Mg, Mn, Fe, Cu, Ca, Na, K, Pb, Zn, Co, Al, dan Bi (Sudarsono,

1996).

MA kunyit memiliki berat jenis 0,941, rotasi optik pada suhu 20°C

adalah -190.18, indeks bias pada suhu 20°C adalah 1.5025. Warna MA kuning

dan mempunyai bau yang khas dan rasa pedas (Guenther, 1952).

MA dari RK berkhasiat untuk mencegah keluarnya asam lambung yang

berlebihan dan mengurangi peristaltik usus yang terlalu kuat (Tampubolon, 1981)

D. Penyulingan Minyak Atsiri

Sebagian besar MA umumnya diperoleh dengan cara penyulingan.

Penyulingan didefinisikan sebagai pemisahan komponen–komponen suatu

campuran dari dua jenis cairan atau lebih berdasarkan perbedaan tekanan uap dari

masing –masing zat (Guenther, 1948).

Pada industri MA dikenal tiga macam metode penyulingan, yaitu :

1. Penyulingan dengan air

Pada metode ini, bahan yang akan disuling kontak langsung dengan air

mendidih. Bahan tersebut mengapung di atas air atau terendam secara sempurna

tergantung dari bobot jenis dan jumlah bahan yang disulng. Air dipanaskan
dengan metode pemanasan yang biasa dilakukan, yaitu dengan panas langsung,

mantel uap, pipa uap melingkar terbuka atau berlubang. Ciri khas dari metode ini

ialah kontak langsung antara bahan dengan air mendidih (Guenther, 1948).

2. Penyulingan dengan air dan uap

Penyulingan ini dilakukan pada material basah ataupun kering yang bisa

rusak karena perebusan. Pada metode penyulingan ini, bahan olah diletakkan di

atas rak –rak atau saringan berlubang. Ketel suling diisi dengan air sampai

permukaan air berada tidak jauh di bawah saringan. Air dapat dipanaskan dengan

berbagai cara yaitu dengan uap jenuh yang basah dan bertekanan rendah. Ciri khas

dari metode ini adalah: 1) uap selalu dalam keadaan basah, jenuh dan tidak terlalu

panas; 2) bahan yang disuling hanya berhubungan dengan uap dan tidak dengan

air panas (Tyler et al, 1988; Guenther, 1948).

3. Penyulingan dengan uap

Penyulingan cara ini tidak memerlukan air, uap air panas yang biasanya

bertekanan lebih dari 1 atmosfer dialirkan melalui suatu pipa uap. Peralatan yang

dipakai tidak berbeda dengan penyulingan dengan air dan uap, hanya diperlukan

alat tambahan untuk memeriksa suhu dan tekanan (Anonim, 1985). Uap yang

digunakan adalah uap jenuh, uap dialirkan melalui pipa uap berlingkar yang

berpori yang terletak di bawah bahan, dan uap bergerak ke atas melalui bahan

yang terletak di atas saringan (Guenther, 1948). Penyulingan ini baik digunakan

untuk membuat MA dari biji, akar, kayu yang umumnya mengandung komponen

minyak yang bertitik didih tinggi (Anonim, 1985).

E. Uraian Metode Ekstraksi

1. Tujuan ekstraksi

Ekstraksi adalah kegiatan penarikan kandungan kimia yang dapat larut

sehingga terpisah dari bahan yang tidak dapat larut dengan pelarut cair (Anonim,

1986).

Ekstraksi dilakukan untuk menyari zat –zat berkhasiat atau zat –zat aktif

dari bagian tanaman obat, hewan dan beberapa jenis ikan termasuk biota laut.

Zat–zat aktif terdapat di dalam sel, namun sel tanaman dan hewan berbeda

demikian pula ketebalannya, sehingga diperlukan metode ekstraksi dengan pelarut

tertentu dalam mengekstraksinya (Harbone, 1987).

Tujuan ekstraksi bahan alam adalah untuk menarik komponen kimia

yang terdapat pada bahan alam. Ekstraksi ini didasarkan pada prinsip perpindahan

massa komponen zat ke dalam pelarut, dimana perpindahan mulai terjadi pada

lapisan antar muka kemudian berdifusi masuk ke dalam pelarut (Anonim, 1986).

2. Jenis – jenis ekstraksi

Metode ekstraksi dengan menggunakan pelarut, terdiri dari :

a. Cara dingin.

1) Maserasi

Maserasi adalah proses pengekstrakkan simplisia dengan menggunakan

pelarut dengan beberapa kali pengocokan atau pengadukan pada temperatur

kamar. Remaserasi berarti dilakukan pengulangan penambahan pelarut setelah

dilakukan penyaringan maserat pertama, dan seterusnya (Anonim, 2000).

 2) Perkolasi

Perkolasi adalah ekstraksi dengan pelarut yang selalu baru, yang

umumnya dilakukan pada temperatur ruangan. Proses terdiri dari tahapan

pengembangan bahan, tahapan maserasi antara, tahap perkolasi sebenarnya

(penetesan/penampungan ekstrak), terus menerus sampai diperoleh perkolat yang

jumlahnya 1-5 kali jumlah bahan.

b. Cara panas

1) Refluks

Refluks adalah ekstraksi dengan pelarut pada temperatur pada titik

didihnya, selama waktu tertentu dan jumlah pelarut terbatas yang relatif konstan

dengan adanya pendingin balik. Umumnya dilakukan pengulangan proses pada

residu pertama sampai 3-5 kali sehingga proses ekstraksi sempurna.

2) Dengan alat Soxhlet

Dengan alat Soxhlet adalah ekstraksi yang umumnya dilakukan dengan

alat khusus sehingga terjadi ekstraksi kontinyu dengan jumlah pelarut relatif

konstan dengan adanya pendingin balik.

3) Digesti

Digesti adalah maserasi kinetik (dengan pengadukan kontinyu) pada

temperatur yang lebih tinggi dari temperatur kamar, secara umum dilakukan pada

temperatur 40-50 C.
 4) Infus

Infus adalah ekstraksi dengan pelarut air pada temperatur 96-98 C

selama waktu 15-20 menit di penangas air, berupa bejana infus tercelup dalam

penangas air mendidih (Anonim, 2000).

3. Uraian maserasi

Istilah maceration berasal dari bahasa latin macerare, yang artinya

“merendam”. Merupakan proses paling tepat dimana obat yang sudah halus

memungkinkan untuk direndam dalam pelarut sampai meresap dan melunakkan

susunan sel, sehingga zat –zat yang mudah larut akan melarut (Ansel, 1985).

Maserasi merupakan cara penyarian yang sederhana dan digunakan untuk

simplisia yang mengandung zat aktif yang mudah larut dalam cairan penyari.

Maserasi dilakukan dengan cara merendam serbuk simplisia dalam cairan penyari.

Cairan penyari akan menembus dinding sel dan masuk kedalam rongga

sel yang mengandung zat aktif. Zat aktif akan larut dan karena adanya perbedaan

konsentrasi antara larutan zat aktif di dalam sel dan di luar sel, maka larutan yang

pekat didesak keluar. Peristiwa tersebut berlanjut sehingga terjadi keseimbangan

konsentrasi antara larutan di luar dan di dalam sel. Cairan penyari yang digunakan

dapat berupa air, etanol, air-etanol, atau pelarut lain.

Bila cairan penyari yang digunakan adalah air maka untuk mencegah

timbulnya kapang dapat ditambahkan bahan pengawet, yang diberikan pada awal

penyarian (Anonim, 1986). Semakin besar perbandingan cairan pengekstraksi

terhadap simplisia, akan semakin banyak hasil yang diperoleh (Voigt, 1994).

Keuntungan cara penyarian dengan maserasi adalah cara pengerjaan yang

digunakan sederhana, dan mudah diusahakan. Kerugian cara maserasi adalah

pengerjaannya lama dan penyariannya kurang sempurna, juga adanya kejenuhan

konsentrasi di dalam larutan penyari, di mana konsentrasi di dalam simplisia dengan

di dalam penyari sama (Dinda, 2008).

Pada penyarian dengan cara maserasi perlu dilakukan pengadukan.

Pengadukan diperlukan untuk meratakan konsentrasi larutan di luar butir serbuk

simplisia, sehingga dengan pengadukan tersebut tetap terjaga adanya derajat

perbedaan konsentrasi yang sekecil-kecilnya antara larutan di dalam dengan di

luar sel. Hasil penyarian dengan cara maserasi perlu dibiarkan selama waktu

tertentu. Waktu tersebut diperlukan untuk mengendapkan zat-zat yang tidak

diperlukan tetapi ikut terlarut dalam cairan penyari seperti penyari malam dan

lain-lain (Anonim, 1986). Cara ekstraksi maserasi ini dilakukan 3 x 24 jam, hal ini

dilakukan supaya senyawa yang terkandung dalam herba tertarik (Runadi, 2007).

4. Uraian dengan alat Soxhlet

Alat Soxhlet adalah suatu suatu alat terbuat dari gelas yang bekerja

secara kontinyu dalam menyari. Pada proses ini sampel yang akan disari

dimasukkan pada alat Soxhlet, lalu setelah dielusi dengan pelarut yang cocok

sedemikian rupa sehingga akan terjadi dua kali sirkulasi dalam waktu 30 menit

(Harborne, 1987).

Adanya pemanasan menyebabkan pelarut ke atas lalu setelah di atas akan

diembunkan oleh pendingin udara menjadi tetesan –tetesan yang akan terkumpul

kembali dan bila melewati batas lubang pipa samping Soxhlet, maka akan terjadi

sirkulasi yang berulang-ulang akan menghasilkan penyarian yang baik (Harborne,

1987).
 Bahan yang akan diekstraksi diletakkan dalam sebuah kantong ekstrak

(kertas, karton, dan sebagainya) di dalam sebuah alat ekstraksi dari gelas yang

bekerja kontinyu. Wadah gelas yang berisi sampel diletakkan di antara labu suling

dan suatu pendingin aliran balik. Labu tersebut berisi bahan pelarut yang menguap

dan mencapai ke dalam pendingin aliran balik melalui pipa pipet, berkondensasi

di dalamnya, menetes ke atas bahan yang akan diekstraksi dan membawa keluar

bahan yang diekstraksi. Larutan yang terkumpul dalam wadah gelas dan setelah

mencapai tinggi maksimal secara otomatis dipindahkan ke dalam labu dengan

demikian zat yang akan terekstraksi terakumulasi melalui penguapan bahan

pelarut murni berikutnya. Pada cara ini bahan terus diperbaharui artinya

dimasukkan bahan pelarut bebas bahan aktif (Voigt, 1971).

Keuntungan dengan alat Soxhlet adalah membutuhkan pelarut yang

sedikit dan untuk penguapan pelarut biasanya digunakan pemanasan.

Kelemahannya adalah waktu yang dibutuhkan untuk ekstraksi cukup lama sampai

beberapa jam, sehingga kebutuhan energinya tinggi dan dapat berpengaruh negatif

terhadap bahan tumbuhan yang peka suhu (Voigt, 1971).

Menggunakan Soxhlet dengan pemanasan dan pelarut akan dapat

dihemat karena terjadinya sirkulasi pelarut yang selalu membasahi samples.

(Lenny, 2006). Ekstraksi sempurna ditandai bila cairan di sifon tidak berwarna

atau sirkulasi telah mencapai 20-25 kali (Utami, 2009)

.
5. Cairan penyari

a. Kriteria cairan penyari

Pemilihan cairan penyari harus mempertimbangkan banyak faktor.

Cairan penyari yang baik harus memenuhi kriteria berikut ini: murah dan mudah

diperoleh, stabil secara fisika dan kimia, bereaksi netral, tidak mudah menguap

dan tidak mudah terbakar, selektif yaitu hanya menarik zat yang berkhasiat yang

dikehendaki, tidak mempengaruhi zat yang berkhasiat, dan diperbolehkan oleh

peraturan (Anonim, 1986).

Pelarut yang digunakan dalam ekstraksi harus dipilih berdasarkan

kemampuannya dalam melarutkan kandungan zat aktif yang maksimal dan

seminimal mungkin bagi unsur yang tidak diinginkan (Ansel, 1985).

Cairan penyari yang biasa digunakan adalah air, eter atau campuran

etanol dan air (Anonim, 1979). Air atau etanol menjadi acuan cairan

pengekstraksi, karena banyak bahan tumbuhan larut dengan air atau etanol (Voigt,

1971).

b. Etanol

Etanol digunakan sebagai pelarut karena etanol merupakan pelarut yang

universal yang dapat menarik hampir sebagian besar senyawa kimia yang

terkandung di dalam herba (Runadi, 2007). Etanol tidak menyebabkan

pembengkakan membran sel dan memperbaiki stabilitas bahan obat terlarut.

Keuntungan lain dari etanol mampu mengendapkan albumin dan menghambat

kerja enzim (Voigt, 1994).

 Etanol 95% sangat efektif dalam menghasilkan jumlah bahan aktif yang

optimal, di mana bahan pengganggu hanya skala kecil yang turut ke dalam cairan

pengekstraksi, selain itu ekstrak etanol sulit ditumbuhi kapang dan kuman, dan

tidak beracun (Voigt, 1971).

F. Uraian Ekstrak

1. Definisi ekstrak

Ekstrak adalah sediaan yang dapat berupa kering, kental, dan cair

(Anonim, 1979) yang diperoleh dengan mengekstraksi senyawa aktif dari

simplisia nabati atau simplisia hewani menggunakan pelarut yang sesuai

kemudian semua atau hampir semua pelarut diuapkan dan massa atau serbuk yang

tersisa diperlakukan sedemikian sehingga memenuhi standar baku yang telah

ditetapkan (Anonim, 2000). Tujuan pembuatan sediaan ekstrak dimaksudkan agar

zat berkhasiat yang terdapat di simplisia terdapat dalam bentuk yang mempunyai

kadar yang tinggi (Anief, 1997).

2. Pengelompokan ekstrak

Ekstrak berdasarkan sifatnya dapat dikelompokkan menjadi : (a) ekstrak

encer (extractum tenue) sediaan ini memiliki konsistensi seperti madu dan dapat

dituang, (b) ekstrak kental (EK) (extractum spissum) sediaan ini liat dalam

keadaan dingin dan tidak dapat dituang. EK mengandung air tidak lebih dari 30%,
 (c) ekstrak kering (extractum siccum) memiliki konsistensi kering dan mudah

hancur. Melalui penguapan cairan pengekstraksi dan pengeringan sisanya

terbentuk suatu produk, yang mengandung air tidak lebih dari 5%, (d) Ekstrak cair

(extractum fluidum), memiliki konsistensi cair dan mudah dituang (Voigt, 1994).

3. Ekstrak kunyit

EK RK adalah ekstrak yang dibuat dari rimpang tumbuhan Curcuma

domestica Valetton suku Zingiberaceae, mengandung MA tidak kurang dari 3,2%

dan kurkuminoid tidak kurang dari 33,9% (Anonim, 2004).

a. Pemerian :Bentuk: kental; warna: kuning; bau: khas; rasa: agak pahit.

b. Identitas :RK memiliki kandungan kimia berupa: kurkumin,

desmetoksikurkumin, bidesmetoksikurkumin, MA, dan oleoresin.

Senyawa identitas dari RK adalah kurkumin, desmetoksikurkumin, dan

bidesmetoksikurkumin (Anonim, 2004).

G. Penguapan Ekstrak Cair

Penguapan adalah proses terbentuknya uap dari permukaan cairan. Faktor-faktor

yang mempengaruhi penguapan adalah suhu, waktu, cara penguapan, dan konsentrasi

(Anonim, 1986).

Ekstrak cair yang memiliki konsistensi cair dan kandungan pelarutnya

yang masih tinggi dapat diubah menjadi bentuk EK yang konsistensinya liat dan

kandungan air yang lebih rendah dibandingkan dengan ekstrak cair. Proses

pengentalan ini dapat dilakukan melalui penguapan dengan menggunakan alat

vacuum rotary evaporator (VRE) .

 Pengentalan ekstrak cair menggunakan VRE memungkinkan penguapan

larutan pengekstraksi yang lebih cepat karena adanya tekanan dan suhu yang

diatur tidak terlalu tinggi untuk menjaga stabilitas senyawa (Voigt, 1994). Tujuan

ekstrak dikentalkan adalah mempermudah dalam pengukuran dan penimbangan

(Anonim, 2000).

H. Uraian Spektrofotometri

Prinsip kerja spektrofotometri adalah berdasarkan atas interaksi antara

radiasi elektromagnetik dengan materi. Materi dapat berupa atom, ion, atau

molekul, sedang variasi elektromagnetik merupakan salah satu jenis energi yang

ditransmisikan dalam ruang dengan kecepatan tinggi. Interaksi antara molekul

yang mempunyai gugus kromofor dan radiasi elektromagnetik pada daerah

ultraviolet (200 nm-400 nm) dan sinar tampak (400 nm-800 nm) akan

menghasilkan spektra serapan elektronik, spektra serapan ini dapat digunakan

untuk menganalisis kuantitatif karena jumlah radiasi elektromagnetik yang diserap

ada hubungannya dengan jumlah molekul penyerap (Skoog, 1985).

Penyimpangan hukum Beer mungkin disebabkan oleh perubahan kimia

atau alat. Hukum Beer mungkin tidak cocok disebabkan oleh adanya perubahan

kadar zat yang dilarutkan, karena adanya asosiasi antar molekul zat atau antara

molekul zat dengan molekul pelarut. Penyimpangan lain mungkin disebabkan

oleh sinar polikromatik, lebar cerah atau sinar menyimpang. Larutan yang

mengandung 1 mg zat tiap 100 ml dalam 1 cm sering mempunyai serapan 0,2

sampai 0,8 (Anonim, 1974).

 Pada pengukuran serapan suatu larutan selalu diperlukan suatu larutan

blanko. Maksud dari larutan blanko adalah untuk mengatur spektrofotometer hingga

pada panjang gelombang yang digunakan mempunyai serapan nol (Anonim, 1974).

I. Validasi Metode

Validasi metode analisis adalah suatu tindakan penilaian terhadap parameter

tertentu, berdasarkan percobaan laboratorium, untuk membuktikan bahwa parameter

tersebut memenuhi persyaratan untuk penggunaannya (Harmita, 2004).

Untuk itu diperlukan suatu pedoman mengenai kesahihan metode analisis

yang didukung oleh parameter – parameter di bawah ini :

1. Akurasi

Akurasi atau kecermatan adalah ukuran yang menunjukkan derajat

kedekatan hasil analisis dengan kadar analit yang sebenarnya. Akurasi dinyatakan

sebagai persen perolehan kembali (recovery) analit yang ditambahkan (Harmita,

2004).

2. Presisi

Presisi atau keseksamaan adalah ukuran yang menunjukkan derajat

kesesuaian antara hasil uji individual, diukur melalui penyebaran hasil individual dari

rata –rata jika prosedur diterapkan secara berulang pada sampel – sampel yang

diambil dari campuran yang homogen (Harmita, 2004). Presisi biasanya dinyatakan

dalam Koefisien Variasi (KV). Suatu metode dapat dinyatakan

memiliki presisi yang baik apabila memiliki KV < 2% tetapi kriteria ini fleksibel

tergantung dari kondisi analit yang diperiksa, jumlah sampel dan kondisi

laboratorium (Harmita, 2004).

3. Linieritas dan rentang

Linieritas merupakan kemampuan suatu metode (pada rentang tertentu)

untuk mendapatkan hasil uji yang secara langsung proporsional dengan konsentrasi

(jumlah) analit dalam sampel. Rentang adalah jarak antara level terbawah dan teratas

dari metode analisis yang telah dipakai untuk mendapatkan presisi, linieritas, dan

akurasi yang bisa diterima (Harmita, 2004). Persyaratan data linearitas yang bisa

diterima jika memenuhi nilai koefisien korelasi (r) > 0,99 atau r2 ≥ 0,997 (Pelczar,

Roger, and Chan, 1977).

4. Spesifisitas

Spesifisitas suatu metode adalah kemampuannya yang hanya mengukur zat

tertentu saja secara cermat dan seksama dengan adanya komponen lain yang mungkin

ada dalam matriks sampel. Selektivitas metode ditentukan dengan membandingkan

hasil analisis sampel yang mengandung cemaran, hasil urai, senyawa sejenis,

senyawa asing lainnya atau membawa placebo dengan hasil analisis sampel tanpa

penambahan bahan –bahan tadi. Penyimpangan hasil merupakan selisih dari hasil uji

keduanya (Harmita, 2004).

b. Limit Of Detection (LOD) dan Limit Of Quantitation (LOQ)

LOD adalah jumlah terkecil analit dalam sampel yang dapat dideteksi dan

masih memberikan respon signifikan dibandingkan dengan blangko. LOQ merupakan

kuantitas terkecil analit dalam sampel yang masih dapat memenuhi

kriteria akurasi dan presisi. LOD dan LOQ dapat dihitung secara statistik melalui garis regresi

linier dari kurva kalibrasi. Nilai pengukuran akan sama dengan nilai b pada persamaan garis

linier Y = A + BX, sedangkan simpangan baku blangko sama dengan simpangan baku

residual (Sy/x), sehingga LOD dan LOQ dapat

dihitung menggunakan rumus : LOD = dan LOQ =

(Harmita, 2004).
 BAB III
METEDEOLOGI PENELITIAN

Jenis dan Rancangan Penelitian

Jenis penelitian

Penelitian ini merupakan model rancangan quasi eksperimental yaitu membandingkan kadar
kurkuminoid dan MA dalam ekstrak RK dengan variasi metode secara maserasi dan dengan
alat Soxhlet sebagai perlakuan
Tahapan penelitian

1. Identifikasi RK secara organoleptik, makroskopik, dan mikroskopik

2. Pembuatan Simplisia
3. Pembuatan ekstrak RK
Ekstraksi dengan metode maserasi
Ekstraksi dengan metode dengan alat Soxhlet
4. Pengentalan ekstrak RK
5. Penetapan kadar MA dalam ekstrak RK
6. Penetapan kadar kurkuminoid dalam ekstrak RK

Variabel dan Definisi Operasional

Klasifikasi variabel

a. Variabel bebas

Metode ekstraksi RK,

yaitu maserasi dan

dengan alat Soxhlet

b. Variabel tergantung

Kadar kurkuminoid dan MA yang diperoleh dari pengekstrakkan

kunyit secara maserasi dan dengan alat Soxhlet.

c. Variabel pengacau tidak terkendali

Umur RK.

d. Variabel pengacau terkendali

Sumber pembelian RK. Dalam hal ini sumber pembelian RK merupakan variabel

pengacau namun dapat dikendalikan karena pembelian RK dilakukan hanya pada satu

pedagang di pasar Bringhardjo, sehingga diharapkan bila tanaman kunyit berasal dari satu

daerah memiliki kandungan kurkuminoid dan MA yang sama. Bila berbeda daerah asal,

maka dapat mempengaruhi kadar kurkuminoid dan MA hal ini dikarenakan adanya

perbedaan iklim, suhu tanah, kandungan tanah, keasaman tanah, jenis tanah, umur

tanaman, dan faktor lainnya yang dapat mempengaruhi kadar zat aktif tanaman kunyit

(Mariastuty, 2002).

Definisi operasional

 . Maserasi

Merupakan metode ekstraksi penggojogan sekaligus perendaman serbuk RK dengan

pelarut etanol 95% sebanyak 1000 ml selama 3 x 24 jam dan

setiap 24 jam sekali diganti dengan pelarut etanol 95% sebanyak 1000 ml yang masih baru.

b.Dengan alat Soxhlet

Merupakan metode ekstraksi berkesinambungan karena pelarut selalu baru membasahi sampel.
Ekstraksi dihentikan apabila warna pelarut dalam tabung sifon telah bening secara visual.

c. Ekstrak kunyit maserasi

Merupakan hasil penyarian serbuk simplisia RK secara maserasi yang telah dikentalkan

dengan alat VRE sampai volum ekstrak cairnya seperlima dari volum ekstrak cair semula

yang dimasukkan.

d. Ekstrak kunyit dengan alat Soxhlet

Merupakan hasil penyarian serbuk simplisia RK dengan alat Soxhlet yang telah dikentalkan

dengan alat VRE sampai volum ekstrak cairnya setengah dari volum ekstrak cair semula yang

dimasukkan.

e. Penetapan minyak atsiri

Merupakan volume MA yang diperoleh dari masing–masing metode ekstraksi yakni maserasi

dan dengan alat Soxhlet yang dihasilkan dari setiap bobot penimbangan ekstrak dengan

menggunakan destilasi Stahl dan dihitung kadarnya sebagai % v/b.

f. Penetapan kadar kurkuminoid dalam ekstrak rimpang kunyit

Merupakan jumlah total kurkuminoid yang terukur oleh spektrofotometer visible yang telah

tervalidasi dengan menggunakan kurkumin baku pada panjang gelombang maksimum 420

nm.

g. Pengaruh variasi metode ekstraksi

Merupakan perbedaan secara signifikan kadar kurkuminoid dan MA antara hasil MEM

dan hasil MES setelah dilakukan uji T.

Bahan atau Materi Penelitian

1) Bahan utama yang digunakan adalah ekstrak kental RK yang diperoleh dari

hasil ekstraksi RK dengan larutan penyari etanol.

2) Bahan lain yang digunakan antara lain yaitu Aquadest, aseton p.a. (Merck),

asam borat p.a.(Merck), asam oksalat p.a., etanol teknis 95% (Merck), dan

baku kurkumin.

Alat atau Materi Penelitian

Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah blender, ayakan, timbangan

analitik, oven, labu berskala, VRE, spektrofotometer UV – Vis SP 3000, pompa vacuum,

timbangan, alat-alat gelas, labu alas bulat 1 L, alat Soxhlet, seperangkat maserator, Corong

Buchner, dan kertas saring Whatman No. 4.

Pembuatan ekstrak rimpang kunyit

1) Metode maserasi

Ditimbang 100 g serbuk kering kunyit dan dimasukkan ke dalam maserator ditambah 1,0

L etanol 95 %. Ekstraksi dilakukan selama tiga hari, setiap 24 jam sekali pelarut diganti

dengan pelarut yang baru, prosedur per harinya adalah bahan dalam alat gelas (Erlenmeyer)

digojog dengan alat maserasi yang telah diatur untuk menggojog selama 6 jam, kemudian alat

dengan otomatis berhenti, kemudian bahan didiamkan sampai mencapai waktu 24 jam.

Setelah itu hasil ekstraksi dimasukkan ke dalam wadah dengan cara disaring dengan kain

katun agar serbuk tidak ikut masuk ke dalam wadah tertentu. Setelah tiga kali penggantian

pelarut, hasil ekstraksi yang telah ditampung dalam wadah tertentu yang berwujud ekstrak cair

kemudian dikentalkan dengan VRE untuk mendapatkan ekstrak kental (EK) kunyit. Replikasi

dilakukan sebanyak 5 kali.

 2) Metode dengan alat Soxhlet

Ditimbang 100 g serbuk kering kunyit dan dimasukkan ke dalam sifon kemudian

ditambahkan dengan 2 kali sirkulasi etanol 95 % (total pelarut ±544,6 ml per replikasi).

Ekstraksi dilakukan sampai semua kandungan kimia simplisia terekstraksi ditandai dengan

jernihnya larutan penyari di dalam tabung sifon, biasanya larutan penyari dalam tabung sifon

menjadi jernih bila telah mengalami 20 – 25 sirkulasi. Replikasi dilakukan sebanyak 5 kali

sesuai dengan persyaratan statistik.

Pengentalan ekstrak rimpang kunyit

Ekstrak cair yang diperoleh dari proses ekstraksi dengan metode maserasi dan dengan

alat Soxhlet dikentalkan dengan menggunakan VRE pada suhu 500C dan tekanan 72 mbar,

kemudian hasil berupa ekstrak cair, dikentalkan menggunakan oven pada suhu 400C.

Penetapan kadar minyak atsiri

Ditimbang 2,0 g ekstrak kental rimpang kunyit dan dimasukkan ke dalam labu alas bulat,

kemudian ditambahkan aquadest 200 ml. Labu dipanaskan dengan penangas, sehingga

penyulingan pun berlangsung selama 6 jam. Setelah selesai, dibiarkan selama tidak kurang

dari 15 menit, volume MA pada labu berskala dicatat. Kadar MA dihitung dalam % v/b.
 BAB IV
PEMBAHASAN

4.1.Identifikasi Rimpang Kunyit

Identifikasi dilakukan untuk mengidentifikasi suatu bagian tanaman, dalam

hal ini RK. Apakah RK tersebut setelah diidentifikasi benar- benar merupakan

bagian dari tanaman kunyit. Untuk mengidentifikasinya dilakukan perbandingan

dengan literatur. Literatur yang dipakai adalah Materia Medika Indonesia (MMI),

1977. Identifikasi dapat dilakukan dengan uji organoleptik, makroskopis, dan

mikroskopis.

1. Organoleptik

Tabel I. Data perbandingan organoleptik RK dan MMI

Pengamatan
Kunyit Sampel MMI
Organoleptik

Bau Khas aromatis Khas aromatik

Agak pahit, agak pedas,

Agak pahit, pedas, lidah
Rasa lama kelamaan
terasa tebal
menimbulkan rasa tebal

Kuning jingga- coklat Kuning jingga – coklat

Warna
Kemerahan kemerahan

Hampir bulat, bulat

Bentuk Bulat pipih, bulat panjang
panjang
Dari tabel I didapatkan perbandingan antara MMI dengan sampel secara

organoleptik. Dengan melihat tabel tersebut dapat dipastikan rimpang yang

diidentifikasi merupakan rimpang tanaman kunyit karena bau, rasa, warna, dan

bentuk rimpang tersebut sudah sesuai dengan karakteristik standar RK secara

organoleptis pada MMI.

2. Makroskopis

Tabel II. Data perbandingan makroskopik RK dan MMI

Jenis Bentuk Warna

Kepingan bulat, ringan, keras

Kunyit tapi rapuh, Jingga kecokelatan

Sampel Diameter= 1,5-3 cm, tebal=

1-3 mm

Kepingan hampir bundar

sampai bulat panjang, ringan, Kuning jingga, kuning jingga

MMI rapuh, kemerahan sampai kuning jingga

Diameter= 0,5 - 3 cm, Kecoklatan

tebal= 1- 5 mm

Dari tabel II tersebut dapat dipastikan bahwa rimpang yang diidentifikasi

secara makroskopik merupakan RK karena ciri- ciri makroskopisnya, ditinjau dari

bentuk rimpang sampel telah memenuhi kriteria pada RK pada MMI, yaitu bentuk

kepingan bulat, pada MMI disebutkan kepingan hampir bundar sampai bulat

panjang, dan diameter rimpang sampel 1, 5 – 3 cm dengan tebal 1 -3 mm, telah

memenuhi syarat diameter RK pada MMI, yaitu diameter 0,5 – 3 cm, dan tebal 1-5
 mm. Warna rimpang sampel telah sama dengan kriteria warna RK pada MMI.

Gambar II berikut merupakan gambar RK sampel yang dibandingkan dengan MMI.

Cara Maserasi

Maserasi ekstrak RK digunakan serbuk simplisia RK dengan cairan penyari etanol

95% (Anonim, 2004). Digunakan etanol sebagai pelarut karena etanol merupakan pelarut

yang universal yang dapat menarik hampir sebagian besar senyawa kimia yang terkandung

di dalam herba (Runadi, D., 2007) dalam hal ini kurkuminoid dan MA dalam kunyit.

Pertimbangan lainnya adalah etanol sebagai penyari karena lebih selektif,

kapang dan kuman sulit tumbuh, tidak beracun, netral, dan panas yang diperlukan

untuk pemekatan relatif lebih sedikit (Anonim, 1986), juga etanol tidak

menyebabkan pembengkakan membran sel dan mampu mengendapkan albumin dan

menghambat kerja enzim (Voigt, 1994). Digunakan konsentrasi 95% karena etanol

95% sangat efektif dalam menghasilkan jumlah bahan aktif yang optimal, dalam hal

ini kurkuminoid dan MA dimana bahan pengganggu hanya skala kecil yang turut ke

dalam cairan pengekstraksi (Voigt, 1971).

Pada penyarian sering dilakukan pengadukan tujuannya untuk meratakan

distribusi cairan penyari sehingga konsentrasi akan tetap terjaga karena adanya

derajat perbedaan konsentrasi antara larutan di dalam sel dengan larutan di luar sel

(Anonim, 1986).

Dilakukan maserasi dengan alat penggojogan selama 3 x 24 jam (Anonim,

2004). Dilakukan 5 kali replikasi dengan masing – masing replikasi sebanyak 100

gram serbuk menggunakan etanol 95% sebanyak 1000 ml untuk 24 jam, karena

maserasi membutuhkan waktu 3 x 24 jam, maka total pelarut yang diperlukan

adalah 3000 ml untuk satu kali replikasi. (Anonim, 2004). Penggantian pelarut

dilakukan karena larutan telah menjadi jenuh (Anonim, 1986) ditandai dengan
 pekatnya warna cairan ekstrak 24 jam pertama yaitu jingga tua sehingga dilakukan

penggantian pelarut yang baru untuk 24 jam kedua, dan 24 jam ketiga untuk

mengoptimalkan penyarian.

Tiap kali penggantian pelarut dilakukan pemisahan maserat dengan

penyaringan. Hal ini bertujuan agar sisa ampas serbuk RK tidak terikut ke dalam

maserat, sehingga didapatkan maserat yang murni bebas partikel serbuk. Bebas

serbuk karena yang akan kita gunakan pada tahap selanjutnya untuk penetapan

kadar kurkuminoid dan MA adalah ekstraknya bukan serbuknya maka dilakukan

penyaringan.

Penyaringan dilakukan dengan menggunakan kain katun dan hasil saringan

ditampung dalam satu wadah untuk per replikasi. Per replikasi agar diketahui bobot

EKnya setelah dilakukan penguapan dengan VRE. Dari ekstrak hasil maserasi

(EHM) ini diperoleh rata – rata bobotnya untuk 5 replikasi sebanyak 14,7732 gram.

Angka ini didapatkan dari membagi total bobot seluruh replikasi dengan banyaknya

replikasi yang dilakukan.

Cara Dengan Alat Soxhlet

Cara dengan alat Soxhlet ekstrak RK digunakan serbuk simplisia RK dengan cairan

penyari etanol 95%. 100 gram serbuk RK dimasukkan ke dalam pembungkus kertas saring

kemudian diletakkan ke dalam tabung sifon dan dialirkan dengan etanol 95% sebanyak dua

sirkulasi (Harborne, 1987), cairan penyari akan tertampung di dalam labu alas bulat. Rata –

rata jumlah total cairan penyari 2 sirkulasi dari 5 replikasi untuk 1 replikasi adalah 544,6 ml.

Metode dengan alat Soxhlet dapat dikatakan lebih hemat dalam hal jumlah

pelarut (Lenny, 2006), hal ini dikarenakan prinsip alat ini yaitu pelarutnya yang

setelah menarik kurkuminoid, menguap karena pemanasan (tanpa ada zat aktif yang

ikut menguap) lalu mengalami kondensasi kemudian menetes kembali sebagai

 etanol 95% yang baru dan membasahi kembali kertas saring yang berisi serbuk RK,

begitu seterusnya dan pelarutnya tidak pernah habis (Harborne, 1987; Voigt, 1995).

Suhu yang digunakan adalah 50°C karena dianggap optimal dalam menguapkan

pelarut dan tidak merusak senyawa aktif yang terkandung dalam simplisia. Proses

ekstraksi dihentikan apabila pelarut dalam tabung sifon yang berisi kertas saring

berisi serbuk RK telah bening secara visual, bila telah bening berarti proses

ekstraksi telah menempuh 20 -25 kali sirkulasi (Utami, 2006).

Seperti halnya maserasi, ekstrak hasil dengan alat Soxhlet (EHS)

ditampung dalam suatu wadah yang terpisah. Hal ini dilakukan agar diketahui

masing –masing bobot ekstrak per replikasinya sehingga didapatkan rata–rata EK-

nya yaitu 17,3418 gram. Angka ini didapatkan dari membagi total bobot seluruh

replikasi dengan banyaknya replikasi yang dilakukan.

Tabel III. Data hasil penetapan kadar MA MEM

Replikasi I Replikasi II Replikasi III Replikasi IV Replikasi V

Ekstrak Kunyit
2,0957 2,0002 2,0111 2,0612 2,1877
(gram)

Vol. MA (ml) 0,4600 0,3400 0,4200 0,3800 0,4000

Kadar ( v %) 21,9500 16,9983 20,8841 18,4359 18,2840

b

Rata-rata (%) 19,3105

SD 2,0376
CV (%) 10,5500

Tabel IV. Data hasil penetapan kadar MA MES

Replikasi IV Replikasi V
Replikasi I Replikasi II Replikasi III

Ekstrak kunyit
2,0182 2,0398 2,0734 2, 3372 2,0247
(gram)

Volume MA
0,3700 0,3500 0,3200 0,3600 0,3600
(gram)

Kadar ( v %) 20,3297 17,1585 15,4336 15,4030 17,7804

b

Rata-rata (%) 17,2210

SD 2,0298

CV (%) 11,7874

Dengan menggunakan uji statistik t-test maka dapat diketahui apakah

ada pengaruh metode ekstraksi dalam pembuatan ekstrak yang mempengaruhi

kadar MA di dalam ekstrak RK.

Didapatkan thitung dari hasil perhitungan menggunakan rumus uji statistik

t –test yaitu dengan derajat kepercayaan 95% yaitu 1,3594, dimana ttabel = (n1+n2)

= -1,859 sampai 1,859, jadi thitung < t tabel → 1,3594 < 1,859 maka Hnull diterima

yaitu kadar MA dari ekstrak RK dengan MEM dan MES tidak berbeda.

Dari hasil perhitungan statistik dapat diketahui bahwa tidak ada

pengaruh metode ekstraksi dalam pembuatan ekstrak yang mempengaruhi kadar

MA di dalam ekstrak RK.

 Bab V
PENUTUP

5.1.Kesimpulan

1. Dari hasil perhitungan statistik dengan Uji T menunjukkan bahwa kadar

kurkuminoid antara metode ekstraksi maserasi dan dengan alat Soxhlet berbeda signifikan,

maka ada pengaruh variasi metode ekstraksi antara maserasi dan dengan alat Soxhlet untuk

kadar kurkuminoid dalam ekstrak rimpang kunyit, dalam hal ini metode ekstraksi yang paling

baik adalah dengan alat Soxhlet.

2. Dari hasil perhitungan statistik dengan Uji T menunjukkan bahwa kadar minyak

atsiri antara metode ekstraksi maserasi dan dengan alat Soxhlet tidak berbeda signifikan. Hal

ini menunjukkan tidak ada pengaruh variasi metode ekstraksi antara maserasi dan dengan alat

Soxhlet untuk kadar minyak atsiri dalam ekstrak rimpang kunyit. Kedua metode ekstraksi baik

secara maserasi maupun secara alat soxhlet sama baiknya dalam mengekstraksi rimpang

kunyit untuk mendapatkan minyak atsiri.

 DAFTAR PUSTAKA
 Agnam, N., Samhoedi, H., Timmerman, H., Venie, U. A., Sugiyanto, Goot, H.,
1995, The Relationship Between Structure And Inhibition Of Lipoxygenase
Activity of Curcumin Derivatives In International Symposium On Curcumin
Pharmacochemistry ISCP, Yogyakarta
 Anief, M., 1997, Ilmu Meracik Obat, Cetakan Ke 6, 169, Gajah Mada
University Press, Yogyakarta
 Anonim, 1974, Ekstra Farmakope Indonesia, 1092-1093, Departemen
Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta
 Anonim, 1985, Cara Pembuatan Simplisia, 7-15, 105-123, Departemen
Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta
 Anonim, 1995, Farmakope Indonesia, edisi IV, 27, 63, 1134, 1158,
Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta